專利名稱：抗單股正鏈RNA病毒人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及人工合成的抗單股正鏈RNA病毒含CpG單鏈脫氧寡核苷酸，特別是涉及抗SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒的含CpG單鏈脫氧核苷酸。本發(fā)明還涉及含CpG單鏈脫氧核苷酸對單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的傳染性疾病的治療和預(yù)防作用以及用含CpG單鏈脫氧寡核苷酸治療和預(yù)防由單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的傳染性疾病的技術(shù)方法和技術(shù)設(shè)想。
背景技術(shù)：
近年來的研究表明，多種具有CpG結(jié)構(gòu)的細(xì)菌和病毒DNA對人的免疫系統(tǒng)是危險信號，可激活多種免疫細(xì)胞啟動機體的抗病毒機制。CpG是由胞嘧啶和鳥嘌呤通過磷酸連接成的二核苷酸，C代表胞嘧啶，G代表鳥嘌呤，p代表磷酸。進一步的研究表明，含CpG的人工合成的脫氧核糖核酸寡核苷酸(CpG ODN)也可激活多種免疫細(xì)胞啟動機體的抗病毒機制。
SARS的病原體SARS病毒是一種變異了的冠狀病毒，屬有包膜的單股正鏈RNA病毒(Christian Drosten，Identification of a Novel Coronavirus in Patients with SevereAcute Respiratory Syndrome The New England Journal Of Medicine，2003，348；19；PaulA.Rota，etal，Characterization of a Novel Coronavirus Associated with Severe AcuteRespiratory Syndrome Science，Vol.300，Issue 5624，1394-1399，May 30，2003)。丙型肝炎的病原體丙型肝炎病毒也是一種有包膜的單股正鏈RNA病毒(Lindenbach，B.D.，andC.M.Rice.2001.Flaviviridaethe viruses and their replication，p.991-1041.InD.M.Knipe and P.M.Howley(ed.)，F(xiàn)ields virology，vol.1.Lippincott/The Williamsand Wilkins Co.，Philadelphia，Pa)。丙型肝炎病毒屬黃病毒科病毒。黃病毒科的另外兩種病毒，登革熱病毒(Wei-Kung Wang，Su-Ru Lin，Chao-Min Lee，Chwan-Chuen King，andShan-Chwen Chang Dengue Type 3 Virus in Plasma Is a Population of Closely RelatedGenomesQuasispecies Journal of Virology，May 2002，p.4662-4665，Vol.76，No.9)和日本腦炎病毒(Sang-Im Yun，Seok-Yong Kim，Charles M.Rice，and Young-Min LeeDevelopment and Application of a Reverse Genetics System for Japanese EncephalitisVirus Journal of Virology，June 2003，p.6450-6465，Vol.77，No.11)也都是有包膜的單股正鏈RNA病毒。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明概述本發(fā)明的目的之一是提供人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸特別是可刺激人外周血細(xì)胞產(chǎn)生抗單股正鏈RNA病毒物質(zhì)的人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸。人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸由含一個或多個CpG的寡核苷酸單鏈DNA分子構(gòu)成，其磷酸二酯鍵可以是部分硫化的，全部硫化的，也可以是未硫化的。優(yōu)選地，本發(fā)明的人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸具有SEQ ID NO1所示的序列。
本發(fā)明的目的之二是提供本發(fā)明的人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的抗單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒的作用。
本發(fā)明的目的之三是提供本發(fā)明的人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸對單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的傳染性疾病的治療和預(yù)防的作用。
