專利名稱：紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物的偶合物，特別是涉及紫杉醇或多西紫杉醇的一種多肽偶合物。
背景技術(shù)：
紫杉醇(Paclitaxel, PTAX)是從紅豆杉屬(Taxus)植物的樹皮中分離提取的二萜類天然產(chǎn)物，為近二十年來所研發(fā)上市的最有效的化學抗癌藥物之一。通過特異性結(jié)合到細胞微管小管的β位，使微管聚合為團塊或束狀，紫杉醇可有效抑制微管網(wǎng)的正常重組，使細胞的分裂，繁殖及生長受到阻礙并停滯在G2期和M期。作為國際上廣泛認可的高效化學抗癌藥物，紫杉醇已被眾多國家批準用于臨床，以治療包括乳腺癌，卵巢癌，結(jié)腸癌，食管癌，非小細胞肺癌，膀胱癌、前列腺癌，黑素瘤(Melanoma)，淋巴瘤，白血球過多癥(Leukemias)及胃癌等多種癌癥1A紫杉醇的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，目前難以通過化學合成方法制備，因天然資源有限，使其價格極為昂貴。紫杉醇具有高效細胞毒性，但卻缺乏細胞選擇性。在體內(nèi)除腫瘤組織外，也可分布于正常組織中，除導(dǎo)致生物利用度明顯降低外，也使得紫杉醇在殺滅癌細胞的同時，對正常細胞及組織造成傷害。紫杉醇細胞選擇性差也導(dǎo)致了臨床應(yīng)用中產(chǎn)生嚴重毒副作用，包括中性白細胞減少，骨髓抑制，血管性水腫，低血壓，過敏性反應(yīng)，全身性蕁麻疹，感覺及中樞神經(jīng)病變，觸覺異常，感覺減退，位置感覺缺失等，常使需要長期用藥的癌癥患者難以承受。此外，紫杉醇水溶性極差r0.4ug/ml)，在劑型及給藥方式上受到諸多限制。臨床制劑中將紫杉醇加入聚氧乙烯蓖麻油(Cremphor EL):無水乙醇(V: V=1:1)中，再以生理鹽水稀釋后通過靜脈輸液給藥，除給患者帶來不便外，聚氧乙烯蓖麻油還可引起人體的過敏反應(yīng)。對一些需要增加劑量才能獲得較好 療效的病例，紫杉醇也因其水溶性極差而難以有效使用
2，4-7
O多西紫杉醇(DocetaxeLDTAX)是以從紫杉樹葉中提取的、含有紫杉醇基本母核結(jié)構(gòu)的去乙酰衆(zhòng)果赤霉素IIK 10-Deacetyl baccatin III)為原料,通過在其3,位的氨基進行叔丁氧酰化后得到的半合成紫杉醇類似物8，9。通過與紫杉醇相同的作用機制，多西紫杉醇在臨床上也用作有效的化學抗癌藥物。但多西紫杉醇在應(yīng)用中同樣顯示出細胞選擇性差的弱點，在抑制腫瘤細胞的同時，對正常細胞及組織造成傷害，導(dǎo)致各種與紫杉醇類似的毒副作用1(U1。紫杉醇與多西紫杉醇具有如下結(jié)構(gòu):
權(quán)利要求
1.一種紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述紫杉醇或多西紫杉醇在2’位羥基通過連接序列與多肽的氨基相連。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述連接序列為-CO-CH2-(X) J1-CH2-CO-；其中，X 為 0(CH2CH20CH2CH2CH2NHC0CH2_)2，-CO-, -O-, -S-, -CH2-, -CHCH3-或-C(CH3)2-；η為O或I。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述多肽為奧曲肽或者奧曲肽的3位苯丙氨酸(Phe3)用酪氨酸(Tyr)取代后得到奧曲肽-Tyr3。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述紫杉醇或多西紫杉醇在2’位羥基通過連接序列與奧曲肽或奧曲肽-Tyr3的N-端氨基和/或5位賴氨酸(Lys5)側(cè)鏈的-氨基相連接。
5.權(quán)利要求I 4任意一項所述的紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物的制備方法，所述方法包括 將紫杉醇或多西紫杉醇與連接劑反應(yīng)得到2’位羥基上連接有連接序列-CO-CH2-(X)n-CH2-C0-0H的紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體，其中X為O(CH2CH2C)CH2CH2CH2NHC0CH2-)2, -CO-, -O-, -S-, -CH2-, -CHCH3-或-C(CH3)2-, η 為 O 或 I ; 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體通過固相或液相合成方法與多肽的氨基相連。