專利名稱：：肽基化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的肽基化合物和它們?cè)谥委熡行Н煼ㄖ械挠猛疽约坝糜谠\斷成像技術(shù)的用途。更具體地，本發(fā)明涉及這樣的肽基化合物作為與和血管發(fā)生相關(guān)的受體結(jié)合的導(dǎo)向載體的用途，特別是整聯(lián)蛋白受體，例如av(33整聯(lián)蛋白受體。因此這樣的造影劑可以用于診斷例如惡性疾病，心臟病，子宮內(nèi)膜異位，與炎癥相關(guān)的疾病，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和卡波濟(jì)氏肉瘤。此外，這樣的試劑可以在這些疾病的治療性療法中使用。
背景技術(shù)：
：新血管能通過(guò)兩種不同的機(jī)理形成血管發(fā)生或血管生成。血管發(fā)生是從存在的血管分支形成新血管。這種過(guò)程的主要刺激可能是對(duì)組織中的細(xì)胞的不充分的營(yíng)養(yǎng)和氧(氧不足)的供應(yīng)。細(xì)胞可以通過(guò)分泌多種的血管發(fā)生因子響應(yīng)；常常提到的一個(gè)例子是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)。這些因子引起蛋白水解酶的分泌，蛋白水解酶裂解基膜蛋白質(zhì)，還有限制這些可能有害的酶的作用的抑制劑。血管發(fā)生因子的其他突出的作用是引起內(nèi)皮細(xì)胞的移行和分裂。與基膜附著的圍繞血管在contralumenal側(cè)上形成連續(xù)片狀的內(nèi)皮細(xì)胞沒(méi)有經(jīng)歷有絲分裂。附著損失和來(lái)自血管發(fā)生因子的受體的信號(hào)的聯(lián)合作用引起內(nèi)皮細(xì)胞移動(dòng)，繁殖，并且自身重排，最終在新血管周圍合成基膜。血管發(fā)生在組織生長(zhǎng)和重組中是突出的，包括傷口愈合和炎癥過(guò)程。當(dāng)腫瘤達(dá)到毫米大小時(shí)為了保持它們的生長(zhǎng)速度，必須開始血管發(fā)生。血管發(fā)生伴隨內(nèi)皮細(xì)胞和它們的環(huán)境的特征性變化。除了在影響和控制蛋白質(zhì)水解中涉及的各種蛋白質(zhì)之外，在準(zhǔn)備移行中這些細(xì)胞的表面被重組，基膜被降解的地方隱蔽結(jié)構(gòu)被暴露。在腫瘤的情況下，得到的血管網(wǎng)通常被打亂，形成明顯的關(guān)聯(lián)還有動(dòng)靜脈分路。對(duì)血管發(fā)生的抑制作用被認(rèn)為是抗腫瘤治療的有希望的策略。伴隨血管發(fā)生的轉(zhuǎn)化作用對(duì)于診斷也是非常有希望的，一個(gè)明顯的例子是惡性疾病，但是這個(gè)概念還指出對(duì)炎癥和各種與炎癥相關(guān)的疾病非常有前途，包括動(dòng)脈粥樣硬化，早期動(dòng)脈粥樣硬化損傷的巨噬細(xì)胞可能是血管發(fā)生因子的潛在根源。在心肌梗塞部分再血管化作用中也涉及這些因子，如果短時(shí)間內(nèi)狹窄得以解決，則發(fā)生心肌梗塞部分再血管化作用。下面給出與新血管形成或血管發(fā)生，新血管的發(fā)育或增殖有關(guān)的不期望病癥的其他例子。關(guān)于這方面也可參見(jiàn)WO98/47541。與血管發(fā)生有關(guān)的疾病和征兆是例如各種形式的癌癥和轉(zhuǎn)移，例如乳腺癌，皮膚癌，結(jié)腸癌，胰腺癌，前列腺癌，肺癌或卵巢癌。其他疾病和征兆是炎癥(例如慢性的)，動(dòng)脈粥樣硬化，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牙齦炎。與血管發(fā)生有關(guān)的其他疾病和征兆是動(dòng)靜脈alformations，星形細(xì)胞瘤，絨毛膜癌，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，血管瘤(兒童期，毛細(xì)血管)，肝細(xì)胞瘤，子宮內(nèi)膜增生，心肌缺血，子宮內(nèi)膜異位，卡波濟(jì)氏肉瘤，斑變性，黑素瘤，成神經(jīng)細(xì)胞瘤，外周動(dòng)脈閉塞疾病，骨關(guān)節(jié)炎，牛皮癬，視網(wǎng)膜病(糖尿病，增生)，硬皮病，精原細(xì)胞瘤和潰瘍性結(jié)腸炎。血管發(fā)生涉及對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞和周圍的組織獨(dú)特的受體。這些標(biāo)志包括生長(zhǎng)因子受體例如VEGF和整聯(lián)蛋白家族受體。免疫組織化學(xué)研究證明各種整聯(lián)蛋白可能最重要的是ou類的在血管頂端表面上表達(dá)[Conforti,G.,等，(1992)Blood80:37-446并且是對(duì)于通過(guò)循環(huán)配體的導(dǎo)向的可利用的[Pasqualini，R.，等，(1997)NatureBiotechnology15:542-546]。a5卩l(xiāng)也是促進(jìn)纖連蛋白基質(zhì)裝配和引發(fā)細(xì)胞附著纖連蛋白的重要的整聯(lián)蛋白.它在細(xì)胞移行[Bauer，J.S.，(1992)J,CellBiol.116:477-487]以及肺瘤發(fā)病和轉(zhuǎn)移中也起著重要的作用[Gehlsen，K.R.，(1988)J.CellBiol.106:925-930〗。整聯(lián)蛋白av(33是已知與血管發(fā)生有關(guān)的受體中的一種。受刺激的內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)出在血管發(fā)生過(guò)程的關(guān)鍵時(shí)期的存活取決于這種受體，因?yàn)閍v|53整聯(lián)蛋白受體/配體相互作用的拮抗劑誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡并且抑制血管生長(zhǎng)。整聯(lián)蛋白是雜二聚體，其中a-和P-亞基滲透細(xì)胞膜脂雙層.a-亞基在其胞外鏈上有四個(gè)Ca"結(jié)合結(jié)構(gòu)域，{3-亞基有多個(gè)半胱氨酸-富集結(jié)構(gòu)域。細(xì)胞粘著中涉及的很多配體(例如纖連蛋白)包含三肽序列精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)。該RGD序列表現(xiàn)出作為代表該序列的配體與細(xì)胞表面上的受體之間的基本識(shí)別位點(diǎn)而起作用。一般認(rèn)為配體和受體之間的二級(jí)相互作用提高相互作用的特異性。這些二級(jí)作用可能發(fā)生在配體和緊鄰RGD序列的受體之間的部分或者發(fā)生在遠(yuǎn)離RGD序列的位點(diǎn)。已知RGD肽與很多種整聯(lián)蛋白受體結(jié)合并且有調(diào)節(jié)臨床顯著應(yīng)用的很多種細(xì)胞作用的潛力(Ruoslahti，J.CIin,Invest.，87:1-5(1991))?？赡軐?duì)于RGD肽及其模擬物的最廣泛研究的作用涉及它們作為導(dǎo)向血小板整聯(lián)蛋白GpIIbIIIa的抗凝劑。例如W097/06791和W095/25543中描述過(guò)使用抗體或者包含RGD的肽通過(guò)施用avp3或avj35對(duì)組織中相關(guān)發(fā)生的抑制作用EP578083描述了一系列包含單環(huán)RGD的肽，WO90/14103要求保護(hù)RGD-抗體，Haubner等在J.Nucl.Med.(1999);40:1061-1071中描述了新的一類以包含單環(huán)RGD的肽為基礎(chǔ)的導(dǎo)向腫瘤的示蹤劑.使用全身放射自顯影的生物分布研究揭示mI-標(biāo)記肽具有非?？斓难呵宄屎椭饕文懝芘判雇緩剑瑢?dǎo)致高背景，W098/54347和W095/14714中還描述了包含多個(gè)橋鍵的環(huán)RGD肽。