專(zhuān)利名稱(chēng):天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域,并且涉及可以抑制介導(dǎo)細(xì)胞凋亡和炎癥的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶(caspase)的新化合物及其藥物組合物。本發(fā)明還涉及使用本發(fā)明的化合物和藥物組合物治療與天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性有關(guān)之疾病的方法。
背景技術(shù):
細(xì)胞凋亡或程序性細(xì)胞死亡是生物體排除不需要的細(xì)胞的重要機(jī)制。已證實(shí)細(xì)胞凋亡的失調(diào)(可以是過(guò)度的細(xì)胞凋亡或無(wú)法發(fā)生細(xì)胞凋亡)與一系列疾病例如癌癥、急性炎癥和自身免疫性疾病、局部缺血性疾病和某些神經(jīng)變性疾病有關(guān)(參見(jiàn)Science,1998,281,1283-1312;Ellis等,Ann.Rev.Cell.Biol.,1991,7,663)。
天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶是一族半胱氨酸蛋白酶,它是細(xì)胞凋亡和細(xì)胞分解的信號(hào)傳導(dǎo)途徑的重要介質(zhì)(Thornberry,Chem.Biol.,1998,5,R97-R103)。這些信號(hào)傳導(dǎo)途徑隨著細(xì)胞類(lèi)型和刺激而改變,但所有的細(xì)胞凋亡途徑似乎均集中于一種共同的導(dǎo)致重要蛋白發(fā)生蛋白分解的效應(yīng)物途徑。天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶涉及信號(hào)傳導(dǎo)途徑的效應(yīng)期及其引發(fā)時(shí)的上游。涉及引發(fā)事件的上游天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶被激活并隨后激活涉及細(xì)胞凋亡晚期的其它天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶。
天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1是第一個(gè)被證實(shí)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶,它也被稱(chēng)為白介素轉(zhuǎn)化酶或“ICE”。天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1通過(guò)將前體白介素-1β(“pIL-1β”)在Asp-116和Ala-117之間特異性地裂解將pIL-1β轉(zhuǎn)化成致炎活性形式。除天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1之外,還有11種其它已知的人類(lèi)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶,所有這些酶均可以在天冬氨酰殘基處進(jìn)行特異性地裂解。還發(fā)現(xiàn)它們必需要求在裂解部位的N-末端一側(cè)有至少4個(gè)氨基酸殘基。
依據(jù)其優(yōu)選的或主要識(shí)別的氨基酸序列可將天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶分為3組。已證實(shí)包含天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶1、4、5和13的一組天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶優(yōu)選裂解部位N-末端側(cè)4位上的疏水性芳香族氨基酸。包含天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶2、3和7的另一組可以識(shí)別裂解部位N-末端側(cè)1位和4位上的天冬氨酰殘基,并優(yōu)選Asp-Glu-X-Asp序列。包含天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶6、8、9和10的第三組可以容許主要識(shí)別序列中的多種氨基酸,但似乎優(yōu)選帶有支鏈脂肪族側(cè)鏈的殘基例如4位上的纈氨酸和亮氨酸。
還根據(jù)所了解的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶的功能對(duì)其進(jìn)行了分組。第一亞族由天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1(ICE)、4、5和13組成。已證實(shí)這些天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶與致炎細(xì)胞因子的加工有關(guān),因此在炎癥中起重要作用。天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1是這一類(lèi)型的酶中研究的最多的酶,它可以通過(guò)蛋白分解作用激活I(lǐng)L-1β前體。因此該酶在炎癥反應(yīng)中起重要作用。天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1還與干擾素-γ誘導(dǎo)因子(IGIF)的加工有關(guān),該因子可以刺激干擾素γ的生產(chǎn),而干擾素γ是調(diào)節(jié)抗原呈遞、T細(xì)胞激活和細(xì)胞粘著的重要的免疫調(diào)節(jié)劑。
其余的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶構(gòu)成了第二和第三亞族。這些酶在導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑中是非常重要的。一個(gè)亞族由涉及細(xì)胞凋亡途徑中的起始事件(包括從漿膜傳導(dǎo)信號(hào))的酶組成。該亞族的成員包括天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-2、8、9和10。另一個(gè)亞族由效應(yīng)物天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3、6和7組成,它與導(dǎo)致細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞凋亡發(fā)生系統(tǒng)性破壞和死亡的最終的下游裂解事件有關(guān)。涉及上游信號(hào)傳導(dǎo)的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶可以激活下游的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶,后者可以阻斷DNA修復(fù)機(jī)制、斷裂DNA、分解細(xì)胞骨架并最終使細(xì)胞碎裂。
對(duì)于天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶主要識(shí)別的四種氨基酸序列的了解已被用于設(shè)計(jì)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑。已制備出了結(jié)構(gòu)為CH3CO-[P4]-[P3]-[P2]-CH(R)CH2CO2H的可逆的四肽抑制劑,其中P2至P4表示最佳的氨基酸識(shí)別序列,R是可與天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶的半胱氨酸巰基結(jié)合的醛、腈或酮。Rano和Thornberry,Chem.Biol.4,149-155(1997);Mjalli,等,Bioorg.Med.Chem.Lett.3,2689-2692(1993);Nicholson等,Nature 376,37-43(1995)。還制備出了基于類(lèi)似的四肽識(shí)別序列的不可逆抑制劑,其中R是酰氧基甲基酮-COCH2OCOR’。R’的例子是選擇性取代的苯基例如2,6-二氯苯甲酰氧基并且其中R是COCH2X,其中的X是離去基例如F或Cl。Thornberry等,Biochemistry 33,3934(1994);Dolle等,J Med.Chem.37,563-564(1994)。
已經(jīng)用肽類(lèi)的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑證實(shí)了天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑用于治療與細(xì)胞凋亡增加有關(guān)的各種哺乳動(dòng)物疾病狀態(tài)的用途。例如,在嚙齒動(dòng)物模型中,已證實(shí)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑可以減少梗塞面積并抑制心肌梗塞后心肌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡,減輕由中風(fēng)引起的損傷程度和神經(jīng)病學(xué)缺陷,減少創(chuàng)傷性腦損傷中的創(chuàng)傷后細(xì)胞凋亡和神經(jīng)病學(xué)缺陷,可有效地治療暴發(fā)性肝破壞以及改善內(nèi)毒素性休克后的存活率。Yaoita等,Circulation,97,276(1998);Endres等,J Cerebral Blood Flowand Metabolism,18,238,(1998);Cheng等,J.Clin.Invest.,101,1992(1998);Yakovlev等,J Neuroscience,17,7415(1997);Rodriquez等,J.Exp.Med.,184,2067(1996);Grobmyer等,Mol.Med.,5,585(1999)。
總的來(lái)說(shuō),以上描述的肽類(lèi)抑制劑對(duì)于某些天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶是非常有效的。但是,該效力并不總能反映在細(xì)胞凋亡的細(xì)胞模型上。此外,肽抑制劑通常具有不很理想的藥理學(xué)性質(zhì),例如口服吸收差、穩(wěn)定性差以及代謝迅速等。Plattner和Norbeck,DrugDiscovery Technologies,Clark和Moos編(Ellis Horwood,Chich酯,England,1990)。
在認(rèn)識(shí)到了需要改善肽類(lèi)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑的藥理學(xué)性質(zhì)后,出現(xiàn)了肽模擬抑制劑。其中,將其中的P3氨基酸用3-氨基吡啶-2-酮和5-氨基嘧啶-4-酮衍生物代替的抑制劑受到了大量的關(guān)注(US專(zhuān)利5,756,466(Bemis等);Dolle等J.Med.Chem.39,2438,(1996);Golec等Bioorg.Med.Chem.Lett.7,2181,(1997);Semple等,Biorg.Med.Chem.Lett.7,1337,(1997)),導(dǎo)致產(chǎn)生了如下通式的化合物 其中R1是氫或各種基團(tuán),R2是氫、甲基或乙基,R3是烷基、苯基或苯基烷基,R4是各種基團(tuán)。
由于肽類(lèi)抑制劑所固有的問(wèn)題,一直需要有效、穩(wěn)定并且能穿透膜的小分子、非肽類(lèi)的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑以在體內(nèi)提供對(duì)細(xì)胞凋亡的有效的抑制作用。該化合物在治療與天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶有關(guān)的上述疾病中極為有用。
發(fā)明概述現(xiàn)已發(fā)現(xiàn),本發(fā)明的化合物及其藥物組合物是天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶和細(xì)胞凋亡的有效抑制劑。這些化合物具有通式I的結(jié)構(gòu) 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;環(huán)A含有0-2個(gè)雙鍵,并且選擇性地與含有0-3個(gè)雜原子的飽和或不飽和的5-7元環(huán)稠合;環(huán)A中的X1和X3彼此獨(dú)立地選自氮或碳,X2選自?xún)r(jià)鍵、氧、硫、氮或碳,其中具有適宜化合價(jià)的任何X均可以帶有取代基;環(huán)A、包括稠合的環(huán)(如果存在的話(huà))中具有適宜化合價(jià)的各碳可以彼此獨(dú)立地被氫、鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、NHS(O)2R、=O、=S、=NNHR、=NNR2、=N-OR、=NNHCOR、=NNHCO2R、=NNHSO2R或=NR取代;環(huán)A中的各個(gè)可以被取代的氮被氫、R、COR、S(O)2R或CO2R取代;條件是當(dāng)X3是碳時(shí),X3上的取代基通過(guò)除氮以外的原子連接;進(jìn)一步的條件是環(huán)A中的X至少有一個(gè)是氮。
本發(fā)明的化合物對(duì)一系列天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶靶點(diǎn)具有很強(qiáng)的抑制特性并且在細(xì)胞凋亡的細(xì)胞模型中具有良好的效力。此外,預(yù)期這些化合物具有改善了的細(xì)胞滲透性和藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì),并且,由于它們所具有的效力,預(yù)期它們具有改善的對(duì)與天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶有關(guān)的疾病的效力。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了可用作天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑的新化合物及其可藥用衍生物。這些化合物具有通式I的結(jié)構(gòu) 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;環(huán)A含有0-2個(gè)雙鍵,并且選擇性地與含有0-3個(gè)雜原子的飽和或不飽和的5-7元環(huán)稠合;環(huán)A中的X1和X3彼此獨(dú)立地選自氮或碳,X2選自?xún)r(jià)鍵、氧、硫、氮或碳,其中具有適宜化合價(jià)的任何X均可以帶有取代基;環(huán)A、包括稠合的環(huán)(如果存在的話(huà))中具有適宜化合價(jià)的各碳可以彼此獨(dú)立地被氫、鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、NHS(O)2R、=O、=S、=NNHR、=NNR2、=N-OR、=NNHCOR、=NNHCO2R、=NNHSO2R或=NR取代;環(huán)A中的各個(gè)可以被取代的氮被氫、R、COR、S(O)2R或CO2R取代;條件是當(dāng)X3是碳時(shí),X3上的取代基通過(guò)除氮以外的原子連接;進(jìn)一步的條件是環(huán)A中的X至少有一個(gè)是氮。
在本文中使用如下定義,除非另有說(shuō)明。本文所用的術(shù)語(yǔ)“脂肪族”是指直鏈、支鏈或環(huán)狀的C1-C12烴,它可以是完全飽和的或者可以含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元。例如,適宜的脂肪族基團(tuán)包括取代或未取代的直鏈、支鏈或環(huán)狀的烷基、鏈烯基、鏈炔基及其混合形式例如(環(huán)烷基)烷基、(環(huán)烯基)烷基或(環(huán)烷基)鏈烯基。單獨(dú)使用或作為更大基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“烷基”和“烷氧基”是指含有1至12個(gè)碳原子的直鏈和支鏈的鏈。單獨(dú)使用或作為更大基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”和“鏈炔基”包括含有2至12個(gè)碳原子的直鏈和支鏈的鏈。術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”、“鹵代鏈烯基”和“鹵代烷氧基”是指根據(jù)情況被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代的烷基、鏈烯基或烷氧基。術(shù)語(yǔ)“鹵素”是指F、Cl、Br或I。術(shù)語(yǔ)“雜原子”是指N、O或S,并且包括氮和硫的各種氧化形式以及任何堿性氮的季銨化形式。
單獨(dú)使用或作為更大的基團(tuán)例如“芳烷基”的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“芳基”是指5-14元的芳香環(huán)基團(tuán),例如苯基、芐基、1-萘基、2-萘基、1-蒽基和2-蒽基,以及雜環(huán)芳香族基團(tuán)或雜芳基例如2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噁二唑基、5-噁二唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-噠嗪基、3-噠嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-四唑基、2-三唑基、5-三唑基、2-噻吩基或3-噻吩基。
芳基還包括其中的碳環(huán)芳香族環(huán)或雜芳基環(huán)與一個(gè)或多個(gè)其它的環(huán)稠合的稠合多環(huán)芳香族環(huán)系。其例子包括四氫萘基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、異喹啉基、異吲哚基、吖啶基、苯并異噁唑基等。本文所用的術(shù)語(yǔ)“芳基”還包括其中有一個(gè)或多個(gè)碳環(huán)芳香族環(huán)和/或雜芳基環(huán)與環(huán)烷基或非芳香族的雜環(huán)稠合的基團(tuán),例如二氫化茚基或四氫苯并吡喃基。
非芳香族雜環(huán)是在環(huán)中含有一個(gè)或多個(gè)雜原子例如氮、氧或硫的非芳香族碳環(huán)。該環(huán)可以是5元環(huán)、6元環(huán)、7元環(huán)或8元環(huán)和/或與另一個(gè)環(huán)例如環(huán)烷基或芳香族環(huán)稠合。其例子包括3-1H-苯并咪唑-2-酮、3-1-烷基-苯并咪唑-2-酮、2-四氫呋喃基、3-四氫呋喃基、2-四氫噻吩基、3-四氫噻吩基、2-嗎啉基、3-嗎啉基、4-嗎啉基、2-硫代嗎啉基、3-硫代嗎啉基、4-硫代嗎啉基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、4-噻唑烷基、二唑酮基(diazolonyl)、N-取代的二唑酮基、1-苯并[c]吡咯酮基、苯并噁烷(benzoxane)、苯并三唑-1-基、苯并吡咯烷、苯并哌啶、苯并氧雜環(huán)戊烷、苯并硫雜環(huán)戊烷和苯并噻烷(benzothiane)。
