本發(fā)明涉及干細(xì)胞培養(yǎng)基技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源于臍帶華通膠，是具有明顯可塑性和多向分化潛能的一種成體干細(xì)胞，在不同生長(zhǎng)因子的調(diào)節(jié)下，可分化成來(lái)源與3個(gè)胚層的不同組織細(xì)胞類(lèi)型，如脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、肝樣細(xì)胞、心肌樣細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞等。
現(xiàn)有技術(shù)中的干細(xì)胞培養(yǎng)基往往采用胎牛血清，由于使用動(dòng)物源的胎牛血清，導(dǎo)致干細(xì)胞培養(yǎng)基中摻入非人源物質(zhì)，造成殘留或者污染，而且現(xiàn)有的干細(xì)胞培養(yǎng)基存在細(xì)胞貼壁性差，細(xì)胞增殖速度不夠理想等問(wèn)題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，無(wú)動(dòng)物源成分，不會(huì)造成殘留或者污染，細(xì)胞貼壁性好，增殖速度快，提高培養(yǎng)基的抗病原微生物作用，同時(shí)降低了培養(yǎng)基成本。
本發(fā)明提出的一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，包括：DMEM培養(yǎng)基，羥乙基淀粉，人血清白蛋白，氯化鉀，亞硒酸鈉，轉(zhuǎn)鐵蛋白，谷胱甘肽，成纖維細(xì)胞因子，人胰島素生長(zhǎng)因子，輔酶I，硫辛酸，維生素，抗生素，黃芪多糖，黃精多糖，大棗提取物。
優(yōu)選地，羥乙基淀粉的濃度為1.5～2g/L，人血清白蛋白的濃度為1.8～2.3g/L，氯化鉀的濃度為0.6～1.1g/L，亞硒酸鈉的濃度為0.2～0.5μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為50～100mg/L，谷胱甘肽的濃度為50～80mg/L，成纖維細(xì)胞因子的濃度為10～20μg/L，人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為15～25mg/L，輔酶I的濃度為80～200μg/L，硫辛酸的濃度為15～25mg/L，維生素的濃度為50～100mg/L，抗生素的濃度為2～8g/L，黃芪多糖的濃度為20～40mg/L，黃精多糖的濃度為30～60mg/L，大棗提取物的濃度為40～80mg/L。
優(yōu)選地，抗生素按重量份包括：慶大霉素2～3份，青霉素4～5份，鏈霉素1～2份。
優(yōu)選地，維生素按重量份包括：維生素A 5～8份，維生素E 9～12份，維生素B族13～16份，維生素C 12～15份。
優(yōu)選地，維生素B族為硫胺素、核黃素、煙酸、泛酸、吡哆醇、氰鈷胺、葉酸、生物素中的一種或兩種以上組合物。
優(yōu)選地，羥乙基淀粉、人血清白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、成纖維細(xì)胞因子、人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為1.6×106～1.8×106：1.9×106～2.1×106：6×104～8×104：12～18：1.8×104～2.2×104。
優(yōu)選地，黃芪多糖、黃精多糖、大棗提取物的濃度比為25～35：40～50：50～70。
優(yōu)選地，羥乙基淀粉的濃度為1.6～1.8g/L，人血清白蛋白的濃度為1.9～2.1g/L，氯化鉀的濃度為0.8～1g/L，亞硒酸鈉的濃度為0.3～0.4μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為60～80mg/L，谷胱甘肽的濃度為60～70mg/L，成纖維細(xì)胞因子的濃度為12～18μg/L，人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為18～22mg/L，輔酶I的濃度為120～160mg/L，硫辛酸的濃度為17～23mg/L，維生素的濃度為70～90mg/L，抗生素的濃度為4～6g/L，黃芪多糖的濃度為25～35mg/L，黃精多糖的濃度為40～50mg/L，大棗提取物的濃度為50～70mg/L。