從體內(nèi)生物淘選得到的肽(W097/10507)已經(jīng)被用于各種各樣的導(dǎo)向應(yīng)用.序列CDCRGDCFC(RGD-4C)被用來(lái)藥物導(dǎo)向，例如doxirubicin(W098/10795)，核酸和腺病毒(參見(jiàn)WO99/40214,W099/39734,W098/54347,W098/54346,US5846782)。不管怎樣包含多個(gè)半胱氨酸殘基的肽有著多個(gè)二硫鍵異構(gòu)體能發(fā)生的缺陷。有4個(gè)半胱氨酸殘基的肽例如RGD-4C有著形成3種不同的二硫鍵折疊形式的可能性。因?yàn)镽GD藥學(xué)核心被迫形成三種不同的構(gòu)象，因此這些異構(gòu)體對(duì)于整聯(lián)蛋白受體有不同的親和性。PCT/NO01/00146和PCT/NO01/00390公開了包含RGD的肽為基礎(chǔ)的化合物的其他例子，這些專利文獻(xiàn)在此引作參考。因此與體內(nèi)血管發(fā)生相關(guān)的整聯(lián)蛋白受體的有效導(dǎo)向和成像要求化學(xué)穩(wěn)健和穩(wěn)定的選擇性、高親和性RGD為基礎(chǔ)的栽體。因此，當(dāng)為了減少與背景有關(guān)的問(wèn)題而設(shè)計(jì)顯像劑時(shí)，排泄途徑是重要的因素。本發(fā)明描述的二環(huán)結(jié)構(gòu)符合這些嚴(yán)格條件
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的描述本發(fā)明的一方面提供如權(quán)利要求書中定義的式I的新的肽為基礎(chǔ)的化合物。這些化合物對(duì)整聯(lián)蛋白受體有親和性，例如對(duì)整聯(lián)蛋白av卩3有親和性。式I的化合物具有至少兩個(gè)橋鍵，其中一個(gè)橋鍵形成二硫鍵，第二個(gè)橋鍵包括硫醚(硫)鍵，并且所述橋鍵中將肽部分折疊成"巢"構(gòu)型。因此，本發(fā)明的化合物每個(gè)分子部分最多有一個(gè)二硫橋。本發(fā)明定義的化合物具有令人驚奇地體內(nèi)穩(wěn)定性，并且穩(wěn)定于符合標(biāo)記條件下，例如用锝標(biāo)記中應(yīng)用的條件。這些新的化合物可以用于治療有效療法以及用于成像目的。式I定義本發(fā)明描述的新的肽為基礎(chǔ)的化合物或者其生理可接受鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>G代表甘氨酸，和D代表天冬氨酸，和R'代表-(CH2)n-或-(CH2)n-。H廣,優(yōu)選R,代表-(CH。-，和n代表1和IO之間的正整數(shù)，和h代表1或2的正整數(shù)，和X'代表氨基酸殘基，其中所述氨基酸具有一個(gè)功能側(cè)鏈例如酸或胺，優(yōu)選天冬氨酸或谷氨酸，賴氨酸，高賴氨酸，二氨基脂環(huán)酸(alcylicacid)或二氨基丙酸，X2和X4獨(dú)立地代表能形成二硫鍵的氨基酸殘基，優(yōu)選半胱氨酸或高半胱氨酸殘基，和X3代表精氨酸，N-甲基精氨酸或精氨酸模擬物，優(yōu)選精氨酸，和Xs代表疏水性氨基酸或者其衍生物，優(yōu)選酪氨酸，苯丙氨酸，3-碘-酪氨酸或萘基丙氨酸殘基，更優(yōu)選苯丙氨酸或3-碘-酪氨酸殘基，和X6代表含有硫羥的氨基酸殘基，優(yōu)選半胱氨酸或高半胱氨酸殘基，和X,不存在或者代表優(yōu)選以單分散性PEG結(jié)構(gòu)單元為基礎(chǔ)的均相生物改性劑部分，包括1-10個(gè)所述結(jié)構(gòu)單元鏈節(jié)，所述生物改性刑具有改變所述藥物的藥物動(dòng)力學(xué)和血液清除率的功能。另外，X7還可以代表1-10個(gè)氨基酸殘基，優(yōu)選甘氨酸，賴氨酸，天冬氨酸或絲氨酸。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，X，代表由單分散性PEG類似結(jié)構(gòu)的聚合作用構(gòu)成的生物改性劑單元，式II的17-氨基-5-氧代-6-氮雜-3，9，12，15-四氧雜十七酸oo(工i)其中n等于1-10的整數(shù)并且其中C-末端單元是酰胺部分，W,不存在或代表間隔基團(tuán)部分并且優(yōu)選從戊二酸和/或琥珀酸和/或聚乙二醇為基礎(chǔ)的單元和/或式II的單元衍生出oo(II)Z!是抗腫瘤劑，螯合劑或者報(bào)道基因部分，可以用式III的螯合式e代表螯合劑的優(yōu)選的實(shí)施例:13(工工I)其中各個(gè)R1，R2，R3，和r獨(dú)立地是R基團(tuán)；各個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立地是H或C,"。烷基，C",。烷基芳基，C卜!。烷氧基烷基，C卜"羥基烷基，C卜,。烷基胺，C卜,。氟代烷基，或者兩個(gè)或多個(gè)R基團(tuán)，與它們連接的原子一起形成碳環(huán)，雜環(huán)，飽和的或不飽和的環(huán)，或者能代表式a，b,c或d給出的螯合劑室溫下，接近中性pH有水存在的條件下，可以將包括式III的螯合劑的軛合物進(jìn)行放射性標(biāo)記，給出好的放射化學(xué)純度，RCP.室溫下打開肽成分的二硫橋的風(fēng)險(xiǎn)比高溫小。室溫下放射性標(biāo)記軛合物的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是醫(yī)院配藥程序簡(jiǎn)便。間隔基團(tuán)部分W,的作用是使相對(duì)大的螯合劑與肽成分的活性位點(diǎn)之間有距離。間隔基團(tuán)部分W,還用于使大的抗腫瘤劑與肽的活性位點(diǎn)之間有距離。發(fā)現(xiàn)生物改性劑，X"改變化合物的藥物動(dòng)力學(xué)和血液清除率。生物改性劑使組織，例如肌肉，肝臟等較少吸收化合物，因此由于較少背景干擾而給出較好的診斷成像。生物改性劑的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是排泄主要通過(guò)腎。但是，式I定義的化合物還可以包括螯合劑，Zl，如表I中定義。在本發(fā)明的一些方面，Z,包括報(bào)道基因部分，其中所述報(bào)道基因部分包括放射性核素。下面的表I中列出了螯合劑的其他定義。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>Yl-5可以是H，烷基，芳基或它們的組合其中Yl-5基團(tuán)包含一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)部分，使得螯合物能與栽體偶聯(lián)一例如優(yōu)選地烷基胺，烷基硫化物，烷氧基，羧酸烷基酯，烷基胺，芳基硫化物或a-卣代乙?；潴w類別結(jié)構(gòu)定義HYNICV-與栽體連接的連接基團(tuán)或者載體本身Yl,Y2-H，烷基，芳基并且其中Yl或Y2基團(tuán)包含官能團(tuán)部分，使得螯合物能與載體偶聯(lián)一例如優(yōu)選地烷基胺，烷基硫化物，烷氧基，羧酸烷基酯，芳基胺，芳基硫化物或oc-面代乙?；?lt;formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>基，乙?；?，EOE);Y1-5=H，烷基，芳基；或者Y3是L或D氨基酸側(cè)鏈或甘氨酸并且羧酸酯可以用于通過(guò)酰胺鍵與栽體偶聯(lián)。或者Rl-5基團(tuán)可以包含另外的官能團(tuán)，使得螯合物能與載體偶聯(lián)一例如烷基胺，烷基硫化物，烷氧基，羧酸烷基酯，芳基胺，芳基硫化物或a-卣代乙跣基在本發(fā)明式I的一些方面，Z,部分包括結(jié)合1SF同位素或Cu同位素，作為輔基或者通過(guò)取代或加成反應(yīng)而摻合到試劑中.因此得到的化合物可以在正電子發(fā)射斷層掃描(PET)成像中使用。在本發(fā)明式I的一個(gè)方面中，Z,代表抗腫瘤劑。在這方面，化合物定向與癌相關(guān)的血管發(fā)生位點(diǎn)并且將抗腫瘤劑帶給病灶區(qū)?？