專利名稱：被取代的苯基氨基噻唑類化合物以及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的苯基氨基噻唑衍生物、其制備方法、其用于治療和/或預防疾病的用途以及其在制備用于治療和/或預防疾病，優(yōu)選地用于治療和/或預防高血壓以及其它心血管疾病的藥物方面的用途。
背景技術(shù)：
在所有的細胞中都存在腺苷(一種嘌呤核苷)并且許多生理學和病理生理學刺激都可以使其釋放。腺苷在腺苷-5’-單磷酸鹽(AMP)和S-腺苷高半胱氨酸腺苷降解期間在細胞內(nèi)以中間體形式被形成，但是其可以從細胞中被釋放，在這種情況中其通過與特定的受體結(jié)合而發(fā)揮激素樣物質(zhì)或神經(jīng)遞質(zhì)的作用。
在含氧量正常的情況下，細胞外空間中游離腺苷的濃度很低。但是，在局部缺血或含氧量低的情況下，受影響器官中細胞外的腺苷濃度急劇增加。因此，已知例如腺苷抑制了血小板聚集并增加了冠狀動脈的供血量。此外，其對血壓、心率、神經(jīng)遞質(zhì)釋放和淋巴細胞分化也有影響。
腺苷這些作用的目標是增加受影響器官的供氧或降低這些器官的代謝，以使所述器官的代謝適應(yīng)局部缺血或含氧量低情況下器官的供血情況。
腺苷的作用是由特定的受體介導的。迄今為止，已知的亞型有A1、A2a、A2b和A3。根據(jù)本發(fā)明，“腺苷-受體-選擇性配體”是可以選擇性地與所說腺苷受體的一種或多種亞型結(jié)合，從而模擬腺苷的作用(腺苷激動劑)或阻斷腺苷的作用(腺苷拮抗劑)的物質(zhì)。
這些腺苷受體的作用在細胞內(nèi)是由信史cAMP介導的。在腺苷與A2a或A2b受體結(jié)合的情況中，細胞內(nèi)的cAMP通過膜結(jié)合的腺苷酸環(huán)化酶的活化而被增加，而腺苷與A1或A3受體結(jié)合通過抑制腺苷酸環(huán)化酶而降低了細胞內(nèi)cAMP的濃度。
在心血管系統(tǒng)的情況中，腺苷受體活化的主要后果為通過A1受體產(chǎn)生心動過緩、負性肌收縮力變化和保護心臟不受局部缺血的影響(“預調(diào)節(jié)”)、通過A2a和A2b受體產(chǎn)生血管擴張和通過A2b受體抑制了成纖維細胞和平滑肌細胞的增生。
在A1激動劑(優(yōu)選地通過Gi蛋白進行偶合)的情況中，觀察到細胞內(nèi)cAMP濃度降低(優(yōu)選地在用福斯高林對腺苷酸環(huán)化酶進行直接預刺激后觀察到)。相應(yīng)地，A2a和A2b激動劑(優(yōu)選地通過Gs蛋白進行偶合)使得細胞內(nèi)cAMP濃度增加，而A2a和A2b拮抗劑使得細胞內(nèi)cAMP濃度降低。在A2受體的情況中，用福斯高林對腺苷酸環(huán)化酶進行直接預刺激沒有產(chǎn)生任何益處。
腺苷或特異性A2b激動劑對A2b受體的活化通過擴張血管而使得血壓降低。血壓的降低伴有反射性心率增加?？梢酝ㄟ^用特異性A1激動劑活化A1受體來降低這種心率增加。
因此，選擇性A1/A2b激動劑對血管系統(tǒng)和心率的這種聯(lián)合作用在不產(chǎn)生相關(guān)的心率增加的情況下全面降低了血壓。具有該類藥理學性質(zhì)的雙重A1/A2b激動劑例如可用于治療人類的高血壓。
可以用所述物質(zhì)對細胞系的影響來測定上述受體選擇性，所述細胞系在用相應(yīng)cDNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后表達所討論的受體亞型(見出版物M.E.Olah，H.Ren，J.Ostrowski，K.A.Jacobson，G.L.Stiles，“獨特牛A1腺苷受體的克隆、表達、和特征化。用定位誘變對受體結(jié)合部位進行的研究(Cloning，expression，and characterization of the unique bovineA1 adenosine receptor.Studies on the ligand binding site by site-directed mutagenesis)”，J.Biol.Chem.267(1992)，第10764-10770頁，其公開內(nèi)容在這里被全部引入本文作為參考)。
可以通過對細胞內(nèi)信史cAMP進行生物化學測量來監(jiān)測所述物質(zhì)對該類細胞系的影響(見出版物K.N.Klotz，J.Hessling，J.Hegler，C.Owman，B.Kull，B.B.Fredholm，M.J.Lohse，“人腺苷受體亞型的比較藥理學-CHO細胞中被穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的受體的特征化(Comparativepharmacology of human adenosine receptor subtypes-characterizationof stably transfected receptors in CHO cells)”，Naunyn SchmiedebergsArch.Pharmacol.357(1998)，第1-9頁，其公開內(nèi)容在這里被全部引入本文作為參考)。
現(xiàn)有技術(shù)中已知的“腺苷-受體-特異性”配體主要是以天然腺苷為基礎(chǔ)的衍生物[S.-A.Poulsen and R.J.Quinn，“腺苷受體未來藥物的新機遇(Adenosine receptorsnew opportunities for futuredrugs)”，Bioorganic and Medicinal Chemistry 6(1998)，第619-641頁]。但是，現(xiàn)有技術(shù)中已知的這些腺苷配體中的大部分配體具有其作用不是真正的受體特異性作用、其活性低于天然腺苷或者其在口服給藥后僅具有十分微弱的活性的缺點。因此，其主要僅被用于實驗目的。
WO 02/06237公開了作為鈣-依賴性鉀通道開放劑的芳基-取代的二氰基吡啶以及其用于治療泌尿生殖道病癥的應(yīng)用。此外，WO01/25210和WO 02/070485也描述了一些用于治療病癥的作為腺苷受體配體的被取代的2-硫代-3，5-二氰基-4-芳基-6-氨基吡啶。WO03/053441具體公開了特別適用于治療心血管疾病的作為腺苷A1受體選擇性配體的被取代的2-硫代-3，5-二氰基-4-苯基-6-氨基吡啶。WO 02/50071描述了用于治療各種疾病的作為酪氨酸激酶抑制劑的氨基噻唑衍生物。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供作為腺苷A1和A2b受體的雙重選擇性激動劑并且因此適用于治療和/或預防特別是高血壓和其它心血管疾病的新的化合物。
本發(fā)明提供了式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物，
其中R1表示氫或表示可以被羥基、氨基、單-或二-(C1-C4)-烷基氨基、吡咯烷子基、哌啶子基、嗎啉代、哌嗪子基或N′-甲基哌嗪子基取代的(C1-C6)-烷基，R2表示被選自羥基、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-和二-(C1-C4)-烷基氨基的相同或不同取代基單-或二取代的(C2-C6)-烷基，R3表示選自鹵素、氰基、硝基、(C1-C6)-烷基、羥基、(C1-C6)-烷氧基、氨基、單-和二-(C1-C6)-烷基氨基、羧基和(C1-C6)-烷氧基羰基的取代基，其中烷基以及烷氧基對于其部分在各種情況中可以被氟取代最高至5次，和n表示數(shù)字0、1、2、3、4或5，其中，如果取代基R3出現(xiàn)多次，則其含義可以相同或不同。
本發(fā)明的化合物是式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物、式(I)所包括和下式所提及的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物、和式(I)所包括和在下面作為實例性實施方案被提及的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物，其中所說的式(I)所包括的和在下面提及的化合物最初不是鹽、溶劑化物以及鹽的溶劑化物。
根據(jù)其結(jié)構(gòu)，本發(fā)明的化合物可以以立體異構(gòu)形式(對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體)存在。因此，本發(fā)明包括對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體以及其各自的混合物?？梢杂靡阎姆绞綇脑擃悓τ钞悩?gòu)體和/或非對映異構(gòu)體混合物中分離出立體異構(gòu)純的組分。
在本發(fā)明的化合物可以以互變異構(gòu)形式存在的情況中，本發(fā)明包括所有互變異構(gòu)形式。
對本發(fā)明的目的而言，優(yōu)選的鹽是本發(fā)明化合物生理學可接受的鹽。還包括其本身不適用于藥學應(yīng)用，但是例如可用于本發(fā)明化合物的分離或純化的鹽。
本發(fā)明化合物生理學可接受的鹽包括無機酸、羧酸和磺酸的酸加成鹽，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸鹽、萘二磺酸、醋酸、三氟醋酸、丙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、富馬酸、馬來酸和苯甲酸的鹽。
本發(fā)明化合物生理學可接受的鹽還包括常規(guī)堿的鹽，例如并優(yōu)選堿金屬鹽(例如鈉和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣和鎂鹽)以及得自氨或具有1至16個碳原子的有機胺，如并優(yōu)選乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙基胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環(huán)己基胺、二甲基氨基乙醇、普魯卡因、二芐胺、N-甲基嗎啉、精氨酸、賴氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶的銨鹽。
對于本發(fā)明的目的而言，溶劑化物指的是通過與溶劑分子配位形成固態(tài)或液態(tài)復合體的本發(fā)明化合物的這些形式。水合物是其中與水發(fā)生配位的特定溶劑化物形式。對于本發(fā)明的目的而言，優(yōu)選的溶劑化物是水合物。
