專利名稱：多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及將抗癌藥多西紫杉醇用適當(dāng)藥用輔料制備成的靜脈注射多西紫杉醇亞微乳劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
多西紫杉醇(docetaxel)是一種半合成的新型抗腫瘤藥物，是從歐洲紫杉樹針葉中提取的無活性前體，經(jīng)化學(xué)處理后得到的活性藥物，能有效的抑制腫瘤細(xì)胞的復(fù)制，作用于細(xì)胞G2～M生長期。臨床研究表明，多西紫杉醇對多種腫瘤疾病具有良好的抗癌活性，用于治療乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、軟組織肉瘤、頭頸癌、胃癌、卵巢癌和前列腺癌等有很好的療效。由于多西紫杉醇水溶性差，目前臨床使用的主要有凍干粉針和水針注射劑，該制劑在靜脈注射前要用生理鹽水或5％葡萄糖注射液溶解、稀釋，使用煩瑣，給臨床用藥帶來不便，現(xiàn)有水針注射劑(40g·L-1)是采用吐溫-80作溶劑，同時另外配有含13％乙醇的溶媒，該種注射劑由于其中吐溫-80易產(chǎn)生溶血和過敏等不良反應(yīng)，且黏性大，臨床用藥極不方便，因此有必要研發(fā)新的制劑。
公開文獻(xiàn)200510084055.6中，公開了一種多西紫杉醇脂肪乳劑，是將多西紫杉醇與注射用植物油、注射用磷脂以及注射用水混合制成脂肪乳劑，這種乳劑，可以克服現(xiàn)有注射劑的一些缺點(diǎn)，并可補(bǔ)充營養(yǎng)，但是，其仍然存在一些不足例如含藥量低，其最高含量僅為1mg/mL；其含油量很高，含油量均在100mg/ml，注射劑中過高的油量易導(dǎo)致脂肪在組織器官內(nèi)積聚，甚至?xí)绊懙綑C(jī)體的免疫功能；該脂肪乳劑平均粒徑在500nm左右，不具備良好的器官靶向性；另外，該置放乳劑在制備過程中還需要高溫(110-121℃)滅菌，藥物在該溫度下易分解，影響藥物的穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有注射劑和脂肪乳劑的缺點(diǎn)，提供一種新的靜脈注射用多西紫杉醇乳劑，該乳劑可直接用于靜脈注射，療效優(yōu)于現(xiàn)有水針劑型，同時具有良好的藥物穩(wěn)定性及器官靶向性。
因此本發(fā)明目的在于提供一種將抗癌藥多西紫杉醇用適當(dāng)藥用輔料制備成的符合靜脈注射要求的亞微乳劑，以及該亞微乳劑的制備方法。
本發(fā)明的多西紫杉醇亞微乳劑，由有效劑量的多西紫杉醇和至少含有乳化劑和注射用水的藥用輔料經(jīng)乳化而成，并且所述亞微乳劑的平均粒徑小于500納米，多西紫杉醇的有效劑量優(yōu)選為重量體積濃度0.1％-10％。
其中，所述乳化劑為選自卵磷脂或大豆磷脂及其衍生物、泊洛沙姆、聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS15)、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(TPGS)、聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、吐溫類、司盤類、芐澤類、聚乙二醇甘油酯、膽酸鈉、膽固醇、聚氧乙烯甲基蓖麻油醚、乙二醇單乙基醚(Transcutol)、二己基琥珀?；撬徕c(Aerosol OT)和單油酸甘油酯中的一種或幾種的組合，優(yōu)選大豆磷脂、卵磷脂和波洛沙姆中的一種與其它乳化劑的混合。
所述乳化劑在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％-50％，優(yōu)選1％-15％。
其中，所述藥用輔料還包含注射用油相，所述注射用油相為選自大豆油、茶油、橄欖油、紅花油，魚油、亞麻子油、月見草油、葵花子油、花生油、C8～C18中等脂肪鏈長度的甘油三酯類、丁酸乙酯、月桂酸異丙酯、肉豆蔻酸異丙酯、維生素E醋酸酯、維生素E琥珀酸酯、油酸乙酯、亞油酸乙酯、乳酸羥基乙酰胺、三醋酸甘油酯、乳酸乙酯、N，N-二甲基乙酰胺、四氫呋喃聚乙二醇醚、米格列醇(Miglyol 812)、油酸和薏仁油等中的一種或多種的組合，所述注射用油相在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％～10％，優(yōu)選0.1-5％。
其中，所述藥用輔料還包含穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑為選自乙醇、丙二醇、甘油、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、維生素C、氮?dú)?、二丁基羥基甲苯、生育酚、氨基酸類、氫醌、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或幾種的組合，穩(wěn)定劑在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％～10％，優(yōu)選0.01％～5％。
其中，所述藥用輔料還包含等滲調(diào)節(jié)劑和PH調(diào)節(jié)劑，所述pH調(diào)節(jié)劑是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鹽、磷酸、磷酸鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽中的一種或幾種，調(diào)節(jié)的亞微乳劑pH范圍是4～10；所述等滲調(diào)節(jié)劑為選自于甘油、山梨醇、甘露醇、和葡萄糖中的一種或幾種，等滲調(diào)節(jié)劑在亞微乳劑的重量體積濃度為1％～10％，優(yōu)選1％～3％。
