專利名稱：作為選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑(sarms)的新的咪唑烷－2－酮衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的咪唑烷-2-酮衍生物、含有它們的藥用組合物及其在治療由雄激素受體介導(dǎo)的病癥和疾病中的應(yīng)用。更具體地說，本發(fā)明的化合物用于治療前列腺癌、良性前列腺增生(BPH)、多毛癥(hirsitutism)、脫發(fā)、神經(jīng)性食欲缺乏、乳腺癌、痤瘡、AIDS、惡病質(zhì)，以及作為男性避孕藥，和/或作為男性性功能增強(qiáng)劑。
背景技術(shù)：
雄性激素是一種動物的合成代謝類固醇激素，可控制肌肉和骨骼群、生殖系統(tǒng)的成熟、第二性征的發(fā)育以及雄性生殖力的維持。在女性，睪丸激素在大多數(shù)靶組織中被雌激素轉(zhuǎn)換，但是雄激素本身可在正常雌性的生理學(xué)，例如在大腦中發(fā)揮作用。在血清中發(fā)現(xiàn)的主要的雄激素是睪丸激素，而這是組織中例如睪丸和腦垂體中的有效化合物。在前列腺和皮膚中，睪丸激素被5α-還原酶轉(zhuǎn)換為雙氫睪酮(DHT)。由于DHT更緊密地與雄激素受體結(jié)合，因此它比睪丸激素更有效。
象所有的類固醇激素，雄激素與靶組織細(xì)胞內(nèi)的特異性受體結(jié)合，在本例中是雄激素受體。它是轉(zhuǎn)錄因子家族核受體的一員。雄激素與所述受體結(jié)合可激活該受體，并使其結(jié)合于鄰近靶基因的DNA結(jié)合位點(diǎn)。由此它與共激活的蛋白以及基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄因子交互作用以調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。因此，通過它的受體，雄激素在細(xì)胞內(nèi)引起基因表達(dá)的變化。這些變化最終可影響新陳代謝的排出物、細(xì)胞分化或增殖的結(jié)果，所述結(jié)果在靶組織的生理學(xué)中是明顯的。
盡管臨床上已經(jīng)在一段時(shí)期內(nèi)應(yīng)用了雄激素受體功能的調(diào)節(jié)劑，但是無論類固醇(Basaria，S.，Wahlstrom，J.T.，Dobs，A.S.，J.ClinEndocrinol Metab(2001)，86，第5108-5117頁；Shahidl，N.T.，ClinTherapeutics，(2001)，23，第1355-1390頁)，還是非類固醇(Newling，D.W.，Br.J.Urol.，1996，77(6)，第776-784頁)化合物都在與涉及它們的藥理學(xué)參數(shù)，包括男子女性型乳房、乳房觸痛和肝細(xì)胞毒性方面具有重要作用。此外，在接受抗凝治療的病人中，使用香豆素觀察到藥物-藥物交互作用。最后，非類固醇抗雄性激素的新陳代謝可危害到對苯胺過敏的病人。
非類固醇的雄激素受體的激動劑和拮抗劑用于治療多種病癥和疾病。更具體地說，可應(yīng)用雄激素受體的激動劑治療前列腺癌、良性前列腺增生、婦女的多毛癥、脫發(fā)、神經(jīng)性食欲缺乏、乳腺癌和痤瘡。雄激素受體的拮抗劑可用于男性避孕、增強(qiáng)男性性功能，以及治療癌癥、AIDS、惡病質(zhì)和其它疾病。
盡管如此，存在對雄激素受體的小分子的、非類固醇的拮抗劑的需求。我們現(xiàn)在描述一系列新的作為雄激素受體調(diào)節(jié)劑的吲哚衍生物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及式(I)的化合物 其中R1選自氫和低級烷基；R2和R3獨(dú)立地選自低級烷基、鹵素取代的低級烷基、-CH(OH)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷氧基)、-C(O)-N(RA)2、-C(O)-N(RB)2，條件是R2或R3之一是低級烷基或鹵素取代的低級烷基；其中，每一個RA獨(dú)立地選自氫或低級烷基；其中，每一個RB獨(dú)立地選自氫、低級烷基和芳基，條件是如果存在芳基，只能一個RB是芳基；其中，所述芳基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基或二(低級烷基)氨基；R4選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基、二(低級烷基)氨基、-C(O)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷氧基)、-C(O)-N(RA)2、-S(O)0-2-(低級烷基)、-SO2-N(RA)2、-N(RA)-C(O)-(低級烷基)、-N(RA)-C(O)-(鹵素取代的低級烷基)和芳基；其中，每一個RA獨(dú)立地選自氫或低級烷基；其中，所述芳基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基或二(低級烷基)氨基；a是從0到4的整數(shù)；b是從0到1的整數(shù)；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
一方面，本發(fā)明涉及含有藥學(xué)上可接受的載體和本文所述的任一化合物的藥用組合物。另一方面，本發(fā)明涉及通過混合本文所述的任一化合物與藥學(xué)上可接受的載體而制備的藥用組合物。本發(fā)明的又一個方面是制備藥用組合物的方法，所述方法包括將本文所述的任一化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
