專(zhuān)利名稱(chēng)：化合物Blapsins A和B，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物化合物領(lǐng)域，具體地，涉及從日本琵琶甲蟲(chóng)體分離提取的天然化合物Blapsins A和B，其在制備小分子化學(xué)探針或在制備抗癌或抗神經(jīng)退行性疾病的藥物中的應(yīng)用，含其的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
14-3-3是一類(lèi)在真核生物中廣泛表達(dá)的酸性蛋白家族。最早于1967年從牛腦提取物中被發(fā)現(xiàn)，之后引起了科學(xué)界的興趣，至上世紀(jì)九十年代中期，有關(guān)14-3-3研究的科研論文開(kāi)始大量出現(xiàn)，目前14-3-3蛋白領(lǐng)域已經(jīng)成為一個(gè)國(guó)際研究熱點(diǎn)。迄今發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物中14-3-3共有七種亞型，且不同種屬的14-3-3或其每個(gè)亞型在氨基酸序列上呈高度保守性。這一高度保守的特性及其在真核生物中廣泛分布的特點(diǎn)表明14-3-3在真核生物中具有重要的功能。14-3-3是一個(gè)調(diào)節(jié)蛋白家族，目前發(fā)現(xiàn)的靶蛋白有200多個(gè)，14-3-3通過(guò)依賴(lài)性和非依賴(lài)性磷酸化絲/蘇氨酸與200多個(gè)靶蛋白發(fā)生相互作用，從而調(diào)控了各種各樣的生理和病理過(guò)程，尤其是癌癥和神經(jīng)退行性疾病。例如，研究證實(shí)14-3-3通過(guò)與癌基因和抑癌基因如 Raf，Bcr, Bcr-Abl，Bad, Bax, ASK-I, p53, TSC2, p27, Cdc25A, B and C, WeeLChkl等結(jié)合后調(diào)節(jié)它們的功能，從而在癌癥發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。簡(jiǎn)而言之， 14-3-3已被認(rèn)為是尋找抗癌和治療神經(jīng)退行性疾病藥物的重要和具有前景的靶點(diǎn)。癌癥和神經(jīng)退行性疾病嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。至今人們對(duì)于癌癥的基礎(chǔ)研究較為活躍與深入，但有效的干預(yù)藥物還很有限，致使癌癥的治療還未取得實(shí)質(zhì)性突破。神經(jīng)退行性疾病包括老年癡呆等多種疾病，社會(huì)老齡化使得這一疾病呈現(xiàn)多發(fā)、高發(fā)，但目前有效的治療藥物相對(duì)缺乏。為什么癌癥基礎(chǔ)研究越來(lái)越深入，但治療進(jìn)展并不理想，因?yàn)榘┌Y領(lǐng)域的主要矛盾還沒(méi)有被認(rèn)識(shí)。在生命體系復(fù)雜的生理病理過(guò)程中，如何從眾多環(huán)節(jié)中尋找具有重要作用的“開(kāi)關(guān)”，從主要矛盾下手，遏制疾病的進(jìn)展并促進(jìn)其轉(zhuǎn)歸應(yīng)該成為醫(yī)藥界關(guān)注的主要問(wèn)題。14-3-3與200多個(gè)靶蛋白相互作用，顯示其在生理和疾病過(guò)程中扮演著類(lèi)似 “開(kāi)關(guān)”的重要角色。因此以14-3-3為靶點(diǎn)可能尋找到相對(duì)理想的治療藥物。14-3-3的重要性已經(jīng)被認(rèn)識(shí)，但14-3-3更為復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控關(guān)系，其亞型特異性，及14-3-3蛋白的結(jié)合位點(diǎn)等許多基礎(chǔ)科學(xué)問(wèn)題仍待深入研究。14-3-3雖然與癌癥和神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)，但市場(chǎng)上還缺乏針對(duì)該蛋白為靶點(diǎn)的藥物。因此無(wú)論從生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究還是從新藥研發(fā)角度來(lái)看，尋找調(diào)節(jié)14-3-3蛋白的小分子化合物具有重要意義。但之前還未發(fā)現(xiàn)有效的14-3-3小分子調(diào)節(jié)劑。既然14-3-3與癌癥和神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)，因此從具有治療腫瘤和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的傳統(tǒng)中藥或民族藥中有可能尋找到14-3-3配體分子，其作為小分子化學(xué)探針或工具藥將為進(jìn)一步揭開(kāi)14-3-3的重要功能，及尋找與14-3-3調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病藥物提供直接幫助。