專利名稱：抗真菌劑——硫色(滿)酮系列物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種抗真菌藥物，確切地說它是硫色(滿)酮系列物。
真菌病是多發(fā)、難治的病癥。根據(jù)真菌侵犯人體的部位可分為淺部真菌病(癬)和深部真菌病兩類。隨著廣譜抗菌素、激素類藥物、免疫抑制劑和放射治療的普遍應(yīng)用及80年代的艾滋病等嚴(yán)重摧殘機(jī)體的免疫機(jī)能，使深部真菌病明顯增加危害患者的生命，而臨床上深部真菌病的治療藥物仍為數(shù)極少。目前廣泛應(yīng)用的唑類藥物已發(fā)展到第三代。酮康唑因毒副作用大，有死亡病例的報(bào)告。首選的氟康唑也因毒副作用明顯，應(yīng)用上受到限制，因此尋找和開發(fā)新的高效、低毒的抗真菌藥物已成為很有實(shí)際意義的研究工作。
本發(fā)明的目的就是提供一種由天然物質(zhì)經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾而產(chǎn)生的新型抗真菌劑，它不但對(duì)常見致病真菌具有較好的抑菌活性，而且對(duì)深部真菌具有良好的殺菌活性，而且毒性很小或無毒。
本發(fā)明的目的是通過如下方案實(shí)現(xiàn)的，它將取代苯硫酚溶于10％氫氧化鉀溶液中，又將β-氯丙酸溶于計(jì)算量的碳酸鉀溶液中，兩溶液混溶后，回流2～8小時(shí)，除盡醇后抽濾，濾液用濃鹽酸酸化，抽濾，水洗，干燥，得β-(取代苯硫)-丙酸固體。用濃硫酸縮合得取代硫色滿酮。其特征如下
其中n＝0.2(a)當(dāng)R1、R2、R3、中有一個(gè)或二個(gè)為H時(shí)，另外二個(gè)或一個(gè)分別為(a)R1＝F，Cl，Br，-OH，-OCH3，OC2H5，-CH3；R2＝F，Cl，-CH3，-CF3；R3＝F，Cl，-CH3；(b)R4＝H，-CH3；R5＝H，Br，-CH3，-CH2Ph，-CH2Ny＝H，-CH3，-C2H5，Ph或取代苯基，也可和另外一個(gè)y及相連的N形成哌啶，哌嗪，吡咯，嗎啉，味唑，三氮唑等。
將取代苯硫酚加到醇及醇鈉溶液中，加熱到40～90℃，加入α-取代丙烯酸酯，反應(yīng)1～4小時(shí)。除盡溶劑，加入16N鹽酸回流水解2～24小時(shí)。冷卻、提取、干燥，除盡溶劑，加入濃硫酸，室溫?cái)嚢?～24小時(shí)。冰解，抽濾，甲(乙)醇/水重結(jié)晶，得3-取代硫色滿酮系列物。用PCl3處理可得相應(yīng)的硫色酮系列物。用過氧化氫處理則得相應(yīng)氧化物。還可將取代苯硫酚與β-羰基羧酸酯混溶后，加到預(yù)熱至60～110℃的PPA中，反應(yīng)0.5～2小時(shí)，冰解，抽濾，甲(乙)醇/水重結(jié)晶，得2-取代硫色酮系列物。用過氧化氫處理后可得相應(yīng)氧化物。其特征如下 其中n＝0，2R1、R2、R3、R4、R5、同上。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是，它是一種由天然物質(zhì)經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾而產(chǎn)生的新型抗真菌劑，它不但對(duì)深部真菌具有良好的殺菌活性，而且毒性很小或無毒，很有開發(fā)價(jià)值。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
表1、表2為本發(fā)明中部分化合物的理化常數(shù)。
表3為本發(fā)明中部分化合物的抑菌試驗(yàn)結(jié)果。
本發(fā)明的系列化合物的制備方法合成路線如下通式1
表1.部分化合物的理化常數(shù)
表2.部分化合物的理化常數(shù)
續(xù)表2
表3.抑菌試驗(yàn)結(jié)果表