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述多肽為奧曲肽或者奧曲肽的3位苯丙氨酸(Phe3)用酪氨酸(Tyr)取代后得到奧曲肽-Tyr3，并且所述方法進一步包括步驟 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體與連接于固相合成樹脂、側(cè)鏈保護但N-端氨基游離的奧曲肽或奧曲肽-Tyr3通過固相合成方法進行連接反應(yīng)，制備得到紫杉醇-Linker連接于肽鏈N-端氨基的紫杉醇-奧曲肽偶合物或紫杉醇_奧曲肽-Tyr3偶合物，或多西紫杉醇-Linker連接于肽鏈N-端氨基的多西紫杉醇-奧曲肽偶合物或多西紫杉醇-奧曲肽-Tyr3偶合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述固相合成反應(yīng)具體是指， 將與固相合成樹脂相連，已形成分子內(nèi)二硫鍵，側(cè)鏈保護但N-端氨基游離的奧曲肽-樹脂或奧曲肽-Tyr3-樹脂置于固相合成反應(yīng)器中； 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體溶于有機溶劑,并按I: I I. 5的摩爾比分別加入PyBop及有機溶劑后滴入固相合成反應(yīng)器中，并用干燥氮氣進行攪拌； 洗滌樹脂并收集產(chǎn)物。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其特征在于所述方法進一步包括步驟 將制備得到、并從固相合成樹脂上分離的偶合物進一步與紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體在液相合成條件下進行連接反應(yīng)，制備得到奧曲肽/奧曲肽-Tyr3的N-端氨基與5位賴氨酸(Lys5)側(cè)鏈的-氨基分別連接有紫杉醇-Linker的雙紫杉醇-奧曲肽偶合物、雙紫杉醇-奧曲肽-Tyr3偶合物；或奧曲肽/奧曲肽-Tyr3的N-端氨基與5位賴氨酸(Lys5)側(cè)鏈的-氨基分別連接有多西紫杉醇-Linker的雙多西紫杉醇-奧曲肽偶合物或雙多西紫杉醇-奧曲肽-Tyr3偶合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于所述在液相合成條件下進行反應(yīng)是指， 將制備得到、并從固相合成樹脂上分離的偶合物溶于無水二甲基甲酰胺； 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體溶于有機溶劑,并按I : I .I. 5的摩爾比分別加入PyBop及有機溶劑后滴入上述偶合物的有機溶劑溶液； 充分反應(yīng)后收集產(chǎn)物。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述多肽為奧曲肽或者奧曲肽的3位苯丙氨酸(Phe3)用酪氨酸(Tyr)取代后得到奧曲肽-Tyr3，并且所述方法進一步包括步驟 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體與奧曲肽或奧曲肽-Tyr3在液相合成條件下反應(yīng)，制備得到奧曲肽/奧曲肽-Tyr3的N-端氨基與5位賴氨酸(Lys5)側(cè)鏈的-氨基分別連接有紫杉醇-Linker或多西紫杉醇-Linker的雙紫杉醇-奧曲肽/奧曲肽-Tyr3偶合物或雙多西紫杉醇-奧曲肽/奧曲肽-Tyr3偶合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于所述在液相合成條件下反應(yīng)是指， 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體溶于有機溶劑并按I: I I. 5的摩爾比分別加入PyBop及N，N- 二異丙基乙胺后滴入奧曲肽或奧曲肽-Tyr3的無水二甲基甲酰胺溶液中，反應(yīng)后分離純化所得產(chǎn)物。
12.權(quán)利要求I 4任意一項所述的紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物在制備用于預(yù)防和/或治療腫瘤的藥物方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了系列紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，所述紫杉醇或多西紫杉醇在2’位羥基通過不同連接序列與多肽的氨基相連。本發(fā)明還公開了所述偶合物的制備方法及在制備藥物方面的應(yīng)用。本發(fā)明的偶合物具備優(yōu)異抗癌活性與癌細胞選擇性，以及具有良好水溶性。
文檔編號A61K47/48GK103254279SQ201310045580
公開日2013年8月21日 申請日期2008年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月10日
發(fā)明者王樸, 傅雪琦 申請人:江蘇天一時制藥有限公司