專利名稱：：異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化學(xué)和醫(yī)藥生物領(lǐng)域，特別涉及異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，該衍生物可以制備成脂質(zhì)體、納米粒、類脂質(zhì)體及微乳等高度分散的藥物傳遞系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
：結(jié)核病(TB)是一種由結(jié)核桿菌(MTB)引起的古老疾病，與艾滋病和乙型肝炎一起成為當(dāng)今國(guó)內(nèi)威脅人類健康的三大傳染病，因此結(jié)核病的研究和治療是一個(gè)重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題和社會(huì)問(wèn)題。2009年全國(guó)法定甲、乙類傳染病發(fā)病和死亡統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，肺結(jié)核均居次席。目前我國(guó)人口結(jié)核感染率44.5%，約有4億人感染過(guò)結(jié)核病，其中已經(jīng)感染者中大約10%會(huì)在一生中先后發(fā)生臨床肺結(jié)核。特別是近年來(lái)，耐藥結(jié)核病尤其是耐多藥(multi-drugresistanttuberculosis,MDR-TB)禾口廣泛耐藥結(jié)核病(extensivelydrugresistanttuberculosis,XDR-TB)的流行與傳播引起了全球各國(guó)學(xué)者的極大關(guān)注。異煙肼是最早用于結(jié)核病治療的合成藥物，是預(yù)防和治療結(jié)核病中使用最廣泛的一線合成藥物。其作用機(jī)制是異煙肼可以有被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)方式通過(guò)結(jié)核菌的細(xì)胞壁，被細(xì)菌的過(guò)氧化酶(敏感株內(nèi)特有的酶)氧化為異煙酸。異煙酸的PKa二4.84，在細(xì)菌的胞內(nèi)pH下完全解離，因此不能再擴(kuò)散出細(xì)胞。異煙酸在胞內(nèi)可經(jīng)季銨化，然后慘到煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的生物合成形成NAD的類似物，干擾了細(xì)菌的正常代謝，導(dǎo)致細(xì)菌的死亡。結(jié)核病治療的兩大難題在于結(jié)核分枝桿菌的持留性和耐藥性。隨著異煙肼廣泛使用，其耐藥率逐年上升，同時(shí)異煙肼的肝毒性也和長(zhǎng)期大量用藥有關(guān)。有報(bào)導(dǎo)稱我國(guó)異煙肼的耐藥率已排在世界首位。美國(guó)也已發(fā)生多起耐藥結(jié)核病的爆發(fā)流行，目前對(duì)異煙肼耐藥性的研究日益受到重視。結(jié)核桿菌獲得耐藥性的方式大致有三種類型，即障礙機(jī)制(降低細(xì)胞膜的通透性和外排泵機(jī)制)、產(chǎn)生降解或滅活酶類(如P_內(nèi)酰胺酶)、藥物靶部位的改變(如某個(gè)關(guān)鍵基因的突變)。分枝桿菌產(chǎn)生耐藥性的生物學(xué)機(jī)理包括形成脂豐富的細(xì)胞壁，從而阻擋水溶性藥物進(jìn)入菌體內(nèi)；產(chǎn)生藥物降解酶；基因突變。異煙肼分子中有比較活潑的胺基，能通過(guò)化學(xué)合成的方法制備一系列衍生物，將其制備成脂質(zhì)衍生物，能夠提高藥物細(xì)胞滲透性，提高抗菌活性。為了解決異煙肼水溶性差，難以穿透分枝桿菌細(xì)胞壁、滲透進(jìn)入巨噬細(xì)胞而造成大劑量和長(zhǎng)時(shí)期治療，導(dǎo)致了結(jié)核桿菌的耐藥性及毒副作用等問(wèn)題，一系列異煙肼酰基月旨質(zhì)衍生被合成(LI.Gia皿ola，G.GiammonaandR.alottaPro-drugsofisoniazid:Synthesisanddiffusioncharacteristicsofacylderivatives.Pharmazie.1992Jim;47(6):423-5.)，這些衍生物的脂溶性被提高，但由于?；|(zhì)衍生物在體內(nèi)不容易水解，藥物不能發(fā)揮療效，因此必須能找到一種容易降解且能提高藥物滲透性的脂質(zhì)前藥。四氫-2H-1,3，5-噻二嗪-2-硫酮衍生物(Tetrahydro-2H-l，3，5-thiadiazin-2-thionederivatives，THTT)在二十世紀(jì)五十年代被開(kāi)發(fā)和應(yīng)用，90年代初被廣泛應(yīng)用于藥物學(xué)研究領(lǐng)域。四氫-2H-1，3，5-噻二嗪-2-硫酮衍生物(Tetrahydro-2H-1，3，5-thiadiazin-2-thionederivatives)具有很強(qiáng)的生物活性，作為抗菌素藥物、抗病毒藥物、驅(qū)蟲(chóng)藥物、抗原蟲(chóng)藥物及抗結(jié)核藥物的前藥合成被廣泛應(yīng)用。THTT表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌活性主要是因?yàn)檫@類化合物容易水解出異硫氰酸鹽和二硫代氨基甲酸(MostafaA，H.HusseinandMoammedHashem.SynthesisofNew3_Substituted_5_(2-hydroxyethyl)—3，4，5，6_tetrahydro_2H_l，3，5_thiadiazine_2_thioneDerivativeswithPotentialAntimicrobialActivity.Arch.Pharm.Chem.LifeSci.2008，341，370-376)。THTT衍生物的抗菌活性與環(huán)上不同位置的取代基有關(guān)系，如圖l所示當(dāng)3位"R"基是親脂性基團(tuán)，5位"R"基是親水性基團(tuán)時(shí)則可增加抑菌活性，另外根據(jù)基本藥效結(jié)構(gòu)，3位R取代基的鏈長(zhǎng)和結(jié)構(gòu)對(duì)化合物的抗菌活性有直接的關(guān)系(張楓等，噻二嗪硫酮類抑菌衍生物的合成.沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，18(5):329;陳改清等，新型巰基蛋白酶抑制劑的合成及構(gòu)效關(guān)系.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，23(2):107)。，NT^、,5、S"\s圖1四氫-2H-1,3，5-噻二嗪-2-硫酮(THTT)結(jié)構(gòu)THTT還能形成雙頭基脂質(zhì)前藥，乙二胺同THTT環(huán)連接后可行成雙頭基脂質(zhì)前藥(MostafaA.Hussein，Abdel-NasserEI-Shorbagi，A，Synthesisandantifungalactivityof3，3_ethylenebis(5_alkyl_l，3，5_thiadiazine_2_Thiones.Arch.Pharm.Pharm.Med.Chem.2001，334，305-308)，結(jié)構(gòu)如圖2，但僅限于乙二胺的報(bào)道，尚未見(jiàn)長(zhǎng)鏈THTT雙頭基脂質(zhì)衍生物的合成報(bào)道，同時(shí)也沒(méi)有見(jiàn)長(zhǎng)鏈THTT雙頭基和異煙肼形成的衍生物報(bào)道。