狗瘟鰟┛梢允黔h(huán)磷酰胺，苯丁酸氮芥，二甲磺酸丁酯，甲氨喋呤，阿糖孢苷，氟尿嘧啶，長(zhǎng)春堿，紫杉醇，阿霉素，柔紅霉素，依托泊苷，替尼泊苷，順鉑，安吖啶，多西紫杉，但是也可以使用寬范圍的其他抗肺瘤劑.這里描述的軛合物的肽成分優(yōu)選沒(méi)有自由氨基-或羧基_末端。這使得這些化合物抗酶促降解的抗性顯著提高，結(jié)果它們與很多已知的自由肽相比體內(nèi)穩(wěn)定性提高。根據(jù)這里使用的術(shù)語(yǔ)"氨基酸"指它的最廣義意義的蛋白質(zhì)源的L-氨基酸，D-氨基酸，化學(xué)改性的氨基酸，N-甲基，Ca-甲基和氨基酸側(cè)鏈模擬物和非天然氨基酸例如萘基丙氨酸，任何天然存在的氨基酸或者這樣的天然存在的氨基酸的模擬物都是優(yōu)選的，下面的化合物I-IV詳細(xì)說(shuō)明式I的化合物的一些優(yōu)選實(shí)施方案<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>化合物IIIVrViorWVVV0。。0。an，《、〉化合物IVB丄"在大多數(shù)情況下，優(yōu)選的是肽中的氨基酸全部是L-型。但是，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，肽中的氨基酸中的一個(gè)，兩個(gè)，三個(gè)或多個(gè)優(yōu)選是D-型。包含這樣的D-型氨基酸對(duì)化合物的血清穩(wěn)定性有顯著作用。根據(jù)本發(fā)明，式I中定義的任何氨基酸殘基可以優(yōu)選代表天然存在的氨基酸，并且獨(dú)立地是D-或L-構(gòu)型之任何一種.本發(fā)明的一些化合物是高親和性RGD為基礎(chǔ)的栽體。根據(jù)這里使用的，術(shù)語(yǔ)"高親和性RGD為基礎(chǔ)的載體"指在對(duì)avp3整聯(lián)蛋白的竟?fàn)幗Y(jié)合測(cè)試中Ki<10nM并且優(yōu)選〈5nM，并且Ki值通過(guò)與已知的高親和性配體鋸鱗血抑肽竟?fàn)幎鴾y(cè)得的化合物.實(shí)施這樣的竟?fàn)帨y(cè)試的方法是本領(lǐng)域公知的。本發(fā)明還提供含有有效量的(例如在體內(nèi)成像中增強(qiáng)成像對(duì)照的有效量)通式I的化合物或者其鹽，和一種或多種藥學(xué)可接受佐劑，賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。本發(fā)明還提供含有有效量的通式I的化合物或者其酸加成鹽，和一種或多種藥學(xué)可接受佐劑，賦形劑或稀釋劑的用于治療疾病的藥物組合物。其他有代表性的間隔基團(tuán)(W0成分包括結(jié)構(gòu)-型多糖，貯存-型多糖，多氨基酸和它的甲酯和乙酯酯，和多肽，寡糖和寡核苷酸，它們可以包含或不包含酶裂解位點(diǎn)。本發(fā)明造影劑中的報(bào)道基因(Z0可以是在體內(nèi)診斷成像過(guò)程中能直接或間接檢測(cè)的任何部分。優(yōu)選地，造影劑包括一個(gè)報(bào)道基因。優(yōu)選的是散發(fā)或者可被引起散發(fā)射線(例如通過(guò)放射性衰變)的部分。對(duì)于MR成像，報(bào)道基因是非零核自旋同位素(例如"F)或者具有沒(méi)有配對(duì)的電子自旋因此有順磁性，超順磁性，鐵氧體磁性或鐵磁體性質(zhì)的材料；對(duì)于光成像，報(bào)道基因是光散射體(例如有色的或沒(méi)有色的顆粒)，光吸收體或光發(fā)射體；對(duì)于磁量成像，報(bào)道基因具有可檢測(cè)磁性；對(duì)于電抗成像，報(bào)道基因影響電抗；對(duì)于閃爍成像法，SPECT，PET，等等，報(bào)道基因是放射性核素。一般來(lái)說(shuō)，報(bào)道基因可以是(1)可螯合金屬或包含多原子金屬的離子(即TcO，等)，其中所述金屬是高原子數(shù)金屬(例如原子數(shù)大于37)，順磁物質(zhì)(例如過(guò)渡金屬或鑭系)，或放射性同位素，(2)共價(jià)鍵合的非金屬物質(zhì)，它是沒(méi)有配對(duì)的電子點(diǎn)(例如存留自由基中的氧或碳)，高原子數(shù)非金屬，或放射性同位素，(3)含有高原子數(shù)原子，顯示協(xié)同的磁性性狀(例如超順磁性，鐵氧體磁性或鐵磁性)或者包含放射性核素的多原子簇或晶體。下面更詳細(xì)描述特別優(yōu)選的報(bào)道基因(Z，)的實(shí)施例.螯合金屬報(bào)道基因優(yōu)選選自如下"Y,"1c，mIn,"Sc，"Ga，51Cr,177mSn，"Cu，l67Tm，"Ru，'"Re，'"Lu，'"Au，2°3Pb和'"Ce。連接基團(tuán)部分上的螯合基團(tuán)理想的是與金屬離子螯合。合適的螯合基團(tuán)的其他例子公開于US-A-4647447，WO89/00557，US-A-5367080，US-A-5364613'本發(fā)明的金屬與任何螯合劑螯合的方法在本領(lǐng)域技術(shù)人員的水平內(nèi)。通過(guò)三種一般方法中的任一種，金屬能與螯合劑部分結(jié)合直接結(jié)合，模板合成和/或金屬轉(zhuǎn)移作用。直接結(jié)合是優(yōu)選的。因此期望金屬離子容易與螯合劑絡(luò)合，例如，只是通過(guò)使含有螯合劑部分的水溶液與優(yōu)選pH范圍大約4至大約11的水溶液中的金屬接觸或混合。所述鹽可以是任何鹽，但是優(yōu)選所述鹽是金屬的水溶性鹽，例如囟化物鹽，更優(yōu)選逸擇這樣的鹽使得不干擾金屬離子與螯合劑的結(jié)合。含有螯合劑的部分優(yōu)選在pH在大約5和大約9之間，更優(yōu)選pH在大約6和大約8之間水溶液中。含有螯合劑的部分能與緩沖鹽例如檸檬酸鹽，碳酸鹽，乙酸鹽，礴酸鹽和硼酸鹽混合，達(dá)到最佳pH。優(yōu)選地，選擇緩沖鹽使得不干擾接著的金屬離子與螯合劑的結(jié)合。下面的同位素或同位素對(duì)能被用于成像和治療而不改變放射標(biāo)記方法或螯合劑"Sen;141ces8;"eRe75;177Lu71;"Sc21;131I53;67Cu29;131I53和123I53;"0Re7S和""tc";3。Y39和87Y39;47SC21和44Sc21;5。Y33和123I53;14SSm和1S3SmS2;和"Y33和mln49優(yōu)選的非金屬原子報(bào)道基因包括放射性同位素例如'"I，mI和"F和非零核自旋原子例如"F,和重原子例如I。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，具體涉及碘或氟放射性同位素的使用。例如，如果肽或連接基團(tuán)由能在共價(jià)鍵生成反應(yīng)中被碘或氟化學(xué)取代的取代基組成，例如，包含羥基笨基或?qū)ο趸郊柞；倌軋F(tuán)的取代基，這樣的取代基可以通過(guò)本領(lǐng)域公知的方法分別用碘或氟的放射性同位素標(biāo)記。這些基團(tuán)可以用于治療性或診斷性成像應(yīng)用中。同時(shí)，在治療性或診斷性成像應(yīng)用中也可以z使用與相同的肽-連接基團(tuán)上的螯合劑連接的金屬。本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案涉及特別用于腫瘤成像的通式(I)的放射性標(biāo)記試劑，可以對(duì)患者施用足夠量的得到與特定成像技術(shù)期望的對(duì)比度的本發(fā)明的診斷劑用于成像。報(bào)道基因是金屬的情況下，一般情況下，每千克患者體重使用0.001至5.0毫摩爾螯合成像金屬離子的劑量有效實(shí)現(xiàn)足夠的對(duì)比度提高。對(duì)于報(bào)道基因是放射性核素，每70kg體重使用0.01至100mCi，優(yōu)選0.1至50raCi的劑量一般是足夠的。用于治療用途的本發(fā)明的化合物的劑量取決于要治療的病癥，但是一般是lpmol/kg至l咖ol/kg體重級(jí)。因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的生理可接受載體或賦形劑加以配制用于給藥.例如，化合物，任選地加有藥學(xué)可接受賦形劑，可以懸浮或溶解于含水介質(zhì)，然后將得到的溶液或混懸液滅菌。