芳基(碳環(huán)和雜環(huán))或芳烷基例如芐基或苯乙基可以含有一個(gè)或多個(gè)取代基。芳基不飽和碳原子上的適宜取代基包括鹵素、-R、-OR、-OH、-SH、-SR、保護(hù)的OH(例如酰氧基)、苯基(Ph)、取代的Ph、-OPh、取代的-OPh、-NO2、-CN、-NH2、-NHR、-N(R)2、-NHCOR、-NHCONHR、-NHCON(R)2、-NRCOR、-NHCO2R、-CO2R、-CO2H、-COR、-CONHR、-CON(R)2、-S(O)2R、-SONH2、-S(O)R、-SO2NHR或-NHS(O)2R,其中R是脂肪族基團(tuán)或取代的脂肪族基團(tuán)。
脂肪族基團(tuán)或非芳香族雜環(huán)可以帶有一個(gè)或多個(gè)取代基。脂肪族基團(tuán)或非芳香族雜環(huán)的飽和碳上的適宜取代基的例子包括以上關(guān)于不飽和碳所列的那些取代基以及如下取代基=O、=S、=NNHR、=NNR2、=N-OR、=NNHCOR、=NNHCO2R、=NNHSO2R或=NR。
芳香族或非芳香族雜環(huán)上的可被取代的氮可以是取代或未取代的。氮上的適宜取代基包括R、COR、S(O)2R和CO2R,其中R是脂肪族基團(tuán)或取代的脂肪族基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“電負(fù)性離去基”具有本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的定義(參見(jiàn)March,Advanced Organic Chemistry,第4版,John Wiley & Sons,1992)。電負(fù)性離去基的例子包括鹵素,例如F、Cl、Br、I、-芳基和烷基磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基。
羧酸、酯和酰胺的等配物或生物等配物通過(guò)替換一個(gè)原子或多個(gè)原子的基團(tuán)而形成,生成與母體羧酸、酯或酰胺具有相似生物學(xué)性質(zhì)的新化合物。生物等配物置換可以以物理化學(xué)或拓?fù)鋵W(xué)為基礎(chǔ)。羧酸的等配物置換的例子是CONHSO2(烷基)例如CONHSO2Me。
其中R2是COOH或CH2COOH的本發(fā)明化合物是γ(y=1)或δ-酮基酸(y=2),它們可以在溶液中以開(kāi)環(huán)的形式1或環(huán)化的半縮酮形式2存在。本文中所表示的任何一種異構(gòu)體均另外一種。 形式1形式2同樣,對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的是,某些本發(fā)明的化合物可以以互變異構(gòu)體的形式或水合物的形式存在,所有這些化合物的形式均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。若無(wú)另外說(shuō)明,本文中所描述的結(jié)構(gòu)均包括該結(jié)構(gòu)的所有立體化學(xué)形式,即各不對(duì)稱(chēng)中心的R和S構(gòu)型。因此,本發(fā)明化合物的單個(gè)立體化學(xué)異構(gòu)體以及對(duì)映體和非對(duì)映體混合物均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。若無(wú)另外說(shuō)明,本文中所描述的結(jié)構(gòu)還包括區(qū)別僅在于存在一種或多種同位素富集的原子的化合物。例如,將氫用氘或氚代替或?qū)⑻加?3C-或14C-富集的碳代替的具有本發(fā)明結(jié)構(gòu)的化合物均在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物是其中R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物的式I化合物。更優(yōu)選其中R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物并且X1是氮的式I化合物。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1是氮,X2和X3是碳并且和環(huán)A含有兩個(gè)雙鍵的式I化合物。這些化合物用式IA表示 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4-R6彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R;R7選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、CN、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R或SO2NHR。
優(yōu)選的式IA化合物是其中R1是CH2F,R2是CO2H,R3是氫或甲基,R4-R6彼此獨(dú)立地選自氫、R、苯基或取代的苯基,R7是氫、R、苯基或取代的苯基的化合物。IA化合物的例子如表1中所示。表1.式IA化合物的例子
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1是氮,X2和X3是碳,環(huán)A含有兩個(gè)雙鍵,R4和R5合在一起形成稠合的、芳香族或非芳香族碳環(huán)的式I化合物。優(yōu)選該碳環(huán)是稠合的苯環(huán)。該優(yōu)選的化合物具有通式IB的結(jié)構(gòu),其中R1、R2、R3、R6和R7如上所定義,稠合的苯環(huán)可以是取代或未取代的。IB化合物的例子如表2中所示。
表2.式IB化合物的例子
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1是氮,X2是氮或碳,X3是碳,X2和相鄰的CR4之間的鍵是雙鍵或單鍵并且R6和R7合在一起形成稠合的、芳香族或非芳香族碳環(huán)的式I化合物。優(yōu)選該碳環(huán)是稠合的苯環(huán)。該優(yōu)選的化合物具有通式IC的結(jié)構(gòu),其中R1-R5如上所定義,稠合的苯環(huán)可以是取代或未取代的。IC化合物的例子如表3中所示。
表3.式IC化合物的例子
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1和X3是氮,X2是碳,環(huán)A含有一個(gè)雙鍵并且R5和R6合在一起形成環(huán)、優(yōu)選芳香族碳環(huán)的式I化合物。這些化合物具有如下所示的通式ID的結(jié)構(gòu),其中R1-R4和R7如上所定義。ID化合物的例子如表4中所示。
表4.式ID化合物的例子
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1是氮,X2是氮或碳,X3是碳,X2和相鄰的CR4之間的鍵是雙鍵或單鍵并且R6和R7合在一起形成稠合的、芳香族或非芳香族雜環(huán)的式I化合物。這些化合物具有通式IE的結(jié)構(gòu),其中R1-R5如上所定義,稠合的雜環(huán)可以是取代或未取代的。優(yōu)選所述的雜環(huán)是含有一個(gè)環(huán)雜原子的5或6元環(huán)。這些化合物具有如下所示的通式IE的結(jié)構(gòu)。IE化合物的例子如表5中所示。
表5.式IE化合物的例子(R1是CH2F;R2是CO2H)
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1是氮,X2是鍵,X3是碳并且R6和R7合在一起形成稠合的、芳香族或非芳香族雜環(huán)的式I化合物。這些化合物具有通式IF的結(jié)構(gòu),其中R1-R5如上所定義,稠合的環(huán)可以是取代或未取代的。優(yōu)選稠合的環(huán)是6元環(huán)。這些化合物具有如下所示的通式IF的結(jié)構(gòu)。IF化合物的例子如表6中所示。
表6.IF化合物的例子
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及其中X1是氮,X2是氮,X3是碳并且環(huán)A含有兩個(gè)雙鍵的式I化合物。這些化合物具有通式IG的結(jié)構(gòu),其中R1-R7如上所定義。IG化合物的例子如表7中所示。
表7.IG化合物的例子
本發(fā)明化合物可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的用于制備類(lèi)似化合物的方法進(jìn)行制備,將通過(guò)以下反應(yīng)方案和隨后的制備例舉例說(shuō)明。反應(yīng)方案I 試劑(a)NaH/THF;(b)NaOH/THF/H2O;(c)EDC/DMAP/HOBt;(d)Dess-Martin periodinane;(e)TFA/DCM在以上反應(yīng)方案I中,使用了如下縮寫(xiě)EDC是1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺;HOBT是-1羥基苯并三唑;TFA是三氟乙酸;DCM是二氯甲烷;DMAP是4-二甲基氨基吡啶。若無(wú)另外說(shuō)明,原料雜環(huán)1可以購(gòu)買(mǎi)到或者可以通過(guò)與Fuss和Koch,Synthesis(1990),681-685中所述類(lèi)似的方法制備。首先將原料雜環(huán)1用氫化鈉處理,然后用酯2(LG是離去基例如溴或O-三氟甲磺酸酯)處理。將形成的酯3(例如,Y=烷基)先用堿水解,或者,當(dāng)Y是叔丁基時(shí),用三氟乙酸水解。然后將酸3(Y=H)與氨基醇4偶聯(lián)。根據(jù)R1和R2的性質(zhì),可以使用氨基酮代替氨基醇,這可以避免隨后的氧化步驟。在氟甲基酮的情況下(其中R1是CH2F),氨基醇4可以按照Revesz等,Tetrahedron Lett.,1994,35,9693的方法制備。最后將化合物5中的羥基氧化并根據(jù)R2的性質(zhì)對(duì)化合物進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚怼@?,如果產(chǎn)物I需要R2是羧酸,則4中的R2優(yōu)選是酯并且反應(yīng)方案中的最后步驟是水解。
因此,本發(fā)明的一個(gè)方面涉及制備式I化合物的通用方法,該方法包括如下步驟
(a)提供式II的酸或酸衍生物, (b)將II與式4的氨基醇或氨基酮偶聯(lián)得到式III的中間體, 和(c)將中間體III轉(zhuǎn)化成化合物I,其中Y是氫或有機(jī)基團(tuán);Z是=O或OH;環(huán)A、R1、R2、R3、X1、X2和X3如上所定義。
該方法特別適用于制備本發(fā)明的手性化合物,其中帶有R3取代基的碳是立體化學(xué)富集的。正如以下將要舉例說(shuō)明的(參見(jiàn)實(shí)施例21-27),式II的中間體酸或酸衍生物可以以手性的形式得到。其中所列舉的環(huán)A的例子是喹唑啉-4-酮(實(shí)施例21-24、26)、嘧啶-4-酮(實(shí)施例25)和二氫喹唑啉-3-酮(實(shí)施例27)。II和4偶聯(lián)生成III的步驟(b)可以按照任何適宜的方法進(jìn)行。應(yīng)當(dāng)理解,當(dāng)4是酮(Z=O)時(shí),它可能需要在II的存在下通過(guò)就地將氨基脫保護(hù)生成。在步驟(c)中,將III轉(zhuǎn)化成I的反應(yīng)取決于Z和R2的性質(zhì)。如需要,這些基團(tuán)的合成操作可以按照本文中的描述或按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法進(jìn)行。
用于制備本發(fā)明化合物的某些手性中間體II是新的。這些中間體可用嘧啶酮IIA和喹唑啉酮IIB表示 其中Y是氫或有機(jī)基團(tuán),嘧啶酮和喹唑啉酮環(huán)選擇性地按照以上關(guān)于環(huán)A的描述被取代,R3是C1-6烷基。反應(yīng)方案II 試劑(a)甲酸乙酯/二異丙基胺;(b)ArCOCl/THF;(c)PPh3/二甲苯;(d)TFA/DCM;(e)EDC/DMAP/HOBt;(f)Dess-Martin periodinane;(g)TFA/DCM在以上反應(yīng)方案II中,將原料氨基酸酯6(其可以購(gòu)買(mǎi)到或者在常規(guī)條件下合成)先甲?;缓笥没罨衫珲B刃问降?-疊氮基芳香族酸處理。將形成的酰胺7用還原劑例如三苯基膦處理并將形成的酯(例如,Y=烷基)用堿水解,或者,當(dāng)Y是叔丁基時(shí),用三氟乙酸水解。然后按照反應(yīng)方案I中的描述完成合成。反應(yīng)方案III 試劑(a)EDC/DMAP/HOBt;(b)HCl/EtOAc;(c)(EtO)3CH/二甲苯;(d)EDC/DMAP/HOBt;(e)Dess-Martin periodinane;(f)TFA/DCM在以上反應(yīng)方案III中,將原料氨基酸酯6(其可以購(gòu)買(mǎi)到或者通過(guò)已知方法合成)與不飽和的氨基酸在常規(guī)條件下偶聯(lián)得到酰胺10。將酰胺10(例如,P=Boc)在酸性條件下脫保護(hù)并將形成的胺和甲?;噭├缭姿崛阴ヒ黄鸺訜?。然后將中間體進(jìn)行熱逆向-DielsAlder反應(yīng)得到11。然后按照反應(yīng)方案I中的描述完成合成。反應(yīng)方案IV 試劑(a)Et3N/EtOH/18;(b)RaNi/H2/EtOH;(c)CDI/THF;(d)NaH/DMSO/化合物15;(e)TFA/DCM;(f)化合物4/EDC/DMAP/HOBt;(g)Dess-Martin periodinane;(h)TFA/DCM在以上反應(yīng)方案IV中,將原料氨基酸酯6用芐基烷基化(其中LG可以是鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯等)得到化合物13。將化合物13中的硝基還原(例如用阮內(nèi)鎳)然后將二胺在羰基源(例如羰基二咪唑,“CDI”)上環(huán)化得到喹唑酮14??蓪⑿纬傻挠坞xNH烷基化得到化合物16。然后按照反應(yīng)方案I中的描述完成合成。
實(shí)施例15-氟-4-氧代-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙?;被鵠-戊酸(1A-2) 步驟A(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙酸乙酯。
在室溫下將攪拌中的1H-吡啶-2-酮(500mg,5.26mmol)的無(wú)水THF(50ml)溶液用60%NaH(231mg,5.78mmol)進(jìn)行處理。將反應(yīng)混合物保持10分鐘,然后于室溫下將該反應(yīng)混合物在5分鐘內(nèi)加入到(R)-2-三氟甲磺酰氧基)丙酸乙酯(1315mg,5.26mmol)的無(wú)水THF(2.5ml)溶液中。將形成的混合物攪拌2小時(shí),然后濃縮。將殘余物重新溶于乙酸乙酯并將形成的溶液用冰冷的稀HCl洗滌。除去有機(jī)層,將水層用乙酸乙酯再次萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后濃縮。將殘余物通過(guò)色譜純化(20%至80%乙酸乙酯的己烷溶液)得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(480mg,46%)[α]27D=-56.4°(c=0.275,CH2Cl2);1H NMR(400MHz CDCl3)δ1.3(3H,t),1.65(3H,d),4.2(2H,q),5.6(1H,q),6.2(1H,t),6.4(1H,d),7.2-7.3(2H,m).步驟B(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙酸將攪拌中的(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙酸乙酯(364mg,1.87mmol)、THF(2ml)、水(1ml)和氫氧化鈉(90mg,2.24mmol)的混合物在室溫下保持1小時(shí),然后將其減壓濃縮。將殘余物重新溶于乙醚并將形成的溶液用水洗滌。除去有機(jī)層,將水層用濃HCl酸化,然后用乙酸乙酯萃取數(shù)次。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后濃縮。將殘余物用乙醚研磨,得到無(wú)色固體狀的標(biāo)題化合物(84mg,27%)[α]31D=-50°(c=0.2,CH3OH);1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.5(3H,d),5.1(1H,q),6.2(1H,t),6.4(1H,d),7.4(1H,m),7.6(1H,d).步驟C5-氟-4-羥基-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙?;被鵠-戊酸叔丁酯將攪拌中的(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙酸(70mg,0.42mmol)、3-氨基-5-氟-4-羥基-戊酸叔丁酯(91mg,0.44mmol)、HOAt(63mg,0.46mmol)和DMAP(59mg,0.48mmol)及無(wú)水THF(5ml)的混合物冷卻到0℃,然后向該混合物中加入EDC(88mg,0.46mmol)。將該混合物在16小時(shí)內(nèi)升溫至室溫,然后將其減壓濃縮。將殘余物通過(guò)色譜純化(3%甲醇的乙酸乙酯溶液)得到白色泡沫狀的標(biāo)題化合物(137mg,92%)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.3-1.5(9H,2xs),2.5-2.7(2H,m),3.4-3.7(1H,m),3.9-4.6(4H,m),5.4-5.6(1H,m),6.2-6.3(1H,m),6.5-6.6(1H,m),7.1-7.6(3H,m);19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-230.14,-230.14,-230.17,-230.95,-231.07.步驟D5-氟-4-氧代-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙?;被鵠-戊酸叔丁酯在0℃下,將攪拌中的5-氟-4-羥基-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙?;被鵠-戊酸叔丁酯(135mg,0.38mmol)的無(wú)水DCM(5ml)溶液用1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氫-1,2-苯并二氧雜環(huán)戊烯-3(1H)-酮(193mg,0.46mmol)進(jìn)行處理。將形成的混合物于0℃保持1.5小時(shí),用乙酸乙酯稀釋?zhuān)缓髮⒃摶旌衔锏谷腼柡吞妓釟溻c水溶液和飽和硫代硫酸鈉水溶液的1∶1混合物中。