此外，本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的前體藥物。術(shù)語“前體藥物”包括可以本身是生物活性或無生物活性，但是在其在體內(nèi)停留時可以轉(zhuǎn)化(例如代謝或水解)成本發(fā)明化合物的化合物。
對于本發(fā)明的目的而言，除非特別說明，否則所說的取代基具有下面的含義對于本發(fā)明的目的而言，(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烷基、(C1-C4)-烷基和(C2-C4)-烷基分別是具有1至6、2至6、1至4或2至4個碳原子的直鏈或直鏈烷基。優(yōu)選具有1至4或2至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基。例如可提及的基團優(yōu)選地如下甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、異丁基、仲-丁基、叔-丁基、1-乙基丙基、正-戊基和正-己基。
對于本發(fā)明的目的而言，(C1-C6)-烷氧基和(C1-C4)-烷氧基分別表示具有1至6或1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。優(yōu)選具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。例如可提及的基團優(yōu)選地如下甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基和叔-丁氧基。
對于本發(fā)明的目的而言，(C1-C6)-烷氧基羰基和(C1-C4)-烷氧基羰基分別表示通過羰基連接的具有1至6或1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。優(yōu)選在烷氧基中具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基羰基。例如可提及的基團優(yōu)選地如下甲氧基羰基、乙氧基羰基、正-丙氧基羰基、異丙氧基羰基和叔-丁氧基羰基。
對于本發(fā)明的目的而言，單-(C1-C6)-烷基氨基和單-(C1-C4)-烷基氨基表示分別具有有1至6或1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基取代基的氨基。優(yōu)選具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈單烷基氨基。例如可提及的基團優(yōu)選地如下甲基氨基、乙基氨基、正-丙基氨基、異丙基氨基和叔-丁基氨基。
對于本發(fā)明的目的而言，二-(C1-C6)-烷基氨基和二-(C1-C4)-烷基氨基分別表示具有兩個相同或不同的在各情況中具有1至6或1至4個碳原子直鏈或支鏈的烷基取代基的氨基。在各情況中優(yōu)選具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈二烷基氨基。例如可提及的基團優(yōu)選地如下N，N-二甲基氨基、N，N-二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、N-甲基-N-n-丙基氨基、N-異丙基-N-n-丙基氨基、N-叔-丁基-N-甲基氨基、N-乙基-N-正-戊基氨基和N-正-己基-N-甲基氨基。
對于本發(fā)明的目的而言，鹵素包括氟、氯、溴和碘。優(yōu)選氯或氟。
除非特別說明，否則當本發(fā)明化合物中的基團被取代時，所說的基團可以被單-或多取代。對于本發(fā)明的目的而言，在出現(xiàn)多次時，所有基團的含義都是彼此獨立的。優(yōu)選被一、二或三個相同或不同的取代基取代。十分特別優(yōu)選被一個或兩個相同或不同的取代基取代。
對于本發(fā)明的目的而言，優(yōu)選其中R1表示氫或表示可以被羥基、氨基或二甲基氨基取代的(C1-C4)-烷基，R2表示被選自羥基、甲氧基和氨基的相同或不同取代基單-或二取代的(C2-C4)-烷基，R3表示選自鹵素、氰基、硝基、(C1-C4)-烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-和二-(C1-C4)-烷基氨基、羧基和(C1-C4)-烷氧基羰基的取代基，其中烷基以及烷氧基對于其部分在各種情況中可被氟取代最高至三次，和n表示數(shù)字0、1或2，其中，如果取代基R3出現(xiàn)兩次，則其含義可以相同或不同，的式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物。
對于本發(fā)明的目的而言，特別優(yōu)選其中
R1表示氫，R2表示在各種情況中被選自羥基、甲氧基和氨基的相同或不同取代基單-或二取代的乙基、正-丙基或異丙基，R3表示選自氟、氯、溴、氰基、硝基、甲基、乙基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基、氨基、單-和二甲基氨基、羧基、甲氧基羰基和乙氧基羰基的取代基，和n表示數(shù)字0、1或2，其中，如果取代基R3出現(xiàn)兩次，則其含義可以相同或不同，的式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物。
本發(fā)明還提供了一種制備本發(fā)明式(I)化合物的方法，其特征在于，將其中R1和R2各自具有上面所給出的含義的式(II)的化合物 在惰性溶劑中在存在堿的情況下與式(III)的化合物進行反應(yīng)， 其中R3和n各自具有上面所給出的含義，和
X表示一種適宜的離去基團，優(yōu)選地表示鹵素，特別是氯、溴或碘、或表示甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯，并且任選，用適宜的(i)溶劑和/或(ii)堿或酸將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化成其溶劑化物、鹽和/或鹽的溶劑化物。
可以用下面的結(jié)構(gòu)式流程圖來對上述方法進行舉例說明反應(yīng)路線1 適用于本發(fā)明方法的溶劑是在該反應(yīng)條件下為惰性的所有有機溶劑。這些溶劑包括醇類，如甲醇、乙醇和異丙醇、酮類，如丙酮和甲基乙基酮、開鏈式和環(huán)狀醚類，如乙醚、四氫呋喃和二烷、酯類，如乙酸乙酯或乙酸丁酯、烴類，如苯、甲苯、二甲苯、己烷或環(huán)己烷、氯化烴類，如二氯甲烷或氯苯，或其它溶劑，如二甲基甲酰胺、乙腈、吡啶或二甲基亞砜。水也是適宜用作溶劑的。還可以使用上述溶劑的混合物。優(yōu)選的溶劑是二甲基甲酰胺。
適宜的堿是常規(guī)的無機堿或有機堿。其優(yōu)選地包括堿金屬氫氧化物，如，例如，氫氧化鈉或氫氧化鉀、堿金屬碳酸鹽，如碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸銫、堿金屬碳酸氫鹽，如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀、堿金屬醇化物，如甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀或叔丁醇鉀、或氨化物類，如氨化鈉，二(三甲基甲硅烷基)氨化鋰或二異丙基氨化鋰，或有機金屬化合物，如丁基鋰或苯基鋰、或有機胺類，如三乙胺、吡啶、1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或1，5-二氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)。優(yōu)選堿金屬碳酸鹽和堿金屬碳酸氫鹽。
在這里，以1mol式(II)的化合物為基礎(chǔ)，所用堿的數(shù)量可以為1至10mol，優(yōu)選地為1至5mol，特別是1至4mol。
該反應(yīng)通常是在-78℃至+140℃，優(yōu)選-20℃至+60℃，特別是0℃至+40℃的溫度下進行的。該反應(yīng)可以在大氣壓、升高或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進行。該反應(yīng)通常是在大氣壓下進行的。
其中R1表示氫的式(II)的化合物本身是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或者可以用得自文獻的常規(guī)方法來進行制備。特別是可以參考下面的公開物，其各自的內(nèi)容在這里被引入作為參考a)Dyachenko et al.，Russian Journal of Chemistry33(7)，1014-1017(1997)und34(4)，557-563(1998)；b)Dyachenko et al.，Chemistry of Heterocyclic Compounds34(2)，188-194(1998)；c)Qintela et al.，European Journal of Medicinal Chemistry33，887-897(1998)；d)Kandeel et al.，Zeitschrift für Naturforschung42b.107-111(1987).
其中R1表示氫的式(II)的化合物還可以用式(IV)的化合物開始，通過將其與堿金屬硫化物進行反應(yīng)來進行制備， 其中R2的定義如上所述，可以用下面的結(jié)構(gòu)式反應(yīng)路線來對這種制備方法進行舉例性說明反應(yīng)路線2
以1mol式(IV)的化合物為基礎(chǔ)，優(yōu)選地用數(shù)量為1至10mol，優(yōu)選1至5mol，特別是1至4mol的硫化鈉作為堿金屬硫化物。
適宜的溶劑是在該反應(yīng)條件下為惰性的所有有機溶劑。這些溶劑優(yōu)選地包括N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、吡啶和乙腈。還可以使用上述溶劑的混合物。特別優(yōu)選N，N-二甲基甲酰胺。
該反應(yīng)通常是在+20℃至+140℃，優(yōu)選+20℃至+120℃，特別是+60℃至+100℃的溫度范圍中進行的。該反應(yīng)可以在大氣壓、升高或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進行。該反應(yīng)一般是在大氣壓下進行的。
式(IV)的化合物可以與下面公開物中所述化合物相似地類進行制備a)Kambe et al.，Synthesis，531-533(1981)；b)Elnagdi et al.，Z.Naturforsch.47b，572-578(1991).
