專利名稱：一種提升白細(xì)胞的顆粒劑的制備方法和質(zhì)量控制方法
〔技術(shù)領(lǐng)域〕本發(fā)明的生白泡騰顆粒是涉及一種具有溫腎健脾，補(bǔ)益氣血功效，用于治療癌癥放、化療引起的白細(xì)胞減少屬脾腎陽虛，氣血不足證候者的藥物及其制備方法、質(zhì)量控制方法，屬中藥領(lǐng)域。
〔背景技術(shù)〕隨著現(xiàn)代社會(huì)環(huán)境與食物污染的日益嚴(yán)重，癌癥發(fā)病率越來越高，而治療癌癥主要采用放、化療的手段，但其副作用很大，其中絕大多數(shù)會(huì)引起白細(xì)胞減少癥，此癥由脾腎陽虛，氣血不足而引起，是一種常見病、多發(fā)病?，F(xiàn)代化學(xué)藥物中還沒有一種安全、高效的治療該疾病的長期用藥。而中藥以多活性成分、多靶點(diǎn)藥效為特色，擅長治療、調(diào)理病態(tài)生理功能，且可供長期服用。發(fā)揚(yáng)中醫(yī)藥傳統(tǒng)優(yōu)勢，開發(fā)出制劑穩(wěn)定、用藥安全、劑量準(zhǔn)確、質(zhì)量可控、療效可靠的中藥制劑具有重要意義。
中藥生白口服液是一種用于治療癌癥放、化療引起的白細(xì)胞減少屬脾腎陽虛，氣血不足證候者的中藥成藥制劑，由主原料藥淫羊藿、補(bǔ)骨脂、附子(制)、枸杞子、黃芪、雞血藤、茜草、當(dāng)歸、蘆根、麥冬、甘草等制成，具有溫腎健脾，補(bǔ)益氣血作用。方中淫羊藿、補(bǔ)骨脂、黃芪、甘草和雞血藤含有黃酮類化合物。該制劑中活性成分是其療效的基礎(chǔ)淫羊藿含有的黃酮有增強(qiáng)體液免疫功能的作用〔孫奕.淫羊藿及其提取物的免疫藥理學(xué)研究近況.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào).1995.18(4).49-52〕；黃芪總黃酮對(duì)放療術(shù)中輻射所致的免疫系統(tǒng)損傷有一定的保護(hù)作用〔林善文等.黃芪總黃酮在術(shù)中放療時(shí)對(duì)機(jī)體免疫力影響的實(shí)驗(yàn)觀察.軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào).1995.1.5〕。當(dāng)歸含有機(jī)酸如阿魏酸等有效成分，實(shí)驗(yàn)證明當(dāng)歸所含阿魏酸能明顯促進(jìn)小鼠碳粒廓清和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞，提高機(jī)體免疫功能〔馮俊志.趙國平.當(dāng)歸的免疫藥理研究進(jìn)展.福建中醫(yī)藥.2003.34(3).49〕；在治療癌癥放、化療手術(shù)中，免疫功能的提高很重要。
目前，該制劑為液體制劑，其制劑工藝落后。為使澄明度得到保證，在灌封前，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7，阿魏酸在pH7時(shí)成鹽后很不穩(wěn)定，在液體中很容易破壞損失。為確保液體制劑的澄清，配制時(shí)需冷藏、濾過等操作，一部分水溶性差的有效成分會(huì)沉淀出來而損失掉，如黃酮類成分含量會(huì)大幅度下降。制劑的溶劑為水，其中的藥物穩(wěn)定性差，一些水溶性差的有效成分在儲(chǔ)藏過程中也會(huì)沉淀出來，導(dǎo)致有效成分含量降低，療效得不到保證。因此，生白口服液不符合現(xiàn)代藥物療效可靠、質(zhì)量可控的要求。
〔發(fā)明內(nèi)容〕本發(fā)明目的之一是提供一種中藥生白泡騰顆粒劑；目的之二是提供一種中藥生白泡騰顆粒劑的制備方法。目的之三是提供中藥生白泡騰顆粒劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明將生白口服液改為泡騰顆粒劑(固體制劑)，采用先進(jìn)工藝，不用20％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值助溶，而是將醇沉液回收乙醇后加β-環(huán)糊精助溶，使溶解度差的黃酮類有效成分保留更多，藥液再進(jìn)行噴霧干燥，干法制粒，避免了阿魏酸、黃酮類成分的損失。有效地保留了有效成分，提高了本方的療效。
本發(fā)明的“生白泡騰顆?！本唧w如下本發(fā)明“生白泡騰顆?！庇?40重量份淫羊藿、120重量份補(bǔ)骨脂、80重量份附子(制)、240重量份枸杞子、240重量份黃芪、240重量份雞血藤、240重量份茜草、120重量份當(dāng)歸、240重量份蘆根、120重量份麥冬、120重量份甘草為原料藥制成；藥劑還含助溶劑β-環(huán)糊精10-50重量份；含矯味劑甜菊素0.67重量份，含崩解劑羧甲基淀粉鈉16重量份；含成型劑糊精21重量份，含有泡騰劑20重量份，該泡騰劑由枸櫞酸，碳酸鈉和碳酸氫鈉組成。
