本發(fā)明涉及通過(guò)過(guò)濾系統(tǒng)從含有2種以上細(xì)胞的含細(xì)胞溶液及血液中僅將特定的細(xì)胞捕獲并進(jìn)行檢測(cè)時(shí)、在不會(huì)對(duì)選擇性地捕獲的細(xì)胞造成傷害的情況下僅將特定的細(xì)胞捕獲而富集的特定細(xì)胞的捕獲方法、將所捕獲的特定細(xì)胞捕獲之后的已捕獲特定細(xì)胞的器件的制造方法、含有所捕獲的特定細(xì)胞的溶液的制造方法。
背景技術(shù)：
：近年來(lái)，在血液領(lǐng)域中開(kāi)發(fā)了很多從溶液中僅將特定的細(xì)胞捕獲并檢測(cè)的技術(shù)。在進(jìn)行輸血時(shí)僅將白細(xì)胞除去的技術(shù)或者在免疫療法中將特定的白細(xì)胞取出的技術(shù)中進(jìn)行了很多研究。其中備受矚目的是血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞(以下記為CTC)的檢測(cè)技術(shù)。CTC由于臨床意義很高，因此進(jìn)行了很多研究，近年來(lái)特別期待在抗癌劑的篩選或癌的早期發(fā)現(xiàn)的診斷技術(shù)中的應(yīng)用。近年來(lái)，提出了通過(guò)使用利用了聚對(duì)二甲苯的樹(shù)脂過(guò)濾器而有效地檢測(cè)少量的CTC的方法(專(zhuān)利文獻(xiàn)1)?；蛘?，還提出了通過(guò)使用代替樹(shù)脂而利用了金屬的過(guò)濾器使過(guò)濾器的強(qiáng)度提高、利用白細(xì)胞與癌細(xì)胞變形能力的差異進(jìn)行分離的方法(專(zhuān)利文獻(xiàn)2)?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)1：國(guó)際公開(kāi)第2010/135603號(hào)專(zhuān)利文獻(xiàn)2：日本特開(kāi)2013/42689號(hào)技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在使用了過(guò)濾技術(shù)從含有2種以上細(xì)胞的含細(xì)胞溶液及血液中將稀少細(xì)胞等特定細(xì)胞取出的過(guò)程中，期待在不對(duì)選擇性地捕獲的細(xì)胞造成傷害的情況下僅將特定的細(xì)胞捕獲而富集。例如，以往已知的過(guò)濾法可以高效地將血液中的白細(xì)胞或紅細(xì)胞、血小板除去，但由于白細(xì)胞與癌細(xì)胞大小接近，因此無(wú)法全部除去。過(guò)濾法是利用白細(xì)胞的大小與癌細(xì)胞的大小差異、變形能力的差異進(jìn)行分離的方法。此方法中，通過(guò)在過(guò)濾器的材質(zhì)、孔形狀、孔徑、開(kāi)口率、流速上下工夫，可以相當(dāng)大程度地將白細(xì)胞與癌細(xì)胞分離。但是，進(jìn)行過(guò)濾將白細(xì)胞與癌細(xì)胞分離之后，將已捕獲的癌細(xì)胞從過(guò)濾器上取出并非易事，在取出時(shí)有可能對(duì)細(xì)胞造成傷害。本發(fā)明的課題在于提供通過(guò)過(guò)濾將特定的細(xì)胞捕獲后、不對(duì)已捕獲的細(xì)胞造成傷害即可取出的細(xì)胞捕獲方法、制造用于取出的已捕獲特定細(xì)胞的器件的方法、以及制造含有所捕獲的細(xì)胞的含特定細(xì)胞的溶液的方法。用于解決技術(shù)問(wèn)題的方法發(fā)明人們進(jìn)行反復(fù)研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在通過(guò)過(guò)濾將細(xì)胞捕獲之后至對(duì)細(xì)胞進(jìn)行解析和檢測(cè)的期間，通過(guò)一次都不將盒體(細(xì)胞捕獲器件)內(nèi)的液體抽出而連續(xù)地進(jìn)行液體置換的處理，可以在不對(duì)細(xì)胞造成傷害的情況下進(jìn)行取出。根據(jù)本發(fā)明的方法，由于可以防止細(xì)胞被夾住在孔內(nèi)和細(xì)胞的變形，因此可以期待細(xì)胞的高回收效率和傷害更少的細(xì)胞的回收。當(dāng)通過(guò)過(guò)濾從含細(xì)胞溶液中僅將特定的細(xì)胞捕獲時(shí)，通過(guò)在使液面距離過(guò)濾器表面殘留至目標(biāo)捕獲細(xì)胞的平均粒徑以上的高度的狀態(tài)下進(jìn)行處理，由于防止細(xì)胞被夾住在孔內(nèi)和細(xì)胞變形，可以在不對(duì)細(xì)胞造成傷害的情況下進(jìn)行取出。即，本發(fā)明一個(gè)方式的細(xì)胞捕獲方法的特征在于，其是使用細(xì)胞捕獲器件對(duì)液體進(jìn)行過(guò)濾、在過(guò)濾器表面上將含細(xì)胞溶液中所含的特定細(xì)胞選擇性地捕獲的細(xì)胞捕獲方法，所述細(xì)胞捕獲器件具有筐體和所述過(guò)濾器，所述筐體含有具有規(guī)定的容積且將所述液體導(dǎo)入至內(nèi)部的導(dǎo)入?yún)^(qū)域、和用于將所述液體排出至外部的排出流路，所述液體選自含有2種以上細(xì)胞的所述含細(xì)胞溶液及用于對(duì)該含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞進(jìn)行處理的處理液；所述過(guò)濾器設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域與所述排出流路之間的流路上，且在厚度方向上形成有用于所述液體通過(guò)的多個(gè)貫通孔，其中，所述細(xì)胞捕獲方法具有n次對(duì)所述細(xì)胞捕獲器件流過(guò)所述液體的工序，這里n為自然數(shù)，在從第1次的流過(guò)所述液體的工序至第n次的流過(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面維持規(guī)定的液面高度，在第n次的流過(guò)所述液體的工序結(jié)束時(shí)，在所述過(guò)濾器具有規(guī)定高度的液面的狀態(tài)下停止所述液體自所述細(xì)胞捕獲器件的排出。這里，所述筐體可以是含有設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域的上方的上蓋及所述液體的導(dǎo)入流路的方式。可以是在第1次的流過(guò)所述液體的工序之前，預(yù)先在所述筐體的包含所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域內(nèi)且比所述過(guò)濾器更靠上游側(cè)的部位充滿洗滌液的方式?？梢允橇鬟^(guò)所述液體的工序包含：流過(guò)固定液的工序；流過(guò)透過(guò)液的工序、流過(guò)染色液的工序及流過(guò)洗滌液的工序中的1個(gè)以上工序；和流過(guò)所述含細(xì)胞溶液的工序的方式。可以是所述n為1、流過(guò)所述液體的工序是流過(guò)所述含細(xì)胞溶液的工序的方式。可以是在流過(guò)所述液體的工序中，第1次流過(guò)的所述液體是含細(xì)胞溶液、第2次流過(guò)的所述液體是洗滌液的方式。可以是在流過(guò)所述液體的工序中，捕獲對(duì)象的細(xì)胞的至少一部分浸漬于所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體中的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面高度為捕獲對(duì)象的細(xì)胞的大小以上的方式。可以是在流過(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面高度為50μm以上的方式?？梢允撬龊?xì)胞溶液的溶劑由含有哺乳動(dòng)物的全血、血清、血漿或來(lái)自于它們的蛋白質(zhì)的水溶液構(gòu)成的方式?？梢允撬鲞^(guò)濾器使用高分子材料或金屬加工而成的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，對(duì)所述細(xì)胞捕獲器件導(dǎo)入所述液體的速度為50～1000μL/min的方式。另外，本發(fā)明一個(gè)方式的已捕獲特定細(xì)胞的器件的制造方法的特征在于，其是制造通過(guò)使用細(xì)胞捕獲器件對(duì)液體進(jìn)行過(guò)濾、在過(guò)濾器表面上將含細(xì)胞溶液中所含的特定細(xì)胞選擇性地捕獲了的已捕獲特定細(xì)胞的器件的已捕獲特定細(xì)胞的器件的制造方法，所述細(xì)胞捕獲器件具有筐體和所述過(guò)濾器，所述筐體含有具有規(guī)定的容積且將所述液體導(dǎo)入至內(nèi)部的導(dǎo)入?yún)^(qū)域、和用于將所述液體排出至外部的排出流路，所述液體選自含有2種以上細(xì)胞的所述含細(xì)胞溶液及用于對(duì)該含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞進(jìn)行處理的處理液；所述過(guò)濾器設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域與所述排出流路之間的流路上，且在厚度方向上形成有用于所述液體通過(guò)的多個(gè)貫通孔，其中，所述方法具有n次對(duì)所述細(xì)胞捕獲器件流過(guò)所述液體的工序，這里n為自然數(shù)，在從第1次的流過(guò)所述液體的工序至第n次的流過(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面維持規(guī)定的液面高度，在第n次的流過(guò)所述液體的工序結(jié)束時(shí)，在所述過(guò)濾器具有規(guī)定高度的液面的狀態(tài)下停止所述液體自所述細(xì)胞捕獲器件的排出。這里，所述筐體可以是含有設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域的上方的上蓋及所述液體的導(dǎo)入流路的方式?？梢允窃诘?次的流過(guò)所述液體的工序之前，預(yù)先在所述筐體的包含所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域內(nèi)且比所述過(guò)濾器更靠上游側(cè)的部位充滿洗滌液的方式。可以是流過(guò)所述液體的工序包含：流過(guò)固定液的工序；流過(guò)透過(guò)液的工序、流過(guò)染色液的工序及流過(guò)洗滌液的工序中的1個(gè)以上工序；和流過(guò)所述含細(xì)胞溶液的工序的方式?？梢允撬鰊為1、流過(guò)所述液體的工序是流過(guò)所述含細(xì)胞溶液的工序的方式。可以是在流過(guò)所述液體的工序中，第1次流過(guò)的所述液體是含細(xì)胞溶液、第2次流過(guò)的所述液體是洗滌液的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，捕獲對(duì)象的細(xì)胞的至少一部分浸漬于所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體中的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面高度為捕獲對(duì)象的細(xì)胞的大小以上的方式。可以是在流過(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面高度為50μm以上的方式?？梢允撬龊?xì)胞溶液的溶劑由含有哺乳動(dòng)物的全血、血清、血漿或來(lái)自于它們的蛋白質(zhì)的水溶液構(gòu)成的方式。可以是所述過(guò)濾器使用高分子材料或金屬加工而成的方式。可以是在流過(guò)所述液體的工序中，對(duì)所述細(xì)胞捕獲器件導(dǎo)入所述液體的速度為50～1000μL/min的方式。另外，本發(fā)明一個(gè)方式的含特定細(xì)胞的溶液的制造方法的特征在于，其是通過(guò)使用細(xì)胞捕獲器件對(duì)液體進(jìn)行過(guò)濾、在過(guò)濾器表面上將含細(xì)胞溶液中所含的特定細(xì)胞選擇性地捕獲而獲得的含特定細(xì)胞的溶液的制造方法，所述細(xì)胞捕獲器件具有筐體和所述過(guò)濾器，所述筐體含有具有規(guī)定的容積且將所述液體導(dǎo)入至內(nèi)部的導(dǎo)入?yún)^(qū)域、和用于將所述液體排出至外部的排出流路，所述液體選自含有2種以上細(xì)胞的所述含細(xì)胞溶液及用于對(duì)該含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞進(jìn)行處理的處理液；所述過(guò)濾器設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域與所述排出流路之間的流路上，且在厚度方向上形成有用于所述液體通過(guò)的多個(gè)貫通孔，其中，所述方法具有n次對(duì)所述細(xì)胞捕獲器件流過(guò)所述液體的工序，這里n為自然數(shù)，在從第1次的流過(guò)所述液體的工序至第n次的流過(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面維持規(guī)定的液面高度，在第n次的流過(guò)所述液體的工序結(jié)束時(shí)，在所述過(guò)濾器具有規(guī)定高度的液面的狀態(tài)下停止所述液體自所述細(xì)胞捕獲器件的排出，在對(duì)所述細(xì)胞捕獲器件流過(guò)所述液體的工序之后，具有將所述筐體內(nèi)存在的液體回收的工序?？