一種mdck細(xì)胞無(wú)血清化學(xué)培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種MDCK細(xì)胞無(wú)血清無(wú)蛋白化學(xué)培養(yǎng)基，包括各種氨基酸、維生素、微量元素、無(wú)機(jī)鹽；本發(fā)明的MDCK細(xì)胞無(wú)血清無(wú)蛋白化學(xué)培養(yǎng)基，無(wú)動(dòng)物源、無(wú)血清、化學(xué)成份明確可支持MDCK細(xì)胞的高密度懸浮生長(zhǎng)，可用于科學(xué)研究及工業(yè)生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】-種MDCK細(xì)胞無(wú)血清化學(xué)培養(yǎng)基

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種MDCK細(xì)胞無(wú)血清化學(xué)培養(yǎng)基。

【背景技術(shù)】
[0002] MDCK 細(xì)胞（Madin-DarbyCanineKidney)是由 Madin 和 Darby 于 1958 年從美國(guó)母 曲架犬的腎臟細(xì)胞分離培育建立的。它是以貼壁方式生長(zhǎng)的犬腎上皮連續(xù)細(xì)胞系。目前該 細(xì)胞廣泛用于多種病毒的擴(kuò)增及純化。由于其病毒感染效率高，增值快，且不易變異，該細(xì) 胞被公認(rèn)為最適合于甲乙型流感病毒疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞系之一。
[0003] 傳統(tǒng)的MDCK細(xì)胞培養(yǎng)大多采用有貼壁培養(yǎng)方式，使用基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加一定量的 小牛血清作為培養(yǎng)液。然而血清是由血漿去除細(xì)胞及纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合 物，可能含有潛在的傳染性物質(zhì)比如支原體、病毒等，且成分復(fù)雜不明確，會(huì)使蛋白質(zhì)產(chǎn)物 的下游分離純化工作困難。此外，血清來(lái)源困難，價(jià)格昂貴，大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使 用血清將會(huì)大大增加生產(chǎn)成本。同時(shí)血清質(zhì)量隨動(dòng)物個(gè)體、血清產(chǎn)地、生產(chǎn)批號(hào)不同會(huì)產(chǎn)生 波動(dòng)，使得實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)過(guò)程難以實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化。因而適合MDCK細(xì)胞生長(zhǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基的開(kāi) 發(fā)尤為重要。
[0004] 近年來(lái)，MDCK細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)的研究有了一些進(jìn)展，相繼出現(xiàn)了幾種適合MDCK 細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基。這些培養(yǎng)基雖然都可支持MDCK細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，但細(xì)胞生長(zhǎng) 緩慢，培養(yǎng)周期長(zhǎng)，不能很快獲得較高細(xì)胞密度。美國(guó)Sigma-Aldrich和Gibco也分別推出 了可以支持MDCK細(xì)胞生長(zhǎng)的商業(yè)培養(yǎng)基Ex-CellMDCK和EpiSerf。這些商業(yè)培養(yǎng)基雖能支 持MDCK細(xì)胞穩(wěn)定生長(zhǎng)和用于生物制品的生產(chǎn)，但存在一些明顯的缺點(diǎn)：成分保密，化學(xué)成 分不明確，給過(guò)程優(yōu)化和生產(chǎn)帶來(lái)困難；價(jià)格比較昂貴，適用于小規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究，而大規(guī) 模生產(chǎn)使用會(huì)大大提高生產(chǎn)成本。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了一種MDCK細(xì)胞無(wú)血清化學(xué)培養(yǎng)基，無(wú)動(dòng)物源、無(wú)血清、化學(xué)成份明 確可支持MDCK細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。
[0006] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是，一種MDCK細(xì)胞無(wú)血清無(wú)蛋白化學(xué)培養(yǎng)基，包括下述 組分，具體的組分及其含量如下表所示：
[0007]
[0008]

【權(quán)利要求】
1. 一種MDCK細(xì)胞無(wú)血清無(wú)蛋白化學(xué)培養(yǎng)基，其特征在于，包括下述組分，具體的組分 及其含量如下表所示：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的MDCK細(xì)胞無(wú)血清無(wú)蛋白化學(xué)培養(yǎng)基，其特征在于，進(jìn)一步地， 該培養(yǎng)基的組分及其含量如下表所示：


【文檔編號(hào)】C12N5/071GK104278010SQ201410476039
【公開(kāi)日】2015年1月14日 申請(qǐng)日期:2014年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月17日
【發(fā)明者】陳文永, 陳路磊, 劉秀梵, 劉曉文, 李群輝 申請(qǐng)人:陳文永