專利名稱：n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種n-ΗΑ/高聚物復(fù)合納米纖維氈的藥物控釋體系的制備領(lǐng)域，特別設(shè)計一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法。
背景技術(shù)：
近年來，隨著納米技術(shù)的蓬勃興起和各種生物相容性高分子材料的不斷涌現(xiàn)，基于高分子材料的納米級藥物釋放體系備受人們的廣泛關(guān)注。為了改變傳統(tǒng)藥劑的突釋現(xiàn)象，提高藥物利用率并減輕對人體的毒副作用，開發(fā)具有持續(xù)釋放效果的藥物控釋系統(tǒng)一直是人們研究的熱點。靜電紡絲技術(shù)是使帶電的高分子溶液(或熔體)在靜電場中流動變形，經(jīng)溶劑揮發(fā)或熔體冷卻而固化，從而得到纖維狀物質(zhì)的一種方法。1934年，！^rmhals發(fā)表了他的第一篇涉及用靜電紡制備人造纖維的方法和設(shè)備的發(fā)明專利。1969年，Taylor研究了在外加電場時噴絲口形成的聚合物液滴的形狀，發(fā)現(xiàn)了我們熟知的“泰勒錐”，隨后關(guān)于靜電紡絲的研究進展相對比較緩慢。直到20世紀90年代中后期，隨著納米科技的興起，人們意識到納米纖維在許多領(lǐng)域的潛在應(yīng)用價值，Doshi和Reneker領(lǐng)導(dǎo)的研究團隊對靜電紡納米纖維進行了突破性研究，靜電紡絲技術(shù)又重新受到人們的重視并獲得了快速發(fā)展。通過靜電紡可生物降解和生物相容性的高聚物納米纖維支架具有纖維尺寸可控， 極大的比表面積，高孔隙率和三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等特點，在生物功能和結(jié)構(gòu)方面可以很好地模擬天然細胞外基質(zhì)，因此納米纖維在組織工程方面有著非常廣泛的應(yīng)用，而靜電紡納米纖維藥物釋放體系近十年來更是備受關(guān)注。2001年，Ignatious和Baldoni兩人最早用靜電紡納米纖維設(shè)計出分別具有快速、即時、延時、緩慢、持續(xù)及階段性等不同釋藥特性的復(fù)合藥劑。隨后，研究者們用藥物溶液浸泡靜電紡納米纖維氈；將藥物分子和高聚物溶液混合靜電紡；制備藥物分子與高聚物溶液的W/0或0/W的乳液進行靜電紡絲，即乳液靜電紡；或者制備芯層為藥物溶液或者藥物與高聚物的混合溶液，殼層為高聚物溶液的同軸靜電紡納米纖維。這些靜電紡納米纖維載藥系統(tǒng)可以不同程度地改善藥物的突釋現(xiàn)象，然而，靜電紡納米纖維支架存在機械強度低的問題。因此，研究開發(fā)機械性能高、持續(xù)控制釋放效果好的納米纖維載藥系統(tǒng)是必然的發(fā)展趨勢。納米羥基磷灰石(Nano hydroxyapatite, n-HA)是一種磷酸鈣鹽，分子式為 Ca10(PO4)6(OH)20 n-HA的合成方法從本質(zhì)上可以分為兩類一是從上到下的合成方法，即通過機械手段(如球摩法)將塊狀物質(zhì)細化得到納米顆粒；二是從下到上的合成方法，即從分子或原子水平直接合成納米粒，如濕化學(xué)法、共沉淀法、微乳液法等。n-HA多為針狀，棒狀， 及多孔類型，具有較大的比表面積和很強的表面吸附能力，能吸附和傳遞多種藥物，其作為藥物載體的研究已受到了廣泛關(guān)注。Tomoda等人發(fā)現(xiàn)，n-HA對蛋白質(zhì)的吸附和釋放特性與n-HA的形貌相關(guān)，球形n-HA顆粒具有很強的表面吸附能力，且對小分子藥物具有緩釋效果，降低了對機體的毒副作用。n-HA單獨作為藥物載體會存在藥物突釋等問題。Boonsongrit等人通過非原位負載的方法實現(xiàn)了 n-HA對牛血清蛋白(BSA)的負載，發(fā)現(xiàn)在PBS緩沖液中，球形n-HA-BSA體系存在突釋現(xiàn)象，30分鐘內(nèi)BSA的釋放量可達70%。為此他們通過固體/油/水(S/0/W) 乳液溶劑蒸發(fā)法制備了 PLGA/n-HA復(fù)合微球，成功實現(xiàn)了生理條件下n-HA-BSA體系的緩釋。由此表明，通過與特定的聚合物復(fù)合，形成無機/有機雜化藥物載體，可以在一定程度上改善n-HA單獨用作藥物載體時出現(xiàn)的藥物突釋現(xiàn)象。