一種黃根的乙酸乙酯提取物的提取方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中草藥提取技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種黃根的乙酸乙酯提取物的提取方 法,本發(fā)明還涉及一種黃根的乙酸乙酯提取物在制備抗肝纖維化活性藥物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃根又名南山花、狗骨木。為茜草科植物南山花(Prismatomeriscomatar. Z. Ruan) 的根,是廣西特產(chǎn)特色壯藥材之一。有強(qiáng)筋壯骨,利濕退黃,祛瘀生新,涼血止血之功。廣 西壯族民間用以治療風(fēng)濕跌打、肝炎、矽肺、貧血等多種疾病?,F(xiàn)代研宄黃根含有有機(jī)鋁化 合物、柚木醌、虎刺醛、甲基異茜草素、β-各留醇及蒽類(lèi)、萜類(lèi)。黃根提取物有抗菌消炎、 祛瘀平喘、保肝、抗肝纖維化、抗肺纖維化等作用(梁?jiǎn)⒊?,鐘鳴.中國(guó)中藥學(xué).廣西民族 醫(yī)藥出版社.2005 ;382)。早在1986年甘荔等人首先報(bào)告黃根抑制肝纖維化的病理形態(tài) 學(xué)觀察,認(rèn)為黃根對(duì)肝臟吞噬細(xì)胞有保護(hù)作用,促進(jìn)肝吞噬細(xì)胞對(duì)異物的排除,從而抑制肝 纖維化。姜建雙等對(duì)黃根化學(xué)成分進(jìn)行了研宄,通過(guò)反復(fù)的提取分離和純化鑒定了 1-羥 基-2-甲基蒽醌等6個(gè)化合物(姜建雙,馮子明,張培成.黃根化學(xué)成份的研宄.中國(guó)中藥 雜志.2005, 22(11) : 1751),鄧家剛等又報(bào)告黃根醇提物對(duì)CCL4所致大鼠肝纖維化具有保護(hù) 作用。此后鄧家剛等采用黃根醇提物對(duì)CCL 4所致大鼠肝纖維化的作用進(jìn)行觀察,結(jié)果認(rèn)為 黃根醇提物各劑量組可使肝纖維化大鼠肝組織中的I、ΠΙ型膠原含量減少,TGF-β 1僅微量 表達(dá)(①鄧家剛,周程艷,鄭作文:黃根醇提物對(duì)四氯化碳所致大鼠肝纖維化的保護(hù)作用時(shí) 珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥2008,19 (6) :1339.②鄧家剛,鄭作文,王勤等.復(fù)方黃根對(duì)四氯化碳所致大鼠 慢性肝損傷的保護(hù)作用.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志.200614(6) :372.③鄧家剛,周程艷, 鄭作文.黃根醇提物對(duì)肝纖維化大鼠肝組織中TGF-β 1表達(dá)及COI- I、COI- III水平的影 響.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào).2009 ; (1) :42)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種黃根的乙酸乙酯提取物的提取方法,解決了現(xiàn)有技術(shù)中 存在的黃根中具有抗肝纖維化的物質(zhì)成份不容易被浸提出來(lái)的問(wèn)題。
[0004] 本發(fā)明的另一目的是提供一種黃根的乙酸乙酯提取物在制備抗肝纖維化活性藥 物的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明所采用的第一技術(shù)方案是,一種黃根的乙酸乙酯提取物的提取方法,包括 以下步驟:
[0006] 步驟1、原料處理,將黃根的根部清洗、烘干、粉碎,制備的到黃根粗粉;
[0007] 步驟2、將黃根粗粉與乙醇溶液置于反應(yīng)容器中,常溫浸泡45min-75min,制備得 到浸泡液;
[0008] 步驟3、將浸泡液進(jìn)行加熱回流,350目濾布過(guò)濾,濾液泵入貯液罐,再通過(guò)真空抽 至濃縮罐進(jìn)行濃縮,共提取三次;
[0009] 步驟4、濃縮,合并三次過(guò)濾液,濃縮至無(wú)醇味時(shí),把濃縮液轉(zhuǎn)移至電磁鍋,用電磁 爐加熱,一邊攪拌一邊濃縮,至稠浸膏,得到黃根醇提物;
[0010] 步驟5、將步驟4得到的黃根醇提物加適量蒸餾水溶解,依次用石油醚、乙酸乙酯, 制備得到乙酸乙酯相;
[0011] 步驟6、蒸發(fā),蒸發(fā)除去乙酸乙酯得到黃根的乙酸乙酯提取物。
[0012] 上述技術(shù)方案中,乙醇溶液的濃度為60% -95%。
