專利名稱：至少一種二烷基硫代磺酸酯或硫代亞磺酸酯用于減少動物中的頂復動物亞門的數(shù)量的應用的制作方法
至少一種二烷基硫代磺酸酯或硫代亞磺酸酯用于減少動物中的頂復動物亞門的數(shù)量的應用本發(fā)明涉及至少一種二烷基硫代磺酸酯或硫代亞磺酸酯用于減少存在于家禽或豬等單胃動物，或者牛、綿羊或山羊等反芻動物中的頂復動物亞門(ap i comp I exa )的數(shù)量的應用。
背景技術：
頂復動物亞門或孢子蟲綱(sporozoa)是單細胞生物，是脊椎動物或無脊椎動物的寄生蟲。這些寄生蟲能夠引起各種病理狀況。因此，例如，禽球蟲病(Avian coccidiosis)是一種嚴重擾亂家禽攝食和生長的常見腸道原蟲感染，由頂復動物亞門族、特別是艾美爾球蟲屬的幾種寄生蟲引起，這些寄生蟲感染腸道并通過攝取受感染的卵囊從一個動物傳播給另一個動物。新孢子蟲和隱孢子蟲、其他隸屬頂復動物亞門族的生物也能夠感染動物的腸道。所有這些感染都給養(yǎng)殖業(yè)造成了經(jīng)濟損失，而目前沒有有效對抗它們的疫苗。控制這類型感染的傳統(tǒng)策略都非常昂貴，因為它們主要是基于化學藥物預防。此外，不斷出現(xiàn)耐藥菌株(例如，艾美爾球蟲株)，再加上工業(yè)化家禽養(yǎng)殖中強化調控以及抗雙孢子球菌(coccidia)的藥物的禁用，意味著需要新的疾病控制的方法和策略。由于宿主免疫和寄生蟲生命周期的復雜性，開發(fā)新的干預策略或新的抗頂復動物亞門的疫苗被證明是相當困難的。因 此，目前的趨勢是采用基于活寄生蟲的疫苗來控制球蟲病。至少有10種這類疫苗在全世界范圍內(nèi)可商購 。所有這些疫苗都依靠受感染的活卵囊，以便產(chǎn)生意圖引起自然免疫的真正的感染，該自然免疫保護3到4周齡(與多數(shù)球蟲病爆發(fā)的時間相對應)的雛雞。這種疫苗接種技術的主要缺點是活卵囊只能由活雛雞產(chǎn)生，這需要大量的工作，涉及許多操作。文獻US2006/122266提到其它化合物中蒜素治療瘧疾的應用，蒜素是二烯丙基硫代亞磺酸酯，即二亞烷基硫代亞磺酸酯，因此是含有2個不飽和鍵的產(chǎn)品。文獻EP2110128列舉了丙基硫代亞磺酸丙基酯(PTS)和丙基硫代磺酸丙基酯(PTSO)作為抗菌和抗微生物的化合物；這些文獻中列舉的所有生物都是細菌，即原核生物，而頂復動物亞門是真核生物；原核生物與真核生物的細胞結構完全不同。文獻W02004/084645涉及蒜素的應用。該文獻中沒有提及或暗示抗頂復動物亞門的應用。WPI 數(shù)據(jù)庫(Week 199838，Thomson Scientific, London, GB, AN1998-440169&HU9602190A2，1998年5月28日)的摘錄中提到應用蒜油、百里酚、薄荷油、柑橘油以及稀釋劑或載體的組合來治療和預防球蟲??；由于這些化合物中有大量各種成分，本文獻中沒有任何記載關于這些組分中哪些單獨或者與其他成分的組合是活性的。Lewis 等人的出版物(“effects of dietary inclusion of plant extracts onthegrowth performance of male broiler chickens，，，British Poultry Science (英國家禽科學雜志)，朗文集團，GB LNKD-DO1: 10. 1080/00071660301940，第44卷，第I期增刊，2003年 I 月 I 號，第 S43 頁，XP008104094ISSN:0007-1668)以及E. Demir 等人的出版物(“Theuse of natural feed additives as alternatives asalternatives for an antibioticgrowth promoter in broiler diets，，, British PoultryScience (英國家禽科學雜志)，朗文集團，GB LNKS-DO1: 10. 2080/00071660301944，第 44 卷，第 I 期增刊，2003 年 I 月 I 號，第S44-S45頁，XP008104095ISSN: 0007-1668)涉及被迫攝取各種化合物(包括蒜)的動物的生長；這些文獻中提及對頂復動物亞門沒有影響。