同時，n-HA是一種無機納米材料， 具有很好的力學(xué)性能，熱穩(wěn)定性好，其納米級的直徑也使其適合做復(fù)合材料的增強體。檢索國內(nèi)外有關(guān)靜電紡納米纖維方面文獻和專利結(jié)果表明還沒有發(fā)現(xiàn)用n-HA 與高聚物復(fù)合靜電紡絲來增強靜電紡納米纖維氈的機械性能，并以此制備n-HA/PLGA為雙載體的載藥系統(tǒng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法，該方法簡單，易于操作，所用的聚合物具有很好的生物相容性，得到的n-HA/ PLGA的雙載體載藥系統(tǒng)具有很好的藥物持續(xù)釋放效果。本發(fā)明的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法，包括(1)將水溶性藥物溶解在去離子水中，得濃度為0. 05-3mg/mL的藥物的水溶液；將 n-HA分散在去離子水中，超聲分散均勻，得濃度為l-:3mg/mL的η_ΗΑ懸濁液；(2)攪拌下，將上述藥物的水溶液逐滴加入上述Π-ΗΑ懸濁液中，借助磁力攪拌作用，通過表面物理吸附的方法使AMX藥物分子吸附在n-HA表面；離心分離得沉淀，用去離子水洗滌沉淀，冷凍干燥并過濾，得到負載藥物的n-HA ；(3)將上述負載藥物的n-HA超聲分散在THF/DMF混合溶劑中，加入聚乳酸-羥基乙酸(poly lactic-co-glycolic acid，PLGA)配成紡絲溶液，然后進行靜電紡絲，得到 n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系。步驟(1)中所述的藥物為阿莫西林(amoxicillin，AMX)。步驟(1)中藥物的水溶液的濃度為ang/mL，n-HA懸濁液的濃度為lmg/mL，水溶性藥物與n-HA的質(zhì)量比為2 1，超聲分散時間為30 50min。步驟O)中所述的逐滴加入時，藥物的水溶液的滴加速度控制在3 5mL/min，攪拌時間為18 Mh，轉(zhuǎn)速使懸濁液不沉淀即可。步驟(2)中所述的離心分離的離心速度為4000 6000rpm，時間為3 5min ；所述的洗滌沉淀的洗滌次數(shù)為2 3次。步驟O)中所述的過濾為使用325目的篩網(wǎng)過濾。步驟(3)中所述的THF/DMF混合溶劑中THF與DMF的體積比為3 1 ；超聲分散的時間為3 5min。步驟(3)中所加入的PLGA的質(zhì)量與THF/DMF混合溶劑的體積之比為Ig 4_5mL。步驟(3)中所述的靜電紡絲的工藝條件為接收距離為10 20cm，電壓為15 25kV，流速為 0. 8 lmL/h。本發(fā)明使用掃描電鏡(SEM)、機械性能測試、透射電鏡(TEM)等表征了制備含有 n-HA的n-HA/PLGA雙載體納米藥物控釋體系的可行性。此外，本發(fā)明還對藥物控釋體系的緩釋動力學(xué)和體外抑菌活性等特性進行了評價。具體測試結(jié)果如下
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(1) n-HA負載藥物AMX條件優(yōu)化結(jié)果由說明書附圖1可以看出，藥物負載量隨著藥物濃度升高而變大，但隨載體濃度升高而有所降低，由于AMX濃度太高溶解不充分，所以選取AMX的濃度為ang/mL，n-HA的濃度為lmg/mL，AMX與n-HA的質(zhì)量比為2 1，優(yōu)化最大載藥率為20. 44%。(2) n-HA納米粉末及AMX/n_HA/PLGA復(fù)合納米纖維的TEM表征結(jié)果由說明書附圖2(a)可以看出n-HA為棒狀結(jié)構(gòu)，寬度為37 士 9nm，長度為 118士42nm，由說明書附圖2(b)也可以看出n-HA很好地包裹于靜電紡PLGA納米纖維中。(3)靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥體系的SEM表征結(jié)果利用靜電紡絲制備的PLGA納米纖維及n-HA/PLGA、AMX/PLGA和AMX/n-HA/PLGA的復(fù)合納米纖維光滑均勻，纖維之間沒有發(fā)生明顯的粘連，分別參見說明書附圖3a、b、c、d。 納米纖維氈均具有較大的孔隙結(jié)構(gòu)，孔隙率分別為71.5%、71.4%、75. 和74.8%，纖維的平均直徑分別為 656 士 161nm、636 士 152nm、777 士 202nm 和 620 士 107nm。