一種多西他賽凍干粉的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種多西他賽凍干粉。
【背景技術(shù)】
[0002] 多西他賽（多西紫杉醇，Docetaxel，C43H53N0 14)，是在天然抗腫瘤藥物紫杉醇的結(jié) 構(gòu)基礎(chǔ)上，經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾后獲得的一種新的抗腫瘤藥物，其抗譜與紫杉醇類(lèi)似，作用機(jī)制是促 進(jìn)微管蛋白聚合和阻止微管解聚，從而抑制癌細(xì)胞的有絲分裂和增殖，藥效比紫杉醇強(qiáng)。
[0003] 體外的研究表明，在人乳腺、結(jié)腸、膀胱和上皮樣的細(xì)胞株，其IC50比紫杉醇低9 倍。體內(nèi)研究表明，多西他賽具有有高度抗腫瘤活性，用藥后鼠腫瘤和小鼠移植腫瘤可完全 消退。更重要的是，多西他賽對(duì)紫杉醇耐藥的細(xì)胞株不會(huì)自發(fā)地產(chǎn)生對(duì)多烯紫杉醇的交叉 耐藥性。
[0004] 多西他賽為白色或類(lèi)白色的粉末，是高度脂溶性且難溶于水的藥物，其在水中的 溶解度為6-7 μ g/ml。為了增加其溶解性，目前市售的多西他賽制劑均配方中均需添加吐溫 80作為表面活性劑。而采用吐溫80有兩大缺點(diǎn)。
[0005] 第一個(gè)缺點(diǎn)是給患者帶來(lái)較強(qiáng)的不良反應(yīng)。吐溫80可能引起包括過(guò)敏反應(yīng)、溶血 作用、心血管不良反應(yīng)和體液潴留等在內(nèi)的不良反應(yīng)。（《吐溫-80引起動(dòng)物類(lèi)過(guò)敏反應(yīng)的 原因初步探索》，《毒理學(xué)雜志》2007年04期；《藥用輔料吐溫80的藥理、藥動(dòng)學(xué)及分析方法 研究進(jìn)展》，《中國(guó)藥事》2008年第22卷第8期）。因此需要提前給患者口服糖皮質(zhì)激素類(lèi) 藥物進(jìn)行脫敏，對(duì)已經(jīng)發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)的病人需要注射腎上腺素，這無(wú)疑加重了患者的負(fù)擔(dān)。
[0006] 第二個(gè)缺點(diǎn)是給藥方法比較復(fù)雜，增加了使用的難度。以泰索帝為例：需要首先 混合濃縮藥物與稀釋溶液以制備預(yù)混合溶液，然后用〇. 9%的生理鹽水將預(yù)混合溶液稀釋， 制得預(yù)混合稀釋液后的4小時(shí)內(nèi)對(duì)得到的預(yù)混合稀釋液進(jìn)行約1小時(shí)的滴注。此過(guò)程中需 要小心地將混合了稀釋溶液的濃縮藥物顛倒45秒，而不進(jìn)行攪拌，這樣得到的溶液中可能 形成氣泡，因此需要將該溶液靜置5分鐘以使氣泡排出。齊魯制藥生產(chǎn)的多西他賽注射液 "多帕菲"的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中有如下的說(shuō)明文字："每瓶標(biāo)示量為lml:20mg的多帕菲，實(shí)際裝 有1. 2ml濃度為20mg/ml的多西他賽溶液，相當(dāng)于24mg的多西他賽。此容積已經(jīng)對(duì)在準(zhǔn)備 過(guò)程中由于藥液粘稠導(dǎo)致的藥液粘著瓶壁及不能抽出的"死容積"等原因造成的液體損失 進(jìn)行了補(bǔ)充。使用時(shí)，用注射器將每瓶溶液抽取干凈并稀釋到5 %葡萄糖注射液或0. 9 %氯 化鈉注射液中。為避免藥物過(guò)量引起毒副反應(yīng)。切勿用溶劑洗涮西林瓶和注射器！ "。
[0007] 聚合物膠束是由兩親性嵌段共聚物自發(fā)形成的一種核殼結(jié)構(gòu)，具有納米級(jí)粒徑。 聚合物膠束作為一種給藥載體由Bader等在1984年首次提出。使用兩親性嵌段共聚物將 藥物包封在膠束的疏水內(nèi)核內(nèi)，達(dá)到增溶難溶性藥物進(jìn)一步提高生物利用度的效果。此外， 良好的聚合物膠束能延長(zhǎng)藥物體內(nèi)循環(huán)時(shí)間，降低藥物毒性，及能通過(guò)EPR效應(yīng)達(dá)到被動(dòng) 靶向作用。
[0008] 凍干粉是一種保藏藥物的有效方法。將需要干燥的制品在低溫下使其所含的水分 凍結(jié)，然后放在真空的環(huán)境下干燥，讓水分由固體狀態(tài)直接升華為水蒸氣并從制品中排除 而使制品活性干燥。該方法有效地防止了制品理化及生物特性的改變，有效保護(hù)熱敏性藥 物有效成份的穩(wěn)定性；凍干制品在干燥后形態(tài)疏松、顏色基本不發(fā)生改變，加水或者親水性 有機(jī)溶劑后能夠快速溶解并恢復(fù)原有水溶液的理化特性和生物活性；由于干燥在真空條件 下進(jìn)行，對(duì)于一些易氧化的物質(zhì)具有很好的保護(hù)作用；制品經(jīng)過(guò)凍干后水份含量非常低，使 制品的穩(wěn)定性提高，受污染的機(jī)會(huì)減小，這不僅方便了運(yùn)輸還延長(zhǎng)了制品保存期限。
