本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一系列從中藥地骨皮中分離得到的結(jié)構(gòu)新穎的c21甾體及其苷類化合物及其在防治糖尿病中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

糖尿病是一組由多病因引起的以慢性高血糖為特征的終身性代謝性疾病，嚴(yán)重危害人類健康。在發(fā)達(dá)國家，糖尿病已成為僅次于心血管疾病，惡性腫瘤的第三位致死病因疾病，近年來我國糖尿病患病率的上升趨勢有所加劇。各種原因造成胰島素供應(yīng)不足或胰島素在靶細(xì)胞不能發(fā)揮正常生理作用，使體內(nèi)糖、蛋白質(zhì)及脂肪代謝發(fā)生紊亂，就發(fā)生了糖尿病。

胰島β細(xì)胞破壞致胰島功能不足、喪失是1型和2型糖尿病共同的核心病機(jī)。在正常的生理?xiàng)l件下胰島是一個(gè)完整的獨(dú)立的功能單位，能夠敏感地響應(yīng)血糖濃度變化，分泌激素維持血糖濃度平衡。i型糖尿病的病因是由于胰島β細(xì)胞受到破壞，自身不能合成和分泌足夠胰島素、產(chǎn)生準(zhǔn)確的胰島素應(yīng)答。ii型糖尿病以外周組織胰島素抵抗為特征，同時(shí)伴有胰腺β細(xì)胞分泌模式異常的現(xiàn)象。長期的研究觀察到，β細(xì)胞的功能在ii型糖尿病早期即有損害。胎兒期營養(yǎng)不良可損害β細(xì)胞的功能并導(dǎo)致胰腺生長緩慢。針對這一發(fā)病機(jī)理，臨床上也出現(xiàn)了一些胰島素制劑及胰島素增敏劑，但是至今尚無任何一種藥物和方法可用于糖尿病胰島β細(xì)胞直接的保護(hù)和再生。

2型糖尿病的脂毒性及糖毒性已經(jīng)是目前公認(rèn)的導(dǎo)致β-細(xì)胞受損的主要病理機(jī)制，機(jī)體內(nèi)高血糖本身可引起胰島β-細(xì)胞功能損傷，從而無法代償體內(nèi)胰島素抵抗，而當(dāng)機(jī)體內(nèi)進(jìn)入胰島β-細(xì)胞的游離脂肪酸(ffa)超過了其對脂肪酸氧化的能力時(shí)，可導(dǎo)致β-細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的過多堆積，從而加速細(xì)胞凋亡。因此，保護(hù)β-細(xì)胞功能，抑制β-細(xì)胞凋亡可在糖尿病發(fā)展初期改善高糖血癥的惡性循環(huán)，從而防止糖尿病的進(jìn)一步發(fā)展。

地骨皮(lyciicortex)是我國傳統(tǒng)中藥材，為《中國藥典》2005年版和2010年版收載品種。本品為茄科落葉灌木枸杞lyciumchinensemill.或?qū)幭蔫坭絣yciumbarbaruml.的干燥根皮。其味甘，性寒，歸肺、肝、腎經(jīng)。主治內(nèi)熱消渴等方面。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明地骨皮及其提取物具有降血糖、免疫調(diào)節(jié)、抗自由基等多種作用，并在治療糖尿病及其并發(fā)癥、骨質(zhì)疏松、高血脂、高血壓等方面有很好的臨床應(yīng)用前景，有很大的開發(fā)潛力。近年來國內(nèi)外學(xué)者對地骨皮的化學(xué)成分做了大量研究，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分有一百余種，其中包括生物堿類、環(huán)肽類、木脂素類、蒽醌類、香豆素類、黃酮類、萜類、甾醇類、有機(jī)酸及其酯類等。本課題從地骨皮中發(fā)現(xiàn)一系列母核上具有8羥基的c21甾體化合物，也屬于在茄科植物中首次報(bào)道c21甾類化學(xué)成分。c21甾體類化合物具有抗炎、抗腫瘤、抗生育等多方面的生物活性，常見分布于玄參科、夾竹桃科、毛茛科、蘿藦科等植物中。在植物中除游離方式存在外，也和糖縮合成苷類存在，糖鏈多連接在甾體母核的c3位。目前由植物中分離出的c21甾類成分以孕甾烷或其異構(gòu)體為基本骨架，母核上具有8羥基的c21甾體較為少見。

申請者從地骨皮中分離得到了一類結(jié)構(gòu)新穎的化合物—lyciiumsteroidsa-k(dgp-1～11)，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下圖所示。此次在茄科植物中發(fā)現(xiàn)這種母核上有8個(gè)羥基，且12或20位上連接苯戊二烯酸酯的c21甾體在自然界中首次發(fā)現(xiàn)。經(jīng)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明該類化合物在pa誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞損傷模型中，能夠明顯的促進(jìn)胰島細(xì)胞增殖，顯示了一定的胰島細(xì)胞保護(hù)作用。目前，尚未發(fā)現(xiàn)從中藥地骨皮分離得到8羥基c21甾體類化合物的報(bào)道，也未見具有該類型c21甾體類化合物胰島細(xì)胞保護(hù)作用的報(bào)道，以及該類型單體的制備方法專利文獻(xiàn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種新結(jié)構(gòu)類型的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、其藥物組合物以及其在制備預(yù)防或治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是提供一類來源于地骨皮的化合物lyciiumsteroidsa-k(dgp-1～11)及其藥學(xué)上可接受的鹽，其結(jié)構(gòu)如下：

本發(fā)明技術(shù)方案的第二方面是提供了地骨皮新化合物c21甾體類的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：地骨皮藥材80％乙醇回流提取，濃縮后浸膏通過有機(jī)溶劑萃取、大孔吸附樹脂層析、凝膠柱層析、反相硅膠柱層析及制備型hplc分離純化，得到上述化合物，lyciiumsteroidsa-k(dgp-1～11)，經(jīng)uv、ir、nmr、ms及cd等譜學(xué)手段分析鑒定其結(jié)構(gòu)，為一類母核為多羥基的c21甾體類，甾體母核上共有8個(gè)羥基；其12位或20位分別連有一個(gè)苯戊二烯酸?；?；3位連有0-4個(gè)不同數(shù)目的2，6-二去氧糖，目前未有該類物質(zhì)報(bào)道。

