專利名稱：二芳基甲基哌嗪衍生物及其制備并用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新化合物，其制備方法，其用途以及包括新化合物的藥物組合物。所述的新化合物可用于治療，尤其可用于治療疼痛、焦慮癥和功能性胃腸道疾病。
背景技術(shù)：
已經(jīng)確證δ受體在許多身體機(jī)能如循環(huán)以及疼痛體系中發(fā)揮作用。因此δ受體配體具有可用作鎮(zhèn)痛藥，和/或以及作為抗高血壓藥的潛在用途。也已經(jīng)證實(shí)δ受體配體具有免疫調(diào)節(jié)活性。
目前已經(jīng)確證了至少三種不同的阿片受體(μ、δ和κ)，并且所有這三種明顯存在在許多物種包括人的中樞以及外周神經(jīng)系統(tǒng)中。當(dāng)一或多種這些受體被激活的時(shí)候，已經(jīng)在許多動(dòng)物模型中觀察到無痛覺。
除了少數(shù)例外，目前已有的選擇性阿片δ配體本質(zhì)上肽類物質(zhì)并且不適合經(jīng)全身途徑給藥。非肽類δ-激動(dòng)劑的一個(gè)實(shí)例為SNC80(Bilsky E.J.等，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics，273(1)，pp.359-366(1995))。
現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)證實(shí)的許多δ激動(dòng)劑化合物具有許多缺點(diǎn)，藥代動(dòng)力學(xué)差并且當(dāng)全身途徑給藥的時(shí)候不具有鎮(zhèn)痛作用。此外，已有記載，當(dāng)全身給藥的時(shí)候許多δ激動(dòng)劑化合物顯示顯著的驚厥作用。
美國(guó)專利6,130,222描述了一些δ-激動(dòng)劑。
因此，仍然存在改善的δ-激動(dòng)劑的需求。
發(fā)明描述在本說明書中除非另有說明，本發(fā)明書中的命名通常遵循在Nomenclature of Organic Chemistry，Sections A，B，C，D，E，F(xiàn)，and H，PergamonPress，Oxford，1979中表述的實(shí)例以及規(guī)則，其示例性化學(xué)結(jié)構(gòu)名稱以及命名化學(xué)結(jié)構(gòu)的規(guī)則這里引入作為參考。
單獨(dú)使用或作為詞尾的術(shù)語″Cm-n″或″Cm-n基″，指具有m至n個(gè)碳原子的任何基團(tuán)。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“烴”，指只包括碳和氫原子至多14個(gè)碳原子的任何結(jié)構(gòu)。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“烴基”或″hydrocarbyl″，指從烴去除一或多個(gè)氫得到的任何結(jié)構(gòu)。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“烷基”，指包括1～約12個(gè)碳原子的飽和的單價(jià)直鏈或支鏈的烴基團(tuán)。示例性的烷基實(shí)例包括，但不限于，C1-6烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2，2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2，2-二甲基-1-丁基、3，3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基和己基以及長(zhǎng)鏈的烷，如庚基和辛基。烷基能不被取代或被一個(gè)或兩個(gè)合適的取代基取代。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“亞烷基”，指包括1～約12個(gè)碳原子的二價(jià)的直鏈或支鏈的烴基團(tuán)，其將倆個(gè)結(jié)構(gòu)連接起來。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“鏈烯基”，指具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵并包括至少2至多約12個(gè)碳原子的單價(jià)直鏈或支鏈的烴基團(tuán)。鏈烯基的雙鍵能與另一個(gè)不飽和的基團(tuán)非共軛或共軛。合適的鏈烯基包括，但不限于C2-6鏈烯基，如乙烯基、烯丙基、丁烯基、戊烯基、己烯基、丁二烯基、戊二烯基、己二烯基、2-乙基己烯基、2-丙基-2-丁烯基、4-(2-甲基-3-丁烯)-戊烯基。鏈烯基能不被取代或被一個(gè)或兩個(gè)合適的取代基取代。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“炔基”，指具有至少一個(gè)碳-碳三鍵并包括至少2至多約12個(gè)碳原子的單價(jià)直鏈或支鏈的烴基團(tuán)。炔基的三鍵能與另一個(gè)不飽和的基團(tuán)非共軛的或共軛。合適的炔基包括，但不限于，C2-6炔基，如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、甲基丙炔基、4-甲基-1-丁炔基、4-丙基-2-戊炔基和4-丁基-2-己炔基。炔基能不被取代或被一個(gè)或兩個(gè)合適的取代基取代。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“環(huán)烷基”，指包括至少3至多約12個(gè)碳原子的飽和的單價(jià)含環(huán)的烴基團(tuán)。環(huán)烷基的實(shí)例包括，但不限于，C3-7環(huán)烷基，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基以及飽和的環(huán)狀的以及二環(huán)萜烯。環(huán)烷基能不被取代或被一或兩個(gè)合適的取代基取代。優(yōu)選地，環(huán)烷基為單環(huán)或二環(huán)。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“環(huán)烯基”，指具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵并包括至少3至多約12個(gè)碳原子的單價(jià)含環(huán)烴基團(tuán)。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“環(huán)炔基”，指具有至少一個(gè)碳-碳三鍵并包括約7至多約12個(gè)碳原子的單價(jià)含環(huán)烴基團(tuán)。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“芳基”，指具有芳香特性(例如，4n+2離域電子)的具有一或多個(gè)不飽和的碳環(huán)并包括5至多約14個(gè)碳原子的單價(jià)烴基團(tuán)。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“亞芳基”，是指具有一個(gè)或多個(gè)芳香性(例如，4n+2個(gè)離域電子)的不飽和碳環(huán)的二價(jià)烴基，其含有大約5-14個(gè)碳原子，用于同時(shí)連接兩個(gè)結(jié)構(gòu)。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“雜環(huán)”，是指含有一個(gè)或多個(gè)多價(jià)雜原子作為環(huán)結(jié)構(gòu)的一部分的環(huán)狀(ring-containing)結(jié)構(gòu)或分子，所述雜原子獨(dú)立選自N、O、P和S，在環(huán)中含有至少3個(gè)和至多大約20個(gè)原子。所述雜環(huán)可以是飽和或不飽和的，含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，和所述雜環(huán)可含有一個(gè)以上的環(huán)。當(dāng)雜環(huán)含有一個(gè)以上的環(huán)時(shí)，這些環(huán)可以是稠合或未稠合的。稠合的環(huán)一般是指至少兩個(gè)環(huán)在其之間共有兩個(gè)原子。雜環(huán)可以具有芳香性或不具有芳香性。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“雜芳香的”，是指含有一個(gè)或多個(gè)多價(jià)雜原子作為環(huán)結(jié)構(gòu)的一部分的環(huán)狀結(jié)構(gòu)或分子，所述雜原子獨(dú)立選自N、O、P和S，在環(huán)中含有至少3個(gè)和至多大約20個(gè)原子，其中所述環(huán)結(jié)構(gòu)或分子具有芳香性(例如，4n+2個(gè)離域電子)。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“雜環(huán)基團(tuán)”、“雜環(huán)部分”、“雜環(huán)的”、或“雜環(huán)”，是指通過從雜環(huán)中去掉一個(gè)或多個(gè)氫而衍生得到的基團(tuán)。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“雜環(huán)基”，是指從雜環(huán)上除去至少一個(gè)氫而衍生的基團(tuán)。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“亞雜環(huán)基”，是指從雜環(huán)中除去兩個(gè)氫而衍生的二價(jià)基團(tuán)，其可用于同時(shí)連接兩個(gè)結(jié)構(gòu)。
單獨(dú)或作為詞尾或詞頭使用的術(shù)語“雜芳基”，是指具有芳香性的雜環(huán)基。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“雜環(huán)烷基”，指包括碳和氫原子以及至少1個(gè)雜原子，優(yōu)選地，1～3雜原子并且具有沒有不飽和的單環(huán)或多環(huán)，所述的雜原子選自氮、氧和硫。雜環(huán)烷基的實(shí)例包括吡咯烷基、吡咯子基(pyrrolidino)、哌啶基、哌啶子基(piperidino)、哌嗪基(piperazinyl)、哌嗪子基(piperazino)、嗎啉基、嗎啉代、硫嗎啉基、硫嗎啉代和吡喃基。雜環(huán)烷基能不被取代或被一個(gè)和多個(gè)合適的取代基取代。優(yōu)選地，雜環(huán)烷基為單環(huán)或二環(huán)，更優(yōu)選地，單環(huán)，其中環(huán)包括3～6個(gè)碳原子并具有1～3個(gè)雜原子，這里稱為C3-6雜環(huán)烷基。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“亞雜芳基”，指具有芳香性的亞雜環(huán)基。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“亞雜環(huán)烷基”，指不具有芳香性的亞雜環(huán)基。
用作詞尾的術(shù)語″六-員″指具有包含六個(gè)環(huán)原子的環(huán)的基團(tuán)。
用作詞尾的術(shù)語″五-員″指具有包含五個(gè)環(huán)原子的環(huán)的基團(tuán)。
五-員雜芳基為具有5個(gè)環(huán)原子環(huán)的雜芳基，其中1、2或3個(gè)環(huán)原子獨(dú)立地選自N、O和S。
示例性的五-員環(huán)雜芳基為噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、唑基、吡唑基、異噻唑基、異唑基、1，2，3-三唑基、四唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，3-二唑基、1，2，4-三唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，4-二唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基和1，3，4-二唑基。
六-員環(huán)雜芳基為具有六個(gè)環(huán)原子環(huán)的雜芳基，其中1、2或3個(gè)環(huán)原子獨(dú)立地選自N、O和S。
示例性的六-員環(huán)雜芳基為吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基和噠嗪基。
術(shù)語“取代的”用作詞尾的指結(jié)構(gòu)、分子或基團(tuán)，其中一或多個(gè)氫被一或多個(gè)C1-6烴基團(tuán)或一個(gè)或多個(gè)包含一或多個(gè)選自N、O、S、F、Cl、Br、I和P雜原子的化學(xué)基團(tuán)替換。示例性的包含一或多個(gè)雜原子的化學(xué)基團(tuán)包括-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R、氧代(＝O)、亞胺基(＝NR)、硫代(＝S)以及oximino(＝N-OR)，其中各“R”為C1-6烴基。例如，取代的苯基可指硝基苯基、甲氧基苯基、氯苯基、氨基苯基等，其中硝基、甲氧基、氯和氨基可替換苯基環(huán)上任何合適的氫。
