專利名稱：用于治療sars的黃芩屬提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及顯示抗病毒活性的藥物組合物。更具體地，其涉及顯示抗冠狀病毒，并且更特別是對(duì)抗引起嚴(yán)重急性呼吸器官綜合征(SARS)的那些病毒的抗病毒活性的藥物組合物。
背景技術(shù)：
對(duì)獼猴(R.A.M.Fouchier，A.D.M.E.Osterhaus等等Koch′spostulates fulfilled for SARS virus Nature 423，240(2003))和對(duì)人組群(T.Kuiken，A.D.M.E.Osterhaus等等Newly discoveredCoronavirus as the primary cause of severe acute respiratorysyndrome.Lancet 6318，1(2003))的最近觀察結(jié)果提供了結(jié)論性證據(jù)，即一種新發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒(SARS-CoV)是嚴(yán)重急性呼吸器官綜合征(SARS)的主要原因，所述的嚴(yán)重急性呼吸器官綜合征(SARS)是具有高死亡率(全球～10％(世界衛(wèi)生組織-www.who.int/csr/sars))的一種形式的病毒性肺炎，其于2002年11月在中國第一次出現(xiàn)。
因此，具有抗SARS-CoV活性的抗病毒劑可能會(huì)證明對(duì)治療SARS重要。冠狀病毒基因組由單條正鏈RNA組成并且SARS-CoV基因組的全部序列及相關(guān)的變體已經(jīng)公開(P.A.Rota等，Characterization of anovel Coronavirus associated with Severe Acute RespiratorySyndrome，Science 300 1394(2003)和M.A.Marra等，The genomesequence of the SARS-associated Coronavirus，Science 300 1399(2003))并且已經(jīng)詳細(xì)研究了用于抗病毒治療的分子靶標(biāo)。(http//www.sarsresearch.ca/是提供用于分析SARS-CoV及相關(guān)病毒的基因組、基因和蛋白質(zhì)的深入數(shù)據(jù)和方法的生物信息學(xué)網(wǎng)址)。連同病毒聚合酶一起，主要病毒蛋白酶(3CLpro)看起來代表關(guān)鍵的靶標(biāo)(K.Anand等，Coronavirus main proteinase(3CLpro)structureBasisfor design of Anti-SARS drugs.Science 300 1763(2003))。
然而，一種好的候選藥物(AG7088)不能抑制病毒，而同時(shí)顯然無關(guān)的HIV治療(洛匹那韋、那非那韋)是部分活性的(SCRIP在線-www.plbpubs.co.uk/SCRIP/；Factiva在線-www.factiva.com/news)。
除已知的廣譜抗病毒藥如利巴韋林(RBV)外，較不顯著的抑制劑如從甘草提取的甘草甜素(glycyrrhizin)(Cinatl，J等，Glycyrrhizin，an active component of liquorice roots，andreplication of SARS-associated Coronavirus.The Lancet，361，2045(2003))顯示能有效地對(duì)抗SARS-CoV。
然而，對(duì)SARS的爆發(fā)可能會(huì)再次出現(xiàn)這一有充分理由的憂慮，已經(jīng)促進(jìn)了對(duì)有效療法的研究。
因而，存在對(duì)能有效治療SARS、其劑型是東方和西方患者都可接受的藥物和候選藥物的需要。
定義在本說明書中，預(yù)期的下列定義取自美國衛(wèi)生與人類服務(wù)部(U.S.Department of Health and Human Services)，食品與藥品管理局，藥品評(píng)價(jià)與研究中心(CDER)，2000年8月，工業(yè)指導(dǎo)，植物藥產(chǎn)品(Center for Drug Evaluation and Research(CDER)，August 2000Guidance for Industry，Botanical Drug Products)活性成分植物原料、藥用物質(zhì)或藥物產(chǎn)品中負(fù)責(zé)產(chǎn)生想要的藥理學(xué)活性或治療效果的化學(xué)成分。
植物產(chǎn)品；植物性藥材包含植物質(zhì)的標(biāo)記的成品，它可包括植物材料(參見下面)、藻類、肉眼可見的真菌、或這些的組合。部分根據(jù)它預(yù)期的用途，植物產(chǎn)品可為食物、藥物、醫(yī)療裝置或化妝品。
植物藥產(chǎn)品；植物藥預(yù)期用作藥物的植物產(chǎn)品；從植物藥用物質(zhì)制備的藥物產(chǎn)品。植物藥產(chǎn)品以多種劑型提供，例如溶液(例如茶)、粉末、片劑、膠囊、酏劑和局部制劑。
植物藥用物質(zhì)衍生自一種或多種植物、藻類或肉眼可見的真菌的藥用物質(zhì)。它是從植物原料通過下列方法中的一種或多種制備的粉碎、煎煮、壓榨、水提、乙醇提或其它類似方法?？梢远喾N物理形式提供，例如粉末、糊劑、濃縮液體、汁液、膠質(zhì)、糖漿或油。植物藥用物質(zhì)可以從一種或多種植物原料制備(參考單草藥和多草藥植物藥用物質(zhì)或產(chǎn)品)。植物藥用物質(zhì)不包括衍生自天然來源的高度純化或化學(xué)修飾的物質(zhì)。
植物成分源自植物原料的植物藥用物質(zhì)或產(chǎn)品的組分。
植物原料單一物種植物的新鮮的或加工過的(例如清潔、冷凍、干燥或切片)部分，或新鮮的或加工過的藻類或肉眼可見的真菌。
色譜指紋圖譜植物原料或藥用物質(zhì)的色譜圖形，它與參比試樣或標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖形在性質(zhì)和數(shù)量上相符，以確保批次的鑒定和品質(zhì)以及各批次之間的一致性。
膳食補(bǔ)充劑[A]意欲補(bǔ)充飲食的、具有或包含一種或多種下列飲食成分的產(chǎn)品(除外煙草)(A)維生素；(B)礦物質(zhì)；(C)草藥或其它植物性藥材；(D)氨基酸；(E)通過增加總食物攝入，供人類使用補(bǔ)充飲食的飲食物質(zhì)；或(F)在條款(A)、(B)、(C)、(D)或(E)中所述的任何成分的濃縮物、代謝產(chǎn)物、組成成分、提取物或組合；(2)意味著一種產(chǎn)品，它(A)意欲以[FD&C法案的]第411(c)(1)(B)(i)節(jié)中所述形式攝?。换蛞缽牡?11(c)(1)(B)(ii)節(jié)；不代表用作常規(guī)食物或作為膳食或飲食的單獨(dú)項(xiàng)目；和被標(biāo)記為膳食補(bǔ)充劑；和(3)不(A)包括這樣的物品其被批準(zhǔn)作為公共衛(wèi)生署法案(42U.S.C.262)第505節(jié)下的新藥或被批準(zhǔn)作為第351節(jié)下的生物制品，并在這種批準(zhǔn)、認(rèn)證或許可之前，作為膳食補(bǔ)充劑或作為食品上市，除非[FDA]已經(jīng)頒布了條例，在通告和評(píng)論以后，發(fā)現(xiàn)當(dāng)在標(biāo)記該膳食補(bǔ)充劑所列的用途和劑型的情況下用作膳食補(bǔ)充劑或在膳食補(bǔ)充劑中時(shí)，該物品在第402(f)節(jié)之下是非法的；和(B)不包括(i)在公共衛(wèi)生署法案(42U.S.C.262)第505節(jié)下被批準(zhǔn)作為新藥、在第507節(jié)下被認(rèn)證作為抗生素、或在第351節(jié)下被許可作為生物制品的物品，或(ii)被授權(quán)調(diào)查作為新藥、抗生素或生物制品的物品，對(duì)于該物品，實(shí)質(zhì)的臨床研究已經(jīng)創(chuàng)立，該研究的存在已經(jīng)為公眾所知，在這種批準(zhǔn)、認(rèn)證、許可或授權(quán)之前不作為膳食補(bǔ)充劑或作為食品推向市場，除非[FDA]在[它的]考慮中已經(jīng)發(fā)布了條例，在通告和評(píng)論以后，發(fā)現(xiàn)該物品在該法案(21U.S.C.321(ff))下是合法的。
劑型藥物產(chǎn)品的類型，例如，片劑、膠囊、溶液或乳膏，它包含藥物成分(物質(zhì))，通常但不必然地與賦形劑聯(lián)用。
藥物意味著(A)在正式的美國藥典、正式的美國順勢(shì)療法藥典、或正式的國家處方集、或它們中的任何一種的任何補(bǔ)充中公認(rèn)的物品；和(B)意欲用于診斷、治療、減輕、處理或預(yù)防人類或其它動(dòng)物疾病的物品；和(C)意欲影響人類或其它動(dòng)物身體結(jié)構(gòu)或任何功能的物品(不同于食品)；和(D)意欲用作在條款(A)、(B)或(C)中指定的任何物品組分的物品。食品或膳食補(bǔ)充劑，根據(jù)第403(r)節(jié)的需求對(duì)其作出了符合[FD&C法案]的第403(r)(1)(B)節(jié)和第403(r)(3)節(jié)或第403(r)(1)(B)節(jié)和第(r)(5)(D)節(jié)的要求，不是藥物，只因?yàn)闃?biāo)簽或標(biāo)志包含了這種要求。食品、食品成分或膳食補(bǔ)充劑，根據(jù)第403(r)(6)節(jié)對(duì)其作出了真實(shí)的和不令人誤解的陳述，在條款(C)下不是藥物，只因?yàn)闃?biāo)簽或標(biāo)志包含了這種陳述(21U.S.C.321(g)(1))。
藥用物質(zhì)在診斷、治療、減輕、處理或預(yù)防疾病中意欲提供藥理學(xué)活性或其它直接效應(yīng)的，或影響人體結(jié)構(gòu)或任何功能的活性成分(21 CFR 314.3(b))。
藥品意欲推向市場的最終直接包裝的劑型。
食品術(shù)語食品意味著(1)用于食用或飲用的物品，(2)口香糖，和(3)用于所述物品成分的物品(21U.S.C.321(f))。
配方列出劑型的組分(或成分)和組成的處方。多草藥植物藥用物質(zhì)的組分和組成應(yīng)當(dāng)是全部配方的一部分。
標(biāo)記植物原料、藥用物質(zhì)或藥品的化學(xué)成分，它用于鑒定和/或質(zhì)量控制目的，尤其是當(dāng)活性成分未知或未經(jīng)鑒定時(shí)。
多草藥(植物藥用)物質(zhì)或產(chǎn)品得自不止一種植物原料的植物藥用物質(zhì)或藥品，每種植物原料都被看作是植物成分。多草藥植物藥用物質(zhì)可通過一起加工兩種或多種植物原料而制備，或通過聯(lián)合兩種或多種已經(jīng)從它們相應(yīng)的原料各自單獨(dú)加工過了的單草藥植物藥用物質(zhì)而制備。在后一種情況下，各單獨(dú)的單草藥植物藥用物質(zhì)可同時(shí)引入或在劑型制造加工過程中的不同階段引入。
植物材料植物或植物部分(例如皮、木、葉、莖、根、花、果實(shí)、種子、漿果或其部分)以及滲出物。
單草藥(植物藥用)物質(zhì)或產(chǎn)品得自一種植物原料的植物藥用物質(zhì)或藥品。因此，單草藥物質(zhì)或產(chǎn)品通常只包含一種植物成分。
另外的術(shù)語基本上由...組成意欲僅指代存在植物原料和它們的衍生物，排除了存在例如用于制劑配制的賦形劑；治療意欲指代癥狀緩解和/或針對(duì)致病因素的活性。

發(fā)明內(nèi)容
令人驚訝地，本申請(qǐng)人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中組合物(PYN5C)顯示出對(duì)抗SARS-CoV的劑量依賴性活性。
根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了可從黃芩屬(Scutellaria)的物種獲得的植物原料(BRM)、植物藥用物質(zhì)(BDS)或一種或多種植物成分在生產(chǎn)抗病毒藥物中的用途。
優(yōu)選地，該藥物用于治療被正鏈RNA病毒，更特別是被SARS-CoV感染的患者。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物基本上由單一的植物藥用物質(zhì)或植物成分組成。
優(yōu)選地，該藥物與賦形劑一起配制。在一個(gè)實(shí)施方案中該藥物是混懸劑劑型。
根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供了含有黃芩屬種的混懸劑劑型的藥物。
然而，顯然任何合適的劑型都將是可接受的，例如固體劑型如片劑，或液體劑型如糖漿。
同樣，該藥物可配制成通過任何途經(jīng)遞送如經(jīng)口、靜脈內(nèi)遞送，或通過任何其它認(rèn)可的形式遞送的藥物。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，由于該藥物是用于治療上呼吸道感染，其可配制成噴霧劑，更特別是以噴霧器遞送。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，除了黃芩屬種，藥物還包含一種或多種另外的植物藥用物質(zhì)或植物成分，其可從下列一種或多種中獲得b)忍冬屬種(Lonicera spp.)；c)連翹屬種(Forsythia spp)；和/或d)香茶菜屬種(Rabdosia spp.)；PYN5C是黃芩的乙醇單草藥提取物。
已經(jīng)顯示黃芩屬種的水提物表現(xiàn)出對(duì)抗小核糖核酸病毒科病毒(脊髓灰質(zhì)炎-一種負(fù)鏈RNA病毒)和副粘病毒科病毒(麻疹-另一種負(fù)鏈RNA病毒)的抗病毒活性，見WO5,411,733。
也已經(jīng)顯示從黃芩屬種分離的植物黃酮類化合物(flavenoids)(包括黃芩苷元、黃芩苷和漢黃芩素)表現(xiàn)出抗病毒活性(主要但不專門)對(duì)抗HIV，并且也已經(jīng)顯示證明其有抗RSV(Journal ofEthnopharmacology(2002)79(2)，p205-211)和流行性感冒的活性。
盡管有上面的發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)PYN5C顯示抗SARS-CoV活性是意想不到的，因?yàn)橐话愣?，該植物由于其抗?xì)菌活性而用于中藥，而且通常與多種其它的植物物種聯(lián)合使用。實(shí)際上本申請(qǐng)人驚訝于這種單一植物提取物顯示出活性，盡管他們希望包含例如三種草藥即黃芩、連翹和金銀花的提取物的組合(一種與得到許可的中藥雙黃連(Shang HuangLian)(SHL)沒有什么不同的組合物)可能證明是有效抗SARS-CoV的。
因而，根據(jù)本發(fā)明的第三方面提供了可從以下屬的物種獲得的一種或多種植物原料(BRM)、一種或多種植物藥用物質(zhì)(BDS)或一種或多種植物成分在生產(chǎn)用于治療受SARS-CoV感染的患者的植物藥(BD)或膳食補(bǔ)充劑中的用途a)黃芩屬b)忍冬屬；
c)連翹屬；或d)香茶菜屬。
可以使用來自上述植物屬的任何合適的物種。這些物種包括a)作為黃芩屬種黃芩(Scutellaria baicalensis)、云南黃芩(S.amoena)、半枝蓮(S.barbata)、異色黃芩(S.discolor)、連翹葉黃芩(S.hypericifolia)、韓信草(S.inbica)、麗江黃芩(S.likiangensis)、直萼黃芩(S.orthocalyx)、甘肅黃芩(S.rehderiana)、S.scssiliflora和粘毛黃芩(S.viscidula)；b)作為忍冬屬種忍冬(Lonicera japonica)、剛毛忍冬(L.hispidapall)、L.harmsii、和黃褐毛忍冬(L.fulvotomentosa)；c)作為連翹屬種連翹(Forsythia suspensa)、金鐘花(F.viridissima)、卵葉連翹(F.ovata)、東北連翹(F.mandschurica)、朝鮮連翹(F.koeana)、F.spectabilis、F.europaea和F.Xintermedia；和d)作為香茶菜屬種碎米椏(Rabdosia rubescens)、腺花香茶菜(R.adenantha)、香茶菜(R.amethystoides)、細(xì)錐香茶菜(R.coetsa)、顯脈香茶菜(R.nervosa)、黃花香茶菜(R.sculponeata)和牛尾草(R.ternioflia)。
植物藥可通過組合這些物種，特別地但不是唯一地，組合以下物種而獲得a)黃芩；b)忍冬；c)連翹和d)碎米椏。
優(yōu)選的組合包含、基本上組成或組成為來自上面每個(gè)屬的物種的一種或物種的組合，特別是上面確定的優(yōu)選物種中的一種或多種。
優(yōu)選的組合包括，但不限于，如下面列出的屬的物種(以及上面確定的優(yōu)選的物種)的組合1.a)黃芩屬種和c)連翹屬種；
