本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種藥物組合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

目前，全球癌癥負(fù)擔(dān)不斷加重,未來20年每年新發(fā)癌癥病例將達(dá)到2200萬，同期癌癥死亡數(shù)將上升到1300萬例。受人口增長和老齡化影響，發(fā)展中國家的癌癥數(shù)量不斷攀升，全球60％的病例發(fā)生在非洲、亞洲和中美洲及南美洲地區(qū)，并且占全世界癌癥死亡數(shù)的70％。2014年，世界衛(wèi)生組織(who)報(bào)告預(yù)測癌癥病例由2012年的1400萬人逐漸遞增至2025年的1900萬，到2035年，將有可能達(dá)到2400萬人。在我國，衛(wèi)生部不久前召開的腫瘤防治宣傳通報(bào)會(huì)上，來自衛(wèi)生部、醫(yī)學(xué)科學(xué)院的專家披露：目前我國年均癌癥發(fā)病人數(shù)約180萬-200萬，死亡人數(shù)約150萬，如不加強(qiáng)環(huán)境保護(hù)和防控,今后20年內(nèi)，我國癌癥患病和死亡人數(shù)將翻一番。

前列腺癌是男性患癌風(fēng)險(xiǎn)較高的癌癥之一，2008年全球前列腺癌標(biāo)化發(fā)病率28.5/10萬，標(biāo)化死亡率為7.5/10萬，居男性常見腫瘤第二位，1998—2008年我國前列腺癌粗發(fā)病率為2.98/10萬—7.69/10萬；1998—2008年我國前列腺癌病死率為0.7/10萬—4.9/10萬。

未經(jīng)治療的前列腺癌為雄激素依賴性，通過內(nèi)分泌治療或去勢治療阻斷雄激素促使雄激素依賴性癌細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到治療目的，藥物治療目前是控制前列腺癌的主要治療手段，在治療期間大部分患者出現(xiàn)副作用，且受到副作用的折磨，給患者的身體和心理帶來極大的痛苦，不僅如此，藥物治療需要較高的費(fèi)用，大部分患者難以承擔(dān)，給患者家庭帶來傷害。目前采用的聯(lián)合用藥抗前列腺癌的藥物如多西紫杉醇、吉西他濱等具有很強(qiáng)的副作用，且價(jià)格昂貴。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明提供一種藥物組合物及其應(yīng)用。本發(fā)明旨在提供具有較好的抗癌的效果，特別是前列腺癌，低毒、低副作用的聯(lián)合藥物，且價(jià)格較低，能夠被廣大患者接受。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種藥物組合物，包含他汀類藥物和雙氫黃酮類化合物。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述他汀類藥物和雙氫黃酮類化合物的摩爾比為(1～15)：(1～100)。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述他汀類藥物和雙氫黃酮類化合物的摩爾比為(1～2)：(2.5～5)。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述他汀類藥物和雙氫黃酮類化合物的摩爾比為2：5。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述他汀類藥物的使用濃度為1μm～2μm；所述雙氫黃酮類化合物的使用濃度為2.5μm～5μm。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述他汀類藥物選自阿托伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀或羅伐他汀。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述雙氫黃酮類化合物為柚皮苷。

本發(fā)明還提供了所述的藥物組合物在制備治療癌癥的藥物中的應(yīng)用。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述癌癥為前列腺癌。

在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述前列腺癌細(xì)胞為pc-3細(xì)胞和lncap細(xì)胞。

本發(fā)明還提供了一種藥物，包括所述的藥物組合物。本發(fā)明對藥物的劑型不作限定，凡是藥物領(lǐng)域接受的劑型均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

本發(fā)明提供的藥物組合物是將柚皮苷(naringin)和阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合使用，其聯(lián)合使用的藥效大于單獨(dú)藥效，對前列腺癌及前列腺癌的發(fā)展具有明顯的抑制效果。本發(fā)明提供的藥物組合物中，阿托伐他汀是臨床降脂藥，柚皮苷是天然產(chǎn)物。旨在一方面通過與天然產(chǎn)物的聯(lián)合增加抗前列腺癌的效果，同時(shí)減少降脂藥的使用量；另一方面引入另一種物質(zhì)為天然產(chǎn)物，毒性低，副作用小。本發(fā)明提供的藥物組合物的給藥量低，大大降低藥物副作用。此外，本發(fā)明提供的抗癌藥物與現(xiàn)有抗癌藥物相比價(jià)格相對較低，極大的降低了患者的經(jīng)濟(jì)壓力。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。

圖1示采用mtt實(shí)驗(yàn)測定藥物對前列腺癌細(xì)胞的存活率；

圖2示采用cck-8實(shí)驗(yàn)測定藥物對前列腺癌細(xì)胞的存活率；

圖3示采用cck-8試劑檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌pc-3細(xì)胞的抑制作用；其中，由左至右依次為5μm柚皮苷(naringin)組、1μm阿托伐他汀(atorvastatin)組、2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組、5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)組和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組；

