本發(fā)明涉及花生膽酸及其中間體的制備方法。
背景技術(shù)：
脂肪酸-膽酸結(jié)合物(FABACs)是由脂肪酸與膽酸通過酰胺鍵偶聯(lián)形成的一類化合物，F(xiàn)ABACS在體外能夠增加膽汁中膽固醇的溶解度，抑制人工膽汁和天然膽汁中膽固醇的結(jié)晶，能夠預(yù)防由高脂飲食所致的膽結(jié)石，并且對已形成的膽固醇結(jié)石有溶解作用；還能夠預(yù)防高脂飲食所致的動脈粥樣硬化。以色列Galmed制藥，一家致力于肝病和膽結(jié)石口服藥物的開發(fā)的生物制藥公司，已經(jīng)在2014年內(nèi)宣布FDA已經(jīng)同意其脂肪酸-膽酸結(jié)合物花生膽酸(Aramchol，IV)的新藥申請。目前，花生膽酸臨床試驗已經(jīng)接近尾聲，不同劑量的花生膽酸安全、可耐受，適用于非酒精性脂肪性肝炎合并肥胖和葡萄糖不耐癥的患者，并沒有在健康的志愿者中產(chǎn)生嚴重不良事件。非酒精性脂肪性肝炎合并肥胖為慢性病，影響接近12％的美國與部分歐盟國家人口，而且其發(fā)病攀升速率有趕超肥胖癥與糖尿病的趨勢。因此預(yù)計花生膽酸有廣闊的市場空間。2015年9月，F(xiàn)DA授予Galmed制藥公司的aramchol快速審批資格，花生膽酸最快預(yù)計于2016年上市。
花生膽酸的制備方法現(xiàn)有技術(shù)中，如專利文獻US2012/277448、US2004/136906、期刊文獻Synthetic Communications，1998，28，109-117和Journal of Organic Chemistry，2006，71，7205-7213所報導(dǎo)，首先活化膽酸甲酯的羥基、再用疊氮化鈉取代后催化氫化得到花生膽酸中間體I。疊氮化鈉是劇毒品，又極易爆炸，工業(yè)生產(chǎn)危險性大；催化氫化需要高壓特種設(shè)備，既不安全又不利于工業(yè)生產(chǎn)。因此，如何安全的、高收率的得到高純度的花生膽酸中間體I是花生膽酸IV合成的關(guān)注點。花生膽酸中間體I通常合成路線一般為四五步，收率為50％左右，但都是用疊氮化鈉和催化氫化的條件。疊氮化鈉是劇毒品，在使用的極易爆炸，難以工業(yè)化；催化氫化也需要特殊的氫化設(shè)備，操作過程中危險；并且原料藥中，鈀的限度要求極高，很難再純化過程中達到合格限度以下。因此，需要繼續(xù)尋找一種新的花生膽酸中間體I的合成方法，簡化合成路線，避免使用易爆的物料，保證安全生產(chǎn)，降低原料藥的成本。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中花生膽酸的制備方法反應(yīng)條件苛刻、需要使用劇毒品、操作危險、生產(chǎn)成本高、不適合于工業(yè)化生產(chǎn)等缺陷而提供了一種花生膽酸及其中間體的制備方法。本發(fā)明的制備方法反應(yīng)路線短，總收率高，制得的產(chǎn)品純度高，操作安全，生產(chǎn)成本低、環(huán)境友好，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明提供了一種花生膽酸中間體I的制備方法，其包括以下步驟：有機溶劑中，將花生膽酸中間體II或II’與還原劑進行還原反應(yīng)，得到花生膽酸中間體I即可；所述的還原劑為水合肼或甲胺；
所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的有機溶劑可以為本領(lǐng)域中該類還原反應(yīng)的常規(guī)有機溶劑，本發(fā)明中特別優(yōu)選脂肪族醇類溶劑和/或脂肪族醚類溶劑。所述的脂肪族醇類溶劑優(yōu)選C1～C4醇溶劑；所述的C1～C4醇溶劑優(yōu)選甲醇和/或乙醇。所述的脂肪族醚類溶劑優(yōu)選C1～C6醚溶劑；所述的C1～C6醚溶劑優(yōu)選四氫呋喃和/或異丙醚。當采用肪族醇類溶劑和脂肪族醚類溶劑的混合溶劑時，所述的脂肪族醇類溶劑和脂肪族醚類溶劑的混合溶劑優(yōu)選C1～C4醇溶劑和C1～C6醚溶劑的混合溶劑；所述的C1～C4醇溶劑和C1～C6醚溶劑的混合溶劑優(yōu)選甲醇與四氫呋喃的混合溶劑或乙醇與異丙醚的混合溶劑。當采用脂肪族醇類溶劑和脂肪族醚類溶劑的混合溶劑時，所述的脂肪族醇類溶劑與所述的脂肪族醚類溶劑的體積比值優(yōu)選1～3，例如1。