其中R1不表示氫的式(II)的化合物可以通過首先用氯化銅(II)和亞硝酸異戊酯在適宜的溶劑中將式(IV)的化合物轉(zhuǎn)化成式(V)的化合物，
其中R2的定義如上所述，然后將這些物質(zhì)與式(VI)的化合物進行反應(yīng)，R1A-NH2(VI)，其中R1A具有上面對于R1所給出的含義，但是不表示氫，得到式(VII)的化合物， 其中R1A和R2各自的定義如上所述，最后，用硫化鈉將其轉(zhuǎn)化成式(II)的化合物來進行制備。
上述方法可以用下面的結(jié)構(gòu)式反應(yīng)路線來進行舉例說明
反應(yīng)路線3 工藝步驟(IV)→(V)通常是用基于每摩爾式(IV)的化合物使用2至12mol的氯化銅(II)和2至12mol的亞硝酸異戊酯的摩爾比來進行的。
適用于這種工藝步驟的溶劑是在該反應(yīng)條件下為惰性的所有有機溶劑。這些溶劑包括開鏈式和環(huán)狀醚類，如乙醚和四氫呋喃、酯類，如乙酸乙酯或乙酸丁酯、烴類，如苯、甲苯、二甲苯、己烷或環(huán)己烷、氯化烴類，如二氯甲烷、二氯乙烷或氯苯、或其它溶劑，如二甲基甲酰胺、乙腈或吡啶。還可以使用上述溶劑的混合物。優(yōu)選的溶劑是乙腈和二甲基甲酰胺。
該反應(yīng)通常是在-78℃至+180℃，優(yōu)選+20℃至+100℃，特別是+20℃至+60℃的溫度范圍內(nèi)進行的。該反應(yīng)可以在大氣壓、升高或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進行。該反應(yīng)一般是在大氣壓下進行的。
工藝步驟(V)+(VI)→(VII)通常是用基于每摩爾式(V)的化合物使用1至8mol式(VI)化合物的摩爾比來進行的。
適用于這種工藝步驟的溶劑是在該反應(yīng)條件下為惰性的所有有機溶劑。這些溶劑包括醇類如甲醇、乙醇和異丙醇、酮類，如丙酮和甲基乙基酮、開鏈式和環(huán)狀醚類，如乙醚和四氫呋喃、酯類，如乙酸乙酯或乙酸丁酯、烴類，如苯、甲苯、二甲苯、己烷或環(huán)己烷、氯化烴類，如二氯甲烷、二氯乙烷或氯苯、或其它溶劑，如二甲基甲酰胺、乙腈、吡啶或二甲基亞砜。另一種適宜的溶劑是水。還可以使用上述溶劑的混合物。優(yōu)選的溶劑是二甲基甲酰胺。
該反應(yīng)通常是在-78℃至+180℃，優(yōu)選+20℃至+160℃，特別是+20℃至+40℃的溫度范圍內(nèi)進行的。該反應(yīng)可以在大氣壓、升高或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進行。該反應(yīng)一般是在大氣壓下進行的。
工藝步驟(VII)→(II)通常是用基于每摩爾式(VII)的化合物使用1至8mol硫化鈉的摩爾比來進行的。
適用于這種工藝步驟的溶劑是在該反應(yīng)條件下為惰性的所有有機溶劑。這些溶劑包括醇類如甲醇、乙醇和異丙醇、酮類，如丙酮和甲基乙基酮、開鏈式和環(huán)狀醚類，如乙醚和四氫呋喃、酯類，如乙酸乙酯或乙酸丁酯、烴類，如苯、甲苯、二甲苯、己烷或環(huán)己烷、氯化烴類，如二氯甲烷、二氯乙烷或氯苯、或其它溶劑，如二甲基甲酰胺、乙腈、吡啶或二甲基亞砜。還可以使用上述溶劑的混合物。優(yōu)選的溶劑是二甲基甲酰胺。
該反應(yīng)通常是在-78℃至+180℃，優(yōu)選+20℃至+160℃，特別是+40℃至+100℃的溫度范圍內(nèi)進行的。該反應(yīng)可以在大氣壓、升高或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進行。該反應(yīng)一般是在大氣壓下進行的。
式(VI)的化合物可以通過商業(yè)途徑獲得、是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或者可以用常規(guī)方法來進行制備。
式(III)的化合物可以由式(VIII)的化合物，通過將其與1，3-二鹵代丙酮進行反應(yīng)來進行制備，
其中R3和n的定義如上所述。
這種制備方法可以用下面的結(jié)構(gòu)式反應(yīng)路線來進行舉例說明反應(yīng)路線4 在這里，式(III-A)的化合物可以與文獻中所述方法相似地來進行制備和分離[I.Simiti等人，Chem.Ber.95，2672-2679(1962)]，或者其可以在原位被產(chǎn)生并直接與式(II)的化合物進一步進行反應(yīng)。優(yōu)選地由1，3-二氯丙酮和式(VIII)的化合物在二甲基甲酰胺或乙醇中在原位產(chǎn)生。該制備通常是在0℃至+140℃，優(yōu)選+20℃至+120℃，特別是+80℃至+100℃的溫度范圍內(nèi)進行的。
式(VIII)的化合物可以通過商業(yè)途徑獲得、是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或者可以用常規(guī)方法來進行制備。
令人吃驚地是，本發(fā)明的化合物不可預見地具有有用的藥理學活性譜并且因此特別適用于預防和/或治療病癥。
可以用其作為腺苷A1和A2b受體的選擇性配體的作用來解釋本發(fā)明化合物的藥學活性。在這里，其作為雙重A1/A2b激動劑。
在本發(fā)明的上下文中，“腺苷A1和A2b受體的選擇性配體”是在一方面觀察到其對A1和A2b腺苷受體亞型具有明確的活性并且在另一方面觀察到其對A2a和A3腺苷受體亞型沒有活性或者僅有很弱的活性(因子為10或更高)的腺苷受體配體，其中，對其作用的選擇性進行試驗的方法可參見在B-1節(jié)中所述的試驗。
單獨或者與一種或多種其它活性化合物聯(lián)用的式(I)的化合物適用于預防和/或治療各種疾病，即特別是例如高血壓和心血管系統(tǒng)的其它疾病(心血管疾病)。適于進行組合的活性化合物特別是用于治療高血壓和/或冠心病的活性化合物，如β阻滯劑、鈣拮抗劑、利尿劑、ACE抑制劑、AT1拮抗劑和硝酸鹽類。
在本發(fā)明的上下文中，心血管系統(tǒng)疾病或心血管疾病被理解為指的特別是例如除高血壓之外的下面的疾病冠狀動脈再狹窄，如，例如，外周血管氣囊擴張術(shù)后的再狹窄、心動過速、心律不齊、外周血管病癥和心血管病癥、穩(wěn)定和不穩(wěn)定的心絞痛、心房和心室纖維性顫動以及心機能不全。
此外，式(I)的化合物還特別適用于例如降低受梗死影響的心肌區(qū)域和用于預防繼發(fā)性梗死。
此外，式(I)的化合物還特別適用于例如預防和/或治療血栓栓塞性疾病和局部缺血，如心肌梗死、中風和暫時性局部缺血發(fā)作。
本發(fā)明式(I)化合物特別適用的另一些適應(yīng)征領(lǐng)域是例如特別是用于預防和/或治療泌尿生殖領(lǐng)域病癥，如，例如，刺激性膀胱、勃起機能障礙和女性性機能障礙，并且其還適用于預防和/或治療炎性病癥，如，例如，哮喘和可能發(fā)炎的(inflammable)皮膚病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)炎性(neuroinflammatory)疾病，如，例如，腦梗死后的情況、阿耳茨海默氏病，其還可用于神經(jīng)變性疾病以及疼痛、癌癥以及與癌癥治療有關(guān)的惡心和嘔吐。
另一些適應(yīng)征領(lǐng)域是例如特別是用于預防和/或治療呼吸道疾病，如，例如，哮喘、慢性支氣管炎、肺氣腫、支氣管擴張(bronchiectases)、囊性纖維化病(粘稠物阻塞癥)以及肺動脈高血壓。
最后，式(I)的化合物還例如特別適用于預防和/或治療糖尿病，特別是代謝綜合征的和血脂障礙的糖尿病。
本發(fā)明還涉及式(I)的化合物在制備用于預防和/或治療上述臨床情形的藥物方面的用途。
本發(fā)明還涉及一種用式(I)的化合物來預防和/或治療上述臨床情形的方法。
本發(fā)明的主題還包括包含至少一種本發(fā)明化合物的藥物，該藥物通常還一起包含一種或多種惰性無毒的適宜藥用的助劑，本發(fā)明還涉及所述藥物用于上述目的的應(yīng)用。
本發(fā)明的化合物可以全身起效和/或局部起效。為此，其可以以適宜的方式來進行給藥，例如可以通過口服、胃腸外、肺、鼻、舌下、舌、頰、直腸、皮膚、經(jīng)皮、結(jié)膜或耳途徑來進行給藥，或者可以以植入物或移植片固定模(stent)的形式被給藥。
對于這些給藥途徑而言，可以將本發(fā)明的化合物以適宜的給藥形式進行給藥。
適用于口服給藥的形式是可以如現(xiàn)有技術(shù)中所述的那樣起作用并且可以迅速和/或以改變的施用形式傳遞本發(fā)明化合物的給藥形式，其包含結(jié)晶和/或無定形和/或溶解形式的本發(fā)明化合物，例如片劑(未包衣的片劑或包衣片，例如具有腸衣或者溶解被延遲或不溶并且可控制本發(fā)明化合物釋放的包衣的片劑)、在口腔中迅速分解的片劑、或薄膜/糯米紙囊劑(wafers)、薄膜/冷凍干燥物、膠囊(例如硬或軟明膠膠囊)、糖衣片、顆粒、小丸、粉末、乳劑、混懸液、氣霧劑或溶液。
可以采用避免了吸收步驟(例如靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、心內(nèi)、脊柱內(nèi)或腰內(nèi))或者包含吸收步驟(例如肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、經(jīng)皮或腹膜內(nèi))的胃腸外給藥。適用于胃腸外給藥的給藥形式特別是用于以溶液、混懸液、乳劑、冷凍干燥物或無菌粉末的形式進行注射和輸入的制劑。
適用于其它給藥途徑的實例有用于吸入的藥物形式(特別是粉末吸入器、霧化器)、滴鼻劑/溶液/噴霧；被向舌、舌下或頰給藥的片劑、薄膜/糯米紙囊劑或膠囊、栓劑、用于眼睛或耳朵的制劑、陰道膠囊、水性混懸液(洗劑、振搖混合物)、親脂性混懸液、軟膏、乳霜、經(jīng)皮治療系統(tǒng)(例如貼劑)、乳狀物、糊劑、泡沫、撲粉(dusting powders)、植入物或移植片固定模。
優(yōu)選口服或胃腸外給藥，特別優(yōu)選口服給藥。
本發(fā)明的化合物可以被轉(zhuǎn)化成所述的給藥形式?？梢砸员旧硪阎姆绞酵ㄟ^將其與惰性無毒的適宜藥用的助劑進行混合來進行轉(zhuǎn)化。這些助劑特別是包括載體(例如微晶纖維素、乳糖、甘露醇)、溶劑(例如液體聚乙二醇)、乳化劑和分散劑或潤濕劑(例如十二烷基硫酸鈉、聚氧化脫水山梨醇油酸酯)、粘合劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如白蛋白)、穩(wěn)定劑(例如抗氧劑，如，例如，抗壞血酸)、著色劑(例如無機顏料，如，例如，氧化鐵類)和矯味劑-和/或掩味劑。
一般而言，表明對于胃腸外給藥而言，約0.001至1mg/kg，優(yōu)選約0.01至0.5mg/kg體重的數(shù)量可有利地獲得有效結(jié)果?？诜o藥的劑量為約0.01至100mg/kg，優(yōu)選地為約0.01至20mg/kg，并且十分特別優(yōu)選地為0.1至10mg/kg體重。
然而，在任選需要的情況中，可能需要偏離所述的數(shù)量，其取決于體重、給藥途徑、個體對所述活性化合物的響應(yīng)、給藥方式以及進行給藥時所采用的時間或時間間隔。因此，在一些情況中，用低于所述最小數(shù)量的數(shù)量可能就足夠了，而在另一些情況中，可能必需超出所述數(shù)量的上限。在給予更高數(shù)量的情況中，建議在一天內(nèi)將這些數(shù)量分成多個獨立劑量。
用下面的工作實施例來對本發(fā)明進行說明。本發(fā)明并不僅限于這些實施例。
除非另有說明，否則在下面試驗和實施例中的百分比數(shù)據(jù)都是重量百分比；份數(shù)是重量份。液/液溶液的溶劑比例、稀釋比例和濃度數(shù)據(jù)在各種情況中都是以體積為基礎(chǔ)的。
具體實施例方式
A.實施例所用的縮寫B(tài)sp.實施例DC 薄層色譜DCI 直接化學電離(在MS中)DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲基亞砜d.Th理論值的(在收率中)EE 乙酸乙酯EI 電子撞擊電離(在MS中)ESI 電噴射電離(在MS中)Fp. 熔點ges.飽和的
h 小時(們)HPLC高壓高效液相色譜konz. 濃的LC-MS 液相色譜-偶聯(lián)質(zhì)譜LDA 二異丙基氨化鋰Lit.文獻(參考)Lsg.溶液min 分鐘(們)MS 質(zhì)譜NMR 核磁共振光譜RP-HPLC 反相HPLCRT 室溫Rt保留時間(在HPLC中)THF 四氫呋喃verd. 稀的wβr. 水性HPLC-和LC-MS方法方法1(HPLC)儀器Hewlett Packard Series 1050；柱Symmetry TM C18 3.9×150mm；流速1.5ml/min；流動相A水，流動相B乙腈；梯度→0.6min 10％ B→3.8min 100％ B→5.0min 100％ B→5.5min 10％B；停止時間6.0min；注射體積10μl；二極管陣列檢測器信號214和254nm。