本發(fā)明技術(shù)方案的第三方面是提供了一種藥物組合物，其含有有效劑量的第一方面所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體。通常本發(fā)明藥物組合物含有0.1～95％重量的本發(fā)明化合物。在單元?jiǎng)┬椭斜景l(fā)明化合物一般含量為0.1～100mg，優(yōu)選的單元?jiǎng)┬秃?～50mg。

本發(fā)明化合物的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于此目的時(shí)，如果需要，可將本發(fā)明化合物與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為人藥或獸藥使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问健?/p>

本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等。

本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、皮內(nèi)注射和穴位注射等。

給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑劑型、混懸劑型。其他劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、栓劑、凍干粉針劑等。

本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。例如為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進(jìn)劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。

例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、單硬脂酸甘油脂、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。

例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分本發(fā)明化合物與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。

例如，將本發(fā)明化合物制成注射用制劑，如溶液劑、混懸劑溶液劑、乳劑、凍干粉針劑，這種制劑可以是含水或非水的，可含一種和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1,3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂、肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、ph調(diào)節(jié)劑等。這些輔料是本領(lǐng)域常用的。

此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。

為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。

本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的性別、年齡、體重、性格及個(gè)體反應(yīng)，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的，因此本發(fā)明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明中藥學(xué)成分的使用劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。可以根據(jù)本發(fā)明化合物組合物中最后的制劑中所含有的實(shí)際藥物數(shù)量，加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以達(dá)到其治療有效量的要求，完成本發(fā)明的預(yù)防或治療目的。本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍：本發(fā)明的化合物的用量為0.001～100mg/kg體重，優(yōu)選為0.1～60mg/kg體重，更優(yōu)選為1～30mg/kg體重，最優(yōu)選為2～15mg/kg體重。成人患者服用的本發(fā)明化合物每日為10～500mg，優(yōu)選為20～100mg，可一次服用或分2～3次服用；兒童服用的劑量按照每kg體重5～30mg，優(yōu)選為10～20mg/kg體重。上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個(gè)，例如二、三或四個(gè)劑量形式給藥，這受限于給藥醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及治療手段的給藥方案。本發(fā)明的化合物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。

本發(fā)明技術(shù)方案的第四方面是提供第一方面所述化合物或其藥學(xué)上可接受鹽以及第三方面所述藥物組合物在制備預(yù)防或治療糖尿病藥物中的用途。體外抗糖尿病藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該類化合物能夠在棕櫚酸誘導(dǎo)的min6細(xì)胞損傷模型中有效的促進(jìn)胰島細(xì)胞的增值。與正常對照con組比較，棕櫚酸(0.4mm)使模型對照moddel組細(xì)胞增殖明顯受損，其細(xì)胞培養(yǎng)液經(jīng)cck-8染色后的平均僅為con組的60％。在樣品終濃度為1×10^-5m作用模型細(xì)胞24h后，與model組比較，dgp-7，dgp-2，dgp-3處理組細(xì)胞的相對od值分別增加了21.3％，18.1％，13.6％，顯示明顯的胰島細(xì)胞保護(hù)作用。不同濃度的dgp-7，dgp-2，dgp-3作用24h后，對棕櫚酸鈉誘導(dǎo)的胰島細(xì)胞損傷模型呈現(xiàn)劑量依賴性的保護(hù)作用；其中dgp-7的作用效果最好，在5μm水平就有顯著的保護(hù)效果。因此具有良好的抗糖尿病的作用。

有益技術(shù)效果：

1、本發(fā)明的一類地骨皮新化合物具有明顯的防治糖尿病的作用，能夠顯著促進(jìn)胰島細(xì)胞增值，其中dgp-7的作用效果最好，在5μm水平就有顯著的保護(hù)效果。

2、本發(fā)明的一類地骨皮中的新化合物結(jié)構(gòu)新穎，未有文獻(xiàn)報(bào)道，具有進(jìn)一步開發(fā)成降糖類藥物的潛力。

附圖說明

圖1為dgp-2，dgp-3，dgp-7保護(hù)min6胰島細(xì)胞的劑量相關(guān)性分析；分別對dgp-2，dgp-3，dgp-7的活性進(jìn)行3個(gè)劑量水平(1，5，10μm)考察，發(fā)現(xiàn)各化合物保護(hù)min6胰島細(xì)胞均呈現(xiàn)劑量依賴性，其中dgp-7在5μm水平已有顯著的保護(hù)活性。###,p<0.001vscon；**,***p<0.01,0.001vsmodel

具體實(shí)施方式

下面的實(shí)施例及藥理活性實(shí)驗(yàn)用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但這并不意味著對本發(fā)明的任何限制。

下述實(shí)施例中，部分物質(zhì)的全稱或相應(yīng)的中文名稱如下：

cho：中國倉鼠卵巢細(xì)胞

dmem：一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基

gfp：greenfluorescenceprotein，綠色熒光蛋白

lc3:微管相關(guān)輕鏈蛋白3

實(shí)施例1、地骨皮單體化合物lyciiumsteroidsa-k(dgp-1～11)的制備和檢測

100kg地骨皮藥材經(jīng)積濃度為80％乙醇溶劑回流提取3次，每次2小時(shí)，提取液濃縮后得浸膏8.0kg，使用熱水溶散然后用乙酸乙酯進(jìn)行萃取3次，乙酸乙酯部位回收溶劑，得浸膏1.5kg，分別用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇進(jìn)行索氏提取，得到收集乙酸乙酯部位220g，然后對該部位進(jìn)行硅膠柱中壓分離，以石油醚-乙酸乙酯不梯度比例進(jìn)行洗脫，共得到54瓶樣品。回收溶劑后經(jīng)sephadexlh-20凝膠柱層析、ods反相硅膠柱層析反復(fù)純化得到上述化合物lyciiumsteroida～k(dgp-1～11)，經(jīng)uv、ir、nmr、ms及cd等譜學(xué)手段分析鑒定其結(jié)構(gòu)，為一類8羥基的c21甾體類，其12位或20位分別連有一個(gè)苯戊二烯酸?；?，3位連有不同數(shù)目的2，6-二去氧糖。