本發(fā)明還提供在有需要的患者中治療由雄激素受體介導(dǎo)的病癥和疾病的治療方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的本文所述的任一化合物或藥用組合物。
在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，提供在有需要的患者中治療雄激素受體介導(dǎo)的病癥的方法，所述病癥選自前列腺癌、良性前列腺增生、多毛癥、或用于男性避孕，該方法包括給予患者治療有效量的本文所述的任一化合物或藥用組合物。
本發(fā)明的另一個實(shí)施例是本文所述的任一化合物在藥物的制備中的應(yīng)用，所述藥物用于在有需要的患者中治療(a)前列腺癌、(b)良性前列腺增生、(c)多毛癥、(d)脫發(fā)、(e)神經(jīng)性食欲缺乏、(f)乳腺癌、(g)痤瘡、(h)AIDS、(i)惡病質(zhì)、用于(j)男性避孕、或用于(k)男性性功能增強(qiáng)。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式(I)的化合物 其中a、b、R1、R2、R3和R4如上述定義。當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的化合物具有至少一個手性中心時(shí)，它們可相應(yīng)地作為對映體存在。本發(fā)明的化合物是雄激素受體的調(diào)節(jié)劑并用于治療前列腺癌、良性前列腺增生(BPH)、多毛癥、脫發(fā)、神經(jīng)性食欲缺乏、乳腺癌、痤瘡、AIDS、惡病質(zhì)，以及作為男性避孕藥，和/或作為男性性功能增強(qiáng)劑。
本發(fā)明的代表性化合物列于表1。
表1
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“鹵素”表示氯、溴、氟和碘。
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“烷基”，無論單獨(dú)應(yīng)用或作為取代基的一部分應(yīng)用，均包括直鏈和支鏈。例如，烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基等等。除非另有說明，“低級”當(dāng)與烷基一起應(yīng)用時(shí)，表示含有1-4個碳原子組成的碳鏈。
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“鹵素取代的低級烷基”表示如上述定義的低級烷基基團(tuán)，其中一個或多個氫原子被鹵原子取代。合適的實(shí)施例包括，但不限于，三氟甲基、2，2，2-三氟-乙-1-基、氯甲基、氟甲基等。同樣地，術(shù)語“氟代低級烷基”表示如上述定義的低級烷基基團(tuán)，其中一個或多個氫原子被氟原子置換。合適的實(shí)施例包括，但不限于，氟甲基、氟乙基、三氟甲基、2，2，2-三氟-乙-1-基等。
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“烷氧基”表示上述直鏈或支鏈烷基基團(tuán)的氧醚基團(tuán)，例如，甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基、正-己氧基等。
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“環(huán)烷基”表示任何穩(wěn)定的四到八元單環(huán)、飽和環(huán)系統(tǒng)，例如環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“芳基”表示未取代的碳環(huán)芳基，例如苯基、萘基等。
除非另有說明，本文所用的術(shù)語“雜芳基”表示任何含有至少一個雜原子的五元或六元單環(huán)的芳環(huán)結(jié)構(gòu)，所述雜原子選自O(shè)、N和S，任選含有一到三個另外的獨(dú)立選自O(shè)、N和S的雜原子；或者指含有至少一個雜原子的九元或十元雙環(huán)芳環(huán)結(jié)構(gòu)，所述雜原子選自O(shè)、N和S，任選含有一到四個另外的獨(dú)立選自O(shè)、N和S的雜原子。所述雜芳基可連接于環(huán)上任何雜原子或碳原子上，因此產(chǎn)生穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。
合適的雜芳基的實(shí)施例包括，但不限于，吡咯基、呋喃基、噻吩基、唑基、咪唑基、吡唑基(purazolyl)、異唑基、異噻唑基、三唑基、噻二嗪基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡喃基、呋咱基、吲嗪基、吲哚基、異二氫吲哚基、吲唑基、苯唑呋喃基、苯唑噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、異喹啉基、異噻唑基、肉啉基、2，3-二氮雜萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基等。
除非另有說明，如本文所用，符號“*”表示立體生成的(stereogenic)存在。
當(dāng)具體的基團(tuán)是“取代的”(例如，環(huán)烷基、芳基、雜芳基等)時(shí)，該基團(tuán)可具有一個或多個取代基，優(yōu)選從一個到五個取代基，更優(yōu)選從一個到三個取代基，最優(yōu)選從一個到兩個取代基，獨(dú)立地選自取代基列表。
