本發(fā)明涉及合成五肽的制造方法及其制造中間體。

背景技術(shù)：

已知κ阿片受體激動(dòng)劑作為各種疼痛的治療藥物是有用的。其中，對(duì)末梢κ阿片受體具有高選擇性的κ阿片受體激動(dòng)劑作為不產(chǎn)生中樞性副作用的藥物受到期待。作為那樣的末梢選擇性κ阿片受體激動(dòng)劑，報(bào)告了合成五肽(專利文獻(xiàn)1和2)。

在合成五肽中，下述式(A)所示的化合物作為疼痛治療藥物也是有用的。作為該化合物的制造方法，在上述專利文獻(xiàn)1和2中記載了固相肽合成法。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特表2010－510966號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2：日本特開2013－241447號(hào)公報(bào)

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明所要解決的課題

然而，在利用固相肽合成法的制造中，合成五肽保護(hù)體后，進(jìn)行從樹脂脫除和全脫保護(hù)后，利用分取HPLC進(jìn)行精制。在該精制中需要大型的分取HPLC裝置，精制也需要較長(zhǎng)時(shí)間。另一方面，也可以利用液相法進(jìn)行肽合成，但是，在對(duì)中間工序的五肽保護(hù)體進(jìn)行脫保護(hù)后，對(duì)化合物(A)進(jìn)行精制，得到的化合物(A)的純度小于80％，判明不能獲得高純度的化合物(A)。

因此，本發(fā)明的課題在于提供一種工業(yè)上有利地制造高純度的化合物(A)的方法。

用于解決課題的方法

因此，本發(fā)明的發(fā)明人對(duì)制造高純度的化合物(A)的方法進(jìn)行了研究時(shí)，完全意外地發(fā)現(xiàn)，對(duì)從化合物(A)的N-和O-保護(hù)體中只脫除了N-保護(hù)基的下述化合物(1)進(jìn)行分離后，該化合物(1)能夠利用料漿法和再結(jié)晶法進(jìn)行高純度地精制，如果對(duì)其進(jìn)行水解，則能夠在工業(yè)上有利地制造90％以上的高純度的化合物(A)，從而完成了本發(fā)明。

即，本發(fā)明提供以下的〔1〕～〔4〕。

〔1〕一種下述式(1)所示的化合物或其鹽。

(式中，R¹表示烷基或芳烷基。)

〔2〕如〔1〕所述的化合物或其鹽，其中，R¹為烷基。

〔3〕如〔1〕或〔2〕所述的化合物或其鹽，其為酸加合鹽。

〔4〕一種下述式(A)所示的化合物或其鹽的制造方法，其特征在于：對(duì)〔1〕～〔3〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽進(jìn)行水解。

發(fā)明的效果

化合物(1)能夠利用簡(jiǎn)便的操作進(jìn)行精制，如果對(duì)該化合物(1)進(jìn)行水解，則能夠在工業(yè)上有利地制造高純度的化合物(A)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的化合物(1)或其鹽作為化合物(A)的合成中間體是有用的。

式(1)中，R¹表示烷基或芳烷基。作為烷基，可以列舉碳原子數(shù)1～12的直鏈或支鏈的烷基。其中，優(yōu)選碳原子數(shù)1～8的直鏈或支鏈的烷基，更優(yōu)選碳原子數(shù)1～4的直鏈或支鏈的烷基。作為該烷基的例子，可以列舉甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基等，但特別優(yōu)選甲基。

作為芳烷基，優(yōu)選總碳原子數(shù)7～18的芳烷基，更優(yōu)選C_6-14芳基－C_1-4烷基，進(jìn)一步優(yōu)選苯基－C_1-4烷基，特別優(yōu)選芐基。

上述的R¹中，優(yōu)選烷基，更優(yōu)選C_1-6烷基，進(jìn)一步優(yōu)選C_1-4烷基，特別優(yōu)選甲基。

另外，作為化合物(1)的鹽，可以列舉酸加合鹽，具體而言，可以列舉鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽等無機(jī)酸鹽；乙酸鹽、三氟乙酸鹽等有機(jī)酸鹽，作為無機(jī)酸鹽，優(yōu)選鹽酸鹽，作為有機(jī)酸鹽，優(yōu)選三氟乙酸鹽。其中，更優(yōu)選鹽酸鹽。