除去有機(jī)層,將水層用乙酸乙酯再次萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(Na2SO4)并濃縮。將殘余物通過(guò)色譜純化(1%甲醇的乙酸乙酯溶液)得到無(wú)色膠狀的標(biāo)題化合物(125mg,93%)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.2-1.4(9H,2xs),2.6-2.9(2H,m),4.7-4.9(1H,m),4.9-5.3(2H,m),5.6-5.7(1H,m),6.2-6.3(1H,m),6.5-6.6(1H,m),7.2-7.4(1H,m),7.5-7.6(1H,m),8.0-8.2(1H,m);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ16.57,16.87,28.24,28.29,36.44,36.60,52.50,52.62,52.90,53.09,82.31,82.44,83.51,83.72,85.33,85.55,107.35,107.44,120.45,120.49,134.42,134.67,140.22,140.36,162.85,162.98,169.93,169.99,170.59,170.63,202.58,202.64,202.75,202.80;19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-231.94,-231.96,-232.48,-232.49.步驟E5-氟-4-氧代-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙?;被鵠-戊酸將三氟乙酸(2ml)加入到攪拌中的冰冷的5-氟-4-氧代-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-丙酰基氨基]-戊酸叔丁酯(115mg,0.32mmol)的無(wú)水二氯甲烷(2mL)溶液中。將混合物于0℃攪拌0.5小時(shí),然后室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。將混合物減壓濃縮,然后將殘余物重新溶于干燥的二氯甲烷中。將該過(guò)程重復(fù)數(shù)次以除去過(guò)量的三氟乙酸。將膠狀物用HPLC級(jí)水冷凍干燥兩次,得到米白色固體狀的標(biāo)題化合物IR(固體)1789,1730,1654cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.4-1.6(3H,m),2.5-2.9(2H,m),4.2-4.7(2H,m),5.0-5.5(2H,m),6.2-6.3(1H,m),6.3-6.5(1H,m),7.3-7.4(1H,m),7.6-7.7(1H,m),8.4-8.9(1H,m);13C NMR(100MHz,DMSO)δ17.15,17.27,17.61,17.87,17.94,33.50,33.57,35.02,35.23,35.31,52.69,53.08,53.31,53.42,53.47,53.79,53.91,54.49,54.85,81.55,81.92,83.31,83.68,83.95,84.07,85.72,85.84,105.87,106.07,106.19,119.67,119.86,120.26,137.05,137.31,137.36,137.40,137.43,140.60,140.65,140.74,140.85,162.14,162.18,162.28,162.32,171.25,171.48,171.62,171.69,172.55,172.63,173.63,173.67,174.52,203.04,203.18,203.28,203.42;MS(FAB+ve,HR)C13H16FN2O5(MH+)的計(jì)算值299.1043,實(shí)測(cè)值299.1045。
實(shí)施例2 5-氟-3-[2-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-乙?;被鵠-4-氧代-戊酸(1A-1)按照與實(shí)施例1所述類(lèi)似的方式制備,所不同的是在步驟A中用溴乙酸乙酯代替(R)-2-三氟甲磺酰氧基)-丙酸乙酯。分離得到黃色固體狀的產(chǎn)物IR(固體)1657.5,1694.3,1781.3 cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.5-2.9(2H,m),4.3-4.7(3.5H,m),5.1-5.5(1.5H,m),6.2(1H,m),6.3-6.4(1H,m),7.4(1H,m),7.6(1H,m),8.5-9.0(1H,m);13CNMR(100MHz,DMSO)δ(DMSO)28.71,33.17,51.13,51.64,51.70,52.25,52.91,80.96,81.74,82.72,83.46,83.59,85.35,105.16,105.23,105.31,119.54,140.71,140.82,140.89,161.82,161.87,161.94,167.62,167.73,168.18,172.12,173.14,173.80,202.76,202.89;19F(376MHz,DMSO)δ-226.9(t),-231.8(t),-233.3(t).
實(shí)施例3 5-氟-3-[2-(6-甲基-2-氧代-2H-吡啶-1-基)-乙?;被鵠-4-氧代-戊酸(1A-3)按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式制備,得到無(wú)色結(jié)晶IR(固體)3276,1741,1716,1669,1642,1548,1414,1377,1352,1273,1248,1227,1189,1163,1043,796cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.25(3H,s),2.55-2.95(2H,m),4.3-4.8(3H,m),5.1-5.35(2H,m),6.06(1H,m),6.22(1H,m),7.27(1H,m),8.51,8.82(1H,2xd);13C NMR(100MHz,DMSO)δ20.83,34.83,46.47,52.15,83.52,85.29,103.82,116.32,139.97,162.8,167.8,172.0,173.1,202.86.
實(shí)施例4 5-氟-3-[2-(4-苯基-2-氧代-2H-吡啶-1-基)-乙?;被鵠-4-氧代-戊酸(1A-4)按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式從4-苯基嘧啶-2-酮(Iwasaki等,J.Med.Chem.1996,39,2696)制備,得到無(wú)色固體IR(固體)3307.5,3216.5,1787.8,1659.7,1582.9,1567.6,1219.4,1055.5,927.5,763.6cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.66(1H,m),2.85(1H,m),4.31-4.72(3H,m),5.28(2H,m),6.59(1H,m),6.69(1H,m),7.51(3H,m),7.70(3H,m),8.50-8.95(1H,br);13C NMR(100MHz,DMSO)δ33.2,34.7,47.6,50.8,51.4,52.3,83.6,85.4,103.8,104.0,104.2,104.3,115.3,127.0,129.4,129.9,137.1,140.7,151.4,151.6,161.9,162.0,167.8,168.2,172.1,173.1,202.7,202.9;19F(376MHz,DMSO)δ-226.8(t),-231.8(t),-233.27(t).
實(shí)施例5 5-氟-3-[2-(3-苯基-2-氧代-2H-吡啶-1-基)-乙?;被鵠-4-氧代-戊酸(1A-5)從3-苯基嘧啶-2-酮制備。通過(guò)將嘧啶-2-酮(Oswald和Martinu J.Am.Chem.Soc.,1982,104,4142)溴化制備3-苯基嘧啶-2-酮,然后按照Damewood等描述的方法(J.Med.Chem.,1994,37,3303)用苯硼酸進(jìn)行鈀介導(dǎo)的偶聯(lián)。按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式完成其余的合成部分,得到無(wú)色固體IR(固體)3392.3,2941.1,1745.4,1673.9,1635.4,1564.0,1396.3,1236.2,1203.4,775.5,700.9cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.64(1H,m),2.79(1H,m),4.21-4.81(3H,m),5.29(2H,m),6.37(1H,m),7.28-7.41(3H,m),7.62-7.25(4H,m),8.2-8.9(1H,brm);13C NMR(100MHz,DMSO)δ32.2,34.8,47.6,51.9,52.2,52.3,80.9,82.7,83.6,85.4,103.8,104.0,105.4,105.5,105.6,127.6,127.7,128.2,129.6,137.0,137.1,137.2,138.6,138.8,139.5,140.1,158.4,160.8,160.9,162.7,167.7,168.2,169.9,172.1,173.1,202.7,202.9;19F(376MHz,DMSO)δ-226.8(t),-231.6(t),-233.2(t).
實(shí)施例6 5-氟-4-氧代-3-[(S)-2-(2-氧代-2H-喹啉-1-基)-丙?;被鵠-戊酸(1B-1)按照與實(shí)施例1所述類(lèi)似的方式制備,得到白色粉末IR(固體)1782,1737,1641cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.5(3H,m),2.3-2.4(0.5H,m),2.6-3.1(1.5H,m),4.2-4.8(1.6H,m),5.0-5.5(1.4H,m),5.5-6.0(1H,br s),6.6(1H,m),7.3(1H,m),7.3-7.7(2H,br m),7.7-7.8(1H,m),7.9-8.0(1H,m),8.2-8.5(1H,br m);13CNMR(100MHz,DMSO)δ14.06,14.13,14.25,14.39,32.77,32.85,34.29,34.43,51.75,51.99,52.30,53.05,83.41,83.49,85.17,85.26,114.56,114.94,115.13,115.38,120.95,121.43,121.35,121.61,122.34,122.42,122.48,129.53,129.59,129.65,130.66,130.84,130.91,130.95,131.18,140.24,140.32,158.36,158.70,160.98,161.41,161.47,167.71,170.38,171.86,172.14,172.16,173.26,202.35,202.49,202.53,202.66;MS(FAB+ve,HR)C17H18FN2O5(MH+)的計(jì)算值349.1200,實(shí)測(cè)值349.1206。
實(shí)施例7 5-氟-4-氧代-3-[(S)-(R)-2-(2-氧代-2H-喹啉-1-基)-乙?;被鵠-戊酸(1B-2)按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式制備,得到白色粉末IR(固體) 1784,1738,1703,1638cm-1;1HNMR(400MHz,DMSO)δ2.5-3.2(2H,m),4.3-4.7(1.3H,m),4.8-5.4(3.7H,m),6.6(1H,m),7.2-7.3(2H,m),7.5-7.6(1H,m),7.7-7.8(1H,m),7.9-8.0(1H,m),8.5-9.0(1H,m);13C NMR(100MHz,DMSO)δ33.25,34.90,44.51,44.64,44.74,47.71,52.81,81.22,81.59,82.98,83.32,83.51,85.28,114.80,120.48,120.53,120.97,121.09,122.36,122.41,129.24,131.02,131.06,131.21,139.92,139.99,140.27,140.34,140.48,161.48,161.56,167.54,167.74,168.09,172.08,173.13,173.93,202.59,202.73;MS(FAB+ve,HR)C16H16FN2O5(MH+)的計(jì)算值335.1043,實(shí)測(cè)值335.1046。
實(shí)施例8 5-氟-4-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-乙?;被鵠-戊酸(1C-1)按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式制備,得到白色粉末IR(固體)1778,1738,1688,1646cm-11HNMR(400MHZ,DMSO)δ2.6-3.2(2H,m),4.3-4.7(3H,m),5.1-5.4(2H,m),6.6(1H,m),7.4-7.6(2H,m),7.6-7.8(2H,m),8.2(1H,m),8.4-8.9(1H,m);13C NMR(100MHz,DMSO)δ33.20,34.85,51.01,51.40,47.59,52.19,52.91,81.03,81.72,82.79,83.44,83.56,85.32,104.89,104.97,105.05,125.57,125.59,126.48,126.88,126.93,127.25,127.28,132.70,132.74,134.44,134.48,137.61,137.64,161.51,161.58,161.64,167.95,168.07,168.46,172.60,173.13,173.81,202.72,202.86,204.52;MS(FAB+ve,HR)C16H16FN2O5(MH+)的計(jì)算值335.1043,實(shí)測(cè)值335.1044。
實(shí)施例9 5-氟-4-氧代-3-[(S)-2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙酰基氨基]-戊酸(1C-2)按照與實(shí)施例1所述類(lèi)似的方式制備,得到白色粉末IR(固體)1783,1739,1646cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.5-1.6(3H,m),2.5-3.0(2H,m),4.3-4.8(1.7H,m),5.0-5.7(2.3H,m),6.6-6.7(1H,m),7.4-7.6(2H,m),7.6-7.8(2H,m),8.2(1H,m),8.2-8.9(1H,m);13C NMR(100MHz,DMSO)δ16.07,16.71,16.80,17.03,17.28,17.32,32.99,34.58,34.71,52.24,52.46,52.82,52.88,53.06,53.20,53.49,53.80,54.18,83.43,83.52,85.20,85.29,105.19,105.33,105.37,105.46,105.49,125.43,125.48,125.53,125.57,126.35,126.42,126.87,126.91,126.94,127.02,127.41,127.49,127.58,130.28,130.44,130.50,130.57,131.47,132.81,137.09,137.11,137.15,161.13,161.26,161.34,161.42,170.74,170.91,171.18,171.30,172.04,172.09,172.31,173.15,173.18,202.56,202.68,202.70,202.82;MS(FAB+ve,HR)C17H18FN2O5(MH+)的計(jì)算值349.1200,實(shí)測(cè)值349.1198。
實(shí)施例10 5-氟-4-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-乙酰基氨基]-戊酸(1C-3)按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式制備,得到白色粉末IR(固體)1784,1721,1667 cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.6-3.0(1.9H,m),3.2(0.1H,m),4.3-4.6(0.6H,m),4.6-4.7(1H,m)4.7(2H,m),5.1-5.4(1.4H,m),7.5-7.6(1H,m),7.7(1H,m),7.8-7.9(1H,m),8.1-8.2(1H,m),8.3-8.4(1H,m),8.6-9.0(1H,m);13CNMR(100MHz,DMSO)δ33.17,34.85,48.25,48.54,48.62,47.68,52.22,53.01,80.99,81.62,82.75,83.35,83.51,85.28, 121.75, 126.39, 127.38, 127.43, 127.48, 127.52,134.85, 134.89, 148.13, 148.19, 148.88, 149.01, 160.47,160.56, 160.61, 167.32, 167.46, 167.80, 172.04, 173.06,173.70, 202.55, 202.69, 203.59, 204.52; MS(FAB+ve,HR)C15H15FN3O5(MH+)計(jì)算值336.0996,實(shí)測(cè)值336.0996。
實(shí)施例11 5-氟-4-氧代-3-[2-(1-氧代-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基)-乙?;被鵠-戊酸(1C-4)按照與實(shí)施例1所述類(lèi)似的方式從3,4-二氫-1H-導(dǎo)喹啉-1-酮(Norman等,J.Med.Chem.,1994,37,2552)制備,得到白色粉末IR(固體)1793,1655,1539,1209,1175,1154,1062,1037,942,748cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.54-2.95(4H,m),4.01-4.81(5H,m),4.91-5.60(3H,br m),7.24-7.41(2H,m),7.50-7.52(1H,m),7.95(1H,m),8.20-8.65(1H,brm);13C NMR(100MHz,DMSO)δ27.6,33.1,34.8,47.2,47.4,50.1,50.4,52.0,52.7,81.2,81.6,82.9,83.5,85.3,103.9,104.0,127.0,127.7,127.8,129.1,129.2,132.1,132.15,139.3,139.4,164.1,164.2,164.3,168.8,168.9,169.4,172.1,173.2,173.9,202.8,202.9;19F(376MHz,DMSO)δ-229.9(t),-230.8(t),-232.2(t).