本發(fā)明的目的之四是提供用人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸治療和預(yù)防由單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的傳染性疾病的技術(shù)方法和設(shè)想。
另外，需要指出的是，在本申請的上下文的公開內(nèi)容的基礎(chǔ)上，本發(fā)明的其它具有實質(zhì)性特點的方面和創(chuàng)造性的有益效果對本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說是可以直接推知的。
具體實施例方式
在本發(fā)明的上下文中，所使用的術(shù)語除非另外說明，一般具有本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的含義。特別地，下列術(shù)語具有如下的含義優(yōu)選地，本發(fā)明的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸具有如下所示的序列SEQ ID NO1DVAX-15’-TCgTCgggTgCgACgTCgCAgggggg-3’其中的磷酸二酯鍵可以是部分硫化的，全部硫化的，也可以是未硫化的。
本發(fā)明的CpG單鏈脫氧寡核苷酸可通過已知的方法生產(chǎn)，例如采用固相亞磷酰胺三酯法進行生產(chǎn)。以下的實施例詳細(xì)地例舉了一種生產(chǎn)本發(fā)明的人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的方法。
在預(yù)防和治療由單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的人傳染性疾病時，人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的一次用藥劑量為1-5000微克。
本發(fā)明的人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的使用方式包括單獨應(yīng)用或與其它抗單股正鏈RNA病毒藥物或疫苗聯(lián)合使用。
應(yīng)用方式包括粘膜(包括呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜)表面應(yīng)用，滴眼，皮下、肌肉注射應(yīng)用，胃腸應(yīng)用，腹腔應(yīng)用，靜脈注射等常用的方式應(yīng)用。
下面結(jié)合具體的制備實施例和生物學(xué)效果實施例，并參照附圖
進一步詳細(xì)地描述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例只是為了舉例說明本發(fā)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
實施例在如下實施例中，未詳細(xì)描述的各種過程和方法是本領(lǐng)域中公知的常規(guī)方法，例如合成采用固相亞磷酰胺三酯法。在如下實施例中，所用試劑的來源、商品名和/或有必要列出其組成成分者，均只標(biāo)明一次。在其后所用相同試劑如無特殊說明，不在贅述上述內(nèi)容。
實施例1人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的制備采用固相亞磷酰胺三酯法合成人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸。
1、試劑和材料三氯乙酸(Trichloroacetic Acid，TCA)、可控多孔玻璃(Controlled Pore Glass)、DMT(二甲氧基三苯甲基)、四氮唑活化劑、乙酸酐、N-甲基咪唑、A、T、C、G四種核苷酸單體、ABI DNA合成儀、高效液相色譜層析儀等2、方法
脫保護基用三氯乙酸(Trichloroacetic Acid，TCA)脫去連結(jié)在可控多孔玻璃(Controlled Pore Glass)上的核苷酸的保護基團二甲氧基三苯甲基(DMT)，獲得游離的5’-羥基端，以供下一步縮合反應(yīng)。
活化將亞磷酰胺保護的核苷酸單體與四氮唑活化劑混合并進入合成柱，形成亞磷酰胺四唑活性中間體(其3’-端已被活化，但5’-端仍受DMT保護)，此中間體將與可控多孔玻璃上的已脫保護基的核苷酸發(fā)生縮合反應(yīng)。
連接亞磷酰胺四唑活性中間體遇到可控多孔玻璃上已脫保護基的核苷酸時，將與其5’-羥基發(fā)生親合反應(yīng)，縮合并脫去四唑，此時合成的寡核苷酸鏈向前延長一個堿基。
封閉縮合反應(yīng)后為了防止連在可控多孔玻璃上的未參與反應(yīng)的5’-羥基在隨后的循環(huán)反應(yīng)中被延伸，常通過乙?；瘉矸忾]此端羥基，一般乙?；噭┦怯靡宜狒蚇-甲基咪唑等混合形成的。
氧化縮合反應(yīng)時核苷酸單體是通過亞磷酯鍵與連在可控多孔玻璃上的寡核苷酸連接，而亞磷酯鍵不穩(wěn)定，易被酸、堿水解，此時常用碘的四氫呋喃溶液將亞磷酰轉(zhuǎn)化為磷酸三酯，得到穩(wěn)定的寡核苷酸。
經(jīng)過以上五個步驟后，一個脫氧核苷酸就被連到可控多孔玻璃的核苷酸上，同樣再用三氯乙酸脫去新連上的脫氧核苷酸5’-羥基上的保護基團DMT后，重復(fù)以上的活化、連接、封閉、氧化過程即可得到一DNA片段粗品。最后對其進行切割、脫保護基(一般對A、C堿基采用苯甲酰基保護；G堿基用異丁?；Ｗo；T堿基不必保護；亞磷酸用腈乙基保護)、純化(常用的有HAP，PAGE，HPLC，C18，OPC等方法)、定量等合成后處理即可得到符合實驗要求的寡核苷酸片段。