與取代基的引用一起，術(shù)語“獨(dú)立地”表示當(dāng)此類取代基可能多于一個時(shí)，這樣的取代基可以彼此相同或不同。
在應(yīng)用于本公開全文的標(biāo)準(zhǔn)命名下，首先描述指定側(cè)鏈的末端部分，隨后是朝向連接點(diǎn)的鄰近功能團(tuán)。因此，例如，一個“苯基-(C1-C6烷基)-氨基羰基-(C1-C6烷基)”取代基表示下式的基團(tuán)
用于說明書，特別是方案和實(shí)施例中的縮寫如下
本文所用術(shù)語“患者”，指作為治療、觀察或?qū)嶒?yàn)對象的動物，優(yōu)選哺乳動物，最優(yōu)選人類。
本文所用術(shù)語“治療有效量”，指在組織系統(tǒng)、動物或人類可引起能被研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師觀察到的生理或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的活性化合物或藥物的量，包括，但不限于，所治療疾病或病癥的癥狀的減輕。
本文所用術(shù)語“組合物”，指包括含有在規(guī)定的數(shù)量下的規(guī)定的成分的產(chǎn)品，以及任何直接或間接從在規(guī)定的數(shù)量下的規(guī)定的成分的組合中獲得的產(chǎn)品。
當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的化合物具有至少一個手性中心時(shí)，它們可相應(yīng)地作為對映體存在。當(dāng)所述化合物具有兩個或更多個手性中心時(shí)，它們可另外作為非對映體存在。應(yīng)該理解，所有這些異構(gòu)體及其混合物均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，此外，所述化合物的某些晶體形態(tài)也可作為多晶型形式存在，并且這樣的形式也將包括在本發(fā)明之內(nèi)。另外，某些所述化合物可以與水(例如水合物)或常用有機(jī)溶劑一起形成溶劑化物，這類溶劑化物也將包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
當(dāng)用于制備根據(jù)本發(fā)明化合物的方法產(chǎn)生立體異構(gòu)體的混合時(shí)，可通過常規(guī)技術(shù)例如制備型色譜法分離這些立體異構(gòu)體。可將所述化合物制備成外消旋的形式，或者既可以通過對映體有擇合成，也可以通過拆分制備各對映體。例如，可用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)將所述化合物拆分成它們的成分對映體，例如用旋光性的酸如(-)-二-對-甲苯甲酰-D-酒石酸和/或(+)-二-對-甲苯甲酰-L-酒石酸形成鹽形成非對映體對，接著經(jīng)分級結(jié)晶和游離堿的再生作用，。也可通過非對映體的酯或酰胺的形成拆分所述化合物，接著經(jīng)色譜分離和除去手性助劑?；蛘?，可用手性HPLC柱拆分所述化合物。
在用于制備本發(fā)明的化合物的任何方法中，可能需要和/或必須保護(hù)在任一有關(guān)分子上的敏感性基團(tuán)或反應(yīng)性基團(tuán)。這可通過應(yīng)用常規(guī)保護(hù)基團(tuán)實(shí)現(xiàn)，這類保護(hù)基團(tuán)描述于有機(jī)化學(xué)的保護(hù)基團(tuán)，J.F.W.McOmie編輯，Plenum出版，1973年；和T.W.Greene和P.G.M.Wuts，有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)，John Wiley和Sons，1991年。在此后適當(dāng)?shù)碾A段可用本領(lǐng)域已知方法去除所述保護(hù)基團(tuán)。
本發(fā)明的范圍內(nèi)包括本發(fā)明的化合物的前藥。通常，這類前藥將成為在體內(nèi)易于轉(zhuǎn)化成所需化合物的所述化合物的功能性衍生物。因此，在本發(fā)明的治療方法中，術(shù)語“給予”將包括用已經(jīng)具體公開的化合物或雖然可能沒有具體公開，但給予病人后可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為特定化合物的化合物治療所述各種病癥。例如，用于選擇和制備合適前藥衍生物的常規(guī)方法描述于前藥設(shè)計(jì)(H.Bundgaard Elsevier編輯，1985年)中。
用于醫(yī)學(xué)應(yīng)用的本發(fā)明化合物的鹽稱為“藥學(xué)上可接受的鹽”。然而，其它的鹽也可用于制備根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。本化合物的合適的藥學(xué)上可接受的鹽包括酸加成鹽，這類鹽可通過例如，將化合物溶液與與藥學(xué)上可接受的酸溶液混合而形成，所述藥學(xué)上可接受的酸有例如鹽酸、硫酸、富馬酸、馬來酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸。此外，當(dāng)本發(fā)明的化合物攜帶酸性部分，則其合適的藥學(xué)上可接受的鹽可包括堿金屬鹽，例如鈉鹽或鉀鹽；堿土金屬鹽，例如鈣鹽或鎂鹽；以及從合適的有機(jī)配體形成的鹽，例如，季銨鹽。