在所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的有機溶劑與所述的花生膽酸中間體II或II’的體積質(zhì)量比值優(yōu)選1mL/g～100mL/g，進一步優(yōu)選2mL/g～10mL/g，例如4mL/g或6mL/g。
在所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的水合肼可以為本領(lǐng)域中常規(guī)市售水合肼試劑，所述的水合肼的質(zhì)量濃度優(yōu)選5％～80％，進一步優(yōu)選40％～60％，例如40％或60％；所述的質(zhì)量濃度是指肼的質(zhì)量占水合肼總質(zhì)量的百分比。
在所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的甲胺可以為本領(lǐng)域中常規(guī)市售甲胺水溶液試劑，所述的甲胺的質(zhì)量濃度優(yōu)選10％～40％，進一步優(yōu)選30％～40％；例如30％或40％；所述的質(zhì)量濃度是指甲胺的質(zhì)量占甲胺水溶液總質(zhì)量的百分比。
在所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的還原劑與所述的花生膽酸中間體II或II’的摩爾比值優(yōu)選1～8，進一步優(yōu)選2～4。當所述的還原劑為水合肼時，所述的還原劑與所述的花生膽酸中間體II或II’的摩爾比值優(yōu)選2～3，例如2.3；當所述的還原劑為甲胺時，所述的還原劑與所述的花生膽酸中間體II或II’的摩爾比值優(yōu)選2.5～3.5，例如3.0；
在所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的還原反應(yīng)的溫度優(yōu)選0～40℃，進一步優(yōu)選15℃～25℃。
在所述的花生膽酸中間體I的制備方法中，所述的還原反應(yīng)的進程可以采用本領(lǐng)中的常規(guī)監(jiān)測方法(例如TLC、示差檢測或NMR)進行監(jiān)測，一般以所述的花生膽酸中間體II或II’消失時為反應(yīng)的終點，所述的還原反應(yīng)的時間優(yōu)選1小時～24小時，進一步優(yōu)選5小時～10小時，例如8小時。
所述的花生膽酸中間體I的制備方法優(yōu)選采用以下步驟：將還原劑加入到所述的花生膽酸中間體II或II’與有機溶劑形成的溶液中，進行還原反應(yīng)得到花生膽酸中間體I。所述的加入的方式優(yōu)選滴加；所述的滴加的速度以反應(yīng)體系的溫度不超過25℃為準。
所述的花生膽酸中間體I的制備方法優(yōu)選采用以下后處理步驟：反應(yīng)結(jié)束后除去有機溶劑、萃取、洗滌、干燥得到花生膽酸中間體I粗品。所述的除去有機溶劑、萃取、洗滌和干燥可以采用本領(lǐng)域中該類操作的常規(guī)方法。所述的除去有機溶劑優(yōu)選減壓濃縮的方式。所述的萃取采用的溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑；所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑；所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的萃取的次數(shù)優(yōu)選1次～3次，例如2次。所述的洗滌優(yōu)選采用食鹽水洗滌；所述的食鹽水的質(zhì)量濃度優(yōu)選10％，所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比。所述的洗滌的次數(shù)優(yōu)選1次～3次，例如2次。所述的干燥優(yōu)選采用干燥劑干燥，所述的干燥劑優(yōu)選無水硫酸鈉和/或無水硫酸鎂。
所述的花生膽酸中間體I粗品優(yōu)選經(jīng)過重結(jié)晶得到純化后的花生膽酸中間體I。所述的重結(jié)晶可以采用本領(lǐng)域中該類操作的常規(guī)方法。所述的重結(jié)晶的溶劑優(yōu)選酯類溶劑；所述的酯類溶劑優(yōu)選乙酸乙酯。
