本發(fā)明涉及冷凍保存細胞或組織等時使用的冷凍保存用夾具、以及使用了該冷凍保存用夾具的冷凍保存方法。
背景技術：
：在各種各樣的產(chǎn)業(yè)領域中需要細胞或組織的優(yōu)異的保存技術。例如在牛的胚胎移植技術中，將胚胎冷凍保存，配合受胎牛的發(fā)情周期地將胚胎融解而進行移植。另外，在人的不孕治療中，在從母體采集卵子或卵巢后，為了配合適于移植的時機而冷凍保存，在移植時融解使用。一般而言，從活體內(nèi)采集的細胞或組織即使是在培養(yǎng)液中，也會逐漸失去活性，因此在活體外的細胞或組織的長期培養(yǎng)是不可取的。為此，用于不喪失生物活性地長期保存的技術是重要的。借助優(yōu)異的保存技術，可以更加準確地分析所采集的細胞或組織。另外，借助優(yōu)異的保存技術，可以在保持更高的生物活性的狀態(tài)下將細胞或組織用于移植，有望提高移植后的成活率。此外，也可以依次生產(chǎn)保存在活體外培養(yǎng)的培養(yǎng)皮膚和在活體外構筑的所謂細胞片之類的移植用的人工組織，在必要時使用，不僅是在醫(yī)療方面，在產(chǎn)業(yè)方面也可以期待很大的優(yōu)勢。作為細胞或組織的保存方法，例如已知有緩慢冷凍法。在該方法中，首先，在通過使例如磷酸緩沖生理鹽水等生理溶液中含有冷凍保護劑而得的保存液中浸漬細胞或組織。作為該冷凍保護劑，使用甘油、乙二醇等化合物。將細胞或組織浸漬在該保存液中后，通過以比較慢的冷卻速度(例如0.3～0.5℃/分鐘的速度)冷卻至－30～－35℃，而將細胞內(nèi)外或組織內(nèi)外的溶液充分冷卻，粘度變高。在此種狀態(tài)下，如果將該保存液中的細胞或組織進一步冷卻至液氮的溫度(－196℃)，則細胞內(nèi)或組織內(nèi)以及其外面的周圍的少許溶液均會在保持非晶的狀態(tài)下發(fā)生變?yōu)楣腆w的玻璃化?？梢哉J為，當由于玻璃化而使細胞內(nèi)外或組織內(nèi)外固化時，分子的運動就會真正消失，因此通過將經(jīng)過玻璃化的細胞或組織在液氮中保存，可以半永久地保存。然而，在所述緩慢冷凍法中，由于需要以比較慢的冷卻速度冷卻，因此在用于冷凍保存的操作中需要時間。另外，還存在有需要用于進行溫度控制的裝置或夾具的問題。此外，在所述緩慢冷凍法中，由于在細胞外或組織外的保存液中形成冰晶，因此細胞或組織有可能遭受該冰晶造成的物理性損害。作為用于解決所述緩慢冷凍法中的問題的方法，提出過玻璃化保存法。所謂玻璃化保存法是利用了如下原理的方法，即，由于大量含有甘油、乙二醇、DMSO(二甲亞砜)等冷凍保護劑的水溶液的凝固點降低，使得即使在冰點下也難以形成冰晶。當使該水溶液在液氮中急速冷卻時，就可以在不產(chǎn)生冰晶的狀態(tài)下直接固體化。將這樣的固體化稱作玻璃化冷凍。另外，將大量含有冷凍保護劑的水溶液稱作玻璃化液。作為所述玻璃化法的具體操作，是在玻璃化液中浸漬細胞或組織，其后，在液氮的溫度(－196℃)進行冷卻。由于玻璃化法是此種簡便且迅速的工序，因此具有如下的優(yōu)點，即，在用于冷凍保存的操作中不需要很長時間，此外，不需要用于溫度控制的裝置或夾具。如果使用玻璃化保存法，則細胞內(nèi)外均不產(chǎn)生冰晶，因此可以避免冷凍時和融解時對細胞的物理性傷害(凍害)，然而玻璃化液中含有的高濃度的冷凍保護劑具有化學性毒性。因此，在細胞或組織的冷凍保存時，優(yōu)選存在于細胞或組織周圍的玻璃化液少，且優(yōu)選細胞暴露于玻璃化液中的時間、也就是冷凍之前的時間短。此外，解凍后需要立即將玻璃化液稀釋。關于使用玻璃化保存法的細胞或組織的冷凍保存，給出過利用各種方法、使用了各種細胞或組織的例子。例如，專利文獻1中顯示，從冷凍保存及融解后的生存率的方面考慮，玻璃化保存法在動物或人的生殖細胞或體細胞中的應用極為有用。玻璃化保存法主要是使用人的生殖細胞發(fā)展起來的技術，然而最近也廣泛地研究在iPS細胞和ES細胞上的應用。另外，非專利文獻1中顯示，在果蠅胚胎的保存中玻璃化保存法是有效的。此外，專利文獻2中顯示，在植物培養(yǎng)細胞和組織的保存中，玻璃化保存法是有效的。如此所述，已知玻璃化保存法可以廣泛地用于各種各樣的細胞及組織的保存。專利文獻3、專利文獻4提出如下的方法，即，在人的不孕治療領域中使用的所謂的被稱作Cryotop法的方法中，使用作為卵子附著保持用帶使用了長方形的撓曲性且無色透明的膜的卵子冷凍保存用具，在顯微鏡觀察下使卵子或胚胎與極少量玻璃化液一起附著在該膜上，進行冷凍保存。專利文獻5提出如下的方法，即，將卵子或胚胎與玻璃化液一起放在玻璃化保存液除去材料上，通過從下部抽吸而除去附著在卵子或胚胎的周圍的多余的玻璃化液，以優(yōu)異的生存率冷凍保存。而且，作為玻璃化保存液除去材料，還記載過金屬絲網(wǎng)、由紙等天然物質(zhì)或合成樹脂制成的膜狀物且具有貫通孔的材料。另外作為能夠除去多余的玻璃化液、并且能夠提高載放細胞時的操作性的冷凍保存用夾具，例如在專利文獻6中記載有具備具有特定的霧度值的玻璃化液吸收體的玻璃化冷凍保存用夾具。另一方面，專利文獻7中關于將細胞與培養(yǎng)基一起保存時所用的細胞保存容器，記載利用該容器的內(nèi)面由難以附著細胞的材料形成的容器、具體而言是在容器的內(nèi)面結合或覆蓋有親水性材料或疏水性材料等的容器，可以防止保存中的細胞向容器壁面上的膠粘，作為親水性材料例示出丙烯酰胺系聚合物、聚乙烯醇等，作為疏水性材料例示出氟樹脂、硅樹脂?，F(xiàn)有技術文獻專利文獻專利文獻1：日本專利第3044323號公報專利文獻2：日本特開2008－5846號公報專利文獻3：日本特開2002－315573號公報專利文獻4：日本特開2006－271395號公報專利文獻5：國際公開第2011/070973號專利文獻6：日本特開2014－183757號公報專利文獻7：日本特開2004－18504號公報非專利文獻非專利文獻1：Steponkus等，Nature345：170－172(1990)技術實現(xiàn)要素：發(fā)明所要解決的問題專利文獻3、專利文獻4提出如下的方法，即，通過限制載放卵子或胚胎的膜的寬度，而將卵子或胚胎與少量的玻璃化液一起冷凍保存，獲得優(yōu)異的生存率。然而，該方法中，利用操作者的操作，將卵子或胚胎與極少量的玻璃化液一起放在膜上時，存在有操作的難度高的問題。另外，以該方法為基礎的Cryotop法中，為了將卵子或胚胎與更少量的玻璃化液一起冷凍保存，有時也要進行如下的煩雜的操作，即，在先將卵子或胚胎與玻璃化液一起放在膜上后，抽吸多余的玻璃化液而將其從膜上除去。此外，在冷凍后融解卵子或胚胎時，膜上的卵子或胚胎經(jīng)常會固著于膜上，因而還會有在回收它們時要求高技能的問題。專利文獻5提出了通過除去附著于卵子或胚胎的周圍的多余的玻璃化液而以優(yōu)異的生存率冷凍保存這些生殖細胞的方法。然而，上述公報記載的方法中，在除去多余的玻璃化液時，需要從下部的抽吸操作，因此會導致煩雜的操作，不適于在短時間內(nèi)進行玻璃化冷凍保存操作的情況。此外，一旦從下部的抽吸不充分，就會有殘留多余的玻璃化液的問題。另外，與專利文獻3、專利文獻4相同，在冷凍后進行融解時，卵子或胚胎會固著于膜上，因而還有在回收時要求高技能的問題。專利文獻6中，雖然操作者不需要除去附著于卵子或胚胎的周圍的多余的玻璃化液，可以獲得良好的操作性，然而在玻璃化液吸收體吸收玻璃化液時，卵子或胚胎尤為牢固地固著于玻璃化液吸收體上，因此存在有在回收卵子或胚胎時要求尤其高的技能的問題。本發(fā)明的主要目的在于，提供能夠容易并且可靠地進行細胞或組織的冷凍保存操作的細胞或組織的冷凍保存用夾具。更具體而言，第一目的在于，提供一種冷凍保存用夾具，在將細胞或組織浸漬于玻璃化液等保存液中、將細胞或組織與保存液一起載放于該冷凍保存用夾具而進行冷凍保存后，在融解該細胞或組織時，可以容易地剝離、回收細胞或組織。另外，第二目的在于，提供一種冷凍保存用夾具，其除了可以容易地回收所述的細胞或組織以外，還具有玻璃化液等保存液的優(yōu)異的吸收性。此外，目的在于，提供一種可以容易地剝離、回收冷凍保存后的細胞或組織的冷凍保存方法。用于解決問題的方法本發(fā)明人等為了解決上述問題進行了深入研究，結果發(fā)現(xiàn)，利用具有以下的構成的細胞或組織的冷凍保存用夾具(本說明書中，也將“細胞或組織的冷凍保存用夾具”簡稱為“冷凍保存用夾具”)，可以解決上述問題。(1)一種細胞或組織的冷凍保存用夾具，其特征在于，在載放細胞或組織的載放部的最外表面，具有含有水溶性高分子化合物的層。(2)根據(jù)上述(1)中記載的細胞或組織的冷凍保存用夾具，其特征在于，上述水溶性高分子化合物為選自具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇中的至少1種。(3)根據(jù)上述(1)中記載的細胞或組織的冷凍保存用夾具，其特征在于，上述水溶性高分子化合物是皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇。(4)根據(jù)上述(1)～(3)中任一項記載的細胞或組織的冷凍保存用夾具，其特征在于，含有上述水溶性高分子化合物的層還含有無機微粒。(5)根據(jù)上述(1)～(4)中任一項記載的細胞或組織的冷凍保存用夾具，其特征在于，上述載放部具有保存液吸收體，在該保存液吸收體上具有含有上述水溶性高分子化合物的層。(6)一種細胞或組織的冷凍保存方法，其特征在于，在上述(1)～(5)中任一項記載的細胞或組織的冷凍保存用夾具的載放部上，與保存液一起載放浸漬于保存液的細胞或組織，在將細胞或組織保持于載放部的狀態(tài)下將冷凍保存用夾具浸漬于液氮中，由此將細胞或組織冷凍。(7)根據(jù)上述(6)中記載的細胞或組織的冷凍保存方法，其特征在于，上述保存液是相對于保存液的總質(zhì)量包含10質(zhì)量％以上的冷凍保護劑的玻璃化液。發(fā)明效果根據(jù)上述(1)的發(fā)明，可以提供一種冷凍保存用夾具，在細胞或組織的冷凍保存操作中，在將冷凍了的細胞或組織融解時，可以容易地回收細胞或組織。根據(jù)上述(2)～(4)的發(fā)明，可以提供一種冷凍保存用夾具，在將冷凍了的細胞或組織融解時，可以尤其容易地回收細胞或組織。根據(jù)上述(5)的發(fā)明，可以提供一種細胞或組織的冷凍保存用夾具，除了上述的效果以外，在將細胞或組織載放于冷凍保存用夾具的載放部時，保存液吸收體將附著于細胞或組織的外周的多余的保存液吸收，因此并不特別需要用于除去多余的保存液的其他操作(例如從保存液吸收體下部的抽吸除去操作、使用了微量移液器等的從細胞或組織周圍的直接的抽吸除去操作)，可以容易并且簡便地進行細胞或組織的冷凍保存操作。