方法2(LC-MS)儀器Micromass Quattro LCZ，具有HPLC Agilent Series 1100；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；流動相A1l水+0.5ml 50％濃度甲酸，流動相B1l乙腈+0.5ml 50％濃度甲酸；梯度0.0min 90％ A→2.5min 30％ A→3.0min 5％ A→4.5min 5％A；流速0.0min 1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；柱溫箱50℃；UV檢測208-400nm。
方法3(LC-MS)
MS儀器類型Micromass ZQ；HPLC儀器類型水Alliance 2795；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；流動相A1l水+0.5ml 50％濃度甲酸，流動相B1l乙腈+0.5ml 50％濃度甲酸；梯度0.0min 90％ A→ 2.5min 30％ A→3.0min 5％ A→4.5min 5％ A；流速0.0min 1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；柱溫箱50℃；UV檢測210nm。
方法4(LC-MS)MS儀器類型Micromass ZQ；HPLC儀器類型HP 1100 Series；UVDAD；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；流動相A1l水+0.5ml 50％濃度甲酸，流動相B1l乙腈+0.5ml 50％濃度甲酸；梯度0.0min 90％ A→2.5min 30％ A→3.0min 5％ A→4.5min 5％ A；流速0.0min 1ml/min→2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；柱溫箱50℃；UV檢測210nm。
方法5(LC-MS)MS儀器類型Micromass ZQ；HPLC儀器類型水Alliance 2795；柱Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 100mm×4.6mm；流動相A水+500μl50％濃度甲酸/l，流動相B乙腈+500μl50％濃度甲酸/l；梯度0.0min 10％ B→7.0min 95％ B→9.0min 95％ B；柱溫箱35℃；流速0.0min 1.0ml/min→7.0min 2.0ml/min→9.0min2.0ml/min；UV檢測210nm。
方法6(HPLC)儀器使用具有DAD檢測的HP 1100；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；流動相A5ml HClO4/l水，流動相B乙腈；梯度0min 2％ B→0.5min 2％ B→4.5min 90％ B→9min 90％ B；流速0.75ml/min；柱溫箱30℃；UV檢測210nm。
方法7(HPLC)儀器使用具有DAD檢測的HP 1100；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；流動相A5ml HClO4/l水，流動相B乙腈；梯度0min 2％ B→0.5min 2％ B→4.5min 90％ B→6.5min 90％ B；流速0.75ml/min；柱溫箱30℃；UV檢測210nm。
起始材料和中間體
實施例1A4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯甲醛 將39.3g(150mmol)三苯基膦加入到13.2g(100mmol)1，2-O-亞異丙基甘油在250ml無水THF中的溶液中，將該混合物在RT下攪拌30min。將該混合物冷卻至約0℃并向其中加入12.2g(100mmol)4-羥基苯甲醛和31.9g(150mmol)偶氮基二甲酸二異丙酯(DIAD)。將該黃色的反應(yīng)溶液在RT下攪拌16h。然后，將該混合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，并將殘余物加入到150ml飽和的碳酸氫鈉溶液中。將該混合物用乙酸乙酯進行萃取(三次，每次150ml)并將所合并的有機相用硫酸鈉干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60色譜進行純化(流動相梯度為環(huán)己烷→環(huán)己烷/乙酸乙酯2∶1)。
收率5.03g(理論值的21％)LC-MS(方法3)Rt＝1.86min；MS(ESIpos)m/z＝237[M+H]+.
實施例2A{4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]亞芐基}丙二腈
將0.13g(1.98mmol)丙二腈、0.45g(1.90mmol)得自實施例1A的化合物和5.7μl(0.06mmol)哌啶溶解于乙醇中，并將該混合物在回流下加熱3.5h。將該反應(yīng)溶液濃縮并將殘余物用硅膠60色譜進行純化(流動相梯度為環(huán)己烷→環(huán)己烷/乙酸乙酯2∶1)。
收率0.43g(理論值的79％)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝7.91(d，2H)，7.65(s，1H)，7.03(d，2H)，4.51(m，1H)4.19(dd，1H)，4.14(dd，1H)，4.06(dd，1H)，3.91(dd，1H)，1.46(s，3H)，1.41(s，3H).
MS(DCI，NH3)m/z＝302[M+NH4]+.
實施例3A2-氨基-4-{4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯基}-6-巰基吡啶-3，5-二腈 將0.43g(1.51mmol)得自實施例2A的化合物、0.38g(3.78mmol)氰基硫代乙酰胺和0.38g(3.78mmol)4-甲基嗎啉溶解于15ml乙醇中并將該混合物在回流下攪拌6h。在冷卻后，將該反應(yīng)溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，并將殘余物用硅膠60色譜進行處理。在除去副產(chǎn)物(流動相梯度為環(huán)己烷→環(huán)己烷/乙酸乙酯1∶1)后，對產(chǎn)物級分進行洗脫(流動相梯度為乙酸乙酯→乙酸乙酯/甲醇20∶1)。然后用制備HPLC對其進行精細純化(柱YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm；流動相梯度乙腈/水10∶90→95∶5)。
收率88mg(理論值的15％)
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝12.96(br.s，1H)，7.90(br.s，2H)，7.46(d，2H)，7.12(d，2H)，4.44(m，1H)，4.18-4.02(m，3H)，3.79(m，1H)，1.37(s，3H)，1.32(s，3H).
LC-MS(方法3)Rt＝1.76min；MS(ESIpos)m/z＝383[M+H]+.
實施例4A4-[(4-{[(6-氨基-3，5-二氰基-4-{4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯基}吡啶-2-基)硫基]甲基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]苯甲酸 177mg(0.90mmol)4-羧基苯硫基脲和111mg(0.87mmol)1，3-二氯丙酮溶解于3ml DMF中，并將該反應(yīng)溶液在100℃下攪拌60min。在冷卻后，向其中加入230mg(0.60mmol)得自實施例3A的化合物和151mg(1.80mmol)碳酸氫鈉，將該混合物在RT下再攪拌16h。將該反應(yīng)混合物直接用制備HPLC進行色譜純化(柱YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm；流動相梯度乙腈/水10∶90→95∶5)。
收率134mg(理論值的36％)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝12.5(m，1H)，10.6(s，1H)，8.07(br.s，2H)，7.86(d，2H)，7.67(d，2H)，7.49(d，2H)，7.12(d，2H)，7.07(s，1H)，4.50(s，2H)，4.44(m，1H)，4.16-4.03(m，3H)，3.78(dd，1H)，1.37(s，3H)；1.31(s，3H).
LC-MS(方法4)Rt＝2.51min；MS(ESIpos)m/z＝615[M+H]+.
實施例5A2-氨基-4-{4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯基}-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]吡啶-3，5-二腈 將102mg(0.6mmol)4-氟苯硫基脲和73.6mg(0.58mmol)1，3-二氯丙酮溶解于2.5ml乙醇中并將該混合物在回流下攪拌60min。將該混合物冷卻并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對其進行濃縮。將殘余物吸收于1.5mlDMF中，向其中加入153mg(0.4mmol)得自實施例3A的化合物和101mg(1.2mmol)碳酸氫鈉并將該反應(yīng)溶液在RT下再攪拌16h。將該反應(yīng)混合物直接用制備HPLC進行色譜純化(柱YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm；流動相梯度乙腈/水10∶90→95∶5)。
收率62mg(理論值的26％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.24(s，1H)，8.08(br.s，2H)，7.62(dd，2H)，7.47(d，2H)，7.13(m，4H)，6.97(s，1H)，4.49-4.39(m，3H)，4.10(m，3H)，3.78(dd，1H)，1.36(s，3H)，1.31(s，3H).
LC-MS(方法2)Rt＝2.51min；MS(ESIpos)m/z＝589[M+H]+.
表1中所列的實施例是由相應(yīng)的起始化合物，與實施例5A相似地來進行制備的
表1
實施例11A(S)-4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯甲醛
將1.79g(14.6mmol)p-羥基苯甲醛溶解于無水DMF(10ml)中并向其中加入14.2g(102.5mmol)碳酸鉀和3.3g(22.0mmol)(R)-(+)-4-氯甲基-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)。將該混合物在150℃下加熱24h。然后，將該混合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，并將殘余物在二氯甲烷和水之間進行分配。將所合并的有機相用二氯甲烷進行萃取(三次，每次20ml)，用飽和的氯化鈉溶液進行洗滌并用硫酸鎂對其進行干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相環(huán)己烷/乙酸乙酯5∶1)。
收率2.12g(理論值的61％)LC-MS(方法2)Rt＝1.97min；MS(ESIpos)m/z＝237[M+H]+.
實施例12A(S)-2-氨基-4-{4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯基}-6-巰基吡啶-3，5-二腈 將1.52g(6.43mmol)得自實施例11A的化合物、1.29g(12.9mmol)氰基硫代乙酰胺和1.3g(12.9mmol)4-甲基嗎啉溶解于15ml乙醇中并將該混合物在回流下攪拌3h。然后，將該混合物在RT下攪拌18h。將該反應(yīng)溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，并將殘余物用硅膠60色譜進行處理(流動相二氯甲烷/乙醇10∶1)。
收率1.06g(理論值的43％)LC-MS(方法3)Rt＝1.75min；MS(ESIpos)m/z＝383[M+H]+.