所述的純化后的花生膽酸中間體I的純度(示差折光檢測器檢測)大于98.00％，例如98.78％、98.82％、98.21％或98.43％。
所述的花生膽酸中間體I的制備方法優(yōu)選還包括以下步驟：有機溶劑中，催化劑和活化劑存在的條件下，將膽酸甲酯中間體III與鄰苯二甲酰亞胺或者丁二酰亞胺進行Mitsunobu反應(yīng)，得到所述的花生膽酸中間體II或II’即可，當膽酸甲酯中間體III與鄰苯二甲酰亞胺反應(yīng)時，得到的是所述的花生膽酸中間體II；當膽酸甲酯中間體III與丁二酰亞胺反應(yīng)時，得到的是所述的花生膽酸中間體II’；所述的催化劑為R3P，所述的活化劑為R2OOC-N＝N-COOR1，其中，R為C5～C10芳基(優(yōu)選苯基)或C3～C6環(huán)烷基(優(yōu)選環(huán)己基)，R1為C1～C4烷基(優(yōu)選乙基或異丙基)，R2為C1～C4烷基(優(yōu)選乙基或異丙基)；
所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法，可以為本領(lǐng)域中該類Mitsunobu反應(yīng)的常規(guī)方法，本發(fā)明中特別優(yōu)選以下反應(yīng)條件：
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的有機溶劑優(yōu)選脂肪族醚類溶劑；所述的脂肪族醚類溶劑優(yōu)選C1～C6醚溶劑；所述的C1～C6醚溶劑優(yōu)選四氫呋喃和/或異丙醚。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的有機溶劑與所述的膽酸甲酯中間體III的體積質(zhì)量比值優(yōu)選1mL/g～100mL/g，進一步優(yōu)選2mL/g～10mL/g，例如5.7mL/g或7.8mL/g；
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的催化劑優(yōu)選三苯基膦和/或三環(huán)己基膦。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的催化劑與所述的膽酸甲酯中間體III的摩爾比值優(yōu)選0.5～3，進一步優(yōu)選0.5～1.5，例如1.1或0.55。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的活化劑優(yōu)選偶氮二甲酸二乙酯和/或偶氮二甲酸異丙酯。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的活化劑與所述的膽酸甲酯中間體III的摩爾比值優(yōu)選1～3，進一步優(yōu)選1.1～1.5，例如1.2。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的鄰苯二甲酰亞胺或者丁二酰亞胺與所述的膽酸甲酯中間體III的摩爾比值優(yōu)選1～3，例如1.0或1.2。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的Mitsunobu反應(yīng)的溫度優(yōu)選0～40℃，進一步優(yōu)選10℃～20℃。
在所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法中，所述的Mitsunobu反應(yīng)的進程可以采用本領(lǐng)域中的常規(guī)監(jiān)測方法(例如TLC、示差檢測或NMR)進行監(jiān)測，一般以膽酸甲酯中間體III消失時為反應(yīng)的終點，所述的Mitsunobu反應(yīng)的時間優(yōu)選5小時～24小時，進一步優(yōu)選10小時～20小時，例如16小時。
所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法優(yōu)選采用以下步驟：0～5℃下，向膽酸甲酯中間體III與有機溶劑形成的混合物中加入活化劑；加完，再加入鄰苯二甲酰亞胺或者丁二酰亞胺；加完，再分批加入催化劑，加完在0℃～40℃(優(yōu)選10℃～20℃)進行Mitsunobu反應(yīng)，得到所述的花生膽酸中間體II或II’即可。所述的分批加入的速度以維持體系溫度不超過5℃為準。