根據(jù)上述(6)及(7)的發(fā)明，可以提供一種冷凍保存方法，能夠容易地剝離、回收冷凍保存后的細胞或組織。附圖說明圖1是表示本發(fā)明的細胞或組織的冷凍保存用夾具的一例的整體圖。圖2是圖1中的載放部的一例的剖面結構示意圖。圖3是表示圖1所示的載放部具有保存液吸收體的情況下的一例的剖面結構示意圖。圖4是表示圖1所示的載放部具有保存液吸收體的情況下的另一例的剖面結構示意圖。圖5是表示圖1所示的載放部具有保存液吸收體的情況下的另一例的剖面結構示意圖。圖6是載放部的表面層含有無機微粒的情況下的剖面結構示意圖的一例。圖7是載放部的表面層含有無機微粒的情況下的剖面結構示意圖的另一例。圖8是表示載放部具有保存液吸收體、表面層含有無機微粒的情況下的一例的剖面結構示意圖。圖9是表示載放部具有保存液吸收體、表面層含有無機微粒的情況下的另一例的剖面結構示意圖。圖10是實施例24的冷凍保存用夾具的載放部表面的掃描型電子顯微鏡觀察圖像。具體實施方式本發(fā)明的冷凍保存用夾具是冷凍保存細胞或組織時所用的工具。本說明書中所謂細胞，不僅包括單一的細胞，也包括包含多個細胞的生物的細胞集團。所謂包含多個細胞的細胞集團，可以是由單一種類的細胞構成的細胞集團，也可以是由多種細胞構成的細胞集團。另外，所謂組織，可以是由單一種類的細胞構成的組織，也可以是由多種細胞構成的組織，還可以是在細胞以外還包含細胞外基質(zhì)之類的非細胞性的物質(zhì)的組織。本發(fā)明的冷凍保存用夾具是冷凍保存操作中所用的工具，優(yōu)選為玻璃化冷凍保存操作中所用的工具。由此，本發(fā)明的冷凍保存用夾具適于作為細胞或組織的玻璃化冷凍保存用夾具使用。具體而言，本發(fā)明的冷凍保存用夾具是用于將載放有細胞或組織的冷凍保存用夾具浸漬于液氮等冷卻溶媒中并使之冷凍的工具。另外，在將載放于冷凍保存用夾具上的細胞或組織融解時，將細胞或組織與冷凍保存用夾具一起從冷卻介質(zhì)中取出，使之浸漬于融解液中而融解。在使用本發(fā)明的冷凍保存用夾具進行冷凍保存操作的情況下，細胞或組織通常被與保存液一起載放于載放部的含有水溶性高分子化合物的層上。如果使用本發(fā)明的冷凍保存用夾具，就可以在載放細胞或組織時將其可靠地保持，另外可以在融解時容易地回收細胞或組織，因此可以容易并且可靠地進行涉及細胞或組織的冷凍保存的操作。本發(fā)明的冷凍保存用夾具可以改稱為細胞或組織的冷凍保存用具、細胞或組織的保存用具、細胞或組織的冷凍保存器具、細胞或組織的保存用器具。本發(fā)明的冷凍保存用夾具在載放細胞或組織的載放部的最外表面，具有含有水溶性高分子化合物的層(以下也記作本發(fā)明的表面層或簡記為表面層)。該表面層優(yōu)選相對于融解液為可溶性。此處所謂可溶性是指表面層相對于25℃的融解液的溶解度為0.2質(zhì)量％以上。本發(fā)明的冷凍保存用夾具如上所述，在冷凍操作時，將細胞或組織與保存液一起載放于冷凍保存用夾具的含有水溶性高分子化合物的層上后，浸漬于制冷劑(例如液氮)中，進行冷凍，在融解時，將冷凍了的細胞或組織與冷凍保存用夾具一起取出，浸漬于融解液中而融解，而在融解細胞或組織時，含有水溶性高分子化合物的層的整體或一部分溶解于融解液中，由此細胞或組織就不會固著于冷凍保存用夾具的載放部，可以容易地剝離、回收。本發(fā)明中，上述載放部優(yōu)選具有保存液吸收體，優(yōu)選在該保存液吸收體上具有含有上述水溶性高分子化合物的層(表面層)。在本發(fā)明的冷凍保存用夾具的載放部具有保存液吸收體、此外在該載放部的最外表面具有本發(fā)明的表面層的情況下，除了上述效果以外，該保存液吸收體還會吸收多余的保存液，因此不用特別需要用于除去多余的保存液的其他的操作，操作性大幅度提高。另外，經(jīng)過如此操作的細胞或組織由極少量的保存液覆蓋，在進行冷凍操作時也可以快速地制成冷凍狀態(tài)。此外，在所述的玻璃化冷凍法中，保存液因含有大量的冷凍保護劑而造成的化學性毒性成為問題，然而根據(jù)載放部具有保存液吸收體的冷凍保存用夾具，因被載放的細胞或組織周邊的玻璃化液是極少量，而可以期待細胞或組織的生存率的提高。在載放部具有保存液吸收體的情況下，優(yōu)選在保存液吸收體與表面層之間，不具有其他的層。以下，對本發(fā)明的冷凍保存用夾具的構成進行說明。本發(fā)明的冷凍保存用夾具在載放細胞或組織的載放部的最外表面，具有含有水溶性高分子化合物的層。此處所謂載放細胞或組織的載放部的最外表面，相當于細胞或組織被與保存液一起載放的表面部分。本發(fā)明中載放部優(yōu)選在各種樹脂膜、金屬、玻璃、橡膠等非吸收性支承體上、或保存液吸收體上具有本發(fā)明的表面層，特別是優(yōu)選在保存液吸收體上具有本發(fā)明的表面層。而且，本發(fā)明中該表面層可以不是在整個載放細胞或組織的載放部中形成均勻的層，例如可以是海島狀或條紋狀的層。即，重要的是本發(fā)明的表面層存在于與保存液一起載放細胞或組織的部位的最外表面，在沒有載放細胞或組織的部位，可以存在有該表面層，也可以不存在該表面層。如此所述，載放部可以在其整個最外表面具有表面層，也可以在最外表面的一部分具有表面層。作為本發(fā)明中表面層所含有的水溶性高分子化合物，例如可以舉出羥乙基纖維素、羧甲基纖維素等纖維素衍生物、淀粉及其衍生物、明膠、酪蛋白、海藻酸及其鹽、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、苯乙烯·馬來酸共聚物鹽、苯乙烯·丙烯酸共聚物鹽等。其中，海藻酸及其鹽、明膠由于可以獲得相對于保存液的溶解性和適度的被膜形成作用，因此優(yōu)選，聚乙烯醇是來自于非生物的材料，并且對于細胞或組織為低毒性，因此特別優(yōu)選。這些水溶性高分子化合物可以單獨使用，也可以并用2種以上。另外，表面層可以在相對于融解液的溶解度不低于10質(zhì)量％的范圍中含有交聯(lián)劑。而且，本發(fā)明的所謂水溶性高分子化合物的水溶性，是指相對于25℃的水的溶解量至少為0.5質(zhì)量％以上，更優(yōu)選為5質(zhì)量％以上。表面層所含有的水溶性高分子化合物的固體成分量優(yōu)選為0.01～100g/m2，更優(yōu)選為0.1～10g/m2。在水溶性高分子化合物的固體成分量大于100g/m2的情況下，水溶性高分子化合物向融解液中的溶出·混入變多，因而不夠理想。另一方面，在水溶性高分子化合物的固體成分量在低于0.01g/m2的情況下，在融解時，會有無法容易地剝離細胞或組織的情況。本發(fā)明中表面層優(yōu)選作為水溶性高分子化合物含有選自具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇中的至少1種。具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇可以發(fā)揮被膜的優(yōu)異的親水性、適度的強度、適度的溶解性，在融解操作時，細胞或組織不會固著于載放部，可以尤其容易地剝離·回收。具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇可以使用各種皂化度的該聚乙烯醇，而從獲得細胞或組織的良好的剝離性的觀點考慮，這些聚乙烯醇的皂化度優(yōu)選為94mol％以下。另外，這些聚乙烯醇可以單獨使用，也可以并用2種以上。具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇例如可以獲取、使用由日本合成化學工業(yè)(株)銷售的產(chǎn)品。在表面層含有選自具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇中的至少1種聚乙烯醇的情況下，該表面層可以含有一種或兩種以上的其他的水溶性高分子化合物。作為該水溶性高分子化合物，例如可以舉出羥乙基纖維素、羧甲基纖維素等纖維素衍生物、淀粉及其衍生物、明膠、酪蛋白、海藻酸及其鹽、不具有乙二醇基及環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、苯乙烯·馬來酸共聚物鹽、苯乙烯·丙烯酸共聚物鹽等。其他水溶性高分子化合物的含量優(yōu)選相對于選自具有乙二醇基的聚乙烯醇及具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇中的至少1種聚乙烯醇的固體成分量為50質(zhì)量％以下。本發(fā)明中表面層優(yōu)選作為水溶性高分子化合物含有皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇。通過將皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的被膜作為表面層使用，可以獲得優(yōu)異的細胞或組織的剝離性，因此在融解操作時，細胞或組織不會固著于載放部，可以容易地回收。此外，通過選擇皂化度為81mol％以下的聚乙烯醇，或者通過選擇皂化度為94mol％以下并且聚合度為400以下的聚乙烯醇，可以獲得細胞或組織的剝離性尤其優(yōu)異的冷凍保存用夾具。這些聚乙烯醇可以單獨使用，也可以并用2種以上。在表面層含有皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的情況下，該表面層可以含有一種或兩種以上的其他水溶性高分子化合物。作為該水溶性高分子化合物，例如可以舉出羥乙基纖維素、羧甲基纖維素等纖維素衍生物、淀粉及其衍生物、明膠、酪蛋白、海藻酸及其鹽、皂化度大于94mol％的聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、苯乙烯·馬來酸共聚物鹽、苯乙烯·丙烯酸共聚物鹽等。其他水溶性高分子化合物的含量優(yōu)選相對于皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的固體成分量為50質(zhì)量％以下。本發(fā)明中表面層優(yōu)選除了上述的水溶性高分子化合物以外，還含有無機微粒。無機微粒不會降低表面層的親水性，另外可以在表面層形成微細的凹凸而使載放部與細胞或組織的接觸面積降低，因此細胞或組織不會固著于冷凍保存用夾具的載放部，可以更加容易地剝離·回收。