代表性的藥學(xué)上可接受的鹽包括下述鹽乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、乙二胺四乙酸鈣、樟腦磺酸(camsylate)、碳酸鹽、氯化物、棒酸鹽、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽(edisylate)、estolate、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、谷氨酸鹽、羥乙酸對氨基苯胂酸鹽(glycollylarsanilate)、己基間苯二酚鹽(hexylresorcinate)、海巴明、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥萘甲酸鹽、碘化物、異硫代羥酸鹽(isothionate)、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、苦杏仁酸鹽、甲磺酰鹽、甲基溴化物、甲基硝酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽(mucate)、萘磺酸鹽、硝酸鹽、N-甲基葡糖胺銨鹽、油酸鹽、撲酸鹽(雙羥萘酸鹽)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽/雙磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、硫酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、鞣酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿鹽(teoclate)、甲苯磺酸鹽、三乙碘化物(triethiodide)和戊酸鹽。
可用于制備藥學(xué)上可接受的鹽的代表性的酸和堿包括下述酸和堿酸包括乙酸、2，2-二氯乙酸、氨酰酸、己二酸、海藻酸、抗壞血酸、L-天門冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、(+)-樟腦酸、樟腦磺酸、(+)-(1S)-樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)己氨磺酸、月桂基硫酸、乙烷-1，2-二磺酸、乙烷磺酸、2-氫hydrocy-乙烷磺酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、D-葡糖醛酸(D-glucoronic acid)、L-谷氨酸、α-氧代-戊二酸、羥基乙酸、馬尿酸(hipuric acid)、氫溴酸、鹽酸、(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸、乳糖酸、馬來酸、(-)-L-蘋果酸、丙二酸、(±)-DL-苦杏仁酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1，5-二磺酸、1-羥基-2-萘甲酸、煙酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕櫚酸、撲酸、磷酸、L-焦谷氨酸、水楊酸、4-氨基-水楊酸、癸二酸(sebaic acid)、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、對-甲苯磺酰酸以及十一碳烯酸；而堿包括氨、L-精氨酸、芐乙胺(benethamine)、苯乍生、氫氧化鈣、膽堿、丹醇、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、海巴明、lH-咪唑、L-賴氨酸、氫氧化鎂、4-(2-羥乙基)-嗎啉、哌嗪、氫氧化鉀、1-(2-羥乙基)-吡咯烷、仲胺、氫氧化鈉、三乙醇胺、氨丁三醇和氫氧化鋅。
根據(jù)下述方案1的步驟概述可制備通式(I)的化合物。
方案1相應(yīng)地，將合適的取代的式(II)化合物(已知化合物或用已知的方法制備的化合物)與苯甲基(b＝1)伯胺或芳基(b＝0)伯胺在有機(jī)溶劑或其混合液如苯、甲苯、二甲苯等中反應(yīng)，所述反應(yīng)可任選在催化劑，如甲苯磺酸、苯磺酸、硫酸等存在下，在迪安斯塔克(Dean-Stark)條件下加熱來進(jìn)行，產(chǎn)生對應(yīng)的式(III)化合物?；蛘?，將式(II)化合物和對應(yīng)的苯甲基(b＝1)或芳基(b＝0)伯胺的混合物在有機(jī)溶劑，例如THF、甲醇、乙醇等中，與還原劑例如氰基氫硼化鈉、三乙酸基氫硼化鈉等反應(yīng)，直接產(chǎn)生對應(yīng)的式(IV)化合物。
將式(III)化合物與還原劑例如氫氣(在催化劑鈀存在下)、氫硼化鈉、氰基氫硼化鈉等在有機(jī)溶劑，例如甲醇、乙醇、THF等中反應(yīng)，產(chǎn)生對應(yīng)的式(IV)化合物。
根據(jù)已知的方法，將式(IV)化合物去保護(hù)，例如通過與酸如三氟甲烷磺酸、鹽酸、三氟乙酸等在有機(jī)溶劑或其混合液如甲醇/水、乙醇/水、THF等中反應(yīng)，產(chǎn)生對應(yīng)的式(V)化合物。
將式(V)化合物與試劑如羰基二咪唑、氯代甲酸對-硝基苯基酯、三光氣、光氣等在堿如三乙胺、吡啶等存在下，在有機(jī)溶劑如THF、二氯甲烷等中反應(yīng)，產(chǎn)生對應(yīng)的式(Ia)化合物?；蛘撸瑢⑹?Ia)化合物與堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀等在有機(jī)溶劑或其混合液如甲醇/水、乙醇/水、THF等中反應(yīng)，產(chǎn)生對應(yīng)的式(Ib)化合物。或者，將式(Ib)化合物與草酰氯在有機(jī)溶劑如二氯甲烷、二氯乙烷等中反應(yīng)，所述反應(yīng)任選在催化量的DMF存在下進(jìn)行，形成中間體?；龋瑢⒃擋；扰c適當(dāng)取代的伯胺反應(yīng)，獲得對應(yīng)的式(Ic)化合物.