式I的化合物在對(duì)病癥的治療中是治療有效的，并且在體內(nèi)成像中是可檢測(cè)的。因此，例如信號(hào)基因部分上的載體具有治療功效，例如憑借栽體部分的放射性核素報(bào)道基因的放射性治療作用。因此認(rèn)為式I的化合物在治療組合物(藥物)的制備中的用途，和對(duì)人體或動(dòng)物體的治療性療法或預(yù)防性治療，優(yōu)選對(duì)癌癥的治療方法中的用途代表本發(fā)明的另一方面。本申請(qǐng)上下文中可以使用的報(bào)道基因的其他例子在W098/47541的第63-66和70-86頁(yè)給出，這些頁(yè)上的公開內(nèi)容全部在此引作參考。因此主張上面提到的頁(yè)中公開的每一個(gè)和所有報(bào)道基因或者其部分認(rèn)為是本申請(qǐng)中包含的本發(fā)明說(shuō)明書的一部分。本發(fā)明的另一方面提供式I的化合物用于制備在涉及對(duì)人體或動(dòng)物體施用造影介質(zhì)并且對(duì)所述人體或動(dòng)物體的至少一部分成像的診斷方法中使用所述造影介質(zhì)的用途。本發(fā)明的另一方面提供涉及對(duì)所述人體或動(dòng)物體施用造影劑，例如施用到脈管系統(tǒng)，并且對(duì)所述人體或動(dòng)物體的至少一部分成像的對(duì)人體或動(dòng)物體成像的方法，其中所述造影劑使用閃爍法，PET或SPECT形式分布，其中所述造影劑使用式I的物質(zhì)。本發(fā)明的另一方面提供對(duì)事先施用含有式I定義的化合物的造影劑組合物的人體或動(dòng)物體產(chǎn)生增強(qiáng)的像的方法，所述方法包括對(duì)所述人體或動(dòng)物體的至少一部分成像。本發(fā)明的另一方面提供檢測(cè)使用藥物例如細(xì)胞毒素物質(zhì)治療人體或動(dòng)物體減輕與癌癥相關(guān)的癥狀優(yōu)選血管發(fā)生的作用的方法，所述方法包括對(duì)所述人體或動(dòng)物體施用式I的物質(zhì)并且檢測(cè)細(xì)胞受體優(yōu)選內(nèi)皮細(xì)胞受體特別是avp3受體對(duì)所述物質(zhì)的吸收，所述施用和檢測(cè)任選地但是優(yōu)選反復(fù)進(jìn)行，例如用所述藥物治療之前，期間和之后?？梢詰?yīng)用化學(xué)合成公知的所有的方法合成本發(fā)明的化合物，但是特別有用的是使用自動(dòng)肽合成儀的Merrifield的固相方法(J.Ara.Chem.Soc.，85:2149(1964))。在體外篩選測(cè)試之前，肽和肽螯合物可以使用高效液相色鐠法(HPLC)純化并且通過(guò)質(zhì)譜和分析HPLC表征?，F(xiàn)在通過(guò)下面的非限制性實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明'具體實(shí)施例方式實(shí)施例實(shí)施例1:二硫化物[Cys2"]硫醚環(huán)[CIbC0-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-NH2的合成1a)cPn216螯合物的合成對(duì)于锝螯合物cPn216合成的描述，讀者參見(jiàn)專利申請(qǐng)GB0116815.2。1b)cPn216-戊二酸中間體的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>cPn216(100mg，0.29咖ol)溶解于DMF(10mL)并且攪拌下分批加入戊二酸酐(33mg，0.29mmol)。將反應(yīng)攪拌23小時(shí)，使得完全轉(zhuǎn)化為期望的產(chǎn)物。RP-HPLC之后以好的產(chǎn)率獲得純的酸。1c)cPn216-戊二酸的四氟苯硫酯的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>向cPn216-戊二酸(300iag，0.66nmiol)的DMF(2mL)溶液加入HATU(249mg，0.66mmol)和NMM(132pL，1.32mmol)。將混合物攪拌5分鐘之后加入四氟苯硫酚(O."m邁ol，119mg)。將溶液攪拌10分鐘之后用20%乙腈/水(8mU將反應(yīng)混合物稀釋，并且通過(guò)RP-HPLC將產(chǎn)物純化，凍干之后得到IIOmg期望的產(chǎn)物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>使用1mmol氨基酸筒以0.25咖ol規(guī)模使用Rink酰胺AM樹脂起始在ABI433A自動(dòng)肽合成儀上合成肽。在偶聯(lián)之前使用HBTU將氨基酸預(yù)先活化。使用氯代乙酸酐的DMF溶液將N-末端胺基氯乙?；?0分鐘。在含有TIS(5%)，H20(5W和苯酚(2.5%)的TFA中同時(shí)從樹脂中去除肽和側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)(除了tBu之外)，進(jìn)行2小時(shí)，后處理之后獲得295mg的粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B，10分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3|iC18(2)50x4.6nun;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.42分鐘)。利用質(zhì)鐠進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1118.5,實(shí)測(cè)值，1118.6)。1e)硫醚環(huán)[CH2C0—Lys—Cys(tBu)-Arg—Gly—Asp-Cys(tBu)-Phe—28Cys]-NH2的合成分子貴w1082.383精確質(zhì)量》，08，,467分子式aC鄰H75Nl3011S3295mg的ClCILCO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-NH2溶解于水/乙腈。用氨水將混合物調(diào)節(jié)至pH8并且攪拌16小時(shí)。后處理之后獲得217mg的粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B,10分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3fiC18(2)50x4.6mm;流速，2mL/min'，檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.18min)利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1882.5，實(shí)測(cè)值，1882.6),1f)二硫化物[Cys26]硫醚環(huán)〖CIhCO-Lys-CysZ-Arg-Gly-Asp-Cys'Phe-Cys]-NH2的合成用茴香醚(500inL)，DMSO(2mL)和TFA(100mL)的溶液處理217mg硫醚環(huán)[CH2C(HLys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-NH260分鐘，接著真空去除TFA，并且通過(guò)加入二乙基鍵將肽沉淀。對(duì)粗產(chǎn)物(202mg)實(shí)施制備HPLC(Phe,enexLuna10nC18(2)250x50mm柱)純化，使用0-30%B，其中A-H20/0.1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA,用60分鐘，流速50毫升/分鐘。