用作第一種結(jié)構(gòu)、分子或基團(tuán)詞頭的術(shù)語“取代的”，后面接著稱為第二種結(jié)構(gòu)的一或多個(gè)化學(xué)基團(tuán)名稱，指用一或多個(gè)指定的化學(xué)基團(tuán)替換第一種結(jié)構(gòu)、分子或基團(tuán)的一或多個(gè)氫的結(jié)果。例如，“被硝基取代的苯基”指硝基苯基。
雜環(huán)包括，例如單環(huán)雜環(huán)，如氮丙啶、環(huán)氧乙烷、硫雜丙環(huán)、氮雜環(huán)丁烷、環(huán)氧丙烷、環(huán)硫丙烷(thietane)、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、吡唑烷、二氫吡唑、二氧戊環(huán)、環(huán)丁砜、2，3-二氫呋喃、2，5-二氫呋喃、四氫呋喃、噻吩烷、哌啶、1，2，3，6-四氫吡啶、哌嗪、嗎啉、硫嗎啉、吡喃、噻喃、2，3-二氫吡喃、四氫吡喃、1，4-二氫吡啶、1，4-二烷、1，3-二烷、二烷、高哌啶基、2，3，4，7-四氫-1H-氮雜庚因、高哌嗪、1，3-二氧雜環(huán)庚烷、4，7-二氫-1，3-二氧雜庚英(dioxepin)和氧雜環(huán)庚烷。
另外，雜環(huán)還包括芳香族雜環(huán)，例如，吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、噻吩、呋喃、呋咱、吡咯、咪唑、噻唑、唑、吡唑、異噻唑、異唑、1，2，3-三唑、四唑、1，2，3-噻二唑、1，2，3-二唑、1，2，4-三唑、1，2，4-噻二唑、1，2，4-二唑、1，3，4-三唑、1，3，4-噻二唑和1，3，4-二唑。
另外，雜環(huán)還包括多環(huán)雜環(huán)，例如，吲哚、二氫吲哚、異二氫吲哚、喹啉、四氫喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、1，4-苯并二烷、香豆素、二氫香豆素、苯并呋喃、2，3-二氫苯并呋喃、異苯并呋喃、色烯、色滿、異色滿、呫噸、氧硫雜蒽(phenoxathin)、噻蒽、中氮茚、異吲哚、吲唑、嘌呤、酞嗪、萘啶、喹喔啉、喹唑啉、肉啉、蝶啶、菲啶、萘嵌間二氮雜苯、菲咯啉、吩嗪、吩噻嗪、吩嗪、1，2-苯并異唑、苯并噻吩、苯并唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并三唑、噻黃嘌呤、咔唑、咔啉、吖啶、pyrolizidine和喹嗪。
除上面描述的多環(huán)雜環(huán)之外，雜環(huán)還包括其中兩個(gè)或多個(gè)環(huán)之間稠合的雜環(huán)，包括與兩個(gè)環(huán)共有超過一根鍵以及與兩個(gè)環(huán)共有超過兩個(gè)原子的雜環(huán)。這種橋連雜環(huán)的例子包括奎寧環(huán)、二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷和7-氧雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷。
雜環(huán)基包括，例如，單環(huán)雜環(huán)基，如氮雜環(huán)丙基、環(huán)氧乙烷基、硫雜丙環(huán)基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡唑啉基、二氧戊環(huán)基、環(huán)丁砜基、2，3-二氫呋喃基、2，5-二氫呋喃基、四氫呋喃基、噻吩烷基、哌啶基、1，2，3，6-四氫-吡啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、吡喃基、噻喃基、2，3-二氫吡喃基、四氫吡喃基、1，4-二氫吡啶基、1，4-二烷基、1，3-二烷、二烷基、高哌啶基、2，3，4，7-四氫-1H-氮雜庚因基、高哌嗪基、1，3-二氧雜環(huán)庚基、4，7-二氫-1，3-二氧雜庚英基(dioxepinyl)和氧雜環(huán)庚烷基(hexamethylene oxidyl)。
另外，雜環(huán)基包括芳香雜環(huán)基或雜芳基，例如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噻吩基、呋喃基、呋咱基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、唑基、吡唑基、異噻唑基、異唑基、1，2，3-三唑基、四唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，3-二唑基、1，2，4-三唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，4-二唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基和1，3，4-二唑基。
另外，雜環(huán)基還包含多環(huán)雜環(huán)基(包括芳香族或非芳香族的)，例如，吲哚基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、喹啉基、四氫喹啉基、異喹啉基、四氫異喹啉基、1，4-苯并二烷基、香豆素基、二氫香豆素基、苯并呋喃基、2，3-二氫苯并呋喃基、異苯并呋喃基、色烯基、色滿基、異色滿基、呫噸、氧硫雜蒽基(phenoxathinyl)、噻蒽基、中氮茚基、異吲哚基、吲唑基、嘌呤基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、肉啉基、蝶啶基、菲啶基、萘嵌間二氮雜苯基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩嗪基、1，2-苯并異唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、噻黃嘌呤基、咔唑基、咔啉基、吖啶基、pyrolizidinyl和喹嗪基。
除上面描述的多環(huán)雜環(huán)基之外，雜環(huán)基還包括其中兩個(gè)或多個(gè)環(huán)之間稠合的多環(huán)雜環(huán)基，包括與兩個(gè)環(huán)共有超過一根鍵以及與兩個(gè)環(huán)共有超過兩個(gè)原子的多環(huán)雜環(huán)基。這種橋連雜環(huán)基的例子包括奎寧環(huán)基、二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷基和7-氧雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷基。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“烷氧基”，指通式-O-R的基團(tuán)，其中R選自烴基團(tuán)。示例性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、異丁氧基、環(huán)丙基甲氧基、烯丙氧基以及炔丙氧基。
單獨(dú)使用或作為詞頭或詞尾的術(shù)語“胺”或“氨基”，指通式-NRR’的基團(tuán)，其中R和R’獨(dú)立地選自氫或烴基團(tuán)。
鹵素包括氟、氯、溴和碘。
作為基團(tuán)的詞頭使用的“鹵代”是指該基團(tuán)上的一個(gè)或多個(gè)氫被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代。
“RT”或“rt”是指室溫。
在一個(gè)方面，本發(fā)明提供式I的化合物，其可藥用鹽、其非對(duì)映異構(gòu)體、其對(duì)映異構(gòu)體和其混合物 其中R1選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫、C3-6環(huán)烷基或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基。
在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物用式I表示，其中R1為C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基，其中所述C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基任選地被選自C1-6烷基、-CF3、C1-6烷氧基、氯、氟和溴中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代；R2選自-H和C1-3烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基。
在另一種實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物用式I表示，其中R1選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基任選地被選自甲氧基、乙氧基和異丙氧基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代；R2選自-H；和R3選自甲基、乙基、丙基和異丙基。
在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物用式I表示，其中R1選自正丙基、環(huán)丙基甲基、正戊基、2-甲氧基乙基、正丁基、2-異丙氧基乙基、2-乙氧基乙基、3-甲氧基丙基、環(huán)丁基甲基、甲基和乙基；R2選自-H；和R3選自甲基和乙基。
應(yīng)該理解為當(dāng)本發(fā)明的化合物包含一或多個(gè)手性中心的時(shí)候，本發(fā)明的化合物可存在，并且可分離成，對(duì)映體或非對(duì)映體的形式，或作為消旋的混合物。本發(fā)明包括式I的化合物的任何可能的對(duì)映體、非對(duì)映體、消旋體或其混合物?？芍苽浔景l(fā)明化合物的光學(xué)活性形式，例如，通過消旋體的手性色譜分離，從光學(xué)活性的起始物質(zhì)進(jìn)行合成或基于后面描述的步驟的不對(duì)稱合成。
還應(yīng)理解的是，本發(fā)明的某些化合物可存在幾何異構(gòu)體，例如烯烴的E和Z異構(gòu)體。本發(fā)明包括式I化合物的任何幾何異構(gòu)體。還應(yīng)理解的是，本發(fā)明包含式I化合物的互變異構(gòu)體。
還應(yīng)理解的是，本發(fā)明的某些化合物可存在溶劑化物，例如水合物，以及非溶劑化物形式。還應(yīng)理解的是，本發(fā)明包括式I化合物的所有溶劑化物形式。
在本發(fā)明范圍內(nèi)還包括式I化合物的鹽。通常，可使用本領(lǐng)域熟知的標(biāo)準(zhǔn)方法獲得本發(fā)明藥學(xué)上可接受的鹽，例如通過使足量的堿性化合物，例如烷基胺與適當(dāng)酸，例如HCl或乙酸反應(yīng)，以提供生理學(xué)上可接受的陰離子。還可通過用一當(dāng)量的堿金屬或堿土金屬氫氧化物或醇鹽(例如乙醇鹽或甲醇鹽)或適當(dāng)?shù)膲A性有機(jī)胺(例如膽堿或甲葡胺)在水介質(zhì)中處理帶有適當(dāng)酸性質(zhì)子的本發(fā)明化合物，例如羧酸或苯酚，隨后通過常規(guī)純化技術(shù)制備相應(yīng)的堿金屬(例如鈉、鉀或鋰)或堿土金屬(例如鈣)鹽。
在具體實(shí)施方案中，上述式I化合物可轉(zhuǎn)變成其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，特別是酸加成鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、乙鹽酸、富馬酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、甲磺酸鹽或?qū)妆交撬猁}。
本發(fā)明的新化合物可用于治療，尤其是用于治療各種疼痛病癥如慢性疼痛、神經(jīng)性疼痛、急性疼痛、癌癥疼痛、由類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎引起的疼痛、偏頭痛、內(nèi)臟疼痛等。然而，這種列舉不能被解釋為是窮舉性的。
本發(fā)明化合物可用作免疫調(diào)節(jié)劑，特別是用于自身免疫性疾病，例如關(guān)節(jié)炎，用于皮膚移植、器官移植和類似的手術(shù)需要，用于膠原疾病、各種變態(tài)反應(yīng)，用作抗腫瘤劑和抗病毒劑。
本發(fā)明化合物可用于存在或涉及示例中的阿片受體退化或功能紊亂的那些病癥。這包括在診斷技術(shù)和影像應(yīng)用例如正電子發(fā)射層析成象(PET)中使用本發(fā)明化合物的同位素標(biāo)記形式。
本發(fā)明化合物用于治療腹瀉、抑郁、焦慮和應(yīng)激相關(guān)的病癥例如創(chuàng)傷后的應(yīng)激障礙、恐慌癥、一般化焦慮癥、社交恐怖癥和強(qiáng)迫性神經(jīng)障礙、尿失禁、早泄、各種精神病、咳嗽、肺水腫、各種胃-腸病，例如便秘、功能化胃腸機(jī)能紊亂例如過敏性腸綜合征和機(jī)能性消化不良，帕金森疾病和其它運(yùn)動(dòng)障礙、創(chuàng)傷性腦損傷、中風(fēng)、心肌梗塞后的心臟保護(hù)(cardioprotection)、脊椎傷損和藥癮，包括治療酒精、尼古丁、阿片樣物質(zhì)及其它藥物濫用，和交感神經(jīng)系統(tǒng)疾病例如高血壓。
