本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑。

背景技術(shù)：

阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一種常見的神經(jīng)退行性疾病，主要癥狀包括進(jìn)行性記憶和認(rèn)知功能障礙等，具有不可逆轉(zhuǎn)、高死亡率等特征。AD是老年癡呆的主要形式，AD患者超過老年癡呆患者總數(shù)的65％以上。隨全球人口老齡化的發(fā)展，AD發(fā)病率及患者人數(shù)急速升高，然而，臨床尚無特效治療藥物，AD已成為僅次于心腦血管疾病和腫瘤的第三大世界性健康問題，更是一項全球性經(jīng)濟(jì)、社會問題。人口基數(shù)大、老齡化迅速發(fā)展是我國的基本國情，AD防治形勢異常嚴(yán)峻。

AD發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，目前尚不十分明了。人們已從不同角度提出了眾多假設(shè)，包括β-淀粉樣蛋白(β-amyloid)級聯(lián)學(xué)說、Tau蛋白纏結(jié)沉淀學(xué)說、氧化應(yīng)激學(xué)說、生物金屬離子穩(wěn)態(tài)失衡學(xué)說、線粒體功能衰竭學(xué)說等。臨床病理學(xué)研究已證實，AD病理學(xué)特征主要是腦部神經(jīng)元外部的Aβ沉淀和神經(jīng)元內(nèi)部的過度磷酸化Tau蛋白纏結(jié)等。早年認(rèn)為，Aβ聚集纖維化形成的老年斑沉淀有神經(jīng)毒性，對AD發(fā)病具有重要的促進(jìn)作用。但，最近研究發(fā)現(xiàn)，與Aβ沉淀相比，Aβ單體聚集初期形成的可溶性寡聚體(AβOligomers，AβOs)具有更強(qiáng)的神經(jīng)毒性，其產(chǎn)生直接啟動AD長期病理級聯(lián)反應(yīng)，并通過氧化應(yīng)激、炎癥、Tau蛋白過度磷酸化等多種途徑導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的死亡，最終出現(xiàn)癡呆等臨床癥狀。AβOs的產(chǎn)生是AD發(fā)病早期的重要特征性病理變化，抑制AβOs生成有望成為創(chuàng)新抗AD藥物研究的戰(zhàn)略性新方向，而開發(fā)能夠抑制Aβ寡聚化生成AβOs的Aβ寡聚化抑制劑即是其中的核心戰(zhàn)略之一。

近些年來，眾多學(xué)者針對如何抑制老年斑的形成開展了大量的研究工作，主要是希望能夠發(fā)現(xiàn)可以阻止Aβ纖維化形成斑塊沉淀的Aβ聚集抑制劑，已報道的化合物有NQTrp、QKLVFF、MTDLs、BMAOI-14等。該類物質(zhì)對Aβ寡聚化的抑制作用并不理想，且存在水溶性差、跨膜性能差、活性有限、合成步驟繁瑣等不足之處。針對Aβ寡聚化階段的抑制劑研究相對較少，限制了Aβ寡聚化抑制劑類抗AD新藥的開發(fā)。因此，以一定結(jié)構(gòu)的活性分子為模板，對其特征功能單元進(jìn)行設(shè)計和結(jié)構(gòu)優(yōu)化，有望發(fā)現(xiàn)高活性Aβ寡聚化抑制劑，對創(chuàng)新型抗AD先導(dǎo)藥物研究具有重要科學(xué)意義和實用價值。

因此，現(xiàn)有技術(shù)還有待于改進(jìn)和發(fā)展。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中抑制劑對Aβ寡聚化的抑制作用欠佳，且各項性能有待提高的問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑的結(jié)構(gòu)通式如下：

其中，R₁是氫、直鏈狀烷基、支鏈狀烷基、烷氧基、鹵素中的一種；R₂是氫、直鏈狀烷基、支鏈狀烷基、烷氧基、鹵素、苯環(huán)、六元雜芳環(huán)、五元雜芳環(huán)、七元芳環(huán)、萘、蒽、萘醌、多芳環(huán)體系及其取代物中的一種；R₃是氫、直鏈狀烷基、支鏈狀烷基、鹵素、羧基、硝基、磺酸基、胺基、磷酸基及其取代物中的一種；n＝1～5。

所述的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，A單元和B單元在苯環(huán)的鏈接位置是鄰位、間位或?qū)ξ弧?/p>

所述的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，R₁是單取代或不同位置的多取代。

所述的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，R₂是單取代或不同位置的多取代。

所述的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，R₃是單取代或不同位置的多取代。

所述的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，R₃的取代位置在咪唑環(huán)的2、4或5位。

所述的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑以鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、鐵鹽、銅鹽、有機(jī)銨鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、乙二酸鹽或檸檬酸鹽的形式存在。