文獻US2009/018194涉及PTS或PTSO用于治療植物的應用。文獻EP1721534涉及蔥屬的衍生物作為防腐劑在食品和食品加工業(yè)中的應用。發(fā)明概沭本發(fā)明的主要目的是對抗存在于家禽或豬等單胃動物，或牛、綿羊或山羊等反芻動物體內(nèi)的頂復動物亞門。本發(fā)明者所進行的研究使他們能夠找到可破壞頂復動物亞門的試劑。令人驚奇的是，這些試劑是已知的化合物，二烷基硫代亞磺酸酯和硫代磺酸酯，特別是二正丙基硫代亞磺酸酯和二正丙基硫代磺酸酯，在下文的描述中，分別被稱為PTS和PTS0。應用這些化合物已經(jīng)證明是對破壞頂復動物亞門、特別是艾美爾球蟲(Eimer ia)尤為有效。此外，這些化合物能夠獨立于使用它們的動物且從天然產(chǎn)物中產(chǎn)生或通過有機合成產(chǎn)生，即不需要卵囊。 而且，它們具有令人驚奇的優(yōu)點，即即使在極低劑量也是有效的?，F(xiàn)在將在下面參考所附的單張附圖
所給出的描述中詳細地描述本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點，該附圖是表示作為所使用的化合物的函數(shù)的子孢子(spOTozoites)數(shù)量減少的比較圖。發(fā)明詳述二烷基硫代亞磺酸酯和硫代磺酸酯是對應于下式F的化合物式F :F-SOa-S-R,其中，R和R’相同或不同，各表不燒基基團；且a 為 I 或 2。優(yōu)選地，所述烷基基團R和R’包含1-5個碳原子。而且，丙基基團通常是正丙基基團，更適合用作R和R’基團。 在式F的一個化合物和相同的化合物中，優(yōu)選所述R和R’基團相同。對于二烷基硫代亞磺酸酯，式F中的a為I。對于二烷基硫代磺酸酯，a為2。有利的是，將二丙基硫代亞磺酸酯和/或二烷基硫代磺酸酯、特別是PTS或PTSO用作式F的化合物。事實上，雖然PTS可以是合成的產(chǎn)品，但是它能夠有利地從隸屬蔥科(根據(jù)APG親緣分類)的植物中提取，特別是從隸屬蔥屬(蔥科的成員)的植物中提取。隸屬蔥屬的最知名的植物是韭蔥(Allium ampeloprasum)、洋蔥(AlliumcepaL.)、種植的蒜(Allium sativum L.)、火蔥(Allium ascalonicum)、大蔥(Alliumfistulosum L.)和細香蔥(Allium schoenoprasum L.)。根據(jù)本發(fā)明,優(yōu)選使用蒜、特別是種植的蒜(Allium sativum L.)的提取物。通常是蒜球的提取物。PTSO能通過合成或分解(或氧化)PTS獲得。提取獲得PTS和獲得PTSO的方法具體記載在專利申請EP-A1-1721534第15頁第34行到第16頁第26行中。所述硫代亞磺酸酯也能夠根據(jù)記載在專利申請FR-A-2813884中的方法獲得。當然，可以使用任何比例的下列物質的混合物-若干二烷基硫代亞磺酸酯；-若干二烷基硫代磺酸酯；-至少一種二烷基硫代亞磺酸酯和至少一種二烷基硫代磺酸酯。研究已經(jīng)表明，動物、特別是家禽不會對這些化合物產(chǎn)生抵抗作用，從而使它們在工業(yè)養(yǎng)殖中的應用特別有利。 PTS和/或PTSO以預防藥物使用。對于它們的預防性應用，可將二烷基硫代亞磺酸酯和/或硫代磺酸酯添加到動物的飼料中，例如，通過每天將它們與動物的食物進行混合。然后,所使用的量通常為2mg-60mg/千克飼料干物質。它們能夠任選地根據(jù)動物飲用的平均水量在給予動物的水中以l_30mg/升水的比例稀釋。本發(fā)明適用于家禽或豬等單胃動物，或牛、綿羊或山羊等反芻動物。比較例測試了下列化合物的抗寄生蟲特性-含有6wt%的辣椒素與二氫辣椒素的混合物的辣椒油樹脂(辣椒紅色素)；-香芹酚；-肉桂醛；-姜黃素；-茴香腦；-PTS (本發(fā)明的)；-PTSO (本發(fā)明的)；和-被稱為“Garlicon40”的本發(fā)明提取物，其含有400ppm有機硫化合物(其特征是為蒜 / 洋蔥)、6. 7wt% 的 PTS 和 34. 3wt% 的 PTSO0制備由含有IOOppm上述試驗化合物的水溶液組成的第一系列樣品和僅含有IOppm這些化合物的第二系列樣品。