加入 n_HA 后纖維氈的孔隙率變化不大，纖維的直徑輕微變小，根據(jù)文獻資料，由于納米羥基磷灰石表面羥基存在，在高壓靜電場作用下使帶電射流的表面電荷密度增加，有利于纖維的拉伸變細，使得纖維的直徑變小。而AMX/PLGA納米纖維的直徑有所增加，主要是因為AMX的加入引起PLGA 紡絲液性質(zhì)(如電導(dǎo)率、粘度等)變化所致。(4)靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥體系的的應(yīng)力-應(yīng)變曲線靜電紡25 % PLGA, n-HA/PLGA (n-HA 占 PLGA 質(zhì)量的 5 % )和 AMX/n-HA/PLGA (AMX 占PLGA質(zhì)量的)納米纖維氈的應(yīng)力-應(yīng)變曲線，參見附圖4。從應(yīng)力-應(yīng)變曲線可以看出，含n-HA及AMX/n-HA的復(fù)合納米纖維氈的斷裂強力以及初始模量與純PLGA納米纖維相比都有所提高，機械性能得到改善。(5)靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥體系的藥物釋放動力學(xué)分別與AMX/n-HA粉末和AMX/PLGA混紡的納米纖維載藥系統(tǒng)釋放動力學(xué)曲線做了比較，參見附圖5。與AMX/n-HA粉末和AMX/PLGA混紡的納米纖維載藥體系相比，靜電紡 AMX/n-HA/PLGA納米纖維雙載體載藥體系沒有明顯的“突釋”現(xiàn)象，并且藥物能夠持續(xù)地釋放。(6)靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥體系的體外抑菌活性分別進行靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥體系的體外動態(tài)、靜態(tài)抑菌活性測試，結(jié)果分別參見說明書附圖6、附圖7。抑菌實驗結(jié)果表明靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥系統(tǒng)可以很好的起到抑菌效果。有益效果(1)本發(fā)明的制備方法簡單，易于操作，所用的聚合物具有很好的生物相容性，且 PLGA及n-HA適合于大批量生產(chǎn)；(2)本發(fā)明方法制備的含n-HA的纖維氈，其機械強力得到了明顯的提高；(3)本發(fā)明方法制備的n-HA/PLGA的雙載體載藥系統(tǒng)具有很好的藥物持續(xù)釋放效



圖1為本發(fā)明使用的n-HA負載藥物AMX的條件優(yōu)化圖2為本發(fā)明使用的n-HA納米顆粒(a) ,n-HA/PLGA納米纖維(b)和PLGA納米纖維(c)的TEM圖；圖3為本發(fā)明制備的靜電紡PLGA納米纖維SEM圖(a)，靜電紡n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維的SEM圖(b)，靜電紡AMX/PLGA復(fù)合納米纖維的SEM圖(c)和靜電紡AMX/n_HA/PLGA 復(fù)合納米纖維的SEM圖(d)； 圖4為本發(fā)明制備的靜電紡PLGA、n-HA/PLGA及AMX/n_HA/PLGA納米纖維的應(yīng)力-應(yīng)變曲線；圖5為本發(fā)明制備的AMX/n-HA納米粉末、AMX/PLGA混紡纖維和AMX/n_HA/PLGA復(fù)合納米纖維載藥系統(tǒng)的藥物釋放動力學(xué)曲線；圖6為本發(fā)明制備的AMX/n-HA/PLGA納米纖維氈的液體抑菌活性對照圖；圖7為本發(fā)明制備的靜電紡AMX/n-HA/PLGA納米纖維氈的固體平板抑菌活性對照圖；其中 1，2，3，4 分別代表 PLGA、n-HA/PLGA、AMX/PLGA、AMX/n-HA/PLGA 納米纖維氈，a、b、c、d分別為金黃色葡萄球菌菌苔培養(yǎng)Mi、iai、iai、24h各時間點拍攝的四種納米纖維氈表現(xiàn)出的抑菌圈形貌圖。