作為該無機微粒，例如可以舉出輕質(zhì)碳酸鈣、重質(zhì)碳酸鈣、碳酸鎂、高嶺土、二氧化鈦、氧化鋅、氫氧化鋅、硅酸鈣、硅酸鎂、非晶質(zhì)合成二氧化硅、氧化鋁、氧化鋁水合物、氫氧化鎂等。該無機微粒的平均粒徑(如果是一次粒子凝聚而形成二次凝聚體的無機微粒則為平均二次粒徑，沒有形成二次粒子的無機微粒中是平均一次粒徑)優(yōu)選為1μm以下，更優(yōu)選為600nm以下。無機微粒的平均粒徑的下限沒有特別限定，然而優(yōu)選為6nm以上。對于平均粒徑，例如如果是一次粒子凝聚而形成二次凝聚體的無機微粒，則可以使用激光散射式的粒度分布計(例如堀場制作所公司制、LA910)作為個數(shù)中值直徑求出。另外如果是沒有形成二次粒子的無機微粒，則可以利用被分散至能夠判別一次粒徑的粒子的電子顯微鏡照片作為存在于一定面積內(nèi)的100個粒子的平均粒徑求出。其中，一次粒子之間沒有凝聚、沒有形成二次粒子的無機微粒(以下稱作單一粒子分散性的無機微粒。)由于載放部的與細胞或組織的接觸面積較小，因此優(yōu)選。從此種觀點考慮，適合為膠態(tài)二氧化硅。膠態(tài)二氧化硅例如由日產(chǎn)化學工業(yè)工業(yè)(株)作為Snowtex(注冊商標)銷售。另外，也可以優(yōu)選使用由GEHealthcareJapan(株)銷售的Percoll(商品名)之類的、在粒子表面覆蓋了聚乙烯基吡咯烷酮的膠態(tài)二氧化硅。本發(fā)明中，在載放部具有后述的保存液吸收體的情況下，優(yōu)選使無機微粒不會堵塞該保存液吸收體所具有的微孔地在載放部的最外表面設置含有水溶性高分子化合物及無機微粒的層。為此，可以使無機微粒的粒徑大于保存液吸收體所具有的微孔直徑，另外如果是不會明顯減少保存液吸收體的吸收性的范圍，也可以在保存液吸收體的微孔內(nèi)部存在無機微粒。作為本發(fā)明的冷凍保存用夾具所具有的無機微粒的固體成分量，優(yōu)選為0.01～100g/m2，更優(yōu)選為0.1～10g/m2。在無機微粒的固體成分量大于100g/m2的情況下，無機微粒向融解液中的溶出·混入變多，因而不夠理想。另一方面，在無機微粒的固體成分量低于0.01g/m2的情況下，在融解時，會有無法容易地剝離細胞或組織的情況。本發(fā)明中在表面層除了上述的水溶性高分子化合物以外還含有無機微粒的情況下，相對于水溶性高分子化合物而言的無機微粒的含有比率(無機微粒的合計質(zhì)量/水溶性高分子化合物的合計質(zhì)量)優(yōu)選為1～100，更優(yōu)選為1.67～50。通過將相對于水溶性高分子化合物而言的無機微粒的含有比率設為此種范圍，載放部的表面(該表面層)可以維持適度的凹凸，在融解操作時可以容易地回收細胞或組織。另外，例如可以抑制冷凍保存用夾具使用前的無機微粒的脫落(粉粒脫落)、冷凍操作時滴加玻璃化液時的無機微粒的意愿之外的脫落。本發(fā)明中載放部在冷凍保存細胞或組織時，優(yōu)選出于支承細胞或組織的目的而具有支承體，在該支承體上具有表面層。作為該支承體(非吸收性支承體)，例如可以舉出各種樹脂膜、金屬、玻璃、橡膠等。此種支承體可以由1種材料制成，也可以由2種以上的材料制成。其中，從處置的觀點考慮適合使用樹脂膜。作為樹脂膜的具體例，可以舉出由聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚萘苯二甲酸乙二醇酯(PEN)等聚酯樹脂、丙烯酸類樹脂、環(huán)氧樹脂、硅樹脂、聚碳酸酯樹脂、二乙酸酯樹脂、三乙酸酯樹脂、聚丙烯酸酯樹脂、聚氯乙烯樹脂、聚砜樹脂、聚醚砜樹脂、聚酰亞胺樹脂、聚酰胺樹脂、聚烯烴樹脂、環(huán)狀聚烯烴樹脂等制成的樹脂膜。另外如果支承體的總光線透射率為80％以上，則可以使用透射型顯微鏡容易地確認載放于載放部的細胞或組織，因此優(yōu)選。此外，從溫度傳導性優(yōu)異、能夠?qū)崿F(xiàn)急速的冷凍的觀點考慮，也可以合適地使用金屬制支承體。作為金屬制支承體的具體例，可以舉出銅、銅合金、鋁、鋁合金、金、金合金、銀、銀合金、鐵、不銹鋼等。上述的支承體的厚度優(yōu)選為10μm～10mm。另外，根據(jù)目的，也可以利用電暈放電處理之類的電方法、化學方法對支承體的表面進行易膠粘處理，此外也可以使之粗面化。此外，也可以在支承體與表面層之間具有一個或多個其他的層，還可以在支承體的表面?zhèn)染哂斜砻鎸?，在背面?zhèn)染哂幸粋€或多個其他的層。另外，也可以將表面層設于支承體的表背面。支承體也可以是后述的保存液吸收體。下面，對本發(fā)明的冷凍保存用夾具在保存液吸收體上具有含有水溶性高分子化合物的層的情況進行說明。如前所述，在本發(fā)明的細胞或組織的載放部具有保存液吸收體的情況下，即使附著于細胞或組織上的保存液的量多，保存液吸收體也可以除去保存液，因此不需要保存液的除去操作，操作性大幅度提高。另外經(jīng)過如此操作的細胞或組織由極少量的保存液覆蓋，在進行冷凍操作時也可以迅速地制成冷凍狀態(tài)。此外，在所述的玻璃化冷凍法中可以將包含大量甘油、乙二醇、DMSO(二甲亞砜)等冷凍保護劑的水溶液作為保存液利用，該保存液因大量的冷凍保護劑而存在化學性毒性，然而根據(jù)載放部具有保存液吸收體的冷凍保存用夾具，因被載放的細胞或組織周邊的玻璃化液是極少量，而可以期待細胞或組織的生存率的提高。因而，載放部在保存液吸收體上具有含有水溶性高分子化合物的層的冷凍保存用夾具適于用作玻璃化冷凍保存用夾具。本發(fā)明中，在載放部具有保存液吸收體的情況下，優(yōu)選不堵塞該保存液吸收體所具有的微孔地在載放部的最外表面設置表面層。另外，如果是保存液吸收體的吸收性不明顯降低的范圍，也可以在保存液吸收體的微孔內(nèi)部存在表面層。本發(fā)明中，在載放部具有保存液吸收體的情況下，表面層的固體成分量越多，保存液吸收體所具有的微孔就會越小，因此保存液的吸收性有降低的趨勢。另一方面，表面層的固體成分量越多，融解操作時的細胞或組織的剝離性就越優(yōu)異。雖然要依據(jù)所用的保存液吸收體的厚度、微孔直徑、空隙率而定，然而載放部具有保存液吸收體時的表面層的固體成分量可以考慮上述性能的平衡適當?shù)剡M行調(diào)整，優(yōu)選為0.1～5g/m2。作為本發(fā)明的冷凍保存用夾具所具有的保存液吸收體，可以舉出由纖維制成的片、多孔性樹脂片、多孔性金屬片、以及多孔性金屬氧化物片等各種片。本發(fā)明的所謂“多孔性”，是指上述的片在表面具有氣孔(微孔)的結構體，更優(yōu)選為在片表面及內(nèi)部具有連續(xù)的氣孔的結構體。另外，保存液吸收體(上述的各種片)的厚度優(yōu)選為10μm～5mm，更優(yōu)選為20μm～2.5mm。在保存液吸收體為薄片的情況下，可以作為加強構件使用所述的非吸收性支承體。本發(fā)明中，作為用作保存液吸收體的由纖維制成的片，可以例示出紙或無紡布，紙優(yōu)選粘結劑等結著劑成分在紙整體中所占的比例為10質(zhì)量％以下的紙，更優(yōu)選比例為5質(zhì)量％以下、進一步優(yōu)選比例為3質(zhì)量％以下的紙。由此可以獲得優(yōu)異的保存液的吸收性。另外，該紙中所占的制紙用藥品在紙整體中所占的比例優(yōu)選為1質(zhì)量％以下。通常紙中所含的制紙用藥品當中，例如熒光增白劑或染料、陽離子系的施膠劑等對細胞的影響有時令人擔心。在由纖維制成的片為紙的情況下，優(yōu)選為密度為0.1～0.6g/cm3、基重為10～130g/m2的紙。特別是密度為0.12～0.3g/cm3、基重為10～100g/m2的紙可以提供保存液的吸收性優(yōu)異、而且能夠使用透射型顯微鏡觀察載放于載放部上的細胞或組織的、細胞或組織的觀察性優(yōu)異的冷凍保存用夾具，因此優(yōu)選。在由纖維制成的片為無紡布的情況下，作為該無紡布所含有的纖維，可以舉出纖維素纖維、作為包含纖維素纖維的再生纖維的人造絲纖維或銅氨纖維、以及作為來自于纖維素纖維的半合成纖維的乙酸酯纖維、聚酯纖維、尼龍纖維、丙烯酸類纖維、聚丙烯纖維、聚乙烯纖維、聚氯乙烯纖維、亞乙烯纖維、聚氨酯纖維、維尼綸纖維、玻璃纖維、絲綢纖維等，也可以使用對這些纖維進行了各種混合的無紡布。其中優(yōu)選纖維素纖維、作為來自于纖維素纖維的纖維且作為纖維素再生纖維的人造絲纖維或銅氨纖維、以及作為來自于纖維素纖維的半合成纖維的乙酸酯纖維。在由纖維制成的片為無紡布的情況下，優(yōu)選為密度為0.1～0.4g/cm3、基重為10～130g/m2的無紡布。特別是密度為0.12～0.3g/cm3、基重為10～100g/m2的無紡布由于能夠提供保存液的吸收性優(yōu)異、而且細胞或組織的觀察性優(yōu)異的冷凍保存用夾具，因此優(yōu)選。在作為保存液吸收體使用的無紡布中也與所述的紙相同，優(yōu)選粘結劑等結著劑成分在無紡布中所占的比例為10質(zhì)量％以下的無紡布，更優(yōu)選比例為5質(zhì)量％以下、進一步優(yōu)選比例為3質(zhì)量％以下的無紡布。特別優(yōu)選不含有結著劑的無紡布。無紡布與紙不同，有各種各樣的制造方法，然而作為減少了上述的結著劑成分的無紡布，可以合適地使用利用紡粘法、熔噴法制造的無紡布、以及在利用濕式法或干式法將纖維并排排放后以水流交絡法或針刺法制造的無紡布。另外，如上所述，作為本發(fā)明中無紡布所含有的優(yōu)選的纖維，可以舉出纖維素纖維、作為來自于纖維素纖維的纖維且作為纖維素再生纖維的人造絲纖維或銅氨纖維、以及作為來自于纖維素纖維的半合成纖維的乙酸酯纖維，在使用這些纖維制造的情況下，無論是濕式法還是干式法，都適合為利用水流交絡法或針刺法的制造方法。本發(fā)明中，作為用作保存液吸收體的多孔性樹脂片，例如可以舉出如下的樹脂片等，即，日本特公昭42－13560號公報、日本特開平08－283447號公報中記載的樹脂片，即至少沿一軸方向拉伸，并加熱到樹脂的熔點以上而使之燒結，利用由此得到的微細纖維狀結構形成多孔結構；日本特開2009－235417號公報中記載的樹脂片，即將利用乳液聚合或粉碎等方法得到的熱塑性樹脂的固體粉末填充到模具中，并進行加熱、燒結，使粉末粒子表面熔融后冷卻，由此形成多孔結構。在將多孔性樹脂片作為保存液吸收體使用的情況下，可以提供保存液的吸收性優(yōu)異、而且細胞或組織的觀察性優(yōu)異的冷凍保存用夾具，因此優(yōu)選。