專利名稱：作為mek抑制劑的n3烷基化苯并咪唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列烷基化(1H-苯并咪唑-5-基)-(4-取代苯基)-胺衍生物，其用于治療哺乳動(dòng)物中的過度增殖性疾病，如癌癥和炎癥。本發(fā)明還涉及在治療哺乳動(dòng)物，特別是人中的過度增殖性疾病中使用這些化合物的方法，并涉及含有這些化合物的藥物組合物。本申請(qǐng)要求2003年8月29日提交的美國(guó)申請(qǐng)10/652,733的優(yōu)先權(quán)，該文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容引入本文作參考。
背景技術(shù)：
通過生長(zhǎng)因子受體和蛋白激酶進(jìn)行的細(xì)胞信號(hào)傳遞是細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化的重要調(diào)節(jié)劑。在正常的細(xì)胞生長(zhǎng)中，通過受體活化，生長(zhǎng)因子(即PDGF或EGF等)激活MAP激酶途徑。在正常和非受控細(xì)胞生長(zhǎng)中涉及的最重要而且也是最被了解的MAP激酶途徑之一是Ras/Raf激酶途徑?；钚訥TP結(jié)合的Ras導(dǎo)致Raf激酶的活化和間接磷酸化。Raf接著使兩個(gè)絲氨酸殘基上的MEK1和2磷酸化(對(duì)于MEK1是S218和S222，而對(duì)于MEK2是S222和S226(Ahn等人，Methods in Enzymology 2001，332，417-431)?；罨腗EK接著使其惟一的已知底物MAP激酶ERK1和2磷酸化。由MEK產(chǎn)生的ERK磷酸化對(duì)于ERK1是發(fā)生在Y204和T202上，而對(duì)于ERK2是發(fā)生在Y185和T183上(Ahn等人，Methods in Enzymology 2001，332，417-431)。磷酸化的ERK發(fā)生二聚，然后移位至細(xì)胞核中，并在此積聚(Khokhlatchev等人，Cell 1998，93，605-615)。在該細(xì)胞核中，ERK參與數(shù)種重要的細(xì)胞功能，包括但不限于核轉(zhuǎn)運(yùn)、信號(hào)傳導(dǎo)、DNA修復(fù)、核小體組裝和移位以及mRNA加工和翻譯(Ahn等人，MolecularCell 2000，6，1343-1354)?？傊?，用生長(zhǎng)因子處理細(xì)胞導(dǎo)致ERK1和2的活化，這導(dǎo)致增殖，而且在某些情況下導(dǎo)致分化(Lewis等人，Adv.Cancer Res.1998，74，49-139)。
在增殖性疾病中，ERK激酶途徑中所涉及的生長(zhǎng)因子受體、下游信號(hào)蛋白或蛋白激酶的基因突變和/或過度表達(dá)導(dǎo)致非受控的細(xì)胞增殖，并最終導(dǎo)致腫瘤形成。例如，一些癌癥含有這樣的突變，其由于生長(zhǎng)因子的連續(xù)產(chǎn)生而導(dǎo)致該途徑的連續(xù)激活。其他突變可在活化的GTP結(jié)合Ras復(fù)合物的失活中導(dǎo)致缺陷，同樣導(dǎo)致MAP激酶途徑的激活。在50％的結(jié)腸癌和＞90％的胰腺癌以及許多其他類型的癌癥中都發(fā)現(xiàn)了Ras的突變、致癌形式(Kohl等人，Science 1993，260，1834-1837)。最近，在60％以上的惡性黑素瘤中鑒別出bRaf突變(Davies，H.等人，Nature 2002，417，949-954)。bRaf中的這些突變導(dǎo)致組成性活性的MAP激酶級(jí)聯(lián)。原發(fā)性腫瘤樣品和細(xì)胞系的研究也已表明胰腺、結(jié)腸、肺、卵巢和腎的癌癥中MAP激酶途徑的組成性或過度激活(Hoshino，R.等人，Oncogene 1999，18，813-822)。因此，在癌癥和由基因突變導(dǎo)致的過度活躍的MAP激酶途徑之間存在強(qiáng)烈的關(guān)聯(lián)。
因?yàn)镸AP激酶級(jí)聯(lián)的組成性或過度激活在細(xì)胞增殖和分化中起著重要的作用，因此相信抑制該途徑在過度增殖性疾病中是有益的。因?yàn)镸EK在Ras和Raf的下游，因此MEK在該途徑中是關(guān)鍵的因素。另外，其是具有吸引力的治療靶，因?yàn)镸EK磷酸化的惟一已知底物是MAP激酶ERK1和2。在數(shù)項(xiàng)研究中已表明抑制MEK具有潛在的治療益處。例如，已表明小分子MEK抑制劑在裸鼠異種移植物中抑制人腫瘤生長(zhǎng)(Sebolt-Leopold等人，Nature-Medicine 1999，5(7)，810-816；Trachet等人，AACR April 6-10，2002，Poster #5426；Tecle，H.IBC 2ndInternat’l Conference of Protein kinases，Sep.9-10，2002)，在動(dòng)物中阻斷靜態(tài)異常性疼痛(2001年1月25日公布的WO 01/05390)，并且抑制急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)(Milella等人，J Clin Invest2001，108(6)，851-859)。
已公開了MEK的小分子抑制劑。在過去的數(shù)年中至少有13個(gè)專利申請(qǐng)1995年1月24日提交的US 5,525,625；1998年10月8日公布的WO 98/43960；1999年1月14日公布的WO 99/01421和WO 99/01426；2000年7月20日公布的WO 00/41505、WO 00/42002、WO 00/42003、WO 00/41994、WO 00/42022和WO 00/42029；2000年11月16日公布的WO 00/68201；2001年9月20日公布的WO01/68619；以及2002年1月24日公布的WO 02/06213。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供式I的烷基化(1H-苯并咪唑-5-基)-(4-取代苯基)-胺化合物及其藥學(xué)可接受的鹽和前藥，它們用于治療過度增殖性疾病。具體而言，本發(fā)明涉及用作MEK抑制劑的式I的化合物。本發(fā)明還提供治療癌癥的方法。本發(fā)明還提供含有式I的化合物的制劑以及使用該化合物治療需要其的患者的方法。另外，本發(fā)明描述了用于制備式I的抑制化合物的方法。
因此，本發(fā)明提供式I的化合物及其藥學(xué)可接受的鹽、前藥和溶劑化物 其中-是任選的鍵，條件是環(huán)中有且僅有一個(gè)氮是雙鍵的；
R1、R2、R9和R10獨(dú)立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4，或C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-雜芳基、-NR4(CR4R5)m-雜芳基、-O(CR4R5)m-雜環(huán)基或-NR4(CR4R5)m-雜環(huán)基，其中烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R3選自氫、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、(CH2)nC3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R”、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R’、-SO2R’、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R’、R”和R獨(dú)立地選自氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、芳基和芳基烷基；
R3和R4可以與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，它們各自任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R”、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR’、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R’、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R4和R5獨(dú)立地代表氫或C1-C6烷基；或者R4和R5與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，它們各自任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R”、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R’、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R6選自三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R”、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R’、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R7選自氫、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-SO2R3、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；W選自雜芳基、雜環(huán)基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10環(huán)烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(雜芳基)和-C(O)(雜環(huán)基)，它們各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代-NR3R4、-OR3、-R2或C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，它們各自任選被1或2個(gè)獨(dú)立地選自-NR3R4和-OR3的基團(tuán)取代；R8選自氫、-SCF3、-Cl、-Br、-F、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR3R4，或C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-雜芳基、-NR4(CR4R5)m-雜芳基、-O(CR4R5)m-雜環(huán)基或-NR4(CR4R5)m-雜環(huán)基，其中烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；m是0、1、2、3、4或5；并且
j是1或2。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明包括的新化合物是如上述通式I所描述的化合物及其藥學(xué)可接受的鹽和前藥。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基、C3-C7環(huán)烷基烷基、C3-C7雜環(huán)烷基或C3-C7雜環(huán)烷基烷基，它們各自可任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中R8是-OCF3、Br或Cl，R2是氫，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中R9是氫或鹵素，而R10是氫。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中W是-C(O)OR3或-C(O)NR4OR3。
本發(fā)明還提供式II的化合物 其中W、R1、R7、R8、R9和R10如以上式I所定義。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，它們各自可任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中R8是-OCF3、Br或Cl，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中R9是氫或鹵素，而R10是氫。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中W是-C(O)OR3或-C(O)NR4OR3。
本發(fā)明還提供式III的化合物 其中R1、R2、R7、R8和R9如以上式I所定義，而A是-OR3或-NR4OR3，其中R3和R4如以上式I所定義。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，它們各自可任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R8是-OCF3、Br或Cl，R2是氫，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R9是氫或鹵素。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中當(dāng)A是-OR3時(shí)，R3是氫或低級(jí)烷基；而當(dāng)A是-NR4OR3時(shí)，R4是氫。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物 其中R1、R2、R7、R8和R9如以上式I所定義，而A是-OR3或-NR4OR3，其中R3和R4如以上式I所定義。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，它們各自可任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R8是-OCF3、Br或Cl，R2是氫，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R9是氫或鹵素。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中當(dāng)A是-OR3時(shí)，R3是氫或低級(jí)烷基；而當(dāng)A是-NR4OR3時(shí)，R4是氫。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物 其中R1、R7、R8和R9如以上式I所定義，而A是-OR3或-NR4OR3，其中R3和R3如以上式I所定義。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，它們各自可任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R8是-OCF3、Br或Cl，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R9是氟或氯。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中當(dāng)A是-OR3時(shí)，R3是氫或低級(jí)烷基；而當(dāng)A是-NR4OR3時(shí)，R4是氫。
除非另有明確定義，在本說明書中采用以下術(shù)語定義。
本發(fā)明中的“C1-C10烷基”、“烷基”和“低級(jí)烷基”是指具有1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、庚基、辛基等。優(yōu)選的烷基是C1-6烷基。更優(yōu)選的烷基是C1-3烷基。
“C2-C10烯基”、“低級(jí)烯基”和“烯基”是指具有2-10個(gè)碳原子以及至少一個(gè)雙鍵的烴基，并且包括乙烯基、丙烯基、1-丁-3-烯基、1-戊-3-烯基、1-己-5-烯基等。更優(yōu)選的是具有3-5個(gè)碳原子的低級(jí)烯基。
“C2-C10炔基”、“低級(jí)炔基”和“炔基”是指具有2-10個(gè)碳原子以及至少一個(gè)叁鍵的烴基，并且包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔-2-基等。更優(yōu)選的是具有3-5個(gè)碳原子的炔基。
在本發(fā)明中術(shù)語“鹵素”是指氟、溴、氯和碘。
術(shù)語“芳基”是指具有單環(huán)(如苯基)、多環(huán)(如聯(lián)苯基)或其中至少一個(gè)環(huán)是芳香性的多個(gè)稠合環(huán)(如1，2，3，4-四氫萘基、萘基)的芳族碳環(huán)基，其任選被例如鹵素、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、三氟甲基、芳基、雜芳基和羥基單、二或三取代。
術(shù)語“雜芳基”是指5-、6-或7-元環(huán)的一個(gè)或多個(gè)芳族環(huán)系，其包括5-10個(gè)原子的稠合環(huán)系(其中至少一個(gè)環(huán)是芳香性的)，所述環(huán)系含有至少一個(gè)和最多四個(gè)選自氮、氧或硫的雜原子。雜芳基的實(shí)例為吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、2，3-二氮雜萘基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮雜萘基以及呋喃并吡啶基。螺環(huán)基團(tuán)也包括在該定義的范圍內(nèi)。雜芳基任選被例如鹵素、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代烷基、芳基、雜芳基和羥基單、二或三取代。
本文所用術(shù)語“碳環(huán)”、“碳環(huán)基”、“環(huán)烷基”或“C3-C10環(huán)烷基”是指具有3-10個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)基團(tuán)。該環(huán)烷基可以是單環(huán)或者多環(huán)稠合系統(tǒng)，而且可以稠合在芳環(huán)上。這些基團(tuán)的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。本文的環(huán)烷基可以是未取代的，或者如詳細(xì)說明，在一個(gè)或多個(gè)可取代的位置被各種基團(tuán)取代。例如，這些環(huán)烷基可任選被例如以下基團(tuán)取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基。
“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”是指5-、6-或7-元環(huán)的一個(gè)或者多個(gè)碳環(huán)環(huán)系，其包括4-10個(gè)原子的稠合環(huán)系，所述環(huán)系含有至少一個(gè)和最多四個(gè)選自氮、氧或硫的雜原子，條件是該基團(tuán)的環(huán)不含兩個(gè)相鄰的O或S原子。稠合環(huán)系可以是稠合在芳組基團(tuán)上的雜環(huán)。優(yōu)選的雜環(huán)包括但不限于吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、哌啶子基、嗎啉代、硫代嗎啉代、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基、高哌啶基、氧雜環(huán)戊烷基(oxepanyl)、硫雜環(huán)戊烷基(thiepanyl)、氧氮雜(oxazepinyl)、二氮雜、硫氮雜(thiazepinyl)、1，2，3，6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊環(huán)基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊環(huán)基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑啉基、3-氮雜二環(huán)[3.1.0]己烷基、3-氮雜二環(huán)[4.1.0]庚烷基、氮雜二環(huán)[2.2.2]己烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。螺環(huán)基團(tuán)也包括在該定義的范圍內(nèi)。如有可能，衍生于上述基團(tuán)的前述基團(tuán)可以是C-連接的或N-連接的。例如，衍生于吡咯的基團(tuán)可以是吡咯-1-基(N-連接的)或吡咯-3-基(C-連接的)。另外，衍生于咪唑的基團(tuán)可以是咪唑-1-基(N-連接的)或咪唑-3-基(C-連接的)。其中兩個(gè)環(huán)碳原子被氧代(＝O)基團(tuán)取代的雜環(huán)基的實(shí)例是1，1-二氧代-硫代嗎啉基。本文的雜環(huán)基是未取代的，或者如詳細(xì)說明，在一個(gè)或多個(gè)可取代的位置被各種基團(tuán)取代。例如，這些雜環(huán)基可任選被例如以下基團(tuán)取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基。
術(shù)語“芳基烷基”是指被一個(gè)或多個(gè)(如上定義的)芳基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的芳基烷基是芳基-C1-3-烷基。實(shí)例包括芐基、苯基乙基等。
術(shù)語“雜芳基烷基”是指被(如上定義的)雜芳基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的雜芳基烷基是5-或6-元雜芳基-C1-3-烷基。實(shí)例包括噁唑基甲基、吡啶基乙基等。
術(shù)語“雜環(huán)基烷基”是指被(如上定義的)雜環(huán)基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的雜環(huán)基烷基是5或6元雜環(huán)基-C1-3-烷基。實(shí)例包括四氫吡喃基甲基。
術(shù)語“環(huán)烷基烷基”是指被(如上定義的)環(huán)烷基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的雜環(huán)基是5或6元環(huán)烷基-C1-3-烷基。實(shí)例包括環(huán)丙基甲基。
術(shù)語“Me”代表甲基，“Et”代表乙基，“Bu”代表丁基，而“Ac”代表乙?；?。
除非另有說明，本文所用短語“藥學(xué)可接受的鹽”包括可能在本發(fā)明的化合物中存在的酸性和堿性基團(tuán)的鹽。本身為堿性的本發(fā)明化合物能夠與各種無機(jī)和有機(jī)酸形成多種鹽。可用于制備本發(fā)明的這種合堿性化合物的藥學(xué)可接受的酸加成鹽的酸是形成無毒酸加成鹽的酸，即，含有藥學(xué)可接受的陰離子的鹽，如乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、鈣、樟腦磺酸鹽(camsylate)、碳酸鹽、氯化物、clavulanate、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、edislyate、estolate、乙磺酸鹽(esylate)、乙基琥珀酸鹽、富馬酸鹽、gluceptate、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽、己基resorcinate、hydrabamine、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、碘化物、isothionate、乳酸鹽、乳二糖酸鹽(lactobionate)、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽(napsylate)、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、pamoate(embonate)、棕櫚酸鹽(palimitate)、泛酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、teoclate、甲苯磺酸鹽、triethiodode以及戊酸鹽。因?yàn)楸景l(fā)明的單個(gè)化合物可包括一個(gè)以上的酸性或堿性基團(tuán)，所以本發(fā)明的化合物在單個(gè)化合物中可能包括單、二或三鹽。
如果在本發(fā)明的化合物中存在酸性基團(tuán)，則可通過用堿性化合物，特別是無機(jī)堿處理本發(fā)明的化合物來形成鹽。優(yōu)選的無機(jī)鹽是與堿金屬和堿土金屬如鋰、鈉、鉀、鋇和鈣形成的鹽。優(yōu)選的有機(jī)堿鹽包括例如銨、二芐基銨、芐基銨、2-羥基乙基銨、二(2-羥基乙基)銨、苯基乙基芐基胺、二芐基-亞乙基二胺等鹽。酸性基團(tuán)的其他鹽可以包括例如與以下物質(zhì)形成的鹽普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺，以及與堿性氨基酸如甘氨酸、鳥氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴氨酸和精氨酸形成的鹽。特別優(yōu)選的鹽是本發(fā)明化合物的鈉或鉀鹽。
對(duì)于堿性基團(tuán)，通過用酸性化合物，特別是無機(jī)酸處理本發(fā)明的化合物而形成鹽。優(yōu)選的該類型的無機(jī)鹽可以包括例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等。優(yōu)選的該類型的有機(jī)鹽可以包括例如與以下有機(jī)酸形成的鹽甲酸、乙酸、琥珀酸、檸檬酸、乳酸、馬來酸、富馬酸、棕櫚酸、膽酸、撲姆酸、粘酸、D-谷氨酸、D-樟腦酸、戊二酸、乙醇酸、鄰苯二甲酸、酒石酸、月桂酸、硬脂酸、水楊酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、山梨酸、puric酸、苯甲酸、肉桂酸等。特別優(yōu)選的該類型的鹽是本發(fā)明化合物的鹽酸鹽或硫酸鹽。
在本發(fā)明的化合物中，在使用諸如(CR4R5)m或(CR4R5)t的術(shù)語時(shí)，R4和R5可隨1以上的m或t而每次不同。例如，如果m或t是2，則術(shù)語(CR4R5)m或(CR4R5)t可等于-CH2CH2-或-CH(CH3)C(CH2CH3)(CH2CH2CH3)-或任意數(shù)目的在R4和R5定義范圍內(nèi)的類似基團(tuán)。
