雙層細胞篩選培養(yǎng)芯片的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及一種新型細胞篩選和培養(yǎng)用芯片，從使用上講，是生物醫(yī)學工程方面細胞培養(yǎng)觀察用的一種雙層細胞篩選培養(yǎng)芯片。
技術(shù)背景
[0002]微流控芯片技術(shù)目前在生物學領(lǐng)域應用十分廣泛，特別是在細胞學及分子生物學的科學研宄中，大量地使用了微流控技術(shù)。近年來，微流控芯片在細胞生物學研宄中的一些主要應用，包括細胞的培養(yǎng)、分選、裂解、凋亡、計數(shù)、迀移、單細胞捕獲和細胞間相互作用等。在生物醫(yī)學工程實驗室科學研宄中，常常也會遇到對于血液細胞等多種細胞的分離和相同環(huán)境下增殖培養(yǎng)的比較研宄實驗，以及對于同種細胞在不同條件下的因素刺激下的比較研宄實驗，例如:藥物、圖案、生長因子、微環(huán)境的二氧化碳量等等變化因素。上述實驗如果采用目前生物細胞實驗中使用常規(guī)細胞培養(yǎng)皿或多孔板，則由于人工操作誤差的影響，對實驗的一致性和同一性方面的保證方面，具有一定難度和實驗困難。如果采用微流控芯片技術(shù)，則有望大大降低保證實驗的同一性和一致性的難度，同時，也可以替代目前常規(guī)的細胞培養(yǎng)器皿，來滿足細胞的分離、培養(yǎng)、條件對比實驗。
[0003]因此，借鑒微流控芯片技術(shù)，需要開發(fā)一種用于科學實驗研宄用的，培養(yǎng)觀察、實驗對比用的一種細胞篩選培養(yǎng)微流控芯片。
【實用新型內(nèi)容】
[0004]本實用新型的目的在于提供結(jié)構(gòu)簡單便于制作，用于細胞科學實驗研宄的、培養(yǎng)、觀察、實驗對比用的一種細胞篩選培養(yǎng)微流控芯片。
[0005]為了解決上述問題，本實用新型的技術(shù)方案為:一種雙層細胞篩選培養(yǎng)芯片。其特征在于:雙層芯片體由上下大小尺寸一致的上層芯片和下層芯片兩層組成，并粘貼固定在硬質(zhì)載片上。這樣設計，便于芯片體細胞培養(yǎng)/分選單元的結(jié)構(gòu)功能的加工。雙層芯片體呈長方形，在下層芯片的上面，加工有相互盤繞成圓形的細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B ;在雙層芯片體的上層芯片的下面，與圓盤形的細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B的細胞培養(yǎng)分區(qū)墻正上方的位置，加工有相對應的相互盤繞成圓盤形的進樣通道和出樣通道。圓盤的設計，一是為了增加篩選通道的長度，二是將篩選和細胞培養(yǎng)池集成結(jié)合，以充分利用芯片的地方。
[0006]所述圓盤形的細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B與圓盤形的進樣通道和出樣通道共同組成了細胞培養(yǎng)/分選單元，這種模塊化設計，一是便于模板的統(tǒng)一設計和加工，二是便于開發(fā)和布局多種樣式的雙層細胞篩選培養(yǎng)芯片。
[0007]所述細胞培養(yǎng)/分選單元，在雙層芯片體上排布第一個的，其圓形外面的進樣通道的端頭，加工有進樣孔。出樣通道伸出圓形細胞培養(yǎng)/分選單元后與連接通道相連，連接通道再連接第二個細胞培養(yǎng)/分選單元的進樣通道；依次類推，I個雙層芯片體共連接2- 6個細胞培養(yǎng)/分選單元。也就是說，有2個的、3個的、4個的、5個的、6個的共5種不同細胞培養(yǎng)/分選單元排布的雙層細胞篩選培養(yǎng)芯片。最后一個的細胞培養(yǎng)/分選單元的出樣通道，伸出圓形細胞培養(yǎng)/分選單元后與出樣孔相通。每個細胞培養(yǎng)/分選單元的圓盤形的細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B，在各自圓盤的靠圓盤外側(cè)的邊處和圓盤中心處，都加工有細胞培養(yǎng)分區(qū)A進口孔，細胞培養(yǎng)分區(qū)A出口孔，和細胞培養(yǎng)分區(qū)B進口孔，細胞培養(yǎng)分區(qū)B出口孔。這樣設計，便于細胞培養(yǎng)分區(qū)A、B的培養(yǎng)液、氣體、實驗藥物或生長因子的加入，便于細胞的對比實驗。
