專利名稱：防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物；本發(fā)明還涉及該中藥組 合物的制備方法。
背景技術(shù)：
冠心病是人類健康的主要?dú)⑹?，隨著全球化進(jìn)程的加速，心腦血管病已經(jīng)在發(fā)展 中國家開始蔓延，成為世界第一位的死亡原因。冠心病亦可稱為缺血性心臟病，可引起臨床 上心絞痛、心肌梗死等一系列嚴(yán)重的心肌缺血病癥。有大量的研究表明，心肌缺血與心肌細(xì) 胞ATP敏感鉀通道的開放有很大關(guān)系。中醫(yī)藥作為一種“自然療法”，在防治心肌缺血方面 有價(jià)格低廉、毒副作用少的優(yōu)勢。中國專利CN1015M354A于2009年09月09日公開了化合物(I)的治療用途，化 合物(I)對心血管疾病具有治療作用，特別是化合物I對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù) 作用。中國專利CN101375857A于2009年03月04日公開了紅豆杉多糖在制備預(yù)防和 控制心肌缺血再灌注損傷藥物中的應(yīng)用，藥物為任何藥學(xué)上認(rèn)可的制劑，制劑中紅豆杉多 糖的重量百分含量為不低于60% ；紅豆杉多糖能提高心肌缺血再灌注后的LV-DP/DXMAX 和SOD能力，改善心肌順應(yīng)性，顯著降低心肌缺血再灌注后的血清LDH、血清CTNT和MDA 水平，減少心肌損傷；其能顯著抑制和降低心肌缺血再灌注后的FAS MRNA及其蛋白表達(dá)、 MCP-IMRNA及其蛋白表達(dá)和NCF-47K MRNA及其蛋白表達(dá)，從而抑制心肌缺血再灌注后的心 肌細(xì)胞凋亡，因此紅豆杉多糖具有預(yù)防和控制心肌缺血再灌注損傷的功能，為紅豆杉多糖 拓展了新的臨床應(yīng)用領(lǐng)城。目前中醫(yī)藥對于心肌缺血的防治多集中于中藥單體的研究，少有復(fù)方研究，尚沒 有對缺血心肌細(xì)胞ATP敏感K通道各主要亞型基因及蛋白有影響的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題之一在于為心肌缺血及心肌缺血再灌注損傷患者提 供能夠防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題之二在于提出該中藥組合物的制備方法。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物， 是由下述重量份的原料藥制備而成的藥劑黃芪15-30份、益母草12-30份、薤白6-15份、 山楂12-30份、全栝樓20-45份、丹參9-18份、制半夏9-18份、葛根9-18份。優(yōu)選地，本發(fā)明上述中藥組合物的重量份分別為黃芪30、益母草15、薤白12、山 楂30、全栝樓30、丹參15、制半夏12、葛根15。優(yōu)選地，本發(fā)明上述藥劑為合劑。優(yōu)選地，本發(fā)明上述藥劑為顆粒劑。本發(fā)明上述中藥組合物合劑的制備方法如下按比例稱取原料藥7天量，分別加水10倍量和8倍量，煎煮兩次，合并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；濃縮液加3 倍量乙醇，含醇量為60%，冷藏靜置M小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味；回收液煮沸，加 苯甲酸鈉3克、尼泊金乙脂0. 25克，濾過放冷，加水至500ml，趁熱灌裝即得。此外，本發(fā)明上述中藥組合物合劑還可采用如下制備方法按比例稱取薤白7天 量，粉碎至10-40目，采用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提取揮發(fā)油備用；按比例稱取丹參 7天量，用75%乙醇，回流法提取，提取液回收乙醇備用；薤白和丹參的殘?jiān)c按比例稱取 的其余原料藥分別加水5-10倍量，煎煮兩到三次，合并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克 生藥；采用絮凝沉淀法，靜置M小時(shí)，離心濾過，離心速度為5000轉(zhuǎn)/分鐘，濾液加入薤白 揮發(fā)油及丹參乙醇提取物，混勻，加苯甲酸鈉3克、尼泊金乙脂0. 