所述的花生膽酸中間體II或II’的制備方法優(yōu)選包括以下后處理步驟：反應(yīng)結(jié)束后，除去溶劑、萃取、洗滌、干燥、重結(jié)晶得到花生膽酸中間體II或II’。所述的除去溶劑、萃取、洗滌、干燥和重結(jié)晶可以采用本領(lǐng)域中該類操作的常規(guī)方法。所述的除去溶劑優(yōu)選采用減壓濃縮的方式。所述的萃取采用的溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑；所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的萃取的次數(shù)優(yōu)選1次～3次。所述的洗滌優(yōu)選依次采用亞硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液和食鹽水進行洗滌。所述的亞硫酸鈉水溶液的質(zhì)量濃度優(yōu)選1％～10％，例如5％，所述的質(zhì)量濃度是指亞硫酸鈉的質(zhì)量占亞硫酸鈉水溶液總質(zhì)量的百分比。所述的碳酸氫鈉水溶液的質(zhì)量濃度優(yōu)選1％～10％，例如7％，所述的質(zhì)量濃度是指碳酸氫鈉的質(zhì)量占碳酸氫鈉水溶液總質(zhì)量的百分比。所述的食鹽水的質(zhì)量濃度優(yōu)選1％～20％，例如10％，所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比。所述的洗滌的次數(shù)優(yōu)選各1次～3次，例如2次。所述的干燥優(yōu)選采用干燥劑進行干燥，所述的干燥劑優(yōu)選無水硫酸鈉和/或無水硫酸鎂。所述的重結(jié)晶采用的溶劑優(yōu)選烷烴類溶劑和/或酯類溶劑。所述的烷烴類溶劑優(yōu)選正庚烷；所述的酯類溶劑優(yōu)選乙酸乙酯。當采用烷烴類溶劑與酯類溶劑的混合溶劑時，所述的烷烴類溶劑與酯類溶劑的混合溶劑優(yōu)選乙酸乙酯與正庚烷的混合溶劑。所述的烷烴類溶劑與酯類溶劑的混合溶劑中所述的烷烴類溶劑與所述的酯類溶劑的體積比值優(yōu)選1～10，例如1。
所述的花生膽酸中間體I的制備方法優(yōu)選采用以下制備路線：
本發(fā)明還提供了一種花生膽酸中間體V的制備方法，其包括以下步驟：按照上述方法制得花生膽酸中間體I之后，再在有機溶劑中，將所述的花生膽酸中間體I在堿存在的條件下，進行水解反應(yīng)，然后與酸進行酸化反應(yīng)，得到所述的花生膽酸中間體V即可；
所述的花生膽酸中間體V的制備方法可以為本領(lǐng)域中該類水解反應(yīng)的常規(guī)方法，本發(fā)明中特別優(yōu)選以下反應(yīng)方法和條件：
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的有機溶劑優(yōu)選醇類溶劑；所述的醇類溶劑優(yōu)選甲醇。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的有機溶劑與所述的花生膽酸中間體I的體積質(zhì)量比值優(yōu)選1mL/g～100mL/g，進一步優(yōu)選2mL/g～20mL/g，例如3.1mL/g。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的堿優(yōu)選無機堿；所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉。所述的無機堿可以以其水溶液的形式使用，當所述的無機堿以其水溶液的形式使用時，無機堿水溶液的濃度優(yōu)選1mol/L～3mol/L，例如1mol/L。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的堿與所述的花生膽酸中間體I的摩爾比值優(yōu)選1～1.5，例如1.3。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的酸優(yōu)選無機酸；所述的無機酸優(yōu)選鹽酸。