上述新化合物的波譜信息及核磁信號(hào)歸屬如下：

dgp-1

lyciumsteroida(dgp-1):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:308；(c0.05meoh)；cdλmaxnm(δε):300(+2.76),256(–0.26),218(+1.09)；；ir(kbr)νmax:3418,2943,1692,1624,1382,1246,1055,1002,978,694cm^-1,hresims:m/z573.3057[m+h]⁺(calcdforc32h44o9,573.3058).

¹hnmr(500mhz,dmso-d6),δh:1.75(1h,m,h-1a),1.59(1h,m,h-1b),1.58(1h,m,h-2a),1.37(1h,m,h-2b),3.85(1h,m,h-3),1.89(1h,t,j＝12.0hz,h-4a),1.41(1h,m,h-4b),3.45(1h,m,h-6),1.95(1h,dd,j＝3.0,14.0hz,h-7a),1.63(1h,m,h-7b),1.67(1h,m,h-9),1.63(1h,m,h-11a),1.24(1h,m,h-11b),3.21(1h,m,h-12),1.74(1h,m,h-15a),1.57(1h,m,h-15b),1.79(1h,m,h-16a),1.12(1h,m,h-16b),1.18(3h,s,h-18),1.13(3h,s,h-19),5.02(1h,q,h-20),1.13(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.56(2h,d,j＝7.0hz,h-2',6'),7.38(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.31(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.99(1h,d,j＝16.5hz,h-7'),7.13(1h,dd,j＝16.5,16.5hz,h-8'),7.32(1h,dd,j＝16.5,16.5hz,h-9'),5.98(1h,d,j＝16.5hz,h-10').

¹³cnmr(125mhz,dmso-d6),δc:33.3(c-1),30.2(c-2),65.6(c-3),40.3(c-4),74.1(c-5),75.7c-6),33.0(c-7),77.3(c-8),38.5(c-9),37.5(c-10),27.5(c-11),69.7(c-12),57.7(c-13),87.4(c-14),31.8(c-15),33.4(c-16),86.4(c-17),9.5(c-18),17.5(c-19),74.0(c-20),14.9(c-21),136.0(c-1′),126.8(c-2′,6′),128.8(c-3′,5′),128.9(c-4′),139.3(c-7′),127.1(c-8′),143.4(c-9′),122.9(c-10′),165.1(c-11′).

dgp-2

lyciumsteroida(dgp-2):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:312；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):308(+1.62),216(–0.76)；ir(kbr)νmax:3429,2937,1694,1627,1241,1131,1051,1000,877,691cm^-1；hresims:m/z595.2876[m+na]⁺(calcdforc32h44nao9,572.2878)；

¹hnmr(500mhz,dmso-d6),δh:1.71(1h,m,h-1a),1.58(1h,m,h-1b),1.59(1h,m,h-2a),1.36(1h,m,h-2b),3.86(1h,m,h-3),1.91(1h,t,j＝12.5hz,h-4a),1.42(1h,m,h-4b),3.46(1h,m,h-6),1.99(1h,dd,j＝3.5,14.5hz,h-7a),1.71(1h,m,h-7b),1.80(1h,m,h-9),1.81(1h,m,h-11a),1.47(1h,m,h-11b),4.52(1h,m,h-12),1.70(1h,m,h-15a),1.12(1h,m,h-15b),1.80(1h,m,h-16a),1.12(1h,m,h-16b),1.40(3h,s,h-18),1.16(3h,s,h-19),3.28(1h,q,h-20),0.97(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.56(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.38(2h,dd,j＝7.5,7.5hz,h-3',5'),7.45(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),7.03(1h,d,j＝16.0hz,h-7'),7.11(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.42(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-9'),6.09(1h,d,j＝16.0hz,h-10').

¹³cnmr(125mhz,dmso-d6),δc:32.9(c-1),30.2(c-2),65.5(c-3),40.2(c-4),74.0(c-5),75.5c-6),33.2(c-7),76.8(c-8),38.2(c-9),37.6(c-10),23.6(c-11),73.7(c-12),56.0(c-13),87.4(c-14),32.8(c-15),31.9(c-16),87.1(c-17),11.2(c-18),17.3(c-19),69.7(c-20),18.9(c-21),135.9(c-1′),127.2(c-2′,6′),128.8(c-3′,5′),129.2(c-4′),140.1(c-7′),126.6(c-8′),144.6(c-9′),121.9(c-10′),165.7(c-11′).

dgp-3

lyciumsteroidc(dgp-3):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:313；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):311(+3.29),218(–0.91)；ir(kbr)νmax:3441,2938,1700,1623,1594,1453,1421,1238,1077,702cm^-1,hresims:m/z701.3518[m-h]^-(calcdforc38h54o12,701.3543).