本發(fā)明的某些化合物可具有不對(duì)稱中心，并且因此以不同對(duì)映體形式存在。本發(fā)明化合物的所有旋光異構(gòu)體和立體異構(gòu)體以及它們的混合物都被認(rèn)為是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。對(duì)于本發(fā)明的化合物，本發(fā)明包括外消旋體、一種或多種對(duì)映體形式、一種或多種非對(duì)映異構(gòu)體形式或它們的混合物的應(yīng)用。本發(fā)明的化合物也可作為互變異構(gòu)體存在。本發(fā)明涉及所有這些互變異構(gòu)體及其混合物的應(yīng)用。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的化合物，該化合物與本發(fā)明所述的化合物相同，不同之處在于一個(gè)或多個(gè)原子被具有與自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子量或質(zhì)量數(shù)不同的原子量或質(zhì)量數(shù)的原子置換?？蓳饺氡景l(fā)明化合物中的同位素的實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、鱗、硫、氟和氯的同位素，如分別是2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F、和36Cl。本發(fā)明的化合物、其前藥以及包含上述同位素和/或其他原子的其他同位素的所述化合物或所述前藥的藥學(xué)可接受的鹽在本發(fā)明的范圍內(nèi)。某些同位素標(biāo)記的本發(fā)明的化合物，例如摻入了放射性同位素如3H和14C的化合物，用于藥物和/或底物組織分布測(cè)定中。氚化，即3H，及碳-14，即14C同位素由于其制備容易及其可檢測(cè)性而特別優(yōu)選。另外，用更重的同位素如氘，即2H取代，可提供某些由更高的代謝穩(wěn)定性所致的治療益處，如增加的體內(nèi)半衰期或降低的劑量需求，并因此在某些情況下是優(yōu)選的。同位素標(biāo)記的本發(fā)明的化合物及其前藥通?？赏ㄟ^用易于得到的同位素標(biāo)記的試劑替代無同位素標(biāo)記的試劑而按照以下合成路線和/或?qū)嵤├椭苽渲忻枋龅姆椒▉碇苽洹?br> 本發(fā)明還包括含有式I-IIIb化合物的前藥的藥物組合物以及通過給予本發(fā)明化合物的前藥來治療增殖性疾病或異常細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。具有游離氨基、酰氨基、羥基或羧基的本發(fā)明化合物可轉(zhuǎn)化為前藥。前藥包括以下化合物氨基酸殘基或兩個(gè)或多個(gè)(如2、3或4個(gè))氨基酸殘基的多肽鏈通過酰胺或酯鍵共價(jià)連接在本發(fā)明化合物的游離氨基、羥基或羧基上。該氨基酸殘基包括但不限于20個(gè)通常用3個(gè)字母符號(hào)表示的天然氨基酸，而且還包括4-羥基脯氨酸、羥基賴氨酸、demosine、isodemosine、3-甲基組氨酸、正纈氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、cirtulline、高半胱氨酸、高絲氨酸、鳥氨酸和氮氨酸砜。一種優(yōu)選的前藥包括共價(jià)偶聯(lián)于纈氨酸殘基的本發(fā)明的化合物。也包括其他類型的前藥。例如，游離羧基可衍生為酰胺或烷基酯。如AdvancedDrug Delivery Reviews 1996，19，115中所述，游離羥基通過使用以下基團(tuán)來衍生化，所述基團(tuán)包括但不限于半琥珀酸酯(鹽)、磷酸酯、二甲基氨基乙酸酯(鹽)和磷酰氧基甲氧羰基。羥基和氨基的氨基甲酸酯(鹽)前藥以及碳酸酯(鹽)前藥、羥基的磺酸酯和硫酸酯也包括在內(nèi)。還包括羥基的衍生化如(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙基醚，其中所述?；梢允峭榛?，任選被包括但不限于醚、胺和羧酸官能團(tuán)的基團(tuán)取代，或者其中所述?；侨缟纤龅陌被狨?。該類型的前藥描述在以下文獻(xiàn)中J.Med.Chem.1996，39，10。游離胺也可被衍生化為酰胺、磺酰胺或膦酰胺。所有這些前藥部分可摻入包括但不限于醚、胺和羧酸官能團(tuán)的基團(tuán)。
應(yīng)理解，如果兩個(gè)或多個(gè)基團(tuán)被連續(xù)用于定義連接在結(jié)構(gòu)上的取代基，則第一個(gè)命名的基團(tuán)被認(rèn)為是端基，而最后命名的基團(tuán)被認(rèn)為是連接在所討論的結(jié)構(gòu)上。因此，例如，芳基烷基通過烷基連接在所討論的結(jié)構(gòu)上。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中過度增殖性疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥學(xué)可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療癌癥，如腦、肺、鱗狀細(xì)胞、膀胱、胃、胰腺、乳腺、頭、頸、腎、腎、卵巢、前列腺、結(jié)腸直腸、食管、睪丸、婦科或甲狀腺癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療非癌過度增殖性疾病，如良性的皮膚增生(如銀屑病)、再狹窄增生或前列腺增生(如良性前列腺肥大(BPH))。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中胰腺炎或腎病(包括增殖性腎小球腎炎和糖尿病誘發(fā)的腎病)或者治療哺乳動(dòng)物中疼痛的藥物組合物，其包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥學(xué)可接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于預(yù)防哺乳動(dòng)物中胚細(xì)胞植入的藥物組合物，其包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥學(xué)可接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中與血管發(fā)生或血管形成有關(guān)的疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥學(xué)可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療選自以下的疾病腫瘤血管發(fā)生，慢性炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，動(dòng)脈粥樣硬化，炎性腸病，皮膚病如銀屑病、excema和硬皮病，糖尿病，糖尿病視網(wǎng)膜病變，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變，年齡相關(guān)性黃斑變性，血管瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，黑素瘤，卡波濟(jì)肉瘤，以及卵巢、乳腺、肺、胰腺、前列腺、結(jié)腸和表皮癌。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中過度增殖性疾病的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法涉及治療以下疾病癌癥，如腦、肺、鱗狀細(xì)胞、膀胱、胃、胰腺、乳腺、頭、頸、腎、腎、卵巢、前列腺、結(jié)腸直腸、食管、睪丸、婦科或甲狀腺癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法涉及治療非癌過度增殖性疾病，如良性的皮膚增生(如銀屑病)、再狹窄增生或前列腺增生(如良性前列腺肥大(BPH))。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中過度增殖性疾病的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物以及選自以下的抗腫瘤藥有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝藥、插入抗生素(intercalating antibiotics)、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶抑制劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、抗激素藥、血管發(fā)生抑制劑以及抗雄激素。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中胰腺炎或腎病的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。
本發(fā)明還涉及預(yù)防哺乳動(dòng)物中胚細(xì)胞植入的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中與血管發(fā)生或血管形成有關(guān)的疾病的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或水合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于治療選自以下的疾病腫瘤血管發(fā)生，慢性炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，動(dòng)脈粥樣硬化，炎性腸病，皮膚病如銀屑病、excema和硬皮病，糖尿病，糖尿病視網(wǎng)膜病，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變，年齡相關(guān)性黃斑病變，血管瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，黑素瘤，卡波濟(jì)肉瘤，以及卵巢、乳腺、肺、胰腺、前列腺、結(jié)腸和表皮癌。
根據(jù)本發(fā)明的方法，可用本發(fā)明的化合物或所述化合物的藥學(xué)可接受的鹽、前藥和水合物治療的患者包括例如已被診斷患有以下疾病的患者銀屑病、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、BPH、肺癌、骨癌、CMML、胰腺癌、皮膚癌、頭和頸癌、皮膚或眼內(nèi)黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區(qū)的癌癥、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、睪丸癌、婦科腫瘤(如子宮肉瘤、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、陰道癌或外陰癌)、何杰金病、食管癌、小腸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)的癌癥(如甲狀腺癌、甲狀旁腺癌或腎上腺癌)、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、兒童實(shí)體瘤、淋巴細(xì)胞淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌(如腎細(xì)胞癌、腎盂癌)或者中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤(如原發(fā)性CNS淋巴瘤、脊椎軸腫瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤或垂體腺癌)。
本發(fā)明還涉及用于抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物組合物，其包含一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或前藥，以及一定量的化療藥，其中該化合物、鹽、溶劑化物或前藥的量以及該化療藥的量在一起有效抑制異常細(xì)胞生長(zhǎng)。目前在本領(lǐng)域中已知許多化療藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，該化療藥選自有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝藥、插入抗生素、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、抗激素藥、血管發(fā)生抑制劑以及抗雄激素。
本發(fā)明還涉及用于抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)或者治療過度增殖性疾病的方法，所述方法包括給予該哺乳動(dòng)物一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或前藥，并聯(lián)合放射療法，其中該化合物、鹽、溶劑化物或前藥的量以及放射療法在一起有效抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)或者治療過度增殖性疾病。給予放射治療的技術(shù)在本領(lǐng)域中是已知的，而且這些技術(shù)可用于以上描述的組合療法中。在該組合療法中本發(fā)明化合物的給藥可如下所述確定。
據(jù)信本發(fā)明的化合物能夠使異常細(xì)胞對(duì)為殺死這些細(xì)胞和/或抑制這些細(xì)胞生長(zhǎng)的目的的放射治療更為敏感。因此，本發(fā)明還涉及用于使哺乳動(dòng)物中的異常細(xì)胞對(duì)放射治療更加敏感的方法，其包括給予該哺乳動(dòng)物一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物或前藥，所述量有效使異常細(xì)胞對(duì)放射治療更加敏感。在該方法中，本發(fā)明的化合物、鹽或溶劑化物的量可根據(jù)如下所述的用于確定這些化合物的有效量的方法來確定。
本發(fā)明還涉及抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)的方法和藥物組合物，其包括一定量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物、其前藥或其同位素標(biāo)記的衍生物，以及一定量的一種或多種選自抗血管發(fā)生藥、信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑和抗增殖藥的物質(zhì)。
抗血管發(fā)生藥如MMP-2(基質(zhì)-金屬蛋白酶2)抑制劑、MMP-9(基質(zhì)-金屬蛋白酶9)抑制劑和COX-II(環(huán)加氧酶II)抑制劑可與本發(fā)明的化合物以及本文描述的藥物組合物聯(lián)合使用。有用的COX-II抑制劑的實(shí)例包括CELEBREXTM(alecoxib)、伐地考昔和羅非考昔。有用的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的實(shí)例描述在以下文獻(xiàn)中WO 96/33172(1996年10月24日公開)、WO 96/27583(1996年3月7日公開)、歐洲專利申請(qǐng)97304971.1(1997年7月8日提交)、歐洲專利申請(qǐng)99308617.2(1999年10月29日提交)、WO 98/07697(1998年2月26日公開)、WO 98/03516(1998年1月29日公開)、WO 98/34918(1998年8月13日公開)、WO 98/34915(1998年8月13日公開)、WO98/33768(1998年8月16日公開)、WO 98/30566(1998年7月16日公開)、歐洲專利公布606,046(1994年7月13日公開)、歐洲專利公布931,788(1999年7月28日公開)、WO 90/05719(1990年5月31日公開)、WO 99/52910(1999年10月21日公開)、WO 99/52889(1999年10月21日公開)、WO 99/29667(1999年6月17日公開)、PCT國(guó)際申請(qǐng)PCT/IB98/01113(1998年7月21日提交)、歐洲專利申請(qǐng)99302232.1(1999年3月25日提交)、英國(guó)專利申請(qǐng)9912961.1(1999年6月3日提交)、美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/148,464(1999年8月12日提交)、美國(guó)專利5,863,949(1999年1月26日授權(quán))、美國(guó)專利5,861,510(1999年1月19日授權(quán))以及歐洲專利公布780,386(1997年6月25日公開)，所有以上文獻(xiàn)的內(nèi)容全部引入本文作為參考。優(yōu)選的MMP-2和MMP-9抑制劑是在抑制MMP-1方面幾乎沒有或者沒有活性的抑制劑。更優(yōu)選相對(duì)于其他基質(zhì)-金屬蛋白酶(即MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)選擇性抑制MMP-2和/或MMP-9的抑制劑。
一些用于本發(fā)明中的MMP抑制劑的具體實(shí)例是AG-3340、RO32-3555和RS 13-0830。
術(shù)語“異常細(xì)胞生長(zhǎng)”和“過度增殖性疾病”在本申請(qǐng)中可互換使用。
除非另有說明，本文所用的“異常細(xì)胞生長(zhǎng)”是指獨(dú)立于正常調(diào)節(jié)機(jī)制(如接觸抑制作用丟失)的細(xì)胞生長(zhǎng)。這包括例如(1)通過表達(dá)突變的酪氨酸激酶或者受體酪氨酸激酶的過度表達(dá)而增殖的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)的異常生長(zhǎng)；(2)其中發(fā)生異常酪氨酸激酶活化的其他增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞的異常生長(zhǎng)；(3)任何通過受體酪氨酸激酶增殖的腫瘤的異常生長(zhǎng)；(4)任何通過異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化而增殖的腫瘤的異常生長(zhǎng)；以及(5)其中發(fā)生異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化的其他增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞的異常生長(zhǎng)。
除非另有說明，本文所用的“治療(treating)”是指反轉(zhuǎn)、緩解、抑制該術(shù)語所適用的疾病或病癥或這種疾病或病癥的一種或多種癥狀的發(fā)展或者預(yù)防它們。除非另有說明，本文所用的“治療(treatment)”是指以上定義的治療的行為。
包括在本發(fā)明中的代表性的本發(fā)明化合物包括但不限于實(shí)施例的化合物及它們的藥學(xué)可接受的酸或堿加成鹽或其前藥?？梢蕴峒暗挠糜谥苽湟恍┍景l(fā)明的化合物的一般合成方法在PCT申請(qǐng)公布WO00/42022(2000年7月20日公開)中提供。前述專利申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容引入本文作為參考。用于制備本發(fā)明的化合物的幾種方法顯示在合成路線1-5中。
合成路線1
合成路線1a
合成路線2
合成路線3
合成路線4
合成路線5 合成路線1闡述了本發(fā)明化合物的合成。在步驟1中，使用標(biāo)準(zhǔn)條件，優(yōu)選在H2SO4中的發(fā)煙硝酸，將酸硝化。在步驟2中，通過在室溫下于水中用NH4OH置換氟，然后小心地用濃無機(jī)酸酸化至pH接近0而制備苯胺。在步驟3中，通過標(biāo)準(zhǔn)方法，包括但不限于Fisher酯化(MeOH、H2SO4)，然后在合適的有機(jī)溶劑如PhMe/MeOH或THF/MeOH中與TMSCHN2反應(yīng)而制備酯。在步驟4中，通過將所述酯與過量的合適苯胺在無其他物質(zhì)的情況下或者在有機(jī)溶劑如二甲苯中一起加熱(60-200℃)而制備二苯胺基衍生物。例如，當(dāng)R1＝Me且R2＝H時(shí)，優(yōu)選的方法是在二甲苯中于回流下攪拌所述酯和10當(dāng)量苯胺，直至反應(yīng)完全。在步驟5中，通過標(biāo)準(zhǔn)還原條件，包括但不限于在有機(jī)溶劑如EtOH或THF中用H2及Pd/C或Pd(OH)2/C或阮內(nèi)鎳，在AcOH中用Fe，在AcOH中用Zn，或者在MeOH中用Zn、NH4Cl(aq)而還原硝基芳烴，以產(chǎn)生二胺。在步驟6中，通過與甲酸一起在無其他物質(zhì)的情況下加熱或者與甲脒乙酸鹽一起在合適的溶劑如EtOH中加熱而使所述二胺環(huán)化?；蛘撸?dāng)R1或R2不是鹵素時(shí)，可通過在甲酸中與Pd(OH)2/C或其他鈀源如Pd/C一起加熱而將所述硝基芳烴直接轉(zhuǎn)化為苯并咪唑。在步驟8中，可通過標(biāo)準(zhǔn)方法，包括但不限于在有機(jī)共溶劑如THF和MeOH中用NBS或NCS和pTsOH而引入鹵化物。在步驟9中，將所述苯并咪唑烷基化，以得到N1和N3產(chǎn)物的接近等量的混合物，它們可通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，包括例如色譜法和研磨來分離。烷基化通過在合適的有機(jī)溶劑如DMF或THF中于0-80℃的溫度下使用烷化劑如烷基鹵和堿如NaH或K2CO3而完成。R7可通過本領(lǐng)域已知的如下例示的各種合成方法進(jìn)一步修飾。在步驟10中，通過標(biāo)準(zhǔn)皂化方法將酯水解。接著在步驟11中通過標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)方法將酸轉(zhuǎn)化為所希望的異羥肟酸鹽，所述偶聯(lián)方法包括但不限于在合適的有機(jī)溶劑如DMF、THF或二氯甲烷中用EDCl、HOBt或PyBOP以及合適的羥胺。
合成路線2闡述了其中在與硝基酯偶聯(lián)之前R8取代基在所述苯胺上的實(shí)例。反應(yīng)描述與合成路線1相同，區(qū)別僅在于不需要引入R8，因?yàn)槠湓陂_始時(shí)就存在于所述苯胺上。
在合成路線3中闡述了N3烷基氨基苯并咪唑衍生物的制備。在步驟1中，使用合適的氧化劑如在合適溶劑中的OsO4或者KMnO4或I2、AgOAc、AcOH、水將N3烷基化苯并咪唑異羥肟酸鹽的末端烯烴二羥基化。在步驟2中，通過在合適的二相混合物中用NaIO4或Pb(OAc)4將二醇進(jìn)一步氧化，以形成醛?；蛘?步驟3)，可通過標(biāo)準(zhǔn)方法，包括但不限于臭氧/Me2S、NaIO4/OsO4或KMnO4將所述烯烴直接轉(zhuǎn)化為所述醛。在步驟4中，通過在有或沒有AcOH的情況下，在合適的溶劑如二氯甲烷、乙腈或THF中，使用標(biāo)準(zhǔn)方法如Na(CN)BH3、Na(OAc)3BH、NMe4BH(OAc)3進(jìn)行還原胺化而制備胺。優(yōu)選的還原胺化是用胺、Me4NBH(OAc)3和乙酸在MeCN中于室溫下處理所述醛。
合成路線4闡述了其中W是雜環(huán)的本發(fā)明化合物的制備。在步驟1中，通過在合適的溶劑如EtOH中于50-100℃的溫度下與肼一起攪拌而將甲酯轉(zhuǎn)化為酰肼。然后通過用合適的試劑進(jìn)行環(huán)化而制備所希望的雜環(huán)衍生物。為得到噁二唑21，在合適的有機(jī)溶劑如EtOH中于升高的溫度(50-100℃)下用原甲酸酯如原甲酸三乙酯以及酸催化劑如pTsOH處理所述酰肼。為得到羥基噁二唑22，可在合適的有機(jī)溶劑如甲苯中于50-120℃的溫度下用光氣或光氣等價(jià)物如三光氣或羰基二咪唑?qū)⑺鲺ｋ颅h(huán)化。巰基噁二唑23可通過在合適的有機(jī)溶劑如EtOH中于升高的溫度(50-100℃)下與二硫化碳和堿如KOH反應(yīng)來制備。氨基噁二唑24可通過在合適的兩相溶劑系統(tǒng)如二噁烷和水中于室溫下與BrCN和堿如NaHCO3反應(yīng)來制備。最后，取代的氨基噁二唑25可如下制備首先使所述酰肼與合適的異硫氰酸酯(鹽)在合適的有機(jī)溶劑DMF或THF中于25-100℃的溫度下反應(yīng)。中間產(chǎn)物可以分離或者可以在合適的有機(jī)溶劑如THF或DMF中于室溫-80℃的溫度下用EDCl或其他碳二亞胺處理而直接環(huán)化。
在合成路線5中闡述了酮基苯并咪唑衍生物的制備。在步驟1中，通過標(biāo)準(zhǔn)還原方法，優(yōu)選于0℃下在THF中用LAH，或者于室溫下在EtOH:THF中用NaBH4，將甲酯轉(zhuǎn)化為芐醇。在步驟2中，在丙酮:THF中于50℃下用MnO2進(jìn)行氧化，形成醛。在步驟3中，可在THF中于低溫(如-78℃)下向所述醛中添加有機(jī)金屬試劑如有機(jī)鋰試劑和格氏試劑，以形成取代的芐醇。在步驟4中，通過在標(biāo)準(zhǔn)條件下，如Swern或Dess-Martin氧化，氧化所述芐醇而制備酮基衍生物。
本發(fā)明的化合物可能具有不對(duì)稱碳原子?；诜菍?duì)映異構(gòu)體的物理化學(xué)差異，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，例如通過色譜法或分級(jí)結(jié)晶法，可將非對(duì)映異構(gòu)體混合物分離為它們的單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體。對(duì)映體可如下分離通過與合適的旋光化合物(如醇)反應(yīng)將對(duì)映體混合物轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體混合物，分離所述非對(duì)映異構(gòu)體并將單個(gè)的非對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(例如水解)為相應(yīng)的純對(duì)映體。所有這些異構(gòu)體，包括非對(duì)映異構(gòu)體混合物和純對(duì)映體，都被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明化合物的活性可通過以下方法測(cè)定。在大腸桿菌(E.coli)中表達(dá)N-端6 His標(biāo)記的、組成性活性MEK1(2-393)，并通過常規(guī)方法純化蛋白(Ahn等人，Science 1994，265，966-970)。MEK1的活性如下進(jìn)行評(píng)估在MEK1存在下，測(cè)量來自γ-33P-ATP的γ-33P-磷酸酯(鹽)在N-端His標(biāo)記的ERK2上的摻入，所述N-端His標(biāo)記的ERK2在大腸桿菌中表達(dá)并通過常規(guī)方法純化。測(cè)定在96孔聚丙烯板上進(jìn)行。溫育混合物(100μL)包含25mM Hepes，pH7.4、10mM MgCl2、5mM β-磷酸甘油、100μM原釩酸鈉、5mM DTT、5nM MEK1和1μMERK2。抑制劑懸浮在DMSO中，而所有反應(yīng)，包括對(duì)照，均在1％DMSO的最終濃度下進(jìn)行。通過添加10μM ATP(含0.5μCiγ-33P-ATP/孔)來引發(fā)反應(yīng)，然后在室溫下溫育45分鐘。添加等體積的25％ TCA，以終止反應(yīng)并使蛋白沉淀。將沉淀出的蛋白收集在玻璃纖維B濾板上，并用Tomtec MACH III收集器洗去過量的標(biāo)記的ATP。使板風(fēng)干，然后添加30μL/孔的Packard Microscint 20，并使用Packard TopCount對(duì)板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在該測(cè)定中，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出小于50微摩爾的IC50。
以下化合物在上述測(cè)定中得到評(píng)價(jià)并具有活性。