本發(fā)明化合物可在全身麻醉和監(jiān)視麻醉護(hù)理期間用作鎮(zhèn)痛劑。往往可使用具有不同性質(zhì)藥物的聯(lián)合藥物以獲得需要維持麻醉狀態(tài)(例如遺忘、痛覺消失、肌肉放松和鎮(zhèn)靜)的平衡效果。在聯(lián)合藥物中包括吸入麻醉劑、安眠藥、抗焦慮藥、神經(jīng)肌肉阻斷劑和阿片樣物質(zhì)。
同樣，在本發(fā)明范圍內(nèi)包括根據(jù)上述式I的任何化合物在制備用于治療上述任何病癥的藥物中的用途。
本發(fā)明的另一方面是提供治療患有上述任何病癥的患者的方法，其中對(duì)需要這種治療的患者給藥有效量的上述根據(jù)本發(fā)明的式I化合物。
因此，本發(fā)明提供用于治療的上面所述的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物。
另一方面，本發(fā)明提供上面所述的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物在制備用于治療的藥物中的用途。
在本說明書范圍內(nèi)，除非有具體的相反說明，術(shù)語“治療”還包括“預(yù)防”。術(shù)語“治療的”和“治療地”應(yīng)相應(yīng)地理解。在本發(fā)明范圍內(nèi)術(shù)語“治療”還包括給藥有效量的本發(fā)明化合物，以減輕先前存在的疾病狀態(tài)、急性或慢性或復(fù)發(fā)病癥。上述定義還包括對(duì)預(yù)防復(fù)發(fā)病癥的預(yù)防治療和對(duì)慢性病癥的持續(xù)治療。
本發(fā)明化合物還用于治療，特別是治療各種疼痛病癥，包括但不局限于急性疼痛、慢性疼痛、神經(jīng)性疼痛、背痛、癌癥疼痛和內(nèi)臟疼痛。
在用于治療溫血性動(dòng)物例如人類時(shí)，本發(fā)明化合物可以常規(guī)藥物組合物形式通過包括口服、肌內(nèi)、皮下、局部、鼻內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸內(nèi)、靜脈內(nèi)、硬膜外、鞘內(nèi)、腦室內(nèi)和注射入關(guān)節(jié)內(nèi)的任何途徑給藥。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，給藥途徑可以是口服的、靜脈內(nèi)或肌內(nèi)的。
當(dāng)確定具體病人的最適合個(gè)體用藥法和劑量水平時(shí)，劑量取決于給藥途徑、疾病的嚴(yán)重程度、患者的年齡和體重以及其它由主治醫(yī)師通?？紤]的因素。
對(duì)于制備本發(fā)明化合物的藥物組合物，惰性的、藥學(xué)上可接受的載體可以是固體和液體。固體形式制劑包括粉劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。
固體載體可以是一種或多種物質(zhì)，其可作為稀釋劑、調(diào)味劑、增溶劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、粘合劑或片劑崩解劑；也可是包封物質(zhì)。
在粉劑中，載體是細(xì)碎的固體，其混在本發(fā)明細(xì)碎的化合物或活性組分的混合物中。在片劑中，活性組分與具有必要粘性的載體以適當(dāng)比例混和并壓制成需要的形狀和大小。
對(duì)于制備栓劑組合物，首先將低熔點(diǎn)的蠟例如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物熔融，并在其中通過例如攪拌分散活性成分。然后，將熔融均勻混合物倒入適當(dāng)大小的模子并使其冷卻和固化。
適當(dāng)?shù)妮d體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、乳糖、蔗糖、果膠、糊精、淀粉、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉鹽、低熔點(diǎn)的蠟、可可脂等。
術(shù)語組合物還可包括活性組分與作為載體的包封物質(zhì)的制劑，包括膠囊劑，其中活性組分(含或不含其它載體)被由此與其結(jié)合的載體包裹著。類似地，也包括扁囊劑。
片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑可作為適于口服的固體劑型。
液體形式的組合物包括溶液、懸浮劑和乳劑。例如，活性化合物的無菌水溶液或丙二醇水溶液可以是適用于腸胃外給藥的液體制劑。液體組合物也可以配制成在聚乙二醇水溶液中的溶液。
用于口服的水溶液可通過在水中溶解活性組分并根據(jù)需要加入適當(dāng)?shù)闹珓⒄{(diào)味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑來配制。用于口服的水懸浮劑可通過在水中一起分散細(xì)碎的活性組分和粘性物質(zhì)例如天然合成的樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉鹽以及其它在藥物制劑領(lǐng)域已知的懸浮劑來制備。
根據(jù)給藥的方式，藥物組合物含有本發(fā)明化合物的量?jī)?yōu)選為0.05％-99w％(重量百分?jǐn)?shù))，更優(yōu)選為0.10-50w％，所有的重量百分?jǐn)?shù)基于總的組合物。
本發(fā)明的實(shí)施治療有效量可通過使用已知規(guī)范包括年齡、重量和相應(yīng)的個(gè)體患者來確定，并且可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在所治療或預(yù)防的疾病范圍內(nèi)來解釋。
在本發(fā)明范圍內(nèi)包括上述定義的任何式I化合物用于制備藥物的用途。
同樣，在本發(fā)明范圍內(nèi)包括上述定義的任何式I化合物用于制備治療疼痛藥物的用途。
另外，本發(fā)明還提供根據(jù)式I的任何化合物用于制備治療各種疼痛病癥的藥物的用途，所述病癥包括但不局限于急性疼痛、慢性疼痛、神經(jīng)性疼痛、背痛、癌癥疼痛和內(nèi)臟疼痛。
本發(fā)明的另一方面是提供治療患有上述任何病癥的患者的方法，其中對(duì)需要這種治療的患者給藥有效量的根據(jù)上述式I的化合物。
此外，提供了一種藥物組合物，包括式I的化合物，或其可藥用鹽以及可藥用載體。
具體地，提供了一種用于治療更具體地治療疼痛的藥物組合物，包括式I的化合物，或其可藥用鹽以及可藥用載體。
此外，提供了一種用于上述討論的任何病癥的藥物組合物，包括式I的化合物，或其可藥用鹽以及可藥用載體。
又一方面，本發(fā)明提供了一種制備式I的化合物的方法。
在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種制備式I的化合物的方法，包括 使式II的化合物與R1-X反應(yīng) 其中X為鹵素；R1選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種制備式III的化合物的方法，包括 使式II的化合物與R4-CHO反應(yīng) 其中R4選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-CF3、C1-6烷氧基、氯、氟和溴中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代。
在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種制備式I的化合物的方法，包括 使式IV的化合物與R3-O-C(＝O)-X反應(yīng)； 其中X為鹵素；R1選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基。
特別地，本發(fā)明的化合物并用于其制備的中間體可按照流程

圖1-4中例示的合成路線來制備。
流程1
流程2
流程3 流程4
生物學(xué)評(píng)價(jià)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物對(duì)溫血?jiǎng)游锢缛说摩氖荏w具有活性。特別是發(fā)現(xiàn)了本發(fā)明的化合物為有效的δ受體配體。下文中的體外試驗(yàn)證明了這些出乎意料的活性，尤其是如在大鼠腦功能試驗(yàn)和/或人δ受體功能試驗(yàn)中所證明的有關(guān)激動(dòng)劑效力和功效。該特征可能與體內(nèi)活性有關(guān)并且可能與結(jié)合親和力不呈線性關(guān)系。在這些體外試驗(yàn)中，測(cè)試了化合物對(duì)δ受體的活性，并且獲得了確定特定化合物對(duì)δ受體選擇性活性的IC50。在目前的上下文中，IC50通常指觀察到50％的標(biāo)準(zhǔn)放射性δ受體配體被替換的化合物濃度。
化合物對(duì)κ和μ受體的活性也以類似的試驗(yàn)測(cè)定。
體外模型細(xì)胞培養(yǎng)將表達(dá)克隆的人的κ、δ和μ受體和耐新霉素的人293S細(xì)胞在37℃和5％的CO2下，在含有無鈣DMEM 10％FBS、5％BCS、0.1％Pluronic F-68和600μg/ml遺傳霉素的搖瓶中懸浮生長(zhǎng)。
將大鼠腦稱重并且用冰冷卻的PBS(含有2.5mM EDTA，pH 7.4)沖洗。將腦在用冰冷卻的裂解緩沖液(50mM Tris，pH 7.0，2.5mM EDTA，臨用將苯基甲磺酰氟從0.5M的DMSO乙醇儲(chǔ)液加至0.5mM)中用polytron勻化30秒(大鼠)。
膜制備將細(xì)胞沉淀并且再懸浮在裂解緩沖液(50mM Tris，pH 7.0，2.5mMEDTA，臨用將PMSF用0.1M乙醇儲(chǔ)液加至0.1mM)中，在冰上孵育15分鐘，然后用polytron勻化30秒。在4℃，以1000克(max)離心該懸浮液10分鐘，將上清液保留在冰上并且將沉淀如前面再懸浮并且離心。合并兩次離心的上清液并且以46,000克(max)離心30分鐘。將沉淀再次懸浮在冷Tris緩沖液(50mM Tris/Cl，pH 7.0)中并且再次離心。將最終的沉淀再次懸浮在膜緩沖液(50mM Tris，0.32M蔗糖，pH 7.0)中。在干冰/乙醇中冷凍聚丙烯試管中的等分試樣(1ml)并且在-70℃儲(chǔ)存直到使用時(shí)。用十二烷基磺酸鈉改進(jìn)的Lowry試驗(yàn)確定蛋白質(zhì)的濃度。
結(jié)合試驗(yàn)在37℃將膜解凍，在冰上冷卻，從25-號(hào)針頭中通過3次，并且稀釋至結(jié)合緩沖液(50mM Tris，3mM MgCl2，1mg/ml BSA(SigmaA-7888)，pH7.4中，用0.22m過濾器過濾之后在4℃儲(chǔ)存，并且其中新加入5μ克/毫升的抑肽酶、10μM苯丁抑制素、10μM diprotin A、無DTT)。將100μl等分試樣加入到含有100μl合適的放射性配體和100μl各種濃度被測(cè)試的化合物、冰凍的12×75mm聚丙烯的試管中。分別在沒有納洛酮和存在10μM納洛酮下確定總結(jié)合(TB)和非特異性結(jié)合(NS)。將試管渦旋并且在25℃培養(yǎng)60-75分鐘，之后將試管中的物質(zhì)快速地真空過濾并且在0.1％的聚乙烯亞胺中至少預(yù)浸2小時(shí)的GF/B過濾器(Whatman)，用約12ml/試管冰凍的洗滌緩沖液(50mM Tris，pH 7.0，3mM MgCl2)洗滌。將過濾器浸在含有6-7ml閃爍液的小管形瓶中至少12小時(shí)后，用β計(jì)數(shù)器測(cè)定保留在過濾器上的放射性(dpm)。如果該試驗(yàn)在96-位深孔板上進(jìn)行，通過96-位PEI-浸過的單一過濾器過濾，用3×1ml洗滌緩沖液洗滌，并且在55℃烘箱中干燥2小時(shí)。加入50μl MS-20閃爍液/孔之后，濾板在TopCount(Packard)上計(jì)數(shù)。
功能試驗(yàn)通過確定化合物受體復(fù)合物激活受體偶合的G-蛋白與GTP的結(jié)合程度，測(cè)定化合物的激動(dòng)劑活性。在GTP結(jié)合試驗(yàn)中，將GTP[γ]35S與被測(cè)試的化合物及表達(dá)克隆的人的鴉片類物質(zhì)受體的HEK-293S細(xì)胞膜或勻化大鼠和小鼠的腦膜混合。激動(dòng)劑在這些膜中刺激GTP[γ]35S結(jié)合。由劑量-反應(yīng)曲線確定化合物的EC50和Emax值。用由δ拮抗劑納屈吲哚(naltrindole)產(chǎn)生的劑量反應(yīng)曲線右移來驗(yàn)證激動(dòng)劑活性通過δ受體介導(dǎo)。Emax值確定與標(biāo)準(zhǔn)δ激動(dòng)劑SNC80有關(guān)，即高于100％為比SNC80更有效的化合物。
