后對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體（通過(guò)本領(lǐng)域公知的分級(jí) 結(jié)晶或色譜手段而由此形成）進(jìn)行拆分，并在隨后回收純的對(duì)映異構(gòu)體。可使用本領(lǐng)域公 知的多種方法來(lái)制備式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓化合物，其中對(duì)映異構(gòu)體的過(guò)量 百分比通常超過(guò)約80%。有利的是，優(yōu)選的對(duì)映異構(gòu)體的過(guò)量百分比大于80%，優(yōu)選大于 90 %，更優(yōu)選大于95 %，并且最優(yōu)選為99 %以上。
[0155] 本發(fā)明的固體分散體可以通過(guò)多種方法來(lái)制備，包括熔融和溶劑蒸發(fā)方法。此 外，本發(fā)明的固體分散體還可以根據(jù)如下文中所描述的工序制備：Chiou WL, Riegelman S: "Pharmaceutical applications of solid dispersion systems", J. Pharm. Sci. 1971 ; 60:1281-1302 ;Serajuddin ATM: "Solid dispersion of poorly water-soluble drugs:early promises, subsequent problems, and recentbreakthroughs"，J. Pharm. Sci.1999 ；88:1058-1066；Leuner C,Dressman J: "Improving drug solubility for oral delivery using solid dispersions"，Eur. J. Pharm.Biopharm. 2000 ;50:47-60 ;和 Vasconcelos T,Sarmento B,Costa P: "Solid dispersions as strategy to improve oral bioavailability of poor water soluble drugs"，Drug Discovery Today 2007 ； 12:1068-1075,所有這些文獻(xiàn)均以引用方式全文并入本文。
[0156] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的固體分散體是通過(guò)熔融工藝制備的。在一個(gè)實(shí)施方 案中，熔融工藝包括在載體中將式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓的多個(gè)實(shí)施方案的一 個(gè)或多個(gè)熔融。在一個(gè)實(shí)施方案中，熔融工藝包括使本發(fā)明的熔融化合物和載體冷卻。在 一個(gè)實(shí)施方案中，熔融工藝包括將熔融的化合物和載體粉碎。在一個(gè)實(shí)施方案中，在冷卻步 驟之后將本發(fā)明的熔融的化合物和載體粉碎。
[0157] 在一些實(shí)施方案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓或者其藥學(xué)可接受的 鹽、溶劑化物（包括水合物）、外消旋物、對(duì)映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記的形式與載體間 不相容，在這種情況中，可以在熔融步驟中加入表面活性劑，從而防止在加熱的混合物中形 成2個(gè)液相或懸液。在一些實(shí)施方案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓的多個(gè)實(shí)施 方案中的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案懸浮于之前熔融的載體中，而并未使用熔融狀態(tài)的藥品和載 體，由此降低了工藝的溫度。在一個(gè)實(shí)施方案中，在冰浴攪拌下冷卻熔融的藥品和載體的混 合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)噴霧冷卻（或者通過(guò)噴霧冷凝）冷卻并固化熔融的藥品和 載體混合物。