本發(fā)明的化合物(下文稱為“活性化合物”)的給藥可通過任何能夠?qū)⒃摶衔镞f送至作用部位的方法來實(shí)現(xiàn)。這些方法包括口服途徑、十二指腸內(nèi)途徑、非胃腸道注射(包括靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或輸注)、局部和直腸給藥。
活性化合物的給藥量將取決于所治療的患者、疾病或病癥的嚴(yán)重程度、給藥率、化合物的處置、處方醫(yī)生的判斷。但是，有效劑量范圍是約0.001-100mg/kg體重/天，優(yōu)選約1-約35mg/kg/天，單劑或多劑。對(duì)于70kg的人，該劑量相當(dāng)于約0.05-7g/天，優(yōu)選約0.05-約2.5g/天。在某些情況下，低于上述范圍下限的劑量水平可能已是足夠的，而在其他情況下，在不產(chǎn)生任何有害副作用的情況下可使用更高的劑量，條件是這種更高的劑量首先被分為數(shù)個(gè)小的劑量，用于整天的給藥。
活性化合物可以作為單獨(dú)的治療施用或者可以伴有一種或多種其他抗腫瘤物質(zhì)，例如選自有絲分裂抑制劑如長(zhǎng)春堿；烷化劑如順鉑、卡鉑和環(huán)磷酰胺；抗代謝藥如5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷和羥基脲，或者例如在歐洲專利申請(qǐng)239362中公開的優(yōu)選抗代謝藥之一，如N-(5-[N-(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲酰基)-L-谷氨酸；生長(zhǎng)因子抑制劑；細(xì)胞周期抑制劑；插入抗生素如阿霉素和博來霉素；酶如干擾素；以及抗激素，例如抗雌激素如NolvadexTM(他莫昔芬)，或者例如抗雄激素如CasodexTM(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺?；?-2-羥基-2-甲基-3’-(三氟甲基)丙酰苯胺)。這些組合治療可通過同時(shí)、順序或分開給予各單獨(dú)治療成分來實(shí)現(xiàn)。
該藥物組合物例如可為適于口服給藥的形式，如片劑、膠囊劑、丸劑、緩釋制劑、溶液劑、混懸劑，適于非胃腸道注射的形式，如無菌溶液劑、混懸劑或乳劑，適于局部給藥的形式，如軟膏劑或乳劑，或者是適于直腸給藥的形式，如栓劑。該藥物組合物可以是適于單次給予精確劑量的單元?jiǎng)┬?。該藥物組合物將包含常規(guī)的藥物載體或賦形劑以及作為活性成分的本發(fā)明的化合物。另外，其可包含其他藥物或藥劑、載體、輔劑等。
示例性的非胃腸道給藥形式包括活性化合物在無菌水溶液，例如丙二醇水溶液或葡萄糖水溶液中的溶液或懸浮液。如果需要，這些劑型可進(jìn)行合適的緩沖。
合適的藥物載體包括惰性稀釋劑或填料、水和各種有機(jī)溶劑。如果需要，該藥物組合物可含有其他成分，如調(diào)味劑、粘合劑、賦形劑等。因此，對(duì)于口服給藥，可使用含有各種賦形劑如檸檬酸、各種崩解劑如淀粉、藻酸和某些復(fù)合硅酸鹽以及粘合劑如蔗糖、明膠和阿拉伯膠的片劑。另外，為壓片目的，潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石通常是有用的。類似類型的固體組合物也可以軟和硬填充明膠膠囊的形式使用。因此，優(yōu)選的材料包括乳糖(lactose或milk sugar)和高分子量聚乙二醇。當(dāng)需要口服給予含水混懸劑或酏劑時(shí)，其中的活性化合物可與各種甜味劑或調(diào)味劑、著色劑或染料一起使用，而且，如果需要，還與乳化劑或助懸劑以及稀釋劑如水、乙醇、丙二醇、甘油及其組合一起使用。
制備各種具有特定量的活性化合物的藥物組合物的方法是已知的，或者對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。例如參見Remington’sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Ester，Pa.，15thEdition(1975)。
以下提供的實(shí)施例和制備進(jìn)一步闡述和例示本發(fā)明的化合物以及制備這些化合物的方法。應(yīng)理解，本發(fā)明的范圍不以任何方式局限于以下實(shí)施例和制備。在以下實(shí)施例中，除非另有說明，具有一個(gè)手性中心的分子以外消旋混合物的形式存在。除非另有說明，那些具有兩個(gè)或多個(gè)手性中心的分子則以非對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物的形式存在。單個(gè)的對(duì)映體/非對(duì)映異構(gòu)體可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法得到。
在本申請(qǐng)中公開的包括專利在內(nèi)的所有文章和參考文獻(xiàn)都引入本文作為參考。
通過以下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但是它們不是將本發(fā)明的范圍或?qū)嵸|(zhì)限于其中描述的具體方法。
原料和各種中間體可得自商業(yè)來源、由可商購(gòu)的有機(jī)化合物制備得到或者使用已知的合成方法制備。
以下是制備本發(fā)明的中間體的方法的代表性實(shí)例。
實(shí)施例實(shí)施例1 7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11a)
步驟A2，3，4-三氟-5-硝基-苯甲酸2在3升三頸圓底燒瓶中加入125mL H2SO4。添加發(fā)煙硝酸(8.4mL，199mmol)，并輕輕攪拌混合物。在90分鐘內(nèi)，按照每次5g的量添加2，3，4-三氟苯甲酸1(25g，142mmol)。將暗棕黃色溶液攪拌60分鐘，此時(shí)反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物傾入1升冰∶水混合物中，并用乙醚(3×600mL)萃取。干燥合并的有機(jī)萃取液(MgSO4)并減壓濃縮，得到黃色固體。將該固體懸浮在己烷中并攪拌30分鐘，之后過濾，得到29g(92％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為淡黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 220(M-1)。
步驟B4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸3在0℃下將氫氧化銨溶液(～30％水溶液)(35mL，271mmol)添加至2，3，4-三氟-5-硝基-苯甲酸2(15g，67.8mmol)在30mL水中的溶液內(nèi)，同時(shí)進(jìn)行攪拌。氫氧化銨添加完成后，將反應(yīng)混合物暖至室溫，同時(shí)進(jìn)行攪拌。2.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并小心添加濃鹽酸，直至反應(yīng)混合物的pH接近0。將反應(yīng)混合物用水(30mL)稀釋，并用乙醚(3×50mL)萃取。干燥合并的有機(jī)萃取液(MgSO4)并減壓濃縮，得到14g(95％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z217(M-1)。
步驟C4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4于0℃和氮?dú)夥障拢瑢MS重氮甲烷在己烷中的2M溶液(6.88mL，13.75mmol)添加至4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸3(2.00g，9.17mmol)在25mL 4∶1 THF∶MeOH內(nèi)的懸浮液中。添加完成后，使反應(yīng)混合物暖至室溫。0.5小時(shí)后，通過小心添加乙酸破壞過量的TMS重氮甲烷。然后減壓濃縮反應(yīng)物并真空干燥，得到1.95g(92％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 231(M-1)。
步驟D4-氨基-3-氟-5-硝基-2-o-甲苯基氨基-苯甲酸甲酯5a
將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4(12.0g，51.7mmol)懸浮在二甲苯(60mL)中，并添加鄰甲苯胺(55.2mL，517mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流，同時(shí)進(jìn)行攪拌。36小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙醚稀釋，并用10％鹽酸水溶液洗滌。用乙醚萃取含水洗滌液。將合并的有機(jī)萃取液減壓濃縮。將殘留物溶解在二氯甲烷中，并通過玻璃漏斗中的硅膠過濾，用二氯甲烷洗滌?；厥杖齻€(gè)部分。第一部分(2升)由HPLC證實(shí)接近純凈。第二部分(1升)和第三部分(1升)僅是部分純的。將第一部分減壓濃縮并用乙醚研磨，得到11.2g(68％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為嫩黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 318(M-1)。
步驟E7-氟-6-o-甲苯基氨基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7a將4-氨基-3-氟-5-硝基-2-o-甲苯基氨基-苯甲酸甲酯5a(1.57g，4.92mmol)、甲酸(25mL，26.5mmol)和20％ Pd(OH)2/C(1.57g，2.95mmol)在25mL EtOH中加熱至95℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并添加0.5g 20％ Pd(OH)2/C和10mL甲酸。將反應(yīng)混合物加熱至95℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并通過硅藻土(Celite)過濾，用EtOH洗滌。減壓濃縮濾液，直至沉淀出所希望的產(chǎn)物。過濾收集所希望的產(chǎn)物。再次濃縮濾液，直至沉淀出更多的所希望的產(chǎn)物。過濾收集產(chǎn)物。重復(fù)EtOH濃縮、產(chǎn)物過濾數(shù)次?；厥?.09g(74％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 300(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 298(M-1)。
步驟F7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8a在氮?dú)夥障拢瑢?-氟-6-o-甲苯基氨基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7a(2.00g，6.68mmol)懸浮在1∶1 THF∶MeOH混合物(60mL)中，并冷卻至-78℃。添加NBS(1.20g，6.75mmol)在1∶1 THF/MeOH(5mL)中的溶液，然后添加TsOH·H2O(1.9g，10.0mmol)的MeOH(5mL)溶液。30分鐘后，使反應(yīng)混合物暖至0℃，然后在1小時(shí)后暖至室溫。16小時(shí)后，添加更多的NBS(0.12g，0.67mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)。通過添加10％ Na2S2O4溶液而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。30分鐘后，將反應(yīng)混合物用水和乙酸乙酯稀釋，并分離各層。用乙酸乙酯萃取含水層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮。將回收的固體用二氯甲烷研磨，得到2.00g(79％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 380，378(M+1Br型)。
步驟G7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸10a將7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8a(63mg，0.167mmol)懸浮在MeOH(1.5mL)中，并添加20％ NaOH(400μl)。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并滴加1N HCl溶液，直至pH為2-3。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋，并分離各層。用鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到58mg(95％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 366，364(M+1Br型)；經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(-)m/z 364，362(M-1Br型)。
步驟H7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11a將7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸10a(48mg，0.132mmol)溶解在1∶1 THF∶二氯甲烷(1mL)中，并添加Hunig堿(0.23μL，1.32mmol)，然后添加PyBOP(82mg，0.158mmol)。幾分鐘后，添加環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽(20mg，0.158mmol)(WO0042022)。反應(yīng)完成后，使混合物在二氯甲烷和飽和NaHCO3溶液之間分配。分離各層，并用飽和NaHCO3和鹽水洗滌有機(jī)層。干燥有機(jī)層(Na2SO4)并減壓濃縮。通過FCC(用20∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫)進(jìn)行純化后，分離出25mg(45％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 435，433(M+1Br型)；經(jīng)檢測(cè)MS ESI(-)m/z 433，431(M-1Br型)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.02(s，1H)，7.28(s，1H)，7.43(d，1H)，7.07(dd，1H)，6.36(m，1H)，3.70(d，2H)，2.38(s，3H)，0.86(m，1H)，0.41(m，2H)，0.13(m，2H)；19F NMR(376MHz，CDCl3)-134.05(s)。
實(shí)施例2 7-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(27a)步驟A4-氨基-3-氟-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯26a將實(shí)施例1步驟C的產(chǎn)物4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4(23.48g，101.1mmol)懸浮在二甲苯(125mL)中，并添加苯胺(92mL，1011mmol)。將反應(yīng)混合物在125℃和氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，固體從溶液中沉淀出。過濾收集該固體，并用二甲苯然后用乙醚洗滌?；厥盏?2.22g(72.78mmol)黃色固體是純的所希望的產(chǎn)物。減壓濃縮濾液，重新溶解在二氯甲烷中，并用二氯甲烷洗脫沖洗通過硅膠短柱(plug)。減壓濃縮所希望的部分，得到棕色固體，用乙醚研磨之，得到5.47g(17.91mmol)黃色固體，其是純的所希望的產(chǎn)物。合并產(chǎn)物的產(chǎn)量為27.69g(90％)。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 304(M-1)。
步驟B7-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯27a在40℃和氮?dú)夥障拢瑢?-氨基-3-氟-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯26a(16.70g，54.71mmol)、甲酸(250mL，6.63mol)和20％Pd(OH)2/C(9.00g，16.91mmol)在乙醇(250mL)中攪拌2小時(shí)，然后在95℃下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并通過硅藻土過濾，用乙酸乙酯洗滌。將濾液減壓濃縮，得到黃色固體。用乙醚研磨該固體，得到13.47g(86％)所希望的產(chǎn)物，其為褐色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 286(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 284(M-1)。
實(shí)施例3 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8b)步驟A6-(4-溴-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯28a將7-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯27a(4.99g，17.51mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(275mL)中。在室溫和氮?dú)夥障绿砑庸腆wN-溴代琥珀酰亞胺(3.15g，17.70mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物。30分鐘后，通過添加飽和亞硫酸氫鈉水溶液而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。然后將反應(yīng)混合物傾入分液漏斗中，用水和乙酸乙酯稀釋，并分離各層。用乙酸乙酯萃取含水層。將合并的有機(jī)萃取液用水洗滌3次，用鹽水洗滌1次，然后干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到6.38g(100％)純的所希望的產(chǎn)物，其為褐色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 364，366(M+Br型)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b將6-(4-溴-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯28a(6.38g，17.51mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(275mL)。在室溫和氮?dú)夥障绿砑庸腆wN-氯代琥珀酰亞胺(2.36g，17.70mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物，直至反應(yīng)完全(5-6天)。通過添加飽和亞硫酸氫鈉水溶液而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，得到懸浮液。過濾收集所得固體，用水和乙醚洗滌并減壓干燥，得到6.07g(87％)純的所希望的產(chǎn)物，其為米黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 398，400(M+Br型)。
實(shí)施例4 6-(2，4-二氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8c)在氮?dú)夥障?，?-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯27a(1.00g，3.51mmol)懸浮在1∶1四氫呋喃/甲醇(20mL)中，并冷卻至-78℃。添加TsOH·H2O(3.00g，10.50mmol)，然后添加N-氯琥珀酰亞胺(0.95g，7.08mmol)。10分鐘后，使反應(yīng)混合物暖至0℃，得到溶液，然后在30分鐘后暖至室溫。攪拌16小時(shí)后，反應(yīng)完全。通過添加飽和亞硫酸氫鈉水溶液而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋，并分離各層。用乙酸乙酯萃取含水層。將合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。將所得固體殘留物用二氯甲烷研磨，得到白色固體，過濾收集之，得到1.05g(85％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 355，357(M+Cl型)。
實(shí)施例5 6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8d)步驟A4-氨基-3-氟-2-(2-氟-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲酯5b將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4(1.50g，6.46mmol)懸浮在二甲苯(7.5mL)中，并添加2-氟-苯胺(6.24mL，64.6mmol)。在140℃和氮?dú)夥障聰嚢璺磻?yīng)混合物。攪拌6天后，反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用二氯甲烷稀釋，并用二氯甲烷(1L)洗脫過濾通過硅膠短柱，得到橙色濾液。將濾液濃縮至干，然后用乙醚研磨，得到嫩黃色固體。重復(fù)進(jìn)行研磨。收集黃色固體，得到1.08g(52％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 322(M-1)。
步驟B6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8d通過已描述的還原/環(huán)化和溴化步驟轉(zhuǎn)化4-氨基-3-氟-2-(2-氟-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲酯5b，得到所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 382，384(M+，Br型)。
實(shí)施例6 6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8e)通過已描述的溴化步驟轉(zhuǎn)化7-氟-6-o-甲苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7a，不同之處在于使用N-氯代琥珀酰亞胺代替N-溴代琥珀酰亞胺，得到所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 334，336(M+，Cl型)。
實(shí)施例7 7-氟-6-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8f)步驟A4-氨基-3-氟-2-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲酯12a將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4(0.50g，2.15mmol)懸浮在二甲苯(3mL)中，并添加2-甲基-4-三氟甲氧基-苯胺(1.00g，5.23mmol)。在140℃和氮?dú)夥障聰嚢璺磻?yīng)混合物。攪拌7天后，反應(yīng)物是原料和產(chǎn)物的混合物。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物傾入分液漏斗中，添加乙醚和10％鹽酸水溶液，并分離各層。用三份乙醚萃取水相。干燥合并的乙醚層(MgSO4)并減壓濃縮。將殘留物重新溶解在二氯甲烷中，并用二氯甲烷洗脫沖洗通過硅膠短柱。減壓濃縮濾液，得到嫩黃色固體。用乙醚洗滌該固體，減壓濃縮濾液，并通過FCC(用100％二氯甲烷洗脫)進(jìn)一步純化殘留物，得到0.39g(45％)所希望的純產(chǎn)物，其為黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 402(M-1)。
步驟B7-氟-6-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8f通過已描述的還原/環(huán)化步驟轉(zhuǎn)化4-氨基-3-氟-2-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲酯12a，得到所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 384(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 382(M-1)。
實(shí)施例8羥胺的制備用于合成本發(fā)明的化合物的羥胺可如下制備。
(i)O-(2-甲氧基-乙基)-羥胺步驟A2-(2-甲氧基-乙氧基)-異吲哚-1，3-二酮將DEAD(10mL，63mmol)添加至2-甲氧基乙醇(5.0mL，63mmol)、PPh3(17g，63mmol)和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺(10g，62mmol)在THF(170mL)中的混合物內(nèi)。將所得橙色溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，過濾出固體并用CHCl3洗滌。再次濃縮濾液，過濾出固體并用CHCl3洗滌。重復(fù)該過程，直至沒有沉淀形成。最終的淡黃色固體用乙醇重結(jié)晶，得到所希望的產(chǎn)物(7.7g，55％)。
步驟BO-(2-甲氧基-乙基)-羥胺在室溫下，向2-(2-甲氧基-乙氧基)-異吲哚-1，3-二酮(7.7g，35mmol)在CH2Cl2(30mL)中的溶液內(nèi)添加甲基肼(2.0mL，36mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。過濾出白色固體。在減壓下小心地蒸餾出溶劑，然后真空蒸餾濃縮物(20托，57-58℃)，得到所希望的產(chǎn)物(2.2g，68％)。
(ii)使用合適的醇如上所述制備以下羥胺。異吲哚-1，3-二酮中間體通過閃蒸色譜法純化。
O-(2-異丁氧基-乙基)-羥胺不純化直接使用。
O-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-羥胺不純化直接使用。
O-(2-哌啶-1-基-乙基)-羥胺通過Kugelrohr蒸餾(腔室溫度140℃，1托)純化。
O-(2-甲基硫烷基-乙基)-羥胺通過真空蒸餾(76-78℃，20托)純化。
O-(2-苯基硫烷基-乙基)-羥胺不純化直接使用。
O-(3-甲基硫烷基-丙基)-羥胺不純化直接使用。
(iii)由合適的異吲哚-1，3-二酮，通過用臭氧進(jìn)行氧化(Tetrahedron Lett.1981，22，1287)，然后如上所述脫保護(hù)而制備以下羥胺。