具體的，所述多西紫杉醇亞微乳劑，每100體積亞微乳劑由以下重量份數(shù)比的原料組分配制多西紫杉醇 0.1-5注射用油相 0.1-5乳化劑 1-10穩(wěn)定劑 0.01-5
等滲調(diào)節(jié)劑 1-3PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH至4.0-10.0的量注射用水余量。
本發(fā)明提供的上述多西紫杉醇亞微乳劑的制備方法，包括下列步驟1.油相的制備按配方量稱取多西紫杉醇、乳化劑、以及必要時的注射用油和穩(wěn)定劑，混合后在20-80℃，優(yōu)選20-60℃加熱，得油相；2.水相的制備按配方量稱取注射用水，加入等滲調(diào)節(jié)劑，加熱得水相；3.多西紫杉醇初乳的制備將制得的油相和水相在20-80℃，優(yōu)選30-60℃下混合，攪拌得初乳；4.多西紫杉醇乳劑的制備將初乳進(jìn)一步乳化得到多西紫杉醇乳劑；進(jìn)一步乳化方式為選自高壓均質(zhì)乳化、機(jī)械攪拌乳化、超聲乳化和膠體磨乳化中的一種；5.得到的多西紫杉醇乳劑經(jīng)調(diào)PH值，通過微孔濾膜過濾除菌得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑。
本發(fā)明提供了一種新的靜脈注射用多西紫杉醇亞微乳劑，由于選用了合適的乳化劑等組分及合適的制備方法，使該乳劑載藥量大、穩(wěn)定性好，貯藏期長，可制備成含有不同多西紫杉醇含量的乳劑。該乳劑使用方便，無毒副作用，具有良好的器官靶向性，提高了生物利用度，極大的減少了病人輸液時的疼痛，易為病人所接受。該乳劑制備工藝方法簡單易行，采用濾過滅菌，避免了普通制劑需要經(jīng)過高溫高壓滅菌而對藥物造成的破壞，適用于大量制備和工業(yè)化生產(chǎn)多西紫杉醇注射亞微乳劑。


圖1為本發(fā)明亞微乳劑粒徑分布圖譜。
圖2為大鼠靜注本發(fā)明多西紫杉醇亞微乳劑與市售多西紫杉醇注射液后血藥濃度-時間曲線。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明靜脈注射用多西紫杉醇亞微乳劑主要是由多西紫杉醇加入乳化劑和注射用水乳化而成，并且，可在乳化過程中加入注射用油、等滲調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、PH調(diào)節(jié)劑等組份，以滿足靜脈注射之用。多西紫杉醇為藥性組分，其余為藥用輔料，其中乳化劑為選自卵磷脂或大豆磷脂及其衍生物、泊洛沙姆、聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS15)、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(TPGS)、聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、吐溫類、司盤類、芐澤類、聚乙二醇甘油酯、膽酸鈉、膽固醇、聚氧乙烯甲基蓖麻油醚、乙二醇單乙基醚(Transcutol)、二己基琥珀酰磺酸鈉(Aerosol OT)和單油酸甘油酯中的一種或幾種的組合，均為醫(yī)學(xué)上常用的輔料，其中，優(yōu)選大豆磷脂或卵磷脂或波洛沙姆與其它乳化劑的混合物；乳化劑的作用是防止分散相聚集而使乳劑穩(wěn)定。
所述注射用油相為選自大豆油、茶油、橄欖油、紅花油，魚油、亞麻子油、月見草油、葵花子油、花生油、C8~C18中等脂肪鏈長度的甘油三酯類、丁酸乙酯、月桂酸異丙酯、肉豆蔻酸異丙酯、維生素E醋酸酯、維生素E琥珀酸酯、油酸乙酯、亞油酸乙酯、乳酸羥基乙酰胺、三醋酸甘油酯、乳酸乙酯、N，N-二甲基乙酰胺、四氫呋喃聚乙二醇醚、米格列醇(Miglyol 812)、油酸和薏仁油等中的一種或多種的組合，均是醫(yī)學(xué)上常用的注射用油，加入注射用油的作用是溶解藥物。
等滲調(diào)節(jié)劑是選自于甘油、山梨純、甘露醇或葡萄糖等，調(diào)節(jié)滲透壓與人體液等滲。
穩(wěn)定劑是選自于乙醇、丙二醇、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、維生素C、氮?dú)?、二丁基羥基甲苯、生育酚、醋酸生育酚、氫醌、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮等中的一種或一種以上混合物，這些物質(zhì)也是藥學(xué)上常用的穩(wěn)定劑，穩(wěn)定劑的加入可提高乳劑的穩(wěn)定性并延長保質(zhì)期。
PH調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、磷酸氫鈉、枸櫞酸、枸櫞酸鈉等中的一種或幾種，調(diào)節(jié)乳劑的最佳pH范圍在4.0～10.0。
具體的，本發(fā)明靜脈注射用多西紫杉醇亞微乳劑是由下列配方組成

在本發(fā)明中，“％”指重量體積濃度，單位為kg/100L。
優(yōu)選的組配為
多西紫杉醇 0.1-5注射用油相 0.1-5乳化劑 1-10穩(wěn)定劑 0.01-5等滲調(diào)節(jié)劑 1-3PH調(diào)節(jié)劑 調(diào)節(jié)PH至4.0-10.0的量注射用水 余量。