作為形成上述的多孔性樹脂片的樹脂，可以舉出低密度聚乙烯、高密度聚乙烯、超高分子聚乙烯等各種聚乙烯或聚丙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚苯乙烯、聚四氟乙烯或聚偏二氟乙烯等氟樹脂、乙烯－乙酸乙烯酯共聚物、聚酰胺、苯乙烯－丙烯腈共聚物、苯乙烯－丁二烯－丙烯腈三元共聚物、聚碳酸酯、聚氯乙烯等。其中聚四氟乙烯、聚偏二氟乙烯等氟樹脂在將細胞或組織與玻璃化液等保存液一起載放于載放部的情況下，該多孔性樹脂片的透明性變高，透射型顯微鏡觀察下的細胞或組織的觀察性飛躍性地提高，可以提供細胞或組織的觀察性尤其優(yōu)異的冷凍保存用夾具，因此是合適的。另外作為多孔性樹脂片，也可以使用作為物理化學實驗用途或研究用途銷售的、過濾用的膜濾器。本發(fā)明中，作為用作保存液吸收體的多孔性金屬片，可以舉出由銅、銅合金、鋁、鋁合金、金、金合金、銀、銀合金、錫、鋅、鉛、鈦、鎳、不銹鋼等金屬制成的多孔性金屬片。另外，作為多孔性金屬氧化物片，可以優(yōu)選利用由二氧化硅、氧化鋁、鋯、石英玻璃等金屬氧化物制成的多孔性金屬氧化物片。另外，多孔性金屬片及多孔性金屬氧化物片也可以是分別含有2種以上的上述的金屬及金屬氧化物的多孔性片。其中，多孔性金屬氧化物片可以提供細胞或組織的觀察性優(yōu)異的冷凍保存用夾具，因此優(yōu)選。本發(fā)明中，作為用作保存液吸收體的多孔性金屬片、以及多孔性金屬氧化物片的制造方法，可以使用通常已知的方法。在玻璃化液吸收體為多孔性金屬片的情況下，可以使用粉末冶金法、間隔物法等方法。另外，也可以優(yōu)選使用組合了樹脂注射成型和粉末冶金法的所謂PowderSpaceHolder法。例如，可以使用國際公開第2006/041118號、日本專利第4578062號公報中記載的方法等。更具體而言，在將金屬粉末與成為間隔物的樹脂混合后，施加壓力而成型，然后在高溫環(huán)境下燒成，由此將金屬粉末燒結，使成為間隔物的樹脂氣化，就可以得到多孔性金屬片。在使用PowderSpaceHolder法等情況下，除了金屬粉末和成為間隔物的樹脂以外，還可以混合樹脂的粘結劑。另外，也可以使用在高溫下加熱金屬粉末后、注入氣體而制作空隙的發(fā)泡熔融法、氣體膨脹法等金屬多孔體的制造方法。此外，也可以使用用發(fā)泡劑來制造金屬多孔體的漿料發(fā)泡法之類的制造方法。在保存液吸收體為多孔性金屬氧化物片的情況下，例如可以使用日本特開2009－29692號公報或日本特開2002－160930號公報中記載的方法等。為了提高上述的多孔性樹脂片、多孔性金屬片、以及多孔性金屬氧化物片等多孔體的表面與表面層的親和性，也可以進行親水化處理。作為親水化處理的方法，可以使用接枝改性法、涂布非溶出性的親水性物質(zhì)的涂覆法、使用了電暈放電、等離子體處理、準分子激光器等各種能量的普通的表面改性方法。在保存液吸收體為上述的多孔性樹脂片、多孔性金屬片、以及多孔性金屬氧化物片等多孔體的情況下，該多孔體的微孔直徑優(yōu)選為0.02～130μm，更優(yōu)選為0.05～60μm。如果微孔直徑是小于0.02μm的范圍，則滴加保存液時會有保存液的吸收性能不夠充分的情況。另外，會有多孔性片的制造困難的問題。另一方面，如果微孔直徑是大于130μm的范圍，則會有保存液的吸收性能不夠充分的情況。而且，對于多孔體的微孔直徑，在多孔性樹脂片的情況下，是利用泡點試驗測定的最大的微孔的直徑。另外，在多孔性金屬片及多孔性金屬氧化物片的情況下，是根據(jù)該多孔體的表面及剖面的圖像觀察測定出的平均微孔直徑。保存液吸收體的空隙率優(yōu)選為20容量％以上，更優(yōu)選為30容量％以上。另外，在保存液吸收體為上述的多孔性樹脂片、多孔性金屬片、以及多孔性金屬氧化物片等多孔體的情況下，多孔體的內(nèi)部的氣孔優(yōu)選為不僅在厚度方向上連續(xù)、而且在垂直于厚度方向的方向上也連續(xù)的結構。如果具有此種結構，則可以有效地使用多孔體內(nèi)部的氣孔，因此可以獲得保存液的高吸收性能。保存液吸收體的厚度、多孔體的空隙率可以根據(jù)所用的細胞或組織的種類、與細胞或組織一起滴加的保存液的滴加量等適當?shù)剡x擇。上述的所謂空隙率，是由以下的式子定義。此處空隙容量V可以如下求出，即，在使用水銀孔隙度儀(測定器名稱AutoporeII9220制造者micromeriticsinstrumentcorporation)測定·處理了的、保存液吸收體的微孔半徑3nm到400nm的累積微孔容積(ml/g)上乘以保存液吸收體的干燥固體成分量(g/平方米)，由此作為每單位面積(平方米)的數(shù)值求出。另外，保存液吸收體的厚度T可以通過用電子顯微鏡拍攝保存液吸收體的剖面并進行測長而得到。P＝(V/T)×100(％)P：空隙率(％)V：空隙容量(ml/m2)T：厚度(μm)在載放部除了保存液吸收體以外還作為加強構件具有非吸收性支承體的情況下，可以在保存液吸收體與非吸收性支承體之間設置膠粘層。作為膠粘層，可以含有以濕氣固化性的膠粘物質(zhì)為代表的瞬間膠粘組合物、熱熔膠粘組合物、光固化性膠粘組合物等，例如可以優(yōu)選利用含有聚乙烯醇、羥基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、淀粉糊之類的水溶性高分子化合物、乙酸乙烯酯系樹脂、丙烯酸系樹脂、環(huán)氧系樹脂、氨基甲酸酯系樹脂、彈性體系樹脂、氰基丙烯酸酯系樹脂、氟系樹脂、硅酮系樹脂、硝基纖維素系樹脂、腈橡膠系樹脂、苯乙烯－丁二烯系樹脂、脲系樹脂、苯乙烯系樹脂、酚醛系樹脂、聚酰亞胺系樹脂、聚酰胺系樹脂、聚酯系樹脂、雙馬來酰亞胺系樹脂、烯烴系樹脂、EVA系樹脂等非水溶性樹脂的組合物。膠粘層可以含有一種樹脂，也可以含有多種樹脂。膠粘層的固體成分量優(yōu)選為0.01～100g/m2的范圍，更優(yōu)選為0.1～50g/m2的范圍。本發(fā)明的冷凍保存用夾具所具有的載放部的面積只要根據(jù)與細胞或組織一起滴加的保存液的滴加量等適當?shù)卦O定即可，沒有特別限定，例如對于滴加的保存液1μL優(yōu)選設為1mm2以上，更優(yōu)選設為2～400mm2。另外，在相同的冷凍保存用夾具中，載放部是在非吸收性支承體上具有多個保存液吸收體的形態(tài)的情況下，優(yōu)選連續(xù)著的1個保存液吸收體部分為所述的面積。本發(fā)明的載放部的制造方法沒有特別限定，例如在支承體上或保存液吸收體上具有表面層的載放部可以通過在支承體上或保存液吸收體上形成表面層而得到。本發(fā)明的表面層的形成方法沒有特別限定。例如，在將含有水溶性高分子的涂布液涂布于支承體或保存液吸收體上后，在其后進行干燥，由此可以在支承體上或保存液吸收體上形成表面層。在表面層包含無機微粒的情況下，使用含有水溶性高分子及無機微粒的涂布液形成表面層即可。涂布液也可以包含水、有機溶媒等溶劑等。涂布涂布液的方法也沒有特別限定，只要適當?shù)剡x擇即可。以上，對本發(fā)明的冷凍保存用夾具的載放部進行了說明。本發(fā)明的冷凍保存用夾具可以與載放部一起還具有握持部。如果具有握持部，則冷凍保存操作時及融解操作時的操作性變得良好，因此優(yōu)選。圖1是表示本發(fā)明的細胞或組織的冷凍保存用夾具的一例的整體圖。圖1中冷凍保存用夾具7由握持部1和載放部2構成。握持部優(yōu)選為耐液氮材料。作為此種材料，例如可以合適地使用鋁、鐵、銅、不銹鋼合金等各種金屬、ABS樹脂、聚丙烯樹脂、聚乙烯樹脂、氟系樹脂或各種工程塑料、以及玻璃等。圖1中，握持部1為圓柱形，然而其形狀是任意的。另外，如后所述，有時出于不使細胞或組織直接接觸液氮的目的，在冷凍前在附著有細胞或組織的載放部2上蓋上蓋子，該情況下，也可以通過將握持部1制成從不具有載放部2的一側朝向具有載放部2的一側圓柱的直徑連續(xù)變小的形狀，而提高蓋上蓋子時的操作性。載放部2的形狀從處置上考慮優(yōu)選為條狀或片狀。對圖1的握持部1與載放部2的連接方法進行說明。在握持部1為樹脂的情況下，例如在進行成形加工時可以利用嵌件成形將載放部2與握持部1連接。此外，可以在握持部1中制作未圖示的結構體插入部而利用膠粘劑連接載放部2。膠粘劑可以使用各種物質(zhì)，然而可以合適地使用耐低溫的硅酮系、氟系的膠粘劑。圖2是圖1中的載放部的一例的剖面結構示意圖。圖2中，載放部2a是在支承體4上具有表面層3的結構。為了獲得此種結構的載放部2a，例如可以使用向支承體上以滑動料斗方式涂布含有水溶性高分子化合物的涂布液的方法、以浸涂法涂布含有水溶性高分子化合物的涂布液的方法等制造方法。圖3～5是表示載放部具有保存液吸收體、且在該保存液吸收體上具有含有水溶性高分子化合物的層的冷凍保存用夾具的一例的剖面結構示意圖。圖3～5所示的保存液吸收體5是具有微孔9(氣孔)的結構體。圖3～5所示的保存液吸收體5的剖面結構是一個例子，并不限定于它們。圖3是表示圖1所示的載放部具有保存液吸收體的情況下的一例的剖面結構示意圖。圖3中，載放部2b是具有保存液吸收體5且在保存液吸收體5上具有表面層3的結構。為了獲得此種結構的載放部2b，例如可以使用將所述的涂布液以滑動料斗方式涂布于保存液吸收體上的制造方法。圖4是表示圖1所示的載放部具有保存液吸收體的情況下的另一例的剖面結構示意圖。圖4中，載放部2c是在保存液吸收體5的整個多孔體具有表面層3的結構。在像這樣在保存液吸收體上存在表面層的情況下，表面層不需要在保存液吸收體表面形成連續(xù)的層，也可以存在于保存液吸收體的孔表面。該結構不會堵塞多孔體的微孔，因此可以兼顧冷凍時的玻璃化液的吸收性和融解時的細胞或組織的剝離性，因而優(yōu)選。該方式中，由于也是在微觀上在載放部的最外表面存在本發(fā)明的表面層，因此可以說圖4表示出本發(fā)明的一例。為了獲得此種結構的載放部2c，例如可以使用以浸涂法涂布上述的涂布液的制造方法。圖5是表示圖1所示的載放部具有保存液吸收體的情況下的另一例的剖面結構示意圖。圖5中，載放部2d除了在保存液吸收體5的整個多孔體具有表面層3的圖4的形態(tài)以外，還具有支承體4和膠粘層6。該結構的情況下，即使在例如保存液吸收體5中所用的多孔體缺乏自立性的情況下，也可以更加可靠地進行冷凍時·融解時的操作。圖6是載放部的表面層含有無機微粒的情況下的剖面結構示意圖的一例。圖6中，載放部2e具有在支承體4上具有以層狀配置的無機微粒8的結構。為了獲得此種結構的載放部2e，例如可以使用向支承體上以滑動料斗方式涂布含有水溶性高分子化合物及無機微粒的涂布液的方法、以浸涂方式涂布含有水溶性高分子化合物及無機微粒的涂布液的方法等制造方法。圖7是載放部的表面層含有無機微粒的情況下的剖面結構示意圖的另一例。圖7中，載放部2f是在支承體4上散布有無機微粒8的結構。