圖4示采用cck-8試劑檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌lncap細(xì)胞的抑制作用；其中，由左至右依次為2.5μm柚皮苷(naringin)組、5μm柚皮苷(naringin)組、2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組、2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組；

圖5示臺(tái)盼藍(lán)實(shí)驗(yàn)檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌pc-3細(xì)胞的作用；其中，由左至右依次為5μm柚皮苷(naringin)組、1μm阿托伐他汀(atorvastatin)組、2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組、5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)組和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組；

圖6示盼藍(lán)實(shí)驗(yàn)檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌lncap細(xì)胞的作用；其中，由左至右依次為2.5μm柚皮苷(naringin)組、5μm柚皮苷(naringin)組、2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組、2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)組。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明公開了一種藥物組合物及其應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。

本發(fā)明提供的藥物組合物中，阿托伐他汀是臨床降脂藥，柚皮苷是天然產(chǎn)物。旨在一方面通過與天然產(chǎn)物的聯(lián)合增加抗前列腺癌的效果，同時(shí)減少降脂藥的使用量；另一方面引入另一種物質(zhì)為天然產(chǎn)物，毒性低，副作用小。

本發(fā)明提供了一種組合物，此組合物包含他汀類藥物和雙氫黃酮類化合物。

優(yōu)選地，所述他汀類藥物選自：阿托伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀和羅伐他汀中的任意一種。

優(yōu)選地，以摩爾比計(jì)，組合物包括他汀類藥物1～15份，雙氫黃酮類化合物1～100份。

優(yōu)選地，以摩爾比計(jì)，組合物包括他汀類藥物2份，雙氫黃酮類化合物5份。

本方案提供的組合物是通過兩個(gè)化合物摩爾比例組合實(shí)現(xiàn)的，他汀類藥物、雙氫黃酮類化合物的摩爾比為2:5，他汀類藥物為阿托伐他汀，雙氫黃酮類化合物為柚皮苷。

上述天然產(chǎn)物為柚皮苷(naringin)，結(jié)構(gòu)如式ⅱ所示，又名柑橘甙，是一種黃酮苷。臨床降脂藥為阿托伐他汀(atorvastatin)，結(jié)構(gòu)如式ⅰ所示，又名立普妥(lipitor)。柚皮苷相對分子質(zhì)量：阿托伐他汀相對分子質(zhì)量＝580.53：1155.34。

1.本發(fā)明提供的方案是將柚皮苷(naringin)和阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合使用，其聯(lián)合使用的藥效大于單獨(dú)藥效，對前列腺癌及前列腺癌的發(fā)展具有明顯的抑制效果。

2.本發(fā)明提供的技術(shù)方案給藥量低，大大降低藥物副作用。

3.本方案提供的抗癌技術(shù)方案價(jià)格相對較低，極大的降低了患者的經(jīng)濟(jì)壓力。

4.本發(fā)明提供的技術(shù)方案含有柚皮苷—黃酮類化合物。

經(jīng)試驗(yàn)測定本發(fā)明提供的技術(shù)方案可明顯抑制前列腺癌細(xì)胞生長，具有較佳的抗腫瘤功效，本技術(shù)方案提供的兩藥聯(lián)合中，使用量少，價(jià)格低，在降低患者經(jīng)濟(jì)壓力的同時(shí)，減少副作用。

本發(fā)明提供的藥物組合物及其應(yīng)用中所用原料及試劑均可由市場購得。

以下實(shí)施案例中，抑制率+存活率＝1。

下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：

實(shí)施例1

本實(shí)施例將采用mtt實(shí)驗(yàn)測定藥物對前列腺癌細(xì)胞的存活率。單獨(dú)使用阿托伐他汀(atorvastatin)和柚皮苷(naringin)作用于前列腺癌pc-3細(xì)胞和lncap細(xì)胞，使用mtt方法檢測藥物對前列腺細(xì)胞的抑制作用。

方法如下：

前列腺癌pc-3細(xì)胞和lncap細(xì)胞以密度為1.5×10⁴cells/ml接200μl于96孔板中，放置于37℃、5％的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，然后將不同濃度的阿托伐他汀(atorvastatin)和柚皮苷(naringin)處理48h，加入200μl0.5mg/ml的mtt放入培養(yǎng)箱孵育2h，倒出mtt后再加入100μldmso孵育10min，在560nm波長下測定吸光值。

阿托伐他汀(atorvastatin)對pc-3細(xì)胞使用的濃度為0μm、2μm、4μm、8μm、10μm、20μm。

阿托伐他汀(atorvastatin)對lncap細(xì)胞使用的濃度0μm、2μm、4μm、8μm、10μm、20μm、25μm。

柚皮苷(naringin)對pc-3細(xì)胞使用的濃度為0μm、10μm、40μm、90μm、120μm、250μm。

柚皮苷(naringin)對lncap細(xì)胞使用的濃度為0μm、10μm、40μm、50μm、120μm、150μm、200μm。

結(jié)果見表1～表4、圖1。

表1mtt單藥

表2mtt單藥

表3mtt單藥

表4mtt單藥

實(shí)施例2

本實(shí)施例將采用cck-8實(shí)驗(yàn)測定藥物對前列腺癌細(xì)胞的存活率。單獨(dú)使用阿托伐他汀(atorvastatin)和柚皮苷(naringin)作用于前列腺癌pc-3細(xì)胞和lncap細(xì)胞，使用cck-8試劑檢測藥物對前列腺細(xì)胞的抑制作用。