有益效果：本發(fā)明所提供的多靶點Aβ寡聚化抑制劑是基于Aβ寡聚過程特征、天然藥效團(tuán)和其他關(guān)鍵酶活性中心結(jié)構(gòu)設(shè)計的，結(jié)構(gòu)新穎、活性顯著，其對Aβ寡聚化抑制效果佳，水溶性較好，在跨膜性能、活性等方面都具有較好的表現(xiàn)。

附圖說明

圖1為N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺對Aβ42寡聚化抑制作用的對比圖。

具體實施方式

本發(fā)明提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑，為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及效果更加清楚、明確，以下對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑，其中，所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑的結(jié)構(gòu)通式如下：

其中，R₁是氫、直鏈狀烷基、支鏈狀烷基、烷氧基、鹵素中的一種；R₂是氫、直鏈狀烷基、支鏈狀烷基、烷氧基、鹵素、苯環(huán)、六元雜芳環(huán)、五元雜芳環(huán)、七元芳環(huán)、萘、蒽、萘醌、多芳環(huán)體系及其取代物中的一種；R₃是氫、直鏈狀烷基、支鏈狀烷基、鹵素、羧基、硝基、磺酸基、胺基、磷酸基及其取代物中的一種；n＝1～5。

本發(fā)明的多靶點Aβ寡聚化抑制劑，是基于多種天然藥效團(tuán)、Aβ寡聚過程特征和其他關(guān)鍵酶活性中心結(jié)構(gòu)設(shè)計合成的，對Aβ寡聚化的抑制顯示出良好的選擇性和專一性，同時對AD病理關(guān)鍵酶谷氨酰胺?；h(huán)化酶、乙酰膽堿酯酶等具有很好的抑制作用，屬于一種多靶點的Aβ寡聚化抑制劑；其母體結(jié)構(gòu)更豐富、水溶性好、跨膜性能佳、活性更高，具有更高的成藥性。

在所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑中，A單元和B單元在苯環(huán)的鏈接位置是鄰位、間位或?qū)ξ弧?/p>

在所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑中，在同一個化合物內(nèi)，R₁和R₂的結(jié)構(gòu)相同或不相同。

優(yōu)選的，在所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑中，R₁是單取代或不同位置的多取代。優(yōu)選的，R₂是單取代或不同位置的多取代。

優(yōu)選的，R₃是單取代或不同位置的多取代。另外，R₃的取代位置在咪唑環(huán)的2、4或5位。

所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑以鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、鐵鹽、銅鹽、有機(jī)銨鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、乙二酸鹽或檸檬酸鹽的形式存在。即本發(fā)明中的多靶點Aβ寡聚化抑制劑在藥學(xué)上可接受的鹽的形式存在。

本發(fā)明的多靶點Aβ寡聚化抑制劑為首次公開的新型多靶點Aβ寡聚化抑制劑，對我國自主抗AD先導(dǎo)藥物研究具有極為重要的科學(xué)意義和研究價值。

本發(fā)明還提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑的應(yīng)用，將所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑用于Aβ寡聚化抑制劑類抗AD藥物中。其中的多靶點Aβ寡聚化抑制劑即為前述合成方法中提到的抑制劑，下述各應(yīng)用中所采用的多靶點Aβ寡聚化抑制劑均為上述合成方法所提到的抑制劑。后續(xù)不再贅述。

本發(fā)明還提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑的應(yīng)用，將所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑用于谷氨酰胺?；h(huán)化酶抑制劑類抗AD藥物中。

本發(fā)明還提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑的應(yīng)用，將所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑用于乙酰膽堿酯酶抑制劑類抗AD藥物中。

本發(fā)明還提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑的應(yīng)用，將所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑用于Aβ寡聚化的試劑盒中。

本發(fā)明還提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑的應(yīng)用，將所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑用于谷氨酰胺酰基環(huán)化酶的試劑盒中。

本發(fā)明還提供一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑的應(yīng)用，將所述多靶點Aβ寡聚化抑制劑用于乙酰膽堿酯酶的試劑盒中。

實施例1：N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺的合成，其合成路線如下：

a、3N1-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺(Ⅱ)的合成：將溴苯胺(5.81mmol，1equiv)、(1-芐基哌啶-4-基)甲胺(6.98mmol，1.2equiv)溶于二氧六環(huán)(10ml)和2mol/L碳酸鉀(10ml)混合液中，添加催化劑[1,1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(0.3486mmol，0.06equiv)；換氣，使整個裝置充滿氬氣；混合體系在100℃下回流3h，乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，飽和NaCl溶液洗一次，無水Na₂SO₄干燥，硅膠柱層析收集產(chǎn)物，收率為90％。