[0009] 目前對(duì)于多西他賽凍干粉的研究成果并未取得突破，尤其在組分、復(fù)溶后的粒 徑和載藥量等方面。郝守祝公開(kāi)了一種多西他賽凍干粉的制備方法（《一種多西他賽的 藥用組合物、制備方法及用途》專利【申請(qǐng)?zhí)枴?00780000695. 1)，但在凍干粉中依然含有吐 溫80。山東大學(xué)張娜等利用PLA-PEG共聚物得到多西他賽膠束凍干粉，但復(fù)溶后的粒徑 在200nm以上（《載多烯紫杉醇納米?；旌夏z束制劑及凍干劑的制備方法》，專利【申請(qǐng)?zhí)枴?201010151501. 1)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種多西他賽凍干粉。其通過(guò)將聚 乙二醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸作為載體材料與多西他賽制成凍干粉獲得，其配方簡(jiǎn)單， 復(fù)溶后的粒徑較小、穩(wěn)定性較高，凍干粉中多西他賽載藥量最高可超過(guò)20%，制備工藝簡(jiǎn) 單，易于工業(yè)應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明的技術(shù)解決方案如下。
[0012] -種多西他賽凍干粉，其包括質(zhì)量比為（3. 21~26. 48) :100的多西他賽和聚乙二 醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸兩組分；其采用注射用水、生理鹽水或葡萄糖注射液復(fù)溶后， 粒徑在20. 6~28. lnm之間。
[0013] 上述聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸的分子式如下所示：
[0015] 其中a = 10-200, b = 3-30,聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸的平均分子量 為2000-7000。嵌段聚乙二醇穩(wěn)定性很高，較難被降解；嵌段聚丙交酯只有在強(qiáng)酸性條件下 才易發(fā)生降解；接枝氨基酸在中性條件下反應(yīng)。因此聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸 在正常體液環(huán)境中的穩(wěn)定性較高。可以通過(guò)質(zhì)譜分析等手段得到聚乙二醇甲醚-聚丙交 酯-天冬氨酸中不同嵌段平均分子量的數(shù)值。
[0016] 上述多西他賽凍干粉中，還包括賦形劑；所述賦形劑選自乳糖、甘露醇、右旋糖苷、 甘氨酸、葡萄糖中的一種或多種。
[0017] 上述多西他賽凍干粉，通過(guò)下述具體步驟制備得到：
[0018] a.擱板預(yù)降溫至0°C后放入載多西他賽的膠束制劑，降溫至_45°C以下，確保載藥 膠束溶液溫度降至_45°C，維持2_4h ;
[0019] b.上述步驟結(jié)束后開(kāi)啟真空泵，抽真空1-1. 5h ;
[0020] c.隔板溫度設(shè)定由-45 °C升至-25 °C，維持12h以上，極限真空度設(shè)定為 0. 013Bar ；
[0021] d.隔板溫度設(shè)定由_25°C升至0°C，維持8h以上，極限真空度設(shè)定為0. 013Bar ;
[0022] e.隔板溫度設(shè)定由0°C升至5°C，維持3h以上，極限真空度設(shè)定為0. 013Bar ;
[0023] f.隔板溫度設(shè)定由5°C升至20°C，制品溫度達(dá)到20°C后，維持4h以上，然后結(jié)束 凍干，得到疏松塊狀的多西他賽凍干粉。
[0024] 上述載多西他賽的膠束制劑通過(guò)直接溶解法、透析法或者薄膜水化法制備得到。
[0025] 本發(fā)明中，當(dāng)多西他賽凍干粉中包括賦形劑時(shí)，通過(guò)先將賦形劑添加到載多西他 賽的膠束制劑中，再凍干的工藝制備得到。
[0026] 本發(fā)明中，所述的多西他賽是指無(wú)水多西他賽原料藥，按照C43H53N014計(jì)，純度 在98.0%以上。
[0027] 本發(fā)明中，研究表明，聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸無(wú)明顯的致癌性，無(wú)生 殖毒性，無(wú)致畸、致突變性，在體內(nèi)可降解為乳酸、氨基酸PEG，均可直接排出體外。對(duì)小鼠進(jìn) 行急性毒性試驗(yàn)，小鼠的LD50>2. 00g/kg ;長(zhǎng)毒試驗(yàn)中，1. 00g/kg劑量，1次/天，每周連續(xù) 給藥2天，停藥5天，連續(xù)給藥13周后，恢復(fù)4周后觀察，未見(jiàn)明顯毒副作用。
[0028] 細(xì)胞毒性測(cè)試表明，聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-天冬氨酸的細(xì)胞毒性比目前公認(rèn) 無(wú)毒的嵌段共聚物mPEG-PLA更低（見(jiàn)下表1)。
[0029] 表1 :MTT法肝細(xì)胞毒性測(cè)試結(jié)果
[0031] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：
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