[0013] 黃根粗粉與乙醇溶液按照質(zhì)量體積比為1:5-1:10。
[0014] 回流條件是微沸45min-75min。
[0015] 本發(fā)明所采用的第二技術(shù)方案是一種黃根的乙酸乙酯提取物在制備抗肝纖維化 活性藥物的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明的有益效果是:本提取方法是米用60% -95%乙醇進(jìn)行提取,再按極性強(qiáng) 弱對(duì)乙醇提取物進(jìn)行萃取,再針對(duì)各部位開(kāi)展抗肝纖維化的活性研宄。從肝纖維化模型大 鼠肝臟指數(shù)、ALT、AST指標(biāo)可看出乙酸乙酯部位具有抗肝纖維化作用。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1是黃根的乙酸乙酯提取物的提取方法的工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0019] 本發(fā)明提供一種黃根的乙酸乙酯提取物的提取方法,如圖1所示,包括以下步驟:
[0020] 步驟1、原料處理,將黃根的根部清洗、烘干、粉碎,制備的到黃根粗粉;
[0021] 步驟2、將黃根粗粉與60 % -95 %的乙醇溶液按照質(zhì)量體積比為1:5-1:10置于反 應(yīng)容器中,常溫浸泡45min-75min,制備得到浸泡液,
[0022] 步驟3、將浸泡液進(jìn)行加熱回流,加熱回流條件是:微沸45min-75min,350目濾布 過(guò)濾,濾液泵入貯液罐共提取三次;
[0023] 步驟4、濃縮,合并三次過(guò)濾液,再通過(guò)真空抽至濃縮罐進(jìn)行濃縮,濃縮至無(wú)醇味 時(shí),把濃縮液轉(zhuǎn)移至電磁鍋,用電磁爐加熱,目的就是為了揮干乙醇,一邊攪拌一邊濃縮,至 稠浸膏,得到黃根醇提物;
[0024] 步驟5、將步驟4得到的黃根醇提物加適量蒸餾水溶解,用石油醚萃取2-3次,合并 水相,然后用乙酸乙酯萃取水相2-3次,合并得到乙酸乙酯相;
[0025] 步驟6、蒸發(fā),蒸發(fā)除去乙酸乙酯得到黃根的乙酸乙酯提取物。
[0026] 實(shí)施例1 :黃根的乙酸乙酯提取物的制備
[0027] 黃根,采自廣西防城,經(jīng)廣西民族醫(yī)藥研宄院蘭日春副主任藥師鑒定為茜草科植 物南山花PrismatomerisconnataY. Z. Ruan.的干燥根。黃根醇提物為實(shí)驗(yàn)室自制:將藥材 粉碎成粗粉,按IKg/袋裝入布袋中,扎好袋口,共20袋黃根粗粉,放入多功能提取、濃縮機(jī) 組的提取鍋中,按料:液=1 :7的比例,加入140Kg95%乙醇,浸泡藥材粉1小時(shí)后,第一次 加熱回流提取、保持微沸1小時(shí),350目濾布過(guò)濾,濾液泵入貯液罐,再通過(guò)真空抽至濃縮罐 進(jìn)行濃縮,藥渣再按料:液=1 :7的比例,加入140Kg95%乙醇,共提取三次。第二、三次加 熱回流提取、過(guò)濾、濃縮同第一次的方法;合并三次濾液,濃縮至無(wú)醇味時(shí),把濃縮液轉(zhuǎn)移至 電磁鍋,用電磁爐加熱,一邊攪拌一邊濃縮,至稠浸膏,稱(chēng)重,得稠浸膏I. 25kg。
[0028] 黃根醇提物加適量蒸餾水溶解,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分別得石 油醚部位56克(得率4. 48% ),乙酸乙酯部位169克(得率13. 52% );正丁醇部位237克 (得率18. 96% ),水部位共得約574克(得率45. 92% )。
[0029] 實(shí)施例2 :黃根的乙酸乙酯提取物的制備
[0030] 一種黃根的乙酸乙酯提取物的提取方法,將黃根的根部清洗、烘干、粉碎,制備的 到黃根粗粉;將黃根粗粉與60 %的乙醇溶液按照質(zhì)量體積比為1:5置于反應(yīng)容器中,常溫 浸泡75min,制備得到浸泡液,將浸泡液進(jìn)行加熱回流,加熱回流條件是:微沸45min,350目 濾布過(guò)濾,濾液泵入貯液罐共提取三次;合并三次過(guò)濾液,再通過(guò)真空抽至濃縮罐進(jìn)行濃 縮,濃縮至無(wú)醇味時(shí),把濃縮液轉(zhuǎn)移至電磁鍋,用電磁爐加熱,目的就是為了揮干乙醇,一邊 攪拌一邊濃縮,至稠浸膏,得到黃根醇提物;將黃根醇提物加適量蒸餾水溶解,用石油醚萃 取2-3次,合并水相,然后用乙酸乙酯萃取水相2-3次,合并得到乙酸乙酯相;蒸發(fā)除去乙酸 乙酯得到黃根的乙酸乙酯