方法如下：

前列腺癌pc-3細(xì)胞和lncap細(xì)胞以密度為,1.5×10⁴cells/ml接200μl于96孔板中，放置于37℃、5％的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，然后將不同濃度的阿托伐他汀(atorvastatin)和柚皮苷(naringin)處理48h，將無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基與cck-8試劑按照10:1混合，每孔加入100μl的已稀釋的cck-8，放入培養(yǎng)箱孵育1h，在450nm的波長測定其吸光度。

阿托伐他汀(atorvastatin)對pc-3細(xì)胞使用的濃度為0μm、1μm、2μm、4μm、10μm、20μm。

阿托伐他汀(atorvastatin)對lncap細(xì)胞使用的濃度為0μm、2μm、4μm、8μm、10μm、20μm、25μm。

柚皮苷(naringin)對pc-3細(xì)胞使用的濃度為0μm、10μm、40μm、90μm、120μm、250μm。

柚皮苷(naringin)對lncap細(xì)胞使用的濃度為0μm、10μm、40μm、50μm、120μm、150μm、200μm。

結(jié)果見表5～表10、圖2、圖3～圖4。

表5

表6

表7

表8

表9

注：根據(jù)軟件分析，表格有數(shù)據(jù)列開始依次標(biāo)號(hào)a、b、c、d、e。a與d相比較，^###p<0.001；c與d相比較，^#p<0.05；b與e相比較，^***p<0.001；c與e相比較，^***p<0.001。d與e兩聯(lián)合組無顯著性差異。

表10

注：根據(jù)軟件分析，表格有數(shù)據(jù)列開始依次標(biāo)號(hào)a、b、c、d、e。a與d相比較，^###p<0.001；b與d相比較，^###p<0.001；a與e相比較，^***p<0.001；c與e相比較，^***p<0.001。d與e兩聯(lián)合組無顯著性差異。

表5～表8、圖2與實(shí)施例1中的兩單藥對前列腺癌細(xì)胞作用的趨勢是相符合的。

表10、圖3為使用cck-8試劑檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌pc-3細(xì)胞的抑制作用。聯(lián)合的組合為5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)。在圖3中，5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥的抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率大于5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率。

表9、圖4為使用cck-8試劑檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌lncap細(xì)胞的抑制作用。聯(lián)合的組合為2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)。

在圖4中，2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥的抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥對lncap的抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率大于2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率。

實(shí)施例3

本實(shí)施例將采用臺(tái)盼藍(lán)實(shí)驗(yàn)測定聯(lián)合用藥對前列腺癌細(xì)胞的抑制作用。

方法如下：

將前列腺癌細(xì)胞以1.5×10⁴cells/ml的密度接2ml種于35mm培養(yǎng)皿，培養(yǎng)24小時(shí)。然后用不同濃度組合的阿托伐他汀和柚皮苷處理48小時(shí)。處理48小時(shí)之后，收集細(xì)胞，用臺(tái)盼藍(lán)染液染色，在倒置顯微鏡下計(jì)臺(tái)盼藍(lán)不染色的細(xì)胞數(shù)，并計(jì)算存活率。

結(jié)果見表11～表12、圖5～圖6。

表11

注：根據(jù)軟件分析，表格有數(shù)據(jù)列開始依次標(biāo)號(hào)a、b、c、d、e。a與d相比較，^###p<0.001；c與d相比較，^###p<0.001；b與e相比較，^***p<0.001；c與e相比較，^***p<0.001。d與e兩聯(lián)合組無顯著性差異。

表12

注：根據(jù)軟件分析，表格有數(shù)據(jù)列開始依次標(biāo)號(hào)a、b、c、d、e。a與d相比較，^###p<0.001；b與d相比較，^###p<0.001；a與e相比較，^***p<0.001；c與e相比較，^***p<0.001。d與e兩聯(lián)合組無顯著性差異。

表12、圖5為臺(tái)盼藍(lán)實(shí)驗(yàn)檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌pc-3細(xì)胞的作用。

聯(lián)合的組合為5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)。

圖5中，5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥的抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率大于5μm柚皮苷(naringin)+1μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率。

表11、圖6臺(tái)盼藍(lán)實(shí)驗(yàn)檢測兩藥聯(lián)合及相應(yīng)單藥對前列腺癌lncap細(xì)胞的作用。

聯(lián)合的組合為2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)和5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)。

圖6中，2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率極顯著(p＜0.01)大于兩單藥的抑制率，5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率大于2.5μm柚皮苷(naringin)+2μm阿托伐他汀(atorvastatin)聯(lián)合抑制率。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。