1.一種自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：包括步驟如下：
(a)從腫瘤患者體內(nèi)獲得細(xì)胞樣本并分離和激活，所述樣本為T細(xì)胞或T細(xì)胞的祖細(xì)胞；
(b)構(gòu)建scFv-CD28-CD137-CD19-CD3；
(c)制作pCAG-T7-CD28-CD137-CD19-CD3-gRNA重組質(zhì)粒
(d)轉(zhuǎn)染T細(xì)胞；
(e)體外培養(yǎng)擴(kuò)增CAR-T細(xì)胞群體；
(f)CAR-T細(xì)胞回輸患者體內(nèi)，進(jìn)行抗腫瘤治療。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：所述步驟(a)的具體操作流程為：1)抗凝血管抽取骨髓瘤患者外周血；2)向管中加入紅細(xì)胞裂解液和等體積PBS，輕輕吹打成細(xì)胞懸液；3)另取兩支離心管，加入LTS1077淋巴細(xì)胞分層液；用吸管吸取細(xì)胞懸液，在距離淋巴細(xì)胞分層液上方0.5-3cm處將細(xì)胞懸液小心而緩慢的加入，使細(xì)胞懸液重疊與淋巴細(xì)胞分層液上，2000r/min離心5-50min；4)取出離心管，移液管吸去最上層的血漿，移液槍吸取血裝層下的單個(gè)核細(xì)胞置入離心管中，加入PBS，輕輕吹打均勻后再次離心，1500r/min，10min，去掉上清液，共洗滌2-5次；5)向去掉上清后的離心管內(nèi)加入含滅活胎牛血清、青鏈霉素和RPMI-1640的培養(yǎng)基放置于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中擴(kuò)大培養(yǎng)；6)離心，收取外周血單核細(xì)胞，置于液氮罐中保存?zhèn)溆谩?/p>
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：所述細(xì)胞裂解液和PBS等體積，細(xì)胞裂解液和PBS的總體積與抽取的外周血體積比為2:1-1:2。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：淋巴細(xì)胞分層液和細(xì)胞懸液的體積比為2:1-1:2；步驟4)中加入PBS的體積為淋巴細(xì)胞分層液的1/2-3倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：步驟5)中加入的濃度分別是10％滅活胎牛血清、100U/ml青鏈霉素、100U/mlIL-2的RPMI-1640。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：所述步驟(c)為根據(jù)CRISPR/Cas9靶點(diǎn)設(shè)計(jì)原則，應(yīng)用crispr在線工具設(shè)計(jì)、合成靶向scFv–CD28-CD137-CD19-CD3全長(zhǎng)基因的gRNA和引物，并將其插入到CRISPR/Cas9質(zhì)粒骨架載體中，制作成pCAG-T7-CD28-CD137-CD19-CD3-gRNA重組質(zhì)粒。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自體CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：所述步驟(d)為將步驟(c)制得的質(zhì)粒CAG-T7-CD28-CD137-CD19-CD3-gRNA與步驟(a)制得的外周血單核細(xì)胞混合進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的CAR-T細(xì)胞制備方法，其特征在于：所述步驟(e)的詳細(xì)步驟為：用OKM-100細(xì)胞培養(yǎng)液調(diào)整接種密度為(1～2)×106/ml后加入到含有刺激因子細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，然后再加入自體滅活血漿，至細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)4～5d待細(xì)胞鋪滿瓶底后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)入大的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)2～3d后，將大的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞轉(zhuǎn)至含有更大的OKM-200細(xì)胞培養(yǎng)液的CO2透氣培養(yǎng)袋中繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)6～7d后，收獲細(xì)胞。