O-(2-甲磺?；?乙基)-羥胺不純化直接使用。
O-(2-苯磺?；?乙基)-羥胺通過閃蒸色譜法(1％ MeOH，在CH2Cl2中)純化。
O-(3-甲磺?；?丙基)-羥胺不純化直接使用。
由PhSCH2CH2CH2Br和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺，通過WO 00/18790中的專利方法，然后如上所述脫保護(hù)而制備O-(3-苯基硫烷基-丙基)-羥胺，且不純化直接使用。
由以上異吲哚-1，3-二酮，通過用臭氧進(jìn)行的其氧化，然后如上所述脫保護(hù)，并通過閃蒸色譜法(100％ CH2Cl2至2％ MeOH，在CH2Cl2中)純化，制備O-(3-苯磺?；?丙基)-羥胺。
(v)O-(2-嗎啉-4-基-乙基)-羥胺二鹽酸鹽步驟AO-(2-溴-乙基)-羥胺氫溴酸鹽如WO 00/18790所述，由1，2-二溴乙烷和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺制備2-(2-溴-乙氧基)-異吲哚-1，3-二酮，然后進(jìn)行J.Org.Chem.1963，28，1604中描述的方法，得到所希望的產(chǎn)物。
步驟B(2-溴-乙氧基)-氨基甲酸叔丁酯在室溫下，向O-(2-溴-乙基)-羥胺氫溴酸鹽(100mg，0.45mmol)和二碳酸二叔丁酯(110mg，0.49mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液內(nèi)添加Et3N(0.08mL，0.56mmol)。將所得懸浮液在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用1N HCl水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，濃縮，并通過閃蒸色譜法(100％ CH2Cl2)純化，得到所希望的產(chǎn)物(81mg，75％)。
步驟C(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-氨基甲酸叔丁酯在室溫下，向(2-溴-乙氧基)-氨基甲酸叔丁酯(252mg，1.05mmol)在DMF(2mL)中的溶液內(nèi)添加嗎啉(0.14mL，1.6mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃下攪拌7小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用水洗滌。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，濃縮，并通過閃蒸色譜法(2％ MeOH，在CH2Cl2)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(118mg，46％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 247。
步驟DO-(2-嗎啉-4-基-乙基)-羥胺二鹽酸鹽在室溫下，向(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-氨基甲酸叔丁酯(118mg，0.48mmol)在MeOH(1mL)中的溶液內(nèi)添加4M鹽酸的二噁烷溶液(2.4mL，9.60mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。添加額外的HCl(2.4mL)然后攪拌4小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，得到黃色固體(82mg，78％)。
(vi)由合適的烷基鹵和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺，通過J.Heterocyclic Chem.2000，37，827-830中描述的方法制備以下羥胺的異吲哚-1，3-二酮中間體。將異吲哚-1，3-二酮通過如上所述的步驟脫保護(hù)O-丁-3-烯基-羥胺、O-(四氫呋喃-2-基甲基)-羥胺、O-(3-甲氧基-丙基)-羥胺和O-(3-芐氧基-丙基)-羥胺。
(vii)如WO 02/06213中所述制備以下羥胺O-(2-乙烯氧基-乙基)-羥胺、2-氨基氧基-2-甲基-丙烷-1-醇、1-氨基氧基-2-甲基-丙烷-2-醇、3-氨基氧基-丙烷-1-醇和(2-氨基氧基-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯。
實(shí)施例9 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11b)步驟A4-氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯5b將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4(2.00g，8.62mmol)懸浮在二甲苯(15mL)中，并添加2-氯苯胺(9.06mL，86.15mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至140℃。6天后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯稀釋。將反應(yīng)混合物用水、10％ HCl溶液和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(MgSO4)并減壓濃縮。將粗產(chǎn)物用乙醚研磨兩次，得到0.35g(12％)純的所希望的產(chǎn)物，其為棕色固體。
步驟B4，5-二氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-苯甲酸甲酯6a將4-氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯5b(0.30g，0.88mmol)懸浮在AcOH(5mL)中，并添加鋅粉(0.29g，4.42mmol)。15分鐘后，反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋并通過硅藻土過濾。將濾液用水、飽和NaHCO3、10％ K2CO3和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(MgSO4)并減壓濃縮，得到0.13g(48％)純的所希望的產(chǎn)物，其為發(fā)白的棕色泡沫。
步驟C6-(2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7b將4，5-二氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-苯甲酸甲酯6a(0.125g，0.404mmol)懸浮在EtOH(2mL)中，并添加甲脒乙酸鹽(63mg，0.605mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至回流。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯稀釋。將有機(jī)層用水、飽和NaHCO3、10％ K2CO3和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(MgSO4)并減壓濃縮，得到0.109g(85％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b在氮?dú)夥障拢瑢?-(2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7b(55mg，0.172mmol)溶解在1∶1 THF∶MeOH(2mL)中，并冷卻至-78℃。添加TsOH·H2O(49mg，0.258mmol)，然后添加NBS(31mg，0.174mmol)。10分鐘后，使反應(yīng)混合物暖至0℃，并在2小時(shí)后暖至室溫。16小時(shí)后，通過添加10％ Na2S2O3終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，并用乙酸乙酯和水稀釋。分離各層，并用乙酸乙酯萃取含水層。干燥合并的有機(jī)萃取液(MgSO4)并減壓濃縮。將粗產(chǎn)物用二氯甲烷研磨，得到58mg(85％)純的所希望的產(chǎn)物，其為褐色固體。
步驟E6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸10b將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b(58mg，0.146mmol)懸浮在EtOH(2mL)中，并添加1mL 2N NaOH。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯、水和10％ HCl溶液稀釋。分離各層，并用鹽水洗滌有機(jī)層。干燥有機(jī)層(MgSO4)并減壓濃縮。用MeOH研磨，得到22mg(39％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟F6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11b)將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸10b(22mg，0.057mmol)溶解在DMF(1mL)中，并添加HOBt(9mg，0.062mmol)，然后添加三乙胺(18μL，0.132mmol)。添加環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽(8mg，0.062mmol)，然后添加EDCl(14mg，0.074mmol)。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋，并分離各層。將有機(jī)層用飽和NH4Cl、鹽水、飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(MgSO4)并減壓濃縮，得到23mg(89％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 455，453(M+Br型)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 453，451(M-Br型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.69(寬s，1H)，8.43(s，1H)，7.62(d，1H)，7.28(dd，1H)，6.42(m，1H)，3.63(d，2H)，1.03(m，1H)，0.48(m，2H)，0.19(m，2H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.95(s)。
通過類似于實(shí)施例1和實(shí)施例9中描述的方法，使用合適的羧酸和合適的羥胺制備以下化合物 實(shí)施例10 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(29c)步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯9a和6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯在75℃下，將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b(150mg，0.38mmol)、碘甲烷(28μL，0.45mmol)和碳酸鉀(78mg，0.56mmol)在二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸鉀水溶液(2×)、鹽水洗滌，并干燥(Na2SO4)。進(jìn)行閃蒸色譜(20∶1二氯甲烷/乙酸乙酯)，得到56mg(36％)流動(dòng)性更強(qiáng)的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯9a，其為白色固體。19F NMR(376MHz，CD3OD)-133.5(s)。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 412，414(M+，Br型)。還分離出54mg(35％)6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯，其為白色固體。19F NMR(376MHz，CD3OD)-139.9(s)。經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 412，414(M+，Br型)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10c將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯9a(56mg，0.14mmol)溶解在2∶1 THF/水(3mL)中，并添加NaOH(0.55mL，1.0M水溶液，0.55mmol)。攪拌2小時(shí)后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使反應(yīng)物減少至初始體積的四分之一，并將殘留物用水稀釋至50mL。通過添加1.0M鹽酸水溶液而將該水溶液酸化至pH2，用1∶1四氫呋喃/乙酸乙酯(3×)萃取，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到43mg(79％)純的羧酸，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 397，398(M+，Br型)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺29a將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10c(2.00g，5.0mmol)、O-(2-乙烯氧基-乙基)-羥胺(0.776g，7.5mmol)、HOBt(0.88g，6.5mmol)、三乙胺(1.61mL，2.3mmol)和EDCI(1.3g，6.5mmol)溶解在二甲基甲酰胺(52mL)中，并在室溫下攪拌48小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用水(3×)、飽和碳酸鉀(2×)、飽和氯化銨(2×)、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到灰白色固體。用乙醚研磨該固體，得到2.18g(90％)所希望的產(chǎn)物，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 483，485(M+Br型)。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺29c將鹽酸(14mL，1.0M水溶液，14mmol)添加至6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺29a(2.18g，4.50mmol)在乙醇(50mL)中的懸浮液內(nèi)，并將反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將反應(yīng)混合物濃縮至干，并使固體在3∶1乙酸乙酯/四氫呋喃和飽和碳酸鉀之間分配。用3∶1乙酸乙酯/四氫呋喃(3×)萃取水相，干燥合并的有機(jī)物(Na2SO4)并濃縮，得到2.11g(100％)6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 457，459(M+，Br型)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.26(s，1H)，7.78(s，1H)，7.57(d，1H)，7.24(dd，1H)，6.40(dd，1H)，3.86(s，3H)，3.79(m，2H)，3.49(m，2H)。19F NMR(376MHz，MeOH-d4)-133.68(s)。
實(shí)施例11通過類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲酯8b以及合適的烷化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物





實(shí)施例12 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2，3-二羥基-丙氧基)-酰胺(29hhh)向6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸烯丙氧基-酰胺29tt(20mg，0.04mmol)在0.50mL 4∶1四氫呋喃/水中的溶液內(nèi)添加OsO4(41μL，在t-BuOH中的0.054M溶液，0.002mmol)，然后添加NMO(7mg，0.06mmol)。將溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，之后HPLC分析顯示完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。然后將該溶液與飽和NaHSO3一起攪拌，并用乙酸乙酯稀釋。干燥有機(jī)相(Na2SO4)。通過FCC(DCM->20∶1 DCM/MeOH)進(jìn)行純化，得到16mg所希望的產(chǎn)物，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 487，489(M+，Br型)。
實(shí)施例13 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(3，4-二羥基-丁氧基)-酰胺(29iii)對(duì)6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸丁-3-烯氧基-酰胺29uu進(jìn)行如實(shí)施例12中描述的二羥基化方法。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 501，503(M+Br型)。
實(shí)施例14 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-甲基氨基-乙氧基)-酰胺TFA鹽(29jjj)由(2-{[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯29ww，通過在二氯甲烷中進(jìn)行三氟乙酸脫保護(hù)而制備。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 470，472(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(s，1H)，7.74(s，1H)，7.51(d，1H)，7.19(dd，1H)，6.39(dd，1H)，4.11(m，2H)，3.97(s，3H)，3.12(m，2H)，2.72(s，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-77.41(s，3F)，-134.79(s，1F)。
實(shí)施例15通過類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲酯8a以及合適的烷化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物 實(shí)施例16通過類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲酯8e以及合適的烷化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物 實(shí)施例17通過類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲酯8c以及合適的烷化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物 實(shí)施例18通過類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲酯8d以及合適的烷化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物
實(shí)施例19 6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁基]-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11o)步驟A6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯9b在氮?dú)夥障?，?-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8a(0.915g，2.419mmol)懸浮在DMF(18mL)中。添加溴戊烯(0.430mL，3.629mmol)和K2CO3(0.502g，3.629mmol)，并將反應(yīng)混合物加熱暖至80℃。1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并傾入100mL 1∶1乙酸乙酯∶乙醚中。將有機(jī)層用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法分離N3和N1烷基化產(chǎn)物，用20∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫。通過進(jìn)行兩次色譜分離而得到完全分離的異構(gòu)體。較高Rf產(chǎn)物是N3產(chǎn)物9b，而較低Rf產(chǎn)物是N1產(chǎn)物。回收得到的N3產(chǎn)物9b為0.415g(38％)經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 448，446(M+1Br型)。回收得到的N1產(chǎn)物為0.486g(45％)經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 448，446(M+1Br型)。
步驟B6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10d將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯9b溶解在1∶1 THF∶MeOH(10mL)中，并添加1N NaOH溶液(2.3mL)。5小時(shí)后，減壓除去有機(jī)溶劑，并將殘留物用水和100mL1∶1 THF∶乙酸乙酯稀釋。分離各層，并用乙酸乙酯萃取含水層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮，得到0.39g(100％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為淺黃色固體。
步驟C6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11f將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10d(0.390g，0.902mmol)溶解在1∶1 THF∶二氯甲烷(6mL)中，并添加Hunig堿(0.346mL，1.985mmol)，然后添加PyBOP(0.563g，1.083mmol)。10分鐘后，添加環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽(0.134g，1.083mmol)。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用0.1N HCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(Na2SO4)并減壓濃縮。通過FCC純化粗的黃色殘留物，用乙酸乙酯洗脫，得到0.315g(70％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 503，501(M+1Br型)。
步驟D6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3-(4，5-二羥基-戊基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11m將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11f(0.307g，0.612mmol)溶解在4∶1 THF∶水(8mL)中，并添加1.134mL(0.061mmol)OsO4在t-BuOH中的0.054M溶液，然后添加NMO(0.093g，0.796mmol)。5小時(shí)后，通過添加10％NaHS2O3溶液終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。10分鐘后，將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，用乙酸乙酯和二氯甲烷洗滌。將濾液用乙酸乙酯稀釋，并用0.01N HCl和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(Na2SO4)并減壓濃縮。通過FCC純化粗產(chǎn)物，用9∶1乙酸乙酯∶MeOH洗脫，得到0.244g(74％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟E6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(4-氧代-丁基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11n向6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3-(4，5-二羥基-戊基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11m(0.244g，0.456mmol)、THF(5mL)和pH7磷酸鹽緩沖液(3mL)的混合物中添加高碘酸鈉(0.195g，0.911mmol)。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用NaHCO3和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(Na2SO4)并減壓濃縮，得到橙色固體。通過FCC進(jìn)行純化，用4∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫，得到0.189g(82％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 505，503(M+1Br型)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 503，501(M-1Br型)。