本發(fā)明采用DMEM培養(yǎng)基、羥乙基淀粉、人血清白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、谷胱甘肽、成纖維細(xì)胞因子、人胰島素生長(zhǎng)因子、輔酶I、硫辛酸和維生素相互配合，能滋養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞保持細(xì)胞的活性；其中DMEM培養(yǎng)基、羥乙基淀粉、人血清白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硫辛酸和維生素為間充質(zhì)干細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)成分；而谷胱甘肽、輔酶I、硫辛酸和維生素相互配合，可以清理細(xì)胞內(nèi)自由基，保護(hù)許多蛋白質(zhì)和酶等分子中的巰基，有利于酶活性的發(fā)揮，并且能恢復(fù)已被破壞的酶分子中-SH基的活性功能，使酶重新恢復(fù)活性，降低細(xì)胞發(fā)生凋亡的概率；成纖維細(xì)胞因子、人胰島素生長(zhǎng)因子能使間充質(zhì)干細(xì)胞在增殖的過(guò)程中進(jìn)行緩慢修復(fù)，維持細(xì)胞活性；羥乙基淀粉、人血清白蛋白、氯化鉀、亞硒酸鈉、轉(zhuǎn)鐵蛋白、谷胱甘肽相互配合，維持細(xì)胞的滲透平衡，抗生素可以對(duì)可能發(fā)生的污染進(jìn)行預(yù)防或者提示已經(jīng)發(fā)生的污染；同時(shí)大棗提取物、黃精多糖、黃芪多糖相互配合，替代特殊抗體因子，增強(qiáng)細(xì)胞的新陳代謝，促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞快速大量增殖，還能提高培養(yǎng)基的抗病原微生物作用，同時(shí)降低了培養(yǎng)基成本。
本發(fā)明培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，使間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁率達(dá)到90％以上，死細(xì)胞較少，大大提高了細(xì)胞的數(shù)量。本發(fā)明培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)至平臺(tái)期需要49～52h，而現(xiàn)有技術(shù)中的培養(yǎng)基最快需要54h，常規(guī)干細(xì)胞培養(yǎng)基則需要至少66h，由此可知本發(fā)明能夠提高間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)速率。同時(shí)本發(fā)明經(jīng)流式細(xì)胞表型檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明所得間充質(zhì)干細(xì)胞與常規(guī)培養(yǎng)基所得間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞表型無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
具體實(shí)施方式
下面，通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
實(shí)施例1
本發(fā)明提出的一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，包括：DMEM培養(yǎng)基，羥乙基淀粉，人血清白蛋白，氯化鉀，亞硒酸鈉，轉(zhuǎn)鐵蛋白，谷胱甘肽，成纖維細(xì)胞因子，人胰島素生長(zhǎng)因子，輔酶I，硫辛酸，維生素，抗生素，黃芪多糖，黃精多糖，大棗提取物。
實(shí)施例2
本發(fā)明提出的一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，包括：DMEM培養(yǎng)基，羥乙基淀粉，人血清白蛋白，氯化鉀，亞硒酸鈉，轉(zhuǎn)鐵蛋白，谷胱甘肽，成纖維細(xì)胞因子，人胰島素生長(zhǎng)因子，輔酶I，硫辛酸，維生素，抗生素，黃芪多糖，黃精多糖，大棗提取物。
其中，羥乙基淀粉的濃度為1.5g/L，人血清白蛋白的濃度為2.3g/L，氯化鉀的濃度為0.6g/L，亞硒酸鈉的濃度為0.5μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為50mg/L，谷胱甘肽的濃度為80mg/L，成纖維細(xì)胞因子的濃度為10μg/L，人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為25mg/L，輔酶I的濃度為80μg/L，硫辛酸的濃度為25mg/L，維生素的濃度為50mg/L，抗生素的濃度為8g/L，黃芪多糖的濃度為20mg/L，黃精多糖的濃度為60mg/L，大棗提取物的濃度為40mg/L。