化合物(1)及其鹽中，從容易以結(jié)晶的形態(tài)分離且容易精制的方面考慮，優(yōu)選R¹為C_1-6烷基的化合物(1)的鹽，更優(yōu)選R¹為C_1-6烷基的化合物(1)的酸加合鹽，進(jìn)一步優(yōu)選R¹為C_1-4烷基的化合物(1)的酸加合鹽，特別優(yōu)選R¹為甲基的化合物(1)的酸加合鹽。

化合物(1)或其鹽和化合物(A)能夠通過例如像下述反應(yīng)式所示、使4-氨基哌啶-4-羧酸、D-賴氨酸(D-Lys)、D-亮氨酸(D-Leu)、D-苯丙氨酸(D-Phe)和D-苯丙氨酸(D-Phe)依次縮合的液相肽合成法制造。

(式中，P¹和P²分別表示N-保護(hù)基，R¹的含義與上述相同。)

上述反應(yīng)式中，P¹和P²所示的N-保護(hù)基分別優(yōu)選能夠利用不同的脫除方法脫除的保護(hù)基。作為這些保護(hù)基，可以列舉：(1)能夠用酸脫除的保護(hù)基(例如，叔丁氧基羰基(Boc)、對(duì)甲氧基芐氧基羰基(Moz)、甲酰基(CHO)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基(Teoc)、1-金剛烷氧基羰基(Adoc)、2-(對(duì)聯(lián)苯基)異丙氧基羰基(Bpoc)、三苯甲基(Tr)、甲氧基甲基(MOM))；(2)能夠利用還原脫除的保護(hù)基(例如，芐氧基羰基(Cbz)、烯丙基(Allyl)、N-芐氧基甲基(BOM))；(3)能夠用仲胺脫除的保護(hù)基(例如，9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、2-(4-硝基苯基)乙氧基羰基(Npeoc))；(4)能夠用鋅末－乙酸等脫除的保護(hù)基(例如，2,2,2-三氯乙氧基羰基(Troc)、N-二硫代琥珀?；?Dts)、苯并噻唑-2-磺?；?Betsyl)、1,1-二甲基-2,2,2-三氯乙氧基羰基(TcBoc)、N-(二苯基-4-吡啶基)甲基(Dppm))；(5)在鈀催化劑存在下能夠用胺等脫除的保護(hù)基(例如，烯丙氧基羰基(Alloc))等。作為P¹和P²，可以選擇使用這些保護(hù)基中的脫除條件不同的基團(tuán)。例如，作為P¹，優(yōu)選Boc，作為P²，優(yōu)選Cbz。

化合物(2)與保護(hù)D-Leu的縮合、化合物(4)與保護(hù)D-Leu的縮合、化合物(6)與保護(hù)D-Phe的縮合和化合物(8)與保護(hù)D-Phe的縮合反應(yīng)例如可以在分子篩、1-羥基苯并三唑(HOBt)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)、N,N-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)等縮合劑的存在下進(jìn)行。具體而言，可以通過在縮合劑的存在下，在鹵素系、酯系或者醚系等的溶劑中以0～40℃反應(yīng)1～48小時(shí)而進(jìn)行。

另外，脫保護(hù)反應(yīng)可以選擇與上述的保護(hù)基的種類相對(duì)應(yīng)的方法而進(jìn)行。為了能夠使化合物(1)成為鹽酸鹽等酸加合鹽，優(yōu)選選擇能夠用酸脫除的保護(hù)基(例如Boc)作為P¹，優(yōu)選選擇能夠利用還原脫除的保護(hù)基(例如(Cbz))作為P²。使用Boc作為P¹時(shí)，如果利用例如使用酸的水解對(duì)P¹進(jìn)行脫保護(hù)，則可以獲得化合物(1)的酸加合鹽。利用還原的脫保護(hù)例如可以通過在金屬催化劑的存在下，在酯系或者醚系等的溶劑中以0～40℃反應(yīng)1～48小時(shí)而進(jìn)行。利用酸的脫保護(hù)例如可以通過在無機(jī)酸或三氟乙酸等的存在下，在酯系或者醚系等的溶劑中以0～40℃反應(yīng)1～48小時(shí)而進(jìn)行。

化合物(1)的鹽能夠利用再結(jié)晶等容易地精制。另外，化合物(1)的鹽即使不精制也是充分高的純度。因此，如果對(duì)化合物(1)的鹽進(jìn)行水解，則能夠制造高純度的化合物(A)。其中，水解反應(yīng)例如優(yōu)選在堿的存在下進(jìn)行。具體而言，可以通過在氫氧化鈉等的存在下，在水或醇系等的溶劑中以0～40℃反應(yīng)1～48小時(shí)而進(jìn)行。