¹hnmr(500mhz,dmso-d6),δh:1.72(1h,m,h-1a),1.57(1h,m,h-1b),1.68(1h,m,h-2a),1.42(1h,m,h-2b),4.01(1h,m,h-3),1.84(1h,t,j＝12.0hz,h-4a),1.55(1h,m),h-4b),3.48(1h,m,h-6),1.98(1h,dd,j＝3.0,14.0hz,h-7a),1.71(1h,m,h-7b),1.79(1h,m,h-9),1.45(1h,m,h-11a),1.80(1h,m,h-11b),4.53(1h,m,h-12),1.77(1h,m,h-15a),1.67(1h,m),(h-15b),1.14(1h,m,h-16a),1.58(1h,m,h-16b),1.40(3h,s,h-18),1.15(3h,s,h-19),4.88(1h,brs,h-20),1.00(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.56(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.38(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.32(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),7.03(1h,d,j＝16.0hz,h-7'),7.08(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.43(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-9'),6.08(1h,d,j＝16.0hz,h-10'),4.81(1h,dd,j＝9.5,1.5hz,h-1”),1.47(1h,m,h-2a”),1.71(1h,m,h-2b”),3.82(1h,d,j＝2.5hz,h-3”),2.97(1h,brd,h-4”),3.59(1h,m,h-5”),1.11(3h,d,j＝6.5hz,h-6”).

¹³cnmr(125mhz,dmso-d6),δc:32.7(c-1),27.8(c-2),73.3(c-3),36.9(c-4),73.8(c-5),75.5c-6),33.2(c-7),76.7(c-8),38.2(c-9),37.6(c-10),23.5(c-11),73.6(c-12),56.0(c-13),87.4(c-14),32.0(c-15),32.8(c-16),87.1(c-17),11.1(c-18),17.2(c-19),69.6(c-20),18.9(c-21),135.9(c-1′),127.2(c-2′,6′),128.8(c-3′,5′),129.0(c-4′),140.1(c-7′),126.6(c-8′),144.6(c-9′),121.9(c-10'),165.7(c-11′),.95.4(c-1”),38.8(c-2”),67.1(c-3”),72.8(c-4”),68.8(c-5”),18.4(c-6”).

dgp-4

lyciumsteroidd(dgp-4):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:313；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):304(+2.04),220(–0.64)；ir(kbr)νmax:3426,2933,1701,1623,1369,1241,1133,1073,997,875cm^-1.hresims:m/z725.3505[m+na]⁺(calcdforc38h54nao12,725.3507).

¹hnmr(500mhz,dmso-d6),δh:1.60(1h,m,h-1a),1.52(1h,m,h-1b),1.60(1h,m,h-2a),1.59(1h,m,h-2b),4.07(1h,m,h-3),1.87(1h,m,h-4a),1.54(1h,m,h-4b),3.78(1h,m,h-6),1.80(1h,m,h-7a),1.55(1h,m,h-7b),1.67(1h,m,h-9),1.75(1h,m,h-11a),1.44(1h,m,h-11b),4.58(1h,m,h-12),1.98(1h,m,h-15a),1.67(1h,m),(h-15b),1.68(1h,m,h-16a),1.13(1h,m,h-16b),1.41(3h,s,h-18),0.93(3h,s,h-19),3.60(br1h,s,h-20),0.97(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.56(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.39(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.34(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),7.04(1h,d,j＝16.5hz,h-7'),7.11(1h,dd,j＝16.5,16.5hz,,h-8'),7.43(1h,dd,j＝16.5,16.5hz,h-9'),6.08(1h,d,j＝16.5hz,h-10'),4.81(1h,dd,j＝9.5,1.5hz,h-1”),1.80(1h,m,h-2a”),1.54(1h,m,h-2b”),3.83(1h,m,h-3”),3.01(1h,m,h-4”),3.61(1h,m,h-5”),1.12(3h,d,j＝6.5hz,h-6”).

¹³cnmr(125mhz,dmso-d6),δc:27.2(c-1),25.5(c-2),73.5(c-3),27.3(c-4),76.3(c-5),67.3c-6),37.9(c-7),75.2(c-8),35.0(c-9),40.5(c-10),23.9(c-11),73.6(c-12),55.9(c-13),87.5(c-14),32.8(c-15),32.2(c-16),87.4(c-17),11.3(c-18),19.3(c-19),69.5(c-20),18.7(c-21),135.9(c-1′),127.2(c-2′,6′),128.8(c-3′,5′),129.1(c-4′),140.1(c-7′),126.6(c-8′),144.6(c-9′),121.9(c-10′),165.7(c-11′),96.2(c-1”),38.5(c-2”),67.0(c-3”),72.6(c-4”),69.1(c-5”),18.3(c-6”).

dgp-5

lyciumsteroide(dgp-5):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:308；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):307(+4.08),240(–0.47),219(+0.99)；ir(kbr)νmax:3432,2969,2935,1697,1626,1450,1362,1087,1002,869cm^-1；hresims:m/z845.4306[m-h]^-(calcdforc45h66o15,845.4329).

¹hnmr(500mhz,dmso-d6),δh:1.80(1h,m,h-1a),1.55(1h,m,h-1b),1.64(1h,m,h-2a),1.40(1h,m,h-2b),3.99(1h,m,h-3),1.83(1h,m,h-4a),1.55(1h,m,h-4b),3.46(1h,m,h-6),1.93(1h,m,h-7a),1.70(1h,m,h-7b),1.71(1h,m,h-9),1.40(1h,m,h-11a),1.22(1h,m,h-11b),3.21(1h,m,h-12),1.75(1h,m,h-15a),1.63(1h,m,h-15b),1.80(1h,m,h-16a),1.14(1h,m,h-16b),1.18(3h,s,h-18),1.11(3h,s,h-19),5.08(1h,brs,h-20),1.13(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.55(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.37(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.32(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.99(1h,d,j＝16.0hz,h-7'),7.12(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.30(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,,h-9'),5.98(1h,d,j＝16.0hz,h-10'),4.78(1h,d,j＝9.5,1.5hz,h-1”),1.67(1h,m,h-2a”),1.50(1h,m,h-2b”),3.67(1h,m,h-3”),3.10(1h,m,h-4”),4.01(1h,m,h-5”),1.10(3h,d,j＝6.5hz,h-6”),4.68(1h,dd,j＝9.5,1.5hz,h-1”'),2.04(1h,m,h-2a”'),1.48(1h,m,h-2b”'),3.48(1h,m,h-3”'),3.06(1h,m,h-4”'),3.59(1h,m,h-5”'),1.09(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),3.48(3h,s,3”'-och3).

