1.一種白藜蘆醇-二十碳五烯酸酯的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1、向白藜蘆醇中加入甲基叔丁基醚,充分混勻,得到白藜蘆醇溶液;
所述甲基叔丁基醚與白藜蘆醇體積摩爾比為1:0.026~0.044(L/mol);
S2、取二十碳五烯酸加入到步驟S1所得的白藜蘆醇溶液中,充分混勻,得到醇酸混合溶液;
所述二十碳五烯酸與白藜蘆醇摩爾比為6~12:1;
S3、取脂肪酶EC 3.1.1.3加入到步驟S2所得的醇酸混合溶液中,充氮氣、密封,得到脂肪酶溶液;
所述脂肪酶EC 3.1.1.3≥5000U/g,所述脂肪酶EC 3.1.1.3與白藜蘆醇質(zhì)量摩爾比為100~150:1(g/mol);
S4、將步驟S3所得的脂肪酶溶液置于35~50℃、150~200rpm環(huán)境下振蕩反應(yīng)48~96h后,置于冰水浴中冷卻,終止酶解,得酶反應(yīng)溶液;
S5、將步驟S4所得的酶反應(yīng)溶液過濾,除去脂肪酶,再于35~45℃、相對真空度-0.05~-0.08Mpa條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),除去甲基叔丁基醚,得到粗產(chǎn)物;
S6、將體積濃度為95%的乙醇加入到步驟S5所得的粗產(chǎn)物中,加入碳酸鈉和水,氮氣保護,40~50℃回流皂化20~30min,得皂化溶液;
所述體積濃度為95%的乙醇與粗產(chǎn)物的體積質(zhì)量比為10~20:1(mL/g),所述碳酸鈉與粗產(chǎn)物質(zhì)量比為0.8~1.2:1,所述水與粗產(chǎn)物體積質(zhì)量比為4~6:1(mL/g);
S7、將步驟S6所得的皂化溶液用正己烷萃取1~3次,萃取所得正己烷層用無水硫酸鈉除水后,于35~45℃、相對真空度-0.05~-0.08Mpa條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),除去正己烷,得到白藜蘆醇-二十碳五烯酸酯;
每次萃取所用正己烷的體積與步驟S5中所用體積濃度為95%的乙醇的體積的比為2~6:1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述白藜蘆醇-二十碳五烯酸酯的制備方法,其特征在于,步驟S3所述脂肪酶EC 3.1.1.3為Novozyme 435,來自南極假絲酵母。