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通過使用三孢布拉霉菌正負菌株混合培養(yǎng)深層發(fā)酵制造類胡蘿卜素的方法與流程

文檔序號:12070546閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種通過使用三孢布拉霉菌正負菌株混合培養(yǎng)深層發(fā)酵制造從β-胡蘿卜素或番茄紅素中選出類胡蘿卜素并從獲得的生物質和/或從發(fā)酵液油相獲取類胡蘿卜素的方法,其特征在于,首先分別預培養(yǎng)正和負菌株至完全形成形態(tài),然后將負菌株接種到生物反應器中并在負菌株指數(shù)式增長過程中將正菌株按1:5到1:100的體積比添加到負菌株中以誘導形成類胡蘿卜素,兩種菌株在18℃至24℃下,均無需調節(jié)pH值及氧分壓下發(fā)酵。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于,兩種菌株在誘導后,在18℃至24℃下,均無需調節(jié)pH值及氧分壓下發(fā)酵直至形成類胡蘿卜素。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的方法,其特征在于,在生物反應器中在26℃-30℃下分別單獨進行菌株預培養(yǎng)和負菌株培養(yǎng)。

4.根據(jù)權利要求1至3中任一項所述的方法,其特征在于,正菌株按與負菌株體積比1:5到1:20,優(yōu)選1:5到1:10,添加。

5.根據(jù)權利要求1至4中任一項所述的方法,其特征在于,在22℃下正負菌株共同發(fā)酵到形成類胡蘿卜素。

6.根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的方法,其特征在于,正負菌株共同發(fā)酵的培養(yǎng)基包含碳水化合物和有機氮化合物。

7.根據(jù)權利要求6所述的方法,其特征在于,淀粉、糖蜜或麥芽汁用做培養(yǎng)基中含糖部分。

8.根據(jù)權利要求1至7中任一項所述的方法,其特征在于,正負菌株共同發(fā)酵的培養(yǎng)基包含脂類,優(yōu)選一種或多種油,特別優(yōu)選一種或多種天然油,非常特別優(yōu)選天然植物油,特別是例如橄欖油、低芥酸菜子油、玉米油和/或葵花籽油。

9.根據(jù)權利要求1至8中任一項所述的方法,其特征在于,在制造番茄紅素時向正負菌株共同發(fā)酵的培養(yǎng)基添加一種環(huán)化酶抑制劑,優(yōu)選咪唑和/或一種咪唑衍生物。

10.根據(jù)權利要求1至9中任一項所述的方法,其特征在于,正負菌株共同發(fā)酵時放氣速率、攪拌器速度和溫度保持恒定。

11.根據(jù)權利要求1至10中任一項所述的方法,其特征在于,使用負菌株DSM 2388和正菌株DSM 2387或負菌株ATCC 14272和正菌株ATCC 14271。

12.根據(jù)權利要求1至11中任一項所述的方法,其特征在于,將含類胡蘿卜素的油相從留下的發(fā)酵液中分離。

13.根據(jù)權利要求12所述的方法,其特征在于,含類胡蘿卜素油相被過濾。

14.根據(jù)權利要求1至13中任一項所述的方法,其特征在于,該方法為連續(xù)操作。

15.根據(jù)權利要求1至14中一項所述的方法,其特征在于,誘導后重新向發(fā)酵液中添加培養(yǎng)基。

16.根據(jù)權利要求15所述的方法,其特征在于,加入正菌株誘導發(fā)酵料后20小時到60小時的時間段內重新添加培養(yǎng)基。

17.根據(jù)權利要求16所述的方法,其特征在于,繼續(xù)添加培養(yǎng)基,其中優(yōu)選每一次添加都在前一次添加培養(yǎng)基后24小時到48小時的時間段內。

18.一種包含天然類胡蘿卜素的油或油混合物,其特征在于,油或油混合物根據(jù)權利要求1至17中任一項所述的方法制造。

19.根據(jù)權利要求18所述的油或油混合物,其特征在于,油或油混合物中包含的天然類胡蘿卜素的濃度為400mg/l或更大。

20.根據(jù)權利要求18或19所述的油或油混合物,其特征在于,油或油混合物具有至少400mg/L的β-胡蘿卜素和至少5mg/L的番茄紅素。

21.根據(jù)權利要求18所述的油或油混合物,其特征在于,油或油混合物包含:

≥0.25mg/L葉黃素,

≥2mg/Lβ-隱黃質,

≥2mg/L番茄紅素,

≥3mg/Lγ-胡蘿卜素,

≥0.25mg/Lα-胡蘿卜素,和

≥30mg/Lβ-胡蘿卜素。

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