實施例13A(S)-2-氨基-4-{4-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲氧基]苯基}-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]吡啶-3，5-二腈 該合成是與實施例5A相似地用得自實施例12A的對映異構(gòu)純的起始材料進行的。
收率理論值的47％LC-MS(方法3)Rt＝2.58min；MS(ESIpos)m/z＝589[M+H]+.
表2中所列的實施例是由相應(yīng)的起始化合物類似于實施例5A或13A或用相應(yīng)的對映異構(gòu)體進行制備的
表2




實施例29A2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-苯硫基-吡啶-3，5-二腈 將0.765g(11.6mmol)丙二腈、1.28g(11.6mmol)苯硫酚和2.48g(11.6mmol)2-[4-(2-羥基乙氧基)亞芐基]丙二腈[根據(jù)WO03/053441，實施例6/方法2，步驟1進行制備的]溶解于15ml乙醇中并向其中加入0.03ml三乙胺。將該混合物在回流下攪拌2h。在冷卻后，將該反應(yīng)混合物過濾并將殘余物用乙醇進行洗滌并對其進行干燥。
收率2.07g(理論值的46％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝7.76(br.s，2H)，7.60(m，2H)，7.51(m，5H)，7.12(d，2H)，4.93(t，1H)，4.09(t，2H)，3.75(m，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.02min；MS(ESIpos)m/z＝389[M+H]+.
實施例30A2-氯-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-苯硫基-吡啶-3，5-二腈
2.07g(5.33mmol)得自實施例29A的化合物溶解于11ml無水DMF中并向其中加入4.30g(32.0mmol)無水氯化銅(II)和2.71ml(32.0mmol)亞硝酸異戊酯。將該混合物在40℃下攪拌18h。然后，將該反應(yīng)溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，并將殘余物加入到1N鹽酸中。將該混合物用二氯甲烷萃取三次并將所合并的有機相用1N鹽酸和氯化鈉溶液進行洗滌。在用硫酸鎂干燥后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相二氯甲烷/乙醇20∶1)。
收率1.29g(理論值的59％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝7.60(m，7H)，7.20(d，2H)，4.12(t，2H)，3.76(t，2H).LC-MS(方法3)Rt＝2.38min；MS(ESIpos)m/z.＝408[M+H]+.
實施例31A2-(2-羥基乙氧基)氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-苯硫基-吡啶-3，5-二腈
將0.50g(1.23mmol)得自實施例30A的化合物溶解于1.5ml DMF中并向其中加入0.16ml(2.70mmol)2-羥基乙胺。將該混合物攪拌20min，然后向其中加入2ml甲醇和4ml水。將沉淀濾出，用甲醇洗滌并對其進行干燥。
收率0.36g(理論值的68％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝7.94(br.s，1H)，7.55(m，7H)，7.13(d，2H)，4.93(t，1H)，4.49(t，1H)，4.09(t，2H)，3.75(m，2H)，3.09(m，2H)，3.00(m，2H).
LC-MS(方法4)Rt＝2.33min；MS(ESIpos)m/z＝433[M+H]+.
實施例32A2-(2-羥基乙氧基)氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈 將0.30g(0.70mmol)得自實施例31A的化合物溶解于2ml DMF中并向其中加入0.19g(2.43mmol)硫化鈉。將該混合物在80℃下攪拌2h，然后將其在RT下攪拌12h。然后，向其中加入1N鹽酸(10ml)并將沉淀濾出。
收率0.25g(理論值的72％)LC-MS(方法3)Rt＝1.21min；MS(ESIpos)m/z＝357[M+H]+.
實施例33A2-氨基-6-(芐硫基)-4-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}吡啶-3，5-二腈 將6.31g(56.2mmol)叔-丁醇鉀加入到8.39g(23.4mmol)2-氨基-6-(芐硫基)-4-(4-羥基苯基)吡啶-3，5-二腈[根據(jù)WO 01/25210，實施例A 383，由2-氨基-4-(4-羥基苯基)-6-巰基吡啶-3，5-二腈和芐基溴來進行制備的]在105.5ml乙醇中的溶液中。將該混合物在RT下攪拌1h，然后，向其中加入4.05g(28.1mmol)鹽酸2-二甲基氨基乙基氯。然后，將該混合物在+78℃下攪拌3h。在冷卻后，將該反應(yīng)混合物過濾并將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將殘余物直接用制備HPLC進行純化(柱Merck 210g RP 硅膠Gromsil 120 ODS-4 HR 10μm，50mm×200mm；流動相A＝水+0.1％甲酸，流動相B＝乙腈；梯度0min 10％ B→5min 10％ B→6min 90％ B→22min 90％ B→22min 10％ B→28min 10％ B；流速110ml/min；波長220nm)。
收率3.55g(理論值的35％)LC-MS(方法3)Rt＝1.57min；MS(ESIpos)m/z＝430[M+H]+.
實施例34A2-氨基-4-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-6-巰基吡啶-3，5-二腈
將0.97g(12.41mmol)硫化鈉加入到3.56g(8.28mmol)得自實施例33A的化合物在13ml無水DMF中的溶液中。將該反應(yīng)混合物在+80℃下攪拌2h。在將其冷卻至RT后，向該反應(yīng)混合物中加入2ml濃度為37％的鹽酸，其溫度升至65℃。在加入2.6ml水后，將該反應(yīng)混合物冷卻使其回復至RT。在再加入5ml水后，將該混合物用5ml乙酸乙酯進行洗滌并通過加入濃度為40％的氫氧化鈉溶液來使其呈堿性。沉淀出黃色結(jié)晶，將其抽濾濾出，用10ml水和10ml乙醚進行洗滌，然后將其減壓干燥。將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮并將其與少量水一起進行攪拌。將所得的結(jié)晶抽濾濾出，分別用10ml水和乙醚對其進行洗滌并將其減壓干燥。
收率0.38g(理論值的13％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.77(br.s，1H)，7.39(d，2H)，7.09(d，2H)，6.92(br.s，2H)，4.30(t，2H)，3.21(br.s，2H)，2.64(s，6H).
LC-MS(方法3)Rt＝0.83min；MS(ESIpos)m/z＝340[M+H]+.
實施例35A4-甲基苯基磺酸[2-(4-甲?；窖趸?乙基]酯
在RT下，在攪拌的情況下，將12.6ml(90.3mmol)三乙胺和13.77g(72.2mmol)甲苯-4-磺酰氯在200ml二氯甲烷中的溶液相繼滴加到10.0g(60.2mmol)4-(2-羥基乙氧基)苯甲醛在300ml二氯甲烷中的溶液中。將該反應(yīng)混合物在RT下攪拌12h。在加入0.15g(1.2mmol)4-N，N-二甲基氨基吡啶后，將該混合物在RT下再攪拌4h。然后，向其中加入250ml碳酸氫鈉飽和水溶液，將該混合物用二氯甲烷萃取三次，每次使用100ml二氯甲烷。將所合并的有機相用硫酸鈉干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相梯度為環(huán)己烷→乙酸乙酯)。
收率12.34g(理論值的64％)HPLC(方法6)Rt＝4.57min；MS(ESIpos)m/z＝321[M+H]+.
實施例36A4-(2-疊氮基乙氧基)苯甲醛 將5.0g(15.61mmol)得自實施例35A的化合物和2.03g(31.22mmol)疊氮化鈉在100ml無水DMF中的溶液在RT下攪拌12h。將該反應(yīng)混合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，并將殘余物混懸于約20ml水中。在用乙醚萃取三次(每次使用30ml乙醚)后，將所合并的有機相用水洗滌兩次(每次使用10ml水)和用10ml飽和氯化鈉溶液洗滌一次。在用硫酸鈉干燥后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑。
收率3.02g(理論值的98％)HPLC(方法7)Rt＝4.14min；MS(DCI)m/z＝209[M+NH4]+.
實施例37A[4-(2-疊氮基乙氧基)亞芐基]丙二腈 將47μl(0.47mmol)哌啶滴加到3.02g(15.79mmol)得自實施例36A的化合物和1.09g(16.42mmol)丙二腈在100ml乙醇中的溶液中并將該反應(yīng)混合物在+78℃下攪拌3.5h。在此期間，該溶液的顏色變成橙色-紅色。在將其冷卻至RT后，將該溶液在不進行攪拌的情況下靜置20h。形成一種無色的沉淀。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將該粗品混懸液濃縮至其最初體積的一半，通過在冰浴上進行冷卻而使其完全結(jié)晶。將所得的沉淀抽濾濾出并再用乙醇洗滌兩次(每次使用20ml乙醇)和用甲基叔丁基醚洗滌兩次(每次使用20ml甲基叔-丁基醚)。
收率2.38g(理論值的63％)MS(DCI)m/z＝257[M+NH4]+.
實施例38A2-氨基-4-[4-(2-疊氮基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈
將2.39g(9.98mmol)得自實施例37A的化合物和2.50g(24.92mmol)氰基硫代乙酰胺在100ml乙醇中的溶液在+78℃下攪拌6h。在將其冷卻至RT并將其在不進行攪拌的情況下再靜置12h后，將該反應(yīng)混合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。將殘余物用約30ml乙醇重結(jié)晶。將所得的沉淀抽濾濾出并將其再用甲基叔丁基醚洗滌兩次(每次使用10ml甲基叔-丁基醚)。
收率2.04g(理論值的61％)MS(DCI)m/z＝355[M+NH4]+.
實施例39A2-氨基-4-[4-(2-疊氮基乙氧基)苯基]-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]吡啶-3，5-二腈
將74mg(0.44mmol)4-氟苯硫基脲和55mg(0.44mmol)1，3-二氯丙酮在5ml乙醇中的溶液在+85℃下攪拌60min。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將殘余物吸收于5ml DMF中并向其中加入105mg(0.31mmol)得自實施例38A的化合物和78mg(0.93mmol)碳酸氫鈉，然后，將該混合物在RT下攪拌20h。然后，將該混合物加入到15ml飽和碳酸氫鈉溶液中。將該混合物用乙酸乙酯進行萃取(三次，每次15ml)并將所合并的有機相用硫酸鎂進行干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相梯度為二氯甲烷/乙醇200∶1→20∶1)。
收率79mg(理論值的47％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.22(s，1H)，8.27-7.86(br.s，2H)，7.66-7.58(m，2H)，7.50(d，2H)，7.17-7.08(m，4H)，6.96(s，1H)，4.46(s，2H)，4.31-4.22(m，2H)，3.74-3.67(m，2H).LC-MS(方法2)Rt＝2.72min；MS(ESIpos)m/z＝544[M+H]+.