本發(fā)明靜脈注射用多西紫杉醇乳劑制備方法，包括下列步驟油相的制備按配方量稱取多西紫杉醇，注射用油，乳化劑和穩(wěn)定劑，在20-80℃，優(yōu)選20-60℃加熱，得油相；水相的制備按配方量稱取注射用水，加入等滲調(diào)節(jié)劑，加熱得水相，加熱溫度最好不超過80℃；多西紫杉醇乳劑的制備將油相和水相在20-80℃，優(yōu)選30-60℃下混合，用剪切乳化或攪拌乳化3-200分鐘，轉(zhuǎn)速為300-20000轉(zhuǎn)/分，得初乳；將初乳進(jìn)一步乳化，進(jìn)一步乳化可采用高壓均質(zhì)乳化、機(jī)械攪拌乳化、超聲乳化或膠體磨乳化這些乳化方式中的任一種，其中高壓均質(zhì)乳化可選擇的壓力為500-25000psi，溫度為0-80℃；機(jī)械攪拌乳化、超聲乳化或膠體磨乳化可選擇的轉(zhuǎn)速為2000-50000轉(zhuǎn)/分，乳化時間3-200分鐘；將進(jìn)一步乳化產(chǎn)品再用PH調(diào)節(jié)劑調(diào)劑至PH為4.0-10.0(也可以在制備初乳時調(diào)節(jié)PH)，用微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，即得多西紫杉醇亞微乳劑產(chǎn)品。所制乳劑的平均粒徑范圍是10納米～500納米。
該乳劑為類白色乳狀半透明液體，載藥量為0.1-50mg/mL(相當(dāng)于含有0.01-5％多西紫杉醇的量)，平均粒徑10-500nm，PH為4.0-10.0。
以下舉出本發(fā)明具體實(shí)施例，這些實(shí)施例在于說明本發(fā)明的技術(shù)方案，不能理解為對本發(fā)明的限制。實(shí)施例中，乳劑平均粒徑用激光粒度測定儀檢測，乳劑中多西紫杉醇含量用HPLC法檢測。
實(shí)施例1制備藥物含量為0.01％(即0.1mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇100毫克，大豆油50克，磷脂5克，5克聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)，水浴加熱至55℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水920毫升，加入山梨醇22.5克加熱至55℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在60℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速10000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用磷酸鈉溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為7.5，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力10000psi，溫度40℃)四次，經(jīng)過0.22u m微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑100.3nm，多西紫杉醇含量為0.0094％，為標(biāo)示量的94％，PH為7.5。
實(shí)施例2制備含量為0.1％(即1mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇1克，月見草油20克，大豆磷脂15克，生育酚1克，水浴加熱至55℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水950毫升，加入甘油15克加熱至45℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在45℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速15000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用磷酸溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為5.5，得初乳。將初乳用膠體磨乳化，其轉(zhuǎn)速為25000轉(zhuǎn)/分，乳化時間3分鐘，經(jīng)過0.22u m微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑73.6nm，多西紫杉醇含量為0.090％，為標(biāo)示量的90％，PH為5.5。
實(shí)施例3制備含量為10％(即30mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇30克，茶油50克，聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)120克，泊洛沙姆30克，水浴加熱至45℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水880毫升，加入20克聚乙二醇400，加入葡萄糖20克加熱至45℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在45℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速14000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用氫氧化鈉溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為8.0，得初乳。將初乳用30千赫茲的頻率超聲乳化，乳化時間6分鐘，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1030ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑138.6nm，多西紫杉醇含量為9.11％，為標(biāo)示量的91％，PH為8.0。