梢允菍⑺隹痼w內(nèi)存在的液體回收的工序包含從所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域側(cè)吸引所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域內(nèi)的液體的工序的方式?？梢允撬隹痼w含有設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域的上方的上蓋及所述液體的導(dǎo)入流路，將所述筐體內(nèi)存在的液體回收的工序包含從所述排出流路向所述導(dǎo)入流路進(jìn)行送液的工序的方式。可以是從所述排出流路向所述導(dǎo)入流路送液的流速為50～1000μL/min的方式?？梢允窃趶乃雠懦隽髀废蛩鰧?dǎo)入流路送液之前，對(duì)所述筐體賦予振動(dòng)的方式?？梢允撬隹痼w含有設(shè)置在所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域的上方的上蓋及2個(gè)以上的所述液體的導(dǎo)入流路，將所述筐體內(nèi)存在的液體回收的工序包含從2個(gè)以上的所述導(dǎo)入流路中所含的第1導(dǎo)入流路向2個(gè)以上的所述導(dǎo)入流路中不同于第1導(dǎo)入流路的導(dǎo)入流路進(jìn)行送液的工序的方式?？梢允菑?個(gè)以上的所述導(dǎo)入流路中所含的第1導(dǎo)入流路向2個(gè)以上的所述導(dǎo)入流路中不同于第1導(dǎo)入流路的導(dǎo)入流路送液的流速為50～1000μL/min的方式?？梢允窃趶?個(gè)以上的所述導(dǎo)入流路中所含的第1導(dǎo)入流路向2個(gè)以上的所述導(dǎo)入流路中不同于第1導(dǎo)入流路的導(dǎo)入流路送液之前，對(duì)所述筐體賦予振動(dòng)的方式?？梢允窃诘?次的流過(guò)所述液體的工序之前，預(yù)先在所述筐體的包含所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域內(nèi)且比所述過(guò)濾器更靠上游側(cè)的部位充滿洗滌液的方式。可以是流過(guò)所述液體的工序包含：流過(guò)固定液的工序；流過(guò)透過(guò)液的工序、流過(guò)染色液的工序及流過(guò)洗滌液的工序中的1個(gè)以上工序；和流過(guò)所述含細(xì)胞溶液的工序的方式。可以是所述n為1、流過(guò)所述液體的工序是流過(guò)所述含細(xì)胞溶液的工序的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，第1次流過(guò)的所述液體是含細(xì)胞溶液、第2次流過(guò)的所述液體是洗滌液的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，捕獲對(duì)象的細(xì)胞的至少一部分浸漬于所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體中的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面高度為捕獲對(duì)象的細(xì)胞的大小以上的方式?？梢允窃诹鬟^(guò)所述液體的工序中，所述過(guò)濾器上的所述導(dǎo)入?yún)^(qū)域中的所述液體的液面高度為50μm以上的方式。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明，可以提供通過(guò)過(guò)濾將特定的細(xì)胞捕獲后、不會(huì)對(duì)所捕獲的細(xì)胞造成傷害即可取出的細(xì)胞捕獲方法、制造用于取出的已捕獲特定細(xì)胞的器件的方法、以及制造含有所捕獲的細(xì)胞的含特定細(xì)胞的溶液的方法。附圖說(shuō)明圖1是說(shuō)明細(xì)胞捕獲器件(開(kāi)放型筐體)的概略構(gòu)成的圖。圖2是說(shuō)明細(xì)胞捕獲器件(密閉型筐體)的概略構(gòu)成的圖。圖3是說(shuō)明過(guò)濾器的制造方法的概略截面圖。圖4是表示使用銅板(進(jìn)行銅鍍覆時(shí)為Ni板)來(lái)制造過(guò)濾器的方法的概略截面圖。圖5是說(shuō)明過(guò)濾器的長(zhǎng)孔徑、短孔徑及開(kāi)口率的定義的圖。圖6是實(shí)施例1的捕獲后的細(xì)胞的照片。圖7是實(shí)施例4的捕獲后的細(xì)胞的照片。圖8是比較例1的捕獲后的細(xì)胞的照片。圖9是比較例4的捕獲后的細(xì)胞的照片。具體實(shí)施方式以下進(jìn)行本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方式的詳細(xì)說(shuō)明。本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲方法是指從含有2種以上細(xì)胞的含細(xì)胞溶液中選擇性地捕獲特定細(xì)胞的方法。捕獲特定的細(xì)胞時(shí)，使用細(xì)胞捕獲器件。對(duì)于細(xì)胞捕獲器件在后敘述，其具備：含有具有規(guī)定容積的導(dǎo)入?yún)^(qū)域和用于將從導(dǎo)入?yún)^(qū)域?qū)胫羶?nèi)部的液體排出至外部的排出流路的筐體；和設(shè)置在導(dǎo)入?yún)^(qū)域與排出流路之間的流路上且在厚度方向上形成有用于所述液體通過(guò)的多個(gè)貫通孔的過(guò)濾器。通過(guò)使用該細(xì)胞捕獲器件進(jìn)行含細(xì)胞溶液的過(guò)濾，在過(guò)濾器上將特定的細(xì)胞捕獲。在含細(xì)胞溶液的過(guò)濾時(shí)，通過(guò)將固定液、透過(guò)液、染色液或洗滌液等處理液流入細(xì)胞捕獲器件，可以進(jìn)行用于對(duì)所捕獲的細(xì)胞進(jìn)行觀察等的處理。此外，將在過(guò)濾器上捕獲了特定的細(xì)胞的細(xì)胞捕獲器件稱(chēng)作已捕獲特定細(xì)胞的器件。本實(shí)施方式中，含細(xì)胞溶液定義為存在2種以上細(xì)胞的溶液。作為含細(xì)胞溶液的例子，可舉出人血液及含人血液的溶液。本實(shí)施方式中，當(dāng)含細(xì)胞溶液為人血液時(shí)，含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞是指存在于人血液中的細(xì)胞且2種以上的細(xì)胞為對(duì)象。具體地說(shuō)，為人白細(xì)胞、血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CirculatingTumorCell：CTC)、循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞(CirculatingEndothelialCell：CEC)、癌干細(xì)胞。含細(xì)胞溶液的溶劑優(yōu)選由含有哺乳動(dòng)物的全血、血清或血漿、或者來(lái)自于它們的蛋白質(zhì)的水溶液構(gòu)成，更優(yōu)選是來(lái)自于牛、馬、人的蛋白質(zhì)，進(jìn)一步優(yōu)選是來(lái)自于人的蛋白質(zhì)。水溶液優(yōu)選以磷酸緩沖液為主成分。還有在含蛋白質(zhì)的水溶液內(nèi)添加抗凝劑的情況?？鼓齽﹥?yōu)選是EDTA、肝素、檸檬酸鈉、氟化鈉中的任一種。作為利用細(xì)胞捕獲器件捕獲的對(duì)象的特定細(xì)胞是指存在于人血液中的細(xì)胞。具體地說(shuō)為人白細(xì)胞、血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞、循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞、癌干細(xì)胞。另外，本實(shí)施方式中，含特定細(xì)胞的溶液定義為使用細(xì)胞捕獲器件由存在2種以上細(xì)胞的含細(xì)胞溶液中將特定的細(xì)胞捕獲之后所制作的溶液。在含特定細(xì)胞的溶液中，所捕獲到的特定細(xì)胞相對(duì)于除特定細(xì)胞以外的細(xì)胞的存在比例比原來(lái)的含細(xì)胞溶液中的存在比例要高。含特定細(xì)胞的溶液通過(guò)將在細(xì)胞捕獲器件中捕獲了特定細(xì)胞之后的已捕獲特定細(xì)胞的器件中所殘留的液體進(jìn)行回收來(lái)獲得。參照?qǐng)D1及圖2說(shuō)明細(xì)胞捕獲器件。細(xì)胞捕獲器件具有筐體及過(guò)濾器。首先，進(jìn)行筐體的說(shuō)明。本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲器件的筐體能夠向內(nèi)部導(dǎo)入液體，且能夠?qū)⑼ㄟ^(guò)過(guò)濾器后的液體排出至外部。進(jìn)而，在筐體內(nèi)具備具有規(guī)定容積的導(dǎo)入?yún)^(qū)域以使得能夠以規(guī)定的高度維持在過(guò)濾器上滯留的液體的液面。這種筐體存在2種類(lèi)型。此外，細(xì)胞捕獲器件的形狀并非限于圖1或圖2所示的形狀。只要是能夠通過(guò)使用了過(guò)濾器的含細(xì)胞溶液的過(guò)濾而對(duì)特定的細(xì)胞進(jìn)行捕獲，則其裝置構(gòu)成并無(wú)特別限定。首先，第一種是在比過(guò)濾器更靠上的部分沒(méi)有上蓋的類(lèi)型的開(kāi)放型筐體。圖1表示具有開(kāi)放型筐體的細(xì)胞捕獲器件10。細(xì)胞捕獲器件10具有帶有在厚度方向(上下方向)上延伸的貫通孔的過(guò)濾器11、設(shè)置在過(guò)濾器11上方的導(dǎo)入?yún)^(qū)域12、以及設(shè)置在過(guò)濾器下方的排出流路13。導(dǎo)入?yún)^(qū)域12及排出流路13由筐體形成。具有開(kāi)放型筐體的細(xì)胞捕獲器件10中，將所導(dǎo)入的液體從存在于過(guò)濾器11上部的導(dǎo)入?yún)^(qū)域12導(dǎo)入。由于導(dǎo)入?yún)^(qū)域12的上方是開(kāi)口的，因此可以直接導(dǎo)入。用于導(dǎo)入液體的介質(zhì)在通過(guò)測(cè)定者的手藝進(jìn)行時(shí)，優(yōu)選使用用于自動(dòng)導(dǎo)入一定量液體的設(shè)備。作為用于導(dǎo)入一定量的液體的設(shè)備，優(yōu)選是滴定管等半自動(dòng)的設(shè)備和機(jī)械控制的自動(dòng)的設(shè)備。第2種筐體是具備具有用于向比過(guò)濾器更靠上的部分導(dǎo)入液體的1個(gè)以上導(dǎo)入流路的上蓋和用于將液體排出至外部的排出流路的類(lèi)型的密閉型筐體。圖2表示具有密閉型筐體的細(xì)胞捕獲器件20。細(xì)胞捕獲器件20具有帶有在厚度方向(上下方向)上延伸的貫通孔的過(guò)濾器21、設(shè)置在過(guò)濾器21上方的導(dǎo)入?yún)^(qū)域22、以及設(shè)置在過(guò)濾器21下方的排出流路23。進(jìn)而，在導(dǎo)入?yún)^(qū)域22上方設(shè)置上蓋24的同時(shí)，設(shè)置用于將液體導(dǎo)入至被上蓋24覆蓋的導(dǎo)入?yún)^(qū)域22的2個(gè)導(dǎo)入流路25、26。在上蓋24與過(guò)濾器21之間形成作為具有用于保持液體及細(xì)胞的規(guī)定容積的空間的導(dǎo)入?yún)^(qū)域22。導(dǎo)入流路25、26優(yōu)選安裝在比上蓋24更靠上方的位置或者上蓋24的橫側(cè)處。圖2的細(xì)胞捕獲器件20中，導(dǎo)入流路25與導(dǎo)入?yún)^(qū)域的連接部分設(shè)置在上蓋24的橫側(cè)，顯示了流路向上方延伸的例子。具備多個(gè)導(dǎo)入流路25、26時(shí)，可以防止導(dǎo)入至細(xì)胞捕獲器件20的液體之間(例如含細(xì)胞溶液和處理液)的污染。因此，優(yōu)選是具有2個(gè)以上導(dǎo)入流路的構(gòu)成。對(duì)于細(xì)胞捕獲器件10、20中使用的過(guò)濾器11、21，詳細(xì)情況在后敘述，材質(zhì)優(yōu)選是金屬或高分子材料。作為金屬的主成分，優(yōu)選是鎳、銀、鈀、銅、銥中的任一個(gè)或者它們的合金。作為高分子材料的主成分，優(yōu)選以聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、聚酰亞胺、聚四氟乙烯、聚氨酯、聚乳酸、聚對(duì)二甲苯為主成分。其中，“主成分”是指構(gòu)成過(guò)濾器的材料中該成分的比例為50重量％以上。另外，過(guò)濾器11、21中，在厚度方向上形成有用于液體通過(guò)的多個(gè)貫通孔11a、21a。通過(guò)調(diào)整這些貫通孔11a、21a的形狀及大小，可以選擇性地捕獲成為捕獲對(duì)象的特定細(xì)胞。接著，對(duì)細(xì)胞捕獲器件中捕獲細(xì)胞的方法進(jìn)行說(shuō)明。