未硫化的CpG單鏈脫氧寡核苷酸在ABI 3900 DNA合成儀上合成；全硫化及部分硫化CpG單鏈脫氧寡核苷酸的合成采用置換法，在ABI 394 DNA合成儀上合成。
實施例2、人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的抗單股正鏈RNA病毒SARS病毒的作用1、人外周血單個核細(xì)胞的分離(1)、材料肝素抗凝的人全血長春市中心血站。
聚蔗糖-泛影葡胺比重1.077±0.001，北京鼎國生物技術(shù)有限公司。
細(xì)胞培養(yǎng)常用的儀器設(shè)備低溫冰箱、二氧化碳孵箱、超凈工作臺、倒置顯微鏡、液氮罐、蒸餾水器、真空泵、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、濾菌器、濾過瓶、各種規(guī)格的吸管、加樣器、滴管、血球計數(shù)板、水平式離心機等。
RPMI1640培養(yǎng)液含L-谷氨酰胺的RPMI1640(GIBCOBRL) 10.4克碳酸氫鈉 2.0克慶大霉素 10萬單位加三蒸水至體積1000毫升0.22微米的濾膜真空泵抽濾除菌、分裝。
滅活胎牛血清胎牛血清(Invitrogen)-20℃取出，4℃冰箱融化后，56℃水浴30min。10％胎牛血清的RPMI1640滅活的小牛血清10毫升RPMI 1640培養(yǎng)液 90毫升
Hank’s液(無鈣離子、鎂離子)的配制氯化鈉 8.0克氯化鉀 0.4克磷酸氫二鈉(帶一個結(jié)晶水) 0.06克磷酸二氫鉀 0.06克碳酸氫鈉 0.35克葡萄糖 1.0克酚紅 0.02克加入雙蒸水至1000毫升。
將上列成分混合后溶化，8磅15min滅菌，4℃冰箱保存。臨用時用7.4％NaHCO3調(diào)pH至7.3～7.6。
2％臺酚蘭染色液臺酚蘭 2克生理鹽水 100毫升(2)、方法將肝素抗凝的人外周血沿管壁緩慢加于比重為1.077±0.001的聚蔗糖-泛影葡胺淋巴細(xì)胞分層液面上，分離液與肝素抗凝外周血的比例約為2∶1。
水平離心機離心，1,000xg 15-20min，離心后管內(nèi)液體分為3層，用吸管吸取白色云霧層液體帶，置入另一管中。
加入等倍體積的Hank’s液(無血清)，混勻，800-1,000xg，離心15min，棄上清。用Hank’s液離心洗細(xì)胞兩次。
末次離心后，棄上清，加入2ml 10％FCS RPMI1640完全培養(yǎng)液，重懸細(xì)胞。
取一滴細(xì)胞懸液稀釋后做細(xì)胞計數(shù)。數(shù)四個大方格內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)，單個核細(xì)胞濃度(細(xì)胞數(shù)/1毫升細(xì)胞懸液)＝4個大方格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)/4×104×2(稀釋倍數(shù))。
2、獲取CpG ODN(DVAX-1)刺激人外周血PBMC培養(yǎng)上清將含人外周血PBMC的10％FCS RPMI1640完全培養(yǎng)液接種于12孔培養(yǎng)板，每孔2ml，細(xì)胞濃度為4×106細(xì)胞/ml，加濾過除菌的CpG ODN(DVAX-1)，終濃度分別為25μg/ml，12.5μg/ml，6.25μg/ml和3.13μg/ml。設(shè)培養(yǎng)液對照(不加CpG ODN)。37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)48小時，收集上清，置-20℃?zhèn)溆谩?br> 3、抗SARS病毒實驗本實驗在中國疾病預(yù)防控制中心病毒預(yù)防控制所完成。
(1)、材料非洲綠猴腎傳代細(xì)胞(VERO E6)中國疾病預(yù)防控制中心病毒預(yù)防控制所。冠狀病毒Sino-5分離株(SARS病人急性血清04號標(biāo)本)由北京佑安門醫(yī)院提供，中國疾病預(yù)防控制中心病毒預(yù)防控制所鑒定保存。
陽性對照藥物遠(yuǎn)策素(重組人干擾素α2b)，100萬IU/支，文號國藥準(zhǔn)字S19990013，批號000503A，北京遠(yuǎn)策藥業(yè)有限責(zé)任公司出品。
(2)、方法將VERO E6細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板，細(xì)胞的濃度為4×105/ml，37℃、5％CO2培養(yǎng)24小時，吸棄培養(yǎng)液。加入100 TCCID50冠狀病毒Sino-5分離株病毒，37℃、5％CO2培養(yǎng)2小時，棄掉病毒液。加入CpG ODN(DVAX-1)刺激人外周血PBMC培養(yǎng)上清，每孔100μl，設(shè)兩個復(fù)孔。設(shè)重組人干擾素α2b和培養(yǎng)基對照，細(xì)胞對照和病毒對照，37℃、5％CO2培養(yǎng)6天。在顯微鏡下觀察細(xì)胞病變(CPE)，出現(xiàn)25％病變記“+”，出現(xiàn)26~50％病變記”++”，出現(xiàn)51~75％病變記”+++”，出現(xiàn)76~100％病變記”++++”。在觀察CPE結(jié)束后，每孔加100μL0.5％結(jié)晶紫染色液(結(jié)晶紫0.5克，NaCl 0.85克，溶于50ml無水乙醚，3ml甲醛，47ml蒸餾水中)，37℃、5％CO2培養(yǎng)15分鐘。流水沖洗。每孔加入100μl脫色液(乙二醇單甲醚50ml，蒸餾水50ml)。室溫振蕩2小時后，用ELISA檢測儀測OD(492nm)值。