25克，濾過放冷，加水至 500ml，趁熱灌裝即得。本發(fā)明上述中藥組合物顆粒劑的制備方法如下按比例稱取原料藥7天量，分別 加水10倍量和8倍量，煎煮兩次，合并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；濃縮液加 3倍量乙醇，含醇量為60%，冷藏靜置M小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，回收液濃縮至 相對密度為1. 25-1. 30，加入糊精或淀粉適量，濕法制粒，干燥，制成顆粒500克，分裝即得。此外，本發(fā)明上述中藥組合物顆粒劑還可采用如下制備方法按比例稱取薤白7 天量，粉碎至10-40目，采用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提取揮發(fā)油備用；按比例稱取丹 參7天量，用75%乙醇，回流法提取，提取液回收乙醇備用；薤白和丹參的殘?jiān)c按比例稱 取的其余原料藥分別加水5-10倍量，煎煮兩到三次，合并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5 克生藥；采用殼聚湯絮凝沉淀法，靜置M小時(shí)，離心濾過，加入丹參乙醇提取物，混勻，混合 液濃縮至相對密度為1.25-1. 30，加入糊精或淀粉適量、薤白揮發(fā)油β環(huán)糊精包合物，濕法 制?；蛞徊街屏７ㄖ屏?，低溫或真空干燥，制成顆粒500克，分裝即得。本發(fā)明中藥組合物以健脾益氣、活血化瘀、祛痰降濁為治則，由黃芪、薤白、栝樓 子、栝樓皮、益母草、丹參、制半夏、葛根、山楂為藥物組成。這一組藥物中，黃芪健脾益氣，薤 白、栝樓、制半夏、山楂祛痰降濁，益母草、丹參活血化瘀，全方補(bǔ)虛祛邪、活血化瘀共同發(fā)揮 療效?，F(xiàn)代藥理研究，栝樓、丹參酮、益母草堿、葛根素具有擴(kuò)冠、增加冠脈血流量，改善心肌 缺血的作用；黃芪多糖可對抗急性心肌缺血及心律失常。本發(fā)明中藥組合物經(jīng)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及體外試驗(yàn)都證明其體內(nèi)、體外均具有明顯的抗心 肌缺血的作用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖
和具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。這些實(shí)施例應(yīng)理解為僅用于說 明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。在閱讀了本發(fā)明記載的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù) 人員可以對本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等效變化和修飾同樣落入本發(fā)明權(quán)利要求所限 定的范圍。本發(fā)明以下實(shí)施例所用黃芪確定產(chǎn)地為內(nèi)蒙古，為豆科多年生草本植物蒙古黃芪 Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao 的根；本發(fā)明以下實(shí)施例所用薤白確定產(chǎn)地江蘇，為百合科多年生草本植物小根蒜 Alliummacrostemon Bge.禾口薤 A. chinense G. Don 的地下鱗蓬。本發(fā)明以下實(shí)施例所用益母草確定產(chǎn)地江蘇，為唇形科一年生或二年生草本植物益母草 Leonurus heterophyllus Sweet 的地上部分。本發(fā)明以下實(shí)施例所用丹參確定產(chǎn)地江蘇，為唇形科多年生草本植物丹參 Salviamiltiorrhiza Bge.的根及根蓬。本發(fā)明以下實(shí)施例所用山楂確定產(chǎn)地江蘇，為薔薇科落葉灌木或小喬木植物山里 紅 Crataegus pinnatifida Bge. var. major Ν· Ε· Br·、山楂 C· pinnatifida Bge.或野山楂 C. cuneata Sieb. et Zucc.的成熟果實(shí)。