首先，對(duì)向細(xì)胞捕獲器件10或細(xì)胞捕獲器件20流過(guò)液體的工序進(jìn)行說(shuō)明。本實(shí)施方式中所謂的流過(guò)液體的工序是指自比過(guò)濾器11、21更靠上方的位置或者自專(zhuān)用的導(dǎo)入流路(例如導(dǎo)入流路25)進(jìn)行目標(biāo)溶液的導(dǎo)入。之后，在使其通過(guò)過(guò)濾器11、21之后，自排出流路13、23將液體排出。作為流過(guò)液體的方法，優(yōu)選是吸引，作為用于吸引液體的動(dòng)力，優(yōu)選使用蠕動(dòng)泵。與本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲有關(guān)的處理中，流過(guò)液體的工序進(jìn)行n次(n為自然數(shù))。流過(guò)液體的工序的數(shù)量基于含細(xì)胞溶液流過(guò)的工序的數(shù)量及流過(guò)處理液的工序(流過(guò)固定液的工序，以及流過(guò)透過(guò)液的工序、流過(guò)染色液的工序及流過(guò)洗滌液的工序中的1個(gè)以上的工序)的數(shù)量進(jìn)行變動(dòng)。即，n為1時(shí)，僅進(jìn)行含細(xì)胞溶液流過(guò)的工序。此外，通過(guò)成為第1次流過(guò)的液體為含細(xì)胞溶液、第2次流過(guò)的所述液體為洗滌液的構(gòu)成，在利用洗滌液對(duì)含細(xì)胞溶液中所含成分中除捕獲對(duì)象的特定細(xì)胞以外的成分進(jìn)行洗滌(向排出流路側(cè)移動(dòng))之后，可以實(shí)施利用各種處理液進(jìn)行的處理，因此可以提高利用除洗滌液以外的處理液進(jìn)行處理的效果。具有n次流過(guò)液體的工序時(shí)，特征在于，在從第1次至第n次的流過(guò)液體的工序中，滯留在過(guò)濾器11、21上的導(dǎo)入?yún)^(qū)域12、22中的液體的液面維持在規(guī)定的高度。通過(guò)為這種構(gòu)成，可以實(shí)現(xiàn)捕獲對(duì)象細(xì)胞的至少一部分浸漬在過(guò)濾器上的導(dǎo)入?yún)^(qū)域的液體中的狀態(tài)。另外，特征在于，在第n次的流過(guò)最終液體的工序之后(結(jié)束時(shí))，在滯留于過(guò)濾器11、21上的導(dǎo)入?yún)^(qū)域12、22中的液體具有規(guī)定的液面高度的狀態(tài)下停止液體自細(xì)胞捕獲器件10、20的排出。規(guī)定的高度是指優(yōu)選具有以捕獲為目標(biāo)的細(xì)胞的平均粒徑以上的高度，更優(yōu)選為捕獲對(duì)象的細(xì)胞的大小以上。具體地說(shuō)，滯留在過(guò)濾器11、21上的導(dǎo)入?yún)^(qū)域12、22中的液體的液面高度優(yōu)選為50μm以上，更優(yōu)選為30μm以上。通過(guò)使液體的高度為捕獲對(duì)象的細(xì)胞的平均粒徑以上的高度，可以充分地確保滯留在過(guò)濾器上的特定細(xì)胞的移動(dòng)性，可以防止細(xì)胞因與過(guò)濾器或其他細(xì)胞的沖撞而受到損傷。優(yōu)選在第1次的流過(guò)液體的工序之前、預(yù)先在筐體內(nèi)的導(dǎo)入?yún)^(qū)域內(nèi)及流路(導(dǎo)入流路、排出流路)內(nèi)、即包含導(dǎo)入?yún)^(qū)域內(nèi)且比過(guò)濾器更靠上游側(cè)的部位充滿洗滌液。洗滌液優(yōu)選使用含有來(lái)自于牛的血清的磷酸緩沖溶液，更優(yōu)選使用含有胎牛血清的磷酸緩沖溶液。作為牛血清的濃度，優(yōu)選為0.1w/v％～20w/v％、更優(yōu)選為0.5w/v％～10w/v％。作為含細(xì)胞溶液、各種處理液通過(guò)過(guò)濾器的孔的流速，優(yōu)選為100～800μL/min的范圍、更優(yōu)選為200～600μL/min的范圍。具有密閉型筐體的細(xì)胞捕獲器件20可作為在捕獲細(xì)胞后在筐體內(nèi)部填充有液體的狀態(tài)下停止液體自排出流路23的排出之后、以保持所捕獲的細(xì)胞的形狀的狀態(tài)進(jìn)行保管的容器來(lái)進(jìn)行使用。另外，將細(xì)胞捕獲到細(xì)胞捕獲器件的過(guò)濾器上之后，將存在于筐體內(nèi)的含細(xì)胞溶液作為含特定細(xì)胞的溶液進(jìn)行回收的方法根據(jù)開(kāi)放型的筐體和密閉型的筐體而不同。例如，作為用于從具有開(kāi)放型筐體的細(xì)胞捕獲器件10回收含細(xì)胞溶液的方法，優(yōu)選使用移液管等吸引器。作為用于從具有密閉型筐體的細(xì)胞捕獲器件(例如細(xì)胞捕獲器件20)回收含細(xì)胞溶液的方法，示例3個(gè)。首先，作為第1個(gè)方法，可舉出如導(dǎo)入流路25、26那樣保有2個(gè)以上導(dǎo)入流路的情況中所使用的方法。使一側(cè)的導(dǎo)入流路(第1導(dǎo)入流路)為液體的導(dǎo)入側(cè)、使與用作液體導(dǎo)入側(cè)的導(dǎo)入流路不同的導(dǎo)入流路為液體的排出側(cè)，作為液體例如送液處理液等。由此，自作為排出側(cè)的導(dǎo)入流路將含有利用過(guò)濾器21所捕獲的特定細(xì)胞的含細(xì)胞溶液回收，可獲得含特定細(xì)胞的溶液。此時(shí)的送液速度優(yōu)選為50～1000μL/min的范圍、更優(yōu)選為200～800μL/min的范圍。通過(guò)使送液速度為上述范圍，不會(huì)對(duì)特定的細(xì)胞造成損傷，可以提高過(guò)濾器21上的特定細(xì)胞的回收效率。作為第2個(gè)方法，可舉出導(dǎo)入流路僅為1個(gè)時(shí)也能使用的方法。使排出流路為液體的導(dǎo)入側(cè)、使導(dǎo)入流路為液體的排出側(cè)，通過(guò)對(duì)液體進(jìn)行送液，自作為排出側(cè)的導(dǎo)入流路進(jìn)行含細(xì)胞溶液的回收。此時(shí)的送液速度優(yōu)選為50～1000μL/min的范圍、更優(yōu)選為200～800μL/min的范圍。另外，自密閉型筐體回收含細(xì)胞溶液時(shí)，優(yōu)選在送液之前對(duì)筐體賦予一定的振動(dòng)。作為賦予振動(dòng)的介質(zhì)，優(yōu)選使用混合器或振動(dòng)器等。作為第3個(gè)方法，與具有開(kāi)放型筐體的細(xì)胞捕獲器件10同樣，可舉出進(jìn)行吸引的方法。此時(shí)，將移液管等吸引器連接在導(dǎo)入流路的1個(gè)上來(lái)進(jìn)行吸引。以下一邊參照?qǐng)D3及圖4一邊示例作為在細(xì)胞捕獲器件10、20中優(yōu)選使用的過(guò)濾器之一種的金屬過(guò)濾器的制作方法，同時(shí)進(jìn)行該金屬過(guò)濾器的說(shuō)明。圖3是表示使用在MCL上粘貼有可剝離銅箔(進(jìn)行銅鍍覆時(shí)為Ni箔)的基板來(lái)制造金屬制薄膜過(guò)濾器的方法的概略截面圖。圖3(A)表示在MCL1上層疊了可剝離銅箔2(進(jìn)行銅鍍覆時(shí)為Ni箔)的基板。首先準(zhǔn)備該基板。作為用于制作過(guò)濾器的基板使用的材料優(yōu)選是銅(鍍覆為銅時(shí)是鎳)。銅可通過(guò)利用藥液的化學(xué)溶解而容易地除去，與光致抗蝕劑的密合力也比其他材料優(yōu)異。接著，如圖3(B)所示，在基板的可剝離銅箔2上形成光致抗蝕劑3。該光致抗蝕劑的厚度優(yōu)選是之后的導(dǎo)體的厚度的1.0倍～2.0倍。該厚度薄時(shí)，后面的抗蝕劑剝離變難，厚時(shí)，電路形成性變難。具體地說(shuō)，優(yōu)選光致抗蝕劑3為15～50μm的厚度。作為形成光致抗蝕劑3的感光性樹(shù)脂組合物，優(yōu)選負(fù)型感光性樹(shù)脂組合物。負(fù)型感光性樹(shù)脂組合物優(yōu)選至少含有粘合劑樹(shù)脂、具有不飽和鍵的光聚合性化合物、光聚合引發(fā)劑。接著，如圖3(C)所示，在光致抗蝕劑3上重疊光掩模4之后進(jìn)行光致抗蝕劑曝光。由此，在未重疊有光掩模4的區(qū)域上形成曝光部3a。接著，如圖3(D)所示，利用堿溶液等進(jìn)行未曝光部3b的光致抗蝕劑顯影除去。由此，在對(duì)應(yīng)于過(guò)濾器的貫通孔的位置上殘留曝光部3a。接著，如圖3(E)所示，對(duì)未被光致抗蝕劑覆蓋的部分進(jìn)行電鍍，從而形成鍍覆層5。該鍍覆的部分變?yōu)檫^(guò)濾器的材質(zhì)。接著，如圖3(F)所示，從MCL1上將利用電鍍形成了鍍覆層5的可剝離銅箔2剝離。接著，如圖3(G)所示，通過(guò)利用藥液的化學(xué)溶解將可剝離銅箔2除去，將由曝光部3a及鍍覆層5形成的自支撐膜取出。接著，如圖3(H)所示，將殘留在自支撐膜內(nèi)的基于光致抗蝕劑的曝光部3a除去，在鍍覆層5上形成貫通孔6。接著，如圖3(I)所示，進(jìn)行非電解鍍金，在過(guò)濾器表面上形成鍍金層7。由以上，可以制造細(xì)胞捕獲器件10、20中使用的過(guò)濾器11、21。圖4是表示使用銅板(進(jìn)行銅鍍覆時(shí)為Ni板)來(lái)制造金屬制薄膜過(guò)濾器的方法的概略截面圖。在圖4所示的方法中，除了代替圖3所示方法中的MCL1和可剝離銅箔2而使用銅板(或Ni板)2’之外，與圖2所示的制造方法相同。即，圖4(A)表示準(zhǔn)備作為基板使用的銅板2’的工序。另外，圖4(B)表示光致抗蝕劑3在銅板2’上的層壓的工序。另外，圖4(C)表示重疊光掩模4的光致抗蝕劑曝光。圖4(D)表示未曝光部3b的光致抗蝕劑的顯影除去。另外，圖4(E)表示通過(guò)對(duì)未被光致抗蝕劑的曝光部3a覆蓋的部分進(jìn)行的電鍍而形成鍍覆層的工序。另外，圖4(F)表示通過(guò)利用藥液的化學(xué)溶解(化學(xué)刻蝕)將銅板2’除去、將由曝光部3a及鍍覆層5形成的自支撐膜取出的工序。另外，圖4(G)表示將殘留在自支撐膜內(nèi)的基于光致抗蝕劑的曝光部3a除去、在鍍覆層5上形成貫通孔6的工序。另外，圖4(H)表示進(jìn)行非電解鍍金而在過(guò)濾器表面形成鍍金層7的工序。如此，使用圖3所示方法及圖4所示方法中的任一種均可制造細(xì)胞捕獲器件10，20中使用的過(guò)濾器11、21。過(guò)濾器的材質(zhì)優(yōu)選是金屬。作為金屬的主成分，優(yōu)選是鎳、銀、鈀、銅、銥中的任一種或它們的合金。以上的金屬能夠進(jìn)行電鍍。其中，“主成分”表示該成分相對(duì)于過(guò)濾器105的總重量的重量比例為50％以上。鈀及銥的氧化還原電位高、為難溶性、特性良好，但具有價(jià)格昂貴的缺點(diǎn)。由于鎳比氫的氧化還原電位低，因此易于溶解，但價(jià)格便宜。銀及鈀是貴金屬，與銥相比較為廉價(jià)。作為用于制作過(guò)濾器的基板(銅板2’：參照?qǐng)D4)所使用的材料優(yōu)選銅(過(guò)濾器的材質(zhì)為銅時(shí)是鎳)。銅可通過(guò)利用藥液的化學(xué)溶解而容易地除去，與光致抗蝕劑的密合力也比其他材料更為優(yōu)異。另外，對(duì)于相對(duì)于MCL1層疊的金屬箔2(參照?qǐng)D3)而言，也優(yōu)選是銅(過(guò)濾器的材質(zhì)為銅時(shí)是鎳)。另外，圖3(E)及圖4(E)所示的鍍覆層5的形成利用電鍍進(jìn)行。例如，作為電解鍍鎳，可舉出瓦特浴(硫酸鎳、氯化鎳、硼酸為主成分)、氨基磺酸浴(氨基磺酸鎳、硼酸為主成分)、焦磷酸銅打底鍍?cè)?氯化鎳、氯化氫為主成分)等。作為電解鍍銀，可舉出以氰化銀鉀或酒石酸鉀為主成分的浴。作為電解鍍鈀，可舉出由水溶性鈀鹽與萘磺酸化合物構(gòu)成的浴。作為電解鍍銥，可舉出包含含鹵素的可溶性銥鹽及醇類(lèi)的浴。作為電解鍍銅，可舉出以硫酸銅和硫酸、氯化物離子為主成分的浴。使用這些鍍覆浴進(jìn)行電鍍。電鍍時(shí)的電流密度可以是0.3～4A/dm2的范圍、更優(yōu)選為0.5～3A/dm2的范圍。通過(guò)使電流密度為4A/dm2以下，可以抑制麻點(diǎn)的產(chǎn)生，通過(guò)使電流密度為0.3A/dm2以上，由于金屬的晶粒充分地成長(zhǎng)，作為阻擋層的效果提高，因此可良好地獲得本實(shí)施方式的效果。進(jìn)行鍍覆時(shí)的抗蝕劑的位置是貫通孔的位置。作為貫通孔的開(kāi)口形狀，可舉出圓、橢圓、正方形、長(zhǎng)方形、圓角長(zhǎng)方形、多邊形等。從能夠高效地捕獲對(duì)象成分的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選圓、長(zhǎng)方形或圓角長(zhǎng)方形。另外，從防止過(guò)濾器的堵塞的觀點(diǎn)出發(fā)，特別優(yōu)選圓角長(zhǎng)方形。貫通孔6的孔徑根據(jù)成為捕獲對(duì)象的成分的尺寸來(lái)設(shè)定孔徑。本說(shuō)明書(shū)中，開(kāi)口形狀為橢圓、長(zhǎng)方形、多邊形等圓以外的形狀的孔徑是能夠通過(guò)各個(gè)貫通孔的球的直徑的最大值。例如，開(kāi)口形狀為長(zhǎng)方形時(shí)，如圖5所示，可以定義短邊側(cè)的短孔徑和長(zhǎng)邊側(cè)的長(zhǎng)孔徑，但貫通孔6的孔徑為短孔徑。