(3)、結(jié)果●CPE法實驗結(jié)果25μg/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶160對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果12.5/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶80對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果6.25/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶40對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果重組人干擾素α2b在稀釋到5萬單位以上對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果。
不含CpG ODN的培養(yǎng)基上清對照冠狀病毒(Sino-5分離株)沒有抑制效果。
●結(jié)晶紫染色法實驗結(jié)果25μg/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶80對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果12.5/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶80對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果6.25/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶20對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果重組人干擾素α2b在稀釋到5萬單位以上對冠狀病毒(Sino-5分離株)有抑制效果。
不含CpG ODN的培養(yǎng)基上清對冠狀病毒(Sino-5分離株)沒有抑制效果。
上述結(jié)果表明，CpG ODN(DVAX-1)刺激的人外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)上清中含抗單股正鏈RNA病毒SARS病毒的物質(zhì)；CpG ODN(DVAX-1)可通過刺激細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒物質(zhì)發(fā)揮抗單股正鏈RNA病毒SARS病毒的作用。
實施例3、人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的抗單股正鏈RNA病毒登革熱病毒的作用1、人外周血單個核細(xì)胞的分離同實施例2。
2、獲取CpG ODN(DVAX-1)刺激人外周血PBMC培養(yǎng)上清同實施例2。
3、抗登革熱病毒實驗(1)、材料登革熱病毒(D2V strain NGC)用C6/36昆蟲細(xì)胞(ATCC)制備。
Vero細(xì)胞來自美國ATCC。
10％FCS RPMI1640完全培養(yǎng)液同實施例2。
(2)、方法將200μl VERO E6細(xì)胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板，細(xì)胞的濃度為4×105/ml，37℃、5％CO2培養(yǎng)24小時，吸棄培養(yǎng)液。加入100 TCCID50登革熱病毒，37℃、5％CO2培養(yǎng)2小時，棄掉病毒液。加入CpG ODN(DVAX-1)刺激人外周血PBMC培養(yǎng)上清，每孔100μl，設(shè)三個復(fù)孔。設(shè)細(xì)胞對照和病毒對照，37℃、5％CO2培養(yǎng)8天。在顯微鏡下觀察細(xì)胞病變(CPE)，出現(xiàn)25％病變記“+”，出現(xiàn)26-50％病變記”++”，出現(xiàn)51-75％病變記”+++”，出現(xiàn)76-100％病變記”++++”。
(3)、結(jié)果(CPE法)25μg/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶80對登革熱病毒有抑制效果12.5/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶80對登革熱病毒有抑制效果6.25/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶40對登革熱病毒有抑制效果不含CpG ODN的培養(yǎng)基上清對登革熱病毒沒有抑制效果。病毒對照的細(xì)胞全部發(fā)生病變。
上述結(jié)果表明，CpG ODN(DVAX-1)刺激的人外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)上清中含抗單股正鏈RNA病毒登革熱病毒的物質(zhì)；CpG ODN(DVAX-1)可通過刺激細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒物質(zhì)而發(fā)揮抗單股正鏈RNA病毒登革熱病毒的作用。