下述所列實(shí)施例式為了幫助理解本發(fā)明，并不意欲和不應(yīng)該被分析為對隨后列于權(quán)利要求書的本發(fā)明的任何方面的局限。
實(shí)施例12-叔-丁氧基羰基氨基-3-(4-氟-苯基氨基)-2-甲基-丙酸甲酯(1a)
向溶于甲醇(25ml)中的2-叔-丁氧基羰基氨基-2-甲基-3-氧代-丙酸甲酯(2.35g，6.71mmol)溶液中加入4-氟苯胺(0.53ml，5.59mmol)和乙酸(0.16ml，2.80mmol)。滴加溶于甲醇(25ml)中的氰基氫硼化鈉(188mg，2.99mmol)溶液并在加入后于室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)。真空除去溶劑并將殘留物溶解于DCM(50ml)中。將所述有機(jī)溶液用碳酸鈉水溶液(20ml，1N)處理、攪拌20分鐘、并去除水相。濃縮有機(jī)層，接著用快速層析(SiO2，DCM)法純化殘留物，得到黃色油性的標(biāo)題化合物(970mg，53％)。
MS(m/Z)＝325(M-H)表A用實(shí)施例1中的所述方法產(chǎn)生的類似物
實(shí)施例22-叔-丁氧基羰基氨基-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-2-甲基-丙酸甲酯(2a)
向溶于甲苯(70ml)中的2-叔-丁氧基羰基氨基-2-甲基-3-氧代-丙酸甲酯(1.40g，6.06mmol)溶液中加入4-甲氧基芐胺(0.80ml，6.12mmol)和對-甲苯磺酸(ca.10mg)。將迪安斯塔克汽水分離器和回流冷凝器安裝在燒瓶上，并在氮?dú)庀录訜峄亓?小時(shí)。真空除去溶劑得到黃色油性的亞胺，它具有適于下一步應(yīng)用的純度。
將殘留物溶解于甲醇(30ml)中。滴加溶于甲醇(15ml)的氫硼化鈉(310mg，8.17mmol)溶液，并在加入后于室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)。真空除去溶劑并將殘留物溶解于DCM(50ml)中。將所述有機(jī)溶液用碳酸鈉水溶液(20ml，1N)處理、攪拌20分鐘、并去除水相。濃縮有機(jī)層，接著用快速層析(SiO2，DCM)法純化殘留物，得到黃色油性的標(biāo)題化合物(1.85g，99％)。
MS(m/Z)＝353(MH+)表B用實(shí)施例2中的所述方法產(chǎn)生的類似物
實(shí)施例3
2-氨基-3-(4-氟-苯基氨基)-2-甲基-丙酸甲酯(3a)
向溶于甲醇(10ml)中的2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(4-氟-苯基氨基)-2-甲基-丙酸甲酯(954mg，2.92mmol)溶液中加入鹽酸(3ml，12N)。將該混合物在55℃下加熱直至MS指示沒有起始物質(zhì)殘留。在冷卻至周圍環(huán)境后，將所述溶液用氫氧化鈉水溶液(40ml，1N)處理，并用DCM萃取數(shù)次。濃縮合并的萃取物并用快速層析(SiO2，5％MeOH/DCM)法純化，產(chǎn)生黃色油性的標(biāo)題化合物(305mg，46％)。
MS(m/Z)＝227(MH+)表C用實(shí)施例3中的所述方法產(chǎn)生的類似物
實(shí)施例41-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸甲酯(4a)
將溶于THF(10ml)中的2-氨基-3-(4-氟-苯基氨基)-2-甲基-丙酸甲酯(282mg，1.25mmol)溶液用三乙胺(2.00ml，14.3mmol)處理，并在氬氣下冷卻至0℃。向反應(yīng)液中滴加三光氣(211mg，0.71mmol)溶液，并使混合物達(dá)到室溫。1小時(shí)后，用DCM稀釋、用1N鹽酸洗滌該混合物，并真空濃縮有機(jī)層。得到的殘留物用快速層析法純化，得到產(chǎn)物(260mg，82％)。
MS(m/Z)＝251(M-H)表D用實(shí)施例4中的所述方法產(chǎn)生的其它化合物
實(shí)施例51-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(5a)
將溶于甲醇(15ml)中的1-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸甲酯(247mg，0.98mmol)溶液用氫氧化鈉水溶液(1.50ml，6.38mmol)處理。室溫下攪拌1小時(shí)后，用1N鹽酸處理該混合物至pH 1，用過濾法收集得到的白色沉淀(135mg，58％)。
MS(m/Z)＝237(M-H)表E用實(shí)施例5中的所述方法產(chǎn)生的其它化合物
實(shí)施例61-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-酰胺(6a)
將溶于DCM(15ml)中的1-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(120mg，0.50mmol)溶液用草酰氯(0.09ml，1.03mmol)和一滴無水DMF處理。室溫下攪拌1小時(shí)后，真空除去溶劑。向殘留物中加入4-氨基-2-(三氟甲基)芐睛(277mg，1.49mmol)和的三乙胺(0.28ml，2.01mmol)的無水DCM(10ml)溶液。室溫下攪拌過夜，真空濃縮混合物，并用快速層析法純化殘留物，得到黃褐色固體的標(biāo)題化合物(110mg，54％)。
MS(m/Z)＝405(M-H)表F用實(shí)施例6中的所述方法產(chǎn)生的其它化合物