步驟F6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁基]-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11o將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(4-氧代-丁基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11n(15mg，0.030mmol)溶解在MeCN(500μL)中，并添加甲基哌嗪(10μL，0.089mmol)，然后添加AcOH(5μL，0.089mmol)。5分鐘后，添加四甲基三乙酰氧基硼氫化銨(12mg，0.045mmol)。5分鐘后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用NaHCO3和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(Na2SO4)并減壓濃縮，得到12mg(69％)純的所希望的產(chǎn)物，其為白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 587，585(M-1Br型)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.98(s，1H)，7.30(d，1H)，7.08(dd，1H)，6.30(d，1H)，6.1(寬單峰，1H)，4.26(t，2H)，3.64(d，2H)，3.37(s，1H)，2.45(寬，8H)，2.41(s，3H)，2.38(t，2H)，2.28(s，3H)，1.95(quin，2H)，1.55(quin，2H)，0.98(m，1H)，0.50(qt，2H)，0.22(qt，2H)。
實(shí)施例20通過類似于實(shí)施例19中描述的方法，在還原胺化(步驟F)中使用合適的烯基取代的苯并咪唑以及合適的胺，制備以下化合物

實(shí)施例21 6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3-[4-(1，1-二氧代-1λ6-硫代嗎啉-4-基)-丁基]-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18cc)向6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(4-硫代嗎啉-4-基-丁基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺18l(8mg，0.014mmol)在1∶1∶1水/丙酮/MeOH(1mL)中的溶液內(nèi)添加NMO(1.6mg，0.014mmol)和四氧化鋨(250μL，在t-BuOH中的0.054M溶液，0.014mmol)。攪拌24小時(shí)后，將溶液用飽和硫代硫酸鈉溶液稀釋，攪拌10分鐘，并用乙酸乙酯稀釋。將溶液用鹽水(2×)洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到灰色固體。進(jìn)行FCC(10∶1二氯甲烷/甲醇)，得到6mg(71％)所希望的產(chǎn)物，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 622，624(M+，Br型)。
實(shí)施例22 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁基]-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18dd)在85℃下，將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(4-氯-丁基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺18ee(10mg，0.018mmol)、碘化鈉(14mg，0.092mmol)以及1-甲基-哌嗪(10μL，0.092mmol)的溶液攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用水洗滌3次，用飽和碳酸鉀水溶液洗滌2次，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到黃色油。進(jìn)行閃蒸柱色譜(1∶1二氯甲烷/甲醇，接著甲醇，接著20∶1甲醇/三乙胺)，得到純凈的產(chǎn)物(8mg，72％)，其為灰白色泡沫。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z607，609(M+，Br型)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.37(s，1H)，7.71(s，1H)，7.49(d，1H)，7.18(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.38(t，2H)，3.62(d，2H)，2.45(寬，8H)，2.41(t，2H)，2.28(s，3H)，1.96(m，2H)，1.54(m，2H)，1.07(m，1H)，0.50(d，2H)，0.22(d，2H)。
實(shí)施例23通過類似于實(shí)施例22中描述的方法，使用合適的胺和伯烷基氯制備以下化合物

實(shí)施例24 6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-噁唑-5-基甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18ggg)將6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(2-氧代-乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(0.020g，0.046mmol)溶解在甲醇(2mL)中。添加碳酸鉀(0.013g，0.093mmol)和1-異氰基甲磺?；?4-甲基-苯(0.010g，0.051mmol)。將反應(yīng)混合物在回流和氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)，然后減壓濃縮。將殘留物溶解在乙酸乙酯中，傾入分液漏斗中，并用水和鹽水洗滌。重新用乙酸乙酯(2×)萃取合并的含水層。干燥合并的乙酸乙酯層(Na2SO4)并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法(用15∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化所得固體，得到0.011g(50％)所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 470，472(M+，Cl型)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.51(br s，1H)，8.07(s，1H)，8.02(s，1H)，7.89(s，1H)，7.23(s，1H)，7.15(d，1H)，6.92(dd，1H)，6.31(d，1H)，6.11(br s，1H)，5.45(s，2H)，3.62(d，2H)，2.40(s，3H)，0.87(m，1H)，0.49(m，2H)，0.20(m，2H)。19F NMR(376MHz，CDCl3)-134.54(s)。
實(shí)施例25 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18hhh)步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-叔丁氧羰基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯在氮?dú)夥障?，?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b(0.50g，1.25mmol)溶解在DMF(8mL)，并添加K2CO3(0.26g，1.88mmol)，然后添加丙烯酸叔丁酯(1.84mL，12.54mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至90℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。4小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯稀釋。將有機(jī)層用水(3×)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法進(jìn)行純化，用19∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫，得到0.41g(62％)所希望的產(chǎn)物。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-羧基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯TFA鹽將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-叔丁氧羰基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(0.050g，0.095mmol)溶解在二氯甲烷(0.5mL)中，并添加TFA(0.5mL)。45分鐘后，將反應(yīng)混合物濃縮至干，得到0.49g(88％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 472，470(M+Br型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.51(s，1H)，8.20(s，1H)，8.13(s，1H)，7.64(d，1H)，7.29(dd，1H)，6.45(dd，1H)，4.55(t，2H)，2.89(t，2H)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯在室溫下，向6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-羧基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(60mg，0.13mmol)在DMF(1.8mL)中的溶液內(nèi)添加HOBt-H2O(24mg，0.16mmol)、Et3N(0.043mL，0.31mmol)、吡咯烷(0.011mL，0.13mmol)和EDCl(34mg，0.18mmol)。將所得黃色溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc和水稀釋，用飽和NH4Cl水溶液、鹽水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過閃蒸色譜法純化之(3％ MeOH，在CH2Cl2中)，得到45mg(67％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 523，525(M+，Br型)。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸在室溫下，向6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(41mg，0.079mmol)在THF/H2O(1.5mL/0.75mL)中的溶液內(nèi)添加0.20mL(0.20mmol)1N LiOH水溶液。將所得溶液攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用1N HCl水溶液酸化(pH約2-3)，并用EtOAc稀釋。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物(42mg)，其不進(jìn)一步純化直接使用。
步驟E6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺18hhh由6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸和O-環(huán)丙基甲基-羥胺鹽酸鹽，通過步驟A中描述的標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)步驟制備標(biāo)題化合物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 578，580(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.66(s，1H)，8.42(s，1H)，8.01(s，1H)，7.76(s，1H)，7.62(s，1H)，7.28(d，1H)，6.39(890m，1H)，4.52(t，2H)，3.66(d，2H)，3.33(t，2H)，3.28(t，2H)，2.89(t，2H)，1.83(m，2H)，1.76(m，2H)，1.06(m，1H)，0.49(m，2H)，0.22(m，2H)；19FNMR(376MHz，DMSO-d6)-132.94(s，1F)。
實(shí)施例26通過類似于實(shí)施例25中描述的方法，使用甲酯8b以及合適的胺制備以下化合物
實(shí)施例27 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(11p)步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯11q將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b(0.25g，0.63mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中。添加2-溴甲基-四氫吡喃(0.34g，1.88mmol)和碳酸鉀(0.26g，1.88mmol)，并在60℃和氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入分液漏斗中，用乙酸乙酯和水稀釋，并分離各層。用水和鹽水洗滌乙酸乙酯層，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。用乙醚研磨所得固體殘留物，得到淡黃色固體(通過NMR確定為N3區(qū)域異構(gòu)體)和黃色濾液(通過NMR確定為N1和N3區(qū)域異構(gòu)體的混合物)。收集固體并用乙醚洗滌，得到0.12g(37％)純的所希望的N3區(qū)域異構(gòu)體產(chǎn)物，其為淡黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 496，498(M+，Br型)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸11r將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯11q懸浮在4∶1四氫呋喃/水(2.5mL)中，并添加1MLiOH水溶液(2.5mL)。在室溫下攪拌16小時(shí)后，反應(yīng)混合物為均相的，而且反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用水稀釋，并滴加2MHCl水溶液，直至該溶液的pH為1-2，此時(shí)變?yōu)閼腋∫?。將反?yīng)混合物傾入分液漏斗中，用乙酸乙酯/四氫呋喃和水稀釋，并分離各層。用乙酸乙酯萃取含水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到0.11g(100％)純的所希望的產(chǎn)物，其為白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 482，484(M+，Br型)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺11s將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸11r(0.11g，0.23mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中。添加HOBT(0.037g，0.27mmol)和三乙胺(0.094mL，0.68mmol)。然后在室溫和氮?dú)夥障绿砑覱-(2-乙烯氧基-乙基)-羥胺(0.028g，0.27mmol)和EDCl(0.056g，0.29mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物，直至HPLC顯示反應(yīng)完全(2-3天)。將反應(yīng)混合物傾入分液漏斗中，用乙酸乙酯和水稀釋，并分離各層。依次用飽和NH4Cl水溶液(2×)、鹽水(1×)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2×)、水(1×)和鹽水(1×)洗滌乙酸乙酯層，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。通過FCC(用15∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化所得固體，得到0.039g(79％)純的所希望的產(chǎn)物，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 567，569(M+，Br型)。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺11p將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺11s(0.039g，0.068mmol)溶解在乙醇(2mL)中，并添加2M HCl水溶液(200μL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物用水稀釋，然后用2M NaOH水溶液(約200μL)中和至pH7，并減壓濃縮。在分液漏斗中，使殘留物在乙酸乙酯和鹽水之間分配，并分離各層。干燥乙酸乙酯層(Na2SO4)并減壓濃縮，得到0.034g(91％)純的所希望的產(chǎn)物，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 541，543(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.29(s，1H)，7.75(s，1H)，7.49(d，1H)，7.18(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.40(dd，ABX型的A，1H)，4.28(dd，ABX型的B，1H)，3.92(m，ABX型的X，1H)，3.66(t，2H)，3.35(m，1H)，1.89(m，1H)，1.76(m，1H)，2.28(s，3H)，1.54(m，3H)，1.30(m，1H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)-134.87(s)。
實(shí)施例28通過類似于實(shí)施例27中描述的方法，使用合適的甲酯和烷化劑(步驟A)以及合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物
實(shí)施例29 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11bb)步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯11cc在氮?dú)夥障?，?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b(1.55g，3.89mmol)溶解在15mL DMF中。添加K2CO3(0.70g，5.06mmol)，然后添加甲基乙烯基砜(0.41mL，4.67mmol)。在室溫下攪拌16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋。分離各層，并用水(3×)和鹽水洗滌有機(jī)層。用乙酸乙酯萃取合并的含水洗滌液。干燥合并的有機(jī)萃取液(MgSO4)并減壓濃縮。通過將殘留物溶解在二氯甲烷中并用乙醚沉淀，重復(fù)數(shù)次而進(jìn)行純化，得到1.16g(59％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體MS APCI(+)m/z 506，504(M+Br型)和400，398(M-甲基乙基砜Br型)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11bb對(duì)6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯11cc進(jìn)行如上所述的方法，得到6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 561，559(M+Br型)和MS APCI(-)m/z559，557(M-Br型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.75(s，1H)，8.47(s，1H)，8.04(s，1H)，7.77(s，1H)，7.62(d，1H)，7.28(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.78(t，2H)，3.82(t，2H)，3.62(d，2H)，3.07(s，3H)，1.02(m，1H)，0.49(m，2H)，0.21(m，2H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6-132.66(s)。
實(shí)施例30使用合適的甲酯和Michael受體以及如上所述的方法類似地制備以下化合物
實(shí)施例31 [6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-甲基-苯基)-胺(24a)步驟A6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20a將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8a(0.051g，0.135mmol)懸浮在EtOH(5mL)中，并添加水合肼(0.118g，2.023mmol)。將反應(yīng)混合物在回流下加熱16小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物并通過FCC進(jìn)行純化，用97∶3乙酸乙酯∶MeOH洗脫，得到0.041g(81％)純凈的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 378，380(M+Br型)。
步驟B[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-甲基-苯基)-胺24a將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20a(0.041g，0.109mmol)懸浮在1，4-二噁烷(1.5mL)中，并添加36μL溴化氰在二氯甲烷中的3M溶液。然后添加NaHCO3(9mg，0.109mmol)在水(1.5mL)中的溶液。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用水和鹽水稀釋，并用THF萃取。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮。通過FCC進(jìn)行純化，用98∶2乙酸乙酯∶MeOH洗脫，得到24mg(55％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 403，405(M+Br型)；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.97(s，1H)，8.42(s，1H)，7.94(s，1H)，7.74(s，1H)，7.36(s，2H)，7.33(d，1H)，7.15(d，1H)，6.40(bs，1H)，2.34(s，3H)。
實(shí)施例32 [6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-氯-2-甲基-苯基)-胺(24b)如實(shí)施例31所述，由6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8e起始，制備[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-氯-2-甲基-苯基)-胺24b。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z359，361(M+Cl型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.42(s，1H)，8.00(bs，1H)，7.78(bs，1H)，7.48(s，2H)，7.22(s，1H)，7.04(d，1H)，6.48(bs，1H)，2.37(s，3H)。
實(shí)施例33 噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-氯-苯基)-胺(24c)如實(shí)施例31所述，由6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b起始，制備[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-氯-苯基)-胺24c。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 425，423(M+Br型)和MS APCI(-)m/z 423，421(M-Br型)。
實(shí)施例34 6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼(20b)如實(shí)施例31步驟A所述，由6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8e起始，制備6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 334，336(M+Cl型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.09(bs，1H)，9.98(s，1H)，8.40(s，1H)，8.17(bs，1H)，7.64(bs，1H)，7.20(s，1H)，7.03(d，1H)，6.41(bs，1H)，4.49(s，2H)，2.23(s，3H)。
實(shí)施例35 5-[6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-[1，3，4]噁二唑-2-醇(22a)
將6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b(0.050g，0.150mmol)懸浮在PhMe(2mL)中，并添加20％光氣在PhMe中的溶液(0.24mL，0.45mmol)。將反應(yīng)混合物在回流和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，然后冷卻至室溫。通過添加THF和10％HCl的1∶1混合物(20mL)而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，用THF(3×)萃取含水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到54mg(99％)所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 360，362(M+Cl型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.64(s，1H)，8.83(s，1H)，7.88(s，1H)，7.30(s，1H)，7.20(d，1H)，7.00(dd，1H)，6.38(dd，1H)，2.30(s，3H)。