本發(fā)明生白泡騰顆粒的制備方法按如下步驟稱取240重量份淫羊藿、120重量份補(bǔ)骨脂、80重量份附子(制)、240重量份枸杞子、240重量份黃芪、240重量份雞血藤、240重量份茜草、120重量份當(dāng)歸、240重量份蘆根、120重量份麥冬、120重量份甘草，備用；以上十一味，加水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.24～1.27(25℃)，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置12～36小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇，加入助溶劑β-環(huán)糊精10-50重量份，60℃攪拌30分鐘-2小時(shí)，濃縮至相對(duì)密度1.08-1.12(50℃)，濾過，噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度160-190℃，出風(fēng)溫度60-90℃，得噴干粉。加成型劑糊精21重量份，加入矯味劑甜菊素0.67重量份，加入泡騰劑酸源枸櫞酸10重量份，堿源10重量份，該堿源由碳酸鈉和碳酸氫鈉組成。該加入崩解劑羧甲基淀粉鈉16重量份，與噴干粉充分混勻，物料在18-60℃溫度下干式制粒，整粒，得顆粒，分裝，即得。
本發(fā)明生白泡騰顆粒的質(zhì)量控制方法，具體如下(1)枸杞的薄層鑒別取本品適量，加水20ml溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml，分取醋酸乙酯液，合并，水浴濃縮，用醋酸乙酯定容至1ml，作為制劑溶液。取枸杞對(duì)照藥材粉末(40目)2g，加60％乙醇30ml回流提取30分鐘，濾過，濾液揮發(fā)至無醇味，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水10ml分次洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml，分取醋酸乙酯液，合并，水浴濃縮，用醋酸乙酯定容至1ml，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-二氯甲烷-甲酸(2∶6∶1)，為展開劑，展開，取出，晾干。在紫外365nm觀察熒光，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯有相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)當(dāng)歸的薄層鑒別取本品適量，加40ml醋酸乙酯超聲提取20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.5g加10ml醋酸乙酯超聲提取20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
所說的取本品適量按2-5g左右取樣量。
(3)淫羊藿苷的含量測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙腈 25體積0.1％三氟乙酸水溶液 75體積流動(dòng)相還可以為乙腈 25體積0.1％乙酸(或磷酸)水溶液 75體積檢測波長為270nm；理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000(4)阿魏酸的含量測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙腈 35體積0.1％三氟乙酸水 65體積流動(dòng)相還可以為乙腈 35體積0.1％磷酸水溶液 65體積檢測波長為313nm；理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
(5)總黃酮的含量測定紫外分光光度計(jì)檢測檢測波長為270nm以甲醇為空白對(duì)照，用紫外分光光度法檢測。
〔具體實(shí)施方式
〕實(shí)施例一 生白泡騰顆粒的制備稱取原料淫羊藿240g、補(bǔ)骨脂120g、附子(制)80g、枸杞子240g、黃芪240g、雞血藤240g、茜草240g、當(dāng)歸120g、蘆根240g、麥冬120g、甘草120g。
以上十一味，加水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.24～1.27(25℃)，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.10(50℃)，加入助溶劑β-環(huán)糊精24g，55℃保溫，充分?jǐn)嚢枞芙猓W(wǎng)篩濾過，噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度170℃，出風(fēng)溫度80℃，所得噴干粉加入崩解劑羧甲基淀粉鈉16g，成型劑乳糖21g，矯味劑甜菊素0.67g，泡騰劑枸櫞酸9.5g、碳酸氫鈉3.1g，碳酸鈉6.2g，充分混勻，物料在18-60℃溫度下干式制粒，整粒，得顆粒216g，分裝，每袋9g，即得產(chǎn)品。
實(shí)施例二 濃縮液相對(duì)密度對(duì)噴霧干燥工藝的影響藥液的噴霧干燥效率與藥液的濃度相關(guān)，根據(jù)下表，以濃縮液的相對(duì)密度1.06～1.13(50℃)作為濃縮終點(diǎn)。
表1 濃縮液相對(duì)密度對(duì)噴霧干燥工藝的影響
實(shí)施例三 進(jìn)、出風(fēng)溫度對(duì)噴霧干燥粉的影響噴霧干燥條件對(duì)成分的保留及顆粒成型極為重要。為利于有效成分的保留和顆粒成型，對(duì)進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度進(jìn)行比較如表2。
表2進(jìn)、出風(fēng)溫度對(duì)噴霧干燥粉的影響
結(jié)果表明，本制劑半成品細(xì)粉粒的含水量在4.0～5.0％時(shí)，可以直接干式制得粒度、硬度適宜的顆粒；含水量高于6.0％時(shí)，顆粒流動(dòng)性較差，加輔料制粒后水分難以控制在5％以內(nèi)；含水量小于4.0％時(shí)，顆粒的細(xì)粉稍多，成品率會(huì)下降。同時(shí)考慮有效成分的保留率，因此應(yīng)控制噴霧干燥的進(jìn)風(fēng)溫度為170-180℃，出風(fēng)溫度70-80℃。
實(shí)施例四 制粒成型輔料的選擇取1個(gè)處方量的藥材，按工藝制備，得噴干粉，分為5份，加入不同量輔料，并加入乳糖調(diào)整至同一重量。干法制成顆粒，對(duì)顆粒的泡騰性進(jìn)行考察，結(jié)果見表3。
表3輔料對(duì)顆粒劑成型性的影響
由表3可以看出，處方4制得的顆粒，泡騰速度適中，故選用處方四。
實(shí)施例五 β-環(huán)糊精用量研究因制劑中有脂溶性的黃酮類成分，故加入β-環(huán)糊精助溶，以提高制劑的有效成分，為了選擇β-環(huán)糊精用量的最佳條件，進(jìn)行了比較試驗(yàn)。
取4個(gè)處方量的藥材，按工藝制備，得濃縮液，分為4份，分別加不同量的β-環(huán)糊精，再按工藝制備，制粒，分裝(9g/袋)，即得。
以總黃酮作為考察指標(biāo)，考察總黃酮的含量，結(jié)果見表4。
表4 β-環(huán)糊精用量與總黃酮含量結(jié)果表
結(jié)果表明，β-環(huán)糊精用量為5g時(shí)助溶效果不理想，當(dāng)增加至10g時(shí)，總黃酮含量較高，如β-環(huán)糊精用量再增加為24g和50g時(shí)，與10g時(shí)指標(biāo)成分的保留率差異很小，故選擇β-環(huán)糊精的用量為10-50g，最佳為24g。
因此，濃縮藥液中加助溶劑β-環(huán)糊精的用量為24g。
實(shí)施例六 生白口服液與生白泡騰顆粒的成分含量研究對(duì)“生白口服液”及“生白泡騰顆?！边M(jìn)行了淫羊藿苷、阿魏酸和總黃酮成分的含量對(duì)比試驗(yàn)，采用室溫留樣試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。
表5 “生白口服液”與“生白泡騰顆?！钡某煞趾繉?duì)比試驗(yàn)
從上可知，生白泡騰顆粒劑的穩(wěn)定性比生白口服液顯著提高。
實(shí)施例七 泡騰顆粒與普通顆粒的溶化性比較表6 泡騰顆粒與普通顆粒的溶化性比較
20025(室溫)不攪拌≥1000由表6可以看出泡騰顆粒比普通顆粒在溶化性上有較大優(yōu)勢，可以明顯減少用水量，改善了藥物的溶解性，宜于食道癌患者等病人服用。
實(shí)施例八 生白泡騰顆粒按下列方法質(zhì)量控制(一)枸杞鑒別 取本品2g，加水20ml溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml，分取醋酸乙酯液，合并，水浴濃縮，用醋酸乙酯定容至1ml，作為制劑溶液。取枸杞對(duì)照藥材粉末(40目)2g，加60％乙醇30ml回流提取30分鐘，濾過，濾液揮發(fā)至無醇味，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水10ml分次洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml，分取醋酸乙酯液，合并，水浴濃縮，用醋酸乙酯定容至1ml，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-二氯甲烷-甲酸(2∶6∶1)，為展開劑，展開，取出，晾干。在紫外365nm觀察熒光，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯有相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)施例九 生白泡騰顆粒按下列方法質(zhì)量控制(二)當(dāng)歸鑒別 取本品粉末5g，加40ml醋酸乙酯超聲提取20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.5g加10ml醋酸乙酯超聲提取20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
實(shí)施例十 生白泡騰顆粒按下列方法質(zhì)量控制(三)淫羊藿苷的含量測定含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000版一部附錄61頁)測定。
系統(tǒng)適用性試驗(yàn)Waters510泵，紫外486檢測器，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈∶0.1％三氟乙酸水溶液(25∶75)為流動(dòng)相，流速為1ml/min；檢測波長為270nm。理論塔板數(shù)按淫羊藿苷計(jì)算應(yīng)不低于3000。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取于60℃減壓干燥至恒重的淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相制成每1ml約含0.02mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品0.1g，置50ml量瓶中，加入50％甲醇溶液適量，超聲30分鐘，冷卻至室溫，用50％甲醇定容，搖勻，離心10分鐘(10000rpm)，取上清液即得。
測定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40O15)計(jì)，不得少于68mg/袋。
實(shí)施例十一 生白泡騰顆粒按下列方法質(zhì)量控制(四)阿魏酸的含量測定含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000版一部附錄61頁)測定。
系統(tǒng)適用性試驗(yàn) Waters 510泵，紫外486檢測器，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈∶0.1％三氟乙酸水溶液(35∶65)為流動(dòng)相，流速為1ml/min；檢測波長為313nm。理論塔板數(shù)按阿魏酸計(jì)算應(yīng)不低于3000。
三氟乙酸換為冰醋酸，取得同樣的效果。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取于60℃減壓干燥至恒重的阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相制成每1ml含0.01mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密稱取本品0.5g，置50ml量瓶中，加入50％甲醇溶液適量，超聲30分鐘，冷卻至室溫，用50％甲醇定容，搖勻，離心10分鐘(10000rpm)，取上清液即得。
測定 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含當(dāng)歸以阿魏酸(C10H10O4)計(jì)，不得少于2mg/袋。
實(shí)施例十二 生白泡騰顆粒按下列方法質(zhì)量控制(五)總黃酮的含量測定含量測定照紫外分光光度法(中國藥典2000版一部附錄33頁)測定。
以甲醇為空白對(duì)照，檢測波長為270nm。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取于60℃減壓干燥至恒重的淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，用甲醇制成每1ml約含0.01mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 稱取聚酰胺5g于玻璃層析柱(Φ2cm，長10cm)內(nèi)，用甲醇50ml緩慢洗滌后，再用50ml蒸餾水洗滌備用。精密稱取本品0.05g，置50ml量瓶中，加入蒸餾水適量，超聲30分鐘，冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻，離心10分鐘(10000rpm)，精密量取上清液10ml緩慢加入聚酰胺柱上，用20ml蒸餾水洗滌，滴干水分，用甲醇洗脫至50ml量瓶中，定容，搖勻，作為供試品溶液。
測定法 分別取對(duì)照品溶液與供試品溶液適量置比色皿中，測定，即得。
本品含總黃酮以淫羊藿苷(C33H40O15)計(jì)，不得少于300mg/袋。


附圖1淫羊藿苷標(biāo)品HPLC圖附圖2生白泡騰顆粒樣品HPLC圖附圖3缺淫羊藿陰性樣品HPLC圖附圖4阿魏酸標(biāo)品HPLC圖附圖5生白泡騰顆粒樣品HPLC圖附圖6缺當(dāng)歸陰性樣品HPLC圖
權(quán)利要求
1.一種提升白細(xì)胞的顆粒劑，由240重量份淫羊藿、120重量份補(bǔ)骨脂、80重量份制附子、240重量份枸杞子、240重量份黃芪、240重量份雞血藤、240重量份茜草、120重量份當(dāng)歸、240重量份蘆根、120重量份麥冬、120重量份甘草為原料藥制成，其特征是含有助溶劑β-環(huán)糊精10-50重量份，含崩解劑羧甲基淀粉鈉16重量份，含成型劑糊精21重量份，含矯味劑甜菊素0.67重量份，含泡騰劑20重量份，該泡騰劑由枸櫞酸，碳酸鈉及碳酸氫鈉組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提升白細(xì)胞的顆粒劑，其特征是含助溶劑β-環(huán)糊精24重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種提升白細(xì)胞的顆粒劑的制備方法，按具體步驟如下稱取淫羊藿、補(bǔ)骨脂、制附子、枸杞子、黃芪、雞血藤、茜草、當(dāng)歸、蘆根、麥冬、甘草，備用；以上十一味，加水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至25℃測定相對(duì)密度1.25，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇，加入助溶劑β-環(huán)糊精10-50重量份，60℃攪拌1小時(shí)，濃縮至50℃測定相對(duì)密度1.10，濾過，噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度160-190℃，出風(fēng)溫度60-90℃，得噴干粉；加成型劑糊精21重量份，加入矯味劑甜菊素0.67重量份，加入泡騰劑，酸源10重量份，該酸源由枸櫞酸組成，堿源10重量份，該堿源由碳酸鈉和碳酸氫鈉組成。加入崩解劑羧甲基淀粉鈉16重量份，與噴干粉充分混勻，物料在18-60℃溫度下干式制粒，整粒、分裝、即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種提升白細(xì)胞的顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征是枸杞鑒別取泡騰劑2g，加水20ml溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml，分取醋酸乙酯液，合并，水浴濃縮，用醋酸乙酯定容至1ml，作為制劑溶液；取粒度為40目的枸杞對(duì)照藥材粉末2g，加60％乙醇30ml回流提取30分鐘，濾過，濾液揮發(fā)至無醇味，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水10ml分次洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml，分取醋酸乙酯液，合并，水浴濃縮，用醋酸乙酯定容至1ml，作為對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為2∶6∶1的醋酸乙酯-二氯甲烷-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外365nm處觀察熒光，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯有相同顏色的熒光斑點(diǎn)；當(dāng)歸鑒別取本品粉末5g，加40ml醋酸乙酯超聲提取20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.5g加10ml醋酸乙酯超聲提取20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以體積比為10∶1的石油醚-醋酸乙酯為展開劑，石油醚的沸點(diǎn)范圍是60～90℃，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，波長365nm，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的所述的一種提升白細(xì)胞的顆粒劑，其淫羊藿苷的含量測定方法是對(duì)照品溶液的制備精密稱取于60℃減壓干燥至恒重的淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相制成每1ml含0.02mg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱取本品0.1g，置50ml量瓶中，加入50％甲醇溶液適量，超聲30分鐘，冷卻至室溫，用50％甲醇定容，搖勻，10000rpm離心10分鐘，取上清液即得；色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑體積比為25∶75的乙腈-0.1％三氟乙酸水為流動(dòng)相；檢測波長為270nm測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的顆粒劑的淫羊藿苷含量測定方法，其特征是流動(dòng)相為體積比為25∶75的乙腈-0.1％乙酸水；
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的顆粒劑的淫羊藿苷含量測定方法，其特征是流動(dòng)相為體積比為25∶75的乙腈-0.1％磷酸水；
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2的所述的一種提升白細(xì)胞的顆粒劑，其阿魏酸的含量測定方法是對(duì)照品溶液制備精密稱取于60℃減壓干燥至恒重的阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相制成每1ml含0.01mg的溶液，即得；供試品溶液制備精密稱取本品0.5g，置50ml量瓶中，加入50％甲醇溶液適量，超聲30分鐘，冷卻至室溫，用50％甲醇定容，搖勻，離心10分鐘(10000rpm)，取上清液即得；色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為35∶65的乙腈-0.1％酸水為流動(dòng)相；檢測波長為313nm測定分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的顆粒劑的阿魏酸含量測定方法，其特征是流動(dòng)相為體積比為35∶65的乙腈-0.1％磷酸水；
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2的所述的一種提升白細(xì)胞的顆粒劑，其總黃酮的含量測定方法是對(duì)照品溶液的制備精密稱取于60℃減壓干燥至恒重的淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，用甲醇制成每1ml含0.01mg的溶液，即得。供試品溶液的制備稱取聚酰胺5g于玻璃層析柱內(nèi)，該柱直徑2cm，長10cm，用甲醇50ml緩慢洗滌后，再用50ml蒸餾水洗滌備用；精密稱取本品0.05g，置50ml量瓶中，加入蒸餾水適量，超聲30分鐘，冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻，10000rpm離心10分鐘，精密量取上清液10ml緩慢加入聚酰胺柱上，用20ml蒸餾水洗滌，滴干水分，用甲醇洗脫至50ml量瓶中，定容，搖勻，作為供試品溶液；紫外分光光度計(jì)檢測檢測波長為270nm測定法 以甲醇為空白對(duì)照，分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液進(jìn)行測定。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種主要用于治療癌癥放、化療引起的白細(xì)胞減少屬脾腎陽虛，氣血不足證候的中藥泡騰顆粒的制備方法和質(zhì)量控制方法。由淫羊藿等11味中藥為原料藥制成，還含助溶劑β－環(huán)糊精10－50重量份，制備工藝中采用β－環(huán)糊精助溶，噴霧干燥及干式制粒的方法，使有效成分盡可能保留完全，便于連續(xù)性GMP條件下大型生產(chǎn)。該泡騰顆粒的質(zhì)量控制方法有枸杞的薄層鑒別、當(dāng)歸的薄層鑒別、淫羊藿苷的高效液相法含量測定、阿魏酸的含量測定和總黃酮的含量測定。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1657093SQ200410078100
公開日2005年8月24日 申請(qǐng)日期2004年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月23日
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