實(shí)施例12 5-氟-4-氧代-3-[2-(4-氧代-4H-噻吩并[2,3-d]嘧啶-3-基)-乙?;被鵠-戊酸按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式制備,得到白色粉末IR(固體)1666.2,1723.8,1783.7cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.6-3.2(2H,m),4.3-4.5(0.3H,m),4.6-4.8(1H,m),4.8(2H,m),5.1-5.4(1.7H,m),7.4(1H,m),7.6(1H,m),8.4(1H,m),8.7-9.1(1H,m).
實(shí)施例13 5-氟-4-氧代-3-[2-(1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-乙?;被鵠-戊酸(1F-1)用與步驟C-E所述類(lèi)似的方法從2-(1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-乙酸制備,得到白色固體狀標(biāo)題化合物。IR(固體)1782,1731,1660,1532,1470,1455,1419,1209,1055,922cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.58-2.90(2H,m),4.20-4.73 5H),5.18(1H,dd),5.29(1H,dd),7.50(1H,m),7.61(2H,m),7.71(1H,m),8.38/8.69(1H,2d);19FNMR(376MHz,DMSO-d6)δ-227.0(t),-23 0.9(t),-232.6(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ34.8,45.0,50.9,52.0,84.3,123.2,123.8,128.2,131.9,132.2,142.6,168.2,168.8,169.0,172.1,202.7.
實(shí)施例145-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-丙酰基氨基]-戊酸(1F-2) 步驟F(2S)-2-(1,3-二氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)丙酸叔丁酯將(2S)丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽(2.05g,11.2mmol)、二異丙基乙基胺(1.83mL,10.6mmol)和鄰苯二甲酸酐(1.48g,10mmol)的甲苯(10ml)懸浮液在迪安斯塔克條件下回流3小時(shí)。將該反應(yīng)液冷卻至室溫,用Et2O稀釋?zhuān)来斡?N HCl和飽和NaHCO3水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后蒸發(fā)得到白色粉末狀的小標(biāo)題化合物(2.465g,90%)1H NMR(400MHz CDCl3)δ1.45(9H,s),1.68(3H,d),4.90(1H,q),7.75(2H,d),7.88(2H,d)。步驟G(2S)-2-(1-羥基-3-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-丙酸叔丁酯向THF(10mL)和MeOH(2mL)的混合物中的(2S)-2-(1,3-二氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-丙酸叔丁酯(426mg,1.55mmol)溶液中一次性加入硼氫化鈉(181mg,4.8mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘,然后于室溫蒸除溶劑,將殘余物用硅膠柱色譜純化(石油醚/AcOEt,8/2)得到無(wú)色油狀的小標(biāo)題化合物(284mg,66%)1H NMR(400MHz CDCl3)δ1.38-1.40(9H,2s),1.57-1.60(3H,2d),4.38-4.45(1H,m),4.65-4.76(1H,m),5.81-6.01(1H,2d),7.33-7.64(4H,d).步驟H(2S)-2-(1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)丙酸向(2S)-2-(1-羥基-3-氧代-1,3-二氫異吲哚-2-基)-丙酸叔丁酯(271mg,0.98mmol)的TFA(5mL)溶液中一次性加入三乙基硅烷(170mg,1.47mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí),然后蒸除溶劑。將殘余物用Et2O研磨然后過(guò)濾,得到白色固體狀的小標(biāo)題化合物(165mg,82%)1H NMR(400MHz DMSO-d6)δ1.51(3H,d),4.49-4.55(2H,m),4.85(1H,q),7.51-7.71(4H,m),12.90(1H,brs).
用與上面的步驟C-E所述類(lèi)似的方法從(2S)-2-(1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-丙酸制備5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-丙?;被鵠-戊酸。得到白色固體狀標(biāo)題化合物。IR(固體)1736,1660,1527,1450,1360,1226,1222cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.42-1.46(3H,m),2.68(1H,m),2.74(1H,m),4.52-4.63(3H,m),4.85(1H,m),5.14-5.76(2H,br m,),7.48-7.53(1H,m),7.62-7.63(2H,m),7.70-7.72(1H,m),8.66(1H,br s),12.50(1H,br s);19FNMR(376MHz,DMSO-d6)δ-232.6;13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ16.0,34.4,47.4,49.9,52.2,123.1/123.2,123.8,128.2,131.8,132.4,142.8,167.9,172.5.
實(shí)施例15 5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(1,3-二氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-丙?;被鵠-戊酸(1F-3)用與上面的步驟F、然后是C-E中所述類(lèi)似的方法從(2S)-2-(1,3-二氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)丙酸叔丁酯制備。得到無(wú)色粘稠油狀的標(biāo)題化合物。IR(薄膜)1777,1706,1644,1532,1383,1363,1204,1158,1045cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.49-1.56(3H,m),2.42-2.49(1H,m),2.74-2.82(1H,m),4.31-4.90(2H,m),4.91-5.39(2H,m),7.86-7.92(4H,m),8.59/8.72(1H,2d);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-226.7,-226.8,-231.0,-232.2,-233.0,-233.1;13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ15.1/15.2,34.3/34.4,48.0/48.1,52.2/52.5,84.1/84.2,123.4/123.5,123.5/123.7,132.2,134.7/134.8,134.8/135.1,167.7,169.7/169.8,172.0/172.1,202.3.
實(shí)施例16 2,6-二氯-苯甲酸4-羧基-2-氧代-3-[2-(1-氧代-IH-異喹啉-2-基)-丙?;被鵠-丁酯(1C-5)步驟I2,6-二氯-苯甲酸4-叔丁氧羰基-2-羥基-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙?;被鵠-丁酯室溫下,將攪拌中的無(wú)水DMF(1.5ml)和CH2Cl2(4.5ml)的混合物中的2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙酸(150mg,0.7mmol)和2,6-二氯-苯甲酸3-烯丙氧基羰基氨基-4-叔丁氧基羰基-2-羥基-丁酯(319mg,0.7mmol)溶液用催化量的二(三苯基膦)氯化鈀(II)進(jìn)行處理,接著向其中滴加三丁基氫化錫(279?m,1.0mmol)。5分鐘后,加入HOBt(186mg,1.4mmol),將反應(yīng)混合物冷卻到0℃,向該混合物中加入EDC(132mg,0.7mmol),然后將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)并緩慢升溫至室溫。將反應(yīng)混合物倒入冰冷的1M HCl中并用EtOAc萃取,然后將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌,隨后用飽和氯化鈉溶液洗滌,干燥(Na2SO4)、過(guò)濾然后濃縮。將殘余物用石油醚研磨,然后用1∶1的石油醚/EtOAc作為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化,得到無(wú)色泡沫狀的小標(biāo)題化合物(190mg,48%);1H NMR(400MHzCDCl3)δ1.3-1.5(10H,m),1.65-1.75(3H,2xd),2.5-2.7(2H,m),4.1-4.5(3H,m),5.6(1H,2xq),6.6(1H,2xd),7.1-7.6(8H,m),7.7(1H,m),8.4(1H,d).步驟J2,6-二氯-苯甲酸4-叔丁氧羰基-2-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙?;被鵠-丁酯在0℃下,將攪拌中的2,6-二氯-苯甲酸4-叔丁氧羰基-2-羥基-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙?;被鵠-丁酯(183mg,0.32mmol)的無(wú)水DCM(3ml)溶液用1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氫-1,2-苯并二氧雜環(huán)戊烯-3(1H)-酮(147mg,0.34mmol)進(jìn)行處理。將形成的混合物于0℃保持5小時(shí),用DCM稀釋?zhuān)缓髮⒃摶旌衔锏谷腼柡吞妓釟溻c水溶液和飽和硫代硫酸鈉水溶液的1∶1混合物中。除去有機(jī)層,將水層用DCM再次萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(Na2SO4)、過(guò)濾然后濃縮。將殘余物用60∶40石油醚/EtOAc作為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化,得到無(wú)色泡沫狀的小標(biāo)題化合物(116mg,64%)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.2-1.4(9H,2xs),1.7(3H,d),2.7-3.0(2H,m),4.9-5.1(4H,m),5.8(1H,m),6.6(1H,2xd),7.2-7.6(7H,m),8.4(1H,m);MS(FAB+ve)576.步驟K2,6-二氯-苯甲酸4-羧基-2-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙?;被鵠-丁酯將三氟乙酸(2ml)加入到攪拌中的冰冷的2,6-二氯-苯甲酸4-叔丁氧基羰基-2-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-異喹啉-2-基)-丙?;被鵠-丁酯(110mg,0.19mmol)的無(wú)水二氯甲烷(2ml)溶液中。將混合物于0℃攪拌1小時(shí),室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮,然后將殘余物重新溶于干燥的二氯甲烷中。將該過(guò)程重復(fù)數(shù)次以除去過(guò)量的三氟乙酸。然后將殘余物用HPLC級(jí)水冷凍干燥兩次,然后用反相HPLC通過(guò)梯度洗脫(10∶90 CH3CN∶水至100∶0 CH3CN∶水)進(jìn)行純化,得到白色固體狀的標(biāo)題化合物(17mg,16%)IR(固體)3295,1736,1648,1618,1590cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)1.57(3H,2xd),2.64-2.80(2H,m),4.73(1H,m),5.14-5.33(2H,m),5.44-5.53(1H,m),6.67(1H,m),7.44-7.74(7H,m),8.20(1H,d),.8.77-8.83(1H,bd);13C NMR(100MHz,DMSO)16.72,16.90,53.77,105.36,105.49,125.48,126.37,126.90,127.49,128.85,130.52,130.67,131.15,132.47,132.82,132.93,137.09,137.12,161.38,163.56,163.64,171.15,171.25;MS(FAB+ve,HR)C24H20C12N2O7(MH+)的計(jì)算值519.0726,實(shí)測(cè)值519.0701。實(shí)施例17 5-氟-3-[2-(6-乙基-2-氧代-2H-吡啶-1-基)-乙?;被鵠-4-氧代-戊酸(1A-6)按照與實(shí)施例2所述類(lèi)似的方式制備,得到無(wú)色結(jié)晶IR(固體)1792.9,1664.9,1644.4,1547.1,1209.1,1045.2,1019.6,922.3 cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.15(3H,t),2.52-2.71(3H,m),2.74-2.93(1H,m),4.28-4.81(4H,m),5.25(1H,m),6.10(1H,m),6.29(1H,m),7.37(1H,m),7.85-8.85(1H,m),12.50(1H,brs);13C NMR(100MHz,DMSO)δ12.4,12.45,25.5,25.6,25.7,33.2,34.8,45.6,46.1,47.7,52.2,52.8,81.2,83.0,83.4,83.6,85.,103.7,103.8,103.9,104.0,116.4,116.5,139.9,140.0,152.6,162.7,162.9,167.8,167.9,168.3,172.1,173.1,202.7,202.9;19F(376MHz,DMSO)-226.9(t),-231.6(t),-233.1(t);MS(FAB+ve,HR)計(jì)算值C14H17FN2O5(M+)312.1122實(shí)測(cè)值312.1115.實(shí)施例185-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙?;被鵠-戊酸 步驟L(2S)-2-甲?;被?丙酸叔丁酯向甲酸乙酯(10ml)和DCM(5mL)的混合物中的(2S)丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽(3.63g,20mmol)懸浮液中加入二異丙基乙基胺(3.83mL,22mmol)然后將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。蒸除溶劑,然后將殘余物用Et2O研磨并過(guò)濾。將濾液蒸發(fā)并將殘余物用短的硅膠墊過(guò)濾,用乙酸乙酯作為洗脫劑。蒸除溶劑后得到無(wú)色油狀的小標(biāo)題化合物,其在放置過(guò)程中形成結(jié)晶(2.806g,81%)1H NMR(400MHzCDCl3)δ1.43(3H,d),1.50(9H,s),4.55(1H,m),6.31(1H,br s),8.16(1H,s).步驟M(2S)-2-(N-(2-疊氮基-苯甲酰基)-N-甲?;被?-丙酸叔丁酯在-78℃下,將攪拌中的(2S)-2-甲酰基氨基-丙酸叔丁酯(3.524g,20.3mmol)的無(wú)水THF(50mL)溶液用LDA(20.3mmol)處理,并將反應(yīng)液攪拌15分鐘。然后向該反應(yīng)液中滴加2-疊氮基苯甲酰氯(T.Okawa,T.Sugimori,S.Eguchi和A.Kakehi,Heterocycles,1998,47,1,375-382)(20.6mmol)的無(wú)水THF(20mL)溶液,然后將該反應(yīng)混合物于-78℃攪拌1小時(shí),隨后用飽和NH4Cl水溶液終止反應(yīng)。將反應(yīng)液加熱至室溫,將有機(jī)層用飽和NH4Cl水溶液洗滌、干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后蒸發(fā),將殘余物通過(guò)快速色譜純化(20%乙酸乙酯的己烷溶液)得到淡黃色油狀的小標(biāo)題化合物(3.437g,53%)1H NMR(400MHz CDCl3)δ1.49(9H,s),1.60(3H,d),5.18(1H,m),7.27(2H,m),7.40(1H,d),7.59(1H,t),8.60(1H,s).步驟N(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙酸叔丁酯在室溫下,將三苯基膦(3.41g,13.0mmol)分批加入到(2S)-2-(N-(2-疊氮基-苯甲?;?-N-甲?;被?-丙酸叔丁酯(3.437g,10.80mmol)的二甲苯(70ml)溶液中。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?,直到停止放出氮?dú)?約1小時(shí)),然后將反應(yīng)混合物回流20小時(shí)。蒸除揮發(fā)性物質(zhì),并將殘余物通過(guò)快速色譜純化(30%乙酸乙酯的己烷溶液)得到無(wú)色油狀的小標(biāo)題化合物(2.221g,75%)。
1H NMR(400MHz C6D6)δ1.30(3H,d),1.34(9H,s),4.97(1H,q),7.08(1H,m),7.31(1H,m),7.81(1H,s),7.86(1H,d),8.55(1H,m).步驟O(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙酸將(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙酸叔丁酯(1.434g,5.23mmol)的TFA(25ml)溶液室溫?cái)嚢?小時(shí)。將混合物減壓濃縮并將殘余物溶于干燥的DCM。將該過(guò)程重復(fù)數(shù)次以除去過(guò)量的TFA。將該膠狀物用乙醚研磨然后過(guò)濾并用乙醚洗滌數(shù)次,得到白色粉末狀的小標(biāo)題化合物(1.626g,94%)1H NMR(400MHz DMSO-d6)δ1.67(3H,d),5.26(1H,q),7.58(1H,m),7.71(1H,d),7.87(1H,m),8.15(1H,m),8.44(1H,s).