實(shí)施例3
本發(fā)明提出的一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，包括：DMEM培養(yǎng)基，羥乙基淀粉，人血清白蛋白，氯化鉀，亞硒酸鈉，轉(zhuǎn)鐵蛋白，谷胱甘肽，成纖維細(xì)胞因子，人胰島素生長(zhǎng)因子，輔酶I，硫辛酸，維生素，抗生素，黃芪多糖，黃精多糖，大棗提取物。
其中，羥乙基淀粉的濃度為2g/L，人血清白蛋白的濃度為1.8g/L，氯化鉀的濃度為1.1g/L，亞硒酸鈉的濃度為0.2μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為100mg/L，谷胱甘肽的濃度為50mg/L，成纖維細(xì)胞因子的濃度為20μg/L，人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為15mg/L，輔酶I的濃度為200μg/L，硫辛酸的濃度為15mg/L，維生素的濃度為100mg/L，抗生素的濃度為2g/L，黃芪多糖的濃度為40mg/L，黃精多糖的濃度為30mg/L，大棗提取物的濃度為80mg/L。
抗生素按重量份包括：慶大霉素2份，青霉素5份，鏈霉素1份。
維生素按重量份包括：維生素A 8份，維生素E 9份，維生素B族16份，維生素C 12份。維生素B族為硫胺素、核黃素、煙酸、泛酸、吡哆醇、氰鈷胺、葉酸、生物素的組合物。
實(shí)施例4
本發(fā)明提出的一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，包括：DMEM培養(yǎng)基，羥乙基淀粉，人血清白蛋白，氯化鉀，亞硒酸鈉，轉(zhuǎn)鐵蛋白，谷胱甘肽，成纖維細(xì)胞因子，人胰島素生長(zhǎng)因子，輔酶I，硫辛酸，維生素，抗生素，黃芪多糖，黃精多糖，大棗提取物。
其中，羥乙基淀粉的濃度為1.6g/L，人血清白蛋白的濃度為2.1g/L，氯化鉀的濃度為0.8g/L，亞硒酸鈉的濃度為0.4μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為60mg/L，谷胱甘肽的濃度為70mg/L，成纖維細(xì)胞因子的濃度為12μg/L，人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為22mg/L，輔酶I的濃度為120mg/L，硫辛酸的濃度為23mg/L，維生素的濃度為70mg/L，抗生素的濃度為6g/L，黃芪多糖的濃度為25mg/L，黃精多糖的濃度為50mg/L，大棗提取物的濃度為50mg/L。
抗生素按重量份包括：慶大霉素3份，青霉素4份，鏈霉素2份。
維生素按重量份包括：維生素A 5份，維生素E 12份，維生素B族13份，維生素C 15份。維生素B族為吡哆醇、氰鈷胺、葉酸、生物素的組合物。
實(shí)施例5
本發(fā)明提出的一種間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，包括：DMEM培養(yǎng)基，羥乙基淀粉，人血清白蛋白，氯化鉀，亞硒酸鈉，轉(zhuǎn)鐵蛋白，谷胱甘肽，成纖維細(xì)胞因子，人胰島素生長(zhǎng)因子，輔酶I，硫辛酸，維生素，抗生素，黃芪多糖，黃精多糖，大棗提取物。
其中，羥乙基淀粉的濃度為1.8g/L，人血清白蛋白的濃度為1.9g/L，氯化鉀的濃度為1g/L，亞硒酸鈉的濃度為0.3μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為80mg/L，谷胱甘肽的濃度為60mg/L，成纖維細(xì)胞因子的濃度為18μg/L，人胰島素生長(zhǎng)因子的濃度為18mg/L，輔酶I的濃度為160mg/L，硫辛酸的濃度為17mg/L，維生素的濃度為90mg/L，抗生素的濃度為4g/L，黃芪多糖的濃度為35mg/L，黃精多糖的濃度為40mg/L，大棗提取物的濃度為70mg/L。
抗生素按重量份包括：慶大霉素2.5份，青霉素4.5份，鏈霉素1.5份。
維生素按重量份包括：維生素A 7份，維生素E 11份，維生素B族15份，維生素C 13份。維生素B族為硫胺素、核黃素、煙酸、泛酸的組合物。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。