接下來，為了能夠測試上述化合物對艾美爾球蟲的影響，進行如下操作。從柔嫩艾美爾球蟲(Eimeria tenella)獲得新鮮的孢子化的卵囊，并儲存于4°C下2. 5% (重量/體積)的重鉻酸鉀溶液中，直到使用。然后，用漂白劑對卵囊滅菌，然后分離孢子蟲。卵囊的壁采用球磨機(具有O. 5mm的球)機械破壞5-7秒。再將所得到的產(chǎn)物于41°C下在含有O. 014mol/l的?；撬崦撗跄懰岷蚈. 25wt%的胰蛋白酶的PBS緩沖溶液中培養(yǎng)45分鐘，以釋放所述子孢子。將經(jīng)脫囊釋放的流體過濾，將收集到的子孢子在4°C下用RPM1-1640培養(yǎng)基以每分鐘2100轉的速度攪拌來洗滌三次。然后，制備每毫升106個子孢子的溶液，再用相同體積的測試化合物的樣品進行培養(yǎng)24小時。然后，根據(jù)臺盼藍染色排除法測定子孢子的成活力。在所附的單張圖上能看到所述結果，圖中位于每列上方的數(shù)字表示相應的化合物所抑制的百分比，化合物名稱后的數(shù)字表示該化合物的濃度。還用對照溶液(不含測試化合物)進行了測量，在圖中稱為“對照”。首先，除了茴香腦外，似乎測試的所有化合物在IOOppm的濃度都對柔嫩艾美爾球蟲的子孢子具有明顯抑制或破壞作用(至少61%);其次，姜黃素、肉桂醛、香芹酚、PTS、PTSO和Garlicon 40提取物似乎是最有效的(至少74%) 。此外，驚奇地注意到，只有PTS和PTSO在僅IOppm的濃度水平顯示出高有效性，分別為87%和61%。更重要的是，PTSO在IOppm甚至令人驚奇地比在IOOppm時具有更高的有效性。
權利要求
1.至少一種與下式F相對應的化合物用于減少單胃動物或反芻動物體中的頂復動物亞門的數(shù)量的預防性應用，式 F : R-SOa-S-R, 其中，R與R'可以相同或不同，各表示烷基基團；以及 a為I或2。
2.如權利要求1所述的應用，其中，在式F中，所述的R與R’基團是包含1-5個碳原子的燒基基團。
3.如權利要求2所述的應用，其中，在式F中，所述的R與R’基團是丙基。
4.如權利要求1-3中任一項所述的應用，其中，所述的R與R’基團相同。
5.如權利要求1-4中任一項所述的應用，其中，在式F中，a為I。
6.如權利要求1所述的應用，其中，式F的化合物為二丙基硫代亞磺酸酯。
7.如權利要求1-4中任一項所述的應用，其中，在式F中，a為2。
8.如權利要求1所述的應用，其中，式F的化合物為二丙基硫代磺酸酯。
9.如權利要求1-8中任一項所述的應用，其中，式F的化合物至少部分地為隸屬蔥科家族(family Alliaceae)的植物的提取物的形式。
10.如權利要求9所述的應用，其中，式F的化合物至少部分地為隸屬蔥屬(Alliumgenus)的植物的提取物的形式。
11.如權利要求10所述的應用，其中，所述的蔥屬的植物為種植的蒜(大蒜(Alliumsativum L.))。
12.如權利要求1-11中任一項所述的應用，其中，所述動物為單胃動物。
13.如權利要求12所述的應用，其中，所述動物為家禽。
14.如權利要求1-11中任一項所述的應用，其中，所述的動物為反芻動物。
15.如權利要求14所述的應用，其中，所述動物為牛科動物。
16.如權利要求1-15中任一項所述的應用，其中，所述的頂復動物亞門為雙孢子球菌。
17.如權利要求16所述的應用，其中所述的雙孢子球菌為艾美爾球蟲。
18.如權利要求1-15中任一項所述的應用，其中，所述的頂復動物亞門為新孢子蟲屬或隱孢子蟲屬。
19.如權利要求1-18中任一項所述的應用，按2-60mg/千克飼料干物質的比例或l-30mg/升飲用水的比例使用。
全文摘要
本發(fā)明涉及應用至少一種二烷基硫代磺酸酯或硫代亞磺酸酯以減少家禽或豬等單胃動物，或者牛、綿羊或山羊等反芻動物中的頂復動物亞門，例如，球孢子菌屬、特別是艾美爾球蟲的數(shù)量。
文檔編號A61P33/02GK103037856SQ201180024972
公開日2013年4月10日 申請日期2011年4月1日 優(yōu)先權日2010年4月1日
發(fā)明者達維德·布拉沃, 希恩·利勒霍伊 申請人:潘可士瑪股份公司