本發(fā)明以下實(shí)施例所用制半夏確定產(chǎn)地安徽，為天南星科多年生草本植物半夏 Pinellia ternate (Thunb.)Breit.的塊莖，用姜汁制過入藥。本發(fā)明以下實(shí)施例所用葛根確定產(chǎn)地江蘇，為豆科多年生落葉藤本植物野葛 Puerarialobata(ffilid. )0hwi 5 " ^ Pueraria thomsonii Benth.的 。本發(fā)明以下實(shí)施例所用全栝樓確定產(chǎn)地河北，為葫蘆科多年生草質(zhì)藤本植物栝樓 Trichosanthes kirilowii Maxim.禾口雙邊栝樓 Τ· rosthornii Harms 的成熟果實(shí)。實(shí)施例1 (制備合劑)按比例稱取上述藥材7天量分別加水10倍量和8倍量，煎煮兩次，合并濾液，濾液 濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；濃縮液加3倍量乙醇，含醇量達(dá)到60%左右，冷藏靜置M小 時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味；回收液煮沸，加苯甲酸鈉3克，尼泊金乙脂0. 25克(已溶 于水中)，濾過放冷，加水至500ml，趁熱灌裝即得。實(shí)施例2 (制備合劑)按比例稱取薤白7天量，粉碎至10-40目，采用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提 取揮發(fā)油備用；另按比例稱取丹參7天量用75%乙醇，回流法提取，提取液回收乙醇備用； 薤白和丹參的殘?jiān)c按比例稱取的其余原料藥分別加水5-10倍量，煎煮兩到三次，合并濾 液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；采用絮凝沉淀法，靜置M小時(shí)，離心濾過離心速度 為5000轉(zhuǎn)/分鐘，濾液加入薤白揮發(fā)油及丹參乙醇提取物，混勻，加苯甲酸鈉3克，尼泊金 乙脂0. 25克(已溶于水中)，濾過放冷，加水至500ml，趁熱灌裝即得。實(shí)施例3 (制備顆粒劑)按比例稱取原料藥7天量分別加水10倍量和8倍量，煎煮兩次，合并濾液，濾液濃 縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；濃縮液加3倍量乙醇，含醇量達(dá)到60%左右，冷藏靜置M小 時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，回收液濃縮至相對密度為1. 25-1. 30 (室溫)，加入糊精 或淀粉適量，濕法制粒，干燥，制成顆粒500克，分裝即得。實(shí)施例4 (制備顆粒劑)按比例稱取薤白7天量，粉碎至10-40目，采用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提 取揮發(fā)油備用；另按比例稱取丹參7天量用75%乙醇，回流法提取，提取液回收乙醇備用； 薤白和丹參的殘?jiān)c按比例稱取的其余原料藥分別加水5-10倍量，煎煮兩到三次，合并濾 液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；采用殼聚湯絮凝沉淀法，靜置M小時(shí)，離心濾過，加 入丹參乙醇提取物，混勻，混合液濃縮至相對密度為1. 25-1. 30 (室溫)，加入糊精或淀粉適 量，薤白揮發(fā)油β環(huán)糊精包合物，濕法制?；蛞徊街屏７ㄖ屏?，低溫或真空干燥，制成顆粒 500克，分裝即得。下面通過試驗(yàn)例進(jìn)一步說明本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗(yàn)使用本發(fā)明上 述實(shí)施例1-4制備獲得的中藥組合物合劑或顆粒劑(以下稱冠心康)進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)儀器超級恒溫槽(上海衡平儀器廠)，PH精密數(shù)顯酸度計(jì)(上海天達(dá)儀器廠)；壓力 換能器(復(fù)旦大學(xué)電子工程系)；Langendorff灌流裝置(保定蘭格恒流泵有限公司)；倒 置顯微鏡(德國Iaica公司)；微操縱器(美國BURLEIGH公司)；PM8000加藥系統(tǒng)(美國 MDI公司)；HSS-I型數(shù)字式超級恒溫浴槽、SffF-Iff型微電極放大器和R1C406B/C信號采集 處理系統(tǒng)(成都儀器廠)；PF5-1型微操縱儀步進(jìn)馬達(dá)(日本成茂科學(xué)器械研究所)；膜片 鉗放大器AX0N200B、Pclamp6數(shù)據(jù)采集軟件(美國AXON公司)；垂直拉制儀pp-830 (日本 Narishige 公司)。