[0008]所述每個細胞培養(yǎng)/分選單元的進樣通道和出樣通道的兩側(cè)，加工有雙側(cè)寬度尺寸一致的細胞篩選孔。這樣設計，可以使不同大小的細胞通過細胞篩選孔篩選，分別在細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B培養(yǎng)。細胞篩選孔的寬度尺寸，分別為10 μ m/10 μ m—組，20 μ m/20 μ m 一組，50 μ m/50 μ m 一組，80 μ m/80 μ m 一組，100 μ m/100 μ m 一組。
[0009]上述技術(shù)方案中，所述進樣通道、出樣通道、連接通道的尺寸在同一個雙層芯片體上統(tǒng)——致；它們的寬X深的統(tǒng)一尺寸有:10Χ50μπι，50Χ50μπι，100Χ50μπι，10 X 100 μ m，50 X 100 μ m，100 XlOOym兩個規(guī)格的深度，3個規(guī)格的寬度。這便于芯片的加工，芯片規(guī)格的制定和實驗的選用。
[0010]上述技術(shù)方案中，所述上層芯片下面的進樣通道和出樣通道，與下層芯片上面的細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B通過細胞篩選孔相通；所述細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B的深度尺寸H，在同一個雙層芯片體上統(tǒng)一一致，這樣保證了芯片規(guī)格的統(tǒng)一。在同一個雙層芯片體上，進樣通道、出樣通道、連接通道的深度h，尺寸是細胞培養(yǎng)分區(qū)A和細胞培養(yǎng)分區(qū)B的深度H的1/2，這樣設計，是充分考慮細胞培養(yǎng)室的通氣空間。
[0011]本實用新型技術(shù)特點是制作方便，專業(yè)性更強。
[0012]與現(xiàn)有的微流控細胞培養(yǎng)芯片相比，本實用新型有下列有益效果:(1)功能單元的模塊化和集成化更高，可以通過不同連接管，變化出多種具有篩選/培養(yǎng)功能的芯片，適合實驗室的不斷變化的科學研宄的需要；(2)每個功能區(qū)分為A、B兩處，一片芯片就可以同時進行2-6個不同細胞樣本或4-12個條件因素的實驗，大大提高了實驗效率；(3)制作方便簡單，使用成本低廉，節(jié)約成本。
【附圖說明】
[0013]圖1為本實用新型有2個細胞培養(yǎng)/分選單元的芯片體示意圖。
[0014]圖2本實用新型細胞培養(yǎng)/分選單元的局部A-A剖視示意圖。
[0015]圖3為本實用新型細胞培養(yǎng)/分選單元的上層芯片的加工形貌示意圖。
[0016]圖4為本實用新型細胞培養(yǎng)/分選單元的下層芯片的加工形貌示意圖。
[0017]圖中:1.雙層芯片體；2.細胞培養(yǎng)/分選單元；3.細胞培養(yǎng)分區(qū)B進口孔；4.細胞培養(yǎng)分區(qū)A進口孔；5.進樣通道；6.進樣孔；7.出樣通道；8.細胞培養(yǎng)分區(qū)A出口孔；
9.連接通道；10.細胞培養(yǎng)分區(qū)B出口孔；11.細胞培養(yǎng)分區(qū)A ; 12.細胞培養(yǎng)分區(qū)B ; 13.細胞篩選孔；14.出樣孔；15.下層芯片；16.上層芯片；17.細胞培養(yǎng)分區(qū)墻。
【具體實施