R\N-S-、S.N-S-NS-N\R圖2乙二胺THTT雙頭基脂質(zhì)衍生物將具有抗菌活性的母體藥物異煙肼與THTT通過(guò)化學(xué)合成的方法，制備含有THTT環(huán)的前體藥物，將有可能提高藥物本身的抗菌活性，同時(shí)提高藥物滲透進(jìn)入細(xì)胞的能力，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間，降低藥物的毒性。異煙肼與THTT通過(guò)環(huán)化形成的脂質(zhì)衍生物往往具有較強(qiáng)的脂溶性，藥物不能溶解于水中，傳統(tǒng)制劑如片劑、膠囊或注射劑，無(wú)法解決藥物在水中的高度分散和溶解問(wèn)題。藥物一般需要以分子或高度分散的分子聚集體形式才能吸收進(jìn)入細(xì)胞。人體的內(nèi)環(huán)境是水溶液形式，生物膜呈脂溶性，藥物或藥物給藥形式需要在體內(nèi)可以傳輸，并且多次穿越生物膜才能到達(dá)細(xì)胞等作用靶部位。如果不溶性的脂溶性藥物無(wú)法溶解或高度分散，就無(wú)法有5效的傳遞藥物。脂質(zhì)體(liposome)是有磷脂雙分子層構(gòu)成的泡囊，是一種可以在水溶液中高度分散的傳遞系統(tǒng)，可以作為藥物的載體。脂質(zhì)體包裹藥物后在體內(nèi)具有靶向、緩釋性，同時(shí)具有組織細(xì)胞相容性、較低藥物毒性及提高藥物的穩(wěn)定性等作用。修飾后的磷脂組成的脂質(zhì)體還可以有體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)、溫度靶向、pH靶向、磁靶向、主動(dòng)靶向等功能。結(jié)核分支桿菌(MycobacteriaTuberculosis)是細(xì)胞內(nèi)兼生的寄生菌，通過(guò)呼吸道進(jìn)入體內(nèi)后，迅速被肺巨噬細(xì)胞吞噬。激活的巨噬細(xì)胞有殺滅結(jié)核菌的能力，未激活的巨噬細(xì)胞不能殺滅結(jié)核菌，結(jié)核菌可以在胞內(nèi)增殖并引起細(xì)胞凋亡。鳥(niǎo)分枝桿菌復(fù)合菌組(Mycobacteriaaviumcomplex,MAC)感染是HIV感染者中最常見(jiàn)的機(jī)會(huì)性細(xì)菌感染。美國(guó)HIV感染病人中MAC引起播撒性疾病多達(dá)15%40%，也有報(bào)道達(dá)23%50%。MAC主要侵染單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)(MPS，主要包括肝、脾、肺、淋巴結(jié)，是人體內(nèi)巨噬細(xì)胞的主要集中地)。脂質(zhì)體具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活體內(nèi)的自身免疫功能，并改變被包封藥物在體能的分布動(dòng)力學(xué)特性，使藥物主要在肝、脾肺和骨髓等器官組織中蓄積，從而提高了藥物的治療指數(shù)，減少藥物的治療劑量和降低了藥物的毒副作用。將異煙肼制備成脂質(zhì)體，提高了異煙肼在結(jié)核分子桿菌宿體細(xì)胞內(nèi)濃度，提高了療效，同時(shí)降低了因大量服用異煙肼造成的毒副作用。據(jù)報(bào)道，將異煙肼制備成脂質(zhì)體，電鏡下觀察異煙肼脂質(zhì)體滲透進(jìn)入豚鼠肺巨噬細(xì)胞的試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)孵化30分鐘就能完全進(jìn)入(GolyshevskaiaVI，SelishchevaAA.Evaluationoftheefficiencyofactivityoftheliposomalformofisoniazidagainstdifferenttypesofmycobacteriainvitro.ProblTuberkBoleznLegk.2006，(8):61-64)肺巨噬細(xì)胞。說(shuō)明將異煙肼制備成脂質(zhì)體提高了細(xì)胞滲透性。脂質(zhì)體泡囊的磷脂雙分子層膜將內(nèi)部包裹的水相和外部水相隔開(kāi)，雙分子層內(nèi)呈疏水性。藥物根據(jù)其物理化學(xué)性質(zhì)的不同分別包裹在內(nèi)水相或膜中。水溶性藥物在內(nèi)水相中；脂溶性藥物在膜層中。脂質(zhì)體的形成是磷脂分子在水中自組裝的過(guò)程，內(nèi)水相的體積比例很小，因此大部分水溶性藥物的包裹率比較低，藥物容易滲漏到外水相。藥物連接脂溶性脂肪鏈，則提高藥物的脂溶性，且藥物分子的脂肪鏈可以插入磷脂雙分子層中，結(jié)合比較牢固，藥物分子不容易脫掉，藥物的包裹率比較高。異煙肼本身的水溶性比較強(qiáng)，包裹率比較低，因此異煙肼通過(guò)化學(xué)合成，與連接有長(zhǎng)脂肪鏈的THTT衍生化后，脂溶性提高，增加了其在脂質(zhì)體中的包裹率。非離子表面活性劑泡囊是指某些非離子表面活性劑在一定條件下在水中自組裝成泡囊結(jié)構(gòu)，也叫類脂質(zhì)體，它同樣可以作為藥物載體，具有類似脂質(zhì)體的一些體內(nèi)特征。納米粒一般是指納米級(jí)分散的固體粒子，由于其高度分散性，它作為藥物載體具有提高藥物生物利用度、增強(qiáng)靶向性等特點(diǎn)。固體脂質(zhì)納米粒采用人體相容性的脂質(zhì)材料作為主要輔料形成納米粒，具有普通納米粒的特點(diǎn)和生物相容性好的特點(diǎn)。微乳是指粒徑在100納米以下的乳滴組成的體系，可以將脂溶性藥物包裹在乳滴中，由于其高度分散性，它作為藥物載體同樣有提高藥物生物利用度、增強(qiáng)靶向性的特點(diǎn)。因此，將異煙肼制備成脂溶性前藥，并進(jìn)一步制備成脂質(zhì)體、類脂質(zhì)體、納米粒、微乳等水溶液中高度分散的制劑，有利于發(fā)揮療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種脂溶性高，可制成高度分散制劑的異煙肼噻二嗪酮化衍生物。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，結(jié)構(gòu)通過(guò)INH-THTT-R-THTT-INH來(lái)描述，INH代表抗結(jié)核藥物異煙肼的結(jié)構(gòu)；THTT是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)；R是含有兩個(gè)伯胺的直鏈或非直鏈或環(huán)狀烴基化合物，其生產(chǎn)過(guò)程和通式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>烴基化合物與兩個(gè)伯胺直接相連接的碳原子周?chē)缓娮咏Y(jié)構(gòu)，雙伯胺選自1，3-丁二胺、l，4-戊二胺、l，5-戊二胺、己二胺、l，3-環(huán)己二胺、l，4-環(huán)己二胺、反式-l，4-環(huán)己二胺、甲基環(huán)戊二胺、1，7-庚二胺、1，8辛二胺及上述含有雙伯胺的化合物的同分異構(gòu)體，乙二胺，正丁二胺中的任意一種。