凍干之后得到112mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，5-50%B，用10分鐘，其中A=H2O/0,l%TFAB=CH3CN/0.1%TFA;柱子，Phe麵enexLuna3hC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，5.5Q分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H968，實(shí)測(cè)值，971).1g)二硫化物[CVS2"]硫醍環(huán)[CHAO-Lys(cPn216~戊二酰)-Cys2-Arg-G1y-Asp-Cys6-Phe-Cys〗-冊(cè)2的合成HO:y洲、人分于量》，407,754精確質(zhì)黃《W06,662分于式-C的H卵N10O15S39.7mg二硫化物[Cys21硫醚環(huán)[CH2CO-Lys-Cys-Arg-Gly-29分于重"368.t50精確質(zhì)量《訴7.346分子式》C38HS7M，30"S3Asp-Cys-Phe-Cys-m,9.1mg的cPn216整合物活潑酉旨和6pL的N-甲基嗎啉溶解于DMF(0.5mL)。將混合物攪拌3小時(shí)，對(duì)反應(yīng)混合物實(shí)施制備HPLC(Phe,enexLuna5pC18(2)250x21.20咖柱)純化，使用0-30%B，其中A-H20/0.154TFA和B-CH3CN/0.1%TFA,用40分鐘，流速IO毫升/分鐘。凍干之后得到5.7mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，0-30%B，用10分鐘，其中A-H2O/0.1WTFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3jiCi8(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，7,32分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1407.7,實(shí)測(cè)值，1407.6)。實(shí)施例2:二硫化物[Cys3—6]硫瞇環(huán)[CH2CO-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys〗-(PEG)n-NH2，其中n-1的合成2a)17-(Fmoc-氨基)-5-氯代-6-氮雜-3，9,12，15-四氣雜十七酸利用Fmoc化學(xué)過(guò)程使該結(jié)構(gòu)單元與固相偶聯(lián)。這種結(jié)構(gòu)單元的偶聯(lián)形式簡(jiǎn)言之是指(PEGh，其中n是正整數(shù)。1，11-二疊氮基-3,6,9-三氯雜十一烷無(wú)水THF(100ml)中的四乙二醇(19.4g，0.100mol)和甲磺酰氯(25.2g，0.220mol)的溶液保持在氬氣下并且在水/水浴上冷卻至0°C。用45分鐘的時(shí)間向燒瓶中滴加三乙胺(22.6g，0.220mol)的無(wú)水THF(25ml)溶液。1小時(shí)之后去除冷卻浴并且繼續(xù)攪拌4小時(shí)。加入水(60邁l)。按順序向混合物加入碳酸氫鈉(6g,至pH8)和疊氮化鈉(14.3g，0.220mmol)。蒸餾去除THF并且將水溶液回流24小時(shí)(形成兩層)。將混合物冷卻并且加入乙醚(IOOml)。用氯化鈉將水相飽和。分離各相并且用乙醚萃取水相(4x50ml)。合并的有機(jī)相用鹽水(2x50ml)洗滌并且干燥(MgSOO。過(guò)濾并且濃縮，得到22.1g(9lW黃色油狀物。產(chǎn)物不用進(jìn)一步純化即可在下一步中使用。ll-疊氮基-3,6，9-三氣雜十一烷胺室溫下經(jīng)3小時(shí)向機(jī)械劇烈攪拌著的5%鹽酸(200ml)中l(wèi)，ll-二疊氮基-3，6，9-三氧雜十一烷(20.8g，0.085mol)的混懸液加入三苯基膦(19.9g,0.073mol)的乙醚(150ml)溶液。再將反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)。分離各相并且用二氯甲烷萃取水相(3x40ml)。水相在冰/水浴上冷卻并且通過(guò)加入KOH將pH調(diào)節(jié)至大約12。將產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中(5x50ml)。干燥(MgS(M合并的有機(jī)相。過(guò)濾并蒸發(fā)，得到14.0g(88W黃色油狀物。通過(guò)MALDI-TOF質(zhì)讒分析(基質(zhì)a-氰基-4-羥基肉桂酸)，正如所預(yù)期的，在219給出M+H峰。使用'H(500MHz)和"C(125MHz)NMR光譜學(xué)進(jìn)一步表征證實(shí)結(jié)構(gòu)。17-疊氮基-5-氯代-6-氮雜-3,9,12，15-四氣雜十七酸向11-疊氮基-3，6，9-三氧雜十一烷胺(IO.9g，50.0mmol)的二氯甲烷溶液(IOOml)中加入二甘醇酸酐(6,38g，55.0mmol)'將反應(yīng)混合物攪拌一夜。HPLC分析(柱子Vydac218TP54;溶劑A=水/0.1%TFA和B-乙腈/0.1%TFA;梯度4-16^B，20分鐘；流速1，0毫升/分鐘；UV檢測(cè)在214和284nm進(jìn)行)，表明滯留時(shí)間18.3分鐘時(shí)起始物完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。將溶液濃縮得到定量產(chǎn)率的黃色漿液。通過(guò)LC-MS(ES離子化作用)分析產(chǎn)物，正如所預(yù)期的給出[MH]+335。'H(500MHz)和13C(125MHz)詣R光諉與結(jié)構(gòu)相吻合。產(chǎn)物不用進(jìn)一步純化即可在下一步中使用，17-氨基-5-氧代-6-氮雜-3,9,12,15-四氯雜十七酸使用H2(g)-Pd/C(10%)還原17-疊氮基-5-氧-6-氮雜-3,9,12,15-四氧雜十七酸(8.36g，25.0mmol)的水溶液(1OOml)。進(jìn)行反應(yīng)直到LC-MS分析表明起始物完全轉(zhuǎn)化(柱子Vydac218TP54;溶劑A=水/0.1%TFA和B=乙腈/0.1%TFA;梯度4-16%B，20分鐘；流速l.O毫升/分鐘；UV檢測(cè)在H4和284nm進(jìn)行，ES離子化作用對(duì)于起始物是M+H335，對(duì)于產(chǎn)物是309)。將溶液過(guò)濾并且在下一步中直接使用。17-(Fmoc-氨基)-5-氯代-6-氮雜-3，9,12，15-四氣雜十七酸向上一步得到的17-氨基-5-氧-6-氮雜-3，9,12，15-四氧雜十七酸(相當(dāng)于25.0m邁ol氨基酸)的水溶液加入碳酸氫鈉(5.04g，60.0邁mol)和二喝烷(40ml)。滴加Fmoc-氯(7.11g，0.275mol)的二P惡烷(40ml)溶液，將反應(yīng)混合物攪拌一夜。將二哺烷蒸出(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā))并且用乙酸乙酯萃取水相。通過(guò)加入鹽酸將水相酸化并且將沉淀出的物質(zhì)萃取到氯仿中。將有機(jī)相千燥(MgSOO，過(guò)濾并濃縮，得到11.3g(85'/0黃色漿液。通過(guò)LC-MS分析證實(shí)結(jié)構(gòu)(柱子Vydac218TP54;溶劑A-水/0.1%TFA和B-乙腈/0.UTFA;梯度40-60%B,20分鐘；流速l.O毫升/分鐘；UV檢測(cè)在214和254nm進(jìn)行，ES離子化作用對(duì)于5.8分鐘峰的產(chǎn)物正如預(yù)期的是M+H531)。分析表明副產(chǎn)物含量非常低，產(chǎn)物不用進(jìn)一步純化即可使用。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>精確質(zhì)重s140Mt2分子式=CMHe6CW，50l7S3N乂HH，以0.25mmol規(guī)模開始，由HATU活化作用介導(dǎo)，人工使PEG單元與Rink酰胺AM樹脂偶聯(lián)，使用1mmol氨基酸筒在ABI433A自動(dòng)肽合成儀上組裝其余的肽。在偶聯(lián)之前使用HBTU預(yù)先將氨基酸活化。