本發(fā)明硫色酮、硫色滿酮系列物通過對(duì)10屬、19種27株真菌抑菌試驗(yàn)結(jié)果如下采用典型菌株白色念球菌(C.albicans)，熱帶念珠菌(C.tropicalis)，啤酒酵母菌(S.cererisiae)，新生隱球菌(C.neoformans)，絮狀表皮癬菌(E.floccosum)，石膏樣毛癬菌(T.gypsoum)，紅色毛癬菌(T.vubrum)，斷發(fā)毛癬菌(T.tonsurans)，石膏樣小孢子菌(M.gypseum)，鐵銹色小孢子菌(M.ferugineum)，木霉菌(Trichoderum)，黑曲霉菌(A.niger)，灰綠曲霉(A.glaucus)，普通青霉菌(P.commune)，裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)，卡氏枝孢霉菌(C.carionii)，緊密瓶霉菌(P.compaitum)，疣狀瓶霉菌(P.verrucosa)，申克孢子絲菌(S.schenekn)等10屬，19種27株真菌。
供試菌液制備將充分發(fā)育的供試菌種移至5ml無菌生理鹽水內(nèi)，搗碎，充分震蕩，去除塊狀物，混勻，作為原菌液，測(cè)試前調(diào)整其濃度為106CFU/ml后備用。
供試藥用適量DMSO溶解，再用無菌蒸餾水稀釋至1毫克/毫升后備用。
采用2倍稀釋法進(jìn)行抑菌活性測(cè)試。測(cè)試結(jié)果見表3。
具體實(shí)施例如下實(shí)施例1表1中化合物5的制備。將0.2克金屬鈉溶于4毫升無水甲醇中攪拌制成甲醇鈉溶液。向甲醇鈉溶液中加入5.2克(0.036摩爾)對(duì)氯苯硫酚，加熱至60-70℃加入4.2克(0.042摩爾)-甲基丙烯酸甲酯，在80℃攪拌4小時(shí)，蒸干溶劑加入6N鹽酸70毫升回流12小時(shí)，冷卻后用乙醚提取，無水硫酸鎂干燥。蒸除乙醚，剩余物用8毫升二氯甲烷溶解，室溫滴加于7毫升濃硫酸中，繼續(xù)攪拌4小時(shí)。
在另一容器中加入9毫升水，12毫升二氯甲烷，在劇烈攪拌下加入上述反應(yīng)液，分取二氯甲烷層，用水洗，無水硫酸鎂干燥，蒸去二氯甲烷，得到3-甲基-6-氯硫色滿酮2.5克，收率32％，甲醇重結(jié)晶，mp72-73℃。
IR(cm-1)主要峰位1670(＞C＝O)，1575，1445(C6H6)。
將3-甲基-6-氯硫色滿酮1克溶解于8毫升冰乙酸中，加入5毫升30％H2O2，室溫放置5天，加水，抽濾，用氯仿一石油醚重結(jié)晶得3-甲基-6-氯硫色滿酮1.1-二氧化物0.8克，收率70％，mp147-149℃。
IR(cm-1)主要峰位2900(-CH3)；1695(＞C＝O)，1595，1445(C6H6)。
實(shí)施例2表1中化合物16的制備。將0.05克-0.2克金屬鈉溶于1-4毫升無水甲醇，攪拌制成甲醇鈉液中，在60-70℃范圍內(nèi)加入4克(0.021摩爾)α-芐基丙烯酸乙酯，在80-90℃攪拌1-4小時(shí)，蒸干溶劑，加入35毫升6N鹽酸回流12小時(shí)，冷卻，用乙醚提取，無水硫酸鎂干燥。蒸去乙醚，剩余物溶于5毫升二氯甲烷，室溫滴加于5毫升濃硫酸中，反應(yīng)2-24小時(shí)。在另一容器中加入水6毫升，二氯甲烷8毫升，將上述反應(yīng)液滴入，分取二氯甲烷層，用水洗，無水氯化鈣干燥，蒸去二氯甲烷，用甲醇重結(jié)晶，得到3-芐基-6-氯硫色滿酮，mp70-71℃。
IR(cm-1)主要峰位2890(-CH3)，1650(＞C＝O)，1540，1430(C6H6)。
實(shí)施例3表1中化合物21的制備。將2.6克(0.02摩爾)鄰甲基苯硫酚溶于5.2克(0.04摩爾)乙酰乙酸乙酯中，于10-15分鐘滴加于70-80℃的PPA中，在80-90℃攪拌1小時(shí)，冰解，室溫放置過夜。抽濾，濾餅用甲醇水重結(jié)晶，得2、8-二甲基硫色酮3克，收率75％，mp116-117℃。
IR(cm-1)主要峰位2900(-CH3)，1620(＞C＝O)，1590，1445(C6H6)。