實(shí)施例36 (4-氯-2-甲基-苯基)-(4-氟-6-[1，3，4]噁二唑-2-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺(21a)將6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b(0.048g，0.144mmol)懸浮在3mL無水EtOH中，并添加HC(OEt)3(0.60mL，3.54mmol)，然后添加催化劑pTsOH·H2O。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法(97∶3乙酸乙酯∶MeOH)進(jìn)行純化，得到36mg(73％)所希望的產(chǎn)物，其為淺黃色固體。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 344，346(M+Cl型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.10(bs，1H)，9.39(s，1H)，8.49(s，1H)，8.10(bs，1H)，7.78(bs，1H)，7.20(d，1H)，7.00(dd，1H)，6.41(bs，1H)，2.18(s，3H)。
實(shí)施例37 5-[6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-[1，3，4]噁二唑-2-硫醇(23a)在氮?dú)夥障?，?-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b(0.050g，0.150mmol)懸浮在3mL無水EtOH中，并冷卻至0℃。添加CS2(26mg，0.346mmol)，然后添加KOH粉末(8mg，0.150mmol)。在0℃下攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物加熱至回流。3.5小時(shí)后，通過添加水，然后添加乙酸乙酯和1N HCl而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。分離各層，用乙酸乙酯萃取含水層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮，得到所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 376，378(M+Cl型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.51(s，1H)，7.92(s，1H)，7.19(s，1H)，7.12(s，1H)，6.98(d，1H)，6.29(d，1H)，2.28(s，3H)。
實(shí)施例38 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酰胺(11oo)將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸10c(0.029g，0.076mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(1.1mL)中。在室溫下，向反應(yīng)混合物中順序添加HOBT(0.016g，0.10mmol)、三乙胺(0.028mL，0.20mmol)、甲胺(0.059mL，0.12mmol，在四氫呋喃中的2M溶液)以及EDCl(0.019g，0.10mmol)。將溶液在室溫和氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入分液漏斗中，用乙酸乙酯和水稀釋，并分離各層。依次用飽和NH4Cl水溶液(2×)、鹽水(1×)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2×)、水(1×)和鹽水(1×)洗滌乙酸乙酯層，干燥(MgSO4)并減壓濃縮。通過FCC(用19∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化所得固體，得到0.013g(42％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 397，399(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.76(寬s，1H)，8.69(m，1H)，8.41(s，1H)，7.76(s，1H)，7.63(d，1H)，7.30(dd，1H)，6.50(dd，1H)，2.76和2.75(s和s，總共3H，酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.69(s)。
實(shí)施例39通過類似于實(shí)施例38中描述的方法，使用合適的羧酸和胺制備以下化合物。如果含有兩個(gè)胺官能團(tuán)，則在偶聯(lián)反應(yīng)中使用合適的單Boc保護(hù)的胺，而Boc基團(tuán)在最終的步驟中在標(biāo)準(zhǔn)TFA脫保護(hù)條件下除去。
實(shí)施例40 [6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇(10e)將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8b(1.06g，2.65mmol)懸浮在四氫呋喃(25mL)中，并冷卻至-78℃。向反應(yīng)混合物中滴加氫化鋁鋰(8.03mL，8.03mmol，在四氫呋喃中的1M溶液)。在-78℃下攪拌10分鐘后，使反應(yīng)混合物暖至0℃，其變?yōu)榫鶆虻娜芤?。將反?yīng)混合物在0℃下攪拌5分鐘，然后再次冷卻至-78℃。用MeOH終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，用Rochelle′s鹽稀釋，暖至室溫并攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物傾入分液漏斗中，用乙酸乙酯稀釋，并分離各層。用乙酸乙酯萃取水相。干燥合并的乙酸乙酯層(Na2SO4)并減壓濃縮，得到0.98g(100％)純的所希望的產(chǎn)物，其為淡黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 370，372(M+，Br型)。
實(shí)施例41 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛(10f)將[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇10e(0.96g，2.58mmol)溶解在四氫呋喃/丙酮(1∶1，15mL)中，并添加MnO2(2.24g，25.8mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃和氮?dú)夥障聰嚢?0小時(shí)。通過硅膠過濾反應(yīng)混合物，并用二氯甲烷/甲醇(10∶1，1L)洗脫。將濾液減壓濃縮至小體積，然后通過Acrodisc注射過濾器過濾，以除去少量通過硅膠的MnO2。減壓濃縮濾液，并通過閃蒸柱色譜法(用20∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化殘留物，得到0.81g(85％)純的所希望的產(chǎn)物，其為嫩黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 368，370(M+，Br型)。
實(shí)施例42 1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮(10g)步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10i在-78℃下，向三丁基-甲氧基甲氧基甲基-錫烷(864mg，2.37mmol，通過J.Org.Chem.1988，53，4131中描述的方法制備)在THF(8mL)中的溶液內(nèi)添加n-BuLi(0.94mL，2.35mmol，在己烷中的2.5M溶液)。攪拌3分鐘后，在-78℃下添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲醛10h(59mg，0.15mmol)在THF(2mL)中的溶液。在-78℃下攪拌40分鐘后，在-78℃下用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)，使反應(yīng)物暖至室溫，并用EtOAc稀釋。用鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，濃縮，并通過閃蒸色譜法(1.5％ MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(45mg，64％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 458，460(M+，Br型)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10j在室溫下，將1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10i(44mg，0.096mmol)和Dess-Martinperiodinane(49mg，0.12mmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的溶液攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物用醚(3mL)稀釋。添加飽和NaHCO3水溶液(1mL)，其含有硫代硫酸鈉五水合物(74mg)。將所得混合物攪拌10分鐘，并用EtOAc稀釋。用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過閃蒸色譜法(1.5％ MeOH，在CH2Cl2中)純化之，得到所希望的產(chǎn)物(31mg，71％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 456，458(M+，Br型)。
步驟C1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮10在室溫下，將1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10j(15mg，0.033mmol)、10％ HCl水溶液(0.3mL)、甲醇(0.01mL)和水(0.05mL)的混合物攪拌3天。用飽和NaHCO3水溶液中和反應(yīng)混合物，并用EtOAc稀釋。用鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，并真空濃縮，通過閃蒸色譜法(1.5％MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(7.3mg，54％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 412，414(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ8.64(s，1H)，8.34(s，1H)，8.16(s，1H)，7.58(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.59(dd，1H)，4.94(s，2H)，4.06(s，3H)；19F NMR(376MHz，丙酮-d6)-132.45(s，1F)。
實(shí)施例43 1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮(10k)步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10l根據(jù)實(shí)施例42步驟A中描述的方法，用三丁基-甲氧基甲氧基甲基-錫烷處理6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f，得到化合物10l。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 444，446(M+，Br型)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10m在-78℃下，向草酰氯(0.11mL，0.22mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液內(nèi)添加DMSO(0.016mL，0.22mmol)。攪拌3分鐘后，添加1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10l(25mg，0.056mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液。將所得溶液在-78℃下攪拌30分鐘。添加TEA(0.1mL，0.71mmol)。使反應(yīng)混合物緩慢暖至室溫，在室溫下攪拌5分鐘，并用水和CH2Cl2稀釋。分離有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物，其不進(jìn)一步純化直接使用。
步驟C1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮10k根據(jù)實(shí)施例42步驟C中描述的方法，將1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10m脫保護(hù)，得到化合物10k。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 398，400(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.38(s，1H)，8.04(s，1H)，7.52(d，1H)，7.22(dd，1H)，6.53(dd，1H)，4.90(m，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-133.96(s，1F)。
實(shí)施例44 1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙烷酮(10n)
步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙醇10o在-78℃下，向鋰甲基乙基醚在THF(6mL)中的溶液(通過Tetrahedron 1996，52，1643中的方法由4，4’-二叔丁基聯(lián)苯(585mg，2.20mmol)、Li(18mg，2.59mmol)和EtOCH2Cl(0.20mL，2.05mmol)制得)內(nèi)添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(29mg，0.080mmol)在THF(1mL)中的溶液。將所得溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)，然后用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)，暖至室溫，并用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，并通過閃蒸色譜法(100％ CH2Cl2-3％-5％MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(15mg，44％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 428，430(M+，Br型)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙烷酮10n根據(jù)實(shí)施例42步驟B中描述的方法，由1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙醇10o制備標(biāo)題化合物，不同之處在于，反應(yīng)混合物不用含有硫代硫酸鈉五水合物的飽和碳酸氫鈉水溶液處理。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 426，428(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.36(s，1H)，8.04(s，1H)，7.51(d，1H)，7.21(dd，1H)，6.51(dd，1H)，4.76(s，2H)，3.57(q，2H)，1.19(t，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-133.96(s)。
實(shí)施例45
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基-乙烷酮(10p)通過實(shí)施例44中描述的方法，由6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f和鋰甲基甲基醚制備1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基-乙烷酮10p。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 412，414(M+，Br型)。
實(shí)施例46 2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷酮(10q)步驟A2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙醇10r在-78℃下，向芐氧基甲基鋰在THF中的溶液(2mL，通過J.Am.Chem.Soc.1978，100，1481中描述的方法由n-Bu3SnCH2OBn(505mg，1.23mmol)和n-BuLi(0.49mL，1.22mmol，在己烷中的2.5M溶液)制備)內(nèi)添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(51mg，0.14mmol)在THF(3mL)中的溶液。將所得溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)。用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)，并用EtOAc萃取。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，真空濃縮，并通過閃蒸色譜法(100％ CH2Cl2-3％MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(46mg，68％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 490，492(M+，Br型)。
步驟B2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷酮10q
通過實(shí)施例42步驟B中描述的方法，由2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙醇10r制備標(biāo)題化合物，不同之處在于，反應(yīng)混合物不用含有硫代硫酸鈉五水合物的飽和碳酸氫鈉水溶液處理。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 488，490(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H)，8.02(s，1H)，7.51(d，1H)，7.26(m，5H)，7.19(dd，1H)，6.46(dd，1H)，4.77(s，2H)，4.58(s，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-134.52(s)。
實(shí)施例47 1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺酰基-乙烷酮(10s)步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺?；?乙醇10t在-78℃下，向甲基砜(65mg，0.68mmol)在THF(1.5mL)中的溶液內(nèi)添加n-BuLi溶液(O.27mL，0.68mmol，在己烷中的2.5M溶液)。攪拌5分鐘后，添加HMPA(0.1mL)。另外攪拌10分鐘后，添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(26mg，0.069mmol)在THF(1mL)中的溶液。將所得溶液在-78℃下攪拌1.5小時(shí)。用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)，暖至室溫，并用EtOAc稀釋。用水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，并通過閃蒸色譜法(3％MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到粗的所希望的產(chǎn)物(31mg，96％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 462，464(M+，Br型)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺酰基-乙烷酮10s通過實(shí)施例42步驟B中描述的方法，由1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺?；?乙醇10t制備標(biāo)題化合物，不同之處在于，反應(yīng)混合物不用含有硫代硫酸鈉五水合物的飽和碳酸氫鈉水溶液處理。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 460，462(M+，Br型)；1HNMR(400MHz，丙酮-d6)δ8.44(s，1H)，8.33(s，1H)，7.59(s，1H)，7.32(d，1H)，6.68(dd，1H)，5.00(s，1H)，3.15(s，3H)；19F NMR(376MHz，丙酮-d6)-132.97(s)。
實(shí)施例48 1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷-1，2-二醇(10u)步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-(異丙氧基-二甲基-硅烷基)-乙醇10v在-78℃下，向由Mg和氯甲基二甲基異丙氧基硅烷制得的格氏試劑(Org.Synth.1992，69，96)[4.4mL，3.26mmol，0.74M溶液(基于90％純度)]在THF中的溶液內(nèi)添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(200mg，0.54mmol)在THF(1mL)中的溶液。在-78℃下攪拌1小時(shí)后，用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)，并用EtOAc萃取反應(yīng)物。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，真空濃縮，得到粗的所希望的產(chǎn)物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷-1，2-二醇10u在室溫下，向粗的1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-(異丙氧基-二甲基-硅烷基)-乙醇10v在MeOH-THF(5mL-5mL)中的溶液內(nèi)添加KHCO3(54mg，0.54mmol)、KF(74mg，1.27mmol)以及30％ H2O2水溶液(0.20mL)。在室溫下攪拌3.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用水稀釋，并用EtOAc萃取。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，真空濃縮，并通過閃蒸色譜法(8％-10％ MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(74mg，34％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z400，402(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.20(s，1H)，7.62(寬s，1H)，7.47(d，1H)，7.14(dd，1H)，6.30(d，1H)，4.96(t，1H)，3.64(m，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-136.87(s)。
實(shí)施例49 [6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-吡啶-2-基-甲醇(10w)在-78℃下，向2-溴吡啶(0.10mL，1.04mmol)在THF(3mL)中的溶液內(nèi)添加n-BuLi(0.39mL，0.98mmol，在己烷中的2.5M溶液)。在-78℃下攪拌10分鐘后，添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲醛10h(25mg，0.064mmol)在THF(1mL)中的溶液。將所得反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1.5小時(shí)，用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)，并用EtOAc萃取。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，真空濃縮，并通過閃蒸色譜法(2.5％ MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純化，得到所希望的產(chǎn)物(18mg，62％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 461，463(M+，Br型)；1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(d，1H)，8.16(s，1H)，7.65(m，3H)，7.38(d，1H)，7.10(m，1H)，7.00(dd，1H)，6.11(dd，1H)，6.05(s，1H)，3.94(s，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-135.79(s)。