實(shí)施例7應(yīng)用大鼠腹部前列腺胞質(zhì)溶膠結(jié)合雄激素受體大鼠前列腺胞質(zhì)溶膠的制備每次制備采用雄性Sprague Dawley大鼠或Wistar大鼠(CharlesRiver，200-300g)。在制備胞質(zhì)溶膠前一天，用標(biāo)準(zhǔn)的外科操作閹割大鼠。
將大鼠用二氧化碳窒息使其安樂死。迅速取出大鼠的前列腺并放置于預(yù)先冷凍的、預(yù)先稱重的50ml塑料試管中的冰上。一個試管中放置前列腺不超過5個。然后稱取該試管重量并計(jì)算前列腺組織的濕重。然后向冷凍的前列腺組織中加入1ml/mg組織的冷凍均化緩沖液。所述均化緩沖液用10mM Tris鹽酸，pH 7.4、1mM鉬酸鈉、1.5mM EDTA、1mM二硫蘇糖醇、10％(體積比)甘油和1％蛋白酶抑制劑合劑(Sigma P 8340)混合新鮮制備。
在冷凍間用預(yù)先冷凍的polytron PT 3000均化劑(Brinkmann)均化所述前列腺組織。將速度設(shè)置為20、每次脈沖10秒總共3次，進(jìn)行均化反應(yīng)。在均化過程中將含有前列腺組織的試管保留在冰上。在脈沖串之間允許勻漿在冰上放置20秒。然后將勻漿放入預(yù)先冷凍的、3ml的聚碳酸酯超速離心管中，并在4℃下以100,000rpm的轉(zhuǎn)速在TL-100超速離心機(jī)的TLA-100轉(zhuǎn)子上離心12分鐘。將得到的上清液以1ml分裝貯存于-80℃直至需要時(shí)。
根據(jù)應(yīng)用于上述大鼠胞質(zhì)溶膠的實(shí)施例86所述的方案檢測雄激素受體的結(jié)合力。
在結(jié)合實(shí)驗(yàn)中通過檢測試驗(yàn)化合物的稀釋液(通常是雙份，10μM)測定％抑制率。測量每孔的計(jì)數(shù)并測定抑制百分率。在結(jié)合實(shí)驗(yàn)中通過檢測試驗(yàn)化合物的系列稀釋液(通常是雙份，從10μM開始的10的半對數(shù)稀釋液)測定％雄激素受體結(jié)合的IC50。測量每孔的計(jì)數(shù)并用線性回歸測定IC50。
根據(jù)上述方法檢測本發(fā)明的代表性化合物對雄激素受體的結(jié)合并將結(jié)果列于表B。對化合物進(jìn)行一次以上的檢測，將每次結(jié)果單獨(dú)列于下面的表2中。
表2雄激素受體結(jié)合力(大鼠胞質(zhì)溶膠)
實(shí)施例8COS-7全細(xì)胞雄激素受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)，腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)第一天將含有10％(體積比)經(jīng)木炭處理過的胎牛血清(Hyclone)并不含酚紅的DMEM/F12(GIBCO)溶液的COS-7細(xì)胞以每孔20,000個細(xì)胞平鋪于96孔培養(yǎng)板上。然后將細(xì)胞在37℃、潮濕環(huán)境、5％(體積比)二氧化碳下培養(yǎng)過夜。
第二天如果需要，用100％(體積比)DMSO稀釋試驗(yàn)化合物制備試驗(yàn)化合物溶液。每一稀釋產(chǎn)生的溶液是最后所需的試驗(yàn)濃度的625倍。
然后，將1ml不含酚紅的DMEM/F12用移液管按2ml/孔加入96孔的測定板的每孔中。然后將4μl 625X的試驗(yàn)化合物稀釋液用移液管加入測定板的每孔中。用移液管小心將每孔混合。
在一支15ml或50ml無菌離心管中，制備溶于不含酚紅的DMEM/F12的2.5nM的含氚的甲基-trienolone稀釋液([3H]R1881；Perkin-Elmer)。
在15ml或50ml無菌離心管中，制備溶于DMEM/F12中的腺病毒AdEasy+rAR(a moi of 1∶50)的溶液，加入每孔。將96孔板倒轉(zhuǎn)除去培養(yǎng)基，并在無菌毛巾上倒轉(zhuǎn)培養(yǎng)板簡單地干燥。在除去培養(yǎng)基之后盡快在每孔中加入40μl試驗(yàn)化合物的稀釋液，每個檢測按一式兩份進(jìn)行。然后每孔加入40μl 2.5nM的[3H]R1881和20μl腺病毒稀釋液。然后將培養(yǎng)板在37℃、潮濕環(huán)境、5％(體積比)二氧化碳下孵育48小時(shí)。
第四天倒轉(zhuǎn)上述孵育過的培養(yǎng)板除去培養(yǎng)基并干燥。然后用0.35ml的1×PBS洗滌每孔。倒轉(zhuǎn)培養(yǎng)板除去PBS并干燥培養(yǎng)板。然后每孔加入50μl 0.5％(體積比)溶于1×PBS的Triton X-100(Sigma)，并將培養(yǎng)板放在旋轉(zhuǎn)震動器上震蕩5分鐘。然后將每孔的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到96孔OptiPlate(Packard)閃爍板。然后每孔加入0.2ml Microscint-20(Packard)并將每孔內(nèi)容物移至TopCount(Packard)。
在結(jié)合實(shí)驗(yàn)中通過檢測試驗(yàn)化合物的稀釋液(通常是一式兩份，10μM)來測定抑制百分率。測量每孔的計(jì)數(shù)并確定抑制百分率。在結(jié)合實(shí)驗(yàn)中通過檢測試驗(yàn)化合物的系列稀釋液(通常是一式兩份，從10μM開始10的半對數(shù)稀釋液)來測定雄激素受體結(jié)合的IC50。測量每孔的計(jì)數(shù)并用線性回歸測定IC50。
