本發(fā)明涉及于中醫(yī)藥研究開發(fā)利用領域，具體來說，涉及一種防治非酒精性脂肪性肝病的復方制劑。

背景技術(shù)：

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一種無過量飲酒史、飲酒折含乙醇量小于140g/周(女性＜70g/周)，以肝實質(zhì)細胞脂肪變和脂肪於積為特征的臨床病理綜合征。近年來，隨著生活水平的提高、飲食結(jié)構(gòu)的改變以及藥物的濫用等因素的影響，非酒精性脂肪性肝病的發(fā)病率逐年上升，并且隨著肥胖癥患兒的增多，NAFLD的患病年齡也趨于低齡化，越來越顯示出臨床治療的重要性。

NAFLD的發(fā)病機制目前尚未統(tǒng)一，一般認為它是一種遺傳-環(huán)境-代謝應激相關(guān)性疾病，主要有原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類，其中又以原發(fā)性為主，包括以胰島素抵抗(insulin resistance，IR)為主的“一次打擊”和以氧化應激、肝細胞大量死亡和纖維化為主的“二次打擊”。除此，半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)、Fas、代謝性核受體、肝細胞鐵沉積、線粒體功能失調(diào)以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力等也參與其中。在NAFLD的發(fā)病和疾病發(fā)展過程中，不論是“第一次打擊”，還是“第二次打擊”，活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)起到了非常重要的作用。隨著游離脂肪酸(free fatty acids，F(xiàn)FA)大量增多，肝細胞脂肪變性，并在體內(nèi)一系列活性因子的作用下，大量產(chǎn)生ROS，超過抗氧化系統(tǒng)的清除能力，產(chǎn)生氧應激及大量過氧化產(chǎn)物，損傷蛋白及核酸，導致肝細胞損傷，使大量肝細胞在二次打擊中死亡，刺激自身免疫系統(tǒng)，激活肝庫普弗細胞，促使纖維化的發(fā)生。NAFLD的發(fā)生就是促脂肪變性與抗脂肪變性，促炎與抗炎間不平衡的結(jié)果。

目前西醫(yī)尚未研究出高效理想的治療方法，相關(guān)藥物盡管能有效降低肝脂、血脂，但都僅治其“標”而未治其“本”，甚至有一些藥物還表現(xiàn)出嚴重的肝臟、腎臟毒性給身體健康帶來了附加的傷害。而通過大量的臨床觀察和基礎研究發(fā)現(xiàn)，中藥對NAFLD療效確切，且無明顯的毒副作用顯現(xiàn)，因此，研發(fā)防治非酒精性脂肪肝的安全綠色有效藥物就具有了重要意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提出一種防治非酒精性脂肪性肝病的復方制劑，以克服現(xiàn)有相關(guān)技術(shù)所存在的上述不足。

本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：

一種防治非酒精性脂肪性肝病的復方制劑，由以下重量份數(shù)的原料制成：黑果枸杞10～50、丹參5～30、山楂5～30、澤瀉5～30。

優(yōu)選的，由以下重量份數(shù)的原料制成：黑果枸杞20、丹參15、山楂15、澤瀉15。

優(yōu)選的，所述復方制劑為湯劑、丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。

本發(fā)明復方藥物理論依據(jù)為：黑果枸杞為茄科枸杞屬多年生灌木植物。黑果枸杞味甘、性平、清心熱，藏醫(yī)用于治療心熱病、心臟病、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)等病癥。因其成熟漿果中富含紫紅色素，屬于珍稀的天然花色苷類色素資源，又稱“花青素”，具有抗氧化、激活巨噬細胞、抗衰老等作用?，F(xiàn)代藥理研究證明：其提取物黑果枸杞多糖、花青素，不僅可以調(diào)節(jié)血清脂質(zhì)代謝、提高機體的抗脂質(zhì)過氧化能力，同時，還可通過抗脂質(zhì)過氧化反應、保護肝細胞膜結(jié)構(gòu)的完整性而實現(xiàn)對化學性肝損傷的保護作用。