[0158] 在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)將熔融物噴霧至冷卻室（使環(huán)境溫度或冷卻溫度的低溫 空氣通過(guò)該冷卻室）中從而將熔融物形成顆粒，從而冷卻和固化熔融的藥品和載體的混合 物。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)在合適的流化床處理器中使熔融分散體霧化和再固化，從而冷 卻和固化熔融的藥品和載體混合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)在可加熱的高剪切力混合器 中進(jìn)行熔融制粒，從而冷卻并固化熔融的藥品和載體的混合物。
[0159] 在一些實(shí)施方案中，可以采用熱階段擠出（hot-stage extrusion)或恪融團(tuán)聚來(lái) 避免藥品的熔融局限。熱階段擠出包括如下過(guò)程：在熔融溫度下將預(yù)先混合的藥品和載體 以高轉(zhuǎn)速在短時(shí)間內(nèi)擠出；在室溫下冷卻后收集所得的產(chǎn)物并研磨。
[0160] 在一個(gè)實(shí)施方案中，將式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓的多個(gè)實(shí)施方案中的 一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案在校對(duì)的溫度下加工，從而避免任何熱不穩(wěn)定的化合物發(fā)生降解。在 一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)將熱階段擠出與暫時(shí)性增塑劑（例如二氧化碳）結(jié)合而得到較低的 處理溫度。在一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備中，在常規(guī)的高剪切力混 合器或旋轉(zhuǎn)處理器中使用了熔融團(tuán)聚。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)將包含根據(jù)本發(fā)明的噻吩 并三唑并二氮雜卓化合物的熔融載體加入至加熱的賦形劑中，從而制備根據(jù)本發(fā)明的固體 分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)將熔融載體加入到根據(jù)本發(fā)明的噻吩并三唑并二氮雜卓 與一種或多種賦形劑的加熱混合物中，從而制備根據(jù)本發(fā)明的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方 案中，通過(guò)將根據(jù)本發(fā)明的噻吩并三唑并二氮雜卓化合物、載體和一種或多種賦形劑的混 合物加熱至載體的熔融范圍內(nèi)或以上的溫度，從而制備根據(jù)本發(fā)明的固體分散體。
[0161] 在一些實(shí)施方案中，通過(guò)溶劑蒸發(fā)方法來(lái)制備根據(jù)式（1)所示的噻吩并三唑并二 氮雜卓的制劑多個(gè)實(shí)施方案中的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案。在一個(gè)實(shí)施方案中，溶劑蒸發(fā)方法 包括使根據(jù)式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓和載體溶解于揮發(fā)性溶劑中，然后使揮發(fā) 性溶劑蒸發(fā)。在一個(gè)實(shí)施方案中，揮發(fā)性溶劑可以為一種或多種賦形劑。在一個(gè)實(shí)施方案 中，一種或多種賦形劑包括但不限于抗粘劑、惰性填料、表面潤(rùn)濕劑、pH調(diào)節(jié)劑和添加劑。在 一個(gè)實(shí)施方案中，賦形劑可以溶解于揮發(fā)性溶劑中，或者在揮發(fā)性溶劑中呈懸浮或膨脹狀 〇
[0162] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備包括使懸浮于揮發(fā)性溶劑中 的一種或多種賦形劑干燥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的干燥包括真空干燥、使揮發(fā)性溶劑在 低溫下緩慢蒸發(fā)、使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、噴霧干燥、噴霧制粒、冷凍干燥或使用超臨界流體。
[0163] 在一個(gè)實(shí)施方案中，使用了噴霧干燥制備根據(jù)式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜 卓組合物的制劑，其包括使所述的組合物的懸液或溶液霧化形成小滴，然后快速除去制劑 中的溶劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的制劑的制備涉及噴霧制粒，其中將位于溶劑 中的組合物的溶液或懸液噴霧至合適的化學(xué)惰性和/或物理惰性填料上，例如乳糖或甘露 醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)雙通或三通噴嘴對(duì)所述的組合物的溶液或懸液進(jìn)行噴霧制粒。