通過(guò)下述三步反應(yīng)得到第一步反應(yīng)含有兩個(gè)伯胺的烴基化合物與二硫化碳、20%氫氧化鉀溶液反應(yīng)，反應(yīng)中各物質(zhì)的投料量按照摩爾量來(lái)進(jìn)行計(jì)算，二硫化碳?xì)溲趸涬p伯胺烴基化合物(NH2-L-NH2)摩爾比為(412):1:1，或者比例為(610):1:l;反應(yīng)溫度為258(TC，或者305(TC，反應(yīng)時(shí)間為612h，或者810h;第二步反應(yīng)第一步反應(yīng)溶液冷卻至室溫后，加入福爾馬林溶液(含甲醛3540%水溶液)，加入量是雙伯胺烴基化合物投入摩爾量的412倍，或者位58倍，反應(yīng)持續(xù)16小時(shí)，或者2-4小時(shí)；第三步反應(yīng)此步反應(yīng)為環(huán)化過(guò)程，異煙肼分子中的伯胺比較活潑，參與環(huán)化反應(yīng)，投入量是雙伯胺烴基化合物投入摩爾量的2-6倍，或者24倍，量取一定量的pH7.8磷酸緩沖液-無(wú)水乙醇(l:2，V/V)混合溶液，將規(guī)定量的異煙肼溶于上述混合溶液內(nèi)，逐滴加入第二步反應(yīng)液中，室溫?cái)嚢?18小時(shí)，或者812小時(shí)?；衔锏姆肿恿糠秶?061000g/moL，或者534618g/moL;化合物的油水分配系數(shù)(LgP)范圍為0.015，或者范圍為0.12.0。制備成脂質(zhì)體或固體脂質(zhì)納米?；蝾愔|(zhì)體或微乳高度分散的制劑，這種高度分散的制劑形成的混懸液，粒徑小于1000nm，或者粒徑或是200700nm，或者徑是200400nm。本發(fā)明提出的異煙肼脂質(zhì)衍生物是一種全新的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明所提的異煙肼脂質(zhì)衍生物的結(jié)構(gòu)可以用如下形式來(lái)表達(dá)INH-THTT-R-THTT-INH此結(jié)構(gòu)描述如下(1)INH代表抗結(jié)核藥物異煙肼的結(jié)構(gòu)；(2)THTT是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)；(3)R是含有兩個(gè)伯胺的直鏈、非直鏈或環(huán)狀烴基化合物。本發(fā)明中，異煙肼(INH)化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖3所示，又稱4-吡啶甲酰胺，按照藥典規(guī)定按照干燥品計(jì)算，含C6H7N30不得少于99.0%。異煙肼為藥用原料藥。圖3異煙肼結(jié)構(gòu)圖本發(fā)明中提出的異煙肼脂質(zhì)衍生物結(jié)構(gòu)中THTT-R-THTT是通過(guò)合成得到。本發(fā)明提出的異煙肼脂質(zhì)衍生物可以用下列合成步驟說(shuō)明第一步反應(yīng)含有兩個(gè)伯胺的烴基化合物與二硫化碳、20%氫氧化鉀溶液反應(yīng)，反應(yīng)方程式如下圖4第一步反應(yīng)式R代表連有兩個(gè)伯胺的烴基化合物或氨基酸單元反應(yīng)中各物質(zhì)的投料量按照摩爾量進(jìn)行計(jì)算，二硫化碳?xì)溲趸涬p伯胺結(jié)構(gòu)(NH2-L-NH2)為(412):1:1，或者比例為(610):1:l;反應(yīng)溫度為2580。C，或者3050°C，反應(yīng)時(shí)間為612h，或者810h。第二步反應(yīng)第一步反應(yīng)溶液冷卻至室溫后，加入福爾馬林溶液(含甲醛3540%水溶液)，加入量是雙伯胺投入摩爾量的412倍，或者位58倍。反應(yīng)持續(xù)166CSK0H小時(shí)，或者2-4小時(shí)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>圖5第二步反應(yīng)第三步反應(yīng)此步反應(yīng)為環(huán)化過(guò)程，異煙肼分子中的伯胺比較活潑，參與環(huán)化反應(yīng)，投入量是雙伯胺投入摩爾量的2-6倍，或者2液-無(wú)水乙醇(l:2，體積比)混合溶液，將規(guī)定著入第二步反應(yīng)液中，室溫?cái)嚢?18小時(shí)，或者8S.4倍。量取一定量的pH7.8磷酸緩沖:的異煙肼溶于上述混合溶液中。逐滴加12小時(shí)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>圖6異煙肼噻二嗪硫酮脂質(zhì)衍生物合成路線本發(fā)明中異煙肼噻二嗪硫酮脂質(zhì)衍生物的合成分三個(gè)反應(yīng)步驟完成，反應(yīng)中兩個(gè)THTT環(huán)相連的烴基結(jié)構(gòu)中須含有兩個(gè)活潑的伯胺，其特征為與兩個(gè)伯胺直接相連接的碳原子周?chē)缓娮咏Y(jié)構(gòu)體系；主要包括脂肪二胺、芳香二胺。可以選自乙二胺、正丁二胺、1，3-丁二胺、1，4-戊二胺、1，5-戊二胺、1，6-己二胺、l，3-環(huán)己二胺、l，4-環(huán)己二胺、反式-l，4-環(huán)己二胺、甲基環(huán)戊二胺、l，7-庚二胺、l，8辛二胺及這些含有雙胺基結(jié)構(gòu)的同分異構(gòu)體、不同取代基的烴類化合物。芳香二胺由于胺基和吸電子基苯環(huán)相連，降低了胺基的活性因此不利于反應(yīng)進(jìn)行。本發(fā)明所列出的具兩個(gè)活潑胺基的烴基化合物不局限于上述所列的二胺烴基，包括所有含兩個(gè)活潑伯胺基化合物及其同分異構(gòu)體，同時(shí)還包括前述含兩個(gè)活潑胺基化合物的不同位置取代基的烴基化合物。本發(fā)明中異煙肼衍生物結(jié)構(gòu)具有如下特征(1)結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)異煙肼分子與THTT環(huán)通過(guò)"N"原子相連；(2)結(jié)構(gòu)中兩個(gè)THTT環(huán)與烴基或其同分異構(gòu)體通過(guò)"N"原子相連；本發(fā)明中異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物可以在體內(nèi)水解釋放兩分子異煙肼，同時(shí)釋放出異硫氰酸鹽和二硫代氨基甲酸發(fā)揮抗菌活性。異煙肼噻二嗪硫酮化的衍生物可以制備成脂質(zhì)體、類脂質(zhì)體、納米粒、微乳等高度分散的制劑。這些高度分散的制劑可以以水性混懸液形式存在并給藥。含有異煙肼噻二嗪硫酮化的衍生物所制備的高度分散制劑，粒徑一般小于lOOOnm，一般是200700nm，更或者的是200400nm。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下本發(fā)明提出了異煙肼新的一種脂質(zhì)衍生物結(jié)構(gòu)，此結(jié)構(gòu)不僅提高了異煙肼的脂溶性，并且提高了其制備脂質(zhì)體、類脂質(zhì)體、納米粒、微乳等水溶液中高度分散制劑形式的能力。異煙肼新的脂質(zhì)衍生物是異煙肼前藥的一種，很容易在體內(nèi)水解釋放異煙肼，發(fā)揮原藥的治療作用，釋放出的其他化學(xué)結(jié)構(gòu)同時(shí)也具有良好的抗菌活性。