另外，當(dāng)貫通孔的孔徑在例如開(kāi)口形狀為長(zhǎng)方形時(shí)，成為該長(zhǎng)方形的短邊的長(zhǎng)度，當(dāng)開(kāi)口形狀為多邊形時(shí)，是該多邊形的內(nèi)切圓的直徑。開(kāi)口形狀為長(zhǎng)方形或圓角長(zhǎng)方形時(shí)，即便是成為捕獲對(duì)象的細(xì)胞被貫通孔6捕獲了的狀態(tài)下，在開(kāi)口部中，在開(kāi)口形狀的長(zhǎng)邊方向上也產(chǎn)生空隙。由于液體可以經(jīng)由該空隙通過(guò)，因此可以防止過(guò)濾器的堵塞。金屬過(guò)濾器的短孔徑的長(zhǎng)度優(yōu)選為5～15μm、更優(yōu)選為7～9μm。過(guò)濾器11、21的貫通孔的平均開(kāi)口率優(yōu)選為3～50％、更優(yōu)選為3～20％、特別優(yōu)選為3～10％。這里，開(kāi)口率是指貫通孔所占的面積相對(duì)于作為過(guò)濾器發(fā)揮功能的區(qū)域的面積的比例(參照?qǐng)D5)。即，作為過(guò)濾器發(fā)揮功能的區(qū)域的面積是指在過(guò)濾器所含的多個(gè)貫通孔中連接貫通孔的最外部所獲得的區(qū)域(圖5中由虛線包圍的區(qū)域A1)。開(kāi)口率過(guò)高時(shí)，則施加于白細(xì)胞的壓力降低、白細(xì)胞殘留增加。開(kāi)口率低時(shí)，流過(guò)的血液量降低。過(guò)濾器11、21的厚度優(yōu)選為3μm～50μm、更優(yōu)選為5μm～30μm、特別優(yōu)選為8μm～20μm。過(guò)濾器11、21的膜厚小于3μm時(shí)，過(guò)濾器的強(qiáng)度降低，有處理性變難的情況。相反，超過(guò)50μm時(shí)，則有可能加工時(shí)間延長(zhǎng)而導(dǎo)致生產(chǎn)率降低、消耗所需量以上的材料而導(dǎo)致成本上的不利、微細(xì)加工本身變難，而且白細(xì)胞等除捕獲對(duì)象的特定細(xì)胞以外的細(xì)胞變得難以通過(guò)。以上電路形成后將樹(shù)脂層剝離，對(duì)銅箔進(jìn)行刻蝕(圖3)或者將銅板除去(圖4)，從而如圖3(H)或圖4(G)所示，完成由鍍覆層5形成的過(guò)濾器。接著，利用強(qiáng)堿將殘留在過(guò)濾器中的抗蝕劑(曝光部3a)除去。作為強(qiáng)堿，優(yōu)選0.1wt％～10wt％的NaOH或KOH水溶液。為了促進(jìn)剝離，還可添加單乙醇胺(1～20vol％)等。剝離困難時(shí)，還可以利用在高錳酸鈉或高錳酸鉀等中添加了堿(0.1wt％～10wt％的NaOH或KOH)的溶液來(lái)將抗蝕劑除去。還可以對(duì)除去了抗蝕劑后的過(guò)濾器進(jìn)行貴金屬鍍覆。作為貴金屬鍍覆，優(yōu)選金、鈀、鉑、釕、銦等。貴金屬鍍覆中，金如前所述在所有金屬中氧化還原電位最高，沒(méi)有細(xì)胞毒性。長(zhǎng)期保存下也幾乎沒(méi)有變色等。鍍金還可以通過(guò)非電解來(lái)進(jìn)行，也可通過(guò)電解進(jìn)行。通過(guò)電解進(jìn)行時(shí)，厚度不均會(huì)變大、易于影響過(guò)濾器的孔徑精度，因此優(yōu)選通過(guò)非電解來(lái)進(jìn)行。但電解鍍金可以提高被覆率。鍍金僅通過(guò)置換鍍覆進(jìn)行也有效，但組合了置換鍍覆和還原鍍覆的效果更大。鍍金之前的金屬過(guò)濾器有時(shí)表面會(huì)發(fā)生氧化。因此要進(jìn)行氧化皮膜的除去，這里可以利用加入有與金屬離子形成絡(luò)合物的化合物的水溶液進(jìn)行洗滌。具體地說(shuō)，可以是加入有氰類(lèi)或EDTA類(lèi)、或檸檬酸類(lèi)的水溶液。其中，檸檬酸類(lèi)作為鍍金的前處理最為適合。具體地說(shuō)，只要是檸檬酸的酸酐、檸檬酸的水合物、檸檬酸鹽或檸檬酸鹽的水合物即可，具體地可以使用檸檬酸酐、檸檬酸一水合物、檸檬酸鈉、檸檬酸鉀等。其濃度優(yōu)選為0.01mol/L～3mol/L、更優(yōu)選為0.03mol/L～2mol/L、特別優(yōu)選為0.05mol/L～1mol/L的范圍。為0.01mol/L以上時(shí)，非電解鍍金層與金屬過(guò)濾器的密合性提高。超過(guò)3mol/L時(shí)，不僅效果不會(huì)提高，而且經(jīng)濟(jì)上也不優(yōu)選。在含檸檬酸的溶液中的浸漬可以是在70℃～95℃下進(jìn)行1～20分鐘。含檸檬酸的溶液在獲得發(fā)明效果的范圍內(nèi)還可添加在鍍覆液等中含有的還原劑、pH調(diào)節(jié)劑等緩沖劑，但還原劑、pH調(diào)節(jié)劑等優(yōu)選是少量的，最優(yōu)選是僅檸檬酸的水溶液。含檸檬酸的溶液的pH優(yōu)選為5～10、更優(yōu)選為6～9。作為pH調(diào)節(jié)劑，只要是酸或堿則無(wú)特別限定，作為酸可以使用鹽酸、硫酸、硝酸等，作為堿可舉出氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉等堿金屬或堿土類(lèi)金屬的氫氧化物溶液。如上所述，可以在不阻礙檸檬酸效果的范圍內(nèi)進(jìn)行使用。另外，當(dāng)在含檸檬酸的溶液中以100ml/L的高濃度含有硝酸時(shí)，與在僅含檸檬酸的溶液中進(jìn)行處理的情況相比，改善粘接性的效果降低。作為還原劑，只要是具有還原性則無(wú)特別限定，可舉出次磷酸、甲醛、二甲基胺硼烷、硼氫化鈉等。接著，進(jìn)行置換鍍金。置換鍍金有氰浴和非氰浴，考慮到環(huán)境負(fù)荷或殘存時(shí)的細(xì)胞毒性時(shí)，優(yōu)選非氰浴。作為非氰浴中所含的金鹽，可以舉出氯化金酸鹽、亞硫酸金鹽、硫代硫酸金鹽、硫代蘋(píng)果酸金鹽。金鹽可以?xún)H使用1種、也可組合使用2種以上。進(jìn)而，氰系的浴由于溶解金屬的效果過(guò)強(qiáng)，因此根據(jù)金屬不同，容易發(fā)生溶解而產(chǎn)生針孔。在如上所述充分地進(jìn)行前處理時(shí)，優(yōu)選是非氰系的鍍覆浴。作為金的供給源，特別優(yōu)選亞硫酸金。作為亞硫酸金，可以是亞硫酸金鈉、亞硫酸金鉀、亞硫酸金銨等。金濃度優(yōu)選為0.1g/L～5g/L的范圍。小于0.1g/L時(shí)金難以析出，超過(guò)5g/L時(shí)溶液變得易于分解。置換鍍金浴中可以添加有銨鹽或乙二胺四乙酸鹽作為金的絡(luò)合劑。作為銨鹽，可舉出氯化銨、硫酸銨，作為乙二胺四乙酸鹽，使用乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸鈉、乙二胺四乙酸鉀、乙二胺四乙酸銨。銨鹽的濃度優(yōu)選在7×10-3mol/L～0.4mol/L的范圍內(nèi)使用，當(dāng)銨鹽的濃度為該范圍外時(shí)，則有液體變得不穩(wěn)定的傾向。乙二胺四乙酸鹽的濃度優(yōu)選在2×10-3mol/L～0.2mol/L的范圍內(nèi)使用，當(dāng)銨鹽的濃度為該范圍外時(shí)，則有液體變得不穩(wěn)定的傾向。為了穩(wěn)定保持液體，可以添加有0.1g/L～50g/L的亞硫酸鹽。作為亞硫酸鹽，可舉出亞硫酸鈉、亞硫酸鉀、或亞硫酸銨等。作為pH調(diào)節(jié)劑，當(dāng)降低pH時(shí)優(yōu)選使用鹽酸或硫酸。另外，提高pH時(shí)優(yōu)選使用氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水。pH可以調(diào)整至6～7。為該范圍外時(shí)，會(huì)對(duì)液體的穩(wěn)定性或鍍覆的外觀造成不良影響。置換鍍覆優(yōu)選在液溫30度～80度下使用，為該范圍外時(shí)，會(huì)對(duì)液體的穩(wěn)定性或鍍覆的外觀造成不良影響。如上進(jìn)行置換鍍覆，但置換鍍覆中難以完全地覆蓋金屬。因此，接著進(jìn)行添加有還原劑的還原型鍍金。置換鍍覆的厚度優(yōu)選為0.02～0.1μm的范圍。作為還原型鍍金的金鹽，優(yōu)選亞硫酸金鹽及硫代硫酸鹽，其含量以金計(jì)優(yōu)選為1～10g/L的范圍。當(dāng)金的含量小于1g/L時(shí)，金的析出反應(yīng)降低，超過(guò)10g/L時(shí)，鍍覆液的穩(wěn)定性降低，同時(shí)因鍍覆液的帶出而導(dǎo)致金消耗量增多，因而不優(yōu)選。含量更優(yōu)選為2～5g/L。作為還原劑，可舉出次磷酸、甲醛、二甲基胺硼烷、硼氫化鈉等，但更優(yōu)選苯基化合物系還原劑。例如，可舉出苯酚、鄰甲酚、對(duì)甲酚、鄰乙基苯酚、對(duì)乙基苯酚、叔丁基苯酚、鄰氨基苯酚、對(duì)氨基苯酚、氫醌、兒茶酚、焦棓酚、甲基氫醌、苯胺、鄰苯二胺、對(duì)苯二胺、鄰甲苯胺、鄰乙基苯胺、對(duì)乙基苯胺等，可以使用其中的1種或2種以上。還原劑的含量?jī)?yōu)選是0.5g/L～50g/L。還原劑的含量小于0.5g/L時(shí)，有難以獲得實(shí)用的析出速度的傾向，超過(guò)50g/L時(shí)，有鍍覆液的穩(wěn)定性降低的傾向。還原劑的含量更優(yōu)選是2g/L～10g/L、特別優(yōu)選是2g/L～5g/L。非電解鍍金液還可以含有重金屬鹽。從促進(jìn)析出速度的觀點(diǎn)出發(fā)，重金屬鹽優(yōu)選是選自鉈鹽、鉛鹽、砷鹽、銻鹽、碲鹽及鉍鹽中的至少1個(gè)。作為鉈鹽，可舉出硫酸鉈鹽、氯化鉈鹽、氧化鉈鹽、硝酸鉈鹽等無(wú)機(jī)化合物鹽，丙二酸二鉈鹽等有機(jī)絡(luò)合物鹽，作為鉛鹽，可舉出硫酸鉛鹽、硝酸鉛鹽等無(wú)機(jī)化合物鹽，醋酸鹽等有機(jī)醋酸鹽。另外，作為砷鹽，可舉出亞砷鹽、砒酸鹽三氧化砷等無(wú)機(jī)化合物鹽或有機(jī)絡(luò)合物鹽，作為銻鹽，可舉出酒石酸銻鹽等有機(jī)絡(luò)合物鹽，氯化銻鹽類(lèi)、含氧硫酸銻鹽、三氧化銻等無(wú)機(jī)化合物鹽類(lèi)。作為碲鹽，可舉出亞碲酸鹽、碲酸鹽等無(wú)機(jī)化合物鹽或有機(jī)絡(luò)合物鹽，作為鉍鹽，可舉出硫酸鉍(III)、氯化鉍(III)、硝酸鉍(III)等無(wú)機(jī)化合物鹽，草酸鉍(III)等有機(jī)絡(luò)合物鹽。上述的重金屬鹽可使用1種或者更多，但其總添加量以鍍覆液總?cè)萘繛榛鶞?zhǔn)時(shí)優(yōu)選為1～100ppm、更優(yōu)選為1～10ppm。少于1ppm時(shí)，有析出速度提高效果不充分的情況，超過(guò)100ppm時(shí)，有鍍覆液穩(wěn)定性變差的傾向。非電解鍍金液還可以含有硫系化合物。通過(guò)在含苯基化合物系還原劑及重金屬鹽的非電解鍍金液中進(jìn)一步含有硫化合物，即便是液溫60～80℃左右的低溫，也可獲得充分的析出速度，不僅被膜外觀也良好，鍍覆液的穩(wěn)定性也變得特別優(yōu)異。作為硫系化合物，可舉出硫化物鹽、硫代氰酸鹽、硫脲化合物、硫醇化合物、硫醚化合物、二硫醚化合物、硫酮化合物、噻唑化合物、噻吩化合物等。作為硫化物鹽，例如可舉出硫化鉀、硫化鈉、多硫化鈉、多硫化鉀等，作為硫代氰酸鹽，可舉出硫代氰酸鈉、硫代氰酸鉀、二硫代氰酸鉀等，另外作為硫脲化合物，可舉出硫脲、甲基硫脲、二甲基硫脲等。作為硫醇化合物，可舉出1,1-二甲基乙硫醇、1-甲基-辛硫醇、十二烷基硫醇、1,2-乙二硫醇、硫代苯酚、鄰硫代甲酚、對(duì)硫代甲酚、鄰二巰基苯、間二巰基苯、對(duì)二巰基苯、硫代甘醇、硫二甘醇、巰基乙酸、二巰基乙酸、硫代蘋(píng)果酸、巰基丙酸、2-巰基苯并咪唑、2-巰基1-甲基咪唑、2-巰基-5-甲基苯并咪唑等。作為硫醚化合物，可舉出二乙基硫醚、二異丙基硫醚、乙基異丙基硫醚、二苯基硫醚、甲基苯基硫醚、繞丹寧、硫撐二乙酸、硫撐二丙酸等，作為二硫醚化合物，可舉出二甲基二硫醚、二乙基二硫醚、二丙基二硫醚等。進(jìn)而，作為硫酮化合物，可舉出氨基硫脲等，作為噻唑化合物，可舉出噻唑、苯并噻唑、2-巰基苯并噻唑、6-乙氧基-2-巰基苯并噻唑、2-氨基噻唑、2,1,3-苯并噻二唑、1,2,3-苯并噻二唑、(2-苯并噻唑硫代)醋酸、3-(2-苯并噻唑硫代)丙酸等，作為噻吩化合物，可舉出噻吩、苯并噻吩等。硫系化合物可以單獨(dú)使用，也可使用2種以上。硫系化合物的含量?jī)?yōu)選為1ppm～500ppm、更優(yōu)選為1ppm～30ppm、特別優(yōu)選為1ppm～10ppm。硫系化合物的含量低于1ppm時(shí)，析出速度降低，發(fā)生鍍覆均鍍不良，皮膜外觀惡化。超過(guò)500ppm時(shí)，濃度管理產(chǎn)生困難，鍍覆液變得不穩(wěn)定。非電解鍍金液中，優(yōu)選除了上述的金鹽、還原劑、重金屬鹽及硫系化合物之外還含有絡(luò)合劑、pH緩沖劑及金屬離子掩蔽劑中的至少1個(gè)，更優(yōu)選含有這些等的全部。本實(shí)施方式的非電解鍍金液中優(yōu)選含有絡(luò)合劑。具體地說(shuō)，可舉出亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽、硫代蘋(píng)果酸鹽等非氰系絡(luò)合劑。絡(luò)合劑的含量以鍍覆液的總?cè)萘繛榛鶞?zhǔn)，優(yōu)選為1g/L～200g/L。絡(luò)合劑的含量低于1g/L時(shí)，金屬絡(luò)合力降低、穩(wěn)定性下降。超過(guò)200g/時(shí)，雖然鍍覆穩(wěn)定性提高，但會(huì)在溶液中發(fā)生重結(jié)晶、經(jīng)濟(jì)上不適合。