實施例40A4-(2-羥基丙氧基)苯甲醛 將18.30g(172.6mmol)碳酸鈉加入到7.03g(57.5mmol)對-羥基苯甲醛和6.80g(71.9mmol)1-氯-2-丙醇(工業(yè)級，純度為約70％，具有2-氯-1-丙醇的異構(gòu)體混合物)在125ml無水DMF中的溶液中并將該混合物在+130℃下攪拌20h。在將其冷卻至RT后，向混合物中加入100ml飽和碳酸氫鈉溶液并將該混合物用乙酸乙酯進行萃取(三次，每次100ml)。將所合并的有機相用硫酸鎂進行干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相梯度為環(huán)己烷/乙酸乙酯5∶1→2∶1)。
收率4.60g(理論值的44％，比例為75∶25的異構(gòu)體混合物)LC-MS(方法4)Rt＝1.63min；MS(ESIpos)m/z＝181[M+H]+.
實施例41A4-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙氧基)苯甲醛 將5.39g(35.7mmol)叔-丁基二甲基甲硅烷基氯和3.30g(48.5mmol)咪唑相繼加入到4.60g(25.5mmol)得自實施例40A的化合物在120ml無水二甲基甲酰胺中的溶液中并將該混合物在RT下攪拌20h。然后，向反應(yīng)混合物中加入100ml飽和碳酸氫鈉溶液并將該反應(yīng)混合物用乙醚進行萃取(三次，每次100ml)。將所合并的有機相用硫酸鎂進行干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相梯度為環(huán)己烷/乙酸乙酯50∶1→10∶1)。
收率4.00g(理論值的53％，比例為86∶14的異構(gòu)體混合物)LC-MS(方法2)Rt＝3.29min；MS(ESIpos)m/z＝295[M+H]+.
實施例42A2-氨基-4-[4-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈
將1.77g(5.99mmol)得自實施例41A的化合物和1.26g(12.59mmol)氰基硫代乙酰胺在25ml乙醇中的溶液在+78℃下攪拌6h。然后，將該混合物冷卻至RT并將其在該溫度下再攪拌20h。將所得的沉淀抽濾濾出并用冷乙醚對其進行洗滌。通過用硅膠60進行色譜純化而由該濃濾液溶液中又得到一些產(chǎn)物(流動相梯度為環(huán)己烷/乙酸乙酯1∶1→1∶4)。
收率0.25g(理論值的9％，異構(gòu)體混合物)LC-MS(方法3)Rt＝2.71min，2.77min；MS(ESIpos)m/z＝430[M+H]+.
實施例43A2-氨基-4-[4-(2-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙氧基)苯基]-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]吡啶-3，5-二腈
將78.6mg(0.46mmol)4-氟苯硫基脲和56.0mg(0.44mmol)1，3-二氯丙酮在2ml無水DMF中的溶液在+80℃下攪拌3h。在將其冷卻至RT后，向其中加入370mg(0.42mmol)得自實施例42A的化合物，然后，將該混合物在RT下攪拌20h。將該反應(yīng)混合物直接用兩種制備HPLC進行純化(柱YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm；流動相梯度乙腈/水10∶90→95∶5)。
收率0.44g(理論值的14％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.21(s，1H)，8.18-7.93(br.s，2H)，7.60(dd，2H)，7.47(d，2H)，7.12(t，2H)，7.07(d，2H)，6.95(s，1H)，4.44(s，2H)，4.21-4.12(m，1H)，3.96(dd，1H)，3.87(dd，1H)，1.18(d，3H)，0.87(s，9H)，0.08(d，6H).
LC-MS(方法5)Rt＝7.35min；MS(ESIpos)m/z＝647[M+H]+.
工作實施例實施例12-氨基-6-[({2-[(3-氯苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2，3-二羥基丙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈 將2ml冰醋酸和90mg(0.15mmol)得自實施例7A的化合物加入到1ml水中并將該混合物在RT下攪拌16h。將該混合物濃縮并將殘余物用硅膠60進行色譜處理(流動相梯度為二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇10∶1)。
收率30mg(理論值的36％)m.p.192-194℃1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.42(s，1H)，8.06(br.s，2H)，7.82(s，1H)，7.45(m，3H)，7.30(t，1H)，7.10(d，2H)，7.03(s，1H)，6.97(d，1H)，4.99(d，1H)，4.68(dd，1H)，4.49(s，2H)，4.09(dd，1H)，3.95(dd，1H)，3.82(m，1H)，3.46(dd，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.17min；MS(ESIpos)m/z＝565[M+H]+.
表3中所列的實施例是由相應(yīng)的起始化合物與實施例1相似地來進行制備的
表3

實施例82-氨基-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈 將244mg(1.92mmol)1，3-二氯丙酮加入到327mg(1.92mmol)4-氟苯硫基脲在8ml乙醇中的溶液中并將該混合物在回流下攪拌1h。將該混合物濃縮，將殘余物溶解于4ml DMF中并向其中加入429mg(1.37mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈(其制備見WO 03/053441，實施例6/方法1，步驟1)和346mg(4.1mmol)碳酸氫鈉，將該混合物在RT下攪拌一夜。在加入水后，將沉淀輕輕到出并將殘余物用二氯甲烷進行研磨。在用硅膠進行色譜處理(流動相二氯甲烷/甲醇50∶1)后，得到淡黃色固體形式的標題化合物。
收率316mg(理論值的44％)HPLC(方法1)Rt＝4.24min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.23(s，1H)，8.1(br.s，2H)，7.62(dd，2H)，7.47(d，2H)，7.12(dd，4H)，6.96(s，1H)，4.92(t，1H)，4.45(s，2H)，4.07(t，2H)，3.74(q，2H).
LC-MS(方法2)Rt＝2.39min；MS(ESIpos)m/z＝519[M+H]+.
實施例92-氨基-6-[({2-[(4-氯苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈 標題化合物是與實施例8相似地通過將179mg(0.96mmol)4-氯苯硫基脲與122mg(0.96mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與150mg(0.48mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行反應(yīng)來獲得的。
收率60mg(理論值的12％)
HPLC(方法1)Rt＝4.44min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6δ＝10.37(s，1H)，8.1(br.s，2H)，7.63(d，2H)，7.47(d，2H)，7.32(d，2H)，7.11(d，2H)，6.99(s，1H)，4.47(s，2H)，4.08(t，2H)，3.75(q，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.31min；MS(ESIpos)m/z＝535[M+H]+.
實施例102-氨基-6-[({2-[(2，4-二氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈 標題化合物是與實施例8相似地通過將169mg(0.90mmol)2，4-二氟苯硫基脲與114mg(0.90mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與200mg(0.64mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行反應(yīng)來獲得的。
收率126mg(理論值的36％)
HPLC(方法1)Rt＝4.31min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝9.97(s，1H)，8.34(dt，1H)，8.1(br.s，2H)，7.47(d，2H)，7.30(dq，1H)，7.10(d，2H)，7.04(br.t，1H)，6.99(s，1H)，4.91(t，1H)，4.45(s，2H)，4.06(t，2H)，3.74(q，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.21min；MS(ESIpos)m/z＝537[M+H]+.
實施例112-氨基-6-[({2-[(3-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈 標題化合物是與實施例8相似地通過將153mg(0.90mmol)3-氟苯硫基脲與114mg(0.90mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與200mg(0.64mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行反應(yīng)來獲得的。
收率80mg(理論值的24％)HPLC(方法1)Rt＝4.36min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.46(s，1H)，8.1(br.s，2H)，7.66(dt，1H)，7.47(d，2H)，7.35-7.21(m，2H)，7.10(t，2H)，7.04(s，1H)，6.74(dt，1H)，4.92(br.s，1H)，4.48(s.2H)，4.07(t，2H)，3.74(t，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.20min；MS(ESIpos)m/z＝519[M+H]+.
實施例122-氨基-6-[({2-[(2-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈 標題化合物是與實施例8相似地通過將153mg(0.90mmol)2-氟苯硫基脲與114mg(0.90mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與200mg(0.64mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行反應(yīng)來獲得的。
收率170mg(理論值的51％)HPLC(方法1)Rt＝4.28min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝9.99(s，1H)，8.36(t，1H)，8.1(br.s，2H)，7.46(d，2H)，7.22(dd，1H)，7.16-7.08(m，3H)，7.02-6.96(m，2H)，4.90(t，1H)，4.46(s，2H)，4.07(t，2H)，3.74(t，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.16min；MS(ESIpos)m/z＝519[M+H]+.
實施例134-({4-[({6-氨基-3，5-二氰基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-2-基}硫基)甲基]-1，3-噻唑-2-基}氨基)苯甲酸
標題化合物是與實施例8相似地通過將176mg(0.90mmol)4-[(氨基carbonothioyl)氨基]苯甲酸與114mg(0.90mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與200mg(0.64mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行反應(yīng)來獲得的。
收率45mg(理論值的13％)HPLC(方法1)Rt＝3.81min1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝12.6(br.s，1H)，10.64(s，1H)，8.1(br.s，2H)，7.87(d，2H)，7.68(d，2H)，7.49(d，2H)，7.13-7.06(m，3H)，4.45(s，2H)，4.07(t，2H)，3.74(t，2H).
LC-MS(方法2)Rt＝1.97min；MS(ESIpos)m/z＝545[M+H]+.
在這種反應(yīng)中，以副產(chǎn)物形式得到了4-({4-[({6-氨基-3，5-二氰基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-2-基}硫基)甲基]-1，3-噻唑-2-基}氨基)苯甲酸乙酯(見實施例14)。
實施例144-({4-[({6-氨基-3，5-二氰基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-2-基}硫基)甲基]-1，3-噻唑-2-基}氨基)苯甲酸乙酯
如實施例13中所述，標題化合物是在176mg(0.90mmol)4-[(氨基carbonothioyl)氨基]苯甲酸與114mg(0.90mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)和隨后與200mg(0.64mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行的反應(yīng)中以副產(chǎn)物的形式獲得的。
收率59mg(理論值的16％)HPLC(方法1)Rt＝4.32min1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝10.67(s，1H)，8.1(br.s，2H)，7.88(d，2H)，7.68(d，2H)，7.47(d，2H)，7.1 3-7.07(m，3H)，4.91(br.s，1H)，4.50(s，2H)，4.26(q，2H)，4.07(t，2H)，3.74(t，2H)，1.29(t，3H).