大鼠腦GTP測(cè)定方法在37℃將大鼠腦膜解凍，從25-號(hào)平端針中通過3次并且在GTPγS結(jié)合液(50mM Hepes、20mM NaOH、100mM NaCl、1mM EDTA、5mM MgCl2，pH 7.4，新鮮加入1mM DTT，0.1％BSA)中稀釋。向膜稀釋液中加入最終的120μM GDP。由在300μl、用適量的膜蛋白(20μg/孔)和每孔100000-130000dpm的GTPγ35S(0.11-0.14nM)完成的10-點(diǎn)劑量-反應(yīng)曲線，計(jì)算化合物的EC50和Emax值。在無SNC-80和存在3μM SNC-80下確定基礎(chǔ)和最大刺激結(jié)合。
數(shù)據(jù)分析特異性結(jié)合(SB)以TB-NS計(jì)算，并且在各種受試化合物存在下的SB用對(duì)照SB的百分比表示。對(duì)于替換特異性結(jié)合放射性配體的配體，IC50和Hill系數(shù)(nH)值由logit圖或曲線擬合程序如Ligand、GraphPad Prism、SigmaPlot或ReceptorFit計(jì)算。由Cheng-Prussoff方程計(jì)算Ki值。報(bào)告了在至少三個(gè)替換曲線中測(cè)試的配體IC50、Ki和nH的平均值±S.E.M.。
基于上面的試驗(yàn)方案，我們發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物對(duì)于人δ受體具有活性。通常，本發(fā)明的一些化合物對(duì)人δ受體的IC50在0.2nM-3.7nM的范圍內(nèi)，平均為1nM。這些化合物對(duì)人δ受體的EC50和％Emax通常分別在5.4nM-213nM和26-87nM的范圍內(nèi)。本發(fā)明化合物對(duì)人κ和μ受體的IC50通常分別在156nM-9227nM和106nM-2913nM的范圍內(nèi)。
受體飽和實(shí)驗(yàn)通過在細(xì)胞膜上用合適的放射性配體，以估計(jì)Kδ值的0.2到5倍的濃度范圍(如果所需放射性配體的量可行，最高可達(dá)10倍)進(jìn)行結(jié)合試驗(yàn)，確定放射性配體的Kδ值。以pmole/mg膜蛋白表示特異性放射性配體結(jié)合。根據(jù)一點(diǎn)(one-site)模型由特異性結(jié)合(B)對(duì)nM游離(F)放射性配體的非線性擬合，獲得每個(gè)實(shí)驗(yàn)的Kδ值和Bmax值。
用Von Frey實(shí)驗(yàn)確定機(jī)械性-異常性疼痛(allodynia)用Chaplan等(1994)描述的方法、在08:00和16:00小時(shí)之間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將大鼠置于有機(jī)玻璃(Plexiglas)籠內(nèi)，在允許爪子進(jìn)入的絲網(wǎng)底部之上，并使其習(xí)慣10-15分鐘。受試區(qū)域?yàn)樽蠛笞Φ字胁?，避免較不敏感的腳墊。將爪與一系列具有對(duì)數(shù)遞增堅(jiān)度(stiffness)(0.41、0.69、1.20、2.04、3.63、5.50、8.51和15.14克；Stoelting，Ill，USA)的8 Von Frey毛發(fā)接觸。將VonFrey毛發(fā)從與環(huán)表面垂直的網(wǎng)底下面，以足夠的力量輕輕扣住爪，并保持大約6-8秒。如果爪急促地縮回，表示為陽性反應(yīng)。對(duì)移開毛發(fā)立即產(chǎn)生退縮也認(rèn)為是陽性反應(yīng)。移動(dòng)被認(rèn)為是不明確的反應(yīng)，并且在這種情況下重復(fù)刺激。
實(shí)驗(yàn)方案對(duì)FCA-處理組在手術(shù)后的1天的測(cè)試動(dòng)物。用Dixon(1980)的上-下(up-down)方法確定50％的收縮閾值。測(cè)試以該系列的中間值2.04克毛發(fā)開始。不論遞增或遞減，刺激始終以連續(xù)方式存在。在爪對(duì)最初選擇的毛發(fā)無縮回反應(yīng)的情況下，進(jìn)行更強(qiáng)的刺激；如果發(fā)生爪縮回反應(yīng)，下次選擇較弱的刺激。用該方法在最接近50％閾值的反應(yīng)中計(jì)算最佳閾值需要6次，并且當(dāng)?shù)谝淮畏磻?yīng)變化出現(xiàn)例如閾值首次交叉時(shí)開始記錄這6次反應(yīng)。當(dāng)閾值在刺激范圍外時(shí)，分別指定15.14(正常敏感性)或0.41(最大異常性疼痛)兩值。按慣例將所得陽性和陰性反應(yīng)的模式列表，X＝無縮回；O＝縮回，50％縮回閾值用下式計(jì)算50％g閾值＝10(xf+kδ)/10,000其中Xf＝最后所用的von Frey毛發(fā)(對(duì)數(shù)單位)的值；k＝陽性/陰性反應(yīng)模式的列表值(自Chaplan等(1994))；δ＝刺激(對(duì)數(shù)單位)之間的平均差。在此δ＝0.224。
根據(jù)Chaplan等1994，將von Frey閾值轉(zhuǎn)換成最大可能效應(yīng)的百分比(％MPE)。下列方程用于計(jì)算％MPE 受試物質(zhì)的給藥在進(jìn)行von Frey測(cè)試前給大鼠注射(皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)或經(jīng)口)受試物質(zhì)，給予受試化合物和von Frey測(cè)試之間的時(shí)間取決于該受試化合物的性質(zhì)而變化。
扭曲試驗(yàn)(writhing test)當(dāng)在小鼠經(jīng)腹膜內(nèi)給予乙酸時(shí)將引起腹部收縮。然后這些反應(yīng)將以典型模式擴(kuò)展到其身體。當(dāng)給予止痛藥時(shí)，觀察到所述活動(dòng)較不頻繁，并且將該藥選為潛在的好候選藥。
僅當(dāng)下列因素存在時(shí)才認(rèn)為是完全并且典型的扭曲反射該動(dòng)物不活動(dòng)；下背輕微降低；兩爪底面可觀察到。在該試驗(yàn)中，經(jīng)口給藥1-100μmol/kg后，本發(fā)明化合物顯示出顯著的扭曲反應(yīng)抑制作用。
(i)溶液制備乙酸(AcOH)將120μL乙酸加入到19.88ml蒸餾水中以獲得最終體積為20ml、最終濃度為0.6％AcOH。然后將該溶液混合(渦旋)并等待注射。
化合物(藥物)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法，在最合適的溶媒中制備并溶解各化合物。
(ii)溶液給藥將化合物(藥物)以10ml/kg(考慮小鼠平均體重)，在測(cè)試前20、30或40分鐘(根據(jù)化合物的類別及其性質(zhì))經(jīng)口、腹膜內(nèi)(i.p.)、皮下(s.c.)或靜脈內(nèi)(i.v.)給藥。當(dāng)化合物中樞釋放時(shí)腦室內(nèi)(i.c.v.)或鞘內(nèi)(i.t.)給予5μL體積。
在測(cè)試前以10ml/kg(考慮小鼠的平均體重)立即在兩個(gè)部位經(jīng)腹膜內(nèi)(i.p.)給予AcOH。
(iii)測(cè)試觀察動(dòng)物(小鼠)20分鐘并記錄出現(xiàn)(扭曲反射)的次數(shù)，并且在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)匯總。將小鼠置于單獨(dú)的并且具有接觸基床的“鞋盒(shoe box)”籠中。通常同時(shí)共觀察4只小鼠一只對(duì)照和三只給藥。
對(duì)焦慮癥和焦慮樣適應(yīng)征，用大鼠geller-seifter沖突實(shí)驗(yàn)確定有效性。
對(duì)功能性胃腸失調(diào)適應(yīng)征，通過Coutinho SV等在American Journal ofPhysiology-Gastrointestinal&Liver Physiology.282(2)G307-16，2002年2月所描述的試驗(yàn)用大鼠確定有效性。
另外的體內(nèi)測(cè)試方案受試動(dòng)物和飼養(yǎng)環(huán)境將雄性Sprague Dawley純種大鼠(175-200克)以5只一組，飼養(yǎng)在溫度控制室(22℃，40-70％濕度，12小時(shí)光照/黑暗)。實(shí)驗(yàn)在循環(huán)的光照階段進(jìn)行。動(dòng)物自由進(jìn)食和水且在獲得數(shù)據(jù)后立即被殺死。
樣品受試化合物(藥物)包括未接受任何處理的大鼠組并用大腸桿菌(E.coli)脂多糖(LPS)處理的其他組。對(duì)于LPS-處理的實(shí)驗(yàn)，四組用LPS注射，然后四組之一用溶媒處理而其他三組注射藥物及其溶媒。進(jìn)行第二批實(shí)驗(yàn)，涉及五組大鼠；所有大鼠均接受無LPS處理。空白組不接受化合物(藥物)或溶媒；其他四組用有或無藥物的溶媒處理。進(jìn)行這些實(shí)驗(yàn)以確定藥物抗焦慮或鎮(zhèn)靜作用，可將其歸因于減少USV。
LPS給藥在處理前使大鼠在實(shí)驗(yàn)室中習(xí)慣15-20分鐘。通過給予LPS(革蘭氏陰性大腸桿菌血清型內(nèi)毒素0111B4，Sigma)誘發(fā)炎癥。在異氟烷麻醉下、用標(biāo)準(zhǔn)立體定位手術(shù)技術(shù)，經(jīng)腦室內(nèi)(i.c.v.)以10μl體積注射LPS(2.4μg)。將耳之間的皮膚以喙?fàn)钔崎_并縱向切開約1cm的切口使頭蓋骨表面暴露。穿刺位置由下列坐標(biāo)確定前囪后0.8mm，人字點(diǎn)(矢狀縫)側(cè)面(左側(cè))1.5mm及腦室側(cè)面、頭蓋骨(垂直)表面下5mm。用消毒的5mm長(zhǎng)并且由聚乙烯管(PE20；10-15cm)接至100-μl Hamilton注射器上的不銹鋼針(26-G 3/8)注射LPS。將由穿刺針(20-G)制備的4mm的塞子放置在其上并通過硅樹脂膠固定至26-G針以產(chǎn)生所需的5mm深度。
注射LPS之后，再保留針10秒使化合物擴(kuò)散，然后撤去。封閉切口，將該大鼠返回到原先的籠中并使其在測(cè)試前休息最少3.5小時(shí)。
建立噴氣刺激實(shí)驗(yàn)注射LPS后大鼠保留在實(shí)驗(yàn)室中并給予化合物(藥物)。在測(cè)試時(shí)，所有大鼠移開并置于實(shí)驗(yàn)室外。將大鼠一次一只帶進(jìn)測(cè)試實(shí)驗(yàn)室并且置于干凈的盒(9×9×18cm)中，然后將該盒置于大小為62(w)×35(d)×46(h)cm(BRS/LVE，Div.Tech-Serv Inc)的消音并且通風(fēng)的小室中。通過0.32cm的空氣輸出噴嘴輸送噴氣，由能夠輸送固定持續(xù)時(shí)間(0.2秒)和固定強(qiáng)度的空氣噴氣系統(tǒng)(AirStim，San Diego Intruments)以每10秒噴1次的頻率控制。最多噴10次或直到開始叫，總是首先開始叫。第一次空氣噴氣標(biāo)志著記錄的開始。
建立超聲記錄實(shí)驗(yàn)用放置在各個(gè)小室內(nèi)并且用LMS(LMS CADA-X 3.5B，DataAcquisition Monitor，Troy，Michigan)軟件控制的麥克風(fēng)(G.R.A.S.聲音和振動(dòng)，Vedbaek，Denmark)記錄叫聲10分鐘。記錄0至32000Hz之間的頻率，保存并用相同的軟件分析(LMS CADA-X 3.5B，Time Data Processing Monitorand UPA(用戶程序設(shè)計(jì)和分析))。
化合物(藥物)將所有化合物(藥物)均調(diào)節(jié)pH為6.5至7.5并且以體積為4ml/kg給藥。給予化合物(藥物)后，將動(dòng)物返回其原先的籠中直到測(cè)試時(shí)間。
分析將記錄進(jìn)行一系列的統(tǒng)計(jì)和Fourier分析以篩選(在20-24kHz之間)和計(jì)算目標(biāo)參數(shù)。數(shù)據(jù)以平均值±SEM表示。用T-檢驗(yàn)比較空白和LPS處理大鼠來評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并用單側(cè)ANOVA，接著用Dunnett的多重比較檢驗(yàn)(post-hoc)來評(píng)價(jià)藥物的有效性。最小p值≤0.05，認(rèn)為組間差異顯著。實(shí)驗(yàn)重復(fù)最少兩次。
實(shí)施例通過下面的實(shí)施例更詳細(xì)地進(jìn)一步描述本發(fā)明，這些實(shí)施例描述了制備、純化、分析和生物試驗(yàn)本發(fā)明的化合物的方法，而且它們不被視為限制本發(fā)明。
中間體14-碘-N，N-二乙基苯甲酰胺在0℃下向4-碘-苯甲酰氯(75g)在500mL CH2Cl2中的混合物中加入Et3N(50mL)和Et2NH(100mL)的混合物。加入后，在1小時(shí)內(nèi)將得到的反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后用飽和氯化銨洗滌。干燥(Na2SO4)有機(jī)萃取物，過濾并濃縮。用熱己烷重結(jié)晶殘余物得到80g中間體1。