山楂，性味酸、甘微溫，入脾胃、肝經(jīng)?？芍委煾咧Y、肉食積滯、胃脘脹滿、瀉痢腹痛，瘀血經(jīng)閉，產(chǎn)后瘀阻，心腹刺痛、疝氣疼痛等。山楂葉總黃酮能減少非酒精性脂肪肝大鼠脂質(zhì)過氧化反應；山楂黃酮提取物用藥可以有效地保護給藥后大鼠肝臟細胞，減少細胞因子對肝細胞的損傷程度；山楂葉總黃酮可降低糖尿病小鼠血清中血糖、總膽固醇、丙二醛、甘油三酯、大腦脂褐質(zhì)水平，升高血清高密度脂蛋白膽固醇能抑制CYP2E1活性，增強機體對自由基的清除能力，同時能夠抑制肝組織脂質(zhì)過氧化反應，從而抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB、iKBamRNA和蛋白的表達，減少NF-kB的活化，從而有效防治非酒精性脂肪肝。

澤瀉為澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖。氣微，味微苦，性味：甘，功效：利尿滲濕，泄熱，化油降脂；用于小便不利，水腫脹潰，熱淋澀痛，泄瀉尿少，痰飲暈眩，高脂血癥。近代藥理證明澤瀉具有抑制動脈粥樣硬化和活血化瘀的功效，以及降低血壓、抗高血脂和利尿等作用。并且其提取物對高膽固醇血癥的實驗性兔有明顯的降膽固醇作用，可能與其干擾外源性膽固醇的吸收和內(nèi)源性膽固醇代謝有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)澤瀉能降低血中低密度脂蛋白，升高高密度脂蛋白，進而防止動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。澤瀉能抑制低蛋白飲食、乙基硫氨酸所致的脂肪肝，對各種原因引起的動物脂肪肝均有良好效應，對CC14所致急性肝損害減輕肝內(nèi)脂肪量，亦顯示保護作用，并能改善肝功能。

丹參，性味微寒，有活血調(diào)經(jīng)、祛瘀止痛、涼血消癰，除煩安神功效，含丹參酮、丹參素等，有保護CC14引起的肝損傷作用。丹參有增進一氧化氮活性，至于一氧化氮，它是一種強有力的血管舒張藥物，能夠調(diào)節(jié)血管的收縮與舒張，護肝降酶、促進肝細胞再生及抗纖維化的作用，丹參的脂溶性有效成分為丹參酮類，其中丹參酮、丹參隱酮是良好的自由基清除劑，可降低血脂，增加血流量，改善肝臟微循環(huán)，減輕瘀血性缺血狀態(tài)，增強脂質(zhì)的代謝與排泄，能更好的抑制肝臟炎癥反應，從而使細胞內(nèi)源性膽固醇的合成、外源性膽固醇的吸收減少，改善肝臟脂肪的代謝，進而治療脂肪肝。研究表明，丹參能夠降低脂質(zhì)過氧化反應，對肝功能損害起到一定的保護作用。

本發(fā)明的有益效果：采用以健脾祛濕、化瘀消痰為治則，切中非酒精性脂肪肝中醫(yī)病因病機，各種原料藥合理配比，之間協(xié)同作用，具有治療非酒精性脂肪性肝病的療效，并且，本發(fā)明為純天然中藥制劑，無毒副作用，服用方便，便于患者長期服用。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1是對非酒精性脂肪肝大鼠肝臟病理光鏡觀察圖。

圖中：A正常組；B模型組；C復方黑杞液高劑量組；D復方黑杞液中劑量組；E復方黑杞液低劑量組F水飛薊素膠囊組。

具體實施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術(shù)人員所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

實施例一

根據(jù)本發(fā)明的實施例，提供了一種防治非酒精性脂肪性肝病的復方制劑，由以下重量份數(shù)的原料制成：黑果枸杞10g、丹參5g、山楂5g、澤瀉5g。按照常規(guī)工藝制備成湯劑、丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。