圖8是表示載放部具有保存液吸收體、且表面層含有無機微粒的情況下的一例的剖面結構示意圖。圖8中，載放部2g在保存液吸收體5的表面上具有無機微粒8。為了獲得此種結構的載放部2g，只要利用粒徑大于保存液吸收體5的微孔直徑的無機微粒8，對含有該無機微粒8和水溶性高分子化合物的涂布液以上述的滑動料斗方式、浸涂方式等涂布方法進行涂布即可。圖9是表示載放部具有保存液吸收體、且表面層含有無機微粒的情況下的另一例的剖面結構示意圖。圖9中，載放部2h在保存液吸收體5的最外表面含有無機微粒8，并且在保存液吸收體5的微孔內(nèi)部也具有無機微粒8。為了獲得此種結構的載放部2h，只要利用粒徑小于保存液吸收體5的微孔直徑的無機微粒8，對含有該無機微粒8和水溶性高分子化合物的涂布液以上述的滑動料斗方式、浸涂方式等涂布方法進行涂布即可。另外，在利用了粒徑小于保存液吸收體5的微孔直徑的無機微粒8的情況下，由于該無機微粒8進入微孔內(nèi)部而使微孔直徑變小，因此如圖9所示，也有在保存液吸收體5的表面上以層狀配置無機微粒的情況。圖6～圖9所示的載放部的剖面示意圖是表示在最外表面具有含有水溶性高分子化合物及無機微?；衔锏膶拥妮d放部的一例的剖面示意圖。而且，在上述的圖6至圖9中，省略表面層3(水溶性高分子化合物)，僅記載了無機微粒8。在利用本發(fā)明的細胞或組織的冷凍保存用夾具長期冷凍保存細胞或組織的情況下，如前所述，也可以為了將細胞或組織與外界隔絕而蓋上蓋子，或?qū)⒃摾鋬霰４嬗脢A具放入任意形狀的容器中并密閉。在液氮沒有被滅菌、使細胞或組織直接接觸液氮而使之冷凍的情況下，即使冷凍保存用夾具被滅菌也會有無法保證滅菌狀態(tài)的情況。由此，有時在冷凍前在附著有細胞或組織的載放部上蓋上蓋子，或?qū)⒗鋬霰４嬗脢A具密閉在容器中，使細胞或組織不直接接觸液氮地使之冷凍。另外，在歐洲等海外發(fā)達國家如前所述地不直接接觸液氮的冷凍方法是主流。從此種理由考慮，蓋子及容器優(yōu)選用作為具有耐液氮性的材料的各種金屬、各種樹脂、玻璃、陶瓷等制作。作為形狀沒有特別限定，例如，蓋子只要是鉛筆用的筆帽之類的半紡錘狀或拱頂狀等蓋子、圓柱狀的草帽等不與主體部接觸、而可以將細胞或組織與外界隔絕的形狀，則無論是何種形狀都可以。容器只要是不與被載放的細胞或組織接觸、而可以將冷凍保存用夾具外包或收納并密閉的容器即可，其形狀沒有特別限定。本發(fā)明中，只要不損害本發(fā)明的效果，就可以將冷凍保存用夾具與此種能夠?qū)⑤d放部上的細胞或組織與外界隔絕的蓋子或容器組合使用。另外，與此種蓋子或容器組合使用的冷凍保存用夾具也包含于本發(fā)明中。本發(fā)明的冷凍保存用夾具例如適用于Cryotop法中。另外，以往的Cryotop法通常被用于單一的細胞或少于10個的少數(shù)的細胞的保存中，而本發(fā)明的冷凍保存用夾具在更多的細胞的保存(例如10～1000000個細胞的保存)時也可以合適地使用。此外，還可以適用于包含多個細胞的片狀的細胞(所謂的細胞片)的保存。如果使用本發(fā)明的冷凍保存用夾具，則可以在細胞或組織的冷凍保存操作中，在將細胞或組織冷凍后進行融解時，容易地回收細胞或組織。另外，通過使載放部具有保存液吸收體，除了上述的效果以外，在將細胞或組織冷凍時，由于會吸收附著于細胞或組織的外周的多余的玻璃化液，因此在細胞或組織的冷凍時及融解時難以受到由細胞外的玻璃化液造成的損傷，可以以優(yōu)異的生存率冷凍保存細胞或組織。使用本發(fā)明的冷凍保存用夾具冷凍保存細胞或組織的方法沒有特別限定，例如，首先將浸漬于保存液的細胞或組織與保存液一起向載放部上滴加，使用移液管等盡可能地除去附著于該細胞或該組織的周圍的多余的保存液。此時，在該冷凍保存用夾具的載放部具有保存液吸收體的情況下，不需要上述操作，多余的保存液被自動地除去。然后，通過在將所述細胞或所述組織保持于載放部的狀態(tài)下將冷凍保存用夾具浸漬于液氮等中，就可以冷凍細胞或組織。此時，也可以在載放部安裝能夠?qū)⑺龅妮d放部上的細胞或組織與外界隔絕的蓋子，或?qū)⒗鋬霰４嬗脢A具密閉于所述的容器中，浸漬于液氮等中。如此所述，將浸漬于保存液的細胞或組織與保存液一起載放在上述細胞或組織的冷凍保存用夾具的載放部上，在將細胞或組織保持于載放部的狀態(tài)下將冷凍保存用夾具浸漬于液氮中，由此將細胞或組織冷凍的冷凍保存細胞或組織的方法也是本發(fā)明之一。保存液可以使用通常為了冷凍卵子、胚胎等細胞而使用的保存液，例如，可以使用通過使上述的磷酸緩沖生理鹽水等生理性溶液中含有冷凍保護劑(甘油、乙二醇等)而得的保存液、包含大量(至少相對于保存液的總質(zhì)量為10質(zhì)量％以上、更優(yōu)選為20質(zhì)量％以上)的甘油或乙二醇、DMSO(二甲亞砜)等各種冷凍保護劑的玻璃化液。其中，作為保存液，優(yōu)選相對于保存液的總質(zhì)量包含10質(zhì)量％以上的冷凍保護劑的玻璃化液。在融解操作時，從液氮等冷卻溶媒中，取出該冷凍保存用夾具，使載放有經(jīng)過冷凍的細胞或組織的載放部浸漬于融解液中，其后，回收細胞或組織。作為可以使用本發(fā)明的冷凍保存用夾具冷凍保存的細胞，例如可以舉出哺乳類(例如人(人類)、牛、豬、馬、兔、大鼠、小鼠等)的卵子、胚胎、精子等生殖細胞；人工誘導多功能干細胞(iPS細胞)、胚胎干細胞(ES細胞)等多功能干細胞。另外，可以舉出初代培養(yǎng)細胞、繼代培養(yǎng)細胞、以及細胞株細胞等培養(yǎng)細胞。另外，在一個或多個實施方式中，作為細胞可以舉出成纖維細胞、來自于胰腺癌、肝癌細胞等癌的細胞、上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞、淋巴管內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞、軟骨細胞、組織干細胞、以及免疫細胞等貼壁細胞。此外，作為可以冷凍保存的組織，可以舉出由同種或異種細胞組成的組織，例如卵巢、皮膚、角膜上皮、牙周膜、心肌等組織。本發(fā)明特別適于具有片狀結構的組織(例如細胞片、皮膚組織等)的冷凍保存。本發(fā)明的冷凍保存用夾具不僅可以適用于直接從活體采集的組織，也適用于例如在活體外培養(yǎng)增殖的培養(yǎng)皮膚、在活體外構筑的所謂的細胞片、日本特開2012－205516號公報中提出的具有三維結構的組織模型之類的人工組織的冷凍保存。本發(fā)明的冷凍保存用夾具可以作為如上所述的細胞或組織的冷凍保存用夾具合適地使用。[實施例]以下利用實施例更詳細地明示本發(fā)明，對本發(fā)明進行具體的說明，然而本發(fā)明并不受以下的實施例限定。(實施例1)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上，以使干燥時的固體成分量為5g/m2的方式，利用滑動料斗方式涂布日本合成化學工業(yè)(株)制的高純度聚乙烯醇EG－05P(皂化度86.5～89mol％)的5質(zhì)量％水溶液，使之在室溫下干燥，制作出圖2所示的形態(tài)的載放部。將該載放部裁割為2mm×20mm的大小(40mm2)，與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例1的冷凍保存用夾具。(比較例1)除了在實施例1的冷凍保存用夾具的制作中，直接使用透明PET膜作為載放部以外，同樣地制作出比較例1的冷凍保存用夾具。＜小鼠卵子的冷凍操作＞將采集到的小鼠卵子在作為pH指示劑含有極低濃度的酚紅的修正磷酸緩沖液(137mM的NaCl、2.7mM的KCl、0.9mM的CaCl2·2H2O、0.5mM的MgCl2·6H2O、1.5mM的KH2PO4、8mM的Na2HPO4、5.6mM的葡萄糖、0.3mM的丙酮酸Na、65μg/ml的硫酸地貝卡星、1mg/ml的聚乙烯基吡咯烷酮、14.8mM的L－proline、200mM的海藻糖)中、在15℃的環(huán)境下浸漬10分鐘。其后，暫時取出小鼠卵子，然后將該小鼠卵子在溫度15℃的平衡液(7容量％乙二醇、0.5容量％甘油、92.5容量％上述修正磷酸緩沖液)中浸漬5分鐘。然后，將從平衡液中取出的小鼠卵子浸漬在溫度4℃的玻璃化液(30容量％的乙二醇、0.5容量％的甘油、69.5％的上述修正磷酸緩沖液、0.5M的蔗糖)中。在玻璃化液中的30秒的浸漬后，將小鼠卵子載放于實施例1或比較例1的冷凍保存用夾具的載放部上，在透射型顯微鏡觀察下，使用移液管盡可能地除去小鼠卵子周邊的多余的玻璃化液。其后，浸漬于液氮中，使之玻璃化冷凍。將冷凍了的冷凍保存用夾具直至融解前都保管在液氮保存容器中。＜小鼠卵子的融解操作和剝離性的評價＞將載放有小鼠卵子的實施例1或比較例1的冷凍保存用夾具從液氮中取出，浸漬于溫度37℃的融解液(向上述修正磷酸緩沖液中添加了1M的蔗糖的溶液)中。用透射型光學顯微鏡觀察浸漬后的小鼠卵子的樣子，依照以下的基準對融解時的小鼠卵子的剝離性進行了評價。將這些結果表示于表1的“融解時的剝離性”的項目中。依照以下的基準評價了融解時的剝離性?！颍簩⒗鋬霰４嬗脢A具浸漬于融解液中時，能夠以輕微地振動握持部的程度剝離小鼠卵子(剝離所需的時間為1分鐘以內(nèi))?！穑簩⒗鋬霰４嬗脢A具浸漬于融解液中時，能夠通過將握持部上下左右搖動而剝離小鼠卵子(剝離所需的時間為1分鐘以內(nèi))?！粒和ㄟ^將握持部上下左右搖動，無法在1分鐘以內(nèi)剝離小鼠卵子。[表1]融解時的剝離性實施例1◎比較例1×由表1的結果判明，本發(fā)明的冷凍保存用夾具在融解時顯示出優(yōu)異的剝離性。(實施例2)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上作為膠粘層以使干燥時的固體成分量為30g/m2的方式涂布了HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P。在膠粘層完全固化前，作為保存液吸收體，貼合AdvantechTOYO(株)制的經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)。通過將如此得到的層疊體浸漬于日本合成化學工業(yè)公司制的高純度聚乙烯醇EG－05P(皂化度86.5～89mol％)的2質(zhì)量％水溶液中，而進行浸涂，使之在室溫下干燥，制作出圖5所示的形態(tài)的具有含有水溶性高分子化合物的層的載放部。而且，含有水溶性高分子化合物的層的涂布量以干燥時的固體成分量計為1.6g/m2。