中間體24-[羥基(3-硝基苯基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺將N，N-二乙基-4-碘苯甲酰胺(5.0g，16mmol)溶解在THF(150mL)中，并在氮?dú)鈿夥罩欣鋮s到-78℃。在-65-78℃下在10分鐘內(nèi)逐滴加入正丁基鋰(15mL，在己烷中的1.07M溶液，16mmol)。然后在-78℃下將溶液用導(dǎo)管引入到在甲苯/THF(大約1∶1，100mL)中的3-硝基苯甲醛(2.4g，16mmol)中。30分鐘后加入NH4Cl(水溶液)。在真空中濃縮后，用乙酸乙酯/水萃取，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)有機(jī)相，通過在二氧化硅上的色譜法(0-75％乙酸乙酯/己烷)純化殘余物得到中間體2(2.6g，50％)。
1H NMR(CDCl3)δ1.0-1.3(m，6H)，3.2，3.5(2m，4H)，5.90(s，1H)，7.30-7.40(m，4H)，7.50(m，1H)，7.70(d，J＝8Hz，1H)，8.12(m，1H)，8.28(m，1H)。
中間體2的另一種形成方法在45分鐘內(nèi)向氯化I-丙基鎂(1.6M的乙醚溶液，80mL，128mmol)在-50℃下的攪拌溶液中逐滴加入在THF(250mL)中的中間體1(39.5，130mmol)。如上所述，形成“膠”，但不到加入3/4的中間體1，并且在加入最后1/4的過程中，混合物變成漿液。在-50℃下攪拌2小時(shí)。沒有原料剩下(GCD)。在＜-40℃下在70分鐘內(nèi)向混合物中加入3-硝基苯甲醛(19.65，130mmol)。當(dāng)加入完成后，移去冷卻浴，并使溫度達(dá)到-5℃。用飽和NH4Cl水溶液中止，然后按上述步驟進(jìn)行后處理，50mL乙酸乙酯得到18.5g結(jié)晶中間體2，然后從柱得到另外7.1g。總產(chǎn)率61％。
中間體3N，N-二乙基-4-[(3-硝基苯基)(1-哌嗪基)甲基]苯甲酰胺向醇中間體2(10.01g，30.5mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液中加入亞硫酰溴(2.58mL，33.6mmol)。在室溫下1小時(shí)后，用飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌反應(yīng)物，并分離有機(jī)層。用二氯甲烷(3×100mL)洗滌水層，干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)萃取物，過濾并濃縮。
將粗芐基溴溶解在乙腈(350mL)中，并加入哌嗪(10.5g，122mmol)。在65℃下加熱反應(yīng)物1小時(shí)后，用飽和氯化銨/乙酸乙酯洗滌反應(yīng)物，并分離有機(jī)層。用乙酸乙酯(3×100mL)萃取水層，干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)萃取物，過濾并濃縮得到外消旋的中間體3。
按如下方法將外消旋的中間體3拆分得到對(duì)映異構(gòu)純的中間體4a和4b中間體4aN，N-二乙基-4-[(S)-(3-硝基苯基)(1-哌嗪基)甲基]苯甲酰胺將中間體3溶解在乙醇(150mL)中，并加入二-對(duì)-甲苯酰-L-酒石酸(11.79g，1當(dāng)量)。產(chǎn)物在12小時(shí)時(shí)間內(nèi)沉淀出。通過過濾收集固體，并再溶解到回流的乙醇中，直到全部固體溶解(大約1200mL乙醇)。當(dāng)冷卻時(shí)，通過過濾收集固體，并重復(fù)重結(jié)晶第二次。通過過濾收集固體，并用氫氧化鈉(2M)水溶液處理并用乙酸乙酯萃取。然后干燥(Na2SO4)有機(jī)萃取物，過濾并濃縮得到1.986g對(duì)映異構(gòu)純的中間體4a。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.11(br s，3H)，1.25(br s，3H)，2.37(br s，4H)，2.91(t，J＝5Hz，4H)，3.23(br s，2H)，3.52(br s，2H)，4.38(s，1H)，7.31-7.33(m，2H)，7.41-7.43(m，2H)，7.47(t，J＝8Hz，1H)，7.75-7.79(m，1H)，8.06-8.09(m，1H)，8.30-8.32(m，1H)。
中間體4b對(duì)映異構(gòu)純的N，N-二乙基-4-[(R)-(3-硝基苯基)(1-哌嗪基)甲基]苯甲酰胺通過用二-對(duì)-甲苯酰-D-酒石酸進(jìn)行上述拆分過程得到(R)對(duì)映體中間體4b。
使用下面的條件通過HPLC測(cè)定手性純度Chiralpack AD柱(Daicel Chemical Industries)；流速1mL/分鐘；運(yùn)行時(shí)間25℃下20分鐘；恒溶劑成分15％乙醇，85％己烷。
中間體5a或5b4-((3-氨基苯基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯向中間體4a或4b(300mg)在二氧己環(huán)(40mL)中的溶液中加入焦碳酸二叔丁酯(247g；1.5當(dāng)量)。將碳酸鈉(119g；1.5當(dāng)量)溶解在水(15mL)中，然后在二氧己環(huán)溶液中加入。12小時(shí)后，濃縮溶液，然后加入飽和碳酸氫鈉。用三份二氯甲烷萃取水溶液，在無水硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)物，過濾和濃縮得到白色泡沫。不用進(jìn)一步純化，然后將泡沫溶解在乙醇、四氫呋喃、水和飽和氯化銨(15mL；體積比4∶2∶1∶1v/v)的混合物中。加入鐵顆粒(422g；10當(dāng)量)，在90℃下加熱溶液1.5小時(shí)。冷卻得到的混合物，通過硅藻土過濾并濃縮。加入飽和的碳酸氫鈉，用三份二氯甲烷萃取水溶液，在無水硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)物，過濾和濃縮分別得到白色泡沫中間體5a或5b。不用進(jìn)一步純化就可使用產(chǎn)物(92-99％產(chǎn)率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.06-1.16(m，3H)，1.17-1.26(m，3H)，1.44(s9H)，2.28-2.39(m，4H)，3.20-3.31(br s，2H)，3.37-3.44(br s，2H)，3.48-3.58(br s2H)，3.60-3.70(br s，2H)，4.12(s，1H)，6.51-6.55(m，1H)，6.72(t，J＝2.13Hz，1H)，6.79(d，J＝8.17Hz，1H)，7.06(t，J＝7.46Hz，1H)，7.29(d，J＝7.82Hz，2H)，7.43(d，J＝7.82Hz，2H)。
中間體63-[(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯 室溫下，攪拌氯甲酸甲酯(0.33mL；4.29mmol)和鋅粉(0.36g；5.58mmol)在甲苯(40mL)中的溶液30分鐘，然后以逐滴方式加入中間體5a(2.0g；4.29mmol)在甲苯(45mL)中的溶液。攪拌反應(yīng)混合物過夜，然后在硅藻土填料上過濾(用大量二氯甲烷沖洗)并在減壓下濃縮。在乙酸乙酯中吸收殘余物，并用水洗滌。用二氯甲烷萃取水層。在無水硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)層，過濾并在減壓下濃縮。用2％乙醇的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到所需的化合物(2.12g；85％產(chǎn)率)。
在二氯甲烷(35mL)中吸收叔丁氧羰基保護(hù)的化合物，并加入三氟乙酸(3.0mL)。攪拌反應(yīng)混合物過夜，然后用水接著是飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。在無水硫酸鈉上干燥有機(jī)相，過濾并在減壓下濃縮。用5％甲醇和1％濃縮氫氧化銨的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到中間體6(1.64g；100％產(chǎn)率)。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.01(t，J＝6.93Hz，3H)，1.14(t，J＝6.54Hz，3H)，2.98-3.08(br s，4H)，3.12-3.19(br s，3H)，3.39-3.48(br s，6H)，3.64(s，3H)，7.22-7.28(br s，4H)，7.34(d，J＝8.01Hz，1H)，7.69-7.73(m，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，54.03；H，6.79；N，10.00。C24H32N4O3×2.7HCl×0.6H2O具有C，54.00；H，6.78；N，10.50％。[α]D16＝+6.3°[c 0.53，MeOH]。
中間體73-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體5b(2.5g；5.36mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到1.55g；68％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞97％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.99-1.29(br s，6H)，1.59-1.79(br s，2H)，2.25-2.43(br s，2H)，2.88(t，J＝4.69Hz，4H)，3.16-3.32(br s，2H)，3.43-3.59(br s，2H)，3.76(s，3H)，4.20(s，1H)，5.30(s，1H)，7.11(td，J＝7.23，1.37Hz，1H)，7.21(t，J＝7.42Hz，1H)，7.23-7.28(m，1H)，7.28(d，J＝8.40Hz，2H)，7.38-7.42(m，1H)，7.43(d，J＝8.20Hz，2H)。試驗(yàn)結(jié)果C，51.43；H，6.28；N，9.35。C24H32N4O3×3.8HCl具有C，51.19；H，6.41；N，9.95％。
中間體83-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸乙酯
使用中間體5b(535mg；1.15mmol)和為化合物1描述的方法合成，用氯甲酸乙酯代替氯甲酸甲酯。得到399mg；79％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ1.02-1.27(br s，6H)，1.30(t，J＝7.13Hz，3H)，1.64-1.75(br s，2H)，2.28-2.41(br s，2H)，2.88(br t，J＝4.69Hz，4H)，3.16-3.32(br s，2H)，3.43-3.59(br s，2H)，4.17-4.23(m，1H)，4.21(q，J＝7.03Hz，2H)，5.30(s，1H)，6.65(br s，1H)，7.10(td，J＝7.42，1.37Hz，1H)，7.21(t，J＝7.71Hz，1H)，7.23-7.28(m，1H)，7.28(d，J＝8.40Hz，2H)，7.39-7.43(m，1H)，7.43(d，J＝8.01Hz，2H)。試驗(yàn)結(jié)果C，54.19；H，6.91；N，9.94。C25H34N4O3×2.9HCl×0.6H2O具有C，54.09；H，6.92；N，10.09％。[α]D17＝-5.0°[c 0.52，MeOH]。
中間體93-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸異丁酯 使用中間體5b(300mg；0.64mmol)和為化合物1描述的方法合成，用氯甲酸異丁酯代替氯甲酸甲酯。得到265mg；88％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 0.89(d，J＝6.64Hz，6H)，1.00(t，J＝6.83Hz，3H)，1.13(t，J＝6.93Hz，3H)，1.80-1.95(m，1H)，3.10-3.21(br s，4H)，3.25-3.35(br s，6H)，3.38-3.48(br s，2H)，3.82(d，J＝6.64Hz，2H)，4.48(s，1H)，7.09-7.17(br s，1H)，7.19(d，J＝4.88Hz，2H)，7.29(d，J＝8.01Hz，2H)，7.58(d，J＝7.81Hz，2H)，7.69(br s，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，57.52；H，7.29；N，9.94。C27H38N4O3×2.6HCl×0.1H2O具有C，57.58；H，7.30；N，9.95％。[α]D17＝-7.2°[c 0.53，MeOH]。