所述的鹽酸可以為常規(guī)市售鹽酸試劑。所述的無機酸優(yōu)選以其水溶液的形式使用。當所述的無機酸以其水溶液的形式使用時，所述的無機酸水溶液的濃度優(yōu)選1mol/L～3mol/L，例如1mol/L。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的酸與所述的花生膽酸中間體I的摩爾比值優(yōu)選1～2，例如1.6。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的水解反應(yīng)的溫度優(yōu)選10℃～60℃，進一步優(yōu)選30℃～50℃，例如40℃～45℃。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的水解反應(yīng)的進程可以采用本領(lǐng)域中常規(guī)監(jiān)測方法(例如TLC、示差檢測或NMR)進行監(jiān)測，一般以所述的花生膽酸中間體I消失時為反應(yīng)的終點，所述的水解反應(yīng)的時間優(yōu)選1小時～10小時，進一步優(yōu)化2小時～6小時，例如3小時。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的酸化反應(yīng)的溫度優(yōu)選0℃～40℃，進一步優(yōu)選10℃～30℃，例如15℃～20℃。
在所述的花生膽酸中間體V的制備方法中，所述的酸化反應(yīng)的時間優(yōu)選1小時～10小時，進一步優(yōu)選1小時～6小時，例如1小時。
所述的花生膽酸中間體V的制備方法，優(yōu)選采用以下步驟：將無機堿水溶液加入到所述的花生膽酸中間體I與有機溶劑形成的混合物中，進行水解反應(yīng)，然后加入無機酸水溶液(優(yōu)選0～40℃)，進行酸化反應(yīng)，得到花生膽酸中間體V即可。所述的加入的方式優(yōu)選滴加，滴加無機堿水溶液的速度以維持體系溫度不超過45℃為準；滴加無機酸水溶液的速度以維持體系溫度不超過20℃為準。
所述的花生膽酸中間體V的制備方法，優(yōu)選采用以下后處理步驟：反應(yīng)結(jié)束后，過濾、洗滌、干燥得到花生膽酸中間體V。所述的過濾、洗滌和干燥可以采用本領(lǐng)域中該類操作的常規(guī)方法。所述的洗滌優(yōu)選依次采用水進行洗滌。所述的洗滌的次數(shù)優(yōu)選1次～3次，例如2次。所述的干燥優(yōu)選真空干燥，所述的真空干燥的溫度優(yōu)選40℃～50℃；所述的真空干燥的溫度壓強優(yōu)選0.08MPa～-0.1MPa；所述的真空干燥的時間優(yōu)選3小時～5小時。
所述的花生膽酸中間體V的制備方法優(yōu)選采用以下合成路線：
本發(fā)明還提供了一種花生膽酸IV的制備方法，其包括以下步驟：有機溶劑中，堿存在的條件下，將按照上述方法制得的花生膽酸中間體V與花生酰氯進行縮合反應(yīng)，得到花生膽酸IV即可；
所述的花生膽酸IV的制備方法可以為本領(lǐng)域中該類縮合反應(yīng)的常規(guī)方法，本發(fā)明中特別優(yōu)選以下反應(yīng)方法和條件：
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的有機溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑；所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑；所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的有機溶劑與所述的花生膽酸中間體V的體積質(zhì)量比值優(yōu)選1mL/g～100mL/g，進一步優(yōu)選2mL/g～20mL/g，例如12.2mL/g。
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的堿優(yōu)選有機堿；所述的有機堿優(yōu)選三乙胺。
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的堿與所述的花生膽酸中間體V的摩爾比值優(yōu)選1～5，例如3。