絡(luò)合劑的含量更優(yōu)選為20g/L～50g/L。非電解鍍金液中優(yōu)選含有pH緩沖劑。通過(guò)pH緩沖劑，具有將析出速度保持在一定值、使鍍覆液穩(wěn)定化的效果。緩沖劑也可混合多種。作為pH緩沖劑，可舉出磷酸鹽、醋酸鹽、碳酸鹽、硼酸鹽、檸檬酸鹽、硫酸鹽等，其中特別優(yōu)選硼酸、硫酸鹽。pH緩沖劑的含量以鍍覆液的總?cè)萘繛榛鶞?zhǔn)優(yōu)選為1g/L～100g/L。pH緩沖劑的含量低于1g/L時(shí)，沒(méi)有pH的緩沖效果，超過(guò)100g/L時(shí)，有發(fā)生重結(jié)晶化的危險(xiǎn)。更優(yōu)選的含量為20g/L～50g/L。鍍金液中優(yōu)選含有掩蔽劑。作為掩蔽劑，可以使用苯并三唑系化合物，作為苯并三唑系化合物，例如可舉出苯并三唑鈉、苯并三唑鉀、四氫苯并三唑、甲基苯并三唑、硝基苯并三唑等。金屬離子掩蔽劑的含量以鍍覆液的總?cè)萘繛榛鶞?zhǔn)優(yōu)選為0.5g/L～100g/L。金屬離子掩蔽劑的含量低于0.5g/L時(shí)，有雜質(zhì)的掩蔽效果小、無(wú)法確保充分的溶液穩(wěn)定性的傾向。而超過(guò)100g/L時(shí)，有在鍍覆液中發(fā)生重結(jié)晶化的情況。鑒于成本及效果，最優(yōu)選為2g/L～10g/L的范圍。鍍金液的pH優(yōu)選為5～10的范圍。鍍覆液的pH低于5時(shí)，有作為鍍覆液的絡(luò)合劑的亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽分解而產(chǎn)生毒性的亞硫酸氣體的危險(xiǎn)。pH超過(guò)10時(shí)，有鍍覆液的穩(wěn)定性降低的傾向。為了提高還原劑的析出效率、獲得快速的析出速度，非電解鍍金液的pH優(yōu)選為8～10的范圍。作為非電解鍍覆的方法，浸漬結(jié)束了置換鍍金的過(guò)濾器來(lái)進(jìn)行鍍金。鍍覆的液溫可以是50℃～95℃。低于50℃，則析出效率差，為95℃以上時(shí)，則溶液易于變得不穩(wěn)定。如此形成的最外層的鍍金層7優(yōu)選由99重量％以上純度的金構(gòu)成。鍍金層7的金的純度低于99重量％時(shí)，接觸部的細(xì)胞毒性提高。從提高可靠性的觀點(diǎn)出發(fā)，鍍金層7的金的純度更優(yōu)選為99.5重量％以上。另外，鍍金層7的厚度優(yōu)選為0.005～3μm、更優(yōu)選為0.05～1μm、進(jìn)一步優(yōu)選為0.1μm～0.5μm。通過(guò)使鍍金層7的厚度為0.005μm以上，可以一定程度地抑制鍍金層7的溶出。另一方面，由于即便超過(guò)3μm、其以上的效果也不會(huì)大大提高，因此從經(jīng)濟(jì)性的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為3μm以下。另外，還可以代替金屬過(guò)濾器而使用由高分子材料構(gòu)成的過(guò)濾器。作為過(guò)濾器的材質(zhì)使用高分子材料時(shí)，與金屬相比，成型加工性更為優(yōu)異，因此例如可以更為細(xì)致地控制貫通孔的形狀或孔徑。另外，作為由高分子材料構(gòu)成的過(guò)濾器的主成分采用聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、聚酰亞胺、聚四氟乙烯、聚氨酯、聚乳酸、聚對(duì)二甲苯等時(shí)，這些材料具有抗血栓性強(qiáng)的特征。由高分子材料構(gòu)成的過(guò)濾器的制造方法并無(wú)特別限定，例如可以使用徑跡蝕刻法。具體地說(shuō)，準(zhǔn)備對(duì)應(yīng)于過(guò)濾器厚度的厚度的高分子膜，對(duì)該高分子膜照射離子束、中粒子線或激光等，從而形成貫通孔。另外，還可根據(jù)需要在照射后利用化學(xué)蝕刻形成貫通孔。根據(jù)過(guò)濾器的形狀將形成有貫通孔的高分子膜進(jìn)行裁剪，從而可獲得由高分子材料構(gòu)成的過(guò)濾器。如此，本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲器件中使用的過(guò)濾器可以適當(dāng)變更。以上對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式進(jìn)行了說(shuō)明，但本發(fā)明的細(xì)胞捕獲方法、已捕獲特定細(xì)胞的器件的制造方法及含特定細(xì)胞的溶液的制造方法可以適當(dāng)變更。例如，在本發(fā)明一個(gè)方式的細(xì)胞捕獲方法中，可以是在流過(guò)液體的工序中、過(guò)濾器上的液面高度為30μm以上的方式。另外，可以是哺乳動(dòng)物的全血、血清或血漿為來(lái)自于牛、馬及人中的任一者的方式?？梢允遣溉閯?dòng)物的全血、血清或血漿為來(lái)自于人的方式。可以是含蛋白質(zhì)的水溶液以磷酸緩沖液為主成分的方式。可以是含蛋白質(zhì)的水溶液含有抗凝劑的方式。可以是抗凝劑為EDTA、肝素、檸檬酸鈉及氟化鈉中的任一者的方式?？梢允呛?xì)胞溶液中的細(xì)胞為人血液中存在的細(xì)胞的方式。可以是含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞含有人白細(xì)胞、血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞、循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞及癌干細(xì)胞中的任一個(gè)的方式?？梢允沁^(guò)濾器為使用聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯或聚對(duì)二甲苯進(jìn)行成型加工而成的方式?？梢允沁^(guò)濾器表面為金、鉑、鈀或它們的合金的方式。可以是過(guò)濾器以鎳、銅或鈀為主成分、且其表面上鍍覆有金、鉑、鈀或它們的合金的方式?？梢允沁^(guò)濾器的最外層為金的方式?？梢允沁^(guò)濾器的最外層是厚度為0.05μm～1μm的貴金屬鍍覆的方式。可以是形成過(guò)濾器的貫通孔的形狀為圓、橢圓、圓角長(zhǎng)方形、長(zhǎng)方形、正方形中的任一者的方式。可以是形成過(guò)濾器的貫通孔的形狀包含長(zhǎng)方形及圓角長(zhǎng)方形中的任一個(gè)以上的形狀、且其短邊的長(zhǎng)度為5μm～15μm的方式?？梢允沁^(guò)濾器的膜厚為3μm～50μm的方式?？梢允撬鲐炌椎钠骄_(kāi)口率為0.1％～50％的方式。另外，本發(fā)明一個(gè)方式的已捕獲特定細(xì)胞的器件的制造方法中，可以是在所述流過(guò)液體的工序中、過(guò)濾器上的液面高度為30μm以上的方式。這里，可以是哺乳動(dòng)物的全血、血清或血漿為來(lái)自于牛、馬及人中的任一者的方式?？梢允遣溉閯?dòng)物的全血、血清或血漿為來(lái)自于人的方式。可以是含蛋白質(zhì)的水溶液以磷酸緩沖液為主成分的方式。可以是含蛋白質(zhì)的水溶液含有抗凝劑的方式?？梢允强鼓齽镋DTA、肝素、檸檬酸鈉及氟化鈉中的任一者的方式。可以是含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞為人血液中存在的細(xì)胞的方式?？梢允呛?xì)胞溶液中的細(xì)胞含有人白細(xì)胞、血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞、循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞及癌干細(xì)胞中的任一個(gè)的方式?？梢允沁^(guò)濾器為使用聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯或聚對(duì)二甲苯進(jìn)行成型加工而成的方式?？梢允沁^(guò)濾器表面為金、鉑、鈀或它們的合金的方式?？梢允沁^(guò)濾器以鎳、銅或鈀為主成分、且其表面上鍍覆有金、鉑、鈀或它們的合金的方式?？梢允沁^(guò)濾器的最外層為鍍金的方式?？梢允沁^(guò)濾器的最外層是厚度為0.05μm～1μm的貴金屬鍍覆的方式?？梢允切纬蛇^(guò)濾器的貫通孔的形狀為圓、橢圓、圓角長(zhǎng)方形、長(zhǎng)方形、正方形中的任一者的方式?？梢允切纬蛇^(guò)濾器的貫通孔的形狀包含長(zhǎng)方形及圓角長(zhǎng)方形中的任一個(gè)以上的形狀、且其短邊的長(zhǎng)度為5μm～15μm的方式?？梢允沁^(guò)濾器的膜厚為3μm～50μm的方式。可以是所述貫通孔的平均開(kāi)口率為0.1％～50％的方式。另外，本發(fā)明一個(gè)方式的含特定細(xì)胞的溶液的制造方法中，可以是在所述流過(guò)液體的工序中、過(guò)濾器上的液面高度為30μm以上的方式。這里，可以是含細(xì)胞溶液的溶劑由含有哺乳動(dòng)物的全血、血清、血漿或來(lái)自于它們的蛋白質(zhì)的水溶液構(gòu)成的方式?？梢允遣溉閯?dòng)物的全血、血清或血漿為來(lái)自于牛、馬及人中的任一者的方式。可以是哺乳動(dòng)物的全血、血清或血漿為來(lái)自于人的方式?？梢允呛鞍踪|(zhì)的水溶液以磷酸緩沖液為主成分的方式。可以是含蛋白質(zhì)的水溶液含有抗凝劑的方式。可以是抗凝劑為EDTA、肝素、檸檬酸鈉及氟化鈉中的任一者的方式。可以是含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞為人血液中存在的細(xì)胞的方式。可以是含細(xì)胞溶液中的細(xì)胞含有人白細(xì)胞、血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞、循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞及癌干細(xì)胞中的任一個(gè)的方式?？梢允沁^(guò)濾器為使用高分子或金屬進(jìn)行成型加工而成的方式。可以是過(guò)濾器為使用聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯或聚對(duì)二甲苯進(jìn)行成型加工而成的方式?？梢允沁^(guò)濾器表面為金、鉑、鈀或它們的合金的方式?？梢允沁^(guò)濾器以鎳、銅或鈀為主成分、且其表面上鍍覆有金、鉑、鈀或它們的合金的方式?？梢允沁^(guò)濾器的最外層為鍍金的方式。可以是過(guò)濾器的最外層是厚度為0.05μm～1μm的貴金屬鍍覆的方式?？梢允切纬蛇^(guò)濾器的貫通孔的形狀為圓、橢圓、圓角長(zhǎng)方形、長(zhǎng)方形、正方形中的任一者的方式?？梢允切纬蛇^(guò)濾器的貫通孔的形狀包含長(zhǎng)方形及圓角長(zhǎng)方形中的任一個(gè)以上的形狀、且其短邊的長(zhǎng)度為5μm～15μm的方式?？梢允沁^(guò)濾器的膜厚為3μm～50μm的方式?？梢允撬鲐炌椎钠骄_(kāi)口率為0.1％～50％的方式?？梢允菍?dǎo)入所述細(xì)胞溶液、所述處理液的速度為50μL/min～1000μL/min的方式。實(shí)施例(評(píng)價(jià)例1)將感光性樹(shù)脂組合物(PHOTECRD-1225：厚度為25μm、日立化成株式會(huì)社制)層壓在250mm見(jiàn)方的基板(MCL-E679F：在MCL的表面上貼有可剝離銅箔的基板、日立化成株式會(huì)社制)的單面上。在層壓條件是軋輥溫度為90℃、壓力為0.3MPa、傳送帶速度為2.0m/分鐘下來(lái)進(jìn)行。接著，將按照光的透過(guò)部形狀為圓角長(zhǎng)方形、尺寸為7.8(短孔徑)×100(長(zhǎng)孔徑)μm、開(kāi)口率為6.7％的方式設(shè)計(jì)的玻璃掩模靜置在基板的光致抗蝕劑層壓面上。本實(shí)施例中，使用朝向相同方向的圓角長(zhǎng)方形在長(zhǎng)軸及短軸方向上以一定間距整齊排列的玻璃掩模。接著，在600mmHg以下的真空下，自載置有玻璃掩模的基板上部，利用紫外線照射裝置照射曝光量為30mJ/cm2的紫外線。接著，利用1.0％碳酸鈉水溶液進(jìn)行顯影，在基板上形成長(zhǎng)方形的光致抗蝕劑垂直豎起的抗蝕劑層。對(duì)該帶有抗蝕劑的基板的銅露出部分，在調(diào)整至pH達(dá)到4.5的鎳鍍覆液中進(jìn)行溫度為55℃、約20分鐘、約20μm的鍍覆。將鎳鍍覆液的組成示于表1。表1鍍覆液組成濃度(g/L)氨基磺酸鎳450氯化鎳5硼酸30接著，將所得鍍鎳層與基板的可剝離銅箔一起剝離，將該可剝離銅箔通過(guò)溫度40℃下約120分鐘、攪拌處理下的利用藥液的化學(xué)溶解(MECBrightSF-5420B、MEC株式會(huì)社)除去，從而將成為金屬過(guò)濾器的自支撐膜(20mm×20mm)取出。最后，將殘留在自支撐膜內(nèi)的光致抗蝕劑利用溫度60℃下約40分鐘、超聲波處理下的抗蝕劑剝離(P3Poleve、Henkel)除去，制作具有微細(xì)貫通孔的金屬過(guò)濾器。由此，制作沒(méi)有皺褶、折痕、傷痕、彎曲等傷害、具有充分精度的貫通孔的金屬過(guò)濾器。接著，在酸性脫脂液Z-200(Worldmetal制：商品名)中浸漬金屬過(guò)濾器，進(jìn)行金屬過(guò)濾器上的有機(jī)物的除去(40℃、3分鐘)。