實施例二

根據(jù)本發(fā)明的實施例，提供了一種防治非酒精性脂肪性肝病的復方制劑，由以下重量份數(shù)的原料制成：黑果枸杞20g、丹參15g、山楂15g、澤瀉15g。按照常規(guī)工藝制備成湯劑、丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。

實施例三

根據(jù)本發(fā)明的實施例，提供了一種防治非酒精性脂肪性肝病的復方制劑，由以下重量份數(shù)的原料制成：黑果枸杞50g、丹參30g、山楂30g、澤瀉30g。按照常規(guī)工藝制備成湯劑、丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液。

為了方便理解本發(fā)明的上述技術(shù)方案，以下通過實驗例對本發(fā)明的上述技術(shù)方案進行詳細說明。

其中，在本發(fā)明的以下實驗例中，復方制劑采用湯劑進行。

實驗例一

(1)備藥

原料藥的用量為：黑果枸杞25g，丹參15g，山楂15g，澤瀉15g。

制備方法包括以下步驟：

將上述藥材經(jīng)冷水浸泡2h，再常規(guī)兩煎(藥材與水的重量比為1∶3)，頭煎1.5h，二煎1h，兩次水煎液混合，得到復方黑杞液中藥制劑M1。

服用方法：150ml/次，每日2次。

(2)臨床實驗

1.研究對象及方法

1.1病例來源

選取48例非酒精性脂肪性肝病患者，其均來自某中醫(yī)院脾胃病科收治的符合納入標準的門診和住院的病人。

1.2非酒精性脂肪性肝病的西醫(yī)診斷標準

符合中華醫(yī)學會肝病學會脂肪肝和酒精性肝病學組《非酒精性脂肪性肝病診療指南》制定的標準，經(jīng)過臨床診斷或病理組織學或影像學檢查或代謝綜合征診斷證實為非酒精性脂肪性肝病患者。

1.2.1臨床診斷標準

明確NAFLD的診斷需符合以下3項條件：

①飲酒史或飲酒折合乙醇量小于140g/周(女性＜70g/周)；

②除外病毒性肝炎、藥物性肝病、全胃腸外營養(yǎng)、肝豆狀核變性、自身免疫性肝病等可導致脂肪肝的特定疾??；

③肝活檢組織學改變符合脂肪性肝病的病理學診斷標準。鑒于肝組織學診斷難以獲得，NAFLD工作定義為：①肝臟影像學表現(xiàn)符合彌漫性脂肪肝的診斷標準且無其他原因可供解釋；和(或)②有代謝綜合征相關(guān)組分的患者出現(xiàn)不明原因的血清ALT和(或)AST、GGT持續(xù)增高半年以上。減肥和改善IR后，異常酶譜和影像學脂肪肝改善甚至恢復正常者可明確NAFLD的診斷。

1.2.2影像學診斷標準

規(guī)定具備以下3項腹部超聲表現(xiàn)中的兩項者為彌漫性脂肪肝：

(1)肝臟近場回聲彌漫性增強(“明亮肝”)，回聲強于腎臟；

(2)肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)顯示不清；

(3)肝臟遠場回聲逐漸衰減。

CT診斷依據(jù)：肝臟密度普遍降低，肝/脾CT值之比小于1.0。其中，肝/脾CT比值小于1.0但大于0.7者為輕度，＜0.7但大于0.5者為中度，＜0.5者為重度脂肪肝。

1.2.3代謝綜合征的診斷

代謝綜合征組分的診斷采用改良的2005年國際糖尿病聯(lián)盟標準，符合以下5項條件中3項者診斷為代謝綜合征：

(1)肥胖癥：腰圍＞90cm(男性)，＞80cm(女性)，和(或)BMI＞25kg/ni2；

(2)甘油三酯(TG)增高：血清TG＞1.7ramol/L，或已診斷為高TG血癥；

(3)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)降低：HDL-C＜1.03minol/L(男性)，＜1.29mmol/L(女性)；