¹³cnmr(125mhz,dmso-d6),δc:32.8(c-1),27.8(c-2),73.5(c-3),36.9(c-4),73.7(c-5),75.7c-6),33.2(c-7),77.2(c-8),38.4(c-9),37.5(c-10),27.4(c-11),69.6(c-12),57.7(c-13),87.4(c-14),31.7(c-15),33.4(c-16),86.4(c-17),9.4(c-18),17.3(c-19),74.1(c-20),14.8(c-21),136.0(c-1′),127.1(c-2′,6′),128.8(c-3′,5′),129.0(c-4′),139.3(c-7′),126.8(c-8′),143.3(c-9′),122.9(c-10′),165.0(c-11′),.95.4(c-1”),38.5(c-2”),67.4(c-3”),81.7(c-4”),66.1(c-5”),18.0(c-6”),98.9(c-1”'),34.7(c-2”'),77.5(c-3”'),72.8(c-4”'),69.6(c-5”'),18.4(c-6”'),57.6(3”'-och3).

dgp-6

lyciumsteroidf(dgp-6):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:308；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):309(+4.74),238(–0.90)；ir(kbr)νmax:3433,2970,2937,1699,1626,1451,1313,1084,1002,871cm^-1；hresims:m/z845.4298[m-h]^-(calcdforc45h66o15,845.4329).

¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δh:1.68(1h,m,h-1a),1.47(1h,m,h-1b),1.56(2h,m,h-2),4.06(1h,m,h-3),1.86(1h,m,h-4a),1.62(1h,m,h-4b),3.74(1h,m,h-6),1.79(1h,m,h-7a),1.55(1h,m,h-7b),1.54(1h,m,h-9),1.24(2h,m,h-11),3.24(1h,m,h-12),1.80(2h,m,h-15a),1.68(1h,m,h-15b),1.68(1h,m,h-16a),1.80(1h,m,h-16b),1.19(3h,s,h-18),0.91(3h,s,h-19),5.05(1h,brs,h-20),1.14(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.56(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.37(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.32(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.99(1h,d,j＝16.0hz,h-7'),7.12(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.39(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-9'),5.98(1h,d,j＝16.0hz,h-10'),4.81(1h,dd,j＝9.5,1.5hz,h-1”),1.78(1h,m,h-2a”),1.56(1h,m,h-2b”),3.69(1h,m,h-3”),3.15(1h,m,h-4”),4.04(1h,m,h-5”),1.09(3h,d,j＝6.5hz,h-6”),4.69(1h,d,j＝9.5,1.5hz,h-1”'),2.06(1h,m,h-2a”'),1.49(1h,m,h-2b”'),3.49(1h,m,h-3”'),3.05(1h,m,h-4”'),3.60(1h,m,h-5”'),1.10(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),3.33(3h,s,3”'-och3).

¹³cnmr(125mhz,dmso-d6),δc:27.2(c-1),25.5(c-2),73.5(c-3),27.4(c-4),76.4(c-5),67.7c-6),38.0(c-7),75.5(c-8),35.3(c-9),40.4(c-10),27.6(c-11),69.7(c-12),57.7(c-13),87.4(c-14),32.7(c-15),32.6(c-16),86.9(c-17),9.7(c-18),19.5(c-19),74.0(c-20),14.8(c-21),136.0(c-1′),127.1(c-2′,6′),128.8(c-3′,5′),128.8(c-4′),139.4(c-7′),126.8(c-8′),143.6(c-9′),122.7(c-10′),164.9(c-11′),.96.0(c-1”),38.0(c-2”),67.4(c-3”),81.4(c-4”),66.1(c-5”),17.9(c-6”),98.8(c-1”'),34.7(c-2”'),77.5(c-3”'),72.8(c-4”'),69.6(c-5”'),18.4(c-6”'),57.6(3”'-och3).

dgp-7

lyciumsteroidg(dgp-7):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:313；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):309(+3.30),209(–0.79)；ir(kbr)νmax:3441,2935,1702,1624,1450,1371,1166,1086,1001,977,871cm^-1.hresims:m/z869.4295[m+na]⁺(calcdforc45h66nao15,869.4294).

¹hnmr(500mhz,pyride-d5),δh:2.28(1h,m,h-1a),1.89(1h,m,h-1b),2.26(1h,m,h-2a),2.02(1h,m,h-2b),4.89(1h,m,h-3),2.70(1h,m,h-4a),2.29(1h,m,h-4b),4.19(br.1h,s,h-6),2.72(1h,m),h-7a),2.47(1h,m,h-7b),2.55(1h,m,h-9),2.46(1h,m,h-11a),2.15(1h,m,h-11b),5.24(1h,dd,j＝4.0,11.0hz,h-12),2.16(1h,m,h-15a),2.03(1h,m,h-15b),1.89(1h,m,h-16a),1.46(1h,m,h-16b),2.12(3h,s,h-18),1.68(3h,s,h-19),4.03(1h,m,h-20),1.34(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.47(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.33(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.28(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.94(1h,d,j＝16.5hz,h-7'),6.94(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.93(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-9'),6.42(1h,d,j＝16.5hz,h-10'),5.41(1h,d,j＝9.5hz,h-1”),2.04(1h,m),h-2a”),2.34(1h,m,h-2b”),4.60(1h,m,h-3”),3.46(1h,m,h-4”),4.07(1h,m,h-5”),1.33(3h,d,j＝6.5hz,h-6”),5.10(1h,d,j＝9.5hz,h-1”'),1.67(1h,m,h-2a”'),2.33(1h,m,h-2b”'),3.70(1h,m,h-3”'),3.47(1h,m,h-4”'),4.03(1h,m,h-5”'),1.43(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),3.43(3h,s,och3-3”').

