1.一種玻璃酸酶的制備方法,其特征在于具體操作步驟為:
(1)選取3~5個豬睪丸,放入清水中,反復搓洗,去除表層殘留污物后,剝?nèi)?nèi)外皮層及副睪丸,待處理結束,用注射器抽取質(zhì)量濃度為60%碳酸氫鈉溶液,緩慢注入處理后的豬睪丸中,其中每個豬睪丸中注射量為7~9mL,待注射結束,將注射后的豬睪丸放置在蒸爐中,在85~95℃下蒸煮35~45min,隨后將煮后的豬睪丸取出放于菠蘿篩中,自然冷卻至室溫后,倒入絞碎機中,絞成糜漿;
(2)稱取500~600g無霉斑、無病蟲害、無腐爛的白蘿卜,用清水洗凈外皮殘留污泥后,用刀將其均勻切成條狀,放入轉速為250r/min的離心機中進行甩干操作,直至蘿卜表面無自然滴水,隨后將甩干后的蘿卜條放于發(fā)酵罐中,并向其中加入質(zhì)量濃度為37%氯化鈉溶液,直至完全浸沒蘿卜條為止,之后在80~90℃下密封發(fā)酵8~12天,待發(fā)酵結束,提升發(fā)酵溫度為85~95℃,再次密封發(fā)酵5~7天,得發(fā)酵混合物,隨后將得到的發(fā)酵混合物放入高速離心機中,在1200~1300r/min的轉速下離心處理20~25min,去渣留液,得發(fā)酵液;
(3)將上述得到的發(fā)酵液放入容器中,并向其中加入上述步驟(1)制得的豬睪丸糜漿,充分混合均勻,用紗布遮蓋,在溫度為25~32℃,空氣相對濕度為65~68%下自行發(fā)霉,當混合物變質(zhì)產(chǎn)生霉菌時,選取濃度為1.5mol/L的亞硫酸鈉溶液,調(diào)節(jié)pH值為5.7~6.3,每隔一天對霉菌進行1~3次淋洗,直至混合物表層長出一層3~5cm的青褐色菌絲;
(4)用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液沖洗上述長出的青褐色菌絲2~4次,收集沖洗后的混合液,得到菌絲懸浮液,置于微波提取裝置中,在溫度30~40℃,功率為50~60W下進行微波提取45~55min,隨后將混合物放入離心機中,在1000~1200r/min的轉速下離心處理10~15min,取下層沉淀,得菌絲提取物;
(5)將上述得到的菌絲提取物放入真空凍干機中,抽真空至15~18kPa,同時啟動制冷,在1~2h內(nèi)將真空冷凍干燥機溫度降至-10~-8℃,保持時間35~45min,隨后在3~5h內(nèi)將菌絲提取物升溫至0~3℃,使得菌絲提取物干燥,即可得到一種玻璃酸酶。