附PPA制備在干燥管保護(hù)的瓶中，加入40毫升85％磷酸，62克五氧化二磷，水浴溶解即可。
實(shí)施例4表1中化合物6的制備。將2、8-二甲基硫色酮0.85克(0.0045摩爾)溶于40毫升冰乙酸中，加入2.7克(0.024摩爾)30％H2O2，在100℃反應(yīng)1小時(shí)，冰解，過濾，甲醇重結(jié)晶得2、8-二甲基硫色酮1.1-二氧化物1克，收率87％，mp120℃。
IR(cm-1)主要峰位3000(-CH3)，1670(＞C＝O)，1580，1440(C6H6)，1300，1150。
實(shí)施例5表1中化合物1的制備。6-氟硫色(滿)酮的制備將取代苯硫酚0.05摩爾溶于10％氫氧化鉀溶液30毫升(0.055摩爾)中，并加適量乙醇，攪拌使溶液均勻。又將β-氯丙酸6.8克(0.055摩爾)溶于計(jì)算量的碳酸鉀溶液中。兩溶液相混后，攪拌下，加熱回流4小時(shí)。蒸醇。殘留物冷卻，抽濾。濾液用37％鹽酸酸化，β-(取代苯硫)-丙酸析出。抽濾，濾餅用水洗干燥。得黃白色固體8.0克，產(chǎn)率80.0％。
將β-(取代苯硫)-丙酸0.025毫升，溶于98％硫酸50克(0.50摩爾)中，室溫放置12小時(shí)。冰解，有大量淺黃色固體析出。抽濾，濾餅依次用5％碳酸氫鈉溶液、水洗至中性，得粗品。用50％乙醇重結(jié)晶，得淺黃色片狀晶體1.8克，產(chǎn)率40.1％。m.p.92-94℃。IR(VmaxKBrcm-1)1660(C＝O)，1600 1470 900 830(C6H6)。1H-NMR(CDCl3)δppm2.8-3.3(m4H)，7.0-7.4(m2H)，7.7-7.9(dd1H)。元素分析C9H7FOS。計(jì)算值(％)C59.32，H3.87。實(shí)測(cè)值(％)C58.08，H3.87。
將化合物6-氟硫色滿酮3.3克(0.018摩爾溶于70毫升苯中，加入五氯化磷11.4克(0.054摩爾)。電磁攪拌下，加熱回流1h。冷卻后有固體析出。抽濾，得粗品。用甲醇-水重結(jié)晶，得淺黃色晶體1.5克，產(chǎn)率46.2％。m.p.158-160℃。IR(VmaxKBrcm-1)1640(C＝O)，1600 1480 890820(C6H6)，1430(C＝C)。1H-NMR(CDCl3)δppm7.0(d1H)，7.3-7.8(m2H)，7.9(d1H)，8.2(dd1H)。元素分析C9H5FOS。計(jì)算值(％)C59.76，H2.83。
實(shí)施例6表1中化合物3的制備將9401.3.6克(0.02毫升)、多聚甲醛0.6克(0.02摩爾)溶于50毫升苯中，電磁攪拌下，加熱回流0.5小時(shí)。再加入二甲胺鹽酸鹽1.6克(0.02摩爾)，攪拌10分鐘后，滴加37％鹽酸，使PH為3～4。加熱回流6小時(shí)。冷卻，抽濾，濾餅用苯洗，得白色固體。用無水乙醇重結(jié)晶，得白色固體2.7克，產(chǎn)率47.3％。m.p.172-174℃。IR(VmaxKBrcm-1)1680(C=O)，1600 1470 860 820(C6H6)，2700(N+H)，1260(C-N)，1410(CH3)。1H-NMR(D2O)δppm3.0(s6H)，3.1-3.9(m5H)，7.3(d2H)，7.7(d1H)。元素分析C12H15ClFNOS。計(jì)算值(％)C52.27，H5.48，N5.08。實(shí)測(cè)值(％)C52.04，H5.45，N5.04。
實(shí)施例7表1中化合物4的制備實(shí)驗(yàn)操作與3的制備相似。投料9403 4.3克(0.02摩爾)。粗品用無水乙醇重結(jié)晶，得白色晶體2.8克，產(chǎn)率45.2％。m.p.168-170℃。IR(VmaxKBrcm-1)1675(C＝O)，1600 1470(C6H6)，2650(N+H)，1240(C-N)，1380(CH3)。1H-NMR(D2O)δppm3.0(s6H)，3.2-3.9(m5H)，7.4(d1H)，7.8(d1H)，10.6(m1H)。元素分析C12H14Cl2FNOS。計(jì)算值(％)C46.26，H4.52。實(shí)測(cè)值(％)C46.63，H4.48，N4.39。