化合物13-{(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯 在2mL微波小瓶中，加入在DMF(0.9mL)中的中間體6(200mg；0.47mmol)，然后是碳酸鉀(130mg；0.94mmol)和2-溴代乙基甲基醚(58μL；0.61mmol)。加熱反應(yīng)混合物到130℃保持15分鐘，然后在減壓下濃縮。將殘余物溶解在二氯甲烷中，用1份飽和碳酸氫鈉水溶液然后是1份水來洗滌。在無水硫酸鈉上干燥有機(jī)相，過濾并在減壓下濃縮。利用4％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到化合物1(157mg(HCl鹽)；68％產(chǎn)率)。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 0.98(t，J＝6.54Hz，3H)，1.11(t，J＝6.74Hz，3H)，3.07-3.17(br s，4H)，3.28(s，3H)，3.27-3.34(br s，3H)，3.34-3.56(br s，6H)，3.57-3.62(br s，3H)，3.61(s，3H)，5.08(s，1H)，7.10-7.21(br s，3H)，7.28(d，J＝7.81Hz，2H)，7.58(d，J＝7.42Hz，2H)，7.67(br s，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，52.29；H，6.95；N，8.49。C27H38N4O4×3.5HCl×0.6H2O具有C，52.22；H，6.93；N，9.02％。[α]D16＝+7.8°[c 0.51，MeOH]。
化合物23-((S)-(4-丁基哌嗪-1-基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯 按以下順序向中間體6(250mg；0.59mmol)在1，2-二氯甲烷(12mL)中的室溫溶液中加入丁醛(159μL；1.77mmol)、三乙酸硼氫化鈉(400mg；1.89mmol)和乙酸(33.7μL；0.59mmol)。攪拌反應(yīng)混合物5天，然后用二氯甲烷稀釋。用1份水然后用1份飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌混合物。在無水硫酸鈉上干燥有機(jī)相，過濾并在減壓下濃縮。用4％-5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到化合物2(229mg；81％產(chǎn)率)。純度(HPLC-215nm)＞98％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.91(t，J＝7.32Hz，3H)，1.04-1.25(br s，6H)，1.32(六重峰，J＝7.48Hz，2H)，1.47(br 五重峰，J＝7.23Hz，2H)，2.35(br t，J＝7.03Hz，2H)，2.38-2.73(br s，8H)，3.15-3.34(br s，2H)，3.42-3.61(br s，2H)，3.76(s，3H)，4.21(s，1H)，6.61(s，1H)，7.11(d，J＝7.42Hz，1H)，7.18-7.31(m，4H)，7.37-7.46(m，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，55.45；H，7.49；N，9.07。C28H40N4O3×2.9HCl×1.1H2O具有C，55.48；H，7.50；N，9.24％。[α]D16＝+10.3°[c 0.52，MeOH]。
化合物33-[(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-戊基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯
使用中間體6(200mg；0.47mmol)、1-溴戊烷(75.8μL；0.61mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到182mg；78％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ0.86(t，J＝6.71Hz，3H)，1.01(t，J＝6.83Hz，3H)，1.14(t，J＝6.64Hz，3H)，1.23-1.36(m，4H)，1.61-1.72(m，2H)，3.05-3.13(m，3H)，3.13-3.20(m，3H)，3.33-3.49(br s，6H)，3.50-3.62(br s，2H)，3.64(s，3H)，4.86-5.06(br s，1H)，7.18-7.29(m，3H)，7.32(d，J＝8.01Hz，2H)，7.63-7.74(m，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，58.52；H，7.72；N，9.25。C29H42N4O3×2.5HCl×0.5H2O具有C，58.56；H，7.71；N，9.42％。[α]D16＝+13.5°[c 0.49，MeOH]。
化合物43-[(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-丙基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體6(200mg；0.47mmol)、1-碘丙烷(59.5μL；0.61mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到181mg；82％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ0.93(t，J＝7.42Hz，3H)，1.01(t，J＝7.42Hz，3H)，1.14(t，J＝7.03Hz，3H)，1.63-1.75(m，2H)，2.77(s，1H)，2.91(s，1H)，3.06-3.13(m，3H)，3.14-3.20(m，2H)，3.24-3.39(br s，2H)，3.39-3.50(br s，3H)，3.53-3.63(br s，2H)，3.64(s，3H)，5.06-5.22(br s，1H)，7.20-7.32(m，3H)，7.34(d，J＝8.20Hz，2H)，7.68-7.77(m，3H)，7.90(s，1H)。[α]D16＝+11.4°[c 0.52，MeOH]。
化合物53-((S)-[4-(環(huán)丙基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體6(200mg；0.47mmol)、溴甲基環(huán)丙烷(58.6μL；0.61mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到144mg；64％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.09(q，J＝4.75Hz，2H)，0.49(dtd，J＝7.81，4.68，1.37Hz，2H)，0.79-0.92(br s，1H)，1.01-1.27(br s，6H)，2.26(d，J＝6.44Hz，2H)，2.34-2.69(br s，8H)，3.16-3.32(br s，2H)，3.42-3.60(br s，2H)，3.76(s，3H)，4.22(s，1H)，6.62(s，1H)，7.11(dt，J＝7.42，1.37Hz，1H)，7.21(t，J＝7.71Hz，1H)，7.24-7.27(m，1H)，7.28(d，J＝8.40Hz，2H)，7.37-7.42(m，1H)，7.43(d，J＝8.20Hz，2H)。[α]D17＝+7.5°[c 0.54，MeOH]。
化合物63-((S)-[4-(環(huán)丁基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯
使用中間體6(200mg；0.47mmol)、甲基環(huán)丁基溴(68.7μL；0.61mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到101mg；44％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ1.01-1.30(br s，6H)，1.58-1.73(m，3H)，1.73-1.94(m，2H)，1.98-2.09(m，2H)，2.22-2.59(br s，10H)，3.16-3.32(br s，2H)，3.42-3.60(br s，2H)，3.76(s，3H)，4.19(s，1H)，6.61(s，1H)，7.11(dt，J＝7.42，1.37Hz，1H)，7.21(t，J＝7.71Hz，1H)，7.23-7.27(m，1H)，7.27(d，J＝8.98Hz，2H)，7.36-7.41(m，1H)，7.42(d，J＝8.20Hz，2H)。[α]D17＝+9.7°[c 0.49，MeOH]。
化合物73-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯 在氮?dú)庵性谑覝叵?，攪拌氯甲酸甲?46μL；0.59mmol)和鋅(粉)(50.0mg；0.77mmol)在無水甲苯(6mL)中的懸浮液30分鐘，然后逐滴加入4-{(R)-(3-氨基苯基)[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(250mg；0.59mmol)在無水甲苯(6mL)中的溶液。攪拌反應(yīng)混合物40分鐘，然后在硅藻土填料上過濾。在減壓下濃縮濾液，并用二份乙酸乙酯萃取殘余物。在無水硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)層，過濾并在減壓下濃縮。利用3％甲醇和0.5％氫氧化銨的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到化合物7(100mg；35％產(chǎn)率)。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 0.99(t，J＝6.74Hz，3H)，1.12(t，J＝6.83Hz，3H)，3.10-3.20(br s，4H)，3.29(s，3H)，3.27-3.31(m，4H)，3.36-3.50(brs，4H)，3.62(s，3H)，3.57-3.63(m，4H)，4.50-4.59(br s，1H)，7.05-7.11(br s，1H)，7.12-7.19(m，2H)，7.26(d，J＝8.01Hz，2H)，7.53(d，J＝8.01Hz，2H)，7.65(br s，1H).實(shí)測(cè)值C，55.22；H，7.07；N，9.02.C27H38N4O4×2.8HCl×0.2H2O具有C，55.12；H，7.06；N，9.52％。[α]D16＝-8.4°[c 0.52，MeOH]。
按如下步驟制備4-{(R)-(3-氨基苯基)[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺向N，N-二乙基-4-[(R)-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基](3-硝基苯基)甲基]苯甲酰胺(0.9g；1.98mmol)在溶劑體系(乙醇/四氫呋喃/水/氯化銨4/2/1/1)(2.1mL)中的室溫溶液中加入鐵(粉)(1.1g；19.8mmol)。將反應(yīng)混合物加熱到90℃，并攪拌5小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻到室溫，并在硅藻土填料上過濾。在減壓下濃縮濾液，殘余物吸收在乙酸乙酯中，用1份水洗滌。在無水硫酸鈉上干燥有機(jī)層，過濾并在減壓下濃縮。利用2％甲醇和1％氫氧化銨的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到苯胺(620mg；74％產(chǎn)率)。
按如下步驟制備N，N-二乙基-4-[(R)-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基](3-硝基苯基)甲基]苯甲酰胺在5mL微波小瓶中加入在DMF(4.0mL)中的中間體4b(1.7g，4.29mmol)，然后是碳酸鉀(1.19g；8.58mmol)和2-溴乙基甲基醚(0.53mL；5.58mmol)。加熱反應(yīng)混合物至130℃保持15分鐘，然后在減壓下濃縮。將殘余物溶解在二氯甲烷中，用1份飽和碳酸氫鈉水溶液然后是1份水洗滌。在無水硫酸鈉上干燥有機(jī)層，過濾并在減壓下濃縮。利用4％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫的柱色譜法得到烷基化化合物(0.9g；46％產(chǎn)率)。
化合物83-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-乙氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體7(266mg；0.63mmol)、2-溴乙基乙醚(92μL；0.82mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到225mg(HCl鹽)+32mg；82％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.00(t，J＝6.74Hz，3H)，1.07-1.20(m，6H)，2.77(s，1H)，2.90(s，1H)，3.10-3.18(br s，3H)，3.19-3.24(br s，6H)，3.33-3.39(br s，3H)，3.63(s，3H)，3.52-3.75(m，4H)，5.01-5.22(br s，1H)，7.19-7.26(m，2H)，7.26-7.31(m，2H)，7.34(d，J＝7.42Hz，2H)，7.72(s，2H)，7.86-7.94(br s，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，53.58；H，7.36；N，8.99。C28H40N4O4×2.9HCl×1.4H2O具有C，53.59；H，7.34；N，8.93％。[α]D16＝-7.2°[c 0.50，MeOH]。