¹³cnmr(125mhz,pyride-d5),δc:33.9(c-1),29.1(c-2),74.1(c-3),38.3(c-4),75.3(c-5),77.9c-6),34.5(c-7),78.6(c-8),39.6(c-9),39.1(c-10),24.9(c-11),75.1(c-12),57.4(c-13),88.6(c-14),33.0(c-15),33.6(c-16),88.4(c-17),12.1(c-18),18.2(c-19),71.0(c-20),19.6(c-21),136.7(c-1′),127.7(c-2′,6′),129.2(c-3′,5′),129.3(c-4′),140.6(c-7′),127.0(c-8′),145.3(c-9′),122.8(c-10′),167.0(c-11′),.96.0(c-1”),39.3(c-2”),67.5(c-3”),83.5(c-4”),68.4(c-5”),18.6(c-6”),99.8(c-1”'),35.6(c-2”'),78.8(c-3”'),74.1(c-4”'),71.0(c-5”'),18.9(c-6”'),58.1(3”'-och3).

dgp-8

lyciumsteroidh(dgp-8):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:313；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):309(+3.12),209(–0.79)；ir(kbr)νmax:3441,2934,1702,1624,1450,1370,1165,1086,999,874cm^-1；hresims:m/z989.5091[m-h]^-(calcdforc52h77o18,989.5115).

¹hnmr(500mhz,pyride-d5),δh:1.81(1h,m,h-1a),1.49(1h,m,h-1b),2.25(1h,m,h-2a),2.02(1h,m,h-2b),4.89(1h,m,h-3),2.69(1h,m,h-4a),2.28(1h,m,h-4b),4.18(1h,m,h-6),2.72(1h,m,h-7a),2.48(1h,m,h-7b),2.56(1h,m,h-9),2.46(1h,m,h-11a),2.15(1h,m,h-11b),5.24(d,j＝4.0,11.0hz,h-12),2.15(1h,m,h-15a),2.03(1h,m),(h-15b),1.88(1h,m,h-16a),2.28(1h,m,h-16b),2.13(3h,s,h-18),1.68(3h,s,h-19),4.18(1h,m,h-20),1.33(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.48(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.32(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.29(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.94(1h,d,j＝16.5hz,h-7'),6.93(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.92(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-9'),6.42(1h,d,j＝16.5hz,h-10'),5.41(1h,d,j＝9.5hz,h-1”),2.05(1h,m,h-2a”),2.36(1h,m,h-2b”),4.59(1h,m,h-3”),3.47(1h,m,h-4”),4.06(1h,m,h-5”),1.32(3h,d,j＝6.5hz,h-6”),5.15(1h,d,j＝9.5hz,h-1”'),2.29(1h,m,h-2a”'),1.75(1h,m,h-2b”'),4.03(1h,m,h-3”'),3.45(1h,m,h-4”'),4.19(1h,m,h-5”'),1.32(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),4.73(1h,d,j＝9.5hz,h-1””),2.52(1h,m,h-2a””),1.69(1h,m,h-2b””),3.47(1h,m,h-3””),3.47(1h,m,h-4””),3.56(1h,m,h-5””),1.55(3h,d,j＝6.5hz,h-6””),3.56(3h,s,3”'-och3),3.44(3h,s,3””-och3).

¹³cnmr(125mhz,pyride-d5),δc:33.8(c-1),29.1(c-2),74.0(c-3),38.3(c-4),75.2(c-5),77.9c-6),34.5(c-7),78.6(c-8),39.6(c-9),39.1(c-10),24.9(c-11),75.1(c-12),57.4(c-13),88.6(c-14),33.0(c-15),33.6(c-16),88.4(c-17),12.0(c-18),18.2(c-19),71.0(c-20),18.6(c-21),136.7(c-1′),127.7(c-2′,6′),129.2(c-3′,5′),129.3(c-4′),140.6(c-7′),127.0(c-8′),145.3(c-9′),122.0(c-10′),167.0(c-11′),.96.0(c-1”),39.3(c-2”),67.5(c-3”),83.4(c-4”),68.4(c-5”),18.7(c-6”),99.8(c-1”'),36.7(c-2”'),77.7(c-3”'),83.2(c-4”'),69.1(c-5”'),19.6(c-6”'),102.2(c-1””),37.2(c-2””),81.4(c-3””),76.1(c-4””),72.9(c-5””),18.5(c-6””),58.8(3”'-och3),57.0(3””-och3).

dgp-9

lyciumsteroidi(dgp-9):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:313；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):309(+3.12),209(–0.79)；ir(kbr)νmax:3464,2934,1702,1624,1451,1380,1263,1165,1059,1001cm^-1；hresims:m/z1013.5100[m+na]⁺(calcdforc52h77nao18,1013.5080).

¹hnmr(500mhz,pyride-d5),δh:2.17(1h,m,h-1a),1.61(1h,m,h-1b),2.09(1h,m,h-2a),1.89(1h,m,h-2b),4.34(1h,m,h-3),2.68(1h,m,h-4a),2.09(1h,m,h-4b),4.76(1h,m,h-6),2.73(1h,m,h-7a),1.93(1h,m,h-7b),2.28(1h,m,h-9),2.50(1h,m,h-11a),2.16(1h,m,h-11b),5.29(1h,d,j＝4.0,11.0hz,h-12),1.97(1h,m,h-15a),1.97(1h,m,h-15b),2.37(1h,m,h-16a),2.20(1h,m,h-16b),2.15(3h,s,h-18),1.58(3h,s,h-19),4.09(1h,m,h-20),1.33(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.46(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.33(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.28(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.90(1h,d,j＝16.5hz,h-7'),6.91(1h,dd,j＝16.5,16.5hz,h-8'),7.86(1h,dd,j＝16.5,16.5hz,h-9'),6.36(1h,d,j＝16.5hz,h-10'),5.38(1h,d,j＝9.5hz,h-1”),2.33(1h,m,h-2a”),1.95(1h,m,h-2b”),4.59(1h,m,h-3”),3.47(1h,m,h-4”),4.22(1h,m,h-5”),1.40(3h,d,j＝6.5hz,h-6”),5.15(1h,d,j＝9.5hz,h-1”'),2.30(1h,m,h-2a”'),1.71(1h,m,h-2b”'),4.03(1h,m,h-3”'),3.43(1h,m,h-4”'),4.18(1h,m,h-5”'),1.33(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),4.73(1h,d,j＝9.5hz,h-1””),2.53(1h,m,h-2a””),1.70(1h,m,h-2b””),3.58(1h,m,h-3””),3.47(1h,m,h-4””),3.57(1h,m,h-5””),1.55(3h,d,j＝6.5hz,h-6””),3.55(3h,s,3″′-och3),3.44(3h,s,3″″-och3).

