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基于核酸適體熒光探針AFP5的甲胎蛋白試劑盒及其檢測方法與流程

文檔序號:12839146閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:
1.一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒,其特征在于,主要成分包括:含NH4Cl、Tris、EDTA-Na2的紅細(xì)胞裂解液;含MgCl2的0.2M磷酸緩沖液;甲胎蛋白標(biāo)準(zhǔn)品;甲胎蛋白核酸適體熒光探針;所述甲胎蛋白核酸適體熒光探針為5'和3'兩端分別標(biāo)記熒光芘分子單體的核苷酸單鏈,該核苷酸單鏈序列為:gggctgcctaatcgtatatagcatcctactgacgttcacctctgcggttgactggtcgt;所述的甲胎蛋白核酸適體熒光探針不與甲胎蛋白結(jié)合時,核酸適體處于比較松散的結(jié)構(gòu),5'和3'兩端的芘分子單體相互游離,熒光激發(fā)后發(fā)射波長在370~400nm之間;所述的甲胎蛋白核酸適體熒光探針與甲胎蛋白結(jié)合時,甲胎蛋白誘導(dǎo)其發(fā)生結(jié)構(gòu)改變,核酸適體5'和3'兩端的芘分子單體相互靠近,形成激發(fā)態(tài)二聚體,熒光激發(fā)后激發(fā)態(tài)二聚體發(fā)射波長在480~500nm之間。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒,其特征在于,所述含NH4Cl、Tris、EDTA-Na2的紅細(xì)胞裂解液含有1~280mmol/LNH4Cl,1~34mmol/LTris,1~2mmol/LEDTA-Na2,pH7.0~7.2;所述含MgCl2的0.2M磷酸緩沖液含有1~10mmol/LMgCl2。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒,其特征在于,所述含NH4Cl、Tris、EDTA-Na2的紅細(xì)胞裂解液、含MgCl2的0.2M磷酸緩沖液、甲胎蛋白標(biāo)準(zhǔn)品、甲胎蛋白核酸適體熒光探針為配制好直接使用的液體試劑或是使用前需加水溶解的干粉狀態(tài)。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒,其特征在于,該試劑盒用于檢測肝素抗凝全血或末梢血中的甲胎蛋白濃度。
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