化合物93-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(3-甲氧基丙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體4b(140mg；0.32mmol)、用于第一步驟的1-溴-3-甲氧基丙烷(0.85g；5.58mmol)和為化合物7描述的方法合成。得到24mg；15％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞92％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.91(br五重峰，J＝7.03Hz，1H)，0.99-1.46(br s，6H)，1.52-1.71(br s，2H)，1.76(br 五重峰，J＝6.64Hz，1H)，2.22-2.66(br s，8H)，3.15-3.29(br s，2H)，3.32(s，3H)，3.40(t，J＝6.25Hz，2H)，3.45-3.62(br s，2H)，3.76(s，3H)，4.20(s，1H)，5.30(s，1H)，6.62(s，1H)，7.11(d，J＝7.03Hz，1H)，7.23-7.32(m，4H)，7.36-7.47(m，2H)。[α]D16[a]D16＝-12.1°[c0.24，MeOH]。
化合物103-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-丙基哌嗪-1-基]甲基)苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體7(150mg；0.35mmol)、1-溴丙烷(41.7μL；0.46mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到138mg；84％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.89(t，J＝7.32Hz，3H)，1.01-1.32(br s，6H)，1.49(六重峰，J＝7.61Hz，2H)，1.58-1.76(br s，1H)，2.30(br t，J＝7.62Hz，1H)，2.34-2.64(br s，8H)，3.15-3.35(br s，2H)，3.42-3.60(br s，2H)，3.76(s，3H)，4.20(s，1H)，6.62(s，1H)，7.11(d，J＝7.42Hz，1H)，7.21(t，J＝7.71Hz，1H)，7.23-7.28(m，1H)，7.28(d，J＝8.40Hz，2H)，7.37-7.42(m，1H)，7.42(d，J＝8.01Hz，2H)。試驗(yàn)結(jié)果C，54.18；H，7.00；N，8.81。C27H38N4O3×3.6HCl×0.1H2O具有C，54.08；H，7.03；N，9.34％。[α]D16＝-8.4°[c 0.50，MeOH]。
化合物113-((R)-(4-丁基哌嗪-1-基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯
使用中間體7(250mg；0.59mmol)和為化合物2描述的方法合成。得到226mg；80％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 1.00(t，J＝7.32Hz，3H)，1.10(t，J＝6.74Hz，3H)，1.23(t，J＝6.93Hz，3H)，1.42(六重峰.，2H)，1.64-1.76(m，2H)，3.09-3.31(br s，10H)，3.44-3.67(br s，4H)，3.73(s，3H)，4.60(s，1H)，7.19-7.33(m，3H)，7.39(d，J＝8.01Hz，2H)，7.68(d，J＝7.03Hz，2H)，7.74-7.84(m，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，55.20；H，7.20；N，8.62。C28H40N4O3×3.5HCl×0.1H2O具有C，54.96；H，7.18；N，9.16％。[α]D16＝-9.7°[c 0.48，MeOH]。
化合物123-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-戊基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體7(250mg；0.59mmol)、1-碘戊烷(60.0μL；0.46mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到128mg；73％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ0.85(t，J＝6.73Hz，3H)，1.01(t，J＝6.83Hz，3H)，1.14(t，J＝6.74Hz，3H)，1.23-1.36(m，4H)，1.60-1.71(m，2H)，3.07-3.19(m，6H)，3.24-3.36(br s，1H)，3.38-3.51(m，6H)，3.53-3.62(br s，1H)，3.64(s，3H)，5.00-5.18(br s，1H)，7.20-7.31(m，3H)，7.34(d，J＝8.40Hz，2H)，7.67-7.76(m，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，54.55；H，7.20；N，8.75。C29H42N4O3×3.9HCl×0.1H2O具有C，54.54；H，7.28；N，8.77％。[α]D17＝-9.1°[c 0.47，MeOH]。
化合物133-((R)-[4-(環(huán)丙基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯 使用中間體7(150mg；0.35mmol)、溴甲基環(huán)丙烷(43.7μL；0.46mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到134mg；79％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ0.29-0.43(m，2H)，0.61-0.74(m，2H)，0.92-1.08(br s，4H)，1.08-1.20(br s，3H)，2.96-3.17(m，6H)，3.28-3.49(m，4H)，3.62(s，3H)，3.48-3.81(m，4H)，5.18(s，1H)，7.18-7.27(br s，2H)，7.27-7.41(m，3H)，7.65-7.83(br s，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，53.56；H，6.71；N，8.59。C28H38N4O3×4.1HCl具有C，53.54；H，6.76；N，8.92％.[α]D17＝-9.1°[c 0.47，MeOH]。[α]D16＝-8.8deg[c 0.49，MeOH]。
化合物143-((R)-[4-(環(huán)丁基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯
使用中間體7(150mg；0.35mmol)、甲基環(huán)丁基溴(51.6μL；0.46mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到174mg；100％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.01(t，J＝6.45Hz，3H)，1.14(t，J＝6.74Hz，3H)，1.75-1.87(m，3H)，1.88-1.99(m，1H)，2.10(q，J＝8.20Hz，2H)，2.65-2.78(m，1H)，3.11-3.20(m，5H)，3.24-3.37(br s，2H)，3.39-3.56(br s，7H)，3.64(s，3H)，5.04-5.18(br s，1H)，7.21-7.27(m，1H)，7.27-7.32(m，2H)，7.34(d，J＝8.01Hz，2H)，7.68-7.77(m，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，57.27；H，7.36；N，9.11。C29H40N4O3×2.8HCl×0.8H2O具有C，57.18；H，7.35；N，9.20％。[α]D17＝-9.1°[c 0.49，MeOH]。
化合物153-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸乙酯 使用中間體8(150mg；0.34mmol)、2-溴乙基甲醚(42.0μL；0.44mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到125mg(HCl鹽)；69％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.01(t，J＝6.54Hz，3H)，1.14(t，J＝7.03Hz，3H)，1.21(t，J＝7.13Hz，3H)，3.12-3.18(br s，4H)，3.31(s，3H)，3.33(dd，J＝5.86，3.51Hz，3H)，3.37-3.52(br s，6H)，3.64(dd，J＝5.37，4.59Hz，4H)，4.09(q，J＝7.09Hz，2H)，7.18-7.23(br s，3H)，7.31(d，J＝8.01Hz，2H)，7.59-7.64(m，2H)，7.69(s，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，57.93；H，7.53；N，9.03。C28H40N4O4×2.0HCl×0.7H2O具有C，57.77；H，7.51；N，9.62％。[α]D16＝-8.7°[c 0.51，MeOH]。
化合物163-((R)-(4-丁基哌嗪-1-基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸乙酯 使用中間體8(112mg；0.26mmol)和為化合物2描述的方法合成。得到90mg；72％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.90(t，J＝7.32Hz，3H)，1.02-1.25(br s，6H)，1.25-1.36(m，1H)，1.30(t，J＝7.13Hz，3H)，1.40-1.51(m，2H)，1.55-1.72(br s，1H)，2.33(t，J＝7.42Hz，2H)，2.37-2.61(br s，8H)，3.16-3.33(brs，2H)，3.42-3.60(br s，2H)，4.21(q，J＝7.09Hz，2H)，6.57(s，1H)，7.11(dt，J＝7.52，1.32Hz，1H)，7.21(t，J＝7.71Hz，1H)，7.24-7.27(br s，1H)，7.28(d，J＝8.20Hz，2H)，7.38(br s.1H)，7.42(d，J＝8.20Hz，2H)。[α]D16＝-10.1°[c 0.52，MeOH]。
化合物17[3-((R)-[4-(環(huán)丙基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基]氨基甲酸乙酯
使用中間體8(500mg；1.14mmol)和為化合物13描述的方法合成。得到453mg(HCl鹽)；75％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.12-0.28(m，2H)，0.49-0.65(m，2H)，0.93-1.26(m，7H)，1.29(t，J＝7.13Hz，3H)，2.37-2.76(m，9H)，3.13-3.31(br s，2H)，3.42-3.58(br s，2H)，4.20(q，J＝7.16Hz，2H)，4.26(s，1H)，5.29(s，1H)，6.62(s，1H)，7.05-7.11(m，1H)，7.16-7.23(m，2H)，7.27(d，J＝8.20Hz，2H)，7.41(d，J＝8.20Hz，2H)，7.45(s，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，56.87；H，7.66；N，8.95。C29H40N4O3×2.2HCl×2.2H2O具有C，56.87；H，7.67；N，9.15％。[α]D16＝-9.6°[c 0.48，MeOH]。