實(shí)施例4制備含量為5％(即50mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇50克，辛癸酸甘油酯50克，大豆磷脂60克，10克司盤85，水浴加熱至35℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水800毫升，加入甘油22.5克和維生素C 0.5g加熱至35℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在35℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速8000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用檸檬酸溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為6.5，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力16000psi，溫度15℃)三次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑68.3nm，多西紫杉醇含量為4.37％，為標(biāo)示量的87％，PH為6.5。
實(shí)施例5制備含量為0.5％(即5mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇5克，油酸乙酯10克，10克吐溫80，卵磷脂30克，20克聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS15)，水浴加熱至55℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水875毫升，加入聚乙二醇50克，加熱至55℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在60℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速12000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用磷酸二氫鈉溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為7.8，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力14000psi，溫度60℃)五次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑163.4nm，多西紫杉醇含量為0.47％，為標(biāo)示量的94％，PH為7.8。
實(shí)施例6制備含量為0.2％(即2mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇2克，花生油20克，10克泊洛沙姆188及乙醇20mL，水浴加熱至35℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水920毫升，加入20克聚乙二醇400，加熱至35℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在45℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速80000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用檸檬酸溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為6.0，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力15000psi，溫度0℃)四次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑85.1nm，多西紫杉醇含量為0.19％，為標(biāo)示量的95％，PH為6.0。
實(shí)施例7制備含量為1％(即10mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇10克，橄欖油30克，TPGS 80克，生育酚0.5克及20克泊洛沙姆338，水浴加熱至40℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水860毫升，加入二丁基羥基甲苯3克，加熱至40℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在40℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速8000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用氫氧化鈉溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為8.5，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力20000psi，溫度20℃)三次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑114.5nm，多西紫杉醇含量為0.96％，為標(biāo)示量的96％，PH為8.5。