根據(jù)利用本發(fā)明方法(液相法)的化合物(A)的制造方法，與固相合成法相比，不容易生成非對(duì)映異構(gòu)體和缺陷肽這樣的難以去除的雜質(zhì)，另外，即使生成，也能夠在中間工序中除去。另外，與固相合成法相比，由于能夠?qū)χ虚g體化合物進(jìn)行分離，因此能夠?qū)嵤┝蠞{法和再結(jié)晶法等操作比較容易且不需要高價(jià)的設(shè)備投資的過濾精制方法，可以容易得到例如以HPLC測(cè)定為純度99％的高純度的目標(biāo)物。

在固相合成法中，使用的溶劑限定于二氯甲烷和二甲基甲酰胺等，與此相比，在液相合成法中，可以使用適于工業(yè)化的安全且廉價(jià)的溶劑。與固相合成法相比，容易大量合成。在固相合成法中最終化合物的精制多數(shù)需要“分取HPLC法”(通常需要高額的設(shè)備、大量的有機(jī)溶劑)，但在液相合成法中能夠避免這些問題。

實(shí)施例

接著，列舉實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)地說明。

實(shí)施例1

(1)Cbz-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(3)的合成

向2L的4口燒瓶中裝入α-Boc-Pic-OMe·HCl[α-Boc-4-氨基哌啶-4-羧酸甲酯鹽酸鹽](2)43.7g(148mmol)，懸浮于EtOAc 656mL(15v/w)。向該懸浮液中加入1-羥基苯并三唑(HOBt)27.2g(178mmol)、Cbz-D-Lys(Boc)-OH 59.2g(156mmol)，一邊利用冰浴冷卻一邊添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺·HCl(EDC·HCl)34.1g(178mmol)。20分鐘后，升溫至室溫，攪拌12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 218mL(5.0v/w)，將有機(jī)層分液。向得到的有機(jī)層中加入NaHCO₃aq.218mL(5.0v/w)、Et₃N 33.0g(326mmol)，攪拌30分鐘，進(jìn)行分液。依次用1N HCl 218mL(5.0v/w)、NaHCO₃aq.218mL(5.0v/w)、NaClaq.218mL(5.0v/w)洗滌有機(jī)層，加入Na₂SO₄ 8.74g(0.2w/w)進(jìn)行干燥。進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮后，利用真空泵進(jìn)行泵取，以白色固體狀態(tài)得到Cbz-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(3)88.9g(收率96.5％，HPLC純度96.5％)。

(2)D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(4)的合成

向2L的茄形燒瓶中裝入Cbz-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(3)88.3g(142mmol)，加入441mL(5.0v/w)EtOAc使之溶解。向反應(yīng)液中加入17.7g(0.2w/w)5％Pd/C，在減壓氣氛下進(jìn)行3次氮置換后，進(jìn)行3次氫置換。將反應(yīng)溶液在室溫下激烈地?cái)嚢?8小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)行減壓過濾，除去Pd/C。向得到的濾液中加入NaHCO₃aq.441mL(5.0v/w)進(jìn)行分液，向水層中加入EtOAc 200mL(2.3v/w)，提取有機(jī)層。向合并的有機(jī)層中加入NaHCO₃aq.441mL(5.0v/w)進(jìn)行分液，向水層中加入EtOAc 200mL(2.3v/w)，提取有機(jī)層。向合并的有機(jī)層中加入NaClaq.441mL(5.0v/w)進(jìn)行分液，向水層中加入EtOAc 200mL(2.3v/w)，進(jìn)行提取。向合并的有機(jī)層中加入Na₂SO₄ 17.7g(0.2w/w)進(jìn)行干燥，進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮，利用真空泵進(jìn)行泵取，得到62.7g D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(4)(收率90.5％，HPLC純度93.6％)。

(3)Cbz-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(5)的合成

向2L的4口燒瓶中裝入D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(4)57.7g(120mmol)，懸浮于EtOAc 576mL(10v/w)中。向該懸浮液中加入HOBt 19.3g(126mmol)、Cbz-D-Leu-OH 33.4g(126mmol)，一邊利用冰浴進(jìn)行冷卻一邊添加EDC·HCl 24.2g(126mmol)。20分鐘后，升溫至室溫，攪拌5小時(shí)后，再添加1.15g(6.00mmol)EDC·HCl，攪拌16小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 576mL(10v/w)進(jìn)行分液。向得到的有機(jī)層中加入NaHCO₃aq.576mL(10v/w)、Et₃N 24.3g(240mmol)，攪拌30分鐘，進(jìn)行分液。依次用1N HCl 576mL(10v/w)、NaHCO₃aq.576mL(10v/w)、NaClaq.576mL(10v/w)洗滌有機(jī)層，加入Na₂SO₄ 11.5g(0.2w/w)進(jìn)行干燥。進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮后，利用真空泵進(jìn)行泵取，以白色固體狀態(tài)得到Cbz-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(5)85.8g(收率98.7％，HPLC純度96.9％)。