實(shí)施例8表1中化合物8的制備。將對(duì)氯硫酚2.0克(0.014摩爾)，β-氯丙酸1.6克(0.014摩爾)，10％氫氧化鉀溶液8毫升和2.1克碳酸鉀加入反應(yīng)瓶中，加適量乙醇，使原料完全溶解。100℃回流2小時(shí)，冷卻，濾除結(jié)晶。濾液減壓蒸去乙醇，濃縮液加鹽酸調(diào)PH為3，白色固體析出，抽濾，石油醚洗，干燥，然后加入17毫升濃硫酸，室溫?cái)嚢?小時(shí)，冰解，抽濾，碳酸氫鈉水溶液洗，水洗，干燥，得2.0克6-氯硫色滿酮，產(chǎn)率76％，mp66-7℃。
將1.42克(0.07摩爾)6-氯硫色滿酮，0.75克(0.025摩爾)多聚甲醛，2克(0.025摩爾)鹽酸二甲胺和20毫升苯加入反應(yīng)瓶中，攪拌加入濃鹽酸至PH為3，回流6小時(shí)，冷卻，將苯傾出，無水甲醇重結(jié)晶，得0.87克化合物D-22，產(chǎn)率42％，mp160-1℃。IR(cm-1)2950(CH3)2600-2450(N+H)，1665(C＝O)，1580 1480(C6H6)。1H-NMR(D2O)δ3.0(3H，s)，3.05(3H，s)，3.8-3.2(5H，m)，7.45(2H，m)，7.95(1H，d)。元素分析C12H16CL2NOS，理論值C49.33，H5.14，N4.80(％)，實(shí)測(cè)值C49.33，H5.26，N4.90(％)。
實(shí)施例9表1中化合物9的制備。將對(duì)甲基苯硫酚2.0克(0.016摩爾)，β-氯丙酸2.0克(0.018摩爾)，10％氫氧化鉀溶液9毫升和2.4克碳酸鉀加入反應(yīng)瓶中，加適量乙醇，使原料完全溶解。100℃回流2小時(shí)，冷卻，濾除結(jié)晶，濾液減壓蒸去乙醇，濃縮液加鹽酸至PH為3，白色沉淀析出，抽濾，石油醚洗，干燥，然后與11.0毫升濃硫酸室溫?cái)嚢?小時(shí)，冰解，6-甲基硫色滿酮即沉淀析出，抽濾，濾餅用碳酸氫鈉水溶液洗，水洗，干燥，得白色固體2.0克，即為6-甲基硫色滿酮。
將1.3克(0.007摩爾)6-甲基硫色滿酮，0.44克(0.014摩爾)多聚甲醛，0.66克(0.008摩爾)二甲胺鹽酸鹽和5毫升無水乙醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，加入氯化氫無水乙醇溶液，使PH為3。回流四小時(shí)，冷卻有固體物析出，過濾，得1.2克白色固體，無水甲醇重結(jié)晶，得白色結(jié)晶0.8克，即化合物D-23，產(chǎn)率40％，mp156-7℃。IR(cm-1)2995(CH3)，2660-2460(N+H)，1680(C＝O)，1600 1470(C6H6)。1H-NMR(D2O)δ2.3(3H，s)，3.0(3H，s)，3.05(3H，s)，3.8-3.2(5H，m)，7.3(2H，m)7.8(1H，m)。元素分析C13H1C1NOS，理論值C57.35、H6.62，N5.15(％)。實(shí)測(cè)值C57.07，H6.35，N5.31(％)。
實(shí)施例10表1中化合物10的制備。將2.0克(0.016摩爾)鄰甲基苯硫酚，10％氫氧化鉀水溶液9.2毫升，β-氯丙酸1.8克(0.016摩爾)，2.4克碳酸鉀加入反應(yīng)瓶中，加入適量乙醇，使原料完全溶解。100℃回流2小時(shí)，冷卻，濾除結(jié)晶。濾液減壓蒸去乙醇，過濾，濾餅用石油醚洗，干燥，然后與16毫升濃硫酸室溫?cái)嚢?小時(shí)，冰解，8-甲基硫色滿酮即沉淀析出，抽濾，濾餅用碳酸氫鈉水溶液洗，水洗，干燥，得白色固體1.8克。
實(shí)施例11表1中化合物12的制備。