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的花生酰氯與所述的花生膽酸中間體I的摩爾比值優(yōu)選1～2，例如1。
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的縮合反應(yīng)的溫度優(yōu)選0℃～30℃，進一步優(yōu)選5℃～25℃，例如10℃～20℃。
在所述的花生膽酸IV的制備方法中，所述的縮合反應(yīng)的進程可以采用本領(lǐng)域中常規(guī)監(jiān)測方法(例如TLC、示差檢測或NMR)進行監(jiān)測，一般以所述的花生膽酸中間體V消失時為反應(yīng)的終點，所述的縮合反應(yīng)的時間優(yōu)選8小時～24小時，進一步優(yōu)選10小時～20小時，例如16小時。
所述的花生膽酸IV的制備方法，優(yōu)選采用以下步驟：向按照上述方法制得的花生膽酸中間體V與有機溶劑形成的混合物中依次加入堿和花生酰氯，進行縮合反應(yīng)，得到所述的花生膽酸IV即可。所述的加入的方式優(yōu)選滴加，滴加的速度以維持體系溫度不超過10℃為準。
所述的花生膽酸IV的制備方法，優(yōu)選采用以下后處理步驟：反應(yīng)結(jié)束后，冷卻、萃取、洗滌、干燥、過濾、濃縮，得到粗品花生膽酸IV。所述的除去冷卻、萃取、洗滌、干燥、過濾、濃縮和重結(jié)晶可以采用本領(lǐng)域中該類操作的常規(guī)方法。所述的冷卻的溫度優(yōu)選0～10℃。所述的萃取采用的溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑；所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的萃取的次數(shù)優(yōu)選1次～3次，例如1次。所述的洗滌優(yōu)選采用飽和食鹽水洗滌。所述的洗滌的次數(shù)優(yōu)選1次～3次，例如2次。所述的干燥優(yōu)選真空干燥，所述的真空干燥的溫度優(yōu)選40℃～50℃；所述的真空干燥的溫度壓強優(yōu)選0.08MPa～-0.1MPa；所述的真空干燥的時間優(yōu)選3小時～5小時。
所述的粗品花生膽酸IV優(yōu)選重結(jié)晶得到花生膽酸IV。所述的重結(jié)晶采用的溶劑優(yōu)選酮類溶劑。所述的酮類溶劑優(yōu)選丙酮。
所述的花生膽酸IV的制備方法優(yōu)選采用以下合成路線：
在不違背本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實例。
本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
本發(fā)明中，所述的室溫是指環(huán)境溫度，為10℃～35℃。
本發(fā)明的積極進步效果在于：本發(fā)明的制備方法以市售的化工產(chǎn)品膽酸甲酯為起始原料，僅需要兩步就可以制得花生膽酸中間體I，反應(yīng)路線短，總收率高(高達76％)，制得的產(chǎn)品純度高(示差檢測純度高于98.00％)，并且避免了使用劇毒品疊氮化鈉和催化氫化的條件，操作安全，生產(chǎn)成本低、環(huán)境友好，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。花生膽酸中間體I可以用常規(guī)的方法制備得到花生膽酸，純度大于99.80％(示差檢測)，單雜小于0.10％，達到原料藥標準。
具體實施方式
下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規(guī)方法和條件，或按照商品說明書選擇。
實施例1
將膽酸甲酯中間體III 1200g，溶于四氫呋喃6800mL中，冷卻到0～5℃，再加入偶氮二甲酸二乙酯590g，再加入鄰苯二甲酰亞胺430g。攪拌下分批加入三苯基膦800g，加完后在10～20℃攪拌16小時，加入水10L，減壓濃縮去除四氫呋喃，用二氯甲烷5L萃取三次，用質(zhì)量濃度5％亞硫酸鈉(所述的質(zhì)量濃度是指亞硫酸鈉的質(zhì)量占亞硫酸鈉水溶液總質(zhì)量的百分比)、質(zhì)量濃度7％碳酸氫鈉(所述的質(zhì)量濃度是指碳酸氫鈉的質(zhì)量占碳酸氫鈉水溶液總質(zhì)量的百分比)、質(zhì)量濃度10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)各洗滌兩次，用無水硫酸鈉干燥后濃縮得到淺黃色固體。再用乙酸乙酯4.2L和正庚烷4.2L混合溶劑重結(jié)晶，得到花生膽酸中間體II為類白色固體1302g，產(chǎn)率83.0％，純度97.71％(示差折光檢測器檢測)。