水洗后，利用從作為非氰系非電解鍍Au的HGS-100(日立化成制：商品名)中除去了作為金供給源的亞硫酸金之后的溶液，在80℃、10分鐘的條件下進(jìn)行置換鍍金前處理。接著，在作為非氰系的置換型非電解鍍Au的HGS-100(日立化成制商品名)中于80℃下浸漬20分鐘，進(jìn)行置換鍍金。置換鍍金的厚度為0.05μm。水洗后，在作為非氰系還原型非電解鍍Au的HGS-5400(日立化成制商品名)中于65℃下浸漬10分鐘，進(jìn)行鍍金，并進(jìn)行水洗后干燥。鍍金的總厚度為0.2μm。由以上制作評(píng)價(jià)例1的過(guò)濾器。(評(píng)價(jià)例2)除了代替電鍍Ni而使用電鍍鈀之外，與評(píng)價(jià)例1同樣地制作評(píng)價(jià)例2的過(guò)濾器。鈀電鍍液使用PARATEXLF-5(日本ELECTROPLATINGENGINEERS株式會(huì)社：商品名)。在鍍覆溫度為50℃、電流密度為1A/dm2的條件下進(jìn)行鍍覆，在約4.2分鐘/μm的條件下進(jìn)行電鍍至達(dá)到約20μm，除此之外在與評(píng)價(jià)例1相同的條件下進(jìn)行鍍覆。(評(píng)價(jià)例3)代替MCL的可剝離銅箔而使用可剝離鎳箔(電鍍后將鎳箔除去)。進(jìn)而，代替電鍍Ni而使用電鍍銅，除此之外在與評(píng)價(jià)例1同樣的表面上制作評(píng)價(jià)例3的過(guò)濾器。銅電鍍液使用MICROFABCu200(日本ELECTROPLATINGENGINEERS株式會(huì)社：商品名)。在鍍覆溫度為25℃、電流密度為3A/dm2的條件下進(jìn)行鍍覆，在約1.5分鐘/μm的條件下進(jìn)行電鍍至達(dá)到約20μm，除此之外在與評(píng)價(jià)例1相同的條件下進(jìn)行鍍覆。(評(píng)價(jià)例4)除了不進(jìn)行鍍金之外，與評(píng)價(jià)例1同樣地制作評(píng)價(jià)例4的過(guò)濾器。(評(píng)價(jià)例5)代替2階段的鍍金而進(jìn)行1階段的非電解鍍鈀，除此之外與評(píng)價(jià)例1同樣地制作評(píng)價(jià)例5的過(guò)濾器。非電解鈀鍍覆液使用PALLADEXSTRIKE3(日本ELECTROPLATINGENGINEERS株式會(huì)社制：商品名)。鈀的厚度為0.1μm。(評(píng)價(jià)例6)代替2階段的鍍金而進(jìn)行1階段的非電解鍍鉑，除此之外與評(píng)價(jià)例1同樣地制作評(píng)價(jià)例6的過(guò)濾器。非電解鉑鍍覆液使用RectoresPt100(日本ELECTROPLATINGENGINEERS株式會(huì)社制：商品名)。鉑的厚度為0.1μm。(實(shí)驗(yàn))(非小細(xì)胞癌細(xì)胞株的制備)在含有10％胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培養(yǎng)基中，在37℃、5％CO2條件下靜置培養(yǎng)非小細(xì)胞癌細(xì)胞株NCI-H358細(xì)胞。利用胰酶處理，將細(xì)胞從培養(yǎng)皿中剝離、回收，使用磷酸緩沖液(Phosphatebufferedsaline、PBS)進(jìn)行洗滌后，使用10μMCellTrackerRedCMTPX(LifeTechnologiesJapan株式會(huì)社)在37℃下使其靜置30分鐘，從而將NCI-H358細(xì)胞染色。之后，使用PBS洗滌，利用胰酶處理在37℃下靜置3分鐘，從而使細(xì)胞塊解散。之后，在培養(yǎng)基中停止胰酶處理，使用PBS洗滌后，混懸在含有2mMEDTA及0.5％胎牛血清白蛋白(BSA)的PBS(以下稱(chēng)作2mMEDTA-0.5％BSA-PBS)中，獲得制備用的混懸液。其中，PBS是磷酸緩沖生理鹽水，使用光純藥工業(yè)制產(chǎn)品代碼166-23555。BSA使用SIGMA-ALDRICH公司制(產(chǎn)品名：Albuminfrombovineserum-Lyophilizedpowder，BioReagentforcellculture)的產(chǎn)品。EDTA使用2Na(乙二胺-N,N,N’,N’-4醋酸二鈉鹽二水合物)(和光純藥工業(yè)制產(chǎn)品代碼345-01865)。＜一次也不抽取液體地連續(xù)進(jìn)行處理時(shí)的細(xì)胞形態(tài)評(píng)價(jià)＞(實(shí)施例1)使用將評(píng)價(jià)例1的過(guò)濾器安裝在盒體(相當(dāng)于本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲器件)中的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接與對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器。向該貯液器依次投入血液樣品或試劑，從而能夠易于連續(xù)地進(jìn)行CTC的捕獲、染色、洗滌等操作。在CTC回收裝置中導(dǎo)入血液樣品以將癌細(xì)胞富集。作為血液樣品，使用在采血至含EDTA真空采血管的健康者血液中含有相對(duì)于每1mL血液為1000個(gè)的癌細(xì)胞的樣品。作為癌細(xì)胞，使用上述的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株NCI-H358。另外，血液使用采血后6小時(shí)的血液。首先，在貯液器中導(dǎo)入2mMEDTA-0.5％BSA(牛血清白蛋白)-PBS(Gibco制PBS，pH為7.4)1ml(以下記為洗滌液)，將過(guò)濾器上充滿，放置10分鐘。接著，使用蠕動(dòng)泵以流速200μL/分鐘開(kāi)始送液。之后，投入血液3ml。約5分鐘后，向貯液器導(dǎo)入9mL的洗滌液，進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。接著，將在洗滌液中溶解有4％PFA的溶液放入盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。洗滌后，將在洗滌液中溶解有0.2％TritonX的溶液放入到盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。進(jìn)而，在10分鐘后將泵流速改變?yōu)?0μL/分鐘，向貯液器內(nèi)導(dǎo)入600μL的細(xì)胞染色液(Hoechst33342：30μL、洗滌緩沖液：300ml)，對(duì)過(guò)濾器上的癌細(xì)胞或白細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。對(duì)捕獲在過(guò)濾器上的細(xì)胞進(jìn)行30分鐘的染色之后，向貯液器導(dǎo)入1mL的2mMEDTA-0.5％BSA-PBS進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。接著，使用裝備有計(jì)算機(jī)控制式電動(dòng)臺(tái)及冷卻數(shù)碼相機(jī)(DP70、奧林巴斯株式會(huì)社)的熒光顯微鏡(BX61、奧林巴斯株式會(huì)社)，進(jìn)行過(guò)濾器上的癌細(xì)胞及白細(xì)胞的攝像。為了觀察Hoechst33342及CellTrackerRedCMTPX來(lái)源的熒光，分別使用WU及WIG濾波器(奧林巴斯株式會(huì)社)獲取圖像。圖像獲取及解析軟件使用LuminaVision(三谷商事株式會(huì)社)。進(jìn)行所拍攝到的細(xì)胞的圖像解析，分類(lèi)成卡住在孔內(nèi)的四邊形細(xì)胞和在過(guò)濾器上保持圓形的細(xì)胞這2種。(實(shí)施例2)除了使血液的導(dǎo)入速度以400μL/min進(jìn)行之外，在與實(shí)施例1相同的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例3)除了使血液的導(dǎo)入速度以600μL/min進(jìn)行之外，在與實(shí)施例1相同的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例4)除了使血液的導(dǎo)入速度以800μL/min進(jìn)行之外，在與實(shí)施例1相同的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(比較例1)首先，在貯液器中導(dǎo)入洗滌液1ml(以下記為洗滌液)，將過(guò)濾器上充滿，放置10分鐘。接著，使用蠕動(dòng)泵以流速200μL/分鐘開(kāi)始送液。之后，投入血液3ml。約5分鐘后，向貯液器導(dǎo)入9mL的洗滌液，進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。之后利用與實(shí)施例1相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將細(xì)胞染色之后，以200μL/min的速度將細(xì)胞捕獲器件(盒體)內(nèi)的液體抽取，利用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝。進(jìn)行所拍攝到的細(xì)胞的圖像解析，分類(lèi)成卡住在孔內(nèi)的細(xì)胞和保持圓形的細(xì)胞這2種。(比較例2)利用與比較例1相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以50μL/min的速度抽取細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體，用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝。(比較例3)利用與比較例1相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以2μL/min的速度抽取細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體，用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝。＜在第1次～第n次的流過(guò)液體的工序之間、在一次性將液體完全抽取之后再次導(dǎo)入液體時(shí)的細(xì)胞形態(tài)評(píng)價(jià)＞(比較例4)利用與實(shí)施例1相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，當(dāng)染色液導(dǎo)入后的洗滌結(jié)束之后，以50μL/min的速度將細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體完全地抽取。將液體完全地抽取之后，再次從貯液器以200μ/min的速度導(dǎo)入洗滌液。之后，利用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝，進(jìn)行所拍攝到的細(xì)胞的圖像解析，分類(lèi)成卡住在孔內(nèi)的細(xì)胞和保持圓形的細(xì)胞這2種。(結(jié)果)首先，將實(shí)施例1的捕獲后的細(xì)胞的照片示于圖6。實(shí)施例1中，可以確認(rèn)細(xì)胞為圓形，細(xì)胞的粒徑也是理論平均粒徑的18μm左右。由此教示了：通過(guò)在細(xì)胞捕獲后不抽取液體地保存細(xì)胞，可以維持細(xì)胞的形態(tài)，可以在不卡住在孔內(nèi)的情況下取出。將實(shí)施例4的捕獲后的細(xì)胞的照片示于圖7。與實(shí)施例1同樣，可以確認(rèn)細(xì)胞為圓形，細(xì)胞的粒徑也是理論粒徑的18μm左右。將比較例1的捕獲后的細(xì)胞的照片示于圖8。比較例1中，將液體抽取后，捕獲在過(guò)濾器上的細(xì)胞由于液體的吸引壓力，細(xì)胞嵌入在過(guò)濾器的貫通孔中，確認(rèn)了細(xì)胞變形為四方形而卡住在孔徑中的樣子。將比較例4的捕獲后的細(xì)胞的照片示于圖9。與比較例1同樣，確認(rèn)了細(xì)胞變形為四方形、卡住在孔徑中的樣子。接著，將對(duì)各實(shí)施例1～6及比較例1～4進(jìn)行分類(lèi)為卡住在孔內(nèi)的細(xì)胞和保持圓形的細(xì)胞這2種的結(jié)果示于表2。表2如表2所示，未進(jìn)行液體的抽取的實(shí)施例1～6中，95％以上的細(xì)胞為圓形、四邊形的細(xì)胞僅為5％以下。與其相對(duì)，進(jìn)行了液體的抽取的比較例1、2中，98％以上的細(xì)胞卡住在孔內(nèi)、為四邊形。另外，比較例3中，在以2μL/min的低速度抽取液體時(shí)，80％的細(xì)胞為四邊形。進(jìn)而，比較例4中抽取液體之后再次導(dǎo)入液體時(shí)，全部的細(xì)胞也為四邊形。當(dāng)評(píng)價(jià)對(duì)象的特定細(xì)胞(例如CTC)卡住在孔內(nèi)時(shí)，在對(duì)特定的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)時(shí)難以進(jìn)行形態(tài)學(xué)判斷，有導(dǎo)致誤診的危險(xiǎn)。