細(xì)胞外參考電極尖端裸露、乏極化銀絲；記錄電極標(biāo)準(zhǔn)玻璃微電極，由玻璃毛 細(xì)管(直徑1. 5mm，有芯，型號GG-17，中科院上海生理所)經(jīng)微電極拉制儀(NARISHIGE， PE-21，JAPAN)兩步拉制而成。紫外分光光度計(jì)(UNIC日本)，高速冷凍離心機(jī)(Thermo德國)，電子天平 (FA2004B型)(上海精密儀器有限公司)，電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)(寧波新芝生物科技股份有限公 司)，電熱恒溫水浴箱(上海醫(yī)療器械七廠)，酶標(biāo)儀(Wellscan Mk2)，內(nèi)切式勻漿器(浙西 機(jī)械廠)，PCR基因擴(kuò)增儀(美國Perkin Elmer公司)，SANYO超聲細(xì)胞破碎儀(日本三洋)， BioRad蛋白電泳系統(tǒng)(電泳儀、電泳槽)，BioRad半干式電轉(zhuǎn)移裝置，BioRad, TAN0N-2008 凝膠成像系統(tǒng)。2.實(shí)驗(yàn)試劑II型膠原酶(collagenase type II)為Worthington公司制品；格列苯脲、吡那 地爾、MgATP均為Sigma公司制品，格列苯脲、吡那地爾先溶解于二甲亞砜(DMSO)分別配 制成母液10mmol/L和50mmol/L，冷藏保存；牛血清白蛋白(bovine serum album, BAS)為 AMRESC0公司制品；HEPES、?；撬?taurine)等為國產(chǎn)分析純?？捡R斯亮蘭蛋白測定試劑盒、Ca2+-Mg2+-ATP酶測定試劑盒、Na+-K+-ATP酶測定試劑 盒、超氧化物歧化酶(SOD)測試盒、乳酸脫氫酶(LDH)測定試劑盒均由南京建成生物工程研 究所提供。一抗Kir6. 1、Kir6. 2、SUR2A、SUR2B、β -actin兔抗鼠抗體均購自武漢博士德生 物公司，1 200稀釋；二抗HRP標(biāo)記羊抗兔IgG，ROCKLAND公司生產(chǎn)，1 2000稀釋。DEPC、dNTP、隨機(jī)引物、M-MlvQOOU/ul)、RNAsinQOU/ul)、iTaq 酶(5u/ul)購自上 海英駿生物技術(shù)有限公司；DNA marker (each IOObp)上海生工生物技術(shù)有限公司；Trizol Reagent, GIBC0, BRL Life Technologies, USA ；引物由上海英駿生物技術(shù)有限公司(invitrogen)合成。引物設(shè)計(jì)采用primer premier3軟件Kir 6. 1 上游5' -GAGTGAACTGTCGCACCAGA-3 ；下游5' -CGATCACCAGAACTCAGCAA-3‘，擴(kuò)增長度 249bp。Kir6.2 上游5' -TCCAACAGCCCGCTCTAC-3‘；下游5' -GATGGGGACAAAACGCTG-3‘，擴(kuò)增長度 167bp。
SUR2A 上游5' -GGAGCAATCCAGACCAAGAT-3 ‘；下游5 ‘ -AGCCAGCAGAATGATGACAG-3 ‘，擴(kuò)增長度 250bp。SUR2B 上游5' -ACCTGCTCCAGCACAAGAAT-3‘；下游5' -TCTCTTCATCACAATGACCAGG-3‘，擴(kuò)增長 144bp。