與實施例1相同地將該載放部裁割為2mm×20mm的大小，其后與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例2的冷凍保存用夾具。(實施例3)除了將聚乙烯醇EG－05P的水溶液的濃度設為1質(zhì)量％以外，與實施例2相同地制作出實施例3的冷凍保存用夾具。而且，實施例3的冷凍保存用夾具所具有的含有水溶性高分子化合物的層的涂布量以干燥時的固體成分量計為0.5g/m2。(實施例4)除了將聚乙烯醇EG－05P的水溶液的濃度設為0.2質(zhì)量％以外，與實施例2相同地制作出實施例4的冷凍保存用夾具。而且，實施例4的冷凍保存用夾具所具有的含有水溶性高分子化合物的層的涂布量以干燥時的固體成分量計為0.1g/m2。(實施例5)除了在作為其他的聚乙烯醇的(株)Kuraray制PVA103(皂化度98～99mol％)的1質(zhì)量％水溶液中浸漬層疊體而設置含有水溶性高分子化合物的層以外，與實施例2相同地制作出實施例5的冷凍保存用夾具。而且，實施例5的冷凍保存用夾具所具有的含有水溶性高分子化合物的層的涂布量以干燥時的固體成分量計為0.5g/m2。(實施例6)除了在除聚乙烯醇以外還含有作為明膠的Jellice(株)制PN505的1質(zhì)量％水溶液中浸漬層疊體而設置含有水溶性高分子化合物的層以外，與實施例2相同地制作出實施例6的冷凍保存用夾具。而且，實施例6的冷凍保存用夾具所具有的含有水溶性高分子化合物的層的涂布量以干燥時的固體成分量計為0.5g/m2。(實施例7)通過將太盛工業(yè)(株)制的經(jīng)過親水化處理的不銹鋼多孔體(微孔直徑1.5μm、空隙率65％、厚度1mm)作為保存液吸收體，浸漬于聚乙烯醇EG－05P的1質(zhì)量％水溶液中，而進行浸涂，使之在室溫下干燥，制作出圖4所示的形態(tài)的具有含有水溶性高分子化合物的層的載放部。而且，實施例7的含有水溶性高分子化合物的層的涂布量以干燥時的固體成分量計為0.4g/m2。與實施例1相同，使該載放部與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例7的冷凍保存用夾具。(比較例2)除了在實施例2的冷凍保存用夾具的制作中，未進行向水溶液中的浸漬以外，與實施例2相同地制作出不具有含有水溶性高分子化合物的層的比較例2的冷凍保存用夾具。即，該冷凍保存用夾具是在經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)上夾隔著膠粘層(HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P)貼合有經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)的冷凍保存用夾具。(比較例3)除了在實施例7的冷凍保存用夾具的制作中，未進行向水溶液中的浸漬以外，與實施例7相同地制作出不具有含有水溶性高分子化合物的層的比較例3的冷凍保存用夾具。＜玻璃化液的吸收性的評價＞利用與前面的實施例1、比較例1中的冷凍操作相同的方法，將依次浸漬于修正磷酸緩沖液、平衡液、玻璃化液中的小鼠卵子與0.4μL的玻璃化液一起，使用ORIGIO公司制剝卵槍移液器滴加到實施例2～7、以及比較例2、比較例3的冷凍保存用夾具所具有的載放部上。對實施例2～6及比較例2，使用透射型光學顯微鏡進行觀察，對實施例7和比較例3，使用反射型光學顯微鏡進行觀察，同時依照以下的基準評價了滴加后的玻璃化液的吸收的樣子。將這些結果表示于表2的“玻璃化液的吸收性”的項目中。依照以下的基準評價了玻璃化液的吸收性?！颍旱渭硬ＡЩ汉螅?秒以內(nèi)，小鼠卵子周邊的多余的玻璃化液被吸收、消失?！穑旱渭硬ＡЩ汉螅?～30秒，小鼠卵子周邊的多余的玻璃化液被吸收、消失。×：滴加玻璃化液后，在30秒的時刻，殘留有小鼠卵子周邊的多余的玻璃化液。＜小鼠卵子的融解操作和剝離性的評價＞對于使用了實施例2～7、以及比較例2、比較例3的冷凍保存用夾具的融解操作和剝離性的評價，利用與前面的實施例1、比較例1的各冷凍保存用夾具相同的方法進行了評價。其中，在實施例7和比較例3的評價中，除了透射型光學顯微鏡以外還使用了反射型光學顯微鏡。將其結果表示于表2的“融解時的剝離性”的項目中。[表2]玻璃化液的吸收性融解時的剝離性實施例2○◎?qū)嵤├?○○實施例4◎○實施例5○○實施例6○○實施例7○○比較例2◎×比較例3◎×由表2的結果判明，利用本發(fā)明的冷凍保存用夾具，除了可以獲得融解時的優(yōu)異的剝離性以外，還可以獲得玻璃化液的優(yōu)異的吸收性。(實施例8)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上，以使干燥時的固體成分量為5g/m2的方式，利用滑動料斗方式涂布作為具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇的日本合成化學工業(yè)(株)制的GohsenexWO－320R(皂化度88.3mol％)的5質(zhì)量％水溶液，在室溫下使之干燥后，在120℃進行40小時加熱處理，制作出在支承體上具有表面層的圖2所示的形態(tài)的載放部。將該載放部裁割為2mm×20mm的大小(40mm2)，使之與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例8的冷凍保存用夾具。另外，除了在上述實施例8的冷凍保存用夾具的制作中，直接使用透明PET膜作為載放部以外，同樣地制作出冷凍保存用夾具。由此，該冷凍保存用夾具與前面記載的比較例1相同，因此在后述的表3中，將該冷凍保存用夾具作為比較例1記載。＜小鼠胚的冷凍操作＞將采集到的小鼠胚盤胞期胚胎在作為pH指示劑含有極低濃度的酚紅的修正磷酸緩沖液(137mM的NaCl、2.7mM的KCl、0.9mM的CaCl2·2H2O、0.5mM的MgCl2·6H2O、1.5mM的KH2PO4、8mM的Na2HPO4、5.6mM的葡萄糖、0.3mM的丙酮酸Na、65μg/ml的硫酸地貝卡星、1mg/ml聚乙烯基吡咯烷酮、14.8mM的L－proline、200mM的海藻糖)中，在15℃的環(huán)境下浸漬10分鐘。其后，暫時取出小鼠胚胎，然后將該小鼠胚胎在溫度15℃的平衡液(7.5容量％DMSO(二甲亞砜)、7.5容量％乙二醇、17容量％牛胚胎血清、68容量％上述修正磷酸緩沖液)中浸漬5分鐘。然后，將從平衡液中取出的小鼠胚胎浸漬在溫度4℃的玻璃化液(15容量％DMSO(二甲亞砜)、15容量％乙二醇、14容量％牛胚胎血清、56容量％上述修正磷酸緩沖液、0.5M蔗糖)中。在30秒的在玻璃化液中的浸漬后，將小鼠胚胎載放于實施例8或比較例1的冷凍保存用夾具的載放部上，在透射型顯微鏡觀察下，使用移液管盡可能地去除小鼠胚胎周邊的多余的玻璃化液。其后，浸漬于液氮中，使之玻璃化冷凍。將冷凍了的冷凍保存用夾具直至融解前都保管在液氮保存容器中。＜小鼠胚胎的融解操作和剝離性的評價＞將載放有小鼠胚胎的實施例8或前述的比較例1的冷凍保存用夾具從液氮中取出，浸漬于溫度37℃的融解液(在上述修正磷酸緩沖液中添加有1M蔗糖的溶液)中。利用透射型光學顯微鏡觀察浸漬后的小鼠胚胎的樣子，依照以下的基準對融解時的小鼠胚胎的剝離性進行了評價。將這些結果表示于表3的“細胞或組織的剝離性”的項目中。而且，表3中記載的比較例1如前所述，是直接使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜作為載放部的冷凍保存用夾具。依照以下的基準評價了細胞或組織的剝離性?！颍簩⒗鋬霰４嬗脢A具浸漬于融解液中時，可以一邊搖動握持部一邊剝離小鼠胚胎(剝離所需的時間少于20秒)。○：將冷凍保存用夾具浸漬于融解液中時，可以一邊搖動握持部一邊剝離小鼠胚胎(剝離所需的時間為20秒以上且少于40秒)?！鳎簩⒗鋬霰４嬗脢A具浸漬于融解液中時，為了一邊搖動握持部一邊剝離小鼠胚胎，需要40～60秒?！粒簾o法通過搖動握持部而在60秒以內(nèi)剝離小鼠胚胎。[表3]細胞或組織的剝離性實施例8◎比較例1×由表3的結果判明，本發(fā)明的冷凍保存用夾具在融解時顯示出優(yōu)異的剝離性。(實施例9)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上作為膠粘層以使干燥時的固體成分量為30g/m2的方式涂布了HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P。在膠粘層完全固化前，作為保存液吸收體，貼合AdvantechTOYO(株)制的經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)。通過將如此得到的層疊體浸漬于作為具有乙二醇基的聚乙烯醇的日本合成化學工業(yè)(株)制的Nichigo－GpolymerAZF8035W(皂化度98.4mol％)的2質(zhì)量％水溶液中，而進行了浸涂，在室溫下使之干燥后，在120℃進行40小時加熱處理，制作出圖5所示的形態(tài)的具有表面層的載放部。而且，表面層的固體成分量為1.6g/m2。與實施例8相同，將該載放部裁割為2mm×20mm的大小，其后使之與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例9的冷凍保存用夾具。(實施例10)除了使用作為具有乙二醇基的聚乙烯醇的日本合成化學工業(yè)(株)制的Nichigo－GpolymerOKS－8041(皂化度88.9mol％)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例9相同地制作出實施例10的冷凍保存用夾具。而且，實施例10的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。(實施例11)除了使用作為具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇的GohsenexWO－320R(皂化度88.3mol％)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例9相同地制作出實施例11的冷凍保存用夾具。而且，實施例11的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。