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實施例1取40mg AMX和2Omg n_HA分別溶解或分散在去離子水中，并將n-HA懸濁液超聲分散30 50min ；將AMX溶液逐滴加入n-HA懸濁液中，滴加速度控制在3mL/min，兩者最終質(zhì)量比為 2 1，并將制備的混合液攪拌18 Mh，轉(zhuǎn)速使懸濁液不沉淀即可；將所得混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，在3000 5000rpm的條件下離心3 5min，取出上清液，用去離子水清洗載有AMX的n-HA沉淀3 5次，上清液與洗滌液混合待用；將AMX/ n-HA沉淀置凍干機上低溫干燥18 Mh，將干燥后的粉末用瑪瑙研缽研磨，再用325目的篩網(wǎng)過濾，待用。實施例2將實施例1中離心得到的上清液和洗滌液稀釋20倍，用紫外分光光度計測試AMX 溶液在228nm處的吸光度，根據(jù)事先用AMX溶液標定的濃度-吸光度關(guān)系曲線，即可算出 n-HA載藥后溶液中剩余AMX的量，算出平均載藥效率(載藥效率(％ ) = n-HA負載AMX的質(zhì)量/n-HA的質(zhì)量)。根據(jù)附圖1結(jié)果，選取AMX的濃度為ang/mL，n-HA的濃度為lmg/mL， AMX與n-HA的質(zhì)量比為2 1，制備了實際載藥率為19. 2%的AMX/n-HA納米粉末。實施例3將^mg的實施例1得到的載藥效率為19. 2 %的n-HA粉末加入到2mL的THF/ DMF (3 1)溶劑中，超聲分散3 5min，攪拌30 50min，將0. 5g的PLGA溶解在上述混合液中，攪拌他，配制成質(zhì)量百分比濃度為(AMX相對PLGA為Iwt% )的均一靜電紡絲液，然后按照常規(guī)靜電紡絲的方法制備納米纖維氈，其中，接收距離為15cm，電壓為20kV，流速為0. 8mL/h，制備的復(fù)合納米纖維氈在真空干燥箱內(nèi)干燥48h以除去殘留的溶劑，待用。TEM表征結(jié)果(如附圖加所示)顯示n-HA為棒狀結(jié)構(gòu)，寬度為37士9nm，長度為 118士42nm，也可以看出n-HA很好地包裹于靜電紡PLGA納米纖維中(如附圖2b所示)，而對比例1制備的純的PLGA納米纖維則不顯示包裹在內(nèi)的納米棒狀結(jié)構(gòu)(如附圖2c所示)。 納米纖維氈的SEM表征結(jié)果(如附圖3a、b、c、d所示)顯示，本發(fā)明制備的PLGA(見對比例1)、n-HA/PLGA (見對比例2)、AMX/PLGA (見對比例3)、AMX/n-HA/PLGA納米纖維形貌規(guī)則、表面規(guī)整，都具有較大的孔隙結(jié)構(gòu)，孔隙率分別為71.5%、71.4%、75. 和74.8%，纖維直徑分別為656士 161nm、636士 152nm、777士202nm和620士 107nm。很明顯，當(dāng)一定量的 n-HA納米粒子摻雜于PLGA紡絲液中時，在同樣的紡絲條件下，所得納米纖維的直徑有所降低，根據(jù)文獻資料，由于納米羥基磷灰石表面羥基存在，在高壓靜電場作用下使帶電射流的表面電荷密度增加，有利于纖維的拉伸變細，使得纖維的直徑變小。而AMX/PLGA納米纖維的直徑有所增加，主要是因為AMX的加入引起PLGA紡絲液性質(zhì)(如電導(dǎo)率、粘度等)變化所致。實施例4將對比例1制備的靜電紡PLGA (25 %，w/v)、對比例2制備的靜電紡n_HA (相對 PLGA 5wt % ) /PLGA及實施例3制備的AMX (相對PLGA Iwt % ) /n-HA/PLGA納米纖維氈剪成10X50的長條，每個樣品有5個平行樣，并用千分尺測量每條纖維氈的五個不同的位置的厚度，求其平均值。用萬能材料測試機測試纖維氈的機械性能，得出應(yīng)力-應(yīng)變曲線、斷裂強度和斷裂伸長。從附圖4可以看出，n-HA/PLGA和AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維氈的斷裂強度因n-HA的加入而提高，這也充分說明n-HA是很好的纖維增強體。實施例5取IOOmg的實施例3中得到的靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維氈，置于裝有IOmL的PBS緩沖液的試劑瓶中，用于做緩釋實驗。同樣方法取對比例3中制備的 IOOmgAMX (相對PLGA Iwt % ) /PLGA復(fù)合納米纖維氈和實例2中制備的5. 2mgAMX/n-HA納米粉末作為對照。將試劑瓶置于37°C的搖床中震蕩，在不同的時間點，從試劑瓶中取出1. 5mL溶液， 再用1. 5mL的PBS緩沖液補充。取出的緩釋液用紫外分光光度計測試濃度，借助AMX在PBS 中的濃度-吸光度標定曲線，計算不同時間點的緩釋百分率，分析n-HA/PLGA雙載體載藥系統(tǒng)的藥物釋放動力學(xué)特征。