化合物18{3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-丙基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基甲酸乙酯 使用中間體8(500mg；1.14mmol)、1-碘丙烷(41.7μL；0.46mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到246mg(HCl鹽)；45％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.95(t，J＝7.32Hz，3H)，0.99-1.26(m，6H)，1.29(t，J＝7.13Hz，3H)，1.68-1.90(m，2H)，2.58-2.85(br s，8H)，3.13-3.31(br s，2H)，3.38-3.58(br s，2H)，4.19(q，J＝7.09Hz，2H)，4.30(s，1H)，5.28(s，1H)，6.77(s，1H)，7.04(dt，J＝4.39，1.56Hz，1H)，7.19(d，J＝5.27Hz，2H)，7.27(d，J＝8.40Hz，2H)，7.40(d，J＝8.20Hz，2H)，7.52(s，1H)，8.00(s，1H)。試驗(yàn)結(jié)果C，53.72；H，7.15；N，8.60。C28H40N4O3×3.9HCl×0.2H2O具有C，53.68；H，7.13；N，8.94％。[α]D16＝-12.1°[c 0.51，MeOH]。
化合物19{3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-乙基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基甲酸乙酯 使用中間體8(385mg；0.88mmol)、1-溴乙烷(85.0μL；1.14mmol)和為化合物1描述的方法合成。得到339mg(HCl鹽)；74％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.01(t，J＝6.83Hz，3H)，1.14(t，J＝6.93Hz，3H)，1.20(t，J＝7.13Hz，3H)，1.28(t，J＝7.32Hz，3H)，3.06-3.29(m，7H)，3.27-3.49(m，4H)，3.48-3.72(m，4H)，4.09(q，J＝7.09Hz，2H)，5.15-5.34(br s，1H)，7.22-7.30(m，1H)，7.30-7.42(m，4H)，7.69-7.84(m，3H)。試驗(yàn)結(jié)果C，55.60；H，7.07；N，9.23。C27H38N4O3×3.2HCl具有C，55.60；H，7.12；N，9.61％。[α]D16＝-9.0°[c 0.54，MeOH]。
化合物20{3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基甲酸乙酯
使用中間體8(500mg；1.14mmol)、甲醛(35％的水溶液，780μL；0.44mmol)和為化合物2描述的方法合成，省略乙酸。得到426mg(HCl鹽)；83％產(chǎn)率。純度(HPLC-215nm)＞99％；光學(xué)純度(手性HPLC-215nm)＞99％。
1H NMR游離堿(400MHz，CDCl3)δ0.99-1.25(m，6H)，1.29(t，J＝7.13Hz，3H)，2.28(s，3H)，2.32-2.61(br s，8H)，3.14-3.33(br s，2H)，3.40-3.58(br s，2H)，4.20(q，J＝7.23Hz，2H)，4.18(s，1H)，6.60(s，1H)，7.10(d，J＝7.42Hz，1H)，7.19(t，J＝7.71Hz，1H)，7.23(s，1H)，7.27(d，J＝8.01Hz，2H)，7.37-7.41(m，1H)，7.41(d，J＝8.20Hz，2H)。[α]D16＝-8.7°[c 0.55，MeOH]。
權(quán)利要求
1.式I的化合物，其可藥用鹽、其非對(duì)映異構(gòu)體、其對(duì)映異構(gòu)體或混合物 其中R1選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫、C3-6環(huán)烷基或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基，其中所述C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基任選地被選自C1-6烷基、-CF3、C1-6烷氧基、氯、氟和溴中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代；R2選自-H和C1-3烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基-甲基任選地被選自甲氧基、乙氧基和異丙氧基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代；R2選自-H；和R3選自甲基、乙基、丙基和異丙基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自正丙基、環(huán)丙基甲基、正戊基、2-甲氧基乙基、正丁基、2-異丙氧基乙基、2-乙氧基乙基、3-甲氧基丙基、環(huán)丁基甲基、甲基和乙基；R2選自-H；和R3選自甲基和乙基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物選自化合物13-{(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯；化合物23-((S)-(4-丁基哌嗪-1-基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯；化合物33-[(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-戊基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯；化合物43-[(S)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-丙基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯；化合物53-((S)-[4-(環(huán)丙基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯；化合物63-((S)-[4-(環(huán)丁基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯；化合物73-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯；化合物83-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-乙氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯；化合物93-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(3-甲氧基丙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸甲酯；化合物103-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-丙基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯；化合物113-((R)-(4-丁基哌嗪-1-基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯；化合物123-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-戊基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸甲酯；化合物133-((R)-[4-(環(huán)丙基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯；化合物143-((R)-[4-(環(huán)丁基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸甲酯；化合物153-{(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基氨基甲酸乙酯；化合物163-((R)-(4-丁基哌嗪-1-基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基氨基甲酸乙酯；化合物17[3-((R)-[4-(環(huán)丙基甲基)哌嗪-1-基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}甲基)苯基]氨基甲酸乙酯；化合物18{3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-丙基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基甲酸乙酯；化合物19{3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-乙基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基甲酸乙酯；化合物20{3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}氨基甲酸乙酯；和其可藥用鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物，用作藥物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療疼痛、焦慮癥或功能性胃腸疾病的藥物中的用途。
8.一種藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物和可藥用載體。
9.一種治療溫血?jiǎng)游镏刑弁吹姆椒?，包括為需要這種治療的所述動(dòng)物給藥治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物的步驟。
10.一種治療溫血?jiǎng)游镏泄δ苄晕改c疾病的方法，包括為需要這種治療的所述動(dòng)物給藥治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物的步驟。
11.一種制備式I的化合物的方法，包括 使式II的化合物與R1-X反應(yīng) 其中X為鹵素；R1選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基。
12.一種制備式III的化合物的方法，包括 使式II的化合物與R4-CHO反應(yīng) 其中R4選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、-CF3、C1-6烷氧基、氯、氟和溴中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代。
13.一種制備式I的化合物的方法，包括 使式IV的化合物與R3-O-C(＝O)-X反應(yīng)； 其中X為鹵素；R1選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基任選地被選自-R、-NO2、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R2選自-H、C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；和R3選自C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6環(huán)烷基任選地被選自-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF3、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH2、-SH、-NHR、-NR2、-SR、-SO3H、-SO2R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR2、-NRC(＝O)R和-NRC(＝O)-OR中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，其中R獨(dú)立地為氫或C1-6烷基。
14.一種化合物，選自3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸乙酯；3-[(R)-{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}(哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基甲酸異丁酯；其對(duì)映異構(gòu)體；其可藥用鹽和其混合物。
全文摘要
制備了右式的化合物以及其鹽、對(duì)映異構(gòu)體和包括化合物的藥物組合物，其中R
文檔編號(hào)A61P25/04GK1926122SQ200580006254
公開日2007年3月7日 申請(qǐng)日期2005年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月9日
發(fā)明者威廉·布朗, 安德魯·格里芬 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司