專利名稱：六種異喹啉生物堿的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黃連素代謝產(chǎn)物的分離及合成，更確切地說是異喹啉類似物的合成小檗堿(berberine,化合物Ⅰ)也稱黃連素，為黃連、三顆針或其他小檗植物中提取的生物堿。其在植物中即以鹽酸鹽形式存在，臨床口服也為鹽酸鹽，其注射液為硫酸鹽或硫酸氫鹽。 化合物Ⅰ小檗堿臨床廣泛用作抗菌藥和止瀉藥。但是近年來，發(fā)現(xiàn)小檗堿具有60多種藥理作用(國外醫(yī)藥植物藥分冊，1990,5(4):156-163。)。小檗堿的臨床用途已經(jīng)從單純的抗菌止瀉擴展到心腦血管疾病、糖尿病等重要疾病的治療上來了。目前，臨床報道最多的是鹽酸小檗堿口服用于治療各種心率失常，其次是用于糖尿病降血糖。報道較多的還有心力衰竭、消化性潰瘍、膽囊炎、高血壓以及腦血栓等方面的治療應(yīng)用。藥理也以抗心率失常方面的研究為多，其次是細胞毒，抗血栓，腦缺血保護等方面的研究。
但是人口服給藥后血漿中小檗堿的濃度非常低，至今未見小檗堿人體藥物動力學的完整研究。在臨床口服有效時，體內(nèi)藥物濃度應(yīng)該還未達到體外試驗的有效濃度。同時，我們在鹽酸小檗堿人體尿藥分析中檢測到數(shù)個未知代謝物，與原形藥物相比的色譜峰面積提示小檗堿代謝轉(zhuǎn)化率不容忽視。綜合考慮這兩個方面，有理由可能存在小檗堿的活性代謝產(chǎn)物，我們從健康人口服鹽酸小檗堿片劑后收集的尿液，采用大孔樹脂1400柱層析，即服藥后的尿樣上柱，先水洗，然后以10％為間隔，從20％至100％的甲醇/水混合溶劑進行梯度洗脫?？瞻啄驑油瑯由洗罂讟渲?400柱，甲醇/水混合溶劑梯度洗脫。各流份50℃水浴中真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，濃縮至小體積。正相熒光HPLC和反相HPLC檢測，對比空白尿樣，確定含代謝物的流份。合并色譜情況相似的流份再經(jīng)大孔樹脂1400柱層析，最后經(jīng)Sephadex LH-20柱純化，甲醇/水中重結(jié)晶。分離鑒定了小檗堿的三個人體代謝產(chǎn)物，為新結(jié)構(gòu)化合物M1、M2和M3，化學合成此三個化合物的同時還合成了三個類似物M4,M5和M6。 M1 M2M3 M4M5 M6本發(fā)明的目的在于根據(jù)黃連素的有效作用，尋找出等于或優(yōu)于黃連素藥效的新藥。
本發(fā)明化合物的通式為 M1R1=-OCH3,R2=-OSO3-,R3=R4=-OCH3M2R1=-OSO3-,R2=-OH,R3=R4=-OCH3M3R1,R2=-OCH2O,R3=-OCH3,R4=-OSO3-M4R1=-OSO3-,R2=-OCH3,R3=R4=-OCH3M5R1=-OH,R2=-OSO3-,R3=R4=-OCH3M6R1,R2=-OCH2O,R3=-OSO3-,R4=-OCH3本發(fā)明通過以下方法實現(xiàn)1．M1,M4的合成 可得M4: 2．M2,M5的合成 3．M3,M6的合成 同法，以 代替 進行反應(yīng)，可得M6: 藥根堿與氯磺酸在N,N-二甲基苯胺/氯仿混合溶劑中酯化，獲得化合物M1。同法，以非洲防己胺 代替 進行反應(yīng)，可得M4:
化合物Ⅰ經(jīng)硫酸氧化脫亞甲基，的脫亞甲基小檗堿(化合物Ⅱ)，化合物Ⅱ再與氯磺酸在N,N-二甲基苯胺/氯仿混合溶劑中酯化，分離，獲得化合物M2和M5。
從胡椒乙胺和鄰-香蘭醛縮合、氫化還原得化合物Ⅲ，化合物Ⅲ在甲酸和無水硫酸銅存在下，與乙二醛縮合反應(yīng)得化合物Ⅳ，后者再與氯磺酸在N,N-二甲基苯胺/氯仿混合溶劑中酯化，獲得化合物M3。同法，以 代替 進行反應(yīng)，可得M6: 化合物M1、M2、M3、M4、M5和M6可在心血管、內(nèi)分泌、腫瘤和細菌感染等的疾病治療中應(yīng)用。
下面給出本發(fā)明的實施例，對本發(fā)明作進一步的說明，但不限制本發(fā)明。
實施例1化合物M1的制備鹽酸藥根堿(1g)，N,N-二甲基苯胺/三氯甲烷(1∶1)混合溶劑(20ml)，置冰水浴中冷卻至0℃，氯磺酸(5ml)分次加入，保持0℃反應(yīng)兩小時，加入氨水(10ml)終止反應(yīng)，分去上層有機相，水液加鹽酸調(diào)pH值至1～2，析出黃色結(jié)晶，甲醇/水混合溶劑中重結(jié)晶。濾出，干燥，得0.64克M1，得率64％。H1NMR(400MHz,DMSO-d6)數(shù)據(jù)δ9.91(1H,s,H-8),9.05(1H,s,H-13),8.22(1H,d,J=9.1Hz,,H-11),8.04(1H,d,J=9.1Hz,,H-12),7.73(1H,s,H-1),7.56(1H,s,H-4),4.94(2H,t,J=6.1Hz,2H-6),4.10(3H,s,-OCH3-9),4.07(3H,s,-OCH3-10),3.92(3H,s,-OCH3-2),3.20(2H,t,J=6.1Hz,2H-5)。同法，以非洲防己胺 代替 進行反應(yīng)，可得M4:
實施例2化合物Ⅱ(鹽酸脫亞甲基小檗堿)的制備硫酸小檗堿(8g)，60％v/v硫酸(160ml)，間苯三酚(9g)，混合，攪拌下于油浴100℃反應(yīng)8小時。反應(yīng)液冷卻，加入0.03g/mlNaI溶液(80ml)，濾出沉淀，濾渣水洗后溶于1％KOH溶液(200ml)，加入NaHSO3細粉，至溶液pH值為5～6，濾出沉淀，水洗，溶于丙酮/水(1∶1)的混合溶劑中，通過201×7強堿陰離子交換樹脂(Cl-型)柱，柱后流出液濃縮至小體積，析出黃色針晶。濾出，干燥，得4.16克，得率52％。
實施例3化合物M2的制備化合物Ⅱ(5g)，N,N-二甲基苯胺/三氯甲烷(1∶1)混合溶劑(100ml)，置冰水浴中冷卻至0℃，氯磺酸(30ml)分次加入，保持0℃反應(yīng)兩小時，加入氨水(120ml)終止反應(yīng)，分去上層有機相，水液加鹽酸調(diào)pH值至1～2，析出黃色結(jié)晶，甲醇/水混合溶劑中重結(jié)晶。濾出，干燥，得結(jié)晶3.8克，得率61％。H1NMR(400MHz,DMSO-d5)數(shù)據(jù)δ9.86(1H,s,H-8),8.81(1H,s,H-13),8.19(1H,d,J=9.1Hz,,H-11),8.13(1H,d,J=9.1Hz,,H-12),8.02(1H,s,H-1),6.92(1H,s,H-4),4.92(2H,t,J=6.0Hz,2H-6),4.10(3H,s,-OCH3-9),4.08(3H,s,-OCH3-10),3.18(2H,t,J=6.0Hz,2H-5)。
同法，可得M5。
實施例4縮合物(化合物Ⅲ)的制備在反應(yīng)瓶中加入胡椒乙胺(3g)和鄰-香蘭醛(3g)，在水浴上煮沸，反應(yīng)30分鐘，冷卻，加入甲醇(25ml)，在室溫下分次緩緩加入硼氫化鉀(2g)使其反應(yīng)，加畢，在水浴上回流反應(yīng)1小時，回收甲醇。然后加水振搖，使固體溶解，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，殘渣加鹽酸乙醇溶解，調(diào)節(jié)pH值為5-7，于5℃冷凍過夜，濾出結(jié)晶，干燥，得化合物Ⅲ鹽酸鹽5.0-5.3克，得率78.5-83.5％。
實施例5
鹽酸Thallyfendine(化合物Ⅳ)的制備在反應(yīng)瓶中加入85％甲酸15毫升，攪拌下加入無水硫酸銅2.8克，在50-55℃水浴中保溫脫水30分鐘，加入縮合物鹽酸鹽(3g)和乙二醛(含量40％,2.5ml)，升溫至100℃反應(yīng)4小時。在反應(yīng)過程中按以下次序依次加入濃鹽酸保溫開始后45分鐘，0.2毫升；90分鐘，0.2毫升；150分鐘，0.3毫升；210分鐘，0.3毫升；230分鐘，0.2毫升。第五次加完后，繼續(xù)反應(yīng)10分鐘。然后停止加熱，攪拌，冷卻到10℃以下，冷凍一小時，過濾，抽干，在80℃烘干，得化合物Ⅳ鹽酸鹽3.7克。
實施例6化合物M3的制備化合物Ⅳ鹽酸鹽(1g)，N,N-二甲基苯胺/三氯甲烷(1∶1)混合溶劑(20ml)，置冰水浴中冷卻至0℃，氯磺酸(5ml)分次加入，保持0℃反應(yīng)兩小時，加入氨水(10ml)終止反應(yīng)，分去上層有機相，水液加鹽酸調(diào)pH值至1～2，析出黃色結(jié)晶，甲醇/水混合溶劑中重結(jié)晶。濾出，干燥，得0.71克，得率71％。H1NMR(400MHz,DMSO-d6)數(shù)據(jù)δ9.85(1H,s,H-8),8.89(1H,s,H-13),8.32(1H,d,J=9.1Hz,,H-11),7.85(1H,d,J=9.1Hz,,H-12),7.83(1H,s,H-1),7.08(1H,s,H-4),6.17(2H,s,2-OCH2O-3),4.91(2H,t,J=6.0Hz,2H-6),4.26(3H,s,-OCH3-9),3.17(2H,t,J=6.0Hz,2H-5)。同法，以 代替 進行反應(yīng)，可得M6:
權(quán)利要求