從附圖5可以看出，與AMX/n-HA粉末和AMX/PLGA混紡的納米纖維載藥系統(tǒng)相比，靜電紡AMX/n-HA/PLGA納米纖維雙載體載藥系統(tǒng)沒有明顯的“突釋”現(xiàn)象，并且藥物能夠持續(xù)地釋放。實施例6取30mg實施例3中得到的靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維氈及相同質(zhì)量的對比例材料和對照材料(注意含藥的材料指含藥量相同，不含藥的載體材料指載體質(zhì)量相同)，包括原材料n-HA納米顆粒、抗菌藥AMX、實施例2制備的AMX/n-HA納米粉末、對比例 1制備的PLGA納米纖維、對比例2制備的n-HA/PLGA納米纖維和對比例3制備的AMX/PLGA 納米纖維。置于裝有5mL的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的試管中，用于做體外動態(tài)抑菌性試驗。將他紫外殺菌處理的纖維氈加入預(yù)先高壓蒸汽滅菌處理的培養(yǎng)基中，并接種625nm處吸光度為0. 1 0. 2的金黃色葡萄球菌，置37°C恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)Mh，通過紫外分光光度計測定625nm的吸光度并計算抑菌率(抑菌率=(對照組吸光值-實驗組吸光值)/對照組吸光值)。從圖6可以看出，相對于對比例材料和對照組，靜電紡AMX/n-HA/PLGA納米纖維雙載體載藥系統(tǒng)表現(xiàn)出了抑菌活性，但是AMX/n-HA卻沒有表現(xiàn)出明顯的抑菌活性，原因可能是n-HA本身是蛋白質(zhì)的良好吸附載體，培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨吸附在n-HA表面，覆蓋了藥物分子，使其不能很好的釋放出來并表現(xiàn)出抑菌活性。實施例7取實施例3中得到的靜電紡AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維氈和對比例1制備的 PLGA納米纖維、對比2制備的n-HA/PLGA納米纖維、對比例3制備的AMX/PLGA納米纖維氈， 用內(nèi)徑Icm打孔器制備圓形纖維氈，置于涂布金黃色葡萄球菌的固體培養(yǎng)基平板，用于做體外靜態(tài)抑菌性試驗。將他紫外殺菌處理的圓形纖維氈貼在涂布200 μ L金黃色葡萄球菌的固體培養(yǎng)基平板上，置37°C恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在6、12、18、Μ小時拍照，觀察抑菌圈變化情況，驗證緩釋體系釋放藥物效果。從附圖7可以看出，AMX/PLGA(3)、AMX/n-HA/PLGA(4)復(fù)合納米纖維氈相比于PLGA(I)、n-HA/PLGA (2)均出現(xiàn)了明顯的抑菌圈，表現(xiàn)了很好的抑菌效果。對比例1將0. 5g的PLGA溶解在2ml的THF/DMF (3 1)溶劑中，配制成質(zhì)量濃度百分比為 25%的溶液，靜置過夜，制備成均一透明靜電紡絲溶液，然后按照常規(guī)靜電紡絲的方法制備納米纖維氈，其中紡絲條件與實施例3中保持一致，制備的PLGA納米纖維氈在真空干燥箱內(nèi)干燥48h以除去殘留的溶劑，待用。從附圖3a可以看出，本發(fā)明制備的PLGA納米纖維形貌規(guī)則、表面規(guī)整，具有較大的孔隙結(jié)構(gòu)，孔隙率為71. 5%，纖維直徑為656士 161nm。對比例2將25mg n-HA納米粉末加入到2mL的THF/DMF(3 1)溶劑中，超聲分散30 60min，將0. 5g的PLGA溶解在上述混合液中，攪拌他，配制成質(zhì)量百分比濃度為5% (n-HA 相對PLGA為5wt%)的均一靜電紡絲液，然后按照常規(guī)靜電紡絲的方法制備納米纖維氈，其中紡絲條件與實施例3中保持一致。制備的n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維氈在真空干燥箱內(nèi)干燥48h以除去殘留的溶劑，待用。從附圖北可以看出，本發(fā)明制備的n-HA/PLGA納米纖維形貌規(guī)則、表面規(guī)整，具有較大的孔隙結(jié)構(gòu)，孔隙率為71.4%，纖維直徑為636士 152nm。