1、Mannich反應(yīng)產(chǎn)物(m)的制備。將6-氟硫色滿酮0.02摩爾、多聚甲醛溶于50毫升苯，攪拌，加熱回流30分鐘，再加入二甲胺鹽酸鹽0.02摩爾，攪拌10分鐘后滴加濃鹽酸使PH值為3～4。加熱回流6小時(shí)。冷卻，抽濾，濾餅用苯洗，得白色固體。用無水乙醇重結(jié)晶，得白色固體2.7克，收率47.3％。m.p.172-174℃。IR(VmaxKBrcm-1)1680(C＝O)，1600 1470 860 820(C6H6)，2700(N+H)，1260(C-N)，1410(CH3)。1H-NMR(D2O)δppm3.0(s，6H)，3.1-3.9(m，5H)，7.3(d，2H)，7.7(d，1H)。元素分析C12H15ClFNOS。理論值(％)C52.27，H5.48，N5.08。實(shí)測(cè)值(％)C52.04，H5.45，N5.04。
2、胺交換法制備Mannich堿。50毫升茄形瓶中加入0.0036摩爾的化合物(m)，0.0036摩爾磺胺及25毫升50％乙醇，室溫?cái)嚢?3小時(shí)后濾出。粗品用無水乙醇-丙酮重結(jié)晶，得淺黃色針晶0.5克，收率38.5％。m.p.175-177℃。IR(VmaxKBrcm-1)1660(C＝O)，1600 1470 825(C6H6)，3400(NH)，3300(SO2NH)，1150(C-N)。1H-NMR(CDCl3)δppm2.6(s，1H)，3.1-3.4(m，5H)，3.7(m，1H)，6.2(s，1H)，6.7(d，3H)，7.3(m，2H)，7.6(d，1H)，7.7(d，1H)。元素分析C16H15FN2O3S2。理論值(％)C52.45，H4.13，N7.65。實(shí)測(cè)值(％)C52.47，H4.28，N7.43。
實(shí)施例12表1中化合物11的制備。依實(shí)施例11法制得。無水乙醇重結(jié)晶。收率54.5％。m.p.80-81℃。IR(VmaxKBrcm-1)1660(C＝O)，1600 1500 890 810(C6H6)，3340(NH)，1300(C-N)。1H-NMR(CDCl3)δppm3.1-3.3(m，3H)，3.4-3.7(q，2H)，4.0-4.4(s，1H)，6.6(d，2H)，6.9(m，2H)，7.1(m，1H)，7.2(m，1H)，7.8(d，1H)。元素分析C16H13F2NOS。理論值(％)C6 2.94，H4.29，N4.59。實(shí)測(cè)值(％)C62.85，H4.31，H4.49。
權(quán)利要求
1.抗真菌劑——硫色(滿)酮系列物，其特征在于 其中n＝0，2(a)當(dāng)R1、R2、R3、中有一個(gè)或二個(gè)為H時(shí)，另外二個(gè)或一個(gè)分別為(a)R1＝F，Cl，Br，-OH，-OCH3，OC2H5，-CH3；R2＝F，Cl，-CH3，-CF3；R3＝F，Cl，-CH3；(b)R4＝H，-CH3；R5＝H，Br，-CH3，-CH2Ph，-CH2Ny＝H，-CH3，-C2H5，Ph或取代苯基，也可和另外一個(gè)y及相連的N形成哌啶，哌嗪，吡咯，嗎啉，味唑，三氮唑等。
全文摘要
本發(fā)明屬于一種抗真菌藥物硫色(滿)酮系列物，它解決了現(xiàn)有真菌病治療藥物—唑類藥物毒副作用大，應(yīng)用上受到限制的問題。它由天然物質(zhì)經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾而產(chǎn)生的新型抗真菌劑，它將取代苯硫酚經(jīng)加熱，水洗，干燥，再用濃硫酸縮合而取得的，其結(jié)構(gòu)式如下本發(fā)明不但對(duì)深部真菌具有良好的殺菌活性，而且毒性很小或無毒，很有開發(fā)價(jià)值。
文檔編號(hào)C07D335/00GK1147514SQ9611537
公開日1997年4月16日 申請(qǐng)日期1996年6月14日 優(yōu)先權(quán)日1996年6月14日
發(fā)明者方林, 張國梁, 于新蕊, 代志國, 朱全紅, 張騎兵 申請(qǐng)人:沈陽藥科大學(xué)