實(shí)施例50 (4-溴-2-氯-苯基)-(4-氟-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺(10x)步驟A[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇10y在氮?dú)夥障拢瑢?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯11cc(0.300g，0.594mmol)懸浮在EtOH(6mL)和THF(4mL)的混合物中。添加NaBH4(0.112g，2.97mmol)。攪拌約4天后，通過添加AcOH直至反應(yīng)混合物達(dá)到pH7而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，并使殘留物在乙酸乙酯和水之間分配。分離各層，用水(3×)、鹽水洗滌有機(jī)層，并干燥(Na2SO4)。減壓濃縮有機(jī)層，直至形成白色沉淀，過濾收集之，得到0.225g(79％)純凈的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 478，476(M+Br型)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺酰基-乙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醛10z在氮?dú)夥障?，將[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇10y(0.050，0.105mmol)溶解在1∶1 THF∶丙酮(2mL)中，并添加MnO2(0.046g，0.524mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后在55℃下攪拌5小時(shí)。添加額外的MnO2(0.046g，0.524mmol)，并將反應(yīng)混合物在55℃下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮至干，并將殘留物溶解在10∶1二氯甲烷∶MeOH中。通過硅膠短柱過濾溶液，用10∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫。將所得濾液減壓濃縮，得到41mg(82％)所希望的產(chǎn)物，其為嫩黃色固體。
步驟C(4-溴-2-氯-苯基)-(4-氟-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺10x將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醛10z(0.025g，0.053mmol)懸浮在MeOH(2mL)和K2CO3(0.015g，0.105mmol)中，然后添加甲苯磺酰基甲基異氰化物(0.011g，0.058mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流保持16小時(shí)。冷卻后，添加額外的甲苯磺?；谆惽杌?0.011g，0.058mmol)，并在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流保持16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，并溶解在乙酸乙酯中。用水和鹽水洗滌有機(jī)溶液。用乙酸乙酯萃取合并的含水洗滌液。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法進(jìn)行純化，用20∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫，得到4mg(18％)所希望的產(chǎn)物10x和1mg(4％)(4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-1-(2-甲磺酰基-乙基)-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基]-胺。
(4-溴-2-氯-苯基)-(4-氟-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺10x。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 409，407(M+Br型)；1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.33(s，1H)，8.24(s，1H)，7.94(bs，1H)，7.51(d，1H)，7.33(s，1H)，7.07(dd，1H)，6.14(dd，1H)。
(4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-1-(2-甲磺酰基-乙基)-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基]-胺。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 515，513(M+Br型)；1HNMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.39(s，1H)，8.28(s，1H)，8.03(s，1H)，7.52(d，1H)，7.37(s，1H)，7.07(m，1H)，6.14(dd，1H)，3.83(t，2H)，2.99(s，3H)，1.18(t，2H)。
實(shí)施例51 (4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-6-(3H-咪唑-4-基)-1H-苯并咪唑-5-基]-胺(10aa)步驟A(4-溴-2-氯-苯基)-{4-氟-1-(2-甲磺?；?乙基)-6-[4-(甲苯-4-磺酰基)-4，5-二氫-噁唑-5-基]-1H-苯并咪唑-5-基}-胺10bb在氮?dú)夥障?，?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺酰基-乙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醛10z(0.050g，0.107mmol)懸浮在EtOH(0.5mL)中，并添加甲苯磺?；谆惽杌?0.020g，0.105mmol)，然后添加催化劑NaCN(約1mg)。2小時(shí)后，添加2mL THF以幫助溶解。在室溫下攪拌16小時(shí)后，添加第二個(gè)當(dāng)量的甲苯磺酰基甲基異氰化物(0.020g，0.105mmol)。8小時(shí)后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮并用于下一步反應(yīng)中經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 671，669(M+Br型)。
步驟B(4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-6-(3H-咪唑-4-基)-1H-苯并咪唑-5-基]-胺10aa在密封的壓力管中，用2.4mL 2.0M NH3在MeOH中的溶液處理(4-溴-2-氯-苯基)-{4-氟-1-(2-甲磺?；?乙基)-6-[4-(甲苯-4-磺?；?-4，5-二氫-噁唑-5-基]-1H-苯并咪唑-5-基}-胺10bb(0.072g，0.107mmol)。然后將反應(yīng)混合物加熱至90℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌，保持20小時(shí)，并在室溫下繼續(xù)攪拌3天。將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法純化兩次，用10∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫，然后依次用二氯甲烷和乙醚研磨，得到3mg(7％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 408，406(M+Br型)；1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.23(s，1H)，7.87(s，1H)，7.74(s，1H)，7.46(m，1H)，7.32(d，1H)，7.05(m，1H)，6.20(dd，1H)。
實(shí)施例52 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(10cc)步驟A3-氯-2，4-二氟-5-硝基-苯甲酸2a將3-氯-2，4-二氟-苯甲酸1a(3.00g，15.6mmol)添加至濃H2SO4(16mL)和發(fā)煙硝酸(0.85mL，20.3mmol)的攪拌溶液中。3小時(shí)后形成沉淀。將黃色漿液傾于冰水(100mL)上。用乙醚(3×)萃取含水混合物。干燥有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮，得到3.50g(95％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為淡黃色固體。
步驟B4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸3a在0℃下，將氫氧化銨溶液(6.88g，～30％，在水中，58.9mmol)添加至3-氯-2，4-二氟-5-硝基-苯甲酸2a(3.5g，14.7mmol)在水(16mL)中的溶液內(nèi)，同時(shí)進(jìn)行攪拌。氫氧化銨添加完成后，使反應(yīng)混合物暖至室溫。5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并小心添加濃HCl，直至反應(yīng)混合物的pH接近0。過濾收集固體，并用水和乙醚洗滌。將固體溶解在MeOH和EtOAc中，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中并減壓濃縮，得到2.96g黃色固體。使濾液在乙醚和水之間分配，并用鹽水洗滌有機(jī)層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮，得到0.65g產(chǎn)物?？偣不厥?.61g(104％)純的所希望的產(chǎn)物，其不進(jìn)一步純化使用。
步驟C4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4a向4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸3a(3.61g，15.4mmol)在THF(30mL)和MeOH(10mL)中的攪拌溶液內(nèi)添加TMS重氮甲烷(9.23mL，在己烷中的2.0M溶液，18.5mmol)。反應(yīng)完全后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮反應(yīng)混合物，乙酸保留在阱中。用乙醚研磨回收的油狀固體，得到1.51g黃色固體。濃縮濾液并用乙醚研磨，得到另外0.69g黃色固體?？偣不厥?.20g(57％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟D4-氨基-3-氯-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯5c將4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4a(2.20g，8.84mmol)懸浮在MeOH(9.4mL)中，并添加苯胺(3.22mL，35.4mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流，同時(shí)進(jìn)行攪拌。19小時(shí)后，反應(yīng)完全。將蒸餾水(3.22mL)添加至反應(yīng)混合物中并繼續(xù)回流1小時(shí)。在冰浴中保持20分鐘將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。過濾反應(yīng)混合物，并用3∶10蒸餾水/MeOH(總共65mL)洗滌，然后用MeOH洗滌。將固體溶解在CH2Cl2中并減壓濃縮，得到2.40g(84％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 320.3(M-1)。
步驟E4，5-二氨基-3-氯-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯6b將4-氨基-3-氯-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯5c(0.50g，1.55mmol)溶解在2∶1 EtOH/MeOH(15.5mL)中。添加飽和NH4Cl水溶液(15mL)、Zn粉(1.02g，15.6mmol)和THF(10mL)。攪拌20小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用CH2Cl2/THF和水稀釋。用水(3×)洗滌有機(jī)層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮。用醚研磨固體，得到0.32g(70％)純凈的所希望的產(chǎn)物。
步驟F7-氯-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7c將4，5-二氨基-3-氯-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯6b(0.32g，1.09mmol)和甲脒乙酸鹽(72mg，1.64mmol)在EtOH(36mL)中加熱至80℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。44小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用EtOAc稀釋，用水(3×)、飽和NaHCO3以及鹽水洗滌。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮，得到0.33g(99％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 302.3(M+1)。
步驟G6-(4-溴-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8g將7-氯-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7c(0.327g，1.08mmol)溶解在DMF(16mL)中，并添加NBS(0.193g，1.08mmol)。1小時(shí)后，通過添加飽和NaHSO3水溶液而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。然后使反應(yīng)混合物在EtOAc/THF和水之間分配。用水和鹽水洗滌有機(jī)層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮。用醚研磨回收的固體，得到0.225g(54％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 382，384(M+，Br型)。
步驟H6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10dd將6-(4-溴-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8g(0.225g，0.591mmol)溶解在DMF(2mL)中，并添加NCS(79mg，0.591mmol)。在NCS溶解后，添加濃HCl(0.005mL，0.059mmol)。2小時(shí)后，將碳酸氫鈉、水和NaHSO3添加至反應(yīng)混合物中。過濾固體，并用水和醚洗滌，得到0.141g(57％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為褐色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 414，416(M-，Br型)。
步驟I6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10ee將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10dd(0.141g，0.34mmol)、碳酸鉀(0.141g，1.02mmol)和碘甲烷(0.063mL，1.02mmol)溶解在二甲基甲酰胺(3mL)中。20小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，并用水(3×)、碳酸鉀和鹽水洗滌。干燥有機(jī)層(Na2SO4)并濃縮成棕色油。通過閃蒸色譜法(EtOAc)分離N3和N1烷基化區(qū)域異構(gòu)體?；厥盏腘3烷基化區(qū)域異構(gòu)體為20.4mg(28％)。經(jīng)檢測(cè)MSESI(+)m/z 428，430(M+，Br型)。
步驟J6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10ff將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10ee(21mg，0.048mmol)溶解在2∶1 THF/水(1.2mL)中，并添加NaOH(0.190mL，1.0M水溶液，0.190mmol)。在攪拌4小時(shí)后，將反應(yīng)物用水稀釋，并通過添加1.0M HCl而酸化至pH2。用3∶1EtOAc/THF(3×)萃取混合物，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到定量產(chǎn)量的所希望的產(chǎn)物，其為白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 414，416(M+，Br型)。
步驟K6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺10gg將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10ff(32mg，0.077mmol)、O-(2-乙烯氧基-乙基)-羥胺(0.010mL，0.092mmol)、HOBt(13mg，0.093mmol)、三乙胺(0.011mL，0.077mmol)和EDCl(19mg，0.10mmol)溶解在二甲基甲酰胺(1.0mL)中，并在室溫和氮?dú)夥障聰嚢?4小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用水(3×)、10％碳酸鉀(2×)、飽和氯化銨、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮，得到39mg純度為85％的物質(zhì)。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 497，501(M-，Br型)。
步驟L6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺10cc將鹽酸(0.78mL，1.0M水溶液，0.78mmol)添加至6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10gg(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺(39mg，0.078mmol)在MeOH(1mL)中的懸浮液內(nèi)。1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物中和至pH7并減壓濃縮。將固體溶解在EtOAc中，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。進(jìn)行閃蒸色譜(20∶1CH2Cl2/MeOH)，得到9mg(23％)的純產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z473，475(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，8.08(s，1H)，7.57(d，1H)，7.15(dd，1H)，6.21(d，1H)，3.97(s，3H)，3.86(m，2H)，3.57(m，2H)。
實(shí)施例53 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(10hh)以類似于實(shí)施例52的方式制備以上化合物，不同之處在于省去步驟I。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 457，461(M-，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.40(s，1H)，7.85(s，1H)，7.50(d，1H)，7.14(dd，1H)，6.21(d，1H)，3.84(m，2H)，3.61(m，2H)。
實(shí)施例54 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(10ii)步驟A4，5-二氨基-3-氟-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯6c將4-氨基-3-氟-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯26a(11.44g，37.48mmol)懸浮在乙醇(400mL)中，并添加甲酸銨(11.80g，187.0mmol)和20％ Pd(OH)2/C(10.00g，18.79mmol)。將反應(yīng)混合物在95℃和氮?dú)夥障聰嚢?0分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并通過硅藻土過濾，用乙醇洗滌。減壓濃縮濾液，得到9.63g(93％)純的所希望的產(chǎn)物，其為紫色/紅色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 276(M+1)。
步驟B7-氟-2-甲基-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯31a將4，5-二氨基-3-氟-2-苯基氨基-苯甲酸甲酯6c(0.20g，0.73mmol)懸浮在乙醇(3mL)中，并添加5M HCl水溶液(1mL.，5.00mmol)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障禄亓?，然后添?，4-戊烷二酮(0.150mL，1.45mmol)。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌60分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用飽和碳酸氫鈉水溶液處理，直至反應(yīng)混合物的pH為7，然后減壓濃縮至干。將殘留物用乙酸乙酯和水稀釋，傾入分液漏斗中，并分離各層。用鹽水洗滌乙酸乙酯層，干燥(Na2SO4)并減壓濃縮。用乙醚研磨紅色的固體殘留物，得到淺棕色固體和紅色濾液。收集固體并用乙醚洗滌，得到0.20g(91％)純的所希望的產(chǎn)物，其為淺棕色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 300(M+1)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺10ii通過已經(jīng)描述的溴化、氯化、水解、偶聯(lián)和水解方法轉(zhuǎn)化7-氟-2-甲基-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯31a，得到純的所希望的產(chǎn)物，其為灰白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 457，459(M+，Br型)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.58(s，1H)，7.49(d，1H)，7.18(dd，1H)，6.41(m，1H)，3.91(t，2H)，3.65(t，2H)，2.61(s，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-135.84(s)。
實(shí)施例55 6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11yy)步驟A7-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10jj在氮?dú)夥障?，?-氟-6-o-甲苯基氨基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯7a(1.47g，4.92mmol)懸浮在1∶1 THF∶MeOH混合物(44mL)中，并冷卻至-78℃。添加NIS(1.66g，7.39mmol)在THF(2mL)中的溶液，然后添加TsOH·H2O(1.87g，9.84mmol)的MeOH(2mL)溶液。30分鐘后，使反應(yīng)混合物暖至0℃，并添加1mL二氯甲烷。在16小時(shí)內(nèi)緩慢使反應(yīng)混合物暖至室溫，同時(shí)進(jìn)行攪拌。通過添加10％ Na2S2O4溶液而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。然后將反應(yīng)混合物用水和乙酸乙酯稀釋，并分離各層。用乙酸乙酯萃取含水層。干燥合并的有機(jī)萃取液(Na2SO4)并減壓濃縮。用MeOH研磨回收的固體，得到1.45g(69％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 426(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS ESI(-)m/z 424(M-1)。
步驟B7-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10kk在氮?dú)夥障拢瑢?-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10jj(0.200g，0.470mmol)懸浮在DMF(2mL)中，并在冰水浴中冷卻至0℃。添加NaH(在油中的60％分散液，0.018g，0.470mmol)。10分鐘后，使反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌30分鐘。冷卻至0℃后，添加SEMCl(0.087mL，0.494mmol)，然后使反應(yīng)物暖至室溫，同時(shí)攪拌過夜。通過添加水和鹽水而終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。用乙酸乙酯萃取反應(yīng)混合物。用水和鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取液，干燥(MgSO4)并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法進(jìn)行純化，用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到0.182g(70％)所希望的產(chǎn)物，其為白色泡沫，是N1和N3異構(gòu)體的1∶1混合物。