用與上面的步驟C-E所述類(lèi)似的方法從(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙酸制備5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙?;被鵠-戊酸,得到白色固體狀的標(biāo)題化合物。IR(固體)1717,1663cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.63-1.67(3H,2t),2.51-2.91(2H,m),4.30-4.71(1.5H,m,),5.09-5.51(2.5H,m),7.55-7.58(1H,m),7.71(1H,d),7.84-7.88(1H,m),8.14-8.16(1H,m),8.39-8.41(1H,m),8.59,8.62,8.79,8.84,8.90(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.41(s),-226.74(t),-226.82(t),-230.63(t),-231.40(t),-232.85(t),-232.95(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ16.65,16.72,16.86,17.28,34.56,34.62,47.74,52.27,52.34,52.49,53.14,53.52,83.41,85.18,121.59,121.65,126.52,126.65,127.30,127.34,127.49,134.93,146.73,146.79,147.70,147.73,158.45,158.83,160.40,170.34,170.52,170.63,172.01,172.07,172.12,202.47,202.51,202.61.
實(shí)施例19 2,6-二氯-苯甲酸4-羧基-2-氧代-3-[2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙?;被鵠-丁酯(1C-7)用與上面的步驟I-K所述類(lèi)似的方法從(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丙酸制備,得到白色固體狀的標(biāo)題化合物(17mg,57%)IR(固體)1735,1676,1612cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.61-1.68(3H,m),2.59-2.89(2H,m),4.72(1H,m),5.19-5.31(2H,dd),5.45(1H,m),7.54-7.68(4H,m),7.71(1H,d),7.86(1H,m),8.11(1H,m),8.34(1H,m),8.60,8.80,8.96(1H,3xd);13C NMR(100MHz,DMSO)δ16.75,17.25,32.91,34.76,47.74,52.21,53.22,65.64,68.21,121.65,127.41,128.80,128.87,131.04,132.42,132.97,134.89,146.66,147.88,160.41,163.63,170.65,172.02,200.10;19F(376MHz,DMSO)-74.71(s);MS(FAB+ve,HR)計(jì)算值 C23H19Cl2N3O7(MH+-TFA)520.0678,實(shí)測(cè)值520.0677.
實(shí)施例20 5-氟-4-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-[2,6]萘啶-2-基)-乙酰基氨基]-戊酸(1E-2)步驟P(1-氧代-1H-[2,6]萘啶-2-基)-乙酸叔丁酯向攪拌中的2,6-萘啶-1-(2H)-酮(80.7mg,0.55mmol)的干燥THF(0.5mL)溶液中一次性加入NaH(27mg,0.66mmol,60%的油分散液)。將形成的懸浮液室溫?cái)嚢?5分鐘然后補(bǔ)加一份干燥的THF(0.5mL)。再經(jīng)過(guò)5分鐘后一次性加入溴乙酸叔丁酯(129mg,0.66mmol)。4小時(shí)后于減壓下除去溶劑,將形成的膠狀物在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。分層,將水層用EtOAc(3×15mL)萃取。將有機(jī)相合并、干燥(Na2SO4)、過(guò)濾然后減壓濃縮。經(jīng)柱色譜(2%MeOH的EtOAc溶液)得到深橙色固體狀的小標(biāo)題化合物(120mg,84%)。1H NMR(CDCl3)1.5(9H,s,tBu),4.65(2H,s,-CH2-),6.6(1H,d,Ar),7.1(1H,d,Ar),8.2(1H,d,Ar),8.7(1H,d,Ar),9.0(1H,s,Ar)步驟Q(1-氧代-1H-[2,6]萘啶-2-基)-乙酸向攪拌中的、在冰浴中冷卻的(1-氧代-1H-[2,6]萘啶-2-基)-乙酸叔丁酯的干燥DCM(2.5mL)溶液中一次性加入TFA(2.5mL)。將形成的淡黃色溶液于0℃攪拌30分鐘然后室溫?cái)嚢?0分鐘。減壓除去溶劑和TFA,然后將得到的物質(zhì)反復(fù)與干燥的DCM(10mL×5)共沸得到橙褐色膠狀物(143mg,定量),其不需進(jìn)一步純化即可使用。
用與上面的步驟C-E所述類(lèi)似的方法從(1-氧代-1H-[2,6]萘啶-2-基)-乙酸制備5-氟-4-氧代-3-[2-(1-氧代-1H-[2,6]萘啶-2-基)-乙酰基氨基]-戊酸。得到亮黃色固體狀的標(biāo)題化合物(46mg,74%)IR(固體)1628.0,1664.5,1785.3cm-1;1H NMR(DMSO)δ2.6-3.2(2H,m),4.3-4.5(0.5H,m),4.6(1H,m),4.7-4.8(2H,m),5.1-5.4(1.5H,m),6.8(1H,m),7.6(1H,m),8.1(1H,m),8.6(0.3H,m),8.6-8.7(1H,m),8.7-9.0(0.7H,m),9.1-9.2(1H,s);19F(DMSO)δ-226.5(較少的),-226.8,-230.9(較少的)-231.4,-233.0;13C(DMSO)δ33.16,34.83,47.60,51.32,51.64,52.19,52.93,80.97,81.65,82.73,83.38,83.53,85.30,102.37,102.49,102.56,120.13,120.19,130.42,130.45,132.26,136.84,136.93,145.14,145.23,149.34,149.39,160.34,160.42,160.48,167.44,167.56,167.95,172.09,173.12,173.77,202.64,202.78;HRMS計(jì)算值336.099574,實(shí)測(cè)值336.098907,+2.0ppm實(shí)施例21 用與上面的步驟L-O、然后是C-E所述類(lèi)似的方法從2-疊氮基苯甲酰氯(T.Okawa,T.Sugimori,S.Eguchi和A.Kakehi,Heterocycles,1998,47,1,375-382)和2-氨基丁酸叔丁酯鹽酸鹽制備5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丁酰基氨基]-戊酸(1C-8)。得到白色粉末狀的標(biāo)題化合物。IR(固體)1722,1665,1365,1203,1136,1055cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.81-1.89(3H,m),2.03-2.27(2H,m),2.55-2.91(2H,m),4.28-4.74 and 5.11-5.42(4H,2m),7.54(1H,m),7.70(1H,m),7.87(1H,m),8.14(1H,m),8.39(1H,m),8.89-9.01(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.4(s,TFA salt),-226.7(t),-226.8(t),-230.4(t),-231.0(t),-232.6(t),-232.7(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ9.16,22.2/22.4,33.1,50.7/50.9,56.5/56.9,82.8/82.9,119.9/120.0,125.2,125.9,126.1,133.6,145.3/145.4,146.0/146.0,159.2,168.5/168.6170.5/170.5,201.1/201.1.
實(shí)施例22 5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(6-甲氧基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丁?;被鵠-戊酸(1C-9)用與步驟L-O、然后是C-E中所述類(lèi)似的方法從2-疊氮基-5-甲氧基苯甲酰氯(T.Okawa,T.Sugimori,S.Eguchi和A.Kakehi,Heterocycles,1998,47,1,375-382)和2-氨基丁酸叔丁酯鹽酸鹽制備。得到白色粉末狀的標(biāo)題化合物。IR(固體)1732,1660,1493,1355,1222,1198,1026,831cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 080-0.84(3H,m),1.99-2.22(2H,m),2.56(2H,br s),3.17(1H,br s),3.88(3H,s),4.50-4.58(1H,m),4.99-5.31(2H,br),5.37-5.45(1H,m),7.45-7.47(1H,m),7.51-7.53,1H,m),7.64-7.66(1H,m),8.27-8.29(1H,m),8.88-8.95(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.1(s,TFAsalt),-231.2(br);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ10.6/10.7,24.0/24.2,56.0,57.6/57.8,106.6,127.2/127.3,124.4,129.2,142.2,144.6,158.3,160.5,169.9實(shí)施例23 5-氟-4-氧代-3-[(2S)-3-甲基-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丁酰基氨基]-戊酸(1C-10)用與上面的步驟L-O、然后是C-E中所述類(lèi)似的方法從2-疊氮基苯甲酰氯和纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽制備。步驟D后,將兩種非對(duì)映異構(gòu)體通過(guò)在Et2O/石油醚(1/1)中連續(xù)三次結(jié)晶進(jìn)行分離。將這兩種非對(duì)映異構(gòu)體分別用于步驟E,兩者都得到白色粉末。非對(duì)映異構(gòu)體1IR(固體)1732,1660,1365,1231,1212,1198cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.75-1.13(6H,m),1.24-1.53(1H,m),2.57-2.92(2H,m),4.13-5.39(4H,m),7.56-7.59(1H,m),7.70-7.72(1H,m),7.85-7.88(1H,m),8.17-8.19(1H,m),8.52-8.57(1H,m),8.92-9.25(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.3(s,TFA),-226.8(t),-232.3(t);13C NMR(400MHz,DMSO-d6)δ19.6,20.2,30.4,35.2,52.4,61.4,84.7,121.8,127.4,128.0,128.1,135.6,147.7,147.9,161.1,169.8,172.3,203.0.非對(duì)映異構(gòu)體2IR(固體)1732,1660,1607,13 60,122 6,1212,1193cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.75-1.11(6H,m),1.24-1.35(1H,m),2.55-2.87(2H,m),4.37-5.35(4H,m),7.55-7.57(1H,m),7.67-7.71(1H,m),7.84-7.88(1H,m),8.16-8.18(1H,m),8.55-8.58(1H,m),8.98-9.25(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.3(s,TFA),-22 6.3(t),-231.8(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ19.1,19.6,30.2,34.5,52.0,60.4,84.5,121.2,126.9,127.5,127.6,135.1,146.1,147.3,160.5,169.4,171.8,202.5.