根據(jù)上述方法檢測本發(fā)明代表性化合物對雄激素受體的結(jié)合力并將結(jié)果列于表C。除非另外注明，用3000nM的濃度測定COS結(jié)合的％抑制率。對化合物進(jìn)行一次以上的檢測，將每次結(jié)果單獨(dú)列于下面的表3中。
表3COS結(jié)合
實(shí)施例9L929雄激素受體功能檢測，腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)第一天將混懸于含有10％(體積比)經(jīng)木炭處理過的胎牛血清(Hyclone)并不含酚紅的DMEM/F12(GIBCO)溶液的L929細(xì)胞以每孔20,000個細(xì)胞平鋪于96孔培養(yǎng)板上。然后將培養(yǎng)板在37℃、潮濕環(huán)境、5％(體積比)二氧化碳下孵育過夜。
第二天如果需要，用100％(體積比)DMSO稀釋制備試驗(yàn)化合物稀釋液。將每一稀釋進(jìn)行1250倍稀釋至最后期望的試驗(yàn)濃度。
首先，將2ml不含酚紅的DMEM/F12用移液管按2ml/孔加入96孔的測定板的每孔中。然后將4μl 1250X的試驗(yàn)化合物稀釋液用移液管加入測定板的每孔中。用移液管小心將每孔混合。
在一支15ml或50ml無菌離心管中，制備溶于不含酚紅的DMEM/F12的2.5nM(2.5×)的R1881(甲基-trienolone)稀釋液。在第二支15ml或50ml無菌離心管中，制備含有與第一支管等量的DMEM溶液和與用于第一支管的R1881的量相等體積的100％(v/v)DMSO的溶液溶液。
在15ml或50ml無菌離心管中，制備溶于DMEM/F12中的腺病毒AdEasy+rAR(an moi of 1∶500)的溶液，加入每孔。將96孔板倒轉(zhuǎn)除去培養(yǎng)基，倒轉(zhuǎn)并簡單地干燥。在除去培養(yǎng)基之后盡快在每孔加入40μl未標(biāo)記的試驗(yàn)化合物的稀釋液，每個檢測按一式兩份進(jìn)行。在每個指定作拮抗試驗(yàn)的孔中，加入40μl 2.5nM的R1881稀釋液以檢測拮抗試驗(yàn)。在每個指定作激動劑試驗(yàn)的孔中，每孔加入40μlDMSO稀釋液。然后在所有孔中按每孔加入20μl腺病毒稀釋液。然后將培養(yǎng)板在37℃、潮濕環(huán)境、5％(體積比)二氧化碳下孵育48小時(shí)。
第四天每孔加入100μl穩(wěn)定的-Glo熒光素酶測定底物(Promega)，并將培養(yǎng)板放在旋轉(zhuǎn)震動器上震蕩1分鐘。然后將培養(yǎng)板在室溫下避光孵育1小時(shí)。然后將每孔的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到白色微量滴定板(Packard)并在Luminoskan Ascent(Thermo實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng))上讀數(shù)。
除非另外注明，用3000nM的濃度，通過檢測試驗(yàn)化合物的稀釋液來測定L929 AR的活性百分率。用3000nM的濃度，通過檢測試驗(yàn)化合物的稀釋液來測定L929的抑制百分率。通過檢測試驗(yàn)化合物的系列稀釋液(通常是一式兩份，從10μM開始10的半對數(shù)稀釋液)來測定EC50和IC50。測量每孔的熒光素酶的活性并用線性回歸測定EC50和IC50。
根據(jù)上述方法檢測本發(fā)明代表性的化合物對雄激素受體的功能活性，其結(jié)果列于表4。
表4 L929雄激素受體功能檢測
實(shí)施例10
體內(nèi)腹部前列腺和精液囊重量檢測給予未成熟的(大約50g)閹割的雄性Sprague Dawley大鼠(CharlesRiver)試驗(yàn)化合物，一天一次共五天(通常按40mg/Kg口服給予，體積為0.3ml、含30％環(huán)糊精或0.5％甲基纖維素溶媒)，并同時(shí)給予丙酸睪酮(以2mg/Kg在頸項(xiàng)背部皮下注射給予，體積為0.1ml在芝麻油中)。第六天，用二氧化碳將大鼠窒息使其安樂死。取出腹部前列腺和精液囊并稱量其濕重。以睪酮提高的組織重量的抑制百分率來測定試驗(yàn)化合物的活性，以給予載體的對照組設(shè)為0％，而以單獨(dú)給予睪酮的對照組設(shè)為100％。
如果前列腺的重量未得到調(diào)節(jié)，重量為≤60mg或≥84mg，則稱試驗(yàn)化合物為“有活性的”。
根據(jù)上述方法檢測化合物6a、4b、6h、4e和5e，并測定為“有活性的”。
根據(jù)上述方法檢測化合物6e、6j、5a、4a、6g、4d、5d、4c、5c、6c、5b、6b、6d和6e，并測定為“無活性的”。注意雖然這些化合物中的某些顯示其在前列腺和/或精液囊上能或不能發(fā)揮作用，由于它們不符合上述定義的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，本文將它們列于“無活性的”表中。
雖然前述說明書提出本發(fā)明的原則，并為說明的目的提供實(shí)施例，仍然應(yīng)該理解本發(fā)明的實(shí)踐包括落入下述權(quán)利要求書及其等價(jià)物范圍內(nèi)的所有的常規(guī)變化、調(diào)整和/或修飾。
權(quán)利要求