(4)血壓增高：動脈血壓＞130/85mmHg(1ramHg＝0.133kPa)或已診斷為高血壓病；

(5)空腹血糖(FPG)增高：FPG≥5.6mmol/L或已診斷為2型糖尿病。

1.3納入標準

符合以上診斷，且年齡介于18歲-65歲，知情同意。

1.4排除標準

不符合以上診斷標準；伴有腹水、水腫、低鈉血癥等疑似肝硬化表現(xiàn)者；本次發(fā)病后已使用其他治療非酒精性脂肪肝的中西藥物者；年齡在18歲以下或65歲以上者，或為妊娠期、哺乳期婦女；具有嚴重的原發(fā)性心血管病變、肝臟病變、腎臟病變、血液病變、肺臟疾病、糖尿病或影響其生存的嚴重疾病，如腫瘤或艾滋??；精神或法律上的殘疾患者。

1.5剔除標準

(1)剔選病例時不嚴格，將不符合納入標準的患者納入試驗的；

(2)受試者合并服用了本方案禁止使用的其它中西藥物，以致無法正確判定療效和安全性；

(3)受試者依從性差，對本試驗用藥過敏者；

(4)發(fā)生嚴重不良事件、發(fā)生并發(fā)癥或特殊生理變化不宜繼續(xù)接受試驗、自行退出者等均為無效病例；

(5)受試者在研究過程中發(fā)生了某些合并癥、并發(fā)癥或特殊生理變化，可能不宜繼續(xù)接受試驗。

2.研究方法

2.1臨床分組

將符合納入標準的48例患者，采用隨機對照分組法，分為復方黑杞液治療組和水飛薊素膠囊對照組，每組均24人。

2.2治療方案

治療組(復方黑枸杞中藥制劑M1)：復方黑杞液：黑枸杞20g、澤瀉15g、丹參15g、生山楂15g。藥材經(jīng)冷水浸泡2h，常規(guī)兩煎，頭煎1.5h，二煎1h，兩次水煎液混合，150ml/次，每日2次；

對照組：水飛薊素膠囊2粒/次，每日2次；

療程均為12周。

2.3觀察指標

1)臨床癥狀積分改變；2)中醫(yī)癥候療效比較；3)實驗室檢查(主要是谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT、游離脂肪酸FFA、膽固醇TC、甘油三酯TG)比較；4)肝臟B超比較。

以上五項作為量化指標觀察內(nèi)容，分別于治療前、停藥后對受試者作相應指標評定。期間做好隨訪工作，受試者不得接受其他治療。

2.4療效評價標準

2.4.1綜合療效評定標準——參照《中藥新藥臨床研究指導原則(2002試行)》、《非酒精性脂肪性肝病的中西醫(yī)結(jié)合診療共識意見》臨床癥狀，肝功能、血脂、肝臟影像學檢查的療效評定標準，擬定綜合療效判定標準如下：