步驟C6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10ll在室溫和氮?dú)夥障?，?-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10jj(0.060g，0.108mmol)的N1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物在1mL DMF中的攪拌溶液內(nèi)添加dppf(2mg，0.004mmol)，然后添加Pd2dba3(2mg，0.002mmol)和Zn(CN)2(8mg，0.065mmol)(Tetrahedron Lett.1999，40，8193-8195)。將反應(yīng)混合物加熱至120℃保持45分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并通過添加5mL飽和NH4Cl溶液∶濃NH4OH溶液∶水的4∶1∶5混合物終止反應(yīng)。用乙酸乙酯萃取含水層。用水(3×)、鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取液，干燥(MgSO4)并減壓濃縮。通過閃蒸柱色譜法進(jìn)行純化，用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到38mg(77％)所希望的產(chǎn)物，其是N1和N3異構(gòu)體的1∶1混合物經(jīng)檢測(cè)APCI MS(+)m/z 455(M+1)。
步驟D6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸10mm如前所述，用氫氧化鈉水溶液水解6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲酯10ll(31mg，0.068mmol)的N1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物，得到26mg(87％)所希望的產(chǎn)物。
步驟E6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11zz如前所述，使6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸10mm(26mg，0.059mmol)的N1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物與EDCl和環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽偶聯(lián)，得到28mg(93％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)APCI MS(+)m/z 510(M+1)。
步驟F6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11yy向6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11zz(28mg，0.055mmol)的N1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物在0.5mL EtOH中的漿液內(nèi)添加0.5mL10％ HCl。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，同時(shí)攪拌過夜(Whitten等人，J.Org.Chem.，1986，51，1891-1894)。添加另外的0.5mL 10％ HCl，并在70℃下將反應(yīng)混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用1.5mL 1N NaOH中和至約pH8。用乙酸乙酯萃取反應(yīng)混合物，干燥(MgSO4)并減壓濃縮，得到14mg(60％)純度為90％的產(chǎn)物，其是rotatomers的混合物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 380(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(-)m/z 378(M-1)；1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.41(bs，1H)，7.75(m，1H)，7.50(s，1H)，7.38(d，1H)，6.51(m，1H)，3.72(d，0.5H)，3.65(d，1.5H)，2.41(s，3H)，0.98(1H，m)，0.58(d，1.5H)，0.40(d，0.5H)，0.25(d，1.5H)，0.19(d，0.5H)。
實(shí)施例56 6-(4-乙炔基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11aaa
步驟A7-氟-6-(2-甲基-4-三甲基硅烷基乙炔基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11bbb將7-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11ccc(0.025g，0.052mmol)溶解在1∶1乙腈/三乙胺(0.50mL)中。連續(xù)添加乙炔基三甲基硅烷(0.013mL，0.092mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.004g，0.006mmol)和CuI(0.002g，0.011mmol)，并將反應(yīng)混合物在60℃和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并減壓濃縮。通過FCC(用20∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化殘留物，得到0.020g(87％)所希望的產(chǎn)物。
步驟B6-(4-乙炔基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基酰胺11aaa將7-氟-6-(2-甲基-4-三甲基硅烷基乙炔基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基酰胺11bbb(0.020g，0.044mmol)溶解在四氫呋喃(0.50mL)中，并將反應(yīng)溶液冷卻至0℃。添加TBAF(50μL，0.050mmol，在四氫呋喃中的1M溶液)。使反應(yīng)混合物暖至室溫，并添加額外的TBAF(25μL，0.025mmol，在四氫呋喃中的1M溶液)。將反應(yīng)混合物在50℃和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，添加幾滴H2O，并減壓濃縮之。通過FCC(用20∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化殘留物，得到0.011g(65％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(-)m/z 377(M-1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.56(寬s，1H)，8.12(s，1H)，7.99(s，1H)，7.28(s，1H)，7.11(d，1H)，6.42(寬，1H)，3.70(br s，2H)，2.96(d，1H)，2.37(s，3H)，0.85(m，1H)，0.50(m，2H)，0.22(m，2H)。
實(shí)施例57 磷酸一-(2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙基)酯(29nnn)在干燥氮?dú)夥障?，?.000g 6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺、660mg四唑和2.80mL二叔丁基二異丙基-亞磷酰胺(di-tertbutyl diisopropyl-phosphoramidite)溶解/懸浮在30mL無水DMF中。將反應(yīng)混合物攪拌約3小時(shí)，之后將反應(yīng)物冷卻至-78℃，并添加2.50mL 70％過氧化氫叔丁基。然后移去冷卻浴，使反應(yīng)物緩慢暖至室溫并反應(yīng)過夜。然后使反應(yīng)物在乙醚/乙酸乙酯(5∶1)溶液和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。保留有機(jī)層，并用10％亞硫酸鈉洗滌，然后用水洗滌三次，最后用鹽水洗滌。用MgSO4干燥所得有機(jī)層，過濾并真空濃縮。在干燥氮?dú)夥障聦埩粑锶芙庠?5mL TFA/DCM(2∶1)溶液中。將反應(yīng)物在室溫下攪拌約2小時(shí)，之后真空濃縮之，并將所得殘留物在甲醇中攪拌約1小時(shí)。吸濾收集灰白色固體，用甲醇洗滌，然后用乙醚洗滌，接著風(fēng)干，得到2.717g所希望的產(chǎn)物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.94(br s，1H)，8.40(s，1H)，7.96(br s，1H)，7.75(s，1H)，7.60(s，1H)，7.25(dd，1H)，6.37(dd，1H)，4.02(br s，4H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.9(s，1F)。
實(shí)施例58 2-氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯鹽酸鹽(29ooo)步驟A2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯的制備將二甲基乙酰胺(30mL)添加至帶有磁力攪拌器和氮?dú)夤芫€的500mL RBF中的6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基乙氧基)-酰胺(3g，6.555mmol)、BOC-L-纈氨酸(1.710g，7.866mmol)、HOBT·H2O(1.004g，6.555mmol)和TEA(0.929g，9.177mmol)的混合物內(nèi)。5分鐘后，將EDCl(1.759g，9.177mmol)添加至該500mL RBF中的棕色溶液內(nèi)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物緩慢加入210mL去離子水中，同時(shí)進(jìn)行機(jī)械攪拌。將白色漿液攪拌1小時(shí)，通過中度燒結(jié)漏斗過濾。用約100mL水洗滌濾餅，并向該濾餅通入空氣約10-15分鐘。將叔丁基甲基醚(70mL)添加至該濾餅中并用刮勺攪拌。繼續(xù)真空過濾。在50℃下真空干燥固體，得到2g含有約80％所希望的異構(gòu)體的產(chǎn)物。將叔丁基甲基醚層濃縮成泡沫(2.18g)，其富含包含異構(gòu)體混合物的所希望的產(chǎn)物。
步驟B2-氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯三氟乙酸鹽的制備用1.5mL三氟乙酸將2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯及其N-?；悩?gòu)體(0.6g)的混合物處理0.5小時(shí)。反應(yīng)混合物的HPLC示蹤表明反應(yīng)完全。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮混合物，并用泵抽高真空，得到黃色油(0.9g)。對(duì)脫保護(hù)樣品進(jìn)行HPLC純化，得到純化的產(chǎn)品，其為三氟乙酸鹽。
步驟C2-氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯的制備將2-氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯三氟乙酸鹽(474mg)懸浮于80mLEtOAc中。添加15mL飽和碳酸氫鈉水溶液，得到雙相混合物并且大部分固體溶解。添加水(5mL)以溶解含水層中所見的一些混濁物。分離各層，并用20mL EtOAc萃取含水層。將合并的EtOAc層用50mL叔丁基甲基醚稀釋，并用2×25mL水、10mL鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，并過濾。將有機(jī)層濃縮成泡沫，用2×10mL叔丁基甲基醚濃縮，并真空干燥，得到340mg(86％)游離堿，其為白色固體。1H NMR(400MHz，DMSO-d6和D2O交換)δ0.82(d，J＝6.7Hz，3H)，0.87(d，J＝6.7Hz，3H)，1.86(m，1H)，3.14(d，J＝5.0Hz，1H)，3.90(s，3H)，4.03(m br，2H)，4.24(d br，2H)，6.36(dd，JH-H＝8.8Hz，JF-H＝4.4Hz虛假偶合，1H)，7.26(dd，J＝8.8Hz，2.3Hz，1H)，7.60(d，J＝2.26Hz，1H)，7.75(s，1H)，8.40(s，1H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6和D2O交換)δ-133.03。
步驟D2-氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯鹽酸鹽的制備將2-氨基-3-甲基丁酸2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙酯(325mg)溶解在約1.5mL無水乙醇中，并添加0.35mL在醚中的2M HCl，得到濃稠的沉淀。添加額外的1.5mL醚以使?jié){液變稀。使?jié){液混合5-10分鐘，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮。潮濕的固體為微黃色，在室溫和高真空下將其干燥過夜，得到0.325g(94％)鹽酸鹽。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.97(d，J＝6.6Hz，3H)，1.00(d，J＝6.6Hz，3H)，2.20(m br，1H)，3.91(s，3H)，3.95(s br，1H)，4.09(m br，2H)，4.34(m br，1H)，4.43(m br，1H)，6.37(dd，JH-H＝8.8Hz，JF-H＝4.3Hz虛假偶合，1H)，7.27(dd，J＝8.8Hz，2.2Hz，1H)，7.65(d，J＝2.2Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.92(s，1H)，8.37(s br，3H)，8.43(s，1H)，11.86(s br，1H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-132.98。
實(shí)施例59 (S)-磷酸一-(2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙基)酯(29ppp)在干燥氮?dú)夥障?，?01.2mg(S)-6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基乙氧基)-酰胺、78.6mg四唑和320μL二叔丁基二異丙基-亞磷酰胺溶解/懸浮在3mL無水DMF中。將反應(yīng)混合物攪拌約4小時(shí)，之后將反應(yīng)物冷卻至0℃，并添加300μL 70％過氧化氫叔丁基。然后移去冷卻浴，使反應(yīng)物緩慢暖至室溫并反應(yīng)2.5小時(shí)。然后用10mL飽和硫代硫酸鈉水溶液終止反應(yīng)。使所得溶液在乙醚/乙酸乙酯(10∶1)溶液和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。保留有機(jī)層，并用水(3×)洗滌，然后用鹽水洗滌。用MgSO4干燥所得有機(jī)層，過濾并真空濃縮。使用硅膠色譜法純化所得殘留物，用2∶1乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫，得到295.3mg磷酸一-(2-{[6-(4-溴-2-氯苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙基)酯二叔丁基酯，然后在干燥氮?dú)夥障聦⑵淙芙庠?mL TFA和3mL二氯甲烷的溶液中。將反應(yīng)物在室溫下攪拌約2小時(shí)，之后真空濃縮之。將所得殘留物收集在甲醇中并再濃縮(2×)。將所得殘留物在甲醇中攪拌約1小時(shí)。吸濾收集白色固體，用甲醇洗滌，然后用乙醚洗滌，接著風(fēng)干，得到188.6mg所希望的產(chǎn)物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.83(br s，1H)，8.35(s，1H)，7.95(br s，1H)，7.79(s，1H)，7.61(d，1H)，7.26(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.37(m，1H)，4.26(m，1H)，4.03(br s，4H)，3.85(m，1H)，3.70(m，1H)，3.27(m，1H)，1.80(m，1H)，1.70(m，1H)，1.46(m，3H)，1.22(m，1H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.9(s，1F)。
現(xiàn)已完全、清楚、簡(jiǎn)明和準(zhǔn)確地描述了本發(fā)明以及制備和使用其的方式和方法，使得本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)嵤┍景l(fā)明。應(yīng)理解，以上部分描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，而且在不偏離如權(quán)利要求限定的本發(fā)明的精神和范圍的情況下可進(jìn)行許多改進(jìn)。為具體地指出以及明確地要求保護(hù)作為發(fā)明的主題，權(quán)利要求是本說明書的結(jié)論。
本說明書及權(quán)利要求中使用的詞語“包括”、“包含”、“含有”、和“含”意在明確一個(gè)或多個(gè)所稱的特征、整數(shù)、組分或步驟的存在，但它們不排斥一個(gè)或多個(gè)其他特征、整數(shù)、組分、步驟或其組的存在或添加。此外，由于多種改進(jìn)和變化是本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚的，因此不希望將本發(fā)明限制于以上描述的細(xì)節(jié)。因此，認(rèn)為所有合適的改進(jìn)和等價(jià)物均落在有所附權(quán)利要求限定的本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.下式化合物的磷酸鹽或氨基酸前藥及其藥學(xué)可接受的鹽、前藥和溶劑化物 其中------是任選的鍵，條件是環(huán)中有且僅有一個(gè)氮是雙鍵的；R1、R9和R10獨(dú)立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-雜芳基、-NR4(CR4R5)m-雜芳基、-O(CR4R5)m-雜環(huán)基或-NR4(CR4R5)m-雜環(huán)基，其中每個(gè)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R3選自氫、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中每個(gè)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、磷酸鹽、氨基酸殘基、多肽、半琥珀酸酯、磷酸酯、二甲氨基乙酸鹽、磷酰氧基甲氧羰基、膦酰胺、-NR’SO2R””’、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R”’、-NR’C(NCN)NR”R”’、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；或者R3和R4與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，它們各自任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R”’、-NR’C(NCN)NR”R”’、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R’、R”和R”’獨(dú)立地選自氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、芳基和芳基烷基；R””選自低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、芳基和芳基烷基；或者R’、R”、R”’或R””中的任意兩個(gè)與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，它們各自任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R4和R5獨(dú)立地代表氫或C1-C6烷基；或者R4和R5與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，它們各自任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R”’、-NR’C(NCN)NR”R”’、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R6選自三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R”’、-NR’C(NCN)NR”R”’、-OR’、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R7選自氫、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-SO2R6、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；W選自雜芳基、雜環(huán)基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10環(huán)烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(雜芳基)和-C(O)(雜環(huán)基)，它們各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，它們各自任選被1或2個(gè)獨(dú)立地選自-NR3R4和-OR3的基團(tuán)取代；R8選自氫、-SCF3、-Cl、-Br、-F、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-雜芳基、-NR4(CR4R5)m-雜芳基、-O(CR4R5)m-雜環(huán)基或-NR4(CR4R5)m-雜環(huán)基，其中烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分各自任選被1-5個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；m是0、1、2、3、4或5；并且j是1或2。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中W是
3.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中W是
4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其具有下式
5.如權(quán)利要求4所述的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基、C3-C7環(huán)烷基烷基、C3-C7雜環(huán)烷基或C3-C7雜環(huán)烷基烷基，它們各自任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R6、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基；R9是氫或鹵素；R1是低級(jí)烷基或鹵素；并且R8是-OCF3或鹵素。
6.如權(quán)利要求所述5的化合物，其中R9是氟。
7.如權(quán)利要求所述6的化合物，其中R1是甲基或氯。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中R8是氯或溴。
9.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中W是
10.選自以下的化合物的磷酸鹽或氨基酸前藥7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺、6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺、6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺、6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2，3-二羥基-丙氧基)-酰胺、6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺、[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-甲基-苯基)-胺、1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮、1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基-乙烷酮、6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-1，1-二甲基-乙氧基)-酰胺、6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫呋喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺、6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸叔丁氧基-酰胺、6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺和6-(2，4-二氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺。
11.一種組合物，其包含如權(quán)利要求1所述的化合物以及藥學(xué)可接受的載體。
12.一種抑制哺乳動(dòng)物中MEK活性的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物有效抑制MEK的量的如權(quán)利要求1所述的化合物。
13.一種治療哺乳動(dòng)物中過度增殖性疾病的方法，其包括給予所述哺乳動(dòng)物有效治療所述疾病的量的如權(quán)利要求1所述的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了式(I)的化合物及其藥學(xué)可接受的鹽和前藥其中W、R
文檔編號(hào)C07D235/08GK1874768SQ200480032332
公開日2006年12月6日 申請(qǐng)日期2004年8月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月29日
發(fā)明者伊萊·M.·華萊士, 約瑟夫·P.·利希凱托斯, 阿莉森·L.·馬洛, 布賴恩·T.·赫爾利, M·凱文·科克 申請(qǐng)人:陣列生物制藥公司