異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物形成的脂質(zhì)體可以通過(guò)下列方法制備，一般采用薄膜分散法，將異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物與磷脂、膽固醇等膜材共同溶于有機(jī)溶劑中，置燒瓶中，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到一層薄膜，然后加入水或緩沖溶液，進(jìn)行超聲和震蕩，直至形成均勻的混懸液。如果采用反相蒸發(fā)法，可將異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物與磷脂等膜材共同溶于有機(jī)溶劑中，加入水或緩沖液，高速攪拌或超聲制備成乳劑，然后減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到凝膠態(tài)物質(zhì)，再加入水或緩沖溶液，繼續(xù)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，直至制備成均勻混懸液。脂質(zhì)體混懸液也可以選擇適當(dāng)配方，例加加入凍干保護(hù)劑，甘露醇、山梨醇等；冷凍干燥或噴霧干燥，形成固體粉末狀，這樣可以保證制劑的穩(wěn)定性，臨用前加入水溶液振搖即可得到脂質(zhì)體混懸液。制備異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物脂質(zhì)體的方法還包括注入法、二次乳化法、超聲波法、微乳化法及熔融法。運(yùn)用同樣的方法可以制備異煙肼噻二嗪硫酮衍生物的類脂質(zhì)體制劑。異煙肼噻二嗪硫酮衍生物可以制備固體脂質(zhì)納米粒，具體方法為將異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物同固體脂質(zhì)，如磷脂、脂肪酸、甘油酯，共同加熱熔融，然后加入水或適當(dāng)緩沖液，在加熱情況下在高壓乳勻機(jī)上循環(huán)乳化多次，形成納米分散的乳滴，迅速冷卻，使之固化，即得到異煙肼噻二嗪硫酮衍生物脂質(zhì)納米粒。用微乳化法也可以得到異煙肼噻二嗪硫酮衍生物納米粒。這種納米?；鞈乙哼€可以通過(guò)冷凍干燥、噴霧干燥，形成固體粉末狀，這樣可以保證制劑的穩(wěn)定性，臨用前加入水溶液振搖即可得到納米混懸液。異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物微乳的制備可以參考常見(jiàn)的處方，處方組成一般包括乳化劑、助乳化劑、助溶劑、油相、水相。將異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物與助乳化劑溶于適當(dāng)溶劑中，加入乳化劑聚氧乙烯氫化蓖麻油，攪拌均勻即得。將抗結(jié)核藥物異煙肼經(jīng)過(guò)結(jié)構(gòu)改造，合成異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，提高了異煙肼的脂溶性，使藥物更容易滲透進(jìn)入結(jié)核菌細(xì)胞，同時(shí)合成的異煙肼新型化合物能夠在體內(nèi)水解，釋放原型藥物異煙肼，提高了抗結(jié)核藥物異煙肼的治療指數(shù)。將新型異煙肼噻二嗪硫酮化衍生制備成高度分散的傳遞系統(tǒng)，使藥物能夠具有更好的靶向性、穩(wěn)定性，減少了藥物的用量，降低了異煙肼的耐藥性，同時(shí)使異煙肼更加有效10的發(fā)揮抗結(jié)核病的功效。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:N，N'_[乙烷-l，2-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物的結(jié)構(gòu)圖如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>圖7N，N'_[乙烷-l，2-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺本品化學(xué)名稱為N，N'_[ethane-l，2-diylbis(6-thioxo-l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C2。H22N8S402，簡(jiǎn)稱ETTD。分子量為534。具體合成步驟如下將1.5g(25mmo1)乙二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35。C條件下加熱溶解，加入7mL(20X，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmo1)二硫化碳，35t:反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率41%。結(jié)構(gòu)確i正,HNMR(DMS0-d6，400MHz)表明S:3.81-3.92(CH2CH2，4H)，4.64(NCH2NCH2SCS，8H)，7.39(NNHCO，2H)，7.68(Py-CHCH，4H)，8.73(Py-CHCH，4H)。元素分析值C(44.84%)H(4.02%)N(20.81%)與理論值C(44.94%)H(4.12%)N(20.97%)接近。實(shí)施例2:N，N'-[丁烷_(kāi)1，4-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物的結(jié)構(gòu)圖如下S、,SNH圖8N，N'-[丁烷_(kāi)1，4-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺本品化學(xué)名稱為N，N'_[butane_l，4_diylbis(6_thioxo_l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C22H26N8S402，簡(jiǎn)稱BTTD。分子量為562。具體合成步驟如下將2.2g(25mmo1)丁二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35°C條件下加熱溶解，加入7mL(20X，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmol)二硫化碳，35t:反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率53%。結(jié)構(gòu)確i正，^NMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:2.2-2.4(CH2CH2，4H)3.81-3.92(NCH2CH2N，4H)，4.66(NCH2NCH2SCS，8H)，7.41(NNHC0，2H)，7.72(Py-CHCH，4H)，8.83(Py-CHCH，4H)。元素分析值C(46.14%)H(4.55%)N(20.02%)與理論值C(46.97%)H(4.62%)N(19.93%)接近。實(shí)施例3:N，N'-[丁烷_(kāi)1，3-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物的結(jié)構(gòu)圖如下NH—N圖9N，N'-[異丁烷_(kāi)1，3-雙基(6-硫代12-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺本品化學(xué)名稱為N，N'-[isobutane-l，12-diylbis(6-thioxo-l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C22H26N8S402，簡(jiǎn)稱ITTD。