臨床痊愈：臨床癥狀消失，肝功能、血脂、肝臟影像學檢查(B型超聲肝臟圖像)正常。

顯效：臨床癥狀明顯改善，肝功能異常指標下降大于40％，血脂異常指標下降20％-40％，中、重度B型超聲脂肪肝圖像減輕I度以上。

有效：臨床癥狀好轉(zhuǎn)，肝功能異常指標下降20％-40％，血脂異常指標下降10％-20％，輕、中、重度者B型超聲脂肪肝圖像較前減輕，但不及I度者。

無效：臨床癥狀、B型超聲脂肪肝圖像無改善，肝功能異常指標下降小于20％，血脂異常指標下降小于10％。

另肝臟B超輕、中、重度者分別記1、2、3分。

2.4.2中醫(yī)證候療效評定標準

臨床痊愈：主要癥狀、體征消失或基本消失，療效指數(shù)＞90％；

顯效：主要癥狀、體征明顯改善，療效指數(shù)為70％-89％；

有效：主要癥狀、體征明顯好轉(zhuǎn)，療效指數(shù)為30％-69％；

無效：主要癥狀、體征無明顯改善，甚或加重，療效指數(shù)＜30％。

注：計算公式(尼莫地平法)為：[(治療前積分一治療后積分)+治療前積分]X100％。

2.4.3主要癥狀的療效評價

參照《中藥新藥臨床研究指導原則》的療效評定標準。

(1)臨床疫愈：癥狀消失或基本消失；

(2)顯效：癥狀明顯改善，減少2個級別，從重度恢復為輕度；

(3)有效：癥狀好轉(zhuǎn)，減少1個級別，從重度恢復為中度，從中度恢復為輕度；

(4)無效：癥狀無明顯改善，甚或加重。

2.4.4肝功能指標療效評定標準

臨床痊愈：肝功能恢復正常(ALT、AST、FFA)；

顯效：肝功能雖未恢復正常，ALT和/或FFA下降＞40％；

有效：肝功能雖未恢復正常，但ALT和/或FFA下降》20％；

無效：肝功能無明顯改善，甚或加重。

2.4.5血脂療效評定標準

臨床痊愈：血脂恢復正常(包括甘油三酯和總膽固醇)；

顯效：血脂雖未恢復正常，甘油三酯下降＞40％和/或總膽固醇下降》20％；

有效：血脂雖未恢復正常，甘油三酯下降＞20％但＜40％，總膽固醇下降＞10％，但＜20％；

無效：血脂無明顯降低，甚或加重。

2.4.6B超療效評定標準

臨床治愈：肝臟回聲正常，肝內(nèi)管狀結(jié)構(gòu)清晰；

顯效：B超圖像減輕1度以上；

有效：B超圖像較前減輕，但不及1度者；

無效：B超圖像無明顯改善，甚或加重。

2.5統(tǒng)計分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料：兩組間的比較采用獨立樣本T檢驗(Independent-SamplesTTest)，不符合正態(tài)性分布者采用秩和檢驗；組內(nèi)治療前后自身比較采用配對樣本T檢驗(Paired-SamplesTTest)，總體率之間的比較采用檢驗。

3結(jié)果及分析

3.1中醫(yī)癥候臨床療效比較

治療組24例中，顯效9例，有效12例，無效3例，總有效率為87.5％；對照組24例中，顯效6例，有效10例，無效8例，總有效率66.6％。兩組總有效率比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

3.2治療前后癥狀總積分及B超評分比較

表1兩組治療前后癥狀總積分比較

表2兩組治療前后肝臟B超評分比較

注：與同組治療前比較，1)P＜0.01；與對照組治療后比較，2)P＜0.01。

3.3治療前后肝功能、血脂變化比較結(jié)果見表3

表3兩組治療前后肝功能、血脂值比較

注：與同組治療前比較，1)P＜0.01；與對照組治療后比較，2)P＜0.01；3)P＜0.05。

(3)動物實驗

1.實驗藥物

復方黑杞液：黑枸杞20g、澤瀉15g、丹參15g、生山楂15g。藥材經(jīng)冷水浸泡2h，常規(guī)兩煎，頭煎1.5h，二煎1h，兩次水煎液混合并過濾，經(jīng)水浴蒸發(fā)濃縮成含生藥2.6g/ml的濃縮藥液，高壓滅菌后冷藏備用。水飛薊素膠囊(利加隆)(140mg*10粒)。

2.動物

SD雌性大鼠(SPF級)，體重200～220g。

3.試劑

膽固醇、脫氧膽酸鈉、丙硫氧嘧啶片、聚山梨酯-80、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)試劑盒、游離脂肪酸(FFA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、總谷胱甘肽(T-GSH)測定試劑盒。