b、N1-((1-芐基-4-基)甲基)-N2-(3-溴丙基)苯-1,2-二胺(Ⅲ)的合成：將3N1-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺(436μmol，1equiv)和1,3-二溴丙烷(3.05mmol，7equiv)添加到無水乙腈(4ml)中，加入無水碳酸鉀，混合體系保持70℃回流過夜，旋干，乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，飽和NaCl溶液洗一次，無水Na₂SO₄干燥，硅膠柱層析收集產(chǎn)物，收率為46％。

c、N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺(Ⅳ)的合成：咪唑(274.09μmol，1.2equiv)溶于無水乙腈(1.5ml)，加入無水碳酸鉀，常溫攪拌10min得到咪唑溶液，將N1-((1-芐基-4-基)甲基)-N2-(3-溴丙基)苯-1,2-二胺(228.40μmol，1equiv)溶于2ml無水乙腈，加入咪唑溶液，70℃回流過夜，旋干，乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，飽和NaCl溶液洗一次，無水Na₂SO₄干燥，硅膠柱層析收集產(chǎn)物，收率為29％。

實施例2：N2-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 3-((1-芐基-4-基)甲基)萘-2,3-二胺的合成，其合成路線如下：

a、N2-((1-芐基-4-基)甲基)萘-2,3-二胺(Ⅱ)的合成：將3-溴-2-萘胺(5.81mmol，1equiv)、(1-芐基哌啶-4-基)甲胺(6.98mmol，1.2equiv)溶于二氧六環(huán)(15ml)和2mol/L碳酸鉀(10ml)混合液中，添加催化劑[1,1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(0.3486mmol，0.06equiv)；換氣，使整個裝置充滿氬氣；混合體系在100℃下回流4h，乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，飽和NaCl溶液洗一次，無水Na₂SO₄干燥，硅膠柱層析收集產(chǎn)物，收率為88％。

b、N2-((1-芐基-4-基)甲基)-N3-(3-溴丙基)萘-2,3-二胺(Ⅲ)的合成：將N2-((1-芐基-4-基)甲基)萘-2,3-二胺(436μmol，1equiv)和1,3-二溴丙烷(3.05mmol，7equiv)添加到無水乙腈(6ml)中，加入無水碳酸鉀，混合體系保持70℃回流過夜，旋干，乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，飽和NaCl溶液洗一次，無水Na₂SO₄干燥，硅膠柱層析收集產(chǎn)物，收率為43％。

c、N2-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 3-((1-芐基-4-基)甲基)萘-2,3-二胺(Ⅳ)的合成：咪唑(274.09μmol，1.2equiv)溶于無水乙腈(1.5ml)，加入無水碳酸鉀，常溫攪拌10min得到咪唑溶液，將N2-((1-芐基-4-基)甲基)-N3-(3-溴丙基)萘-2,3-二胺(228.40μmol，1equiv)溶于2ml無水乙腈，加入咪唑溶液，70℃回流過夜，旋干，乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，飽和NaCl溶液洗一次，無水Na₂SO₄干燥，硅膠柱層析收集產(chǎn)物，收率為25％。

實施例3：N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺對Aβ寡聚化抑制作用：

如圖1所示，其為N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺對Aβ42寡聚化抑制作用的對比圖，其中，1為蛋白Marker(標(biāo)準(zhǔn)品)；2-3為對照組；4-5為加樣組。

使用前即時制備Aβ42的DMSO單體母液(1mM)，配制N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺的DMSO母液(1mM)，取4μL Aβ42母液和4μL N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺母液混合，加入2μL 1％的SDS溶液，以PBS緩沖溶液調(diào)整總體積為15μL，37℃恒溫孵育6、12h，取樣后進(jìn)行SDS-PAGE分析(15％分離膠)。結(jié)果表明，化合物N1-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-N 2-((1-芐基-4-基)甲基)苯-1,2-二胺可以大大減少Aβ42沉淀的生成，增加體系內(nèi)Aβ42單體的濃度，對Aβ42寡聚化具有顯著抑制作用，如圖1所示。

綜上所述，本發(fā)明所提供的一種多靶點Aβ寡聚化抑制劑是基于多種天然藥效團(tuán)、Aβ寡聚過程特征和其他關(guān)鍵酶活性中心結(jié)構(gòu)設(shè)計合成的，對Aβ寡聚化的抑制顯示出良好的選擇性和專一性，同時對AD病理關(guān)鍵酶谷氨酰胺?；h(huán)化酶、乙酰膽堿酯酶等具有很好的抑制作用，屬于一種多靶點的Aβ寡聚化抑制劑；其母體結(jié)構(gòu)更豐富、水溶性好、跨膜性能佳、活性更高，具有更高的成藥性。

應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的應(yīng)用不限于上述的舉例，對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說，可以根據(jù)上述說明加以改進(jìn)或變換，所有這些改進(jìn)和變換都應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍。