專利名稱：一種治療肝炎的顆粒劑的制備方法和質(zhì)量控制方法
〔技術(shù)領(lǐng)域〕本發(fā)明涉及一種具有清熱利濕，舒肝解郁，祛瘀退黃，利膽降酶功效，治療急性黃疸和無黃疸型肝炎，遷延性、慢性肝炎的藥物及其制備方法，屬中藥領(lǐng)域。
〔背景技術(shù)〕我國是病毒性肝炎的高發(fā)地區(qū)，據(jù)衛(wèi)生防疫部門的疫情報告，我國病毒性肝炎的年發(fā)病率為95萬，在法定傳染病中其發(fā)病率位居第三，僅次于感染性腹瀉和流行性感冒。現(xiàn)代化學(xué)藥物中還沒有一種治療該類疾病的特效、可供長期服用的藥物，而發(fā)揚中醫(yī)藥傳統(tǒng)優(yōu)勢，開發(fā)制劑穩(wěn)定、用藥安全、劑量準確、質(zhì)量可控、療效可靠的中藥制劑具有重要意義。
中藥“三白草肝炎糖漿”是一種用于治療急性黃疸和無黃疸型肝炎，遷延性、慢性肝炎等疾病的中藥成藥制劑，由主原料藥三白草、地耳草、黃芩、茯苓制成，具有清熱利濕，舒肝解郁，祛瘀退黃，利膽降酶作用。但目前該制劑為液體糖漿制劑，劑型落后，藥物穩(wěn)定性差；含防腐劑及大量蔗糖，防腐劑和過多糖分的攝入對人體并無好處，影響制劑的安全使用；對同時患有某些忌糖疾病的病人還會產(chǎn)生高血糖等不良反應(yīng)；據(jù)文獻報道，長期服用含有防腐劑苯甲酸的食品及藥物會存在潛在的肝毒性，特別是對于肝臟疾病患者，會加重肝功能損傷，因三白草肝炎糖漿治療的為肝炎病人，病人肝功能異常，因其中含有防腐劑苯甲酸，也不宜長期服用。
此外，糖漿劑每次服藥量由病人自己量取，劑量不準確，會影響制劑的療效。
〔發(fā)明內(nèi)容〕本發(fā)明目的之一在于提供一種中藥三白草肝炎顆粒劑；目的之二在于提供一種中藥三白草肝炎顆粒劑的制備方法；目的之三在于提供中藥三白草肝炎顆粒劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明將三白草肝炎糖漿劑改為顆粒劑(固體制劑)，采用β-環(huán)糊精包合工藝、技術(shù)，使其黃酮等苦味成分包合，明顯地改善了制劑口味而不影響療效。再進行噴霧干燥、干式制粒，使黃芩苷等有效成分保留更多，提高了本方的療效。
本發(fā)明三白草肝炎顆粒劑具體如下本發(fā)明三白草肝炎顆粒劑由450重量份三白草、300重量份地耳草、150重量份黃芩、150重量份茯苓為原料藥制成，藥劑還含包合劑β-環(huán)糊精50-80重量份，含矯味劑甜菊糖苷0.05重量份，含成型劑低聚乳糖45-75重量份。
本發(fā)明三白草肝炎顆粒劑的制備方法按如下步驟三白草450重量份、地耳草300重量份、黃芩150重量份、茯苓150重量份加水煎煮2次，合并煎液，進行過濾，濾液靜置12小時，取上清液濃縮至適量，放冷至室溫后，加入適量的乙醇使含醇量達70％，攪勻，靜置，濾過，取上清液回收乙醇至相對密度為1.07(50℃)，得清膏，加入包合劑β-環(huán)糊精50-80重量份，充分攪拌，再加成型劑低聚乳糖45-75重量份，濾過，在噴霧狀態(tài)下通入熱空氣，進行噴霧干燥，干燥進風(fēng)溫度170-180℃，出風(fēng)溫度70-90℃，得噴干粉。噴干粉加入矯味劑甜菊糖苷0.05重量份，物料在≤60℃溫度下干式制粒，整粒、分裝即得。