(4)D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(6)的合成

向1L的茄形燒瓶中裝入91.9g(125mmol)Cbz-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(5)，加入459mL(5.0v/w)EtOAc使之溶解。向反應(yīng)液中加入18.4g(0.2w/w)5％Pd/C，在減壓氣氛下進(jìn)行3次氮置換后，進(jìn)行3次氫置換。將反應(yīng)溶液在室溫下進(jìn)行8小時(shí)激烈地?cái)嚢瑁磻?yīng)結(jié)束后，進(jìn)行減壓過濾，除去Pd/C。向得到的濾液中加入NaHCO₃aq.200mL(2.2v/w)進(jìn)行分液，向有機(jī)層中依次加入NaHCO₃aq.200mL(2.2v/w)、NaClaq.200mL(2.2v/w)進(jìn)行洗滌。向得到的有機(jī)層中加入Na₂SO₄ 18.4g(0.2w/w)進(jìn)行干燥，進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮，利用真空泵進(jìn)行泵取。向得到的非晶態(tài)的固體中加入EtOAc 200mL(2.2v/w)使之溶解，加入庚烷50mL(1.8v/w)進(jìn)行晶析。進(jìn)行減壓過濾，將析出結(jié)晶過濾，利用EtOAc 120mL(1.3v/w)、庚烷50mL(0.3v/w)的混合溶劑洗滌結(jié)晶。向得到的結(jié)晶46.1g中加入EtOAc 480mL(5.2v/w)使之溶解，加入環(huán)己烷660mL(7.2v/w)進(jìn)行晶析。進(jìn)行減壓過濾，將析出結(jié)晶過濾，利用環(huán)己烷120mL(1.3v/w)、EtOAc 20mL(0.2v/w)的混合溶劑進(jìn)行洗滌，30℃下進(jìn)行減壓干燥，以白色固體狀態(tài)得到36.6g D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(6)(收率48.7％，HPLC純度99.9％)。

(5)Cbz-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)的合成

向1L的4口燒瓶中裝入35.8g(59.6mmol)D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(6)，懸浮于EtOAc 358mL(10v/w)。向該懸浮液中加入HOBt 9.59g(62.6mmol)、Cbz-D-Phe-OH 18.7g(62.6mmol)，一邊利用冰浴進(jìn)行冷卻一邊添加EDC·HCl 12.0g(62.6mmol)。20分鐘后，升溫至室溫，攪拌16小時(shí)后，再添加3.09g(16.1mmol)EDC·HCl。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 358mL(10v/w)，將有機(jī)層分液。向得到的有機(jī)層中加入NaHCO₃aq.358mL(10v/w)、Et₃N 12.1g(119mmol)，攪拌30分鐘，進(jìn)行分液。利用1N HCl 358mL(10v/w)、NaHCO₃aq.358mL(10v/w)、NaClaq.358mL(10v/w)依次洗滌有機(jī)層，加入Na₂SO₄7.16g(0.2w/w)進(jìn)行干燥。進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮后，利用真空泵進(jìn)行泵取，以白色固體狀態(tài)得到52.5g Cbz-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度97.6％)。

(6)D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(8)的合成

向2L的茄形燒瓶中裝入46.9g(53.3mmol)Cbz-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)，加入840mL(18v/w)EtOAc、93.8mL(2.0v/w)H₂O使之溶解。向反應(yīng)液中加入9.38g(0.2w/w)5％Pd/C，在減壓氣氛下進(jìn)行3次氮置換后，進(jìn)行3次氫置換。將反應(yīng)溶液在室溫下進(jìn)行10小時(shí)激烈地?cái)嚢?，反?yīng)結(jié)束后，進(jìn)行減壓過濾，除去Pd/C。向得到的濾液中加入NaHCO₃aq.235mL(5.0v/w)進(jìn)行分液，向有機(jī)層中依次加入NaHCO₃aq.235mL(5.0v/w)、NaClaq.235mL(5.0v/w)進(jìn)行洗滌。向得到的有機(jī)層中加入Na₂SO₄ 9.38g(0.2w/w)進(jìn)行干燥，進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮，利用真空泵進(jìn)行泵取，得到39.7g D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(7)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度97.3％)。