實施例4、人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的抗單股正鏈RNA病毒日本腦炎病毒的作用1、人外周血單個核細(xì)胞的分離同實施例2。
2、獲取CpG ODN(DVAX-1)刺激人外周血PBMC培養(yǎng)上清同實施例2。
3、抗日本腦炎病毒實驗(1)、材料日本腦炎病毒長春生物制品研究所。
BHK-21細(xì)胞來自內(nèi)蒙生物制藥廠。
10％FCS RPMI1640完全培養(yǎng)液同實施例2。
(2)、方法將200μl BHK-21細(xì)胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板，細(xì)胞的濃度為4×105/ml，37℃、5％CO2培養(yǎng)24小時，吸棄培養(yǎng)液。加入100 TCCID50日本腦炎病毒，37℃、5％CO2培養(yǎng)2小時，棄掉病毒液。加入CpG ODN(DVAX-1)刺激人外周血PBMC培養(yǎng)上清，每孔100μl，設(shè)三個復(fù)孔。設(shè)細(xì)胞對照和病毒對照，37℃、5％CO2培養(yǎng)4天。在顯微鏡下觀察細(xì)胞病變(CPE)，出現(xiàn)25％病變記“+”，出現(xiàn)26-50％病變記”++”，出現(xiàn)51-75％病變記”+++”，出現(xiàn)76-100％病變記”++++”。
(3)、結(jié)果(CPE法)25μg/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶160對日本腦炎病毒有抑制效果。
12.5/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶80對日本腦炎病毒有抑制效果6.25/ml CpG ODN(DVAX-1)刺激(48小時)人PBMC培養(yǎng)上清稀釋到1∶40對日本腦炎病毒有抑制效果不含CpG ODN的培養(yǎng)基上清對日本腦炎病毒沒有抑制效果。病毒對照的細(xì)胞全部發(fā)生病變。
上述結(jié)果表明，CpG ODN(DVAX-1)刺激的人外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)上清中含抗單股正鏈RNA病毒日本腦炎病毒的物質(zhì)；CpG ODN(DVAX-1)可通過刺激細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒物質(zhì)而發(fā)揮抗單股正鏈RNA病毒日本腦炎病毒的作用。
序列表<110>長春華普生物技術(shù)有限公司<120>抗單股正鏈RNA病毒人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸<160>107<170>Patent In version 3.1<210>1<211>26<212>DNA<213>Artificial<400>1tcgtcgggtg cgacgtcgca ggggg g 2權(quán)利要求
1.人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸。
2.按照權(quán)利要求1所述的單鏈脫氧寡核苷酸，它們的磷酸二酯鍵可以是非硫化、部分硫化或全部硫化的。
3.按照權(quán)利要求1所述的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸，它們具有SEQ ID NO1-所示的序列。
4.按照權(quán)利要求1-3中任一項所述的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸用于誘生細(xì)胞產(chǎn)生抗單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒物質(zhì)的用途。
5.按照權(quán)利要求1-3中任一項所述的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸用于由單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的傳染性疾病的治療和預(yù)防作用。
6.用人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸治療和預(yù)防由單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的傳染性疾病的技術(shù)方法和技術(shù)設(shè)想。
全文摘要
本發(fā)明提供了含CpG的人工合成的脫氧寡核苷酸單鏈DNA，它能刺激人外周血單個核細(xì)胞(PBMC)產(chǎn)生抗病毒物質(zhì)，這些物質(zhì)可作用于細(xì)胞使其抵抗病毒尤其是單股正鏈RNA病毒的攻擊；提供了人工合成的含CpG單鏈脫氧寡核苷酸的抗單股正鏈RNA病毒特別是SARS病毒、丙型肝炎病毒、登革熱病毒和日本腦炎病毒引起的感染性疾病的治療和預(yù)防作用。
文檔編號C07H21/00GK1590399SQ0315622
公開日2005年3月9日 申請日期2003年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月5日
發(fā)明者王麗穎, 包木勝, 于永利 申請人:長春華普生物技術(shù)有限公司