[0164] 在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備包括使用超臨界流體。術(shù)語(yǔ) "超臨界流體"是指在臨界溫度和臨界壓力以上以單一液相存在的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案 中，根據(jù)本發(fā)明的制劑的制備包括使用超臨界二氧化碳流體。在一個(gè)實(shí)施方案中，利用超 臨界流體技術(shù)的根據(jù)本發(fā)明的制劑制備包括：將根據(jù)式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓 化合物和載體溶解于常見(jiàn)溶劑中，該溶劑通過(guò)噴嘴與二氧化碳同時(shí)被引入至顆粒形成容器 中；以及將所述溶液噴霧，從而使溶劑被超臨界流體快速萃取，由此使得固體分散體顆粒沉 淀在容器的壁上。
[0165] 在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備包括使用共沉淀方法。在一 個(gè)實(shí)施方案中，在持續(xù)攪拌下將非溶劑滴加至根據(jù)式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓組 合物和載體溶液中。在一個(gè)實(shí)施方案中，在加入非溶劑的過(guò)程中，使根據(jù)式（1)所示的噻吩 并三唑并二氮雜卓組合物和載體進(jìn)行共沉淀，從而形成微顆粒。在一個(gè)實(shí)施方案中，過(guò)濾并 干燥所得的微顆粒，從而提供所需的固體分散體。
[0166] 式⑴所示的化合物與聚合物載體（一種或多種）的混合比例沒(méi)有特別限定，只 要其可以改善式（1)所示的化合物的生物利用率即可，并且該比例根據(jù)聚合物的種類而改 變。
[0167] 在以下非限定性的實(shí)施例中說(shuō)明本發(fā)明。
[0168] VII?例子
[0169] 在以下非限定性的實(shí)施例中說(shuō)明本發(fā)明。
[0170] 實(shí)施例1 :化合物（1-1)的固體分散體的體外篩詵
[0171] 使用化合物（1-1)以及5種聚合物中的一種來(lái)制備十種固體分散體，其中所述聚 合物包括醋酸琥珀酸酯羥丙基甲基纖維素（HPMCAS-M)、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素酯 (HPMCP-HP55)、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、PVP-乙酸乙烯酯（PVP-VA)和 Euragit L100-55,并 且對(duì)于每種聚合物，化合物（1-1)的負(fù)載率為25%和50%。通過(guò)溶劑蒸發(fā)方法來(lái)制備固 體分散體：使用噴霧干燥，然后在低溫對(duì)流烤箱中進(jìn)行二次干燥。通過(guò)非漏槽溶解性能測(cè) 試（non-sink dissolution performance test)來(lái)評(píng)估各固體分散體的性能，其中所述測(cè) 試測(cè)量了藥品的總量和隨時(shí)間的推移溶液中所存在的游離藥品的量。選擇非漏槽溶解是由 于其能夠最好地代表低溶解度化合物的體內(nèi)情況。該測(cè)試包括在分散體被引入至測(cè)試介質(zhì) (該測(cè)試介質(zhì)模擬了體內(nèi)條件）后的約30至40分鐘，分散體由胃部pH值（0.1 N NaCl，pH值 為1.〇)至腸內(nèi)口!1值$&?55正，口11值為6.5)的"胃部轉(zhuǎn)移"。[? &?55正為禁食狀態(tài)的人工腸 液，其由3mM的牛黃膽酸鈉、0. 75mM的卵磷脂、0. 174g的NaOH顆粒、1. 977g的NaH2P04 .H20、 3. 093g的NaCl、和純凈水適量500mL組成]。使用高效液相色譜（HPLC)方法和Agilent 1100系列HPLC來(lái)定量溶解藥品的量。制劑的溶解圖（圖1A-1J)表明：相對(duì)于相同介質(zhì)中 未配制的化合物而言，在所有的分散體候選物中，藥品的溶解度均大幅升高。在所有的固體 分散體中，根據(jù)在腸內(nèi)pH值下所釋放的游離藥品的水平更高這一發(fā)現(xiàn)，25%化合物（1-1) 在PVP中的分散體、25%化合物（1-1)在HPMCAS-M中的分散體、以及50%化合物（1-1)在 HPMCAS-M中的分散體所提供的口服吸收效果高于未配制的化合物。