實(shí)施例8制備含量為2％(即20mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇20克，肉豆蔻酸異丙酯50克，大豆磷脂50克及生育酚0.5克，水浴加熱至65℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水835毫升，加入5克吐溫80和40克聚乙二醇600，加熱至65℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在65℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速15000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用醋酸溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為6.3，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力25000psi，溫度60℃)四次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1020ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑80.1nm，多西紫杉醇含量為1.96％，為標(biāo)示量的0.98％，PH為6.3。
實(shí)施例9制備含量為0.5％(即5mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇5克，米格列醇50克，12克HS15及10克泊洛沙姆338，水浴加熱至50℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水900毫升，加入聚乙烯吡咯烷酮20克加熱至50℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在50℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速7000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用磷酸溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為5.5，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力16000psi，溫度20℃)六次，經(jīng)過0.22u m微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑100.3nm，多西紫杉醇含量為0.485％，為標(biāo)示量的97％，PH為5.5。
實(shí)施例10制備含量為3％(即30mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇30克，大豆磷脂12克，6克泊洛沙姆188水浴加熱至45℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水930毫升，加入甘露醇20克加熱至45℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在45℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速14000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用氫氧化鈉溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為8.0，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力9000psi，溫度55℃)五次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑138.6nm，多西紫杉醇含量為2.81％，為標(biāo)示量的94％，PH為8.1。
實(shí)施例11制備含量為4％(即40mg/mL)的多西紫杉醇靜脈注射亞微乳劑稱取多西紫杉醇40克，0.5克維生素E，卵磷脂18克，聚乙二醇甘油酯10克、乙二醇單乙基醚(Transcutol)12克、10克二己基琥珀酰磺酸鈉(AerosolOT)水浴加熱至40℃，攪拌溶解，得油相。量取注射用水890毫升，加入聚乙二醇20克加熱至45℃攪拌溶解，得水相。將油相和水相在45℃下混合，用攪拌器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速14000轉(zhuǎn)/分)，使油相和水相混勻。用檸檬酸鈉鈉溶液(1mol/L)調(diào)節(jié)其PH為7.5，得初乳。將初乳用微射流高壓均質(zhì)機(jī)均化乳化(壓力15000psi，溫度55℃)四次，經(jīng)過0.22um微孔濾膜過濾除菌，分裝，充氮，得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑1000ml。
