1.一種適用于軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加在所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的添加劑,所述添加劑的成分以終濃度計(jì),包括:丁二胺2-3μM,絲氨酸蛋白酶抑制蛋白10-20μg/mL,纖黏連蛋白15-25ng/mL,轉(zhuǎn)鐵蛋白25-35μg/mL,胰島素5-10μg/mL,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子1-10ng/mL,表皮生長(zhǎng)因子3-15ng/mL,聚賴氨酸2-5mg/mL,花生四烯酸1-3μM,亞麻酸4-10μM,血清鋪展因子4-11ng/mL,維生素C 15-25μg/mL,銀膠菊內(nèi)酯10-30μg/mL,黃酮20-32μg/mL。
2.如權(quán)利要求1所述的適用于軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加在所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的添加劑,所述添加劑的成分以終濃度計(jì),包括:丁二胺2.5μM,絲氨酸蛋白酶抑制蛋白16μg/mL,纖黏連蛋白20ng/mL,轉(zhuǎn)鐵蛋白28μg/mL,胰島素8μg/mL,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子3ng/mL,表皮生長(zhǎng)因子10ng/mL,聚賴氨酸4mg/mL,花生四烯酸2μM,亞麻酸6μM,血清鋪展因子7ng/mL,維生素C 20μg/mL,銀膠菊內(nèi)酯22μg/mL,黃酮25μg/mL。
3.如權(quán)利要求1或2所述的適用于軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為DMEM或F12培養(yǎng)基。
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的適用于軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,步驟如下:
S1向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入丁二胺、絲氨酸蛋白酶抑制蛋白、纖黏連蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、聚賴氨酸、花生四烯酸、亞麻酸、血清鋪展因子、維生素C、銀膠菊內(nèi)酯和黃酮,混合均勻,得混合物;
S2向步驟S1所得混合物中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3-8%的氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH至6.9-7.3,即得。
5.如權(quán)利要求4所述的適用于軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,所述步驟S2向步驟S1所得混合物中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的氫氧化鈉溶液。
6.如權(quán)利要求4所述的適用于軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,所述步驟S2調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH至7.2。