1.一類化合物結(jié)構(gòu)如通式所示的異喹啉衍生物及其可生理接受的鹽。 M1 R1=-OCH3,R2=-OSO3-,R3=R4=-OCH3M2 R1=-OSO3-,R2=-OH,R3=R4=-OCH3M3 R1,R2=-OCH2O,R3=-OCH3,R4=-OSO3-M4 R1=-OSO3-,R2=-OCH3,R3=R4=-OCH3M5 R1=-OH,R2=-OSO3-,R3=R4=-OCH3M6 R1,R2=-OCH2O,R3=-OSO3-,R4=-OCH3
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物，其特征在于當R1=-OCH3,R2=-OSO3-,R3=R4=-OCH3時，異喹啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物M1:
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物，其特征在于當R1=-OSO3-,R2=-OH,R3=R4=-OCH3時，異喹啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物M2:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物，其特征在于當R1,R2=-OCH2O-,R2=-OCH3,R4=-OSO3-時，異喹啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物M3:
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物，其特征在于當R1=-OSO3-,R2=-OCH3,R3=R4=-OCH3時，異喹啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物M4:
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物，其特征在于當R1=-OH,R2=-OSO3-,R2=R4=-OCH3時，異喹啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物M5:
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物，其特征在于當R1,R2=-OCH2O-,R3=-OSO3-,R4=-OCH3時，異喹啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物M6:
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物的制備方法，其特征在于藥根堿或非洲防己胺在N,N-二甲基苯胺和氯仿中與氯磺酸酯化生成化合物M1或M4。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物的制備方法，其特征在于小檗堿在硫酸的存在下經(jīng)脫亞甲基反應(yīng)生成脫亞甲基小檗堿，它再在N,N-二甲基苯胺和氯仿中與氯磺酸酯化生成化合物M2和M5。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物的制備方法，其特征在于A．胡椒胺和鄰-香蘭醛加熱縮合，再經(jīng)氫化還原制得結(jié)構(gòu)式如下的化合物Ⅱ B．化合物Ⅱ在甲酸，無水硫酸銅存在下，與乙二醛加熱縮合得結(jié)構(gòu)式如下的化合物Ⅲ C．化合物Ⅲ再在N,N-二甲基苯胺和氯仿中與氯磺酸酯化生成化合物M3。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異喹啉衍生物可在心血管、內(nèi)分泌、腫瘤和細菌感染等的疾病治療中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及異喹啉類似物的合成,從黃連素代謝產(chǎn)物中分離獲得三種新化合物屬異喹啉類似物,摸索出它們的合成方法同時在不同的取代位置上又合成了另外三種新化合物,經(jīng)初步藥理試驗對心血管、腫瘤及細菌感染等的疾病有一定效果。
文檔編號C07D221/04GK1314347SQ00114970
公開日2001年9月26日 申請日期2000年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年3月17日
發(fā)明者潘俊芳, 余琛, 朱大元, 張慧, 任建英 申請人:中國科學院上海藥物研究所, 上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院