¹³cnmr(125mhz,pyride-d5),δc:28.2(c-1),26.7(c-2),75.8(c-3),29.0(c-4),78.0(c-5),69.1c-6),39.0(c-7),76.6(c-8),36.7(c-9),41.9(c-10),25.2(c-11),75.2(c-12),57.3(c-13),88.9(c-14),32.9(c-15),34.1(c-16),88.5(c-17),12.3(c-18),18.6(c-19),70.8(c-20),20.3(c-21),136.6(c-1′),127.7(c-2′,6′),129.2(c-3′,5′),129.4(c-4′),140.7(c-7′),126.9(c-8′),145.4(c-9′),122.7(c-10′),167.0(c-11′)。,97.9(c-1”),38.9(c-2”),67.5(c-3”),83.1(c-4”),68.7(c-5”),18.7(c-6”),99.8(c-1”'),36.7(c-2”'),77.7(c-3”'),83.0(c-4”'),68.9(c-5”'),19.4(c-6”'),102.2(c-1””),37.2(c-2””),81.4(c-3””),76.1(c-4””),72.9(c-5””),18.5(c-6””),58.8(3″′-och3),57.0(3″″-och3).

dgp-10

lyciumsteroidj(dgp-10):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:307；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):302(+3.17),250(–0.30),222(+1.65)；ir(kbr)νmax:3456,2935,1702,1625,1450,1366,1087,1002,869,696cm^-1；hresims:m/z1157.5853[m+na]⁺(calcdforc59h90nao21,1157.5867).

¹hnmr(500mhz,pyride-d5),δh:1.64(1h,m,h-1a),2.28(1h,m,h-1b),2.00(1h,m,h-2a),2.54(1h,m,h-2b)4.87(1h,m,h-3),2.72(1h,m,h-4a),2.27(1h,m,h-4b),4.07(1h,m,h-6),2.74(1h,m,h-7a),2.49(1h,m,h-7b),2.44(1h,m,h-9),2.40(1h,m,h-11a),1.90(1h,m,h-11b),3.81(1h,m,h-12),2.09(1h,m,h-15a),2.17(1h,m,h-15b),1.94(1h,m,h-16a),2.02(1h,m,h-16b),2.06(3h,s,h-18),1.71(3h,s,h-19),5.83(1h,m,h-20),1.63(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.42(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.35(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.25(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.71(1h,d,j＝16.0hz,h-7'),6.90(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-8'),7.62(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,h-9'),6.24(1h,d,j＝16.0hz,h-10'),5.32(1h,d,j＝9.5hz,h-1”),2.37(1h,m,h-2a”),2.03(1h,m,h-2b”),4.43(1h,m,h-3”),3.44(1h,m,h-4”),3.94(1h,m,h-5”),1.28(3h,d,j＝6.0hz,h-6”),5.09(1h,m,h-1”'),2.23(1h,m,h-2a”'),2.03(1h,m,h-2b”'),4.01(1h,m,h-3”'),3.69(1h,m,h-4”'),4.51(1h,m,h-5”'),1.24(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),5.11(1h,m,h-1””),2.36(1h,m,h-2a””),1.87(1h,m,h-2b””),4.08(1h,m,h-3””),3.51(1h,m,h-4””),4.17(1h,m,h-5””),1.41(3h,d,j＝6.5hz,h-6””),4.76(1h,m,h-1””'),1.76(1h,m,h-2a””'),2.56(1h,m,h-2b””'),3.45(1h,m,h-3””'),3.46(1h,m,h-4””'),3.57(1h,m,h-5””'),1.55(3h,d,j＝6.0hz,h-6””'),3.38(3h,s,3″′-och3),3.51(3h,s,3″″-och3),3.44(3h,s,3″″′-och3).

¹³cnmr(125mhz,pyride-d5)δc:33.9(c-1),29.2(c-2),74.2(c-3),38.4(c-4),75.3(c-5),78.0c-6),34.6(c-7),78.9(c-8),40.1(c-9),39.0(c-10),28.6(c-11),71.1(c-12),59.3(c-13),88.6(c-14),33.0(c-15),34.5(c-16),87.8(c-17),10.6(c-18),18.3(c-19),75.6(c-20),15.7(c-21),136.8(c-1′),128.6(c-2′,6′),129.2(c-3′,5′),129.6(c-4′),139.6(c-7′),127.2(c-8′),143.9(c-9′),122.1(c-10′),166.4(c-11′),.96.1(c-1”),39.1(c-2”),67.7(c-3”),81.1(c-4”),68.7(c-5”),18.6(c-6”),99.0(c-1”'),29.2(c-2”'),75.9(c-3”'),77.0(c-4”'),63.2(c-5”'),16.8(c-6”'),100.5(c-1””),36.6(c-2””),77.8(c-4””),83.3(c-4””),69.1(c-5””),18.6(c-6””),102.2(c-1””'),37.2(c-2””'),81.4(c-3””'),76.2(c-4””'),72.9(c-5””'),18.7(c-6””'),56.5(3″′-och3),58.8(3″″-och3),57.1(3″″′-och3).

dgp-11

lyciumsteroidk(dgp-11):whiteamorphouspowder,uvλmax(meoh)nm:312；(c0.10meoh)；cdλmaxnm(δε):308(+3.57),221(–0.96)；ir(kbr)νmax:3451,2934,1703,1624,1450,1367,1165,1087,1002,907,874cm^-1,hresims:m/z1157.5850[m+na]⁺⁽calcdforc59h90nao21,1157.5867).