使用氯乙酸酸酐的DMF溶液將N-末端胺基氯乙酰化30分鐘。在含有TIS(5%),H20(5%)和苯酚(2.5。/,)的TFA中同時(shí)從樹脂中去除肽和側(cè)鏈保伊基團(tuán)(除了tBu之外)，進(jìn)行2小時(shí)。后處理之后獲得322mg的粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B，10分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3pC18(2)50x4.6咖；流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.37分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1409，實(shí)測(cè)值，1415)。2c)硫瞇環(huán)[CH^CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBip-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2，其中n-1的合成O00分子量《1372,702精確質(zhì)重*1371.635分于式-C58H97N1S017S3322mg的ClCFhCO-Lys-Cys(tBu)-Arg—Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-mh溶劑于水/乙腈。用氨水將混合物調(diào)節(jié)至pH8并且攪拌16小時(shí)，后處理之后獲得粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B，1Q分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B=CH3CN/0,1%TFA;柱子，Pheno隨exLuna3|iC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.22分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1373，實(shí)測(cè)值，1378)。2d)二硫化物[Cys2—1硫瞇環(huán)[(^(:0-Lys-Cysz-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NIL其中1的合成用茴香醚(200nU，DMSO(2mL)和TFA(100mL)的溶液處理硫醚環(huán)[CH2CO—Lys—Cys(tBu)-Arg—Gly-Asp-Cys(tBu)—Phe-Cys〗-(PEG)n-NH260分鐘，接著真空去除TFA，并且通過(guò)加入二乙基醚將肽沉淀。對(duì)70mg粗產(chǎn)物實(shí)施制備HPLC(PhenomenexLuna5fiC18(2)250X21.20mm柱)純化，使用0-30%B，其中A=H20/0,1%TFA和B=CH3CN/0.1%TFA，用40分鐘，流速IO毫升/分鐘。凍干之后得到46mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，0-30%B,用10分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B=CH3CN/0.1%TFAj柱子，Phe麵enexLuna3&C18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.80分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1258.5，實(shí)測(cè)值，1258.8)。2e)二硫化物[Cys"]硫醚環(huán)[CH!CO-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys〗-(PEG)n-亂其中n-1的合成H-OH13mg[Cys2—1環(huán)[CH!CO-Lys—Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys〗-(PEG)n-NH2，9,6mg的cPn216螯合物活潑酯和8pL的N-甲基嗎啉溶解于DMF(0.5mL)。將混合物攪拌2小時(shí)30分鐘。對(duì)反應(yīng)混合物實(shí)施制備HPLC(Phe醒enexUna5&C18(2)250x21.20邁m柱)純化，使用0-30%B，其中A=H20/0，1%TFA和B=CH3CN/0.1%TFA，用40分鐘，流速IO毫升/分鐘。凍干之后得到14.2mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，0-30%B,用10分鐘，其中A=H20/0-1%TFA和B-CH3CN/0-1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3fiC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，7.87分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1697.8，實(shí)測(cè)值，1697.9)。實(shí)施例3:二硫化物[Cys卜6]硫醚環(huán)[CIhC0-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys1-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]—(PEG)n-NH2，其中n-2的合成3a)ClCILCO-Lys-Cys"Bu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-NH2，其中n-2的合成根據(jù)實(shí)施例2b)組裝肽，人工偶聯(lián)兩個(gè)PEG單元后處理之后獲得粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B，IO分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B=CILCN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3fiC18(2)50x4.6on;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.40分鐘)。3b)硫醚環(huán)[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2,其中2的合成C1CH2C0-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-冊(cè)2，其中n=2溶劑于水/乙腈。用氨水將混合物調(diào)節(jié)至pH8并且攪拌16小時(shí)。后處理之后獲得380毫克粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B,10分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B=CH3CN/0.1%TFA;柱子，Phe纖enexLuna3pC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.28分鐘)。利用質(zhì)i普進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1663,實(shí)測(cè)值，1670)。3c)二硫化物[Cys2—6〗硫酸環(huán)[CHzCO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NIL其中n=2的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>精確質(zhì)重*，"T.W2分子式》C8aH、01W7O23幼用茴香酸(500pL),DMS0(2mL)和TFA(100mL)的溶液處理380mg分子奮*，663,02，精確質(zhì)童-WWJM分予式-C70H113N，7083S3硫醚環(huán)[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)n-NH！