[0172] 賣施例2 :化合物（1-1)的固體分散體的體內(nèi)篩詵
[0173] 以更大的規(guī)模制備化合物（1-1)的固體分散體，即25%化合物（1-1)在PVP中的 分散體、25%化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的分散體、和50%化合物（1-1)在HPMCAS-M中 的分散體以用于體內(nèi)研宄。各制劑均經(jīng)過(guò)了實(shí)施例1所述的體外溶解測(cè)試的評(píng)估。為了確 保這些分散體是無(wú)定形且均勻的，通過(guò)X射線粉末衍射法（PXRD)和更改的差示掃描量熱法 (mDSC)來(lái)評(píng)估這些分散體。X射線衍射計(jì)為Bruker D-2Phaser。此外，為了 了解水對(duì)各種 分散體的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度（Tg)的影響，對(duì)在設(shè)定的相對(duì)濕度（即，25%、50%和75%RH)下 首先平衡至少18小時(shí)的樣品實(shí)施mDSC。[水可以用作固體分散體的增塑劑，并且體系由于 活性化合物或聚合物的收濕性可以影響被這些體系吸收的水的量]。
[0174] 非漏槽溶解結(jié)果（圖2A-2C)與實(shí)施例1中分散體的結(jié)果相當(dāng)。PXRD結(jié)果（圖3) 表明任意一種分散體中均未顯不存在結(jié)晶性化合物，并且mDSC結(jié)果（圖4A-4C)表明各分 散體均存在單一的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度（Tg)，這表明各分散體是均勻的。對(duì)于各種分散體，觀 察到Tg與相對(duì)濕度之間呈反比關(guān)系（圖5)。明顯的是，對(duì)于在75% RH下平衡的25%化 合物（1-1)在PVP中的固體分散體，出現(xiàn)了 2個(gè)Tg，這表明發(fā)生了相分離，并且該分散體還 顯示出在75%RH下發(fā)生了熔融，這表明在RH平衡過(guò)程中發(fā)生了結(jié)晶（圖6)。該發(fā)現(xiàn)表明 25%化合物（1-1)在PVP中的固體分散體的穩(wěn)定性弱于HPMCAS-M分散體。
[0175] 為了評(píng)估這三種分散體的生物利用率，向多組雄性獵兔犬（每組3只）給予劑量 為3mg/kg的化合物（1-1)的固體分散體的水性懸液（通過(guò)口服填喂法給藥），或者給予劑 量為lmg/kg的溶解于水：乙醇：聚乙二醇（PEG) 400 (60:20:20)中的化合物（1-1)(并以靜 脈推注給藥至頭靜脈中）。在靜脈給藥后的0分鐘（預(yù)劑量）、5分鐘、15分鐘和30分鐘、 和1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)，以及在口服填喂給藥后的0分鐘（預(yù) 劑量）、15分鐘和30分鐘、以及1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、和24小時(shí)由各動(dòng) 物的頸靜脈收集血液樣品。使用定量LC-MS/MS方法檢測(cè)各樣品中存在的化合物（1-1)的 量，并且定量下限為〇. 5ng/mL。通過(guò)使用線性梯形法則（直至最后可測(cè)量的濃度，而未將終 末消除相外推至無(wú)窮大）來(lái)測(cè)定血漿濃度-時(shí)間曲線的曲線下面積（AUC)。通過(guò)對(duì)對(duì)數(shù)濃 度-時(shí)間曲線的終末線性部分進(jìn)行最小二乘回歸分析來(lái)計(jì)算消除半衰期（t 1/2)。由血漿濃 度數(shù)據(jù)直接得到最大血漿濃度（C_)和達(dá)到C_的時(shí)間（t_)。通過(guò)口服給藥后的劑量歸 一化的AUC除以靜脈給藥后的劑量歸一化的AUC來(lái)計(jì)算口服生物利用率（F)，并以百分率 (% )形式報(bào)告。下表1中概括的結(jié)果分別給出了 25%化合物（1-1)在PVP中的固體分散 體、25%化合物（1-1)在HPMCAS-M中的固體分散體和50%化合物（1-1)在HPMCAS-M中的 固體分散體的平均口服生物利用率（58%、49%和74% )。
[0176] 表1 :狗口服（D〇)和靜脈（iv)給藥后的化合物（1-1)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（數(shù)倌 為3只狗的平均倌）
[0177]