檢測該乳劑，其中，該乳劑平均粒徑116.5nm，多西紫杉醇含量為3.61％，為標(biāo)示量的90％，PH為7.5。
本發(fā)明亞微乳劑的檢驗(yàn)亞微乳劑粒度測定方法將制得的亞微乳劑用蒸餾水稀釋至測定頻率為300kHz左右，裝入比色皿，打開激光粒度檢測儀(PSS.NICOMPTM380)，于23℃測定其粒徑，繪制粒徑圖譜(參見圖1，為實(shí)施例6制得的亞微乳劑測粒結(jié)果，其余實(shí)施例的粒徑分布圖譜不再一一列示)。根據(jù)粒徑圖譜計算所測乳劑的平均粒徑，圖1計算的平均粒徑為85.1nm，分布的SD值為42.2nm，且100％粒子＜500nm，大多分散在50-200nm之間，說明所制得的乳劑確實(shí)為亞微乳劑。
本發(fā)明制備的亞微乳劑，由于其粒徑大多分散在50-200nm之間，具有靶向制劑的特點(diǎn)。該靶向制劑經(jīng)過靜脈注射后，粒徑為100～200nm的微粒很快被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的巨噬細(xì)胞從血液中清除，最終到達(dá)肝枯否細(xì)胞(Kupffer cell)溶酶體中；50～100nm的微粒系統(tǒng)可以進(jìn)入肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中；小于50nm的微粒則透過肝臟內(nèi)皮細(xì)胞或者通過淋巴傳遞到脾和骨髓中；其中網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)主要存在于肝，脾，骨髓和淋巴等器官，所以網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的巨噬細(xì)胞對外來粒子的吞噬同時也使藥物聚集在這些的器官，從而達(dá)到靶向的作用(參見文獻(xiàn)1，李學(xué)濤，田景振，張玉娟.靶向制劑的研究進(jìn)展[J].食品與藥品，2006，8(2)13-17)。
藥物動力學(xué)實(shí)驗(yàn)取大鼠10只，隨機(jī)分成兩組，分別尾靜脈注射(6mg/kg)多西紫杉醇水針和本發(fā)明亞微乳劑，給藥后于5min，15min，30min，1h，2h，4h，6h，8h和12h后眼眶靜脈取血約0.5mL，按血漿樣品處理方法操作，測定血藥濃度。
圖2為大鼠靜注實(shí)施例2多西紫杉醇亞微乳劑與市售多西紫杉醇注射液后血藥濃度-時間曲線。測定結(jié)果顯示，就藥代動力學(xué)分析而言，多西紫杉醇亞微乳與注射液的體內(nèi)分布速率相近，消除速率兩者基本一致。多西紫杉醇亞微乳表觀分布容積大于注射液，可知由于多西紫杉醇包封在亞微乳的油相中，在體內(nèi)必須由內(nèi)相擴(kuò)散到血液，其游離過程延長將導(dǎo)致清除率下降，體內(nèi)滯留時間相對延長，從而延長了療效。同時，亞微乳有效地增大了藥物的溶解度，有利于藥物向周邊組織分布。與多西紫杉醇注射劑相比，多西紫杉醇亞微乳的血藥濃度曲線下面積較大，因此有更好的療效。
其余實(shí)施例的亞微乳劑也與實(shí)施例2有相似結(jié)果，其血藥濃度-時間曲線在此不一一列示。
藥物穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)利用加速實(shí)驗(yàn)來測定本發(fā)明亞微乳劑的藥物穩(wěn)定性將制得的亞微乳劑于25±2℃條件下，避光放置，分別于0月，1月，2月和3月測定其藥物含量和平均粒徑，實(shí)施例9的測定結(jié)果見表1表1亞微乳劑藥物穩(wěn)定性加速實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明乳劑在25±2℃條件下3個月內(nèi)其藥物含量沒有明顯變化，乳劑平均粒徑變化也在允許范圍之內(nèi)，說明本發(fā)明亞微乳劑穩(wěn)定性較好，推算在避光、2-8℃下，穩(wěn)定期可在1年內(nèi)。
權(quán)利要求
1.多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，由有效劑量的多西紫杉醇和至少含有乳化劑和注射用水的藥用輔料經(jīng)乳化而成，并且所述亞微乳劑的平均粒徑小于500納米，多西紫杉醇的有效劑量優(yōu)選為重量體積濃度0.1％-10％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，所述乳化劑為選自卵磷脂或大豆磷脂及其衍生物、泊洛沙姆、聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯(HS15)、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(TPGS)、聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)、吐溫類、司盤類、芐澤類、聚乙二醇甘油酯、膽酸鈉、膽固醇、聚氧乙烯甲基蓖麻油醚、乙二醇單乙基醚(Transcutol)、二已基琥珀?