實(shí)施例24 5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-戊?;被鵠-戊酸(1C-11)用與上面的步驟L-O、然后是C-E中所述類(lèi)似的方法從2-疊氮基苯甲酰氯和(2S)2-氨基-戊酸叔丁酯鹽酸鹽制備。得到白色固體狀的標(biāo)題化合物。IR(固體)2918,1736,1665,1607,1365,1226,1222,1193cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.87-0.88(3H,m),1.21-1.23(2H,m),2.08-2.09(2H,m),2.44-2.90(2H,m),4.29-5.58(4H,m),7.55-7.59(1H,m),7.70-7.72(1H,m),7.84-7.88(1H,m),8.15-8.17(1H,m),8.41(1H,s),8.72,9.01(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.3(s,TFA salt),-226.7(t),-226.8(t),-230.4(t),-231.0(t),-232.6(t),-232.7(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.6/13.6,19.0,32.2/32.3,34.6/34.6,52.2/52.4,55.9/56.4,84.3/84.5,121.4/121.5,126.7,127.4,127.5,135.0,146.8/146.9,147.6/147.6,160.6,170.1/170.6,172.0/172.0,202.5/202.6.
實(shí)施例255-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(6-氧代-6H-嘧啶-1-基)-丁酰基氨基]-戊酸(1G-1) 步驟R3-外-叔丁氧羰基氨基二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-甲酸向3-外-氨基二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-甲酸(1.048g,6.84mmol)的MeCN(10mL)溶液中于0℃加入二異丙基乙基胺(1.311mL,7.53mmol),隨后加入二碳酸二叔丁酯(1.941g,8.89mmol)。將該反應(yīng)液加熱至室溫并攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配,將水層用2N HCl進(jìn)行酸化,然后用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相用鹽水洗滌,干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后蒸發(fā)得到白色粉末狀的小標(biāo)題化合物(1.635g,94%)1H NMR(400MHz CDCl3)δ1.45(9H,s),1.67(1H,m),2.18(1H,m),2.60(1H,m),2.74(1H,s),2.99(1H,s),3.96(1H,m),6.19(2H,m),6.98(1H,m),12.37(1H,brs).步驟S(2S)-2-[(3-外-叔丁氧羰基氨基-二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-羰基)-氨基]-丁酸叔丁酯將攪拌中的3-外-叔丁氧羰基氨基二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-甲酸(728mg,2.87mmol)、(2S)-2-氨基丁酸叔丁酯鹽酸鹽(619mg,3.16mmol)、二異丙基乙基胺(409mg,3.16mmol)、HOBt(415mg,3.16mmol)和DMAP(386mg,3.16mmol)和無(wú)水THF(20ml)的混合物冷卻至0℃,然后向該混合物中加入EDC(606mg,3.16mmol)。將混合物在16小時(shí)內(nèi)升溫至室溫,然后減壓濃縮。將殘余物通過(guò)快速色譜純化(20%乙酸乙酯的己烷溶液)得到白色固體狀的小標(biāo)題化合物(1.116g,98%)1H NMR(400MHz CDCl3)δ0.89-0.94(3H,m),1.42-1.54(10H,m),1.64-1.96(2H,m),2.13-2.15(1H,m),2.35-2.39(1H,m),2.70-2.74(1H,m),2.88-2.93(1H,m),3.84-3.95(1H,m),4.37-4.47(1H,m),5.44-5.84(1H,2d),6.14-6.23(3H,m).步驟T(2S)-2-[(3-外-氨基-二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-羰基)-氨基]丁酸叔丁酯向(2S)-2-[(3-外-叔丁氧羰基氨基-二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-羰基)-氨基]丁酸叔丁酯(1.046g,2.65mmol)的乙酸乙酯(2.5mL)溶液中加入2M HCl的乙酸乙酯(10mL)溶液。將該反應(yīng)液室溫?cái)嚢?小時(shí),然后用水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。將合并的水層用DCM進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后蒸發(fā)得到無(wú)色油狀的小標(biāo)題化合物(677mg,87%)1H NMR(400MHz CDCl3)δ0.94(3H,t,J7.5),1.48-1.49(9H,m),1.55(1H,m),1.64-1.94(4H,m),2.14-2.20(1H,m),2.28-2.30(1H,m),2.59-2.61(1H,m),2.94-2.98(1H,m),3.17-3.21(1H,m),4.46-4.52(1H,m),6.19(2H,m),6.43-6.54(1H,2d).步驟U(2S)-2-(6-氧代-6H-嘧啶-1-基)-丁酸叔丁酯向(2S)-2-[(3-外-氨基-二環(huán)[2.2.1]-庚-5-烯-2-外-羰基)-氨基]丁酸叔丁酯(655mg,2.22mmol)的二甲苯(10mL)溶液中加入原甲酸三乙酯(989mg,6.67mmol),然后將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。蒸除溶劑并將殘余物通過(guò)快速色譜純化(己烷/乙酸乙酯50/50)得到無(wú)色油狀的小標(biāo)題化合物(380mg,72%)。
1H NMR(400MHz CDCl3)δ0.98(3H,t),1.47(9H,m),1.98(1H,m),2.28(1H,m),5.25(1H,dd),6.47(1H,d),7.90(1H,d),8.14(1H,s).
用與上面的步驟O、然后是C-E中所述類(lèi)似的方法從上述化合物制備5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-(6-氧代-6H-嘧啶-1-基)-丁?;被鵠-戊酸。IR(固體)1717,1665,1527,1365,1241,1155,841.1775,1727,1665,1551,1417,1188,1136,1055cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.77-0.81(3H,m),1.96-2.14(2H,m),2.57-2.86(2H,m),4.28-4.66(1.5H,m),5.06-5.40(2.5H,m),6.41-6.45(1H,m),7.93-7.95(1H,m),8.47-8.50(1H,m),8.71-9.02(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-75.4(s,TFA salt),-226.7(t),-226.8(t),-230.4(t),-231.2(t),-232.7(t),-232.8(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ10.5/10.6,23.7/23.9,34.6/34.7,52.3/52.5,57.6/58.1,84.3//84.4,114.7/114.8,151.9/153.2,153.3/153.4,160.5/160.5,169.6/169.7,171.9/172.0,202.5/202.6.
實(shí)施例26 (3S)-4-氧代-3-[(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丁酰基氨基]-丁酸(1C-12)按照記載于Vertex的專(zhuān)利WO97/22619中的方法從(2S)-2-(4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-丁酸(111.1mg,0.49mmol)[用與步驟L-O中所述類(lèi)似的方法從2-疊氮基苯甲酰氯和2-氨基丁酸叔丁酯鹽酸鹽制得]和(2RS,3S)-烯丙氧基羰基氨基-2-芐氧基-5-氧代四氫呋喃(153.3mg,0.53mmol)制備。得到米白色固體狀的標(biāo)題化合物(45.5mg,29%,最后兩步)1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.95-1.15(3H,m),2.00-2.38(2H,m),2.45-2.90(2H,m),4.25-4.45(1H,m),4.50-4.80(1H,m),5.40-5.75(1H,m),7.75-7.90(1H,m),8.00-8.12(1H,m),8.32-8.44(1H,m),9.30-9.65(1H,m);13C NMR(100MHz,CD3OD)δ11.05/11.48,25.38/26.79/26.85/27.,,34.98/35.21/35.46,50.21/50.61/52.95/53.04/53.22/53.30,60.06/60.40/60.46,98.51/98.73/98.80,106.19/106.46,121.54,121.84/121.92/121.99,129.29/129.59,131.04/131.31,138.33,139.50/139.58,159.92/160.01,170.28/170.40,173.66.
實(shí)施例275-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-[1-(3-氯芐基)-2-氧代-1,4-二氫-2H-喹唑啉-3-基]-3-甲基-丁?;被鵠-戊酸(1D-1) 步驟V(2S)-3-甲基-2-(2-硝基-芐基氨基)-丁酸叔丁酯向纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽(1.5g,7.15mmol)的EtOH(10mL)溶液中加入三乙胺(2.09mL,15mmol),10分鐘后接著加入2-硝基芐基氯(1.227g,7.15mmol)。然后將混合物在回流狀態(tài)下攪拌20小時(shí),然后進(jìn)行蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)快速色譜純化(石油醚/乙酸乙酯,85/15)得到無(wú)色油狀的小標(biāo)題化合物(1.753g,80%)。1HNMR(400MHz CDCl3)δ0.93(6H,m),1.48(9H,s),1.83-1.96(2H,m),2.82(1H,d),3.92(1H,d),4.11(1H,d),7.39(1H,t),7.57(1H,t),7.65(1H,d),7.89(1H,d).步驟W.(2S)-2-(2-氨基-芐基氨基)-3-甲基-丁酸叔丁酯向(2S)-3-甲基-2-(2-硝基-芐基氨基)-丁酸叔丁酯(1.753g,5.68mmol)的EtOH(30mL)溶液中加入阮內(nèi)鎳(1.3mL),然后將反應(yīng)混合物氣囊壓力下氫化2小時(shí)。濾除催化劑并將濾液蒸發(fā)得到黃色油狀的小標(biāo)題化合物(1.573g,100%)。
1H NMR(400MHz CDCl3)δ0.81-0.90(6H,m),1.55(9H,s),1.90(1H,m),2.89(1H,d),3.62(1H,d),3.86(1H,d),4.68(2H,vbr s),6.68(2H,m),7.02(1H,d),7.13(1H,t).步驟X(2S)-3-甲基-2-(2-氧代-1,4-二氫-2H-喹唑啉3-基)-丁酸叔丁酯向(2S)-2-(2-氨基-芐基氨基)-3-甲基-丁酸叔丁酯(1.573g,5.65mmol)的THF(20mL)溶液中加入羰基二咪唑(1.008g,6.21mmol),將該反應(yīng)液回流攪拌過(guò)夜。蒸除溶劑并將殘余物通過(guò)快速色譜純化(己烷/乙酸乙酯,50/50)得到黃色固體狀的小標(biāo)題化合物(662mg,38%)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ0.95(3H,d),1.08(3H,d),1.49(9H,s),2.32(1H,m),4.39(1H,d),4.60(1H,d),4.72(1H,d),6.81(1H,d),6.94(1H,t),7.07(1H,d),7.18(1H,t),8.68(1H,s).步驟Y(2S)-2-[1-(3-氯-芐基)-2-氧代-1,4-二氫-2H-喹唑啉-3-基]-3-甲基-丁酸叔丁酯向(2S)-3-甲基-2-(2-氧代-1,4-二氫-2H-喹唑啉-3-基)-丁酸叔丁酯(633mg,2.08mmol)和3-氯芐基溴(470mg,2.29mmol)的DMSO(10mL)混合物中加入氫化鈉(75mg,1.87mmol),然后將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?0小時(shí)。然后向該反應(yīng)液中加入飽和氯化銨水溶液,然后將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相干燥(MgSO4)、過(guò)濾然后蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)快速色譜純化(己烷/乙酸乙酯,70/30)得到無(wú)色油狀的標(biāo)題化合物(477mg,59%)。1H NMR(400MHzCDCl3)δ0.99(3H,d),1.08(3H,d),1.48(9H,s),2.32(1H,m),4.42(1H,d),4.59-4.67(2H,m),5.05-5.19(2H,m),6.68(1H,d),6.97(1H,t),7.06-7.27(6H,m).
用與步驟O、然后是C-E中所述類(lèi)似的方法從上述化合物制備5-氟-4-氧代-3-[(2S)-2-[1-(3-氯芐基)-2-氧代-1,4-二氫-2H-喹唑啉-3-基]-3-甲基-丁?;被鵠-戊酸。IR(固體)1736,1365,1227,1217,1203cm-1;1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.84-0.97(6H,m),2.30-2.33(1H,m),2.54-2.87(2H,m),4.39-5.24(8H,m),6.73-6.78(1H,m),6.93-6.97(1H,m),7.11-7.35(6H,m),8.21-8.76(1H,m);19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-232.2(t),-232.8(t);13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ19.4/19.5,26.1/26.4,34.6/34.8,43.8,45.6/45.7,51.8/52.0,62.7/63.1,84.1/84.3,113.6,121.3/121.4,122.4/122.5,125.3,126.1,126.6,127.1,128.2,130.7,133.5,137.9/138.0,141.0/141.0,155.5/155.7,170.8,172.0/172.0,202.6/202.9.