3-[3-(膽酰胺基丙基)二甲氨基]丙磺酸鹽{3-[(3-Ch0lamid0pr0pyl) dimethyl-ammonio] propanesulfonic acid, CHAPS}, ■^硫蘇糖酉享(DL-dithiothreitol, DTT)，三丁基膦(tributyl phosphine，TBP)，尿素，硫脲，碘乙酰胺(iodoacetamide，IAA)， 丙烯酰胺(acrylamide)、甲雙丙烯酰胺(N，N' -methylenebi sacrylamide)，四甲基乙二 胺(N, N, N, N-tetramethyl-ethylenediamine, TEMED),過硫酉先胺(ammonium persulfate, APS)，三羥甲基氨基甲烷(tris)、甘氨酸(glycine)、十二烷基磺酸鈉(sodium dodecyl sulfate, SDS)均購自Bio-Rad公司。瓊脂糖購自華美生物公司。其他試劑均使用國產(chǎn)分 析純試劑。所有溶液均用MilliQ水配制。硝酸纖維素膜產(chǎn)自Millipore公司。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 豚鼠32只，雄性，清潔級，體重Q20士 10) g，購于上海寶牧實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖廠，動(dòng)物 合格證號SCXK(滬)2003-0007號。飼養(yǎng)在上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，室內(nèi)溫度20°C 左右，單籠飼養(yǎng)，豚鼠飼料及自來水由動(dòng)物自行取食或飲用。雄性SD大鼠，200 300g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供 (SCXK(滬)2007-0005)。飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，SPF級，預(yù)適 應(yīng)飼養(yǎng)1周，飼養(yǎng)環(huán)境溫度23 °C -25°C，濕度40% -60%，晝夜明暗交替，自由飲水飲食。4.實(shí)驗(yàn)用藥實(shí)施例1-4制備獲得的中藥組合物合劑或顆粒劑。實(shí)驗(yàn)“冠心康對豚鼠缺血再灌注心室乳頭肌電生理特性的影響”采用預(yù)先灌胃給 予冠心康水煎液24g生藥/kg體重/d方法，給藥體積為lml/100g體重，每天一次，連續(xù)14 天。其余部分實(shí)驗(yàn)由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院藥劑科以生藥lg/ml制為注射劑。吡那地爾(pinacidil)和格列苯脲(gl ibenclamide)為Sigma公司產(chǎn)品，先溶解 于二甲亞砜(DMSO)配制成母液(lOmmoll/L)，冷藏保存。5.溶液配制(1)無鈣臺(tái)式液(mmol/L) :NaCl 137. 0、KC15. 0、MgSO4L 2、NaH2PO4O. 5、 GlucoselO. 0、HEPES 10. 0 (用 NaOH 調(diào) pH 至 7. ；35 7. 4)。(2)臺(tái)式液(mmol/L) :NaCl 137. 0、CaCl2L 8、KC15. 0、MgSO4L 2、Na&P040. 5、 Glucose 10. 0、HEPES 10. 0 (用 NaOH 調(diào) pH 至 7. ；35 7. 4)。(3) KB 液(mmol/L) :Κ0Η70· 0、KC140. 0、ΚΗ2Ρ0420· 0、L-谷氨酸 50. 0、MgCl23. 0、牛 磺酸 20. 0、EGTA0. 5、HEPES10. 0、GlucoselO. 0 (用 KOH 調(diào) pH 至 7. 35 7. 4)。(4)記錄 Katp 通道電流的細(xì)胞外液(mmol/L) :NaCl 137. 0、CaCl2L 2、KC15. 0、 MgSO4L 2、NaH2PO4O. 5、GlucoselO. 0、HEPES10. 0 (用 NaOH 調(diào) pH 至 7. 35 7. 4)。(5)記錄 Katp 通道電流的細(xì)胞內(nèi)液(mmol/L) :NaCl 10. 0、CaCl2L 0、KCl 125. 0、 MgATPl. 0、HEPES 10. 0、EGTA14. 0 (用 KOH 調(diào) pH 至 7. 1)。(6)模擬缺血缺氧液成分(mmol/L)(冠心康對豚鼠缺血再灌注心室乳頭肌電生理特性的影響實(shí)驗(yàn)):NaC1137. 0，KC15. 