4.儀器

TGL-16G型低溫高速離心機；AMS-18型全自動生化儀；UV-1800紫外-可見光光度計。

5.方法

稱取25g自制豬油在100℃的水浴中溶化，加入10g膽固醇并不斷攪拌，再加入5ml聚山梨酯-80使其完全溶解；將20g蔗糖加入盛有少量蒸餾水的燒杯中，加熱并攪拌至完全溶解，再依次加入2g脫氧膽酸鈉、1g丙硫氧嘧啶，充分攪拌至完全溶解；將兩種溶液混合，再加入5ml聚山梨酯-80，使兩種溶液充分混勻，最后加蒸餾水定容至100ml，即配制成100ml高脂高糖乳劑。保存于0～4℃冰箱以備用，使用時在37℃水浴中加熱融化。

取大鼠48只，實驗前先適應性飼養(yǎng)3周，隨機按質(zhì)量分為6組：正常對照組、模型組、水飛薊素膠囊陽性對照組、復方黑杞液高、中、低劑量組，每組8只。除對照組給予普通飼料外，其他組灌以高脂高糖乳劑復制非酒精性脂肪肝大鼠模型，連續(xù)喂飼5周且自由飲水。各組大鼠按10ml/kg給藥干預。對照組、模型組給予相應劑量的生理鹽水灌胃，水飛薊素膠囊陽性對照組按4.67mg/kg/d劑量灌胃，復方黑杞液高、中、低劑量組分別按13.0、6.5、3.25g生藥/kg劑量灌胃，連續(xù)給藥8周。給藥至第8周末(標本采集前禁食不禁水12h)，大鼠以3％戊巴比妥鈉(30mg/kg)經(jīng)腹腔麻醉，腹主動脈取血，離心分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?。脫頸椎處死大鼠，立即摘取肝臟，4℃冰浴滅菌生理鹽水沖洗，濾紙吸干，稱量肝臟質(zhì)量。在距離肝邊緣0.5cm處取相同部位肝右葉組織若干塊，每塊約0.5g，大小約1cm×1cm×0.5cm，一部分肝組織塊置于2ml的EP管并保存于-20℃冰箱備用，一部分肝組織塊用10％甲醛溶液固定。

6.檢測指標

6.1肝臟指標檢測從-20℃冰箱取出備用的肝臟組織小塊，用氯仿-甲醇提取液(1∶1)制成勻漿，勻完后用提取液定容至5ml并混勻。經(jīng)24h震蕩抽提，3000rpm離心5min得上清液，再分別按照相應試劑盒說明書操作測定肝臟中TC、TG。用生理鹽水制成10％的肝組織勻漿液，再分別按照相應試劑盒說明書測定SOD、MDA、T-GSH。肝指數(shù)按公式(肝指數(shù)＝肝濕重/體重×100)計算求得。

6.2肝組織病理學檢測取10％甲醛溶液固定的肝組織塊，進行常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，光鏡下觀察，對脂肪變性程度進行分級、評分。低倍鏡觀察含脂滴細胞數(shù)與總細胞數(shù)，若含脂滴細胞數(shù)/總細胞數(shù)之比值＞1/3即診斷為脂肪肝；若脂滴細胞數(shù)/總細胞數(shù)之比值在1/3～1/2之間即診斷為輕度脂肪肝；若脂滴細胞數(shù)/總細胞數(shù)之比值在1/2～2/3之間即診斷為中度脂肪肝；若脂滴細胞數(shù)/總細胞數(shù)之比值＞2/3即診斷為重度脂肪肝。

6.3血清指標檢測門靜脈采血分離血清，采用全自動化分析儀測定檢測血清TC、TG、HDL-C、AST、ALT、FFA，LDL-C。按Friedwald公式(LDL-C＝TC-HDL-C-TG/2.2)計算求得。

7.結(jié)果

7.1對非酒精性脂肪肝大鼠血脂水平和FFA的影響與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA顯著升高，HDL-C顯著降低，表明造模成功。給藥8周后，水飛薊素膠囊、復方黑杞液各劑量組能顯著降低血清TC、TG、FFA水平和顯著升高HDL-C水平，復方黑杞液中、高劑量組能顯著降低LDL-C水平，結(jié)果見表4。