設(shè)計(jì)本發(fā)明化合物的目的是用來(lái)抑制天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶。因此,可以測(cè)試本發(fā)明化合物抑制細(xì)胞凋亡和IL-1β釋放的能力或直接測(cè)試其抑制天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性的能力。對(duì)各種活性的試驗(yàn)是本領(lǐng)域已知的,并在如下的試驗(yàn)部分作了詳細(xì)描述。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案,本發(fā)明提供了含有以上描述的本發(fā)明化合物或其可藥用鹽和可藥用載體的組合物。
如果在這些組合物中使用本發(fā)明化合物的可藥用鹽,這些鹽優(yōu)選是從無(wú)機(jī)或有機(jī)酸和堿衍生的鹽。所述的酸鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽(digluconate)、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽、果膠酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽例如鈉和鉀鹽、堿土金屬鹽例如鈣和鎂鹽,與有機(jī)堿的鹽例如二環(huán)己基胺鹽、N-甲基-D-葡糖胺鹽以及與氨基酸例如精氨酸、賴(lài)氨酸等形成的鹽。
此外,堿性的含氮基團(tuán)可以用低級(jí)烷基鹵化物例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物;硫酸二烷基酯例如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯;長(zhǎng)鏈鹵化物例如癸基、十二烷基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物;芳烷基鹵化物例如芐基和苯乙基溴化物等季銨化。由此制得可溶解或分散于水或油中的產(chǎn)物。
本發(fā)明的組合物和方法中所用的化合物還可以通過(guò)增加適宜的功能基來(lái)進(jìn)行修飾,以提高其選擇性的生物學(xué)活性。這些修飾是本領(lǐng)域已知的,包括增加向指定的生物學(xué)系統(tǒng)(例如血液、淋巴系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng))中的生物學(xué)滲透性、增加口服生物利用度、增加溶解度從而能夠通過(guò)注射給藥、改變代謝以及改變排泄速率。
可用于這些組合物的可藥用載體包括但不僅限于,離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白例如人血清白蛋白、緩沖物質(zhì)例如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)例如硫酸鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素類(lèi)物質(zhì)、聚乙二醇、羧基甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛蠟。
根據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案,本發(fā)明的組合物被配制成用于向哺乳動(dòng)物、優(yōu)選人類(lèi)給藥。
本發(fā)明的這些藥物組合物可以口服、胃腸外、通過(guò)吸入噴霧、局部、直腸、經(jīng)鼻、頰部、陰道或通過(guò)植入的儲(chǔ)庫(kù)給藥。本文所用的術(shù)語(yǔ)“胃腸外”包括皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。優(yōu)選將組合物口服或靜脈內(nèi)給藥。
本發(fā)明組合物的無(wú)菌可注射形式可以是含水或油性的混懸液。這些混懸液可以按照本領(lǐng)域已知的技術(shù)用適宜的分散劑或濕潤(rùn)劑以及助懸劑配制。無(wú)菌可注射制劑還可以是在無(wú)毒的胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無(wú)菌可注射溶液或混懸液,例如在1,3-丁二醇中的溶液??梢允褂玫目山邮艿馁x形劑和溶劑是水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外,通常用無(wú)菌的不揮發(fā)油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此,可以使用任何溫和的不揮發(fā)油,包括合成的單或二甘油酯。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備可注射制劑,也可使用天然的可藥用油例如橄欖油或蓖麻油、特別是其聚氧乙基化的形式。這些油溶液或混懸液還含有長(zhǎng)鏈的醇稀釋劑或賦形劑,例如羧基甲基纖維素或常用于配制可藥用劑型、包括乳液和混懸液的類(lèi)似分散劑。其它常用的表面活性劑例如Tweens、Spans和其它常用于生產(chǎn)可藥用固體、液體或其它劑型的乳化劑或生物利用度促進(jìn)劑也可用于制備制劑的目的。
本發(fā)明的藥物組合物可以以任何可口服的劑型口服給藥,包括但不僅限于膠囊、片劑、含水混懸液或溶液。對(duì)于口服使用的片劑,常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。潤(rùn)滑劑例如硬脂酸鎂也經(jīng)常使用。對(duì)于膠囊形式的口服給藥,可以使用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)需要用含水混懸液進(jìn)行口服給藥時(shí),可將活性成分與乳化劑或助懸劑混合。如需要,還可加入某些甜味劑、矯味劑或著色劑。
或者,可將本發(fā)明的藥物組合物以栓劑的形式用于直腸給藥。所述栓劑可以通過(guò)將藥物與適宜的非刺激性的賦形劑混合物進(jìn)行制備,所述賦形劑在室溫下是固體但在直腸溫度下是液體,因此可以在直腸中熔化而釋放出藥物。這些材料包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明的藥物組合物還可以局部給藥,特別是當(dāng)治療靶點(diǎn)包括易于通過(guò)局部涂抹而達(dá)到的區(qū)域或器官時(shí),包括眼、皮膚或腸道下部的疾病。適用于這些區(qū)域和器官的局部制劑很容易制備。
對(duì)于腸道下部的局部應(yīng)用可以通過(guò)直腸栓劑(見(jiàn)上)或適宜的灌腸制劑的形式進(jìn)行。也可以使用局部經(jīng)皮貼劑。
對(duì)于局部應(yīng)用,可將藥物組合物配制成含有懸浮或溶解在一種或多種載體中的活性成分的適宜軟膏。用于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括但不僅限于,礦物油、液體礦脂、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化用蠟和水?;蛘?,可將藥物組合物配制成含有懸浮或溶解在一種或多種可藥用載體中的活性成分的適宜的洗劑或霜?jiǎng)?。適宜的載體包括但不僅限于,礦物油、脫水山梨醇一硬脂酸酯、聚山梨酯60、鯨蠟基酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、芐醇和水。
對(duì)于眼部應(yīng)用,可將藥物組合物配制成在等滲的、調(diào)節(jié)過(guò)pH值的鹽水中的微粉化的混懸液形式,或者,優(yōu)選是在等滲的、調(diào)節(jié)過(guò)pH值的鹽水中的溶液形式,其中可以不含或含有防腐劑例如氯芐烷銨?;蛘?,對(duì)于眼部應(yīng)用,可將藥物組合物配制成軟膏例如凡士林的形式。
本發(fā)明的藥物組合物還可以通過(guò)鼻氣霧劑或吸入劑給藥。這些組合物可以按照藥物制劑領(lǐng)域公知的技術(shù)制備,并可用芐醇或其它適宜的防腐劑、用于提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑、氟化碳和/或其它常規(guī)的增溶劑或分散劑制備成在鹽水中的溶液的形式。
上述組合物特別適用于涉及如下疾病的治療應(yīng)用IL-1介導(dǎo)的疾病、細(xì)胞凋亡介導(dǎo)的疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、傳染性疾病、變性疾病、與細(xì)胞死亡有關(guān)的疾病、過(guò)度飲酒、病毒介導(dǎo)的疾病、視網(wǎng)膜疾病、眼色素層炎、炎性腹膜炎、骨關(guān)節(jié)炎、胰腺炎、哮喘、成人呼吸窘迫綜合征、腎小球性腎炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、格累夫斯氏病、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性中性白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、慢性活動(dòng)性肝炎、重癥肌無(wú)力、炎性腸疾病、節(jié)段性回腸炎、牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、疤痕形成、移植物對(duì)抗宿主的疾病、器官移植排斥反應(yīng)、燒傷后的器官細(xì)胞凋亡、骨質(zhì)疏松、白血病和相關(guān)疾病、骨髓發(fā)育不良綜合征、多發(fā)性骨髓瘤-相關(guān)性骨疾病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、轉(zhuǎn)移性黑瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤、出血性休克、膿毒病、膿毒性休克、燒傷、志賀氏菌病、早老性癡呆、帕金森氏癥、杭廷頓氏舞蹈癥、肯尼迪氏疾病、朊病毒疾病、腦局部缺血、癲癇、心肌缺血、急性和慢性心臟病、心肌梗塞、充血性心衰、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)、脊柱肌肉萎縮、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化、HIV-相關(guān)性腦炎、衰老、脫發(fā)、中風(fēng)引起的神經(jīng)病性損傷、潰瘍性結(jié)腸炎、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、乙型肝炎、丙型肝炎、庚型肝炎、黃熱病、登革熱或日本腦炎、各種形式的肝臟疾病、腎臟疾病、多囊性腎疾病、與幽門(mén)螺旋桿菌有關(guān)的胃和十二指腸潰瘍、HIV感染、肺結(jié)核和腦膜炎。所述化合物和組合物還可用于治療與冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)有關(guān)的并發(fā)癥。上述組合物中的化合物含量應(yīng)足以在通過(guò)實(shí)施例中所描述的任何試驗(yàn)測(cè)量時(shí)產(chǎn)生可觀察到的疾病嚴(yán)重程度或天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性的下降和/或細(xì)胞凋亡的減少。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案,本發(fā)明的組合物還可以含有其它治療劑。所述治療劑包括但不僅限于,溶解血栓的藥物例如組織纖溶酶原激活物和鏈激酶。當(dāng)使用第二種藥物時(shí),可將第二種藥物以獨(dú)立的劑量形式給藥,或作為與本發(fā)明化合物或組合物的單一劑量形式的一部分給藥。
還應(yīng)當(dāng)理解,對(duì)于任何特定患者的具體劑量和治療方案取決于各種因素,包括所用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康情況、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄速率、藥物聯(lián)用、以及主治醫(yī)師的判斷和所治療的具體疾病的嚴(yán)重程度?;钚猿煞值牧窟€取決于組合物中的具體化合物和其它治療劑(如果存在的話(huà))。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,本發(fā)明提供了對(duì)患有上述疾病之一的哺乳動(dòng)物進(jìn)行治療的方法,該方法包括向所述哺乳動(dòng)物施用上述可藥用組合物的步驟。在該實(shí)施方案中,如果還向患者施用其它治療劑或天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑,可將其與本發(fā)明的化合物一起以單一的劑型給藥,或者將其作為獨(dú)立的劑型給藥。當(dāng)以獨(dú)立的劑型給藥時(shí),可將其它天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑或藥物在施用含有本發(fā)明化合物的可藥用組合物之前、同時(shí)或之后給藥。
為了更全面地理解本發(fā)明,描述了如下制備和試驗(yàn)實(shí)施例。這些實(shí)施例的目的僅僅是為了說(shuō)明,并不以任何方式對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成限定。
實(shí)施例28酶試驗(yàn)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制試驗(yàn)是基于重組的、純化人類(lèi)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1、-3、-7或-8對(duì)熒光底物的裂解。該試驗(yàn)基本上按照與Garcia-Calvo等(J.Biol.Chem.273(1998),32608-32613)所報(bào)道的相同的方式用對(duì)各種酶特異性的底物進(jìn)行。天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1的底物是乙?;?Tyr-Val-Ala-Asp-氨基-4-甲基香豆素。天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3、-7和8的底物是乙酰基-Asp-Glu-Val-Asp-氨基-4-甲基香豆素。
通過(guò)將數(shù)據(jù)直接帶入Thornberry等所描述的方程式(Biochemistry 33(1994),3943-3939)用非線(xiàn)性最小二乘法分析計(jì)算機(jī)程序(PRISM 2.0;GraphPad軟件)計(jì)算出在特定抑制劑濃度下觀測(cè)到的酶失活速率Kobs。為了獲得二級(jí)速率常數(shù)Kinact,將Kobs值對(duì)各自的抑制劑濃度繪圖然后通過(guò)線(xiàn)性回歸計(jì)算出Kinact。
表8顯示了通過(guò)上述方法測(cè)定的選定的本發(fā)明化合物對(duì)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1活性的抑制作用。表8.天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1的活性
表9顯示了通過(guò)上述方法測(cè)定的選定的本發(fā)明化合物對(duì)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3活性的抑制作用。
表9.天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3的活性
表10顯示了通過(guò)上述方法測(cè)定的選定的本發(fā)明化合物對(duì)天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-7和-8活性的抑制作用。
表10.天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-7和-8的活性
實(shí)施例29抑制混合的外周血單核細(xì)胞(PBMC)群分泌IL-1β可以用各種細(xì)胞源在細(xì)胞培養(yǎng)物中測(cè)定天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-1對(duì)前體-IL-1β的加工。從健康的供體獲得人類(lèi)PBMC,得到可以響應(yīng)多種生理學(xué)刺激而生產(chǎn)一系列白介素和細(xì)胞因子的混合淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞群。
實(shí)驗(yàn)方法將試驗(yàn)化合物溶于二甲亞砜(DMSO,Sigma#D-2650)得到100mM的儲(chǔ)備液。將其在由含有10%熱滅活的FCS(Gibco BRL#10099-141)、2mM L-谷氨酰胺(Sigma,#G-7513)、100U青霉素和100μg/ml鏈霉素(Sigma#P-7539)的RPMI組成的完全培養(yǎng)基中稀釋。在8次稀釋步驟后,試驗(yàn)化合物的最終濃度范圍從100μM下降至6nM。試驗(yàn)化合物的最高濃度相當(dāng)于在試驗(yàn)中的0.1%DMSO。
通過(guò)在Ficoll-Paque白細(xì)胞分離介質(zhì)(Amersham,#17-1440-02)中離心從得自血庫(kù)的Buffy Coats中分離出人PBMC,然后在無(wú)菌的96孔平底板(Nunc)中進(jìn)行細(xì)胞試驗(yàn)。各孔含有100μl細(xì)胞懸浮液,1×105細(xì)胞,50μl化合物稀釋液和最終濃度為50ng/ml的50μl LPS(Sigma#L-3012)。對(duì)照由+/-LPS刺激和一系列以與化合物相同的方式稀釋的DMSO稀釋液組成。將平板在5%CO2& 95%濕度下于37℃保溫16-18小時(shí)。
16-18小時(shí)后,將平板以100xg于18℃離心15分鐘后收集上清液并分析其IL-1β含量。上清液中成熟IL-1β的測(cè)定用Quantikine試劑盒(R&D Systems)按照廠商的說(shuō)明進(jìn)行。在陽(yáng)性對(duì)照孔中觀察到的PBMC的成熟IL-1β水平約為600-1500pg/ml。
化合物的抑制效力可用IC50值表示,該值是在上清液中檢測(cè)到相當(dāng)于陽(yáng)性的對(duì)照50%的成熟IL-1β時(shí)的抑制劑濃度。表11顯示了通過(guò)上述方法測(cè)定的選定的本發(fā)明化合物對(duì)外周血單核細(xì)胞分泌IL-1β的抑制作用。表11.對(duì)PBMC分泌IL-1β的抑制作用
實(shí)施例30抗-Fas誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡試驗(yàn)可以通過(guò)將Fas配體(FasL)與其受體CD95(Fas)結(jié)合來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。CD95是相關(guān)受體家族中的一員,稱(chēng)為死亡受體,它可以通過(guò)激活天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶的酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)引發(fā)細(xì)胞凋亡。該過(guò)程通過(guò)銜接分子FADD/MORT-1與CD-95受體-配體復(fù)合物的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域結(jié)合而引發(fā)。然后天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-8與FADD結(jié)合并活化,引發(fā)涉及下游天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶激活和隨后的細(xì)胞凋亡的一系列事件。還可以用抗體而不是FasL交聯(lián)細(xì)胞表面的CD95在表達(dá)CD95的細(xì)胞例如Jurkat E6.1 T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
