作為mknk激酶抑制劑的取代的吡咯并嘧啶基氨基-苯并噻唑酮的制作方法
【專利說明】作為MKNK激酶抑制劑的取代的吡咯并嘧啶基氨基-苯并噻 哩酬
[0001] 本發(fā)明涉及本文描述和定義的通式I的取代的吡咯并嘧啶基氨基-苯并噻唑酮化 合物，涉及制備所述化合物的方法，涉及用于制備所述化合物的中間體化合物，涉及包含所 述化合物的藥物組合物和藥物結(jié)合物，以及涉及所述化合物作為單獨(dú)藥劑或與其他活性成 分聯(lián)用，在制備用于治療或預(yù)防疾病，特別是過度增殖性和/或血管發(fā)生性疾病的藥物組 合物中的用途。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 本發(fā)明涉及抑制MKNK1激酶（也稱作MAP激酶作用激酶，Mnkl)和/或MKNK2激 酶（也稱作MAP激酶作用激酶，Mnk2)的化合物。
[0004] 人MKNKs包括一組由兩個(gè)基因（基因符號(hào)：MKNK1和MKNK2)通過選擇性剪接編 碼的四種蛋白質(zhì)。b-形式缺少位于C-末端的MAP激酶結(jié)合域。MKNK1和MKNK2的催化 域十分相似，都在亞區(qū)VII包含一個(gè)特殊的DFD(天冬氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸）基 序，而這在其他蛋白激酶中通常是DFG(天冬氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸）基序，這一特殊 基序被認(rèn)為改變了ATP的結(jié)合[Jauchetal.，Structure13, 1559-1568, 2005 和Jauch etal.，EMBOJ25, 4020-4032, 2006]。MKNKla結(jié)合于ERK和p38MAP激酶并受其激活，但 不受JNK1激活。MKNK2a結(jié)合于ERK并僅受其激活。MKNKlb在任何條件下都呈低活性， MKNK2b具有不依賴于ERK或p38MAP激酶的基礎(chǔ)活性[BuxadeMetal.，F(xiàn)rontiersin Bioscience5359-5374,May1, 2008]〇
[0005] 已證明MKNKs使真核細(xì)胞起始因子4E(eIF4E)、不均一核RNA結(jié)合蛋白A1(hnRNP Al)、多聚嘧啶束結(jié)合蛋白相關(guān)剪切因子（PSF)、胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)和快速發(fā)育生 長(zhǎng)因子同源蛋白 2 抗體（Sprouty2(hSPRY2))磷酸化[BuxadeMetal.,Frontiersin Bioscience5359-5374,May1, 2008]〇
[0006]KO小鼠研宄表明，eIF4E是致癌基因，它在許多惡性腫瘤中擴(kuò)增，且僅受MKNKs蛋 白磷酸化[Koniceketal.，CellCycle7:16,2466-2471，2008;Uedaetal.，MolCell Biol24,6539-6549,2004]。eIF4E在啟動(dòng)細(xì)胞mRNAs翻譯中具有舉足輕重的作用。eIF4E 結(jié)合細(xì)胞mRNAs5'端的7-甲基鳥苷帽子，并將其作為eIF4F復(fù)合物的一部分遞送至核糖 體，eIF4F復(fù)合物還包括eIF4G和eIF4A。盡管所有加帽mRNAs的翻譯都需要eIF4E，但有少 量mRNAs的翻譯格外依賴于高活性的eIF4E。這些所謂的"弱mRNAs"由于其又長(zhǎng)又復(fù)雜的 5'UTR區(qū)而通常翻譯效率較低，它們編碼的蛋白質(zhì)在惡性腫瘤的各個(gè)方面都扮演著重要角 色，這些蛋白質(zhì)包括VEGF、FGF-2、c-Myc、細(xì)胞周期蛋白D1、survivin、BCL-2、MCL-1、MMP-9 和肝素酶（h印aranase)等。在許多人類癌癥中，eIF4E的表達(dá)和功能增強(qiáng)，這與疾病進(jìn)展 直接相關(guān)[Koniceketal.，CellCycle7:16, 2466-2471，2008]〇
[0007]MKNK1和MKNK2是僅有的已知在Ser209磷酸化eIF4E的激酶。總翻譯速率 不受eIF4E磷酸化的影響，但有人認(rèn)為eIF4E磷酸化有助于形成多核糖體（即多個(gè) 核糖體附著在一條mRNA上），這最終使得"弱mRNAs"的翻譯效率更高[BuxadeMet al.frontiersinBioscience5359-5374,May1,2008]?；蛘?，MKNK蛋白將eIF4E磷酸 化可能有助于eIF4E從5'帽子上釋放，使得48S復(fù)合物能夠沿著"弱mRNA"移動(dòng)以尋找起 始密碼子[BlagdenSPandWillisAE,NatRevClin0ncol.8(5):280-291, 2011]。相 應(yīng)地，eIF4E磷酸化的增強(qiáng)預(yù)示著非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后不良[Yoshizawaetal.,Clin CancerRes. 16(1) : 240-248, 2010]。進(jìn)一步的數(shù)據(jù)表明MKNK1在致癌上發(fā)揮功能性作 用，若在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞中過度表達(dá)組成型活化MKNK1而非激酶死亡MKNK1，則加快 腫瘤形成[ChrestensenC.A.etal.，GenesCells12，1133_1140,2007]。