1.一種式(I)的化合物， 其中R1選自氫和低級烷基；R2和R3獨(dú)立地選自低級烷基、鹵素取代的低級烷基、-CH(OH)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷氧基)、-C(O)-N(RB)2，條件是R2或R3之一或者是低級烷基，或者是鹵素取代的低級烷基；其中，每一個RB獨(dú)立地選自氫、低級烷基和芳基，條件是芳基如果存在，只能一個RB是芳基；其中，所述芳基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基或二(低級烷基)氨基；R4選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基、二(低級烷基)氨基、-C(O)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷氧基)、-C(O)-N(RA)2、-S(O)0-2-(低級烷基)、-SO2-N(RA)2、-N(RA)-C(O)-(低級烷基)、-N(RA)-C(O)-(鹵素取代的低級烷基)和芳基；其中，每一個RA獨(dú)立地選自氫或低級烷基；其中，所述芳基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基或二(低級烷基)氨基；a是從0到4的整數(shù)；b是從0到1的整數(shù)；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2是低級烷基或鹵素取代的低級烷基，及R3是-CH(OH)-(低級烷基)、-C(O)-(低級烷基)、羧基、-C(O)-(低級烷氧基)、-C(O)-N(RB)2；其中，每一個RB獨(dú)立地選自氫、低級烷基和芳基，條件是如果存在芳基，只能一個RB是芳基；其中，所述芳基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基或二(低級烷基)氨基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氫，R2是低級烷基或鹵素取代的低級烷基以及R3是羧基、-C(O)-(低級烷基)、-C(O)-N(RB)2；其中，每一個RB獨(dú)立地選自氫、低級烷基和芳基，前提是如果存在芳基，只能一個RB是芳基；其中，所述芳基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、羧基、低級烷基、鹵素取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素取代的低級烷氧基、氰基、硝基、氨基、低級烷基氨基或二(低級烷基)氨基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，所述化合物選自4-甲基-2-氧代-1-苯基-咪唑烷-4-甲酰苯胺、4-甲基-2-氧代-1-苯基-咪唑烷-4-羧酸(4-硝基-3-三氟甲基-苯基)-酰胺、4-甲基-2-氧代-1-苯基-咪唑烷-4-羧酸(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-酰胺、1-(4-氟-芐基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-酰胺和1-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-酰胺。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，所述化合物具有式1-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-酰胺。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，所述化合物具有式1-(4-氟-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸(3，5-二(三氟甲基)-苯基)-酰胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，所述化合物具有式4-甲基-2-氧代-1-苯基-咪唑烷-4-羧酸甲酯。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，所述化合物具有式1-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸甲酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，所述化合物具有式1-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-4-甲基-2-氧代-咪唑烷-4-羧酸。
10.一種藥用組合物，它含有藥學(xué)上可接受的載體和權(quán)利要求1的化合物。
11.一種在有需要的患者中治療由雄激素受體介導(dǎo)的病癥的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中的病癥選自前列腺癌、良性前列腺增生(BPH)、多毛癥、脫發(fā)、神經(jīng)性食欲缺乏、乳腺癌、痤瘡、AIDS、惡病質(zhì)、男性避孕、以及男性性功能障礙。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有通式I結(jié)構(gòu)的新的咪唑烷－2－酮衍生物，其中a、b、R
文檔編號A61P5/26GK101056862SQ200580038111
公開日2007年10月17日 申請日期2005年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月10日
發(fā)明者J·C·蘭特, Z·隋 申請人:詹森藥業(yè)有限公司