抗-Fas誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡還可以通過(guò)激活天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-8來(lái)引發(fā)。這為篩選抑制天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-8介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑的化合物的細(xì)胞試驗(yàn)提供了礎(chǔ)。
實(shí)驗(yàn)方法將Jurkat E6.1細(xì)胞在由RPMI-1640(Sigma No)+10%胎牛血清(Gibco BRL No.10099-141)+2mM L-谷氨酰胺(Sigma No.G-7513)組成的完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期收獲細(xì)胞。將100ml 5-8×105細(xì)胞/ml的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無(wú)菌的50ml Falcon離心管中并在100×g下室溫離心5分鐘。除去上清液并將合并的細(xì)胞沉積物重新懸浮在25ml完全培養(yǎng)基中。對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)并用完全培養(yǎng)基將密度調(diào)整為2×106細(xì)胞/ml。
將試驗(yàn)化合物溶于二甲亞砜(DMSO)(Sigma No.D-2650)得到100mM的儲(chǔ)備液。將其在完全培養(yǎng)基中稀釋至400μM,然后在96孔板中進(jìn)行系列稀釋?zhuān)缓蠹尤爰?xì)胞試驗(yàn)平板中。
將100μl細(xì)胞懸浮液(2×106細(xì)胞)加入到無(wú)菌的96孔圓底平板(Costar No.3790)的各孔中。向各孔中加入50μl適宜稀釋度的化合物溶液和最終濃度為10ng/ml的抗-Fas抗體,克隆CH-11(Kamiya No.MC-060)。對(duì)照孔不含抗體并且不含化合物,但含有一系列的DMSO稀釋液作為載體對(duì)照。將平板在5%CO2和95%下于37℃保溫16-18小時(shí)。
通過(guò)用Boehringer-Mannheim,No.1544 675的“細(xì)胞死亡檢測(cè)試驗(yàn)”定量DNA的斷裂來(lái)測(cè)定細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。保溫16-18小時(shí)后,將試驗(yàn)平板以100×g在室溫下離心5分鐘。取出150μl上清液并用150μl新的完全培養(yǎng)基代替。然后收獲細(xì)胞并向各孔中加入200μl分析試劑盒中提供的溶解緩沖液。將細(xì)胞研磨以確保完全溶解,然后于4℃下保溫30分鐘。然后將平板以1900×g離心10分鐘,將上清液在所提供的保溫緩沖液中稀釋(1∶20)。然后將100μl該溶液完全按照試劑盒中提供的廠商的說(shuō)明進(jìn)行分析。在加入最后的底物20分鐘后,在SPECTRAmax Plus平板讀數(shù)器(Molecular Devices)中測(cè)定OD405nm。將OD405nm對(duì)化合物的濃度繪圖,然后用曲線(xiàn)擬合程序SOFTmax Pro(Molecular Devices)用四參數(shù)擬合選項(xiàng)計(jì)算化合物的IC50值。
表12顯示了選定的本發(fā)明化合物在FAS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡試驗(yàn)中的活性。表12.在FAS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡試驗(yàn)中的活性
雖然我們對(duì)本發(fā)明的一系列實(shí)施方案進(jìn)行了描述,但顯然可以對(duì)我們的基本實(shí)施例進(jìn)行修改而得到使用本發(fā)明化合物和方法的其它實(shí)施方案。因此應(yīng)當(dāng)理解,本發(fā)明的范圍是由所附的權(quán)利要求而不是以實(shí)施例的方式提供的具體實(shí)施方案定義的。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;環(huán)A含有0-2個(gè)雙鍵,并且選擇性地與含有0-3個(gè)雜原子的飽和或不飽和的5-7元環(huán)稠合;環(huán)A中的X1和X3彼此獨(dú)立地選自氮或碳,X2選自?xún)r(jià)鍵、氧、硫、氮或碳,其中具有適宜化合價(jià)的任何X均可以帶有取代基;環(huán)A、包括稠合的環(huán)(如果存在的話(huà))中具有適宜化合價(jià)的各碳可以彼此獨(dú)立地被氫、鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、NHS(O)2R、=O、=S、=NNHR、=NNR2、=N-OR、=NNHCOR、=NNHCO2R、=NNHSO2R或=NR取代;環(huán)A中的各個(gè)可以被取代的氮被氫、R、COR、S(O)2R或CO2R取代;條件是當(dāng)X3是碳時(shí),X3上的取代基通過(guò)除氮以外的原子連接;進(jìn)一步的條件是環(huán)A中的X至少有一個(gè)是氮。
2.權(quán)利要求1的化合物,其中R2是CO2H或酯、酰胺或羧酸等配物。
3.權(quán)利要求2的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、OR、SR或-OC=O(R)。
4.權(quán)利要求3的化合物,其中R3是氫或C1-3烷基。
5.式IA的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R、-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基、-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4-R6彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R;R7選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、CN、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R或SO2NHR。
6.權(quán)利要求5的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR或-OC=O(R);R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-3烷基;R4-R6彼此獨(dú)立地選自氫、R、苯基或取代的苯基;R7是氫、R、苯基或取代的苯基。
7.式IB的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CHO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R6選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R;R7選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、CN、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R或SO2NHR。
8.權(quán)利要求7的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR或-OC=O(R);R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-3烷基;R6和R7均是氫。
9.式IC的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4和R5彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、NHS(O)2R、=O、=S、=NNHR、=NNR2、=N-OR、=NNHCOR、=NNHCO2R、=NNHSO2R或=NR。
10.權(quán)利要求9的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR或-OC=O(R);R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-3烷基;R4是氫;并且當(dāng)X2是氮或碳時(shí)R5是氫。
11.式ID的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R、-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC-O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R;R7選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、CN、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R或SO2NHR。
12.權(quán)利要求11的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR或-OC=O(R);R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-3烷基;R4是氫并且R7是芳烷基。
13.式IE的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R、-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或酯或其等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4和R5彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R;稠合的環(huán)是芳香族或非芳香族雜環(huán)。
14.權(quán)利要求13的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR、-OC=O(R),R2是CO2H及其酯、酰胺或等配物,R3是H或C1-3烷基,稠合的環(huán)是含有1個(gè)環(huán)雜原子5或6元雜環(huán)。
15.式IF的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R。
16.權(quán)利要求15的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR或-OC=O(R);R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-3烷基;R4是H2或=O。
17.式IG的化合物 其中R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;R4和R6彼此獨(dú)立地選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R;R7選自氫、鹵素、R、OR、SR、芳基、取代的芳基、OH、CN、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R或SO2NHR。
18.權(quán)利要求17的化合物,其中R1是CH2Y并且Y是F、-OR、-SR或-OC=O(R);R2是CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-3烷基;R4、R6和R7是氫。
19.選自表1-6中所列化合物的化合物。
20.藥物組合物,含有a)權(quán)利要求1-19中任意一項(xiàng)所述的化合物;和b)可藥用載體、輔劑或賦形劑。
21.在患者中治療或預(yù)防疾病的方法,所述疾病選自IL-1介導(dǎo)的疾病、細(xì)胞凋亡介導(dǎo)的疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、傳染性疾病、變性疾病、與細(xì)胞死亡有關(guān)的疾病、過(guò)度飲酒、病毒介導(dǎo)的疾病、視網(wǎng)膜疾病、眼色素層炎、炎性腹膜炎、骨關(guān)節(jié)炎、胰腺炎、哮喘、成人呼吸窘迫綜合征、腎小球性腎炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、格累夫斯氏病、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性中性白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、慢性活動(dòng)性肝炎、重癥肌無(wú)力、炎性腸疾病、節(jié)段性回腸炎、牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、疤痕形成、移植物對(duì)抗宿主的疾病、器官移植排斥反應(yīng)、燒傷后的器官細(xì)胞凋亡、骨質(zhì)疏松、白血病和相關(guān)疾病、骨髓發(fā)育不良綜合征、多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)性骨疾病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、轉(zhuǎn)移性黑瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤、出血性休克、膿毒病、膿毒性休克、燒傷、志賀氏菌病、早老性癡呆、帕金森氏癥、杭廷頓氏舞蹈癥、肯尼迪氏疾病、朊病毒疾病、腦局部缺血、癲癇、心肌缺血、急性和慢性心臟病、心肌梗塞、充血性心衰、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)、脊柱肌肉萎縮、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化、HIV-相關(guān)性腦炎、衰老、脫發(fā)、中風(fēng)引起的神經(jīng)病性損傷、潰瘍性結(jié)腸炎、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、乙型肝炎、丙型肝炎、庚型肝炎、黃熱病、登革熱或日本腦炎、各種形式的肝臟疾病、腎臟疾病、多囊性腎疾病、與幽門(mén)螺旋桿菌有關(guān)的胃和十二指腸潰瘍、HIV感染、肺結(jié)核、腦膜炎,該方法包括向所述患者施用權(quán)利要求1-19中任意一項(xiàng)所述的化合物或權(quán)利要求20所述的藥物組合物。
22.權(quán)利要求21所述的方法,其中的疾病是細(xì)胞凋亡介導(dǎo)的疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、傳染性疾病、變性疾病、與細(xì)胞死亡有關(guān)的疾病、過(guò)度飲酒、病毒介導(dǎo)的疾病、炎性腹膜炎、腎小球性腎炎、糖尿病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性中性白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、慢性活動(dòng)性肝炎、疤痕形成、移植物對(duì)抗宿主的疾病、器官移植排斥反應(yīng)、燒傷后的器官細(xì)胞凋亡、骨質(zhì)疏松、白血病和相關(guān)疾病、骨髓發(fā)育不良綜合征、轉(zhuǎn)移性黑瘤、出血性休克、膿毒病、膿毒性休克、燒傷、志賀氏菌病、早老性癡呆、帕金森氏癥、杭廷頓氏舞蹈癥、肯尼迪氏疾病、朊病毒疾病、腦局部缺血、癲癇、心肌缺血、急性和慢性心臟病、心肌梗塞、充血性心衰、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)、脊柱肌肉萎縮、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化、HIV-相關(guān)性腦炎、衰老、脫發(fā)、中風(fēng)引起的神經(jīng)病性損傷、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、乙型肝炎、丙型肝炎、庚型肝炎、各種形式的肝臟疾病、腎臟疾病、多囊性腎疾病、與幽門(mén)螺旋桿菌有關(guān)的胃和十二指腸潰瘍、HIV感染、肺結(jié)核、腦膜炎。
22.在患者中抑制天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶介導(dǎo)的功能的方法,該方法包括向所述患者施用權(quán)利要求1-19中任意一項(xiàng)所述的化合物或權(quán)利要求20所述的藥物組合物的步驟。
23.在患者中減少I(mǎi)GIF或IFN-γ產(chǎn)生的方法,該方法包括向所述患者施用權(quán)利要求1-19中任意一項(xiàng)所述的化合物或權(quán)利要求20所述的藥物組合物的步驟。
24.權(quán)利要求1-19所述的方法,其中的化合物用于治療與冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)有關(guān)的并發(fā)癥。
25.權(quán)利要求1-19所述的方法,其中的化合物用于保藏細(xì)胞,所述方法包括將細(xì)胞浸泡在化合物或其可藥用衍生物的溶液中的步驟。
26.權(quán)利要求1-19所述的方法,其中的化合物或其可藥用衍生物用于器官移植或保存血液產(chǎn)品。
27.權(quán)利要求1-19所述的方法,其中的化合物用作治療癌癥的免疫療法的成分。
28.權(quán)利要求1-19所述的方法,與其它治療劑一起給藥。
29.制備式I化合物的方法, 所述方法包括如下步驟(a)提供式II的酸或酸衍生物, (b)將II與式4的氨基醇或氨基酮偶聯(lián)得到式III的中間體, 和(c)將中間體III轉(zhuǎn)化成化合物I,其中Y是氫或有機(jī)基團(tuán);Z是=O或OH;R1是氫、CN、CHN2、R或-CH2Y;R是脂肪族基團(tuán)、取代的脂肪族基團(tuán)、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、非芳香族雜環(huán)基團(tuán)或取代的非芳香族雜環(huán)基團(tuán);Y是電負(fù)性離去基或-OR、-SR、-OC=O(R)或-OPO(R8)(R9);R8和R9彼此獨(dú)立地選自R或OR;R2是CO2H、CH2CO2H或其酯、酰胺或它們的等配物;R3是氫或C1-6支鏈或直鏈的烷基;環(huán)A含有0-2個(gè)雙鍵,并且選擇性地與含有0-3個(gè)雜原子的飽和或不飽和的5-7元環(huán)稠合;環(huán)A中的X1和X3彼此獨(dú)立地選自氮或碳,X2選自?xún)r(jià)鍵、氧、硫、氮或碳,其中具有適宜化合價(jià)的任何X均可以帶有取代基;環(huán)A、包括稠合的環(huán)(如果存在的話(huà))中具有適宜化合價(jià)的各碳可以彼此獨(dú)立地被氫、鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、NHS(O)2R、=O、=S、=NNHR、=NNR2、=N-OR、=NNHCOR、=NNHCO2R、=NNHSO2R或=NR取代;環(huán)A中的各個(gè)可以被取代的氮被氫、R、COR、S(O)2R或CO2R取代;條件是當(dāng)X3是碳時(shí),X3上的取代基通過(guò)除氮以外的原子連接;進(jìn)一步的條件是環(huán)A中的X至少有一個(gè)是氮。
30.式IIA或IIB的化合物 其中Y是氫或有機(jī)基團(tuán);R3是C1-6烷基;IIA的嘧啶環(huán)或IIB的喹唑啉環(huán)上的各個(gè)可被取代的碳彼此獨(dú)立地被氫、鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR或NHS(O)2R取代;并且R是選擇性取代的C1-6烷基。
31.權(quán)利要求30的化合物,其中Y是氫或C1-6烷基。
全文摘要
本發(fā)明提供了可用作天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑的新化合物及其可藥用衍生物。這些化合物具有通式I的結(jié)構(gòu)其中R
文檔編號(hào)C07D217/24GK1420872SQ00818255
公開(kāi)日2003年5月28日 申請(qǐng)日期2000年12月8日 優(yōu)先權(quán)日1999年12月8日
發(fā)明者J·戈萊克, P·查理弗森, J-D·查理爾, H·賓馳 申請(qǐng)人:沃泰克斯藥物股份有限公司