日本琵琶甲蟲(chóng)(Blaps japanensis)系云南彝族地區(qū)常用昆蟲(chóng)藥物，具有抗菌消炎、消包塊、治療腫瘤、小兒驚癇和夜啼的功效。因此基于民族藥理學(xué)知識(shí)從中尋找發(fā)現(xiàn)有效的14-3-3調(diào)節(jié)物質(zhì)是可能的?，F(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)有本發(fā)明的化合物1和2，其對(duì)14-3-3調(diào)節(jié)作用的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供具有14-3-3化學(xué)探針功能的小分子化合物Blapsins A和 B(化合物1和2、；從琵琶甲蟲(chóng)中提取、分離該類(lèi)化合物的方法；以該類(lèi)化合物為有效成分的藥物組合物；該化合物在制備抗癌或/和抗神經(jīng)退行性疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的上述目的是由下述的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的如下結(jié)構(gòu)式所示的化合物1或2，
權(quán)利要求
1.如下結(jié)構(gòu)式所示的化合物1或2，
2.制備權(quán)利要求1化合物1和2的方法，取干燥或鮮活的琵琶甲蟲(chóng)體，用30%-95% 的乙醇或甲醇室溫?cái)嚢杼崛?-3次，每次12-48小時(shí)，每次溶媒用量為藥材的4-10倍，單位為體積/重量，合并提取液減壓濃縮得提取物，提取物用適量水稀釋后，以等體積正丁醇萃取3次，減壓濃縮正丁醇萃取液，再用200-300目正相硅膠柱進(jìn)行色譜分離，提取物與吸附劑比例為1 20，溶劑洗脫系統(tǒng)為梯度氯仿-甲醇，梯度依次為99 1,98 2， 96 4,94 6,90 10,88 12,85 15，每個(gè)梯度溶劑用量為2倍柱床體積，根據(jù)薄層色譜、10%硫酸乙醇顯色特征，含相同斑點(diǎn)流份合并，得到A-F 6個(gè)組份；其中氯仿-甲醇94 6和90 10的洗脫部分D組份，經(jīng)MCI gel CHP 20P柱色譜分離，用5%，15%， 30%，45%，55%，60%，80%甲醇洗脫，每個(gè)梯度溶劑用量為2倍柱床體積，得到11個(gè)組份；其中30% -55%洗脫部分，合并液經(jīng)過(guò)反復(fù)凝膠kphadex LH-20柱層析甲醇洗脫，薄層檢測(cè)合并相同斑點(diǎn)，分別得到含有化合物1和2的組份，分別再經(jīng)硅膠制備薄層層析，以 8 1 0. 05氯仿-甲醇-醋酸展開(kāi)，純化得化合物1和2。
3.藥物組合物，含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物1或2和藥學(xué)上可接受的載體。
4.權(quán)利要求1所述的化合物1或2在制備治療過(guò)表達(dá)14-3-3的癌癥的藥物中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1所述的化合物1或2在制備治療神經(jīng)退行性疾病的藥物中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1所述的化合物1或2在制備14-3-3抑制劑中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求1所述的化合物1或2在制備小分子化學(xué)探針中的應(yīng)用。
全文摘要
如下結(jié)構(gòu)式所示的化合物1和2，以其為有效成分的藥物組合物，它們的制備方法，及其在制備14-3-3小分子化學(xué)探針，在制備抗過(guò)表達(dá)14-3-3的癌癥或神經(jīng)退行性疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明化合物1和2具有顯著的抑制14-3-3蛋白作用。
文檔編號(hào)C07D311/76GK102503826SQ20111029607
公開(kāi)日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年10月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月6日
發(fā)明者呂青, 晏永明, 程永現(xiàn) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所