技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于分子生物學(xué)與生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的gRNA序列在敲除人Lin28A基因的應(yīng)用以及腫瘤治療中的應(yīng)用。本發(fā)明根據(jù)CRISPR/Cas9的設(shè)計(jì)原則，設(shè)計(jì)了6個(gè)向?qū)NA（gRNA），其序列表見(jiàn)SEQ?ID?NO.1?6所示，并且將其構(gòu)建在PX458載體上，經(jīng)活性檢測(cè)篩選獲得2個(gè)高效靶向gRNA。在人肝癌細(xì)胞株(HepG2)和人黑色素瘤細(xì)胞株（A375）中利用這2個(gè)gRNA指導(dǎo)的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，可以有效的敲除人Lin28A基因，這一系統(tǒng)易于操作，人Lin28A基因敲除效率高，適用于多種腫瘤細(xì)胞模型。本發(fā)明涉及的gRNA有望在治療腫瘤的新型藥物中得到應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：周勇;申友鋒
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶高圣生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司
文檔號(hào)碼：201611252179
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.30
技術(shù)公布日：2017.06.20