另外，由于卡住在孔內(nèi)，難以將特定的細(xì)胞從過(guò)濾器上取出，難以進(jìn)行細(xì)胞的解析、診斷。由此教示了：通過(guò)至達(dá)到最終工序、一次也不對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取、而是連續(xù)地進(jìn)行，可以穩(wěn)定地保持細(xì)胞的形狀。＜改變過(guò)濾器上的液體的液面高度時(shí)的細(xì)胞形態(tài)評(píng)價(jià)＞(實(shí)施例7)使用與實(shí)施例1相同的方法進(jìn)行細(xì)胞的捕獲、染色、洗滌等操作。將距離過(guò)濾器表面的液體高度設(shè)定為50μm，進(jìn)行液體置換的操作。距離過(guò)濾器表面的液面高度由過(guò)濾器表面積和質(zhì)量算出，將液面設(shè)定為50μm。液面的高度使用下式算出。液面的高度(μm)＝體積(μm3)÷表面積(μm2)體積(μm3)＝質(zhì)量(μg)÷比重通過(guò)與實(shí)施例1相同的操作，使用顯微鏡進(jìn)行所拍攝到的細(xì)胞的圖像解析，分類(lèi)為卡住在孔內(nèi)的四邊形細(xì)胞和在過(guò)濾器上保持圓形的細(xì)胞這2種。(實(shí)施例8)使用與實(shí)施例7相同的方法，將距離過(guò)濾器表面的液體的高度設(shè)定為30μm，進(jìn)行液體置換的操作。距離過(guò)濾器表面的液面高度由過(guò)濾器表面積和質(zhì)量算出，將液面設(shè)定為30μm。(實(shí)施例9)使用與實(shí)施例7相同的方法，將距離過(guò)濾器表面的液體的高度設(shè)定為20μm，進(jìn)行液體置換的操作。距離過(guò)濾器表面的液面高度由過(guò)濾器表面積和質(zhì)量算出，將液面設(shè)定為20μm。(實(shí)施例10)使用與實(shí)施例7相同的方法，將距離過(guò)濾器表面的液體的高度設(shè)定為10μm，進(jìn)行液體置換的操作的處理。距離過(guò)濾器表面的液面高度由過(guò)濾器表面積和質(zhì)量算出，將液面設(shè)定為10μm。(比較例5)使用與實(shí)施例7相同的方法，將距離過(guò)濾器表面的液體的高度設(shè)定為0μm，進(jìn)行液體置換的操作的處理。交換液體時(shí)，將液體從細(xì)胞捕獲器件內(nèi)全部抽取后進(jìn)行處理，從而將液面的高度設(shè)定為0μm。(結(jié)果)將實(shí)施例7～實(shí)施例10及比較例5的結(jié)果示于表3。表3如表3所示，在將液面的高度設(shè)定為50μm時(shí)，98％以上的細(xì)胞為圓形、四邊形的細(xì)胞為2％以下。而通過(guò)將液面的高度降低至30μm、20μm、10μm，圓形細(xì)胞的比例降低、四邊形細(xì)胞的比例提高。在比較例4的液面高度為0μm時(shí)，全部的細(xì)胞卡住在孔內(nèi)并變形。由此顯示了，可以使一半以上的細(xì)胞不變形地保持圓形的液面高度需要為30μm以上。另外還確認(rèn)到，當(dāng)使液面的高度為50μm以上時(shí)，可以進(jìn)一步地提高細(xì)胞不發(fā)生變形地保持圓形的比例。＜將捕獲在過(guò)濾器上的細(xì)胞取出的實(shí)驗(yàn)1：利用逆洗滌進(jìn)行的取出(排出流路→導(dǎo)入流路)＞(實(shí)施例11)使用將評(píng)價(jià)例1的過(guò)濾器安裝在盒體(相當(dāng)于本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲器件)中的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接于對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器。向該貯液器中依次投入血液樣品或試劑，從而可以易于連續(xù)地進(jìn)行CTC的捕獲、染色、洗滌等操作。在CTC回收裝置中導(dǎo)入血液樣品，將癌細(xì)胞富集。作為血液樣品，使用在采血至含EDTA真空采血管的健康者血液中含有相對(duì)于每1mL血液為1000個(gè)的癌細(xì)胞的樣品。作為癌細(xì)胞，使用上述的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株NCI-H358。另外，血液使用采血后6小時(shí)的血液。首先，在貯液器中導(dǎo)入2mMEDTA-0.5％BSA(牛血清白蛋白)-PBS(Gibco制PBS，pH為7.4)1ml(以下記為洗滌液)，將過(guò)濾器上充滿，放置10分鐘。接著，使用蠕動(dòng)泵以流速200μL/分鐘開(kāi)始送液。之后，投入血液3ml。約5分鐘后，向貯液器導(dǎo)入9mL的洗滌液，進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。接著，將在洗滌液中溶解有4％PFA的溶液放入盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。洗滌后，將在洗滌液中溶解有0.2％TritonX的溶液放入到盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。進(jìn)而在10分鐘后，將泵流速改變?yōu)?0μL/分鐘，向貯液器內(nèi)導(dǎo)入600μL的細(xì)胞染色液(Hoechst33342：30μL、洗滌緩沖液：300ml)，對(duì)過(guò)濾器上的癌細(xì)胞或白細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。對(duì)捕獲在過(guò)濾器上的細(xì)胞進(jìn)行30分鐘的染色之后，向貯液器導(dǎo)入1mL的2mMEDTA-0.5％BSA-PBS進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。接著，使用裝備有計(jì)算機(jī)控制式電動(dòng)臺(tái)及冷卻數(shù)碼相機(jī)(DP70、奧林巴斯株式會(huì)社)的熒光顯微鏡(BX61、奧林巴斯株式會(huì)社)，進(jìn)行過(guò)濾器上的癌細(xì)胞及白細(xì)胞的攝像。為了觀察Hoechst33342及CellTrackerRedCMTPX來(lái)源的熒光，分別使用WU及WIG濾波器(奧林巴斯株式會(huì)社)獲取圖像。圖像獲取及解析軟件使用LuminaVision(三谷商事株式會(huì)社)。進(jìn)行所拍攝到的細(xì)胞的圖像解析，對(duì)過(guò)濾器上所捕獲的癌細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。將結(jié)束了拍攝的盒體(相當(dāng)于本實(shí)施方式的已捕獲特定細(xì)胞的器件)的閥門(mén)全部關(guān)閉之后，進(jìn)行重組以使得液體可以從排出流路23(參照?qǐng)D2)流至導(dǎo)入流路25(參照?qǐng)D2)。在排出流路23側(cè)連接注射器泵TE-351(Terumo株式會(huì)社)，以200μL/min的速度進(jìn)行6分鐘的送液(逆洗滌)。將自導(dǎo)入流路排出的溶液約1ml回收到離心沉淀管內(nèi)。使用安裝有新盒體的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)，將利用逆洗滌回收的含細(xì)胞溶液導(dǎo)入到注射器中，從而在過(guò)濾器上進(jìn)行細(xì)胞的再捕獲，進(jìn)行所回收到的細(xì)胞數(shù)的計(jì)數(shù)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接于對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器。使用同樣的熒光顯微鏡對(duì)再捕獲到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算逆洗滌后的癌細(xì)胞的捕獲數(shù)÷最初捕獲到的癌細(xì)胞＝通過(guò)逆洗滌獲得的癌細(xì)胞的回收率。(實(shí)施例12)除了使逆洗滌時(shí)的速度以400μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例11相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例13)除了使逆洗滌時(shí)的速度以800μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例11相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例14)在進(jìn)行利用逆洗滌的送液之前，使用Voltex(F202A0175)(VELPScientifica制)對(duì)已捕獲特定細(xì)胞的器件施加5秒鐘的200rpm的振動(dòng)，除此之外，使用與實(shí)施例11相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例15)除了使逆洗滌時(shí)的速度以400μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例14相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例16)除了使逆洗滌時(shí)的速度以800μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例14相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(比較例6)細(xì)胞染色結(jié)束之后，以50μL/min的速度對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取，利用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝，除此之外利用與實(shí)施例11相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(比較例7)細(xì)胞染色結(jié)束之后，以50μL/min的速度對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取，利用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝，除此之外利用與實(shí)施例14相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(結(jié)果)將實(shí)施例11～實(shí)施例16及比較例6、7的結(jié)果示于表4。表4由表4的結(jié)果可知，在殘留有細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體的狀態(tài)下進(jìn)行逆洗滌時(shí)(實(shí)施例11～16)，逆洗滌后的細(xì)胞的回收率為50％以上。進(jìn)而，在逆洗滌前施加振動(dòng)時(shí)(實(shí)施例14～16)，相比較于不施加振動(dòng)的情況，細(xì)胞的回收率提高。而在將細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體全部抽取的狀態(tài)下進(jìn)行逆洗滌時(shí)(比較例6、7)，利用逆洗滌獲得的回收率為低達(dá)10～30％的結(jié)果。由此教示了：進(jìn)行逆洗滌時(shí)，在不對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取的狀態(tài)下進(jìn)行逆洗滌的重要性。＜將過(guò)濾器上捕獲到的細(xì)胞取出的實(shí)驗(yàn)2：利用逆洗滌進(jìn)行的取出(導(dǎo)入流路1→導(dǎo)入流路2)＞(實(shí)施例17)使用將評(píng)價(jià)例1的過(guò)濾器安裝在盒體(相當(dāng)于本實(shí)施方式的細(xì)胞捕獲器件)中的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接于對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器。向該貯液器中依次投入血液樣品或試劑，從而可以易于連續(xù)地進(jìn)行CTC的捕獲、染色、洗滌等操作。在CTC回收裝置中導(dǎo)入血液樣品，將癌細(xì)胞富集。作為血液樣品，使用在采血至含EDTA真空采血管的健康者血液中含有相對(duì)于每1mL血液為1000個(gè)的癌細(xì)胞的樣品。作為癌細(xì)胞，使用上述的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株NCI-H358。另外，血液使用采血后6小時(shí)的血液。首先，在貯液器中導(dǎo)入2mMEDTA-0.5％BSA(牛血清白蛋白)-PBS(Gibco制PBS，pH為7.4)1ml(以下記為洗滌液)，將過(guò)濾器上充滿，放置10分鐘。接著，使用蠕動(dòng)泵以流速200μL/分鐘開(kāi)始送液。