LC-MS(方法2)Rt＝2.46min；MS(ESIpos)m/z＝573[M+H]+.
實施例152-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-[({2-[(4-硝基苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]吡啶-3，5-二腈
標題化合物是與實施例8相似地通過將177mg(0.90mmol)4-硝基苯硫基脲與114mg(0.90mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與200mg(0.64mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈進行反應(yīng)來獲得的。
收率67mg(理論值的19％)HPLC(方法1)Rt＝4.23min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝11.03(s，1H)，8.20(d，2H)，8.1(br.s，2H)，7.80(d，2H)，7.48(d，2H)，7.20(s，1H)，7.10(d，2H)，4.90(t，1H)，4.52(s，2H)，4.07(t，2H)，3.74(q，2H).
LC-MS(方法2)Rt＝2.39min；MS(ESIpos)m/z＝546[M+H]+.
實施例162-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-{[(2-{[3-(三氟甲基)苯基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)甲基]硫基}吡啶-3，5-二腈
將25.4mg(0.2mmol)1，3-二氯丙酮在0.5ml DMF中的溶液加入到44mg(0.2mmol)3-三氟甲硫基脲中。將該反應(yīng)混合物在80℃下攪拌3h。在冷卻后，向其中加入位于0.2ml DMF中的62.5mg(0.2mmol)2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈和67mg(0.8mmol)碳酸氫鈉。將該反應(yīng)混合物在RT下攪拌一夜，然后將其過濾并用制備HPLC對其進行純化(柱GROMSIL 120 ODS-HE-4，5μm，20×50mm；UV檢測220nm；注射體積700μl；流動相A水+0.1％甲酸，流動相B乙腈；梯度0min 10％ B→1.5min 10％ B→5.5min 90％ B→7min 90％ B→7.1min 10％ B→8min 10％ B；流速25ml/min)。將包含產(chǎn)物的級分減壓濃縮。
收率71.6mg(理論值的63％)LC-MS(方法2)Rt＝2.56min；MS(ESIpos)m/z＝569[M+H]+.
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.6(s，1H)，8.1(s，1H)，8.1(br.s，2H)，7.8(d，1H)，7.5(m，3H)，7.25(d，1H)，7.1(m，3H)，4.9(t，1H)，4.5(s，2H)，4.1(t，2H)，3.75(q，2H).
表4中所列的實施例17至28是與實施例16相似地分別由2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈(實施例17至25)或由2-氨基-4-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈(其制備見WO 03/053441，實施例1/步驟2)(實施例26至28)來進行制備的
表4


表5中所列的實施例是由相應(yīng)的起始化合物，與實施例1相似地來進行制備的
表5










表6中所列的實施例是與實施例16相似地由2-氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈來進行制備的
表6


實施例682-(2-羥基乙氧基)氨基-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈
標題化合物是與實施例8相似地通過將120mg(0.70mmol)4-氟苯硫基脲與89mg(0.70mmol)1，3-二氯丙酮在乙醇中進行反應(yīng)，然后與245mg(0.50mmol)2-(2-羥基乙氧基)氨基-4-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-6-巰基吡啶-3，5-二腈(實施例32A)進行反應(yīng)來獲得的。
收率30mg(理論值的11％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.24(s，1H)，8.03(t，1H)，7.61(dd，2H)，7.46(d，2H)，7.12(m，4H)，6.81(s，1H)，4.91(t，1H)，4.80(t，1H)，4.50(s，2H)，4.07(t，2H)，3.74(dt，2H)，3.62(t，2H)，3.56(m，2H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.10min；MS(ESIpos)m/z＝563[M+H]+.
實施例692-氨基-6-[({2-[(4-氰基苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}吡啶-3，5-二腈
將26.6mg(0.15mmol)N-(4-氰基苯基)硫基脲和19mg(0.15mmol)1，3-二氯丙酮在0.4ml DMF中的溶液在+80℃下攪拌3h。在將其冷卻至RT后，向其中加入50.9mg(0.15mmol)得自實施例34A的化合物在0.2ml DMF中的溶液和50mg(0.6mmol)碳酸氫鈉。然后，將該混合物在RT下攪拌12h。將該反應(yīng)混合物過濾并直接用制備HPLC進行純化(柱Macherey Nagel VP50/21 Nucleosil 100-5 C18 Nautilus，5μm，21mm×50mm；波長220nm；流速25ml/min；流動相A＝水+0.1％甲酸，流動相B＝乙腈；梯度0min 10％B→2min 10％ B→6min 90％ B→7min 90％ B→7.1min 10％ B→8min 10％B)。將包含產(chǎn)物的級分合并并將其用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行濃縮。
收率50mg(理論值的57％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.80(s，1H)，8.17(s，1H)，8.20-7.96(br.s，2H)，7.82-7.70(m，4H)，7.47(d，2H)，7.13(d，2H)，7.10(s，1H)，4.50(s，2H)，4.16(t，2H)，2.73(t，2H)，2.30(s，6H).
LC-MS(方法4)Rt＝1.87min；MS(ESIpos)m/z＝553[M+H]+.
實施例702-氨基-4-[4-(2-氨基乙氧基)苯基]-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]吡啶-3，5-二腈鹽酸鹽
將1000mg(1.84mmol)得自實施例39A的化合物溶解于100ml二烷中，向其中加入150mg(1.41mmol)鈀-披-活性碳并將該混合物用氫氣在3巴下進行氫化。在3h后，向其中加入4ml 2M鹽酸并將該混合物用氫氣在3巴下再氫化20h。然后，將該混合物用Seitz-Klrschichten濾器進行抽濾過濾，然后將產(chǎn)物用50ml二烷進行洗滌，然后向濾液中加入50ml甲苯。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將殘余物吸收于50ml水和50ml乙酸乙酯的混合物中。通過小心加入稀碳酸氫鈉水溶液，將其pH值調(diào)至約9。對所形成的相進行分離。將有機相用硫酸鎂進行干燥，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去溶劑并將殘余物用制備HPLC進行純化(柱YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm；流動相梯度乙腈/水10∶90→95∶5，加有0.5％濃鹽酸)。將包含產(chǎn)物的級分合并并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器對其進行濃縮。
收率57mg(理論值的6％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.27(s，1H)，8.08-7.97(br.s，2H)，7.67-7.59(m，2H)，7.51(d，2H)，7.20-7.09(m，4H)， 6.98(s，1H)，4.47(s，2H)，4.25(t，2H)，3.31-3.21(m，2H).LC-MS(方法2)Rt＝2.08min；MS(ESIpos)m/z＝518[M+H]+.
實施例712-氨基-6-[({2-[(4-氟苯基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}甲基)硫基]-4-[4-(2-羥基丙氧基)苯基]吡啶-3，5-二腈
將3ml 1M鹽酸加入到43mg(0.06mmol)得自實施例43A的化合物在6ml甲醇中的溶液中并將該混合物在RT下攪拌20h。然后，向反應(yīng)混合物中加入10ml飽和碳酸氫鈉溶液并將該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯進行萃取(三次，每次10ml)。將所合并的有機相用硫酸鎂進行干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑后，將該粗品用硅膠60進行色譜純化(流動相梯度為二氯甲烷/乙醇100∶1→20∶1)。
收率0.34g(理論值的96％)1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝10.22(s，1H)，8.22-7.91(br.s，2H)，7.61(dd，2H)，7.47(d，2H)，7.18-7.06(m，4H)，6.97(s，1H)，4.91(d，1H)，4.46(s，2H)，4.02-3.94(m，1H)，3.94-3.83(m，2H)，1.17(d，3H).
LC-MS(方法3)Rt＝2.26min；MS(ESIpos)m/z＝533[M+H]+.