對比例3將5mg AMX溶解在2mL的THF/DMF (3 1)溶劑中，將0. 5g的PLGA溶解在上述溶液中，攪拌他，配制成質(zhì)量百分比濃度為(AMX相對PLGA為Iwt% )的均一靜電紡絲液，然后按照常規(guī)靜電紡絲的方法制備納米纖維氈，其中紡絲條件與實施例3中保持一致， 制備的AMX/PLGA復(fù)合納米纖維氈在真空干燥箱內(nèi)干燥48h以除去殘留的溶劑，待用。從附圖3c可以看出，本發(fā)明制備的AMX/PLGA納米纖維直徑分布范圍稍大，但不影響其孔隙結(jié)構(gòu)和纖維形貌，孔隙率為75. 1%，纖維直徑為777 士 202nm。
權(quán)利要求
1.一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法，包括(1)將水溶性藥物溶解在去離子水中，得濃度為0.05-3mg/mL的藥物的水溶液^fn-HA 分散在去離子水中，超聲分散均勻，得濃度為Hmg/mL的η_ΗΑ懸濁液；(2)攪拌下，將上述藥物的水溶液逐滴加入上述η-ΗΑ懸濁液中；離心分離得沉淀，用去離子水洗滌沉淀，冷凍干燥并過濾，得到負載藥物的η-ΗΑ ；(3)將上述負載藥物的η-ΗΑ超聲分散在THF/DMF混合溶劑中，加入聚乳酸-羥基乙酸 PLGA配成紡絲溶液，然后進行靜電紡絲，得到n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟(1)中所述的藥物為阿莫西林AMX。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟(1)中藥物的水溶液的濃度為ang/mL，η-ΗΑ懸濁液的濃度為lmg/mL，水溶性藥物與η-ΗΑ的質(zhì)量比為2 1，超聲分散時間為30 50min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟O)中所述的逐滴加入時，藥物的水溶液的滴加速度控制在3 5mL/ min，攪拌時間為18 24h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟(2)中所述的離心分離的離心速度為4000 6000rpm，時間為3 5min ； 所述的洗滌沉淀的洗滌次數(shù)為2 3次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟O)中所述的過濾為使用325目的篩網(wǎng)過濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟(3)中所述的THF/DMF混合溶劑中THF與DMF的體積比為3 1 ；超聲分散的時間為3 5min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法，其特征在于步驟(3)中所加入的PLGA的質(zhì)量與THF/DMF混合溶劑的體積之比為 Ig 4-5mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法， 其特征在于步驟(3)中所述的靜電紡絲的工藝條件為接收距離為10 20cm，電壓為 15 25kV，流速為 0. 8 lmL/h。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合納米纖維載藥體系的制備方法，包括(1)將水溶性藥物溶解在去離子水中，得藥物的水溶液；將n-HA分散在去離子水中，超聲分散均勻，得n-HA懸濁液；(2)攪拌下，將上述藥物的水溶液逐滴加入上述n-HA懸濁液中；離心分離得沉淀，用去離子水洗滌沉淀，冷凍干燥并過濾，得到負載藥物的n-HA；(3)將上述負載藥物的n-HA超聲分散在THF/DMF混合溶劑中，加入聚乳酸-羥基乙酸PLGA配成紡絲溶液，然后進行靜電紡絲，即得。本發(fā)明的制備方法簡單，易于操作，所用的聚合物具有很好的生物相容性；本發(fā)明的n-HA/PLGA的雙載體載藥系統(tǒng)具有很好的藥物持續(xù)釋放效果。
文檔編號A61K47/04GK102389395SQ20111034851
公開日2012年3月28日 申請日期2011年11月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月7日
發(fā)明者史向陽, 沈明武, 王世革, 鄭付印 申請人:東華大學(xué)