(實施例12)除了將GohsenexWO－320R的水溶液的濃度設為0.5質(zhì)量％以外，與實施例11相同地制作出實施例12的冷凍保存用夾具。而且，實施例12的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為0.5g/m2。(實施例13)除了使用作為具有環(huán)氧乙烷基的聚乙烯醇的日本合成化學工業(yè)(株)制的GohsenexWO－320N(皂化度99mol％)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例9相同地制作出實施例13的冷凍保存用夾具。而且，實施例13的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。(實施例14)除了使用作為聚乙烯醇的(株)Kuraray制的PVA103(皂化度98.5mol％)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例9相同地制作出實施例14的冷凍保存用夾具。而且，實施例14的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。另外，作為比較例，除了在前述的實施例9的冷凍保存用夾具的制作中，未進行向水溶液中的浸漬以外，也與實施例9相同地制作出不具有表面層的冷凍保存用夾具。該冷凍保存用夾具是在經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)上夾隔著膠粘層(HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P)貼合有經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)的冷凍保存用夾具，與前述的比較例2相同。由此，在后述的表4中，將該冷凍保存用夾具作為比較例2記載。＜保存液的吸收性的評價＞利用與前面的實施例8、比較例1中的冷凍操作相同的方法，將依次浸漬于修正磷酸緩沖液、平衡液、玻璃化液中的小鼠胚胎與0.3μL的玻璃化液一起，使用ORIGIO公司制剝卵槍移液器滴加到實施例9～14、以及比較例2的冷凍保存用夾具所具有的載放部上。在使用反射型光學顯微鏡觀察滴加后的玻璃化液的吸收的樣子的同時，依照以下的基準進行了評價。將這些結果表示于表4的“保存液的吸收性”的項目中。依照以下的基準評價了保存液的吸收性。◎：滴加玻璃化液后，在6秒以內(nèi)，小鼠胚胎周邊的多余的玻璃化液被吸收、消失?！穑旱渭硬ＡЩ汉?，在6～30秒，小鼠胚胎周邊的多余的玻璃化液被吸收、消失?！粒旱渭硬ＡЩ汉?，在30秒的時刻，殘留有小鼠胚胎周邊的多余的玻璃化液。＜小鼠胚胎的融解操作和剝離性的評價＞對于使用了實施例9～14、以及比較例2的冷凍保存用夾具的融解操作和剝離性的評價，利用與前面的實施例8、比較例1的各冷凍保存用夾具相同的方法進行了評價。將其結果表示于表4的“細胞或組織的剝離性”的項目中。[表4]保存液的吸收性細胞或組織的剝離性實施例9○○實施例10○◎?qū)嵤├?1○◎?qū)嵤├?2◎○實施例13○○實施例14○△比較例2◎×由表4的結果判明，利用本發(fā)明的冷凍保存用夾具，除了可以獲得融解時的優(yōu)異的剝離性以外，還可以獲得玻璃化液的優(yōu)異的吸收性。(實施例15)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上，以使干燥時的固體成分量為5g/m2的方式，利用滑動料斗方式涂布作為皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的(株)Kuraray制的PVA505(皂化度73.5mol％、聚合度500)的5質(zhì)量％水溶液，在室溫下使之干燥后，在120℃進行40小時加熱處理，制作出在支承體上具有表面層的圖2所示的形態(tài)的載放部。將該載放部裁割為2mm×20mm的大小(40mm2)，使之與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例15的冷凍保存用夾具。另外，除了在上述實施例15的冷凍保存用夾具的制作中，直接使用透明PET膜作為載放部以外，同樣地制作出冷凍保存用夾具。由此，該冷凍保存用夾具與前面記載的比較例1相同，因此后述的表5中，將該冷凍保存用夾具作為比較例1記載。＜小鼠胚胎的冷凍操作＞除了作為冷凍保存用夾具，分別使用了實施例15及比較例1的冷凍保存用夾具以外，利用與使用了上述的實施例8的冷凍保存用夾具的小鼠胚胎的冷凍操作相同的方法，使小鼠胚胎玻璃化冷凍。將冷凍了的冷凍保存用夾具直至融解前都保管在液氮保存容器中。＜小鼠胚胎的融解操作和剝離性的評價＞將載放有小鼠胚胎的實施例15或前述的比較例1的冷凍保存用夾具從液氮中取出，浸漬于溫度37℃的融解液(在上述修正磷酸緩沖液中添加有1M蔗糖的溶液)中。浸漬后，在用透射型光學顯微鏡觀察小鼠胚胎的樣子的同時，進行了融解操作。在融解操作時，在使冷凍保存用夾具上的小鼠胚胎剛剛浸漬于融解液中后30秒，不進行從冷凍保存用夾具上回收小鼠胚胎的操作，使冷凍保存用夾具上的小鼠胚胎靜靜地浸漬于融解液中。經(jīng)過30秒后，搖動冷凍保存用夾具的握持部而對載放部施加振動，或使用移液管施加抽吸壓力，由此在小鼠胚胎的融解液浸漬后經(jīng)過60秒之前進行回收操作。對上述融解操作時的小鼠胚胎的剝離性依照以下的基準進行了評價。將這些結果表示于表5的“細胞或組織的剝離性”的項目中。依照以下的基準評價了細胞或組織的剝離性?！颍涸谌诮獠僮鲿r，容易剝離載放部上的小鼠胚胎(僅用上下左右搖動握持部的操作就會比較良好地剝離)。○：在融解操作時，可以剝離載放部上的小鼠胚胎(僅用上下左右搖動握持部的操作就可以剝離)?！鳎涸谌诮獠僮鲿r，可以剝離載放部上的小鼠胚胎，然而略難剝離。×：在60秒以內(nèi)無法剝離小鼠胚胎。[表5]細胞或組織的剝離性實施例15◎比較例1×由表5的結果判明，本發(fā)明的冷凍保存用夾具在融解時顯示出優(yōu)異的剝離性。(實施例16)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上作為膠粘層以使干燥時的固體成分量為30g/m2的方式涂布了HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P。在膠粘層完全固化前，作為保存液吸收體，貼合AdvantechTOYO(株)制的經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)。通過將如此得到的層疊體浸漬于作為皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的PVA505(皂化度73.5mol％、聚合度500)的2質(zhì)量％水溶液中，而進行了浸涂，在室溫下使之干燥后，在120℃進行40小時加熱處理，制作出圖5所示的形態(tài)的具有表面層的載放部。而且，表面層的固體成分量為1.6g/m2。與實施例15相同，將該載放部裁割為2mm×20mm的大小，其后使之與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例16的冷凍保存用夾具。(實施例17)除了使用作為皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的(株)Kuraray制的PVA217(皂化度88mol％、聚合度1700)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例16相同地制作出實施例17的冷凍保存用夾具。而且，實施例17的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。(實施例18)除了使用作為皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的(株)Kuraray制的PVA205(皂化度88mol％、聚合度500)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例16相同地制作出實施例18的冷凍保存用夾具。而且，實施例18的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。(實施例19)除了使用作為皂化度為94mol％以下的聚乙烯醇的日本合成化學工業(yè)(株)制的GOHSENOLEG03P(皂化度88mol％、聚合度300)的2質(zhì)量％水溶液進行了浸涂以外，與實施例16相同地制作出實施例19的冷凍保存用夾具。而且，實施例19的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。(實施例20)除了使用作為聚乙烯醇的(株)Kuraray制的PVA105(皂化度98.5mol％、聚合度500)的2質(zhì)量％水溶液進行以外，與實施例16相同地制作出實施例20的冷凍保存用夾具。而且，實施例20的冷凍保存用夾具所具有的表面層的固體成分量為1.6g/m2。另外，作為比較例，除了在前述的實施例16的冷凍保存用夾具的制作中，未進行向水溶液中的浸漬以外，也與實施例16相同地制作出不具有表面層的冷凍保存用夾具。該冷凍保存用夾具是在經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)上夾隔著膠粘層(HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P)貼合有經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)的冷凍保存用夾具，與前述的比較例2相同。由此，在后述的表6中，將該冷凍保存用夾具作為比較例2記載。＜保存液的吸收性的評價＞利用與前面的實施例15、比較例1中的冷凍操作相同的方法，將依次浸漬于修正磷酸緩沖液、平衡液、玻璃化液中的小鼠胚胎與0.4μL的玻璃化液一起，使用ORIGIO公司制剝卵槍移液器滴加到實施例16～20、以及比較例2的冷凍保存用夾具所具有的載放部上。在使用反射型光學顯微鏡觀察滴加后的玻璃化液的吸收的樣子的同時，依照以下的基準進行了評價。將這些結果表示于表6的“保存液的吸收性”的項目中。依照以下的基準評價了保存液的吸收性?！穑旱渭硬ＡЩ汉?，在30秒以內(nèi)，小鼠胚胎周邊的多余的玻璃化液被吸收?！