,其中ri-2，60分鐘，接著真空去除TFA，并且通過(guò)加入二乙基醚將肽沉淀。對(duì)粗產(chǎn)物(345mg)實(shí)施制備HPLC(PhenomenexLuna10pC18(2)250x50mm柱)純化，使用0-30%B，其中A-H20/0,1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA，用60分鐘，流速50毫升/分鐘。凍干之后得到146mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，0-30%B，用10分鐘，其中A=H20/0.14TFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，Phe誦enexLuna3jiC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，7.42分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1548.6，實(shí)測(cè)值，1548.8),3d)二硫化物[Cys2—6]硫瞇環(huán)[CH2C0-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys2-Arg-G1y-Asp-Cys6-Phe-C!s]一(PEG)n-NIL其中2的合成"，分子貴《1訴5,392精確質(zhì)童《分子式-CWH142N22027S3146mg[Cys2—1環(huán)[C固-Lys-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys]-(PEG)2-NH2，110mg的ePn216螯合物活潑酯和76pL的N-甲基嗎啉溶解于DMF(6mL)。將混合物攪拌9小時(shí)。對(duì)反應(yīng)混合物實(shí)施制備HPLC(PhenomenexLuna10iC18(2)250x50mm柱)純化，使用0-30%B,其中A=H20/0.1%TFA和B=CILCN/0.1°/TFA,用60分鐘，流速50毫升/分鐘。凍干之后得到164mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，0-3054B，用10分鐘，其中A=H20/0.l'/。TFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3pC18(2)50x4.6邁m;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，8.13分鐘)利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，M+H1988.0，實(shí)測(cè)值，1988.0)。實(shí)施例4:二硫化物[Cys2-6]硫醚環(huán)[C&C0-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]—(PEG)n-NH2，其中n-4的合成4a)ClC仏CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)Cys〗一(PEG)n-亂，其中n=4的合成n-Nfh,其中4的合成《h,H>。b分于責(zé)*2280,120精確質(zhì)量《m78.055分干式-cwh，s4cin21035s3O0,根據(jù)實(shí)施例2b)組裝肽，人工偶聯(lián)所有四個(gè)PEG單元。后處理之后獲得粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B，IO分鐘，其中A=H20/0.1%TFA和B=CIhCN/0.1%TFA'，柱子，PhenomenexLuna3nC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.50分鐘)。4b)硫醚環(huán)[CH2CO—Lys-Cys(tBu)-Ars—Gly—Asp—Cys(tBu)-Phe-j-叉Phe-Cys]-(PEG)n-NIh其中4的合成"H、V^iYf(wy^oo0。Rroi》分子'f"'柳.戰(zhàn)精確質(zhì)量，2，37.W7務(wù)于式sCMH14SNJlOM抑用茴香醚(100pL)，DMSO(lmL)和TFA(50mL)的溶液處理硫醚環(huán)[CHaCO—Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp—Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)廣分子lr-22仫《9精確質(zhì)重s22.WB分子式-CWmWN2)03SS3ClCILCO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)廣NH2溶劑于水/乙腈。用氨水將混合物調(diào)節(jié)至pH8并且攪拌16小時(shí)。后處理之后獲得粗產(chǎn)物肽(分析HPLC:梯度，5-50%B，IO分鐘，其中A-H20/0.1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，PhenomenexLuna3nC18(2)50x4.6mm;流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214n邁；產(chǎn)物滯留時(shí)間，6.37分鐘)。利用質(zhì)語(yǔ)進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，[(M+2H)/2〗1122.0，實(shí)測(cè)值，1122.5)。4c)二硫化物[Cys2—l硫醚環(huán)[CH^CO"Lys-Cys7—Arg—Gly—Asp—Cys6—NH260分鐘，接著真空去除TFA，并且通過(guò)加入二乙基醚將肽沉淀,對(duì)粗產(chǎn)物(345mg)實(shí)施制備HPLC(Phe應(yīng)enexLuna5(iC18(2)250x21.20邁m柱)純化，使用5-50%B，其中A-H20/0.1%TFA和B-CH3CN/0.1%TFA,用40分鐘，流速IO毫升/分鐘，凍干之后得到12mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，5-50%B，用10分鐘，其中A-H20/0.1XTFA和B-CH3CN/0.1%TFA;柱子，Pheno隨exLuna3jiC18(2)50x4.6m邁；流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，l/V214n邁；產(chǎn)物滯留時(shí)間，4.87分鐘)。4d)二硫化物[Cys2—6]硫醚環(huán)[CILCO-Lys(cPn216-戊二酰)-Cys;-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys〗-(PEG)n-NH2其中n-4的合成12mg二硫化物[Cys'"I硫醚環(huán)[CH2CO-Lys-Cys-Arg-GIy-Asp-Cys-Phe-Cys]-(PEG)廣NIL，5.2mg的cPn216螯合物活潑酯和2nL的N-甲基嗎啉溶解于DMF(0.5mL)。將混合物攪拌7小時(shí)。對(duì)反應(yīng)混合物實(shí)施制備HPLC(Phe,enexLuna5jiC18(2)250x21.20mm柱)純化，使用5-50%B，其中A1%TFA和B-CH;CN/0.1%TFA，用40分鐘，流速IO毫升/分鐘。凍干之后得到8mg純物質(zhì)(分析HPLC:梯度，5-50%B，用IO分鐘，其中A=H20/0,1%TFA和B=CH3CN/0.1%TFA.'