4，CaCl2L 8，MgCl2L 0，NaHC033. 8，NaH2PO4O. 9，乳酸鈉 20. 0,95% N2 和 5% CO2 飽禾口，pH 6. 7。試驗(yàn)例1.冠心康對缺血缺氧期豚鼠心室乳頭肌細(xì)胞跨膜電位的影響。1.實(shí)驗(yàn)分組及造模模型組正常臺(tái)氏液平衡灌流30min后，模擬缺血缺氧臺(tái)氏液灌流15min，然后用 正常臺(tái)氏液復(fù)灌30min ；格列苯脲組正常臺(tái)氏液平衡灌流25min后，先用含有格列苯脲(ΙΟΟμπιοΙ/L) 的臺(tái)氏灌流液預(yù)處理5min，然后模擬缺血缺氧臺(tái)氏液灌流15min，最后用正常臺(tái)氏液復(fù)灌 30min ；吡那地爾組正常臺(tái)氏液平衡灌流25min后，先用含有吡那地爾(ΙΟΟμπιοΙ/L) 的臺(tái)氏灌流液預(yù)處理5min，然后模擬缺血缺氧臺(tái)氏液灌流15min，最后用正常臺(tái)氏液復(fù)灌 30min ；冠心康組冠心康預(yù)先給藥心肌組織正常臺(tái)氏液灌流30min后，模擬缺血缺氧臺(tái) 氏液灌流15min，然后用正常臺(tái)氏液復(fù)灌30min。2.心室乳頭肌標(biāo)本的制備和刺激、記錄裝置豚鼠擊昏后，迅速取出心臟，移入含Tyrode液的培養(yǎng)皿中，剪開右心室，取出乳頭 肌并置于肌槽內(nèi)，用95% 02+5% C02混合氣體飽和的臺(tái)氏液(37°C)恒溫恒速灌流，實(shí)驗(yàn)中 灌注液高于心肌組織3-5ml以上，以保持溫度恒定灌流，灌流速度為5ml/min。刺激電極為 雙極銀絲電極，二極間距< 0. 5mm,三通道電刺激器細(xì)胞外刺激。為減少刺激偽跡，經(jīng)刺激隔 離器輸出電流，刺激波寬1ms，強(qiáng)度為閾值的2倍，刺激頻率為60次/min。記錄電極為充以 3M KCl的玻璃微電極，電極電阻10 30MQ。在連續(xù)變倍體視顯微鏡下用微操縱儀將電極 推進(jìn)至心肌細(xì)胞表面，再改用步進(jìn)式微電極推進(jìn)器穿刺細(xì)胞。生物電信號經(jīng)微電極放大器 放大后，輸入至計(jì)算機(jī)信號采集分析系統(tǒng)來記錄和處理心肌細(xì)胞跨膜動(dòng)作電位。3.數(shù)據(jù)采集心肌組織在正常Tyrode液中平衡Ih后，開始用刺激器產(chǎn)生方波進(jìn)行刺激，刺激強(qiáng) 度為2倍閾值，波寬1ms，刺激頻率為1Hz，待乳頭肌收縮幅度減小、動(dòng)作電位波形穩(wěn)定后開 始記錄動(dòng)作電位。分別記錄平衡30min、缺血缺氧5、10、15min及再灌注1、5、10、20、30min
(resting potential, RP) ^Μ (action potential amplitude, ΑΡΑ) > 20%動(dòng)作電位時(shí)程(action potential duration at 20% !^polarization，APD20) >50%
Efe^WfM (action potential duration at 50% repolarization, APD50) 電 1 立時(shí)禾呈(action potential duration at 90% repolarization，APD90)。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1.冠心康對缺血缺氧期豚鼠心室乳頭肌細(xì)胞動(dòng)作電位的影響
權(quán)利要求
1.一種防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物，其特征是，該組合物是由下述重量份 的原料藥制備而成的藥劑黃芪15-30份、益母草12-30份、薤白6-15份、山楂12-30份、全 栝樓20-45份、丹參9-18份、制半夏9-18份、葛根9_18份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物，其特征是，各原料 藥的重量份分別為黃芪30、益母草15、薤白12、山楂30、全栝樓30、丹參15、制半夏12、葛 根15。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物，其特征是，所述 藥劑為合劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物，其特征是，所述 藥劑為顆粒劑。
