專利名稱：一種安托芬的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種安托芬的制備方法，特別是涉及一種應(yīng)用超臨界(X)2萃取和高速逆流色譜制備安托芬的方法。
背景技術(shù)：
老瓜頭是蘿摩科鵝絨藤屬植物，別名牛心樸，民間有藥用，以全草入藥，具有活血、 止痛、消炎等功效。安托芬是其主要活性成分，為異喹啉類生物堿。安托芬對K-562、HL_60和Hela細(xì)胞有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性，濃度為lmg/ml時，對P388抑制率為73. 1%。安托芬有抗菌作用，對枯草桿菌、藤黃微球菌和大腸桿菌等均有顯著抑制作用。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)安托芬的工業(yè)提取純化方法的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種安托芬的制備方法，該方法產(chǎn)品收率高、含量尚。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案如下 一種安托芬的制備方法，其特征在于包括以下步驟
(1)取老瓜頭原料細(xì)粉，加入堿性醇浸潤2-6小時，加入萃取釜中，采用超臨界(X)2萃
??；
(2)萃取物用3%的鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；
(3)以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8.5的氨水溶液為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離粗品中的安托芬，收集目標(biāo)組分，濃縮、干燥即得高含量安托芬。所述步驟(1)中堿性醇為90-99%甲醇，氨水調(diào)節(jié)pH8-10。
所述步驟(1)中超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40_55°C，萃取壓力為 30-40MPa, CO2流量為2_5ml/g生藥/min，萃取時間為2_4h，分離釜I溫度為40_45°C，壓力為7-9MPa，分離釜II溫度為30-40°C，壓力為4_6MPa。所述步驟(3)中正己烷-氯仿-甲醇_pH=8. 5的氨水溶液體積為3-5 7~9 :4_5 2-4。所述步驟(3)中溶劑系統(tǒng)上相為流動相，下相為固定相。本發(fā)明的積極效果在于
1)采用超臨界(X)2萃取，環(huán)保無污染，效率高，能耗較低；
2)采用高速逆流色譜分離，制備量大，樣品損失少，制備周期短，產(chǎn)品含量高。下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1
取原料細(xì)粉1kg，加300mlpH10的90%甲醇浸潤4小時，加入萃取釜中進(jìn)行超臨界萃取， 萃取溫度為55°C，萃取壓力為32MPa，CO2流量為3ml/g生藥/min，萃取時間為4h，分離釜 I溫度為42°C，壓力為7MPa，分離釜II溫度為35°C，壓力為5MPa，收集解析萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解萃取物，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按體積比為3 7 4 3混合，靜置，分出上下相，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)750rpm，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，控制流動相流速為2ml/min，收集安托芬流分，濃縮、干燥得安托芬191mg，經(jīng) HPLC檢測，含量為96. 3%ο實施例2:
取原料細(xì)粉1kg，加400mlpH9的95%甲醇浸潤6小時，加入萃取釜中進(jìn)行超臨界萃取， 萃取溫度為50°C，萃取壓力為35MPa，CO2流量為％il/g生藥/min，萃取時間為3h，分離釜 I溫度為40°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為30°C，壓力為6MPa，收集解析萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解萃取物，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按體積比為4 9 5 2混合，靜置，分出上下相，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)SOOrpm，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，控制流動相流速為2. 5ml/min，收集安托芬流分，濃縮、干燥得安托芬230mg， 經(jīng)HPLC檢測，含量為95. 4%。實施例3:
取原料細(xì)粉3kg，加1000mlpH8的99%甲醇浸潤6小時，加入萃取釜中進(jìn)行超臨界萃取， 萃取溫度為45°C，萃取壓力為30MPa，CO2流量為2ml/g生藥/min，萃取時間為2h，分離釜 I溫度為40°C，壓力為7MPa，分離釜II溫度為35°C，壓力為5MPa，收集解析萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解萃取物，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按體積比為3 8 5 4混合，靜置，分出上下相，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)700rpm，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，控制流動相流速為2ml/min，收集安托芬流分，濃縮、干燥得安托芬601mg，經(jīng) HPLC檢測，含量為95. 7%。實施例4:
取原料細(xì)粉^g，加1. SLpHlO的99%甲醇浸潤2小時，加入萃取釜中進(jìn)行超臨界萃取， 萃取溫度為55°C，萃取壓力為40MPa，CO2流量為5ml/g生藥/min，萃取時間為3h，分離釜 I溫度為45°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為40°C，壓力為4MPa，收集解析萃取物，用3%的鹽酸水溶液溶解萃取物，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、PH=8. 5的氨水溶液，按體積比為3 8 5 4混合，靜置，分出上下相，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)900rpm，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，控制流動相流速為2. 5ml/min,收集安托芬流分，濃縮、干燥得安托芬897mg， 經(jīng)HPLC檢測，含量為91.8%。實施例5:
取原料細(xì)粉10kg，加3LpH8的95%甲醇浸潤5小時，加入萃取釜中進(jìn)行超臨界萃取，萃取溫度為40°C，萃取壓力為35MPa，CO2流量為3ml/g生藥/min，萃取時間為4h，分離釜I溫度為40°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為30°C，壓力為6MPa，收集解析萃取物，用1的鹽酸水溶液溶解萃取物，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、 氯仿、甲醇、pH=8. 5的氨水溶液，按體積比為5 8 5 :4混合，靜置，分出上下相，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)850rpm，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，控制流動相流速為:3ml/min，收集安托芬流分，濃縮、干燥得安托芬2. lg，經(jīng)HPLC檢測，含量為96. 0%。
權(quán)利要求
1.一種安托芬的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)取老瓜頭原料細(xì)粉，加入堿性醇浸潤2-6小時，加入萃取釜中，采用超臨界(X)2萃?。?2)萃取物用3%的鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；(3)以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8.5的氨水溶液為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離粗品中的安托芬，收集目標(biāo)組分，濃縮、干燥即得高含量安托芬。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種安托芬的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中堿性醇為 90-99%甲醇，氨水調(diào)節(jié)pH8-10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種安托芬的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中超臨界CO2 萃取條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓力為30-40MPa，C02流量為2_5ml/g生藥/min，萃取時間為2-4h，分離釜I溫度為40-45°C，壓力為7-9MPa，分離釜II溫度為30_40°C，壓力為 4-6MPa。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種安托芬的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中正己烷-氯仿-甲醇_pH=8. 5的氨水溶液體積為3-5 7-9 :4_5 :2_4。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種安托芬的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中溶劑系統(tǒng)上相為流動相，下相為固定相。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種安托芬的制備方法。工藝步驟為取原料細(xì)粉，加入堿性醇浸潤2-6小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃?。惠腿∥镉?%的鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氯仿萃取，取氯仿層，回收氯仿干燥得到粗品；以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8.5的氨水溶液為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離粗品中的安托芬，收集目標(biāo)組分，濃縮、干燥即得高含量安托芬。本發(fā)明操作簡單、污染小，采用本發(fā)明制備的安托芬，產(chǎn)品純度高，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07D471/04GK102432606SQ20111030370
公開日2012年5月2日 申請日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司