(7)Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)的合成

向1L的4口燒瓶中裝入35.1g D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(8)，懸浮于EtOAc 351mL(10v/w)。向該懸浮液中加入HOBt 7.92g(51.7mmol)、Boc-D-Phe-OH 13.1g(49.4mmol)，一邊利用冰浴進(jìn)行冷卻一邊添加EDC·HCl 9.91g(51.7mmol)。20分鐘后，升溫至室溫，攪拌8小時(shí)后，再添加2.25g(11.7mmol)EDC·HCl。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 351mL(10v/w)，對(duì)有機(jī)層分液。向得到的有機(jī)層中加入NaHCO₃aq.351mL(10v/w)、Et₃N 9.51g(94.0mmol)，攪拌30分鐘，進(jìn)行分液。依次用1N HCl 351mL(10v/w)、NaHCO₃aq.351mL(10v/w)、NaClaq.351mL(10v/w)洗滌有機(jī)層，加入Na₂SO₄7.02g(0.2w/w)進(jìn)行干燥。進(jìn)行減壓過濾，利用蒸發(fā)器對(duì)得到的濾液進(jìn)行減壓濃縮后，利用真空泵進(jìn)行泵取，以白色固體狀態(tài)得到46.7g Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度98.6％)。

(8)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)的合成

向20mL的茄形燒瓶中裝入2.00g Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)，加入IPA 3.3mL(1.65v/w)、PhMe 10mL(5v/w)使之懸浮。加入6N HCl/IPA 6.7mL(3.35v/w)，室溫下攪拌19小時(shí)。利用減壓過濾對(duì)析出的固體進(jìn)行過濾，進(jìn)行減壓干燥，得到白色固體的D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)1.59g(收率99.0％，HPLC純度98.2％)。

(9)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)的精制

向20mL的茄形燒瓶中裝入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽粗晶體(1)200mg，加入EtOH﹕MeCN＝1﹕5的混合溶劑4.0mL(20v/w)，加熱至40℃，攪拌1小時(shí)后，再在室溫下攪拌2小時(shí)形成漿料。進(jìn)行減壓過濾而分離，對(duì)得到的固體進(jìn)行減壓干燥，得到白色固體((1)精制晶體)161mg(收率80％，HPLC純度99.2％)。

(10)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成(使用精制的(1))

向10mL的茄形燒瓶中裝入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)精制晶體38.5mg(0.0488mmol)，加入H₂O 0.2mL(5.2v/w)使之溶解。室溫下滴加1N NaOH 197μL(0.197mmol)，攪拌1.5h。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 48.8μL(0.0488mmol)，利用蒸發(fā)器進(jìn)行減壓濃縮，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度99.7％)。

D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe(1)的物性

¹H NMR(400MHz,1M DCl)δppm:0.85-1.02(m,6H),1.34-1.63(m,5H),1.65-2.12(m,5H),2.23-2.45(m,2H),2.96-3.12(m,4H),3.19(ddt,J＝5.0&5.0&10.0Hz),3.33-3.62(m,1H),3.68-3.82(m,1H),3.82-3.95(m,4H),3.95-4.18(m,1H),4.25-4.37(m,2H),4.61-4.77(m,2H),7.21-7.44(m,10H)

¹³C NMR(400MHz,1M DCl)δppm:21.8,22.5,24.8,27.0,30.5,30.8,31.0,31.2,31.7,37.2,37.8,38.4,39.0,39.8,40.4,40.6,41.8,42.3,49.8,50.2,52.2,52.6,54.6,55.2,57.7,57.9,127.6,128.4,129.2,129.6,129.7,129.8

d.p 209.5℃

實(shí)施例2

(使用三氟乙酸(TFA))

(1)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe TFA鹽(1)的合成

向50mL的茄形燒瓶中依次加入TFA 18mL(18v/w)、1-十二硫醇1.6mL(1.6v/w)、三異丙基硅烷0.2mL(0.2v/w)、H₂O 0.2mL(0.2v/w)并攪拌。將Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)1.00g(1.01mmol)利用刮勺向其溶液中逐次添加少量。反應(yīng)結(jié)束后，利用蒸發(fā)器進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)渭拥絀PE 20mL(20v/w)中。將析出的固體進(jìn)行過濾，對(duì)得到的固體進(jìn)行減壓干燥，以白色固體狀態(tài)得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe·TFA鹽(1)(收率93.0％，HPLC純度95.2％)。