B.藥理學和生理學活性評估可以用下面的試驗來證明本發(fā)明化合物的藥理學和生理學活性B-1.通過基因表達對腺苷激動進行的間接測定將CHO(中國蒼鼠卵巢)永久細胞系的細胞用A1、A2a和A2b腺苷受體亞型的cDNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。腺苷A1受體經(jīng)由Gi蛋白與腺苷酸環(huán)化酶偶合，而腺苷A2a和A2b受體經(jīng)由Gs蛋白進行偶合。與此相應(yīng)，其分別抑制或刺激了細胞中cAMP的形成。在此之后，用cAMP-依賴性啟動子調(diào)控熒光素酶的表達。以高靈敏度和再現(xiàn)性、低變異性和在自動系統(tǒng)上進行實施的良好適當性為目的，可以通過改變一些試驗參數(shù)，如細胞密度、生長期以及試驗培養(yǎng)的持續(xù)時間、福斯高林濃度和培養(yǎng)基組成來對該熒光素酶試驗進行優(yōu)化。用下面的試驗方案來對這些細胞的藥理學特性進行描述和進行自動機械輔助的物質(zhì)篩選使儲備培養(yǎng)物在37℃和5％CO2下在包含10％FCS(胎牛血清)的DMEM/F12培養(yǎng)基中進行生長并且使其在各情況中在2-3天后以1∶10的比例進行分裂。將試驗培養(yǎng)物以每孔2000個細胞的數(shù)量接種到384-孔板中并使其在37℃下生長約48小時。然后，將其培養(yǎng)基代之以氯化鈉生理溶液(130mM氯化鈉，5mM氯化鉀，2mM氯化鈣，20mM HEPES，1mM氯化鎂六水合物，5mM碳酸氫鈉，pH 7.4)。將進行試驗的物質(zhì)溶解于溶解于DMSO中，將其用移液管以1.1×10-11M至3×10-6M(終濃度)的稀釋系列形式移加到該試驗培養(yǎng)物上(試驗混合物中DMSO的最大終濃度0.5％)。10分鐘后，向A1細胞中加入福斯高林并隨后將所有的培養(yǎng)物在37℃下培養(yǎng)4小時。其后，向該試驗培養(yǎng)物中加入35μl由50％溶解試劑(30mM磷酸氫二鈉，10％甘油，3％TritonX100，25mM TrisHCl，2mM二硫蘇糖醇(DTT)，pH 7.8)和50％熒光素酶底物溶液(2.5mM ATP，0.5mM熒光素，0.1mM輔酶A，10mM兩性離子緩沖劑(Tricin)，1.35mM硫酸鎂，15mM DTT，pH 7.8)組成的溶液，將其振搖約1分鐘，然后用攝影系統(tǒng)對其熒光素酶活性進行測量。測定其EC50值，即在A1細胞的情況中為50％熒光素酶應(yīng)答被抑制時的濃度以及在A2b和A2a細胞的情況中分別為相應(yīng)物質(zhì)獲得最大刺激的50％時的濃度。在這些實驗中用與所有的腺苷受體亞型以高親合力結(jié)合并具有激動活性的腺苷類似物化合物NECA(5-N-乙基甲酰氨基(carboxamido)腺苷)作為參照化合物[Klotz，K.N.，Hessling，J.，Hegler，J.，Owman，C.，Kull，B.，F(xiàn)redholm，B.B.，Lohse，M.J.，“人腺苷受體亞型的藥理學比較—在CHO細胞中被穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的受體的特性描述(Comparative pharmacology of human adenosinereceptor subtypes-characterization of stably transfected receptors inCHO cells)”，Naunyn Schmiedebergs Arch.Pharmacol.，357，1-9(1998))。
下面的表1中列出了各代表性工作實施例對腺苷A1、A2a和A2b受體亞型的受體刺激的EC50值
表1

B-2.對分離的血管進行的研究將被麻醉了的大鼠的尾動脈切下并將其安放在用于對分離的血管進行測量的常規(guī)裝置中。用熱浴對這些血管進行灌注并用苯福林使其收縮。用收縮計量器測量其收縮程度。將試驗物質(zhì)加入到之前處于收縮狀態(tài)的血管中并測量血管收縮的降低。收縮的降低相當于血管的擴張。就其松弛性而言，其下血管收縮降低50％的濃度以試驗物質(zhì)EC50值的形式被給出。
B-3.對Langendorff心臟進行的研究在打開被麻醉大鼠的胸腔后迅速取下其心臟并將其放入到常規(guī)Langendorff裝置中。對其冠狀動脈進行體積恒定的(10ml/min)灌注，并通過適宜的壓力傳感器記錄由其獲得的灌注壓上升。這種排列中的灌注壓下降相當于冠狀動脈的松弛。同時，通過引入到左心室中的氣囊和另一個壓力傳感器來測量各收縮期間心臟形成的壓力。通過用每單位時間的收縮數(shù)進行計算來得到分離心臟跳動時的速率。
B-4.對清醒大鼠血壓和心率進行的測量將各種劑量的試驗物質(zhì)口服給藥于清醒的攜帶者能持久地測量血壓和心率的內(nèi)部發(fā)送器(血液動力學參數(shù)的遙測)的SHR大鼠(自發(fā)性高血壓大鼠)。然后，在24小時內(nèi)記錄血壓、心率以及其變化。
B-5.對清醒的彌猴和絨猴的血壓和心率進行的測量將清醒的彌猴固定在一根管子中。為了輸入試驗物質(zhì)和測量血壓，將一些導管放置到動物腿部的靜脈中。通過一根導管將試驗物質(zhì)以各種濃度靜脈內(nèi)輸入15-30分鐘。每隔1-5分鐘用通過商業(yè)途徑獲得的測量早產(chǎn)兒血壓的裝置對其血壓和心率變化進行監(jiān)測，一共監(jiān)測60分鐘。為此，將測量套固定在動物的腿上。
將各種濃度的試驗物質(zhì)口服給藥于清醒的攜帶能永久測量血壓和心率的內(nèi)部發(fā)送器(血壓動力學參數(shù)的遙測)的絨猴。然后在6-24小時內(nèi)記錄血壓、心率以及其變化。
C.藥物組合物的加工實施例可以用下面的方法將本發(fā)明的化合物轉(zhuǎn)化成藥物制劑片劑組成100mg本發(fā)明的化合物、50mg乳糖(單水合物)、50mg玉米淀粉(天然的)、10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(得自BASF，Ludwigshafen，德國)和2mg硬脂酸鎂。
片重212mg，直徑8mm，曲徑12mm。
制備將本發(fā)明化合物、乳糖和淀粉的混合物用濃度為5％(m/m)的PVP水溶液進行制粒。將這些顆粒干燥并將其與硬脂酸鎂混合5分鐘。將這種混合物在常規(guī)壓片機中進行壓縮(片劑形式見上)。該壓縮的指導壓縮力為15kN。
可以被口服給藥的混懸液組成1000mg本發(fā)明的化合物，1000mg乙醇(96％)，400mgRhodigel(得自FMC的黃原膠，Pennsylvania，USA)和99g水。
10ml口服混懸液相當于100mg本發(fā)明化合物的單劑量。
制備將Rhodigel混懸于乙醇中并將本發(fā)明的化合物加入到該混懸液中。在攪拌的同時向其中加入水。將該混合物攪拌約6小時直至Rhodigel溶脹結(jié)束。
可以被口服給藥的溶液組成500mg本發(fā)明的化合物，2.5g聚山梨醇酯和97g聚乙二醇400。20g口服溶液相當于100mg本發(fā)明化合物的單劑量。
制備在攪拌的情況下，將本發(fā)明的化合物混懸于聚乙二醇和聚山梨醇酯的混合物中。一直攪拌至本發(fā)明的化合物完全溶解。
i.v.溶液將本發(fā)明的化合物以低于飽和溶解度的濃度溶解于生理可耐受的溶劑(例如等滲的生理鹽水，5％葡萄糖溶液和/或30％PEG 400溶液)中。將該溶液過濾滅菌并用其對無菌無熱源的注射容器進行填充。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物， 其中R1表示氫或表示可被羥基、氨基、單-或二-(C1-C4)-烷基氨基、吡咯烷子基、哌啶子基、嗎啉代、哌嗪子基或N′-甲基哌嗪子基取代的(C1-C6)-烷基，R2表示被選自羥基、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-和二-(C1-C4)-烷基氨基的相同或不同取代基單-或二取代的(C2-C6)-烷基，R3表示選自鹵素、氰基、硝基、(C1-C6)-烷基、羥基、(C1-C6)-烷氧基、氨基、單-和二-(C1-C6)-烷基氨基、羧基和(C1-C6)-烷氧基羰基的取代基，其中烷基和烷氧基對于其部分各自可被氟取代最高至5次，和n表示數(shù)字0、1、2、3、4或5，其中，如果取代基R3出現(xiàn)多次，則其含義可以相同或不同。
2.如權(quán)利要求1所述的式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物，其中R1表示氫或表示可以被羥基、氨基或二甲基氨基取代的(C1-C4)-烷基，R2表示被選自羥基、甲氧基和氨基的相同或不同的取代基單-或二取代的(C2-C4)-烷基，R3表示選自鹵素、氰基、硝基、(C1-C4)-烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、氨基、單-和二-(C1-C4)-烷基氨基、羧基和(C1-C4)-烷氧基羰基的取代基，其中烷基和烷氧基對于其部分各自可被氟取代最高至3次，和n表示數(shù)字0、1或2，其中，如果取代基R3出現(xiàn)兩次，則其含義可以相同或不同。
3.如權(quán)利要求1或2所述的式(I)的化合物以及其鹽、溶劑化物和鹽的溶劑化物，其中R1表示氫，R2表示各自可以被選自羥基、甲氧基和氨基的相同或不同的取代基單-或二取代的乙基、正-丙基或異丙基，R3表示選自氟、氯、溴、氰基、硝基、甲基、乙基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基、氨基、單-和二甲基氨基、羧基、甲氧基羰基和乙氧基羰基的取代基，和n表示數(shù)字0、1或2，其中，如果取代基R3出現(xiàn)兩次，則其含義可以相同或不同。
4.制備如權(quán)利要求1至3所定義的式(I)化合物的方法，其特征在于，將式(II)的化合物 其中R1和R2各自具有權(quán)利要求1至3中所給出的含義，與式(III)的化合物進行反應(yīng)， 其中R3和n各自具有權(quán)利要求1至3中所給出的含義，和X表示一種適宜的離去基團，并且任選，用適宜的(i)溶劑和/或(ii)堿或酸將所得的式(I)的化合物轉(zhuǎn)化成其溶劑化物、鹽和/或鹽的溶劑化物。
5.如權(quán)利要求1至3中任意一項所定義的化合物，其用于治療和/或預防疾病。
6.如權(quán)利要求1至3中任意一項所定義的化合物在制備用于治療和/或預防高血壓以及心血管系統(tǒng)的其它疾病的藥物方面的用途。
7.藥物，其包含如權(quán)利要求1至3中任意一項所定義的化合物和與其結(jié)合的惰性無毒的適宜藥用的助劑。
8.藥物，其包含如權(quán)利要求1至3中任意一項所定義的化合物和與其結(jié)合的選自β阻滯劑、鈣拮抗劑、利尿劑、ACE抑制劑、AT1拮抗劑和硝酸鹽類物質(zhì)的其他活性化合物。
9.如權(quán)利要求7或8所述的藥物，其用于治療和/或預防高血壓以及心血管系統(tǒng)的其它疾病。
10.一種用于治療和/或預防人和動物的高血壓和心血管系統(tǒng)的其它疾病的方法，其通過給藥有效量的至少一種如權(quán)利要求1至3中任意一項所定義的化合物或如權(quán)利要求7至9中任意一項所定義的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的苯基氨基噻唑衍生物、其制備方法、其用于治療和/或預防疾病的應(yīng)用以及其在制備用于治療和/或預防疾病，優(yōu)選用于治療和/或預防高血壓和其它心血管疾病的藥物方面的用途。
文檔編號A61K31/4439GK101056875SQ200580038157
公開日2007年10月17日 申請日期2005年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月3日
發(fā)明者J·－K·厄古登, G·卡里格, U·羅森特雷特, B·阿爾布萊克特, K·亨寧格, J·胡特, N·迪德里克斯, P·內(nèi)爾, S·阿恩德特, W·胡布施, A·克諾爾, K·-H·施萊默, D·布羅姆 申請人:拜耳醫(yī)藥保健股份公司