本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種梅花鹿鮮茸A44基因成份的分離提取技術(shù)。
背景技術(shù)：
：梅花鹿（CervnsnipponTemminck）是我國珍貴的藥食兩用一級保護(hù)動物。主要分布在我國東北三省，是珍貴的藥用經(jīng)濟(jì)動物，“東北三寶”之一的梅花鹿鹿茸是補(bǔ)腎壯陽，強(qiáng)身健體之極品。副產(chǎn)品如鹿鞭、鹿血、鹿心、鹿尾、鹿筋都是名貴中藥材，具有補(bǔ)腎壯陽、益精興五臟、強(qiáng)筋骨、美容效果。除了經(jīng)濟(jì)藥用價值珍貴外，其資源總量更是十分有限。我國雖有3000多年的馴鹿、養(yǎng)鹿歷史，但梅花鹿數(shù)量不多。據(jù)不完全統(tǒng)計，我國梅花鹿養(yǎng)殖存量僅有25萬頭，主要集中在我國吉林省長春市（約10萬只）。南方對梅花鹿的馴養(yǎng)更少。由于鹿產(chǎn)品市場需求增加較快，對鹿資源的爭奪十分激烈。在人類基因組計劃即將結(jié)束時，以美國為代表的西方國家已開始覬覦我國珍稀動植物的基因資源，尤其想在全球的基因爭奪戰(zhàn)中率先占有梅花鹿基因資源。經(jīng)BLASTN軟件科學(xué)分析表明，梅花鹿cDNA序列與人Sentrin/SUMOcDNA序列在核苷酸水平上的同源性為95%，揭示這一序列代表梅花鹿Sentrin/SUMO分子的全編碼cDNA，經(jīng)GenBank登記為A44基因。進(jìn)一步研究表明：梅花鹿因擁有A44基因組群而比其他動物乃至人類有著更強(qiáng)的活力和自我修復(fù)能力，根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)，我們在梅花鹿A44基因有效成份的分離提取上進(jìn)行了深入研究，采用獨(dú)特的基因分離提取法從梅花鹿鮮茸中分離出了其活性成分，解決傳統(tǒng)提取技術(shù)獲得的提取物質(zhì)量差、純度低等問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在提供一種提取效率高、產(chǎn)品質(zhì)量好的梅花鹿鮮茸A44基因有效成份的分離提取技術(shù)。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案包括以下步驟：1）精心挑選梅花鹿鮮茸，清洗干凈后，采用專用設(shè)備針刺吸取，待符合工藝要求后送入液氮分離罐，得到的新鮮茸血經(jīng)微孔過濾、分子網(wǎng)精濾后制得上清液；2）上清液經(jīng)層析、調(diào)溫、調(diào)濕、沉淀、分離后制得精致液；3）精致液經(jīng)濃縮、噴霧干燥后制得干粉，干粉經(jīng)進(jìn)一步分離制得凍干粉。所述1）步驟中針刺吸取在無菌罐中、低溫條件下進(jìn)行。所述2）步驟中層析分三次進(jìn)行，首次層析將雜質(zhì)分離，第二次層析將脂類分離，第三次層析將A44有效成份分離出來；層析過程采用智能數(shù)字控制系統(tǒng)。所述3）步驟分離制得的凍干粉純度大于85%，活性在3000以上。以上整個分離提取過程控制在5小時之內(nèi)，提取的A44有效成分可以作為治療高血壓的醫(yī)用原料，也可用于抑制腫瘤、冠心病、前列腺炎炎、胃癌等疾病的輔助用料，同時還可作為美容化妝品原料。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1、提取效率高：新鮮鹿茸清潔消毒后輸送至無菌罐針刺吸取，實(shí)現(xiàn)了快速保鮮防凝；針刺吸取后的茸血過濾后進(jìn)入低溫罐，將茸血進(jìn)行分離提取，整個分離提取過程中無化學(xué)反應(yīng)發(fā)生，不影響A44的生理活性；通常在3-5小時即可獲得最佳提取率，提取時間短，提高了A44的提取率，節(jié)省了原材料，有利于資源的充分利用，提高了經(jīng)濟(jì)效益。2、產(chǎn)品質(zhì)量好：在提取過程中，除了加入液氮進(jìn)行分離，沒有任何化學(xué)添加劑，A44的分子結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生變化；又由于加快了A44的分離速度，提取時間短，因此A44的生理活性得到最大程度的保持，成品品質(zhì)更高。3、A44純度高：在提取過程中采用了三次反相柱層析，能將與A44結(jié)構(gòu)類似的其他物質(zhì)，以及分子量相似的物質(zhì)進(jìn)行很好的分離，產(chǎn)品純度高達(dá)92.5%，而且固定相重復(fù)使用，大大節(jié)約了成本。4、A44活性高：由于在整個生產(chǎn)提取過程中，最大限度地保持了基因活性，因此，最終產(chǎn)品A44的活性高達(dá)85%，這在工業(yè)化提取中是不多見的。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進(jìn)一步限定，本發(fā)明可以按
發(fā)明內(nèi)容所述的任一方式實(shí)施。實(shí)施例1：精心挑選梅花鹿鮮茸，清洗干凈后，在無菌罐中低溫條件下采用專用設(shè)備針刺吸取，待符合工藝要求后送入液氮分離罐，得到的新鮮茸血經(jīng)微孔過濾、分子網(wǎng)精濾后制得上清液；上清液進(jìn)行三次層析，層析過程采用智能數(shù)字控制系統(tǒng)控制，首次層析將雜質(zhì)分離，第二次層析將脂類分離，第三次層析將A44有效成份分離出來，然后經(jīng)調(diào)溫、調(diào)濕、沉淀、分離后制得精致液；精致液經(jīng)濃縮、噴霧干燥后制得干粉，干粉經(jīng)進(jìn)一步分離制得凍干粉。整個分離提取過程控制在5小時之內(nèi)完成。經(jīng)檢測，分離制得的凍干粉純度大于85%，活性在3000以上。與現(xiàn)有技術(shù)比較如下：指標(biāo)提取率純度活性提取時間色澤味道口感同類產(chǎn)品70%左右60%左右2000左右5天混濁藥味澀本專利產(chǎn)品92．5%85%3000以上5小時晶瑩茸香綿甜適口上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3