之后，投入血液3ml。約5分鐘后，向貯液器導(dǎo)入9mL的洗滌液，進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。接著，將在洗滌液中溶解有4％PFA的溶液放入盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。洗滌后，將在洗滌液中溶解有0.2％TritonX的溶液放入到盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。進(jìn)而在10分鐘后，將泵流速改變?yōu)?0μL/分鐘，向貯液器內(nèi)導(dǎo)入600μL的細(xì)胞染色液(Hoechst33342：30μL、洗滌緩沖液：300ml)，對(duì)過(guò)濾器上的癌細(xì)胞或白細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。對(duì)捕獲在過(guò)濾器上的細(xì)胞進(jìn)行30分鐘的染色之后，向貯液器導(dǎo)入1mL的2mMEDTA-0.5％BSA-PBS進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。接著，使用裝備有計(jì)算機(jī)控制式電動(dòng)臺(tái)及冷卻數(shù)碼相機(jī)(DP70、奧林巴斯株式會(huì)社)的熒光顯微鏡(BX61、奧林巴斯株式會(huì)社)，進(jìn)行過(guò)濾器上的癌細(xì)胞及白細(xì)胞的攝像。為了觀察Hoechst33342及CellTrackerRedCMTPX來(lái)源的熒光，分別使用WU及WIG濾波器(奧林巴斯株式會(huì)社)獲取圖像。圖像獲取及解析軟件使用LuminaVision(三谷商事株式會(huì)社)。進(jìn)行所拍攝到的細(xì)胞的圖像解析，對(duì)過(guò)濾器上所捕獲到的癌細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。將結(jié)束了拍攝的盒體(相當(dāng)于本實(shí)施方式的已捕獲特定細(xì)胞的器件)的閥門(mén)全部關(guān)閉之后，進(jìn)行重組以使得液體可以從排出流路23(參照?qǐng)D2)流至導(dǎo)入流路25(參照?qǐng)D2)中。在排出流路23側(cè)連接注射器泵TE-351(Terumo株式會(huì)社)，以200μL/min的速度進(jìn)行6分鐘的送液(逆洗滌)。將自導(dǎo)入流路排出的溶液約1ml回收到離心沉淀管內(nèi)。使用安裝有新盒體的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)，將利用逆洗滌回收的含細(xì)胞溶液導(dǎo)入到注射器中，從而在過(guò)濾器上進(jìn)行細(xì)胞的再捕獲，進(jìn)行所回收到的細(xì)胞數(shù)的計(jì)數(shù)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接于對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器上。使用同樣的熒光顯微鏡對(duì)再捕獲到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算逆洗滌后的癌細(xì)胞的捕獲數(shù)÷最初捕獲到的癌細(xì)胞＝通過(guò)逆洗滌獲得的癌細(xì)胞的回收率。(實(shí)施例18)除了使逆洗滌時(shí)的速度以400μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例18相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例19)除了使逆洗滌時(shí)的速度以800μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例18相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例20)在進(jìn)行利用逆洗滌的送液之前，使用Voltex(F202A0175)(VELPScientifica制)對(duì)已捕獲特定細(xì)胞的器件施加5秒鐘的200rpm的振動(dòng)，除此之外，使用與實(shí)施例18相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例21)除了使逆洗滌時(shí)的速度以400μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例21相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(實(shí)施例22)除了使逆洗滌時(shí)的速度以800μL/min進(jìn)行之外，使用與實(shí)施例21相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(比較例8)細(xì)胞染色結(jié)束之后，以50μL/min的速度對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取，利用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝，除此之外利用與實(shí)施例17相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(比較例9)細(xì)胞染色結(jié)束之后，以50μL/min的速度對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取，利用熒光顯微鏡進(jìn)行拍攝，除此之外利用與實(shí)施例20相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(結(jié)果)將實(shí)施例17～實(shí)施例22及比較例8、9的結(jié)果示于表5。表5由表5的結(jié)果可知，在殘留有細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體的狀態(tài)下進(jìn)行逆洗滌時(shí)(實(shí)施例17～22)，逆洗滌后的細(xì)胞的回收率為50％以上。進(jìn)而，在逆洗滌前施加振動(dòng)時(shí)(實(shí)施例20～22)，相比較于不施加振動(dòng)的情況，細(xì)胞的回收率提高。而在將細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體全部抽取的狀態(tài)下進(jìn)行逆洗滌時(shí)(比較例8、9)，利用逆洗滌獲得的回收率為低的結(jié)果。由此教示了：進(jìn)行逆洗滌時(shí)，在不對(duì)細(xì)胞捕獲器件內(nèi)的液體進(jìn)行抽取的狀態(tài)下進(jìn)行逆洗滌的重要性。＜將過(guò)濾器上捕獲到的細(xì)胞取出的實(shí)驗(yàn)3：利用液體采集(吸引)進(jìn)行的細(xì)胞回收方法(開(kāi)放型筐體)＞(實(shí)施例23)將評(píng)價(jià)例1的過(guò)濾器安裝在圖1的筐體上，使用蠕動(dòng)泵(SJ-1215)(ATTO株式會(huì)社)進(jìn)行液體的吸引，在過(guò)濾器上進(jìn)行細(xì)胞的捕獲。血液的導(dǎo)入為在2個(gè)注射器上連接硅制管，使用T形活塞(TS-TL1K)(Terumo公司制)分別從不同的注射器進(jìn)行血液和洗滌溶液的導(dǎo)入。首先，在貯液器中導(dǎo)入2mMEDTA-0.5％BSA(牛血清白蛋白)-PBS(Gibco制PBS，pH為7.4)1ml(以下記為洗滌液)，將過(guò)濾器上充滿，放置10分鐘。接著，使用蠕動(dòng)泵以流速200μL/分鐘開(kāi)始送液。之后，投入血液3ml。約5分鐘后，向貯液器導(dǎo)入9mL的洗滌液，進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。向第一注射器中導(dǎo)入血液樣品，將癌細(xì)胞在過(guò)濾器上富集。作為血液樣品，使用在采血至含EDTA真空采血管的健康者血液中含有相對(duì)于每1mL血液為1000個(gè)的癌細(xì)胞的樣品。作為癌細(xì)胞，使用上述的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株NCI-H358。另外，血液使用采血后6小時(shí)的血液。接著，將在洗滌液中溶解有4％PFA的溶液放入在盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。洗滌后，將在洗滌液中溶解有0.2％TritonX的溶液放入到盒體中，浸漬細(xì)胞15分鐘。進(jìn)而在10分鐘后，將泵流速改變?yōu)?0μL/分鐘，向貯液器內(nèi)導(dǎo)入600μL的細(xì)胞染色液(Hoechst33342：30μL、洗滌緩沖液：300ml)，對(duì)過(guò)濾器上的癌細(xì)胞或白細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。對(duì)捕獲在過(guò)濾器上的細(xì)胞進(jìn)行30分鐘的染色之后，向貯液器導(dǎo)入1mL的2mMEDTA-0.5％BSA-PBS進(jìn)行細(xì)胞的洗滌。利用在至導(dǎo)入最后的洗滌液的期間、一次也不對(duì)液體進(jìn)行抽取而是連續(xù)地導(dǎo)入液體的方法來(lái)進(jìn)行。接著，停止液體的導(dǎo)入，在以筐體的框架的高度保持液面的狀態(tài)下停止。在此狀態(tài)下，使用微量吸液管對(duì)過(guò)濾器上的液體進(jìn)行采集(吸引)。使用安裝有新盒體的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)，將對(duì)所采集的液體通過(guò)逆洗滌而回收到的含細(xì)胞溶液導(dǎo)入至注射器中，從而在過(guò)濾器上對(duì)細(xì)胞進(jìn)行再捕獲，進(jìn)行所回收到的細(xì)胞數(shù)的計(jì)數(shù)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接于對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器。使用同樣的熒光顯微鏡對(duì)再捕獲到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算逆洗滌后的癌細(xì)胞的捕獲數(shù)÷最初導(dǎo)入的癌細(xì)胞(理論值)＝通過(guò)逆洗滌獲得的癌細(xì)胞的回收率。(比較例10)利用與實(shí)施例23相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在染色液導(dǎo)入后的洗滌結(jié)束之后，以50μL/min的速度將筐體內(nèi)的液體完全地抽取。將液體完全地抽取之后，再次將洗滌液以200μ/min的速度從貯液器導(dǎo)入。接著，停止液體的導(dǎo)入，在以筐體的框架的高度保持液面的狀態(tài)下停止。在此狀態(tài)下，使用微量吸液管對(duì)過(guò)濾器上的液體進(jìn)行采集。使用安裝有新盒體的CTC回收裝置CT6000(日立化成制商品名)，將對(duì)所采集的液體通過(guò)逆洗滌而回收到的含細(xì)胞溶液導(dǎo)入至注射器中，從而在過(guò)濾器上對(duì)細(xì)胞進(jìn)行再捕獲，進(jìn)行所回收到的細(xì)胞數(shù)的計(jì)數(shù)。CTC回收裝置具備用于導(dǎo)入血液樣品或試劑的流路，流路的入口連接于對(duì)注射器進(jìn)行加工而制作的貯液器。使用同樣的熒光顯微鏡對(duì)再捕獲到的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算逆洗滌后的癌細(xì)胞的捕獲數(shù)÷最初導(dǎo)入的癌細(xì)胞(理論值)＝通過(guò)液體采集獲得的癌細(xì)胞的回收率。(結(jié)果)將實(shí)施例23及比較例10的結(jié)果示于表6。表6由表6可知，利用液體采集(吸引)進(jìn)行的細(xì)胞回收方法中，在途中的工序中未將液體從筐體內(nèi)抽取時(shí)，細(xì)胞的回收率為高達(dá)70％以上的值。而在導(dǎo)入液體的工序的途中抽取一次液體時(shí)，細(xì)胞的回收率為低達(dá)18％的值。由此教示了：在利用液體采集(吸引)進(jìn)行的細(xì)胞回收方法中，在導(dǎo)入液體的工序的途中一次也不抽取液體、而是連續(xù)地導(dǎo)入液體的重要性。符號(hào)說(shuō)明1MCL、2可剝離銅箔、2’銅板、3光致抗蝕劑、3a光致抗蝕劑曝光部分(曝光部)、3b光致抗蝕劑顯影部分、4光掩模、5鍍覆層、6貫通孔、7鍍金層、10、20細(xì)胞捕獲器件、11、12過(guò)濾器、12、22導(dǎo)入?yún)^(qū)域、13、23排出流路、24上蓋、25、26導(dǎo)入流路。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3