；撬徕c(Aerosol OT)和單油酸甘油酯中的一種或幾種的組合，優(yōu)選大豆磷脂、卵磷脂和波洛沙姆中的一種與其它乳化劑的混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，所述乳化劑在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％-50％，優(yōu)選1％-15％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，所述藥用輔料還包含注射用油相，所述注射用油相為選自大豆油、茶油、橄欖油、紅花油，魚油、亞麻子油、月見草油、葵花子油、花生油、C8～C18中等脂肪鏈長度的甘油三酯類、丁酸乙酯、月桂酸異丙酯、肉豆蔻酸異丙酯、維生素E醋酸酯、維生素E琥珀酸酯、油酸乙酯、亞油酸乙酯、乳酸羥基乙酰胺、三醋酸甘油酯、乳酸乙酯、N，N-二甲基乙酰胺、四氫呋喃聚乙二醇醚、米格列醇(Miglyol 812)、油酸和薏仁油等中的一種或多種的組合，所述注射用油相在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％～10％，優(yōu)選0.1-5％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，所述藥用輔料還包含穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑為選自乙醇、丙二醇、甘油、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、維生素C、氮?dú)?、二丁基羥基甲苯、生育酚、氨基酸類、氫醌、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或幾種的組合，穩(wěn)定劑在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％～10％，優(yōu)選0.01％～5％。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，所述藥用輔料還包含穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑為選自乙醇、丙二醇、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、維生素C、氮?dú)狻⒍』u基甲苯、生育酚、氨基酸類、氫醌、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或幾種的組合，穩(wěn)定劑在亞微乳劑的重量體積濃度為0.01％～10％，優(yōu)選0.01％～5％。
7.根據(jù)任一前述權(quán)利要求所述的多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，亞微乳劑所述藥用輔料還包含等滲調(diào)節(jié)劑和PH調(diào)節(jié)劑，所述pH調(diào)節(jié)劑是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鹽、磷酸、磷酸鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽中的一種或幾種，調(diào)節(jié)的亞微乳劑pH范圍是4～10；所述等滲調(diào)節(jié)劑為選自于甘油、山梨醇、甘露醇、和葡萄糖中的一種或幾種，等滲調(diào)節(jié)劑在亞微乳劑的重量體積濃度為1％～10％，優(yōu)選1％～3％。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述多西紫杉醇亞微乳劑，其特征在于，每100體積亞微乳劑由以下重量份數(shù)比的原料組分配制多西紫杉醇0.1-5注射用油相0.1-5乳化劑1-10穩(wěn)定劑0.01-5等滲調(diào)節(jié)劑1-3PH調(diào)節(jié)劑 調(diào)節(jié)PH至4.0-10.0的量注射用水 余量。
9.以上任一權(quán)利要求所述多西紫杉醇亞微乳劑的制備方法，其特征在于包括下列步驟①油相的制備按配方量稱取多西紫杉醇、乳化劑、以及必要時的注射用油和穩(wěn)定劑，混合后在20-80℃，優(yōu)選20-60℃加熱，得油相；②水相的制備按配方量稱取注射用水，加入等滲調(diào)節(jié)劑，加熱得水相；③多西紫杉醇初乳的制備將制得的油相和水相在20-80℃，優(yōu)選30-60℃下混合，攪拌得初乳；④多西紫杉醇乳劑的制備將初乳進(jìn)一步乳化得到多西紫杉醇乳劑；進(jìn)一步乳化方式為選自高壓均質(zhì)乳化、機(jī)械攪拌乳化、超聲乳化和膠體磨乳化中的一種；⑤得到的多西紫杉醇乳劑經(jīng)調(diào)PH值，通過微孔濾膜過濾除菌得產(chǎn)物多西紫杉醇亞微乳劑。
全文摘要
本發(fā)明提供一種新的靜脈注射用多西紫杉醇亞微乳劑及其制備方法，即將多西紫杉醇用適當(dāng)乳化劑等藥用輔料制備成靜脈注射亞微乳劑。將多西紫杉醇、注射用油、乳化劑、穩(wěn)定劑、注射用水和等滲調(diào)節(jié)劑分別攪拌，制得油水兩相，將油相和水相混合進(jìn)行乳化得初乳，再進(jìn)一步乳化，通過攪拌、高壓均化等工藝制備出符合靜脈注射要求的多西紫杉醇乳劑。該乳劑性質(zhì)穩(wěn)定、貯存期長、使用方便，制備工藝方法快速簡便，可適用于大量制備和工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P35/00GK1857222SQ20061001210
公開日2006年11月8日 申請日期2006年6月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月5日
發(fā)明者鄭少輝, 王明新 申請人:中國醫(yī)藥研究開發(fā)中心有限公司