粒旱渭硬ＡЩ汉?，在30秒的時刻，殘留有小鼠胚胎周邊的多余的玻璃化液。＜小鼠胚胎的融解操作和剝離性的評價＞對于使用了實施例16～20、以及比較例2的冷凍保存用夾具的融解操作和剝離性的評價，利用與前面的實施例15、比較例1的各冷凍保存用夾具相同的方法進行了評價。將其結果表示于表6的“細胞或組織的剝離性”的項目中。[表6]保存液的吸收性細胞或組織的剝離性實施例16○◎?qū)嵤├?7○○實施例18○○實施例19○◎?qū)嵤├?0○△比較例2○×由表6的結果判明，利用本發(fā)明的冷凍保存用夾具，除了可以獲得融解時的優(yōu)異的剝離性以外，還可以獲得玻璃化液的優(yōu)異的吸收性。(實施例21)作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，在該支承體上作為膠粘層以使干燥時的固體成分量為30g/m2的方式涂布HenkelJapan公司制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P。在膠粘層完全固化前，作為保存液吸收體，貼合AdvantechTOYO(株)制的纖維素混合酯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率73％、厚度133μm)。通過將如此得到的層疊體浸漬于作為二氧化硅濃度包含20質(zhì)量％的日產(chǎn)化學工業(yè)公司制的作為膠態(tài)二氧化硅的ST－ZL(平均粒徑85nm)、作為聚乙烯醇的固體成分濃度包含1質(zhì)量％的日本合成化學工業(yè)公司制的高純度聚乙烯醇EG－05P(皂化度86.5～89mol％)的水溶液(涂布液)中，而進行了浸涂，使之在室溫下干燥后，再在120℃進行1天加熱處理，制作出在表面具有水溶性高分子化合物和無機微粒的載放部。而且，此時的無機微粒的固體成分涂布量為3g/m2。將該載放部裁割為2mm×20mm的大小(40mm2)，其后使之與ABS樹脂制的握持部接合，以圖1所示的形態(tài)制作出實施例21的冷凍保存用夾具。(實施例22)＜氣相法二氧化硅分散液的制作＞水430份改性乙醇22份陽離子性聚合物3份(二甲基二烯丙基氯化銨均聚物、第一工業(yè)制藥公司制、SHAROLDC902P、平均分子量9000)氣相法二氧化硅100份(平均一次粒徑7nm、基于BET法的比表面積300m2/g)向分散介質(zhì)的水和改性乙醇中添加二甲基二烯丙基氯化銨均聚物，然后添加氣相法二氧化硅，進行預分散而制作出粗分散液。然后對該粗分散液利用高壓均質(zhì)器進行2次處理，制作出二氧化硅濃度為20質(zhì)量％的氣相法二氧化硅的分散液。氣相法二氧化硅的平均粒徑為100nm。除了在實施例21的冷凍保存用夾具的制作中，使用了作為二氧化硅濃度包含10質(zhì)量％的上述氣相法二氧化硅分散液、作為聚乙烯醇的固體成分濃度包含1質(zhì)量％的聚乙烯醇EG－05P的水溶液以外。與實施例21相同地制作出實施例22的冷凍保存用夾具。而且，此時的無機微粒的固體成分涂布量為3g/m2。(實施例23)除了在實施例21的冷凍保存用夾具的制作中，作為夾隔著膠粘層貼合于支承體的保存液吸收體，在纖維素混合酯多孔體以外，還使用了AdvantechTOYO(株)制的經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)以外，與實施例21相同地制作出實施例23的冷凍保存用夾具。而且，此時的無機微粒的固體成分涂布量為3g/m2。(實施例24)除了在實施例23的冷凍保存用夾具的制作中，作為層疊體的浸涂中所用的涂布液，使用了作為二氧化硅濃度包含5質(zhì)量％的日產(chǎn)化學工業(yè)公司制的作為膠態(tài)二氧化硅的MP－4540(平均粒徑450nm)、作為聚乙烯醇的固體成分濃度包含2質(zhì)量％的聚乙烯醇EG－05P的水溶液以外，與實施例23相同地制作出實施例24的冷凍保存用夾具。而且，此時的無機微粒的固體成分涂布量為1g/m2。使用掃描型電子顯微鏡觀察了實施例24的冷凍保存用夾具的載放部的表面，其結果是，觀察到如圖10所示的顯微鏡觀察像。圖10中，比例尺為5μm。(實施例25)除了在實施例23的冷凍保存用夾具的制作中，作為層疊體的浸涂中所用的涂布液，使用了作為二氧化硅濃度包含20質(zhì)量％的GEHealthcareJapan公司制的作為膠態(tài)二氧化硅的Percoll(平均粒徑30nm)、作為聚乙烯醇的固體成分濃度包含1質(zhì)量％的聚乙烯醇EG－05P的水溶液以外，與實施例23相同地制作出實施例25的冷凍保存用夾具。而且，此時的無機微粒的固體成分涂布量為1g/m2。(實施例26)除了在實施例21的冷凍保存用夾具的制作中，作為支承體使用經(jīng)過易膠粘處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)，將該支承體浸漬于與實施例21相同的涂布液中，由此進行了浸涂，使之在室溫下干燥以外，與實施例21相同地制作出實施例26的冷凍保存用夾具。而且，此時的無機微粒的固體成分量為3g/m2。(比較例4)除了在實施例21的冷凍保存用夾具的制作中，將作為保存液吸收體具有纖維素混合酯多孔體的層疊體不進行浸涂地直接用作載放部以外，同樣地制作出比較例4的冷凍保存用夾具。除了在實施例21的冷凍保存用夾具的制作中，直接使用透明PET膜作為載放部以外，同樣地制作出冷凍保存用夾具。由此，該冷凍保存用夾具與前面記載的比較例1相同，因此在后述的表7中，將該冷凍保存用夾具作為比較例1記載。此外除了在前述的實施例23的冷凍保存用夾具的制作中，將包含聚四氟乙烯多孔體的層疊體不進行浸涂地直接作為載放部使用以外，同樣地制作出冷凍保存用夾具。該冷凍保存用夾具是在經(jīng)過易粘附處理的透明PET膜(總光線透射率91％、霧度值5.5％)上夾隔著粘附層(HenkelJapan(株)制的熱熔聚氨酯樹脂PurmeltQR170－7141P)貼合有經(jīng)過親水化處理的聚四氟乙烯多孔體(微孔直徑0.2μm、空隙率71％、厚度35μm)的冷凍保存用夾具，與前述的比較例2相同。由此，在后述的表7中，將該冷凍保存用夾具作為比較例2記載。＜人肝細胞球狀體的制作＞人肝細胞球狀體是使用住友BAKELITE公司制的PrimeSurface(注冊商標)96U多孔板制作。在培養(yǎng)皿上，對用添加有10％的血清的伊格爾最小必需培養(yǎng)基(EMEM)增殖了的HepG2細胞利用胰蛋白酶處理從培養(yǎng)皿中剝離、回收后，以每1孔中50cell的細胞濃度接種到PrimeSurface96U多孔板上。在37℃、2％CO2的條件下，在多孔板上培養(yǎng)3天后，確認了球狀體的形成。從球狀體中，選擇形狀接近球形、并且直徑接近100μm的球狀體，用于以后的評價試驗中。＜球狀體的冷凍操作＞將1個球狀體浸漬于玻璃化液(30容量％乙二醇、0.5容量％甘油、69.5％下述修正磷酸緩沖液、0.5M蔗糖)中后，與玻璃化液一起，載放于實施例21～26及比較例1、比較例2、比較例4的冷凍保存用夾具的載放部上。在冷凍操作時，對于實施例23～26、比較例1、比較例2，如以往的一般的操作所示，在透射型顯微鏡下觀察的同時進行操作。在實施例21、實施例22、以及比較例4的情況下，由于載放部的透光性低，因此在使用反射型顯微鏡觀察的同時進行操作。另外，對于具有實施例26和比較例1以外的保存液吸收體的冷凍保存用夾具，在透射型顯微鏡或反射型顯微鏡下，確認球狀體周邊的玻璃化液被充分地除去后，浸漬于液氮中而進行冷凍。對于實施例26和比較例1的冷凍保存用夾具，在透射型顯微鏡下，使用移液管，盡可能充分地除去球狀體周邊的玻璃化液后，浸漬于液氮中進行冷凍。＜融解操作和剝離性的評價＞將載放有球狀體的實施例21～26及比較例1、比較例2、比較例4的冷凍保存用夾具從液氮中取出，浸漬于溫度37℃的融解液(向修正磷酸緩沖液(137mM的NaCl、2.7mM的KCl、0.9mM的CaCl2·2H2O、0.5mM的MgCl2·6H2O、1.5mM的KH2PO4、8mM的Na2HPO4、5.6mM的葡萄糖、0.3mM的丙酮酸Na、65μg/ml的硫酸地貝卡星、1mg/ml的聚乙烯基吡咯烷酮、14.8mM的L－proline、200mM的海藻糖)中添加有1M蔗糖的溶液)中。在用透射型光學顯微鏡或反射型顯微鏡觀察浸漬后的球狀體的樣子的同時，使用移液管，進行從載放部的球狀體的回收操作，對融解時的球狀體的剝離性依照以下的基準進行了評價。將這些結果表示于表7的“細胞或組織的剝離性”的項目中?！颍簩⒗鋬霰４嬗脢A具浸漬于融解液中時，通過將握持部上下左右搖動或吸液，可以在30秒以內(nèi)將球狀體從設備中剝離。〇：將冷凍保存用夾具浸漬于融解液中時，將握持部上下左右搖動或吸液，從設備中剝離球狀體需要30秒～1分鐘?！粒簾o法在1分鐘以內(nèi)剝離球狀體。[表7]細胞或組織的剝離性實施例21◎?qū)嵤├?2◎?qū)嵤├?3◎?qū)嵤├?4◎?qū)嵤├?5◎?qū)嵤├?6◎比較例1×比較例2×比較例4×＜保存液的吸收性＞將1個球狀體浸漬于玻璃化液(30容量％乙二醇、0.5容量％甘油、69.5％上述修正磷酸緩沖液、0.5M蔗糖)中后，與玻璃化液一起載放于冷凍保存用夾具的載放部上時，評價了保存液的吸收性。具有保存液吸收體的實施例21～25的冷凍保存用夾具具有良好的吸收性，不需要使用移液管等除去多余的玻璃化液的操作。尤其是實施例24顯示出優(yōu)異的吸收性，在10秒以內(nèi)多余的玻璃化液被吸收、除去。＜細胞或組織的觀察性＞將1個球狀體浸漬于玻璃化液(30容量％乙二醇、0.5容量％甘油、69.5％上述修正磷酸緩沖液、0.5M蔗糖)中后，與玻璃化液一起載放于冷凍保存用夾具的載放部上時，作為細胞或組織的觀察性評價了在透射型顯微鏡下觀察球狀體時的操作性。與實施例21、實施例22的冷凍保存用夾具相比，實施例23～26的冷凍保存用夾具能夠更加清楚地觀察被載放的球狀體的形態(tài)。產(chǎn)業(yè)上的可利用性本發(fā)明除了可以用于牛等家畜、動物的胚胎移植和人工授精、對人的人工授精等以外，還可用于iPS細胞、ES細胞、一般使用的培養(yǎng)細胞、從活體采集的檢查用或移植用的細胞或組織、在活體外培養(yǎng)的細胞或組織等的冷凍保存。符號的說明1握持部，2、2a～2h載放部，3表面層，4支承體，5保存液吸收體，6膠粘層，7冷凍保存用夾具，8無機微粒，9微孔(氣孔)。當前第1頁1 2 3