分子量為562。具體合成步驟如下將2.2g(25mmo1)異丁二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35°C條件下加熱溶解，加入7mL(20X，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmol)二硫化碳，35t:反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率47%。結(jié)構(gòu)確證，工HNMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:1.8(CH3，3H)，2.1(CH2，2H)，3.1-3.2(NCH，CH2N，3H)，4.72(NCH2NCH2SCS，8H)，7.61(NNHC0，2H)，7.82(Py-CHCH，4H)，8.93(Py-CHCH，4H)。元素分析值C(47.06%)H(4.61%)N(19.89%)與理論值C(47.01%)H(4.66%)N(20.00%)接近。實(shí)施例4N，N'-[戊烷_(kāi)1，5-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物的結(jié)構(gòu)圖如下圖10N，N'-[戊烷_(kāi)1，5-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺本品化學(xué)名稱為N，N'_[pentane-l，5-diylbis(6-thioxo-l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C23H28N8S402，簡(jiǎn)稱PTTD。分子量為576。具體合成步驟如下將2.55g(25mmo1)戊二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35°C條件下加熱溶解，加入7mL(20X，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmo1)二硫化碳，35t:反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率35%。結(jié)構(gòu)確i正,HNMR(DMS0-d6，400MHz)表明S:1.8-2.7[(CH2)3，6H)，3.1-3.8(NCH2，CH2N，4H)，4.65(NCH2NCH2SCS，8H)，7.56(NNHCO，2H)，7.73(Py-CHCH，4H)，8.83(Py-CHCH，4H)。元素分析13值C(47.91%)H(4.80%)N(19.41%)與理論值C(47.95%)H(4.86%)N(19.45%)接近。實(shí)施例5N，N'_[己烷-l，6-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物的結(jié)構(gòu)圖如下圖10N，N'[己烷-l，6-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺本品化學(xué)名稱為N，N'-[Hexane-l，6-diylbis(6-thioxo-l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C24H3。N8S402，簡(jiǎn)稱HTTD。分子量為590。具體合成步驟如下將2.9g(25mmo1)己二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35°C條件下加熱溶解，加入7mL(20X，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmol)二硫化碳，35t:反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率35X。結(jié)構(gòu)確證？HNMR(匿S0-de，400MHZ)表明S:1.8-2.8[(CH2)4，8H)]，3.5-4.1(NCH2，CH2N，4H)，4.75(NCH2NCH2SCS，8H)，7.71(NNHCO，2H)，7.91(Py-CHCH，4H)，8.97Py-CHCH，4H)。元素分析值C(48.81%)H(5.05%)N(19.78%)與理論值C(48.82%)H(5.08%)N(18.99%)接近。實(shí)施例6N，N'_[1，4-環(huán)己烷-1，4-雙基(6-硫代-l，3，5-噻二嗪-5，3-二基]雙異煙酰胺的合成，化合物結(jié)構(gòu)圖如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>圖11N，N'_[1，4-環(huán)己烷-1，4-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺。本品化學(xué)名稱為N，N'_[l，4_cyclohexane_l，4_diylbis(6_thioxo_l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C24H28N8S402，簡(jiǎn)稱CHTTD。分子量為588。具體合成步驟如下將2.85g(25mmol)l，4-環(huán)己二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35。C條件下加熱溶解，加入7mL(20%，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmo1)二硫化碳，35"反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率45%。結(jié)構(gòu)確i正，^NMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:2.4-3.2[(CH2)4，8H)]，3.8-4.2(NCH，CHN，2H)，4.67(NCH2NCH2SCS，8H)，7.65(NNHCO，2H)，7.85(Py-CHCH，4H)，8.84Py-CHCH，4H)。元素分析值C(48.95%)H(4.74%)N(19.18%)與理論值C(48.98%)H(4.76%)N(19.19%)接近。實(shí)施例7N，N'_[1，3-環(huán)己烷-1，3-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物結(jié)構(gòu)圖如下圖12N，N'_[1，3-環(huán)己烷-1，3-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺。本品化學(xué)名稱為N，N'_[l，3-cyclohexane-l，3-diylbis(6-thioxo-l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C24H28N8S402，簡(jiǎn)稱C'HTTD。分子量為588。具體合成步驟如下將2.85g(25mmol)l，3-環(huán)己二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35t:條件下加熱溶解，加入7mL(20%，25mmo1)KOH溶液攪拌約2分鐘，再滴入1512mL(200mmo1)二硫化碳，35"反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率45%。結(jié)構(gòu)確證，工HNMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:1.2[CH3，3H)]，2.2-2.4(CH2CH3CH2，4H)，2.6(NCHCH3CHN，3H)，3.2[(NCH)2，2H]，4.86(NCH2NCH2SCS，8H)，7.76(匪CO，2H)，7.94(Py-CHCH，4H)，8.82Py-CHCH，4H)。元素分析值C(48.91%)H(4.75%)N(19.17%)與理論C(48.98%)H(4.76%)N(19.19%)接近。實(shí)施例8N，N'-[反式1，4-環(huán)己烷-1，4-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物結(jié)構(gòu)圖如下圖13N，N'_[反式1，4-環(huán)己烷-1，4-雙基(6-硫代-l，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺。本品化學(xué)名稱為N，N'_[Cis_l，4_cyclohexane_l，3_diylbis(6_thioxo_l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C24H28N8S402，簡(jiǎn)稱CCTTD。分子量為588。具體合成步驟如下將2.85g(25mmo1)反式1，4_環(huán)己二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35。C條件下加熱溶解，加入7mL(20%，25mmo1)KOH溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmo1)二硫化碳，35"反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率47%。結(jié)構(gòu)確i正，^NMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:2.5-3.2[(CH2)4，8H)]，3.7-4.1(NCH，CHN，2H)，4.77(NCH2NCH2SCS，8H)，7.85(NNHCO，2H)，7.91(Py-CHCH，4H)，8.94Py-CHCH，4H)。結(jié)構(gòu)確證，元素分析C(48.90%)H(4.71%)N(19.14%)與理論值C(48.98%)H(4.76%)N(19.19%)接近。實(shí)施例9N，N'_[甲基環(huán)戊烷-2，3-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物結(jié)構(gòu)圖如下]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>圖14N，N'_[甲基環(huán)戊烷-2，3-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺。本品化學(xué)名稱為N，N'-[Methylcyclopentane-2，3-diylbis(6-thioxo-1，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C24H28N8S402，簡(jiǎn)稱MTTD。分子量為588。具體合成步驟如下將2.85g(25mmo1)甲基環(huán)戊二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35。C條件下加熱溶解，加入7mL(20%，25mmo1)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmo1)二硫化碳，35"反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率41%。結(jié)構(gòu)確證，工HNMR(DMS0-d6，400MHz)表明S:1.5-1.8[(CH2)2，4H)]，2.2(NCHCH2，2H)，3.5-4.2(NCH，CH2N，3H)，4.67(NCH2NCH2SCS，8H)，7.78(NNHC0，2H)，7.82(Py-CHCH，4H)，8.81Py-CHCH，4H)。結(jié)構(gòu)確證，元素分析值C(48.91%)H(4.72%)N(19.16%)與理論值C(48.98%)H(4.76%)N(19.19%)近。實(shí)施例10N，N'-[庚烷_(kāi)1，7-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物結(jié)構(gòu)圖如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>圖15N，N'-[庚烷_(kāi)1，7-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成。本品化學(xué)名稱為N，N'-[h印tane-l，7-diylbis(6-thioxo-1，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C23H28N8S402，簡(jiǎn)稱H'TTD。分子量為604。具體合成步驟如下將3.25g(25mmol)l，7-庚二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35。C條件下加熱溶解，加入7mL(20%，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmo1)二硫化碳，35"反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率35%。結(jié)構(gòu)確證，^NMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:1.4-2.7[(CH2)5，8H)]，3.6-4.3(NCH2，CH2N，4H)，4.65(NCH2NCH2SCS，8H)，7.66(NNHC0，2H)，7.83(Py-CHCH，4H)，8.74Py-CHCH，4H)。元素分析值C(49.61%)H(5.28%)N(18.48%)與理論值C(49.67%)H(5.30%)N(18.54%)接近。實(shí)施例11N，N'-[辛烷_(kāi)1，8-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺的合成，化合物結(jié)構(gòu)圖如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>圖16N，N'-[辛烷_(kāi)1，8-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺本品化學(xué)名稱為N，N'_[octane_l，7_diylbis(6_thioxo_l，3，5-thiadiazinane-5，3-diyl)]diisonicotinamide，分子式為C23H28N8S402，簡(jiǎn)稱0TTD。分子量為618。具體合成步驟如下將3.68g(25mmo1)正辛二胺置燒瓶中，加入甲苯75mL，35°C條件下加熱溶解，加入7mL(20X，25mmol)K0H溶液攪拌約2分鐘，再滴入12mL(200mmol)二硫化碳，35°C反應(yīng)8小時(shí)后，冷至室溫，加入13.6mL(150mmo1)甲醛，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將6.86g(50mmo1)異煙肼用12.5mLpH7.8磷酸鹽緩沖溶液和25mL無(wú)水乙醇溶解，滴入上述反應(yīng)液中，反應(yīng)8小時(shí)。反應(yīng)液用甲苯萃取三次，合并萃取液，4(TC減壓蒸除甲苯，得到淡黃色粗品，氯仿/甲醇(1:1)重結(jié)晶得到白色固體粉末，產(chǎn)率35%。結(jié)構(gòu)確i正，'HNMR(DMS0-d6，400MHZ)表明S:1.4-2.5[(CH2)6，8H)]，3.4-4.1(NCH2，CH2N，4H)，4.55(NCH2NCH2SCS，8H)，7.58(NNHC0，2H)，7.78(Py-CHCH，4H)，8.84Py-CHCH，4H)。元素分析值C(50.41%)H(5.48%)N(18.13%)與理論值C(50.48%)H(5.50%)N(18.12%)接近。實(shí)施例12異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物油水分配系數(shù)的測(cè)定。異煙肼為水溶性較強(qiáng)的抗結(jié)核藥物，將其制備成本專利所述的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物后，其脂溶性提高。藥物在體內(nèi)的溶解、吸收、分布、轉(zhuǎn)運(yùn)與藥物的水溶性和脂溶性有關(guān)，即和油水分配系數(shù)有關(guān)。測(cè)定異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物的油水分配系數(shù)，可以了解本發(fā)明合成的新型異煙肼噻二嗪硫酮衍生物的脂溶性及在體內(nèi)的滲透性。油水分配系數(shù)的測(cè)定方法采用搖瓶法測(cè)定正辛醇/水系統(tǒng)中的油/水分配系數(shù)，取等體積的正辛醇和蒸餾水室溫下充分混合24h，使其相互飽和，靜置分層待用。稱取實(shí)施例111中合成的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物各2mg分別溶解于水飽和的正辛醇和正辛醇飽和的水各10mL中，再各自加入相同體積的另外一相溶劑，室溫(25°C)磁力攪拌24h，使溶質(zhì)在兩相中充分分配，靜置分層。分別取正辛醇層和水層適量，用甲醇稀釋待測(cè)。精確稱取實(shí)施例111中合成的噻二嗪硫酮化衍生物溶解在相互飽和的正辛醇和水中的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇稀釋至與對(duì)應(yīng)待測(cè)樣品相同的倍數(shù)，紫外分光光度法，以甲醇稀釋對(duì)應(yīng)倍數(shù)的空白溶劑作參比，20(T400nm掃描，記錄(最大吸收值)Amax采用標(biāo)準(zhǔn)溶液?jiǎn)吸c(diǎn)對(duì)照法定量，計(jì)算實(shí)施例111中合成的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物分別在兩相中的濃度(Co，Cw)，按以下公式進(jìn)行計(jì)算P=(C0/Cw)式中P為油/水分配系數(shù)；C。為分配平衡后油相中的藥物濃度；CW為分配平衡后水相中的藥物濃度。按照上述測(cè)定油水分配系數(shù)的方法，對(duì)異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物的油/水分配系數(shù)進(jìn)行測(cè)定。本專利中撰寫(xiě)的油水分配系數(shù)測(cè)定方法為常規(guī)測(cè)定油水分配系數(shù)的方法。通常油水分配系數(shù)越大，脂溶性越強(qiáng)，藥物膜透過(guò)性越好。表1實(shí)施例111中異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物油水分配系數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>結(jié)果表明，新合成的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物的脂溶性都得到了一定成度的提高，可知其在體內(nèi)的細(xì)胞滲透性也能得到改善。實(shí)施例13異煙肼體外水解試驗(yàn)。異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物是一種脂質(zhì)前體藥物，在體內(nèi)容易降解釋放異煙肼，發(fā)揮療效。通過(guò)測(cè)定這些衍生物在不同pH條件的水解特性，判斷其體內(nèi)降解特性。異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物體外水解試驗(yàn)方法分別精密稱取5份施例11中制備的化合物OTTD(N，N'-[辛烷_(kāi)1，8-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺)618mg，將5份化合分別加入體積為25ML的不同pH的水溶液中(0.lmolL—1鹽酸溶液、pH2.0、5.4、6.8、7.4的磷酸鹽緩沖溶液)，37。C條件下孵化24小時(shí)，分別在0、2、4、8、12、24小時(shí)測(cè)定孵化溶液中異煙肼的含量。化合物OTTD在不同pH值水溶液中完全水解，孵化溶液中異煙肼理論含量為10.96mg/ML。異煙肼含量測(cè)定方法色譜條件色譜柱DiamonsilC18(2)5iim，250mmX4.6mm，不銹鋼填充柱；流動(dòng)相甲醇_水(20:80);檢測(cè)波長(zhǎng)為263nm;流速lmL/min。異煙肼標(biāo)準(zhǔn)品制備精密稱取25mg異煙肼，置25mL棕色容量瓶中，加入色譜甲醇定溶，得lmg/mL的異煙肼儲(chǔ)備液。樣品溶液的制備精密量取孵化溶液IML，離心，取上清液，O.45iim濾膜過(guò)濾，即得。將上述異煙肼標(biāo)準(zhǔn)液及樣品溶液注入高效液相色譜儀，采用外標(biāo)法測(cè)定含量。表2不同時(shí)間下孵化溶液中異煙肼的含量(mg/ML)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>上述結(jié)果表明，異煙肼噻二嗪硫酮化衍生在體內(nèi)容易水解，釋放異煙肼。實(shí)施例14異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物N，N'-[辛烷-l，8-雙基(6-硫代-l，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(0TTD)脂質(zhì)體的制備。