[0178] AUC:血漿濃度-時(shí)間曲線下的面積；Cmax:最大血漿濃度；F:生物利用率；HPMCAS: 醋酸羥丙基甲基纖維素鈉；IV :靜脈；PEG :聚乙二醇；P0 :經(jīng)口，口服；PVP :聚乙烯吡咯烷 酮；t_:達(dá)到(：_的時(shí)間；11/2:血漿消除半衰期。
[0179] 賣施例3 :包含化合物（1-1)的固體分散體的膠囊的制各和臨床用涂
[0180] 制備l〇mg強(qiáng)度的凝膠膠囊，在患有惡性血液病的患者中進(jìn)行初步的臨床研宄。基 于實(shí)施例1和2中的化合物（1-1)的固體分散體的體外和體內(nèi)測(cè)試結(jié)果，選擇50%化合物 (1-1)在HPMCAS-M中的固體分散體用于膠囊的研發(fā)。以3#尺寸的硬凝膠膠囊充裝190mg 的充裝量為目標(biāo)來(lái)開(kāi)始膠囊的研發(fā)，因?yàn)檫@樣的硬膠囊的構(gòu)造可以通過(guò)充裝更大尺寸的膠 囊而潛在地增加膠囊的強(qiáng)度，同時(shí)保持藥物組合物。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，設(shè)計(jì)了 4種膠囊制劑，其中 具有不同量的崩解劑并且具有或不具有潤(rùn)濕劑。由于所有4種制劑都顯示出相似的崩解測(cè) 試和溶解測(cè)試結(jié)果，所以選擇最簡(jiǎn)單的制劑（不具有潤(rùn)濕劑，并具有最少量的崩解劑）用于 制造。進(jìn)行制造工藝的研發(fā)和規(guī)模擴(kuò)大的研宄，從而確認(rèn)固體分散體的噴霧干燥工藝和干 燥后的時(shí)間；共混的參數(shù)；為獲得約60g/cc的目標(biāo)堆密度的共混物的輥壓和研磨；以及膠 囊充裝的條件。
[0181] 將結(jié)晶性化合物（1-1)和聚合物醋酸琥珀酸酯羥丙基甲基纖維素（HPMCAS-M)溶 解于丙酮中，并噴霧干燥，從而生產(chǎn)包含50%化合物（1-1)負(fù)載率的固體分散體中間體 (SDI)顆粒。PXRD分析顯示SDI是無(wú)定形的，mDSC分析顯示SDI是均勻的（即在環(huán)境條 件下具有單一的Tg)。在V型攪拌機(jī)的多個(gè)階段（stages)中共混50%化合物（1-1)在 HPMCAS-M中的固體分散體（lOOOg)和賦形劑（包括微晶纖維素填料-粘結(jié)劑（4428g)、交 聯(lián)羧甲基纖維素鈉崩解劑（636g)、膠體二氧化硅分散劑/潤(rùn)滑劑（156g)、硬脂酸鎂分散劑 /潤(rùn)滑劑（156g)和乳糖一水合物填料（5364g))。然后，將混合物壓緊并制粒，從而得到約 0.6g/mL的堆密度。使用自動(dòng)化的充裝機(jī)器將混合物分配至3#尺寸的硬凝膠膠囊（目標(biāo)充 裝量：190mg)中，并使用膠囊剖光器將膠囊成品剖光。
[0182] 在口服給藥10mg膠囊（包含50%化合物（1-1)在HPMCAS中的固體分散體）后 進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)的評(píng)估，并將結(jié)果與對(duì)健康志愿者口服給藥4xl0mg膠囊（其包含化合物 (1-1)的Eudragit固體分散體）后進(jìn)行的藥代動(dòng)力學(xué)評(píng)估加以對(duì)比。
[0183] 在下表2A和2B中提供了這兩種藥物組合物的比較。前一 Eudragit制劑在2009 年1月8日出版的美國(guó)專利申請(qǐng)2009/0012064 A1中的實(shí)施例5中有所描述。該申請(qǐng)記 載：通過(guò)在水和乙醇的混合物中溶解和/或分散式（A)所示的噻吩并三唑并二氮雜卓和包 裹用賦形劑（包含季胺基甲基丙烯酸酯共聚物B型（Eudragit RS)、甲基丙烯酸共聚物C 型（Eudragit L100-55)、滑石和娃酸鎂錯(cuò)）來(lái)制備Eudragit固體分散體制劑。然后，使用 離心流化床制粒機(jī)將上述的非均勾混合物施加在微晶纖維素球（Nonpareil 101，F(xiàn)reund) 上，從而生產(chǎn)出分配至2#尺寸的羥丙基甲基纖維素膠囊中的顆粒。
[0184] 在這2個(gè)臨床研宄中，使用經(jīng)驗(yàn)證的LC-MS/MS方法來(lái)測(cè)定化合物（1-1)的血液水 平，并根據(jù)在膠囊給藥后24小時(shí)內(nèi)的各時(shí)間點(diǎn)測(cè)量的化合物（1-1)的血漿濃度來(lái)進(jìn)行藥代 動(dòng)力學(xué)分析。下表3中總結(jié)的結(jié)果顯示，根據(jù)AUC，HPMCAS-M固體分散體制劑在人類中的生 物利用率比Eudragit固體分散體制劑（924*4/1140,針對(duì)給藥劑量的差