5.權(quán)利要求3所述中藥組合物合劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟按比例稱取 原料藥7天量，分別加水10倍量和8倍量，煎煮兩次，合并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于 5克生藥；濃縮液加3倍量乙醇，含醇量為60%，冷藏靜置M小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無 醇味；回收液煮沸，加苯甲酸鈉3克、尼泊金乙脂0. 25克，濾過放冷，加水至500ml，趁熱灌 裝即得。
6.權(quán)利要求3所述中藥組合物合劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟按比例稱取薤白7天量，粉碎至10-40目，采用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提取揮發(fā) 油備用；按比例稱取丹參7天量，用75%乙醇，回流法提取，提取液回收乙醇備用；薤白和丹參的殘?jiān)c按比例稱取的其余原料藥分別加水5-10倍量，煎煮兩到三次，合 并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；采用絮凝沉淀法，靜置M小時(shí)，離心濾過，離心速度為5000轉(zhuǎn)/分鐘，濾液加入薤白 揮發(fā)油及丹參乙醇提取物，混勻，加苯甲酸鈉3克、尼泊金乙脂0. 25克，濾過放冷，加水至 500ml，趁熱灌裝即得。
7.權(quán)利要求4所述中藥組合物顆粒劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟按比例稱 取原料藥7天量，分別加水10倍量和8倍量，煎煮兩次，合并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng) 于5克生藥；濃縮液加3倍量乙醇，含醇量為60%，冷藏靜置M小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇 至無醇味，回收液濃縮至相對密度為1. 25-1. 30，加入糊精或淀粉適量，濕法制粒，干燥，制 成顆粒500克，分裝即得。
8.權(quán)利要求4所述中藥組合物顆粒劑的制備方法，其特征是，包括如下步驟按比例稱取薤白7天量，粉碎至10-40目，采用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提取揮發(fā) 油備用；按比例稱取丹參7天量，用75%乙醇，回流法提取，提取液回收乙醇備用；薤白和丹參的殘?jiān)c按比例稱取的其余原料藥分別加水5-10倍量，煎煮兩到三次，合 并濾液，濾液濃縮至每毫升相當(dāng)于5克生藥；采用殼聚湯絮凝沉淀法，靜置M小時(shí)，離心濾過，加入丹參乙醇提取物，混勻，混合液 濃縮至相對密度為1.25-1. 30，加入糊精或淀粉適量、薤白揮發(fā)油β環(huán)糊精包合物，濕法制 粒或一步制粒法制粒，低溫或真空干燥，制成顆粒500克，分裝即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種防治心肌缺血再灌注損傷的中藥組合物。該中藥組合物是由下述重量份的原料藥制備而成的藥劑黃芪15-30份、益母草12-30份、薤白6-15份、山楂12-30份、全栝樓20-45份、丹參9-18份、制半夏9-18份、葛根9-18份。另外，本發(fā)明還涉及該中藥組合物的制備方法。
文檔編號A61P9/10GK102114170SQ201010027208
公開日2011年7月6日 申請日期2010年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月5日
發(fā)明者劉萍, 史秀峰, 張娜, 章怡祎, 蔡玨峰, 陳富榮, 韓向暉 申請人:上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院