(2)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成

向10mL的茄形燒瓶中裝入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe TFA鹽(1)83mg(0.0843mmol)，加入H₂O 431μL(5.2v/w)使之溶解。室溫下滴加1N NaOH 345μL(0.345mmol)，攪拌12h。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 84.3μL(0.0843mmol)，利用蒸發(fā)器進(jìn)行減壓濃縮，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度95.4％)。

實(shí)施例3

(使用HCl/EtOAc)

(1)向30mL的茄形燒瓶中裝入Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)1.00g(1.01mmol)，加入EtOAc 7.0mL(7.0v/w)使之溶解。加入4N HCl/EtOAc 5.0mL(5.0v/w)，室溫下攪拌24h后，對(duì)析出的固體進(jìn)行減壓過濾而分離，用EtOAc 2mL(2.0v/w)進(jìn)行洗滌。對(duì)得到的固體進(jìn)行減壓干燥，以白色固體狀態(tài)得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)781mg(收率96.7％，HPLC純度95.4％)。

(2)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成

向10mL的茄形燒瓶中裝入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)90mg(0.112mmol)，加入H₂O 0.47mL(5.2v/w)使之溶解。室溫下滴加1N NaOH 459μL(0.459mmol)，攪拌12h。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 0.112μL(0.112mmol)，利用蒸發(fā)器進(jìn)行減壓濃縮，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度93.1％)。

實(shí)施例4

通過化合物(1)的水解而合成化合物(A)(化合物(1)沒有精制)

向10mL的茄形燒瓶中裝入D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe(1)鹽酸鹽(前工序沒有精制)114.5mg(0.142mmol)，加入H₂O 595μL(5.2v/w)使之溶解。室溫下滴加1N NaOH 586μL(0.586mmol)，攪拌14h。反應(yīng)結(jié)束后，加入1N HCl 0.15μL(0.150mmol)，利用蒸發(fā)器進(jìn)行減壓濃縮，得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率產(chǎn)量(quant)，HPLC純度95.2％)。

比較例1

不經(jīng)過化合物(1)的路徑(使用全保護(hù)體Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(a))

(1)Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OH的合成

向30mL的茄形燒瓶中裝入Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OMe(9)1.00g(1.00mmol)，加入MeOH 5.0mL(5.0v/w)使之溶解。室溫下加入1N NaOH 1.1mL(1.10mmol)，攪拌4天后，再加入MeOH 5.0mL(5.0v/w)、1N NaOH 2.0mL(2.0mmol)，以35℃攪拌3h。反應(yīng)結(jié)束后加入1N HCl 6.1mL，進(jìn)行減壓濃縮，蒸餾除去溶劑后，加入EtOAc 5.0mL(5.0mL)，將有機(jī)層分液。加入NaClaq.5.0mL(5.0v/w)洗滌有機(jī)層，對(duì)有機(jī)層進(jìn)行減壓濃縮，以白色固體狀態(tài)得到Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OH 975.1mg(收率99.3％，HPLC純度80.8％)

(2)D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)的合成

向20mL的茄形燒瓶中裝入Boc-D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys(Boc)-α-Boc-Pic-OH(10)959mg(0.978mmol)，加入EtOAc 4.9mL(5.0v/w)使之溶解。室溫下滴加4N HCl/EtOAc 4.9mL(5.0mL)，室溫下攪拌4h。反應(yīng)結(jié)束后，進(jìn)行減壓過濾，以白色固體狀態(tài)得到D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic(A)(收率96.4％，HPLC純度79.2％)。

不經(jīng)過本發(fā)明的化合物(1)時(shí)，得到的化合物(A)的純度小于80％。

實(shí)施例5

(D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)的合成)

在上述實(shí)施例1的(8)中，將反應(yīng)溶劑IPA(1.65v/w)代替為表1的溶劑和量，同樣進(jìn)行反應(yīng)。將結(jié)果表示在表1中。

[表1]

實(shí)施例6

(D-Phe-D-Phe-D-Leu-D-Lys-Pic-OMe鹽酸鹽(1)的精制)

在上述實(shí)施例1的(9)中，將精制溶劑EtOH/MeCN(16.7﹕83.5、20v/w)代替為表2的溶劑和量，同樣進(jìn)行反應(yīng)。將結(jié)果表示在表2中。

[表2]