柱子，Phe議enexLuna3jiC18(2)50x4.6m依流速，2毫升/分鐘；檢測(cè)，UV214nm;產(chǎn)物滯留時(shí)間，5.17分鐘)。利用質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物的進(jìn)一步表征預(yù)期值，[(M+2H)/21284.6,實(shí)測(cè)值，1284.9)。序列表<110>AmershamHealthAS<120>肽基化合物<130>NO20014954<150>顧00:U9S4<151>2001-10-U<170>Patentlnversion3,1《2U>8<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成肽<220><222>(2)-(5)《223>氨基酸殘基2和5之間的二疏橋<220><221>THIOETH<222>U),,(8)<223>氨基酸殘基1和8之間的疏瞇橋<400>1LysCysArgGlyAspCysPhecys1權(quán)利要求1.通式(I)的化合物或者其藥學(xué)可接受鹽其中G代表甘氨酸，D代表天冬氨酸，R1代表-(CH2)n-或-(CH2)n-C6H4-，其中n代表正整數(shù)1-10，h代表1或2的正整數(shù)，X1代表氨基酸殘基，其中所述氨基酸具有一個(gè)功能側(cè)鏈，X2和X4獨(dú)立地代表能形成二硫鍵的氨基酸殘基，X3代表精氨酸，N-甲基精氨酸或精氨酸模擬物，X5代表疏水性氨基酸或者其衍生物，和X6代表含有硫羥的氨基酸殘基，和X7不存在或者代表生物改性劑部分，Z1代表抗腫瘤劑，螯合劑或者報(bào)道基因部分和W1不存在或代表間隔基團(tuán)部分。2.權(quán)利要求1要求的化合物，其中任何氨基酸殘基獨(dú)立地是D或L構(gòu)型。3.權(quán)利要求l要求的化合物，其中R!代表-(CH》-。4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中X!代表天冬氨酸，谷氨酸，賴氨酸，高賴氨酸，二氨基脂環(huán)酸或其衍生物。5.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中X"X4和Xs獨(dú)立地代表半胱氨酸或高半胱氨酸殘基。6.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中X3代表精氨酸殘基。7.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中Xs代表酪氨酸，苯丙氨酸，3-碘-酪氨酸或萘基丙氨酸殘基。8.權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中X7不存在或者包括l-10單元的單分散PEG結(jié)構(gòu)單元。9.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中x7不存在或者包括l-10單元的式II<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>10.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中X代表1-10個(gè)^酸殘基。11.權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中X7代表甘氨酸，賴氨酸，天冬氨酸或絲氨酸殘基。12.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中Z,是式III的螯合劑(iii)其中各個(gè)R1，R2，R3，和W獨(dú)立地是R基團(tuán)；各個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立地是H或C！-10烷基，"烷基芳基，ch。烷猛烷基，d—10羥基烷基，cho烷基胺，d-lfl氟代烷基，或者兩個(gè)或多個(gè)R基團(tuán)，與它們連接的原子一起形成碳環(huán)，雜環(huán)，飽和的或不飽和的環(huán)。13.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中Z,是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>14.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中Z包括報(bào)道基因部分。15.權(quán)利要求14要求的化合物，其中報(bào)道基因部分包括金屬放射性核素，順磁性金屬離子，熒光金屬離子，重金屬離子或簇離子。16.權(quán)利要求14和15要求的化合物，其中報(bào)道基因部分包括，，99raTc，mIn，47Sc，67Ga,51Cr，177raSn，67Cu，167Tm，97Ru，mRe，177Lu,199Au，203Pb，'"Ce或"F。17.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中報(bào)道基因部分是99raTc。18.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中Z，是抗腫瘤劑。19.權(quán)利要求18要求的化合物，其中Z!代表環(huán)磷酰胺，苯丁酸氮芥，二甲磺酸丁酯，甲氨喋呤，阿糖孢苷，氟尿嘧啶，長(zhǎng)春堿，紫杉醇，阿霉素，柔紅霉素，依托泊苷，替尼泊苷，順鉑，安吖啶或多西紫杉。20.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)要求的化合物，其中W!是戊二酸或琥珀酸。21.權(quán)利要求1要求的化合物，其由下式所定義<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>化合物III22.—種藥物組合物，它含有有效量的通式(I)的化合物或者其鹽，和一種或多種藥學(xué)可接受佐劑、賦形劑或稀釋劑。23.權(quán)利要求1-21任一項(xiàng)要求的化合物在制備造影介質(zhì)中的用途。24.權(quán)利要求1-21任一項(xiàng)要求的化合物在制備用于對(duì)事先施用造影劑的人體或動(dòng)物體進(jìn)行成像的造影劑方面的用途。25.權(quán)利要求1要求的化合物在制備用于對(duì)事先施用造影劑組合物的人體或動(dòng)物體產(chǎn)生增強(qiáng)成像的造影劑組合物方面的用途。26.權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)要求的化合物或組合物在制備用于監(jiān)測(cè)一種藥物對(duì)人體或動(dòng)物體與癌癥相關(guān)的癥狀的治療效果的藥物方面的用途，其中所述人體或動(dòng)物體事先施用權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)要求的化合物或組合物，所述用途包括檢測(cè)細(xì)胞受體對(duì)所述化合物或組合物的攝取，其中所述施用和檢測(cè)任選地反復(fù)進(jìn)行，在用所述化合物或組合物治療之前、期間和之后。27.權(quán)利要求1-12和權(quán)利要求18-19中任一項(xiàng)要求的化合物用于制備用于對(duì)人或動(dòng)物的癌癥或相關(guān)疾病的治療性或預(yù)防性治療的藥物的用途。全文摘要本發(fā)明涉及用作診斷成像劑或者治療藥物的新的肽基化合物，其中所述物質(zhì)包括與整聯(lián)蛋白受體結(jié)合的導(dǎo)向載體。文檔編號(hào)C07C211/13GK101537190SQ20091012785公開日2009年9月23日申請(qǐng)日期2002年7月8日優(yōu)先權(quán)日2001年7月10日發(fā)明者A·庫(kù)斯伯特森,B·因德雷沃爾,C·M·阿歇爾,H·J·瓦德斯沃斯,M·索爾巴肯,T·恩格爾申請(qǐng)人:通用電氣醫(yī)療集團(tuán)股份有限公司