另外，在乳 腺癌中，MKNK蛋白磷酸化和活性的增強(qiáng)與HER2的過度表達(dá)有關(guān)[Chrestensen，C.A.et al.，J.Biol.Chem. 282, 4243 - 4252, 2007]。在小鼠Ey-Myc轉(zhuǎn)基因造血干細(xì)胞致腫瘤 模型中，組成型活化MKNK1，而非激酶死亡MKNK1，也加快腫瘤生長(zhǎng)。對(duì)發(fā)生S209D突變 的eIF4E進(jìn)行分析，得到了可比較的結(jié)果。S209D突變模擬了其MKNK1磷酸化位點(diǎn)的磷 酸化形式。相反地，eIF4E的非磷酸化形式減緩了腫瘤生長(zhǎng)[WendelHG，etal.，Genes Dev. 21 (24) : 3232-3237, 2007]。一種阻斷eIF4E磷酸化的選擇性MKNK抑制劑在體外誘導(dǎo) 癌細(xì)胞凋亡并抑制癌細(xì)胞的增殖和其在軟瓊脂中的生長(zhǎng)。這種抑制劑還抑制B16黑色素 瘤實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移的發(fā)展和HCT116結(jié)腸癌皮下移植瘤的生長(zhǎng)，而不影響體重[Koniceket al.，CancerRes. 71 (5) : 1849-1857, 2011]。對(duì)一組胰腺導(dǎo)管腺癌患者進(jìn)行免疫組織化學(xué) 篩查，發(fā)現(xiàn)eIF4E磷酸化與疾病等級(jí)有關(guān)，早發(fā)的疾病預(yù)后更差。另外，基于臨床前的體外 研宄結(jié)果，有人認(rèn)為MNK/eIF4E路徑代表一種逃跑路徑，胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞利用這一路徑 來抵抗化療治療（如吉西他濱）[AdessoL，etal.，0ncogene.2012Jul16]。此外，觀察到 雷帕霉素通過一種MKNK依賴機(jī)制激活多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株和原發(fā)性樣本的MKNK1激酶活 性。MKNK活性的藥理學(xué)抑制或MKNK1的基因沉默防止雷帕霉素同系物誘導(dǎo)的c-myc內(nèi)部 核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（IRES)的活性上調(diào)。盡管單獨(dú)使用雷帕霉素對(duì)myc蛋白的表達(dá)幾乎沒有 影響，但當(dāng)其與MKNK抑制劑聯(lián)用，則可終止myc蛋白的表達(dá)。這些數(shù)據(jù)為靶向MKNK激酶治 療的mTOR抑制劑的聯(lián)合用藥提供了理論依據(jù)[ShiYetal.，Oncogene. 2012Feb27]?？?之，eIF4E由于MKNK蛋白活性而發(fā)生磷酸化，這會(huì)促進(jìn)細(xì)胞的增殖和存活，是（疾?。夯?的關(guān)鍵。抑制MKNK活性可能提供一種易操作的癌癥治療方法。
[0008] W0 2006/136402 A1和W0 2007/059905 A2(Develogen AG)公開了噻吩并嘧 啶-4-胺和其用于預(yù)防和/或治療那些可通過抑制Mnkl和/或Mnk2激酶活性而受影響的 疾病的用途。
[0009] W0 2010/023181 Al, W0 2011/104334 Al, W0 2011/104337 Al, W0 2011/104338 A1和W0 2011/104340 Al(Boehringer Ingelheim)涉及用于預(yù)防和/或治療那些可通過抑 制Mnkl和/或Mnk2激酶活性而受影響的疾病的噻吩并嘧啶-4-胺。
[0010] US2011/0160203Al(ArQule)記載了作為抗有絲分裂劑的取代的吡咯并-氨基 嘧啶化合物。該美國(guó)申請(qǐng)權(quán)利要求1的通式I一般性涵蓋了吡咯并嘧啶基氨基-苯并噻唑 酮一類的化合物。但該專利申請(qǐng)的說明書中沒有公開苯丙噻唑酮基取代的吡咯并-氨基嘧 啶的具體實(shí)施例。
[0011] W0 2005/117890A2特別公開了吡咯并-氨基嘧啶化合物用于治療C-C趨化因子 介導(dǎo)的癥狀。該化合物沒有攜帶苯并噻唑基基團(tuán)。
[0012] 因此，上文所述的現(xiàn)有技術(shù)沒有公開本文定義的本發(fā)明通式I的具體的取代的吡 咯并嘧啶基氨基-苯并噻唑酮化合物，或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、N-氧化物、水合物、溶 劑化物或鹽，或上述的混合物，或它們的藥理活性，并且所述化合物在上下文中稱為"本發(fā) 明化合物"。
[0013] 現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)所述本發(fā)明化合物具有令人驚奇的且有益的性質(zhì)，這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā) 明的基礎(chǔ)。
[0014] 具體地說，已經(jīng)驚奇地發(fā)現(xiàn)所述本發(fā)明化合物可有效抑制MKNK1激酶并因此可用 于治療或預(yù)防失控的細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和/或存活，不適當(dāng)?shù)募?xì)胞免疫反應(yīng)或不適當(dāng)?shù)募?xì)胞 炎癥反應(yīng)的疾病，或伴隨失控的細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和/或存活，不適當(dāng)?shù)募?xì)胞