表4復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠血脂和FFA水平的影響(n＝8)

注：與模型組相比*P＜0.05，**P＜0.01(下同)

7.2對非酒精性脂肪肝大鼠肝指數(shù)及肝脂質(zhì)水平的影響與正常組比較，模型組肝指數(shù)、肝臟中TC、TG水平均顯著升高。與模型組比較，水飛薊素膠囊、復方黑杞液各劑量組均能顯著降低TC、TG，水飛薊素膠囊、復方黑杞液各劑量組肝指數(shù)也有一定的下降趨勢，表明復方黑杞液能減少脂質(zhì)在肝臟中的積聚，從而減輕肝脂質(zhì)變化程度，結(jié)果見表5。

表5復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠肝指數(shù)及肝脂質(zhì)水平的影響(n＝8)

7.3對非酒精性脂肪肝大鼠血清中肝功能指標的影響與正常組比較，模型組大鼠血清AST、ALT水平均顯著升高。與模型組比較，水飛薊素膠囊、復方黑杞液各劑量均能顯著降低AST水平，水飛薊素膠囊、復方黑杞液高劑量均能顯著降低ALT水平，表明復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠具有明顯的保肝作用，結(jié)果見表6。

表6復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠肝功能的影響(n＝8)

7.4對非酒精性脂肪肝大鼠肝MDA、SOD以及T-GSH的影響與正常組比較，模型組SOD活性明顯下降，MDA含量顯著增加。與模型組比較，水飛薊素膠囊、復方黑杞液各劑量組SOD、T-GSH活性有明顯的增強趨勢，復方黑杞液中劑量組MDA含量顯著下降，結(jié)果表明復方黑杞液具有一定的抗氧化應激和脂質(zhì)過氧化作用，結(jié)果見表7。

表7復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠肝中SOD、MDA、T-GSH的影響(n＝8)

7.5對非酒精性脂肪肝大鼠肝臟病理的影響

光鏡觀察：正常組：肝小葉結(jié)構(gòu)清晰完整，肝竇正常，肝細胞索排列整齊，以中央靜脈為中心呈放射狀排列，肝細胞無明顯病變，呈多邊形、邊界清，細胞核位于細胞中央，核圓結(jié)構(gòu)清晰，位于細胞中心，細胞質(zhì)均勻豐富，肝細胞內(nèi)無脂肪滴沉積。模型組：肝小葉界限不清，肝細胞索排列紊亂，肝竇消失，肝細胞體積明顯增大、呈腫脹狀，出現(xiàn)彌漫性脂肪變性。肝細胞內(nèi)可見大小不等、數(shù)量不一的脂滴空泡，細胞核偏移，部分細胞核溶解。間質(zhì)組織中有炎癥反應，局部有淋巴細胞和漿細胞的浸潤。水飛薊素膠囊、復方黑杞液低劑量組，肝小葉不明顯，脂肪滴空泡較模型組有所減少。復方黑杞液高、中劑量組：肝小葉結(jié)構(gòu)仍可見，部分肝細胞輕度水樣變性，大部分肝細胞接近正常形態(tài)，見圖1所示。

7.6復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠肝臟細胞脂肪變性情況的影響結(jié)果表明：復方黑杞液高、中、低劑量組以及水飛薊素膠囊組均能改善肝臟組織病變，與模型組比較差異有顯著性，見表8。

表8復方黑杞液對非酒精性脂肪肝大鼠肝細胞脂肪變性程度的影響(n＝8)

綜上所述，借助于本發(fā)明的上述技術(shù)方案，采用以健脾祛濕、化瘀消痰為治則，切中非酒精性脂肪肝中醫(yī)病因病機，各種原料藥合理配比，之間協(xié)同作用，具有治療非酒精性脂肪性肝病的療效，并且，本發(fā)明為純天然中藥制劑，無毒副作用，服用方便，便于患者長期服用。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。