實施例2
將膽酸甲酯中間體III 60g，溶于異丙醚470mL中，冷卻到0～5℃，再加入偶氮二甲酸二異丙酯34g，再加入丁二酰亞胺17g。攪拌下分批加入三環(huán)已基膦22g，加完后在10℃～20℃攪拌16小時，加入水500mL，減壓濃縮去除異丙醚，用二氯甲烷250mL萃取三次，用質(zhì)量濃度5％亞硫酸鈉(所述的質(zhì)量濃度是指亞硫酸鈉的質(zhì)量占亞硫酸鈉水溶液總質(zhì)量的百分比)、質(zhì)量濃度7％碳酸氫鈉(所述的質(zhì)量濃度是指碳酸氫鈉的質(zhì)量占碳酸氫鈉水溶液總質(zhì)量的百分比)、質(zhì)量濃度10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌各兩次，用無水硫酸鈉干燥后濃縮得到淺黃色固體。再用乙酸乙酯240mL和正庚烷240mL混合溶劑重結(jié)晶，得到花生膽酸中間體II’為類白色固體55.4g，產(chǎn)率77.5％，純度97.46％(示差折光檢測器檢測)。
實施例3
將花生膽酸中間體II 1250g(純度97.71％，示差折光檢測器檢測)，溶于四氫呋喃2500mL和甲醇2500mL中，再加入質(zhì)量濃度為40％水合肼620mL(所述的質(zhì)量濃度是指肼的質(zhì)量占水合肼總質(zhì)量的百分比)，加完后在15℃～25℃攪拌8小時，加入水5L，減壓濃縮去除四氫呋喃和甲醇，用二氯甲烷4L萃取兩次，質(zhì)量濃度為10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌兩次，用無水硫酸鈉干燥后濃縮得到淺黃色固體。再用乙酸乙酯3.9L重結(jié)晶，得到花生膽酸中間體I為類白色固體875g，產(chǎn)率91.6％，純度98.78％(示差折光檢測器檢測)。
實施例4
將花生膽酸中間體II 10g(純度97.71％，示差折光檢測器檢測)，溶于四氫呋喃20mL和甲醇20mL中，再加入質(zhì)量濃度為60％水合肼3.3mL(所述的質(zhì)量濃度是指肼的質(zhì)量占水合肼總質(zhì)量的百分比)，加完后在15℃～25℃攪拌8小時，加入水40mL，減壓濃縮去除四氫呋喃和甲醇，用二氯甲烷40mL萃取兩次，質(zhì)量濃度為10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌各兩次，用無水硫酸鈉干燥后濃縮得到淺黃色固體。再用乙酸乙酯35mL重結(jié)晶，得到花生膽酸中間體I為類白色固體6.95g，產(chǎn)率90.9％，純度98.82％(示差折光檢測器檢測)。
實施例5
將花生膽酸中間體II’42g(純度97.46％，示差折光檢測器檢測)，溶于異丙醚126mL和乙醇126mL中，再加入質(zhì)量濃度為30％甲胺水溶液28mL(所述的質(zhì)量濃度是指甲胺的質(zhì)量占甲胺水溶液總質(zhì)量的百分比)，加完后在15℃～25℃攪拌8小時，加入水180mL，減壓濃縮去除異丙醚和乙醇，用二氯甲烷180mL萃取兩次，質(zhì)量濃度為10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌兩次，用無水硫酸鈉干燥后濃縮得到淺黃色固體。再用乙酸乙酯140mL重結(jié)晶，得到花生膽酸中間體I為類白色固體31.6g，產(chǎn)率89.8％，純度98.21％(示差折光檢測器檢測)。
實施例6