取N，N'[辛烷-l，8-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(15mg)、大豆磷脂(0.lg)置于250ML燒瓶中，用20ML二氯甲烷溶解，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到一層有機(jī)脂溶性膜，加入10MLpH7.4的磷酸鹽緩沖溶液，振蕩，大部分膜脫落，在5(TC條件下超聲，直至得到均勻混懸液。即得OTTD脂質(zhì)體。實(shí)施例15N，N'-[庚烷_(kāi)1，7-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(H'TTD)類脂質(zhì)體的制備。取N，N'-[庚烷_(kāi)1，7-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰(15mg)、司盤(pán)60(0.lg)置250ML燒瓶中，用20ML二氯甲烷溶解，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到一層有機(jī)脂溶性膜，加入pH7.4的磷酸緩沖溶液IOML，振蕩，大部分膜脫落，在5(TC條件下超聲，直至得到H'TTD類脂質(zhì)體均勻混懸液，粒度分析，平均粒徑為250nm。實(shí)施例16N，N'_[1，4-環(huán)己烷-1，4-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(CHTTD)固體脂質(zhì)納米粒的制備。取N，N'_[1，4-環(huán)己烷-1，4-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(150mg)、單硬脂酸甘油酯(0.8g)、吐溫80(0.025g)于燒杯中加熱至80°C，逐漸加入IOML含十二烷基磺酸鈉(15mg)的熱水中(8(TC)。保持溫度不變，當(dāng)上述溶液呈透明狀，再將其用注射器注入到高速攪拌的ot:水中，溶液呈透明狀。電鏡顯示，固體脂質(zhì)納米粒的平均粒徑為350nm。該CHTTD固體脂質(zhì)納米?；鞈乙嚎墒覝胤胖?5天未見(jiàn)沉淀析出。該固體脂質(zhì)納米?；鞈乙杭尤脒m當(dāng)保護(hù)劑后凍干可成為固體粉末，臨用前加入水，振搖即成CHTTD固體脂質(zhì)納米?；鞈乙?。實(shí)施例17N，N'-[己烷-l，6-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(HTTD)微乳的制備。取N，N'_[己烷-l，6-雙基(6-硫代-1，3，5-噻二嗪-5，3-二基)]雙異煙酰胺(50mg)溶于5ML乙醇中，并與3ML丙二醇、0.5g三甘油癸酸酯、0.8g聚氧乙烯氫化蓖麻油混合，然后在攪拌下滴入5ML水中，形成透明溶液，即為HTTD微乳。2權(quán)利要求異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，其特征在于結(jié)構(gòu)通過(guò)INH-THTT-R-THTT-INH來(lái)描述，INH代表抗結(jié)核藥物異煙肼的結(jié)構(gòu)；THTT是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)；R是含有兩個(gè)伯胺的直鏈或非直鏈或環(huán)狀烴基化合物，其生產(chǎn)過(guò)程和通式如下F2010100280644C00011.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，其特征在于烴基化合物與兩個(gè)伯胺直接相連接的碳原子周?chē)缓娮咏Y(jié)構(gòu)，雙伯胺選自1，3-丁二胺、1，4-戊二胺、1，5-戊二胺、己二胺、1，3-環(huán)己二胺、1，4-環(huán)己二胺、反式-1，4-環(huán)己二胺、甲基環(huán)戊二胺、1，7-庚二胺、l，8辛二胺及上述含有雙伯胺的化合物的同分異構(gòu)體，乙二胺，正丁二胺中的任意一種。3.根據(jù)權(quán)利要求12所述的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，其特征在于通過(guò)下述三步反應(yīng)得到第一步反應(yīng)含有兩個(gè)伯胺的烴基化合物與二硫化碳、20%氫氧化鉀溶液反應(yīng)，反應(yīng)中各物質(zhì)的投料量按照摩爾量來(lái)進(jìn)行計(jì)算，二硫化碳?xì)溲趸涬p伯胺烴基化合物(NH2-L-NH2)摩爾比為(412):1:1，或者比例為(610):1:l;反應(yīng)溫度為258(TC，或者305(TC，反應(yīng)時(shí)間為612h，或者810h;第二步反應(yīng)第一步反應(yīng)溶液冷卻至室溫后，加入福爾馬林溶液(含甲醛3540%水溶液)，加入量是雙伯胺烴基化合物投入摩爾量的412倍，或者位58倍，反應(yīng)持續(xù)16小時(shí)，或者2-4小時(shí)；第三步反應(yīng)此步反應(yīng)為環(huán)化過(guò)程，異煙肼分子中的伯胺比較活潑，參與環(huán)化反應(yīng)，投入量是雙伯胺烴基化合物投入摩爾量的2-6倍，或者24倍，量取一定量的pH7.8磷酸緩沖液-無(wú)水乙醇(l:2，V/V)混合溶液，將規(guī)定量的異煙肼溶于上述混合溶液內(nèi)，逐滴加入第二步反應(yīng)液中，室溫?cái)嚢?18小時(shí)，或者812小時(shí)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，其特征在于化合物的分子量范圍5061000g/moL，或者534618g/moL;化合物的油水分配系數(shù)(LgP)范圍為0.015，或者范圍為O.12.0。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，其特征在于制備成脂質(zhì)體或固體脂質(zhì)納米?；蝾愔|(zhì)體或微乳高度分散的制劑，這種高度分散的制劑形成的混懸液，粒徑小于1000nm，或者粒徑或是200700nm，或者徑是200400nm。全文摘要本發(fā)明為一種異煙肼噻二嗪硫酮化衍生物，解決已有衍生物中活性成份脂溶性差，不能溶解于水中或不能高度分散的問(wèn)題。結(jié)構(gòu)可以通過(guò)INH-THTT-R-THTT-INH來(lái)描述，其中INH代表抗結(jié)核藥物異煙肼的結(jié)構(gòu)；THTT是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)；R是含有兩個(gè)伯胺的直鏈、非直鏈或環(huán)狀烴基化合物(包括不同取代基的烴基結(jié)構(gòu))。該衍生物可以制備成高度分散的藥物傳遞系統(tǒng)，包括脂質(zhì)體、固體脂質(zhì)納米粒、類脂質(zhì)體、微乳等劑型。這種衍生物不僅能提高異煙肼的脂溶性且能在體內(nèi)水解釋放異煙肼原藥，增加了異煙肼細(xì)胞滲透性，降低了異煙肼在治療中的耐藥性，提高療效。文檔編號(hào)A61K9/127GK101747331SQ20101002806公開(kāi)日2010年6月23日申請(qǐng)日期2010年1月11日優(yōu)先權(quán)日2010年1月11日發(fā)明者李薔薇,楊放,田生云,胡楊洋,陳書(shū)峰申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)總公司四川抗菌素工業(yè)研究所