¹hnmr(500mhz,pyride-d5),δh:1.50(1h,m,h-1a),2.26(1h,m,h-1b),1.25(1h,m,h-2a),2.02(1h,m,h-2b),4.84(1h,m,h-3),2.27(1h,m,h-4a),2.69(1h,m,h-4b),4.18(1h,m,h-6),2.72(1h,m,h-7a),2.48(1h,m,h-7b),2.55(1h,m,h-9),2.45(1h,m,h-11a),2.14(1h,m,h-11b),5.24(1h,m,h-12),2.04(1h,m,h-15a),2.16(1h,m,h-15b),1.89(1h,m,h-16a),1.82(1h,m,h-16b),2.13(3h,s,h-18),1.68(3h,s,h-19),4.02(1h,m,h-20),1.32(3h,d,j＝6.0hz,h-21),7.48(2h,d,j＝7.5hz,h-2',6'),7.33(2h,t,j＝7.5hz,h-3',5'),7.27(1h,t,j＝7.5hz,h-4'),6.94(1h,d,j＝16.0hz,h-7'),6.94(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,,h-8'),7.92(1h,dd,j＝16.0,16.0hz,,h-9'),6.42(1h,d,j＝16.0hz,,h-10'),5.33(1h,d,j＝9.5hz,h-1”),2.37(1h,m,h-2a”),2.02(1h,m,h-2b”),4.44(1h,m,h-3”),3.43(1h,m,h-4”),3.92(1h,m,h-5”),1.26(3h,d,j＝6.0hz,h-6”),5.10(1h,m,h-1”'),2.24(1h,m,h-2a”'),2.09(1h,m,h-2b”'),4.02(1h,m,h-3”'),3.69(1h,m,h-4”'),4.52(1h,m,h-5”'),1.24(3h,d,j＝6.5hz,h-6”'),5.12(1h,m,h-1””),2.38(1h,m,h-2a””),1.88(1h,m,h-2b””),4.07(1h,m,h-3””),3.52(1h,m,h-4””),4.16(1h,m,h-5””),1.40(3h,d,j＝6.5hz,h-6””),4.75(1h,m,h-1””'),1.72(1h,m,h-2a””'),2.54(1h,m,h-2b””'),3.46(1h,m,h-3””'),3.45(1h,m,h-4””'),3.57(1h,m,h-5””'),1.54(3h,d,j＝6.0hz,h-6””'),3.38(3h,s,3″′-och3),3.55(3h,s,3″″-och3),3.44(3h,s,3″″′-och3).

¹³cnmr(125mhz,pyride-d5),δc:33.8(c-1),29.1(c-2),74.1(c-3),38.4(c-4),75.1(c-5),77.8c-6),34.5(c-7),78.6(c-8),39.6(c-9),39.0(c-10),28.6(c-11),75.3(c-12),57.4(c-13),88.4(c-14),33.0(c-15),33.6(c-16),88.6(c-17),12.0(c-18),18.2(c-19),71.0(c-20),19.6(c-21),136.7(c-1′),127.7(c-2′,6′),129.2(c-3′,5′),129.3(c-4′),140.6(c-7′),127.1(c-8′),145.3(c-9′),122.9(c-10′),167.0(c-11′),.96.0(c-1”),39.1(c-2”),67.7(c-3”),81.2(c-4”),68.7(c-5”),18.6(c-6”),98.9(c-1”'),24.9(c-2”'),75.9(c-3”'),77.044(c-4”'),63.2(c-5”'),16.8(c-6”'),100.5(c-1””),36.6(c-2””),77.9(c-3””),83.3(c-4””),69.1(c-5””),18.6(c-6””),102.2(c-1””'),37.2(c-2””'),81.4(c-3””'),76.2(c-4””'),72.9(c-5””'),18.6(c-6””'),56.5(3″′-och3),58.8(3″″-och3),57.0(3″″′-och3).

實(shí)驗(yàn)例1、地骨皮中c21甾體及其苷類單體化合物的藥理活性實(shí)驗(yàn)

利用棕櫚酸誘導(dǎo)min6小鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞，形成胰島細(xì)胞損傷模型(model)；應(yīng)用cck-8法測定細(xì)胞存活率，并以con組的od值作為1，計(jì)算各細(xì)胞培養(yǎng)孔的相對od值，觀察樣品作用24h后對模型細(xì)胞的保護(hù)作用。

采用cck-8法篩選地骨皮c21甾體dgp-2，dgp-3，dgp-7對棕櫚酸鈉(0.4mm)所致胰島細(xì)胞(min6)增殖受損的保護(hù)作用，以各組在檢測波長(450nm)下與對照組的吸光度值比值為標(biāo)準(zhǔn)，獲得活性較好的化合物。

結(jié)果顯示，與正常對照con組比較，棕櫚酸鈉(0.4mm)使模型對照model組細(xì)胞增殖明顯受損，其細(xì)胞培養(yǎng)液經(jīng)cck-8染色后的平均僅為con組的60％。在樣品終濃度為1×10^-5m作用模型細(xì)胞24h后，與model組比較，dgp-7，dgp-2，dgp-3組的相對od值分別增加了21.3％，18.1％，13.6％，顯示明顯的胰島細(xì)胞保護(hù)作用。而且不同濃度的dgp-7，dgp-2，dgp-3作用24h后，對棕櫚酸鈉誘導(dǎo)的胰島細(xì)胞損傷模型呈現(xiàn)劑量依賴性的保護(hù)作用(見圖1)。