將花生膽酸中間體II’10g(純度97.46％，示差折光檢測器檢測)，溶于異丙醚30mL和乙醇30mL中，再加入質(zhì)量濃度為40％甲胺水溶液5mL(所述的質(zhì)量濃度是指甲胺的質(zhì)量占甲胺水溶液總質(zhì)量的百分比)，加完后在15℃～25℃攪拌8小時，加入水45mL，減壓濃縮去除異丙醚和乙醇，用二氯甲烷45mL萃取兩次，質(zhì)量濃度為10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌兩次，用無水硫酸鈉干燥后濃縮得到淺黃色固體。再用乙酸乙酯35mL重結(jié)晶，得到花生膽酸中間體I為類白色固體7.22g，產(chǎn)率86.2％，純度98.43％(示差折光檢測器檢測)。
實施例7
1mol/L氫氧化鈉水溶液2.6L逐滴加入到花生膽酸中間體I 842g(純度98.21％，示差折光檢測器檢測)于甲醇2.6L溶液中，然后加熱至40℃～45℃，攪拌3小時，該混合物濃縮至3.0L并加入7L水。然后用二氯甲烷2.4L提取兩次，水溶液濃縮至4L，加入1mol/L鹽酸3.1L并在15～20℃攪拌1小時。過濾，用水2L洗滌兩次和真空干燥(40℃～50℃，0.08MPa～-0.1MPa，3小時～5小時)得到花生膽酸中間體V為類白色固體696g，產(chǎn)率85.5％，純度98.65％(示差折光檢測器檢測)。
實施例8
花生膽酸中間體V 410g(純度98.65％，示差折光檢測器檢測)溶于二氯甲烷5L，冷卻0～10℃，依次加入三乙胺303g和花生酰氯(由花生酸和二氯亞砜回流并濃縮干得到)330g，反應(yīng)混合物在10℃～20℃連續(xù)攪拌16小時，冷卻0～10℃，加入二氯甲烷1L和冰水1L混合物，攪拌均勻，靜置分層。有機層分出，水層用1L二氯甲烷萃取一次，合并有機相并用1L飽和食鹽水洗滌、真空干燥(40℃～50℃，0.08MPa～-0.1MPa，3小時～5小時)、過濾、真空濃縮。粗品用丙酮重結(jié)晶得到花生膽酸IV為白色固體560g，產(chǎn)率79.2％，純度99.90％(示差折光檢測器檢測)、最大單一雜質(zhì)0.036％。
對比實施例1：(參考文獻Roberts，Gina M.；Zhang，Shiyong；Zhao，Yan；Woo，L.Keith；Tetrahedron；vol.71；nb.43；2015；p.8263-8270以及Denike；Moskova；Zhu；Chemistry and Physics of Lipids；vol.77；nb.2；1995；p.261-267)
將膽酸甲酯中間體III 16.0g，溶于二氯甲烷130mL中，加入11.4g三乙胺，攪拌下冷卻到0～5℃，滴加入8.7g甲磺酰氯，滴完后在10～20℃下攪拌3～4小時。反應(yīng)液倒入二氯甲烷和質(zhì)量濃度為1％稀鹽酸(所述的質(zhì)量濃度是指氯化氫的質(zhì)量占鹽酸溶液總質(zhì)量的百分比)混合體系中淬滅，靜置分層，有機相依次用質(zhì)量濃度為1％稀鹽酸、質(zhì)量濃度為5％碳酸氫鈉水溶液(所述的質(zhì)量濃度是指碳酸氫鈉的質(zhì)量占碳酸氫鈉溶液總質(zhì)量的百分比)、質(zhì)量濃度為10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌，無水硫酸鈉干燥。真空減壓濃縮得到黃色泡沫狀物15.8g。將該黃色泡沫狀物溶于N，N-二甲基甲酰胺100mL，再加入疊氮鈉10.6g，加熱至65℃攪拌7～8小時。冷卻到0～5℃，過濾，母液加入質(zhì)量濃度為5％碳酸氫鈉水溶液(所述的質(zhì)量濃度是指碳酸氫鈉的質(zhì)量占碳酸氫鈉溶液總質(zhì)量的百分比)1L，用二氯甲烷萃取，合并有機相，用質(zhì)量濃度為5％碳酸氫鈉水溶液(所述的質(zhì)量濃度是指碳酸氫鈉的質(zhì)量占碳酸氫鈉溶液總質(zhì)量的百分比)、質(zhì)量濃度為10％食鹽水(所述的質(zhì)量濃度是指氯化鈉的質(zhì)量占食鹽水總質(zhì)量的百分比)洗滌，無水硫酸鈉干燥。真空減壓濃縮去除大部分溶劑得到黃色粘稠油狀物32.5g(含有一定數(shù)量的殘留溶劑)。將物料用甲醇100mL溶解，小心的倒入裝有7％鈀碳催化劑0.81g的氫化釜中，在5個大氣壓和45℃下氫化6小時。冷卻到20～25℃，過濾去除鈀碳催化劑，母液真空減壓濃縮得到淺黃色泡沫狀物13.3g，再用乙酸乙酯62mL/50mL重結(jié)晶兩次，得到花生膽酸中間體I為類白色至淺黃色固體7.59g，產(chǎn)率47.6％(以膽酸甲酯中間體III計)，純度97.29％(示差折光檢測器檢測)。