2.a)黃芩屬種和b)忍冬屬種；3.a)黃芩屬種和d)香茶菜屬種；4.a)黃芩屬種、b)忍冬屬種和c)連翹屬種；5.a)黃芩屬種、b)忍冬屬種、c)連翹屬種和d)香茶菜屬種。
優(yōu)選地，每個(gè)物種作為植物藥用物質(zhì)或植物成分存在。
可以使用植物的任何合適的部分。例如可以使用葉、細(xì)枝、枝、樹皮、根、花和果實(shí)。
上面屬的優(yōu)選的物種的優(yōu)選部分a)黃芩屬為根；b)忍冬屬為花；c)連翹屬為果實(shí)；以及d)香茶菜屬為氣生部分，即除外根的任何部分；每個(gè)物種的相對(duì)量(以植物原料的干重計(jì)算)將根據(jù)給定的組合而不同。
對(duì)于單草藥藥物和組合草藥藥物，每一種植物性藥材的量(以植物原料的干重計(jì)算)通常在下表1顯示的范圍內(nèi)表1

對(duì)于二元組合，每種植物可占植物含量的5-95％，更優(yōu)選25-75％并且最優(yōu)選40-60％。
在三種植物性藥材的組合的情況下，量可根據(jù)組合而不同。
當(dāng)組合基本上由黃芩屬種；忍冬屬種和連翹屬種組成時(shí)，每個(gè)物種可以以下面的量存在按重量計(jì)算，連翹屬種以相對(duì)于所有植物原料總重量的30-70％，更優(yōu)選40-60％并且最優(yōu)選50％或更多、最最優(yōu)選大于55％的量存在。
按重量計(jì)算，忍冬屬種以相對(duì)于所有植物原料總重量的12.5-37.5％，更優(yōu)選18.75-31.25％并且最優(yōu)選約27.5％的量存在。
按重量計(jì)算，黃芩屬種以相對(duì)于所有植物原料或成分的總重量的12.5-37.5％，更優(yōu)選18.75-31.25％并且最優(yōu)選為約27.5％的量存在。
根據(jù)本發(fā)明的第四個(gè)方面，提供了懸浮劑粉末混合物，其包含以下植物性藥材按重量計(jì)算相對(duì)于所有植物原料總重量的30-70％的量的連翹屬種，按重量計(jì)算相對(duì)于所有植物原料總重量的12.5-37.5％的量的忍冬屬種，和按重量計(jì)算相對(duì)于所有植物原料總重量的12.5-37.5％的量的黃芩屬種，以及以下賦形劑一種或多種膠凝劑或增稠劑，其中含有至少一種具有如下粒徑分布的黃原膠(xanthum gum)使得100％重量的顆粒通過60目篩，95％重量的顆粒通過80目篩而70％重量的顆粒通過200目篩；一種或多種填充劑；和一種或多種潤濕劑或表面活性劑。
本申請(qǐng)人有理由相信，除黃芩屬種以外，連翹屬的物種也顯示抗SARS-CoV的活性。
從而，在另一個(gè)實(shí)施方案中連翹屬種占總植物提取物的大于50％(按植物原料等價(jià)物的重量計(jì)算)。
當(dāng)證明黃芩屬種或連翹屬種是主要的活性物質(zhì)，優(yōu)選其占植物組分的大于50％，更優(yōu)選大于60％，更進(jìn)一步優(yōu)選大于70％，從80％和90％至多達(dá)100％。
本發(fā)明還延及通過施用根據(jù)本發(fā)明的藥物于患者來治療感染SARS-CoV的患者的方法。
附圖
簡述單一的附圖是顯示PYN5C對(duì)SARS-CoV的抑制效果的代表性測(cè)定板的數(shù)字圖象。
實(shí)施本發(fā)明的最佳模式要求保護(hù)的發(fā)明是基于發(fā)現(xiàn)PYN 5C，即黃芩屬種的凍干的70％乙醇提取物，在細(xì)胞培養(yǎng)中抑制SARS-CoV。通過參考以下已知內(nèi)容i)SHL的組成和類似的草藥組合；ii)黃芩屬種、忍冬屬種、連翹屬種和香茶菜屬種的推測(cè)的活性物質(zhì)；和iii)在中醫(yī)中提供類似藥用效果的備選中草藥。
通過外推，申請(qǐng)人提出除了他們的黃芩屬提取物以外，與他們最初已經(jīng)試驗(yàn)的提取物不同的提取物以及備選的草藥材料或它們可以鑒定的植物成分或活性組分也可能具有SARS-CoV抑制活性并可以另外證明其可用于治療其它的病毒感染，特別是RNA病毒并更特別是正鏈RNA病毒，包括例如RSV、流行性感冒和禽流感。
因而，例如在US6,083,921中，將這一文獻(xiàn)的內(nèi)容通過引用作為參考，其提出a)從黃芩(Radix Scutellariae)分離的黃芩苷；b)從金銀花(Flos Lonicerae)分離的綠原酸和c)從連翹(Fructus Forsythiae)分離的連翹酯甙(Forsythiaside)是SHL的活性化合物。
更特別地，US6,083,921教導(dǎo)了第一種組合物，每ml該組合物含有a)0.25mg黃芩；b)0.25mg連翹和c)0.5mg金銀花。
以及另一種組合物，每ml該組合物含有
a)2mg黃芩苷；b)1mg綠原酸和c)1mg連翹酯甙。
從而，本申請(qǐng)人假設(shè)這種制劑可能像申請(qǐng)人的組合物一樣顯示出抗SARS-CoV的活性。
從而，根據(jù)本發(fā)明的第五個(gè)方面，提供了黃芩苷、綠原酸和連翹酯甙中的任何一種或任何組合在生產(chǎn)用于治療SARS-CoV的藥物或膳食補(bǔ)充劑中的用途。
此外，在US6,083,921中其提出，多種密切相關(guān)的化合物，即如在其中的第2欄中確定的式I和式II化合物，可能具有抗病毒活性。
申請(qǐng)人預(yù)測(cè)這些化合物可能也顯示抗SARS-CoV的活性。
對(duì)改進(jìn)的類似SHL的組合物的其它研究公開于WO02/060379中，該文獻(xiàn)的內(nèi)容也通過引用作為參考。在WO02/060379中，公開了一種改良的SHL片劑。它由a)金銀花；b)連翹；和c)黃芩的不同的且“改良的”提取物制成。
更特別地，使用的提取方法得到確定的藥用物質(zhì)和藥物產(chǎn)品，據(jù)稱其對(duì)抑制流行性感冒病毒、副流感病毒、皰疹病毒I和皰疹病毒II更有效。用于獲得這些更具活性的級(jí)分的提取方法是超臨界二氧化碳抽提法。
因而，據(jù)此申請(qǐng)人預(yù)測(cè)超臨界二氧化碳提取物可能比它們的乙醇提取物顯示出更大的活性。
在WO02/060379中公開的特定的配方含有草藥原料的成比例的混合物，所述的草藥原料的量為a)1份重量的金銀花(相當(dāng)于1875g原料)；b)2份重量的連翹(相當(dāng)于3750g原料)；和c)1份重量的黃芩(相當(dāng)于1875g原料)。
更特別地，其包含
i)90-180份的金銀花和連翹的軟浸膏；ii)10-60份的金銀花和連翹的超臨界提取物；以及iii)30-50份的黃芩提取物。
在說明書中將三維光譜色譜圖用于表征提取物金銀花原料顯示有8-11個(gè)峰，它的第4個(gè)峰是用作參考峰的綠原酸(說明書的圖2)；連翹原料顯示具有11-14個(gè)峰，它的第8個(gè)峰是用作參考峰的連翹苷(說明書的圖3)；并且黃芩原料顯示具有22-25個(gè)峰，它的第12個(gè)峰是黃芩苷而第21峰是黃芩苷元，兩者都用作參考峰(說明書的圖4)。
而且，由于采用的提取技術(shù)，顯示出提高效力的提取物與原料在含量方面不同。
因而，將金銀花和連翹一起提取并且該提取物顯示具有18-21個(gè)峰，它的第8個(gè)、第10個(gè)和第16個(gè)峰分別是綠原酸、咖啡酸和連翹苷的參考峰(說明書的圖5)；黃芩具有4-5個(gè)峰，它的第1個(gè)峰是黃芩苷并且它的第5個(gè)峰是黃芩苷元(說明書的圖6)；并且由這3種草藥的提取物組成的藥物產(chǎn)品具有27-30個(gè)峰，它的第8個(gè)、第12個(gè)、第20個(gè)、第22個(gè)和第28個(gè)峰分別是綠原酸、咖啡酸、連翹苷、黃芩苷和黃芩苷元(說明書的圖7)。
基于它們已經(jīng)顯示的活性，申請(qǐng)人推測(cè)這些組合物和類似的組合物可能也預(yù)期顯示活性。
在本申請(qǐng)人的發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，劑型為懸浮劑粉末，通常包裝于小藥囊中，優(yōu)選采用一個(gè)用于制備用于口服的單位劑量的容器。該容器優(yōu)選裝盛少于100ml的體積量，并且優(yōu)選作標(biāo)記，使得使用者知道要加入多少液體以便使該產(chǎn)品懸浮。最優(yōu)選地，該容器提供有可密封的蓋子以便可以用力搖晃從而使藥物懸浮。
懸浮劑粉末的優(yōu)選賦形劑包括a)一種或多種膠凝劑或增稠劑，優(yōu)選含有至少一種具有以下粒徑分布的黃原膠，使得100％重量的顆粒通過60目篩，95％重量的顆粒通過80目篩以及70％重量的顆粒通過200目篩，b)一種或多種填充劑，特別是味道掩蔽劑；和c)一種或多種潤濕劑或表面活性劑或有助懸浮的其它試劑。
合適的材料描述于EP 1231746中，將其通過引用作為參考。
最優(yōu)選地，劑型可在冷溶劑如水中并在少于50ml，更優(yōu)選少于25ml的體積中懸浮。
優(yōu)選的黃原膠具有3.5-4.0×106的分子量，例如作為Ferwogel出售的黃原膠。
優(yōu)選的潤濕劑是聚乙二醇或碳蠟(macrogol)。
植物藥用物質(zhì)或膳食補(bǔ)充劑可以額外包含崩解劑、潤滑劑、甜味劑、矯味劑和增粘劑中的一種或多種。
可以用于配制植物藥用物質(zhì)的賦形劑的實(shí)例在下表2顯示表2

通過參考下面的實(shí)施例，僅以舉例的方式來進(jìn)一步描述本發(fā)明。
實(shí)施例1提取方案對(duì)黃芩屬種進(jìn)行如下面列出的提取過程1.碾磨材料至細(xì)粉；
2.稱量100g粗粉并用1升70％的乙醇將其回流提取2小時(shí)；3.當(dāng)冷卻后，通過濾紙過濾并收集乙醇提取物；4.將1升70％的乙醇加入黃芩屬種殘余物中并回流2小時(shí)并且重復(fù)步驟3；5.合并步驟3和步驟4的乙醇提取物；6.在“旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀”上回收溶劑以達(dá)到適合凍干的小體積；7.凍干提取物；8.稱量凍干的提取物并存儲(chǔ)于密封的玻璃容器中。
測(cè)試抗冠狀病毒的活性在細(xì)胞培養(yǎng)(vero C1008細(xì)胞，最初由ECACC提供)中測(cè)試PYN 5C對(duì)抗兩種病毒(SARS CoV和RSV S2，由NCPV提供)。將每種試驗(yàn)材料在DMSO中配好并以兩種不同終濃度加入至培養(yǎng)物表層(overlay)。在37℃下孵育3天后，將細(xì)胞單層固定染色并計(jì)數(shù)任何噬斑。
使用RSV2s2的試驗(yàn)結(jié)果是非結(jié)論性的。雖然比較細(xì)胞和病毒對(duì)照，單層中存在微弱的差異，但未產(chǎn)生噬斑。病毒明顯生長而產(chǎn)生合胞體，但測(cè)定法可能需要更長的孵育期以讓細(xì)胞死亡并可見到噬斑。兩種試驗(yàn)材料都不保護(hù)細(xì)胞(除了10μg/ml的利巴韋林有可能)，盡管100μg/ml的濃度未能保護(hù)。
令人驚訝的是使用SARS-CoV的試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生了清楚確定的噬斑(噬斑的數(shù)目在下表3中列出)并且代表性平板的照片在單一的附圖中顯示。
表3

對(duì)于更高濃度的利巴韋林和PYN5C兩者，噬斑的大小都比對(duì)照的小。
結(jié)論P(yáng)YN5C組合物在使用的最高濃度(200μg/ml)抑制了SARS-CoV感染性約50％。鑒于在試驗(yàn)的較低劑量抑制作用較小，該效果看上去是劑量依賴性的。有意義的是，在更高水平的抑制作用大于利巴韋林(100μg/ml)。
實(shí)施例2草藥提取物通過與下列賦形劑混合而配制成懸浮劑型賦形劑Macrogol 6000粉末 0,600gFerwogel 30.385 0,070g甘露醇EZ 0,160gAerosil 200 0,050g阿司帕坦 0,050g焦糖粉末 0,100g薄荷粉末香料 0,060g。
權(quán)利要求
1.從黃芩屬的物種獲得的單一植物藥用物質(zhì)(BDS)或一種或多種植物成分在生產(chǎn)用于治療受SARS-CoV感染的患者的藥物中的用途，所述的黃芩屬的物種選自黃芩、云南黃芩、半枝蓮、異色黃芩、連翹葉黃芩、韓信草、麗江黃芩、直萼黃芩、甘肅黃芩、S.scssiliflora和粘毛黃芩。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中藥物是黃芩屬種的總提取物。
3.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其中藥物進(jìn)一步包含一種或多種賦形劑。
4.如前面的權(quán)利要求任意之一所述的用途，其中植物藥用物質(zhì)是標(biāo)準(zhǔn)化的提取物。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其中來自黃芩屬種的植物藥用物質(zhì)是根據(jù)黃芩苷和/或黃芩苷元標(biāo)記而標(biāo)準(zhǔn)化的。
6.如權(quán)利要求4或5所述的用途，其中標(biāo)準(zhǔn)化的提取物是干燥的乙醇提取物。
7.如權(quán)利要求4-6任意之一所述的用途，其中標(biāo)準(zhǔn)化的提取物是凍干的提取物。
8.如前面的權(quán)利要求任意之一所述的用途，其中藥物是植物藥。
9.如權(quán)利要求8所述的用途，其中植物藥包裝于小藥囊中。
10.如權(quán)利要求9所述的用途，其中植物藥與配藥容器一起包裝。
11.如權(quán)利要求10所述的用途，其中配藥容器具有可密封的蓋子。
12.如權(quán)利要求3所述的用途，其中賦形劑包含一種或多種膠凝劑或增稠劑，其中含有至少一種具有如下粒徑分布的黃原膠，使得100％重量的顆粒通過60目篩，95％重量的顆粒通過80目篩而70％重量的顆粒通過200目篩；一種或多種填充劑；和一種或多種潤濕劑或表面活性劑。
13.如權(quán)利要求1所述的用途，其中從黃芩屬的物種獲得的一種或多種植物成分是植物黃酮類化合物或其合成的等同物。
14.如權(quán)利要求13所述的用途，其中植物黃酮類化合物選自黃芩苷元、黃芩苷和漢黃芩素。
15.可從黃芩屬的物種獲得的植物原料(BRM)、植物藥用物質(zhì)(BDS)或一種或多種植物成分在生產(chǎn)抗病毒藥物中的用途。
16.如權(quán)利要求15所述的用途，其中抗病毒藥物是用于治療正鏈RNA病毒感染的患者。
17.如權(quán)利要求15或16所述的用途，其中藥物是用于治療SARS-CoV感染的患者。
18.含有黃芩屬種的混懸劑藥物。
19.可從以下屬的物種獲得的一種或多種植物原料(BRM)、一種或多種植物藥用物質(zhì)(BDS)或一種或多種植物成分在生產(chǎn)用于治療SARS-CoV的植物藥(BD)或膳食補(bǔ)充劑中的用途a)黃芩屬b)忍冬屬；c)連翹屬；或d)香茶菜屬。
20.一種懸浮劑粉末混合物，其含以下植物性藥材按重量計(jì)算，相對(duì)于所有植物原料總重量的30-70％的量的連翹屬，按重量計(jì)算，相對(duì)于所有植物原料總重量的12.5-37.5％的量的忍冬屬，和按重量計(jì)算，相對(duì)于所有植物原料總重量的12.5-37.5％的量的黃芩屬，和以下賦形劑一種或多種膠凝劑或增稠劑，其中含有至少一種具有如下粒徑分布的黃原膠，使得100％重量的顆粒通過60目篩，95％重量的顆粒通過80目篩而70％重量的顆粒通過200目篩；一種或多種填充劑；以及一種或多種潤濕劑或表面活性劑。
21.如權(quán)利要求20所述的懸浮劑粉末混合物，其含有連翹屬、忍冬屬和黃芩屬物種中每一種的標(biāo)準(zhǔn)化提取物。
22.如權(quán)利要求21所述的懸浮劑粉末混合物，其中連翹屬種是根據(jù)連翹苷標(biāo)記而標(biāo)準(zhǔn)化的；黃芩屬種是根據(jù)黃芩苷和黃芩苷元之一或兩者作為標(biāo)記而標(biāo)準(zhǔn)化的，以及忍冬屬種是根據(jù)綠原酸和/或咖啡酸標(biāo)記而標(biāo)準(zhǔn)化的。
23.黃芩苷、黃芩苷元、綠原酸、連翹酯甙、咖啡酸和連翹苷中的一種或多種在生產(chǎn)用于治療SARS-CoV的藥物中的用途。
24.一種藥物，其基本上由可從以下屬的物種獲得的植物藥用物質(zhì)或植物成分組成a)黃芩屬，b)忍冬屬，c)連翹屬和d)香茶菜屬。
25.一種治療SARS-CoV的方法，其包括給患者施用如前面的權(quán)利要求任意之一所述的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物組合物，其具有抗冠狀病毒，并且更特別是抗引起嚴(yán)重急性呼吸器官綜合征(SARS)的那些病毒的抗病毒活性。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，它含有黃芩屬種(Scutellariae spp)的總標(biāo)準(zhǔn)化提取物。
文檔編號(hào)A61P11/00GK1925863SQ200580006085
公開日2007年3月7日 申請(qǐng)日期2005年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月27日
發(fā)明者鐘守明, 余虹雯, 羅伯特·彌勒 申請(qǐng)人:凡諾華(英國)有限公司