本發(fā)明三白草肝炎顆粒的質(zhì)量控制方法，具體如下(1)三白草鑒別取本品4g，加醋酸乙酯20ml，振搖，分取醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取三白草對照藥材1g，加甲醇10ml，超聲提取，濾過，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解濾液作為對照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以5∶1∶4的二氯甲烷∶乙酸乙酯∶丙酮為展開劑，展開，取出，在365nm下觀察，在供試品色譜中，與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)黃芩苷的含量測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為甲醇 43體積0.1％三氟乙酸水溶液57體積流動相還可以為甲醇 43體積0.1％乙酸水溶液57體積檢測波長為280nm；理論板數(shù)按黃芩苷計算應(yīng)不低于2000(3)槲皮素的含量測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為甲醇 53體積0.1％三氟乙酸水溶液47體積流動相還可以為甲醇 53體積0.1％乙酸水溶液47體積流動相還可以為甲醇 53體積
0.1％磷酸水溶液47體積檢測波長為360nm；理論板數(shù)按槲皮素計算應(yīng)不低于2000〔具體實施方式
〕實施例一 三白草肝炎顆粒劑的制備稱取原料三白草450g、地耳草300g、黃芩150g、茯苓150g。
以上四味，加水煎煮二次，濾過，合并濾液，濾液濃縮至相對密度約為1.20，加乙醇使含醇量達70％，靜置，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至適量，加β-環(huán)糊精65g，加熱溶解，充分攪拌，再加低聚乳糖45g，濾過，進行噴霧干燥，熱空氣進風(fēng)溫度180℃，出風(fēng)溫度80℃，噴干粉加入甜菊糖苷0.05g，在≤60℃溫度下干式制粒，整粒，得棕色顆粒225g。按每次服用量4.5g分裝成袋。
實施例二 包結(jié)條件的選擇由于該藥苦味較大，故采用β-環(huán)糊精包合的方法減小苦味，為了選擇包合的最佳條件，設(shè)計了正交試驗。選用L9(34)正交表，以藥液的苦味作為考察指標(biāo)，進行了9次試驗，各因素水平見表1。
表1 藥液β-環(huán)糊精包結(jié)正交結(jié)果表 *得分是按照藥液苦味的程度而確定的，以最苦為0分，依次遞減分為2分、4分、6分、8分、10分共六個等級，再六人測定，平均評分值。
表2 藥液β-環(huán)糊精包結(jié)正交試驗方差分析表方差來源平方和自由度均方F顯著性藥液濃度 2.14 2 1.0716.03不顯著溫度 0.78 2 0.395.83 不顯著β-CD用量9.69 2 4.8572.60顯著誤差 0.13 2 0.07
由表2的方差分析表可以看出β-CD用量對苦味有顯著影響，其它二個因素對苦味的影響均不顯著。由表2的正交試驗結(jié)果表明，其中K2a＞K1a＞K3a，故因素A選擇水平2，即選擇藥液濃度為2.0g/ml；其中K2b＞K3b＞K1b，故因素B選擇水平2，即選擇溫度為60℃；其中K3c＞K2c＞K1c，故因素C選擇水平3，即選擇β-環(huán)糊精量為65g。即濃縮至藥液濃度為2.0g/ml，相對密度為1.10(50℃)，β-環(huán)糊精用量為65g，保溫為60℃進行攪拌，包合。
同時，β-環(huán)糊精有助溶作用，在上述條件下，考察黃芩苷、槲皮素及總黃酮的含量，結(jié)果見表3。
表3 β-環(huán)糊精用量優(yōu)選表 結(jié)果表明，β-環(huán)糊精用量為35g時助溶效果不理想，當(dāng)增加至50g時，黃芩苷含量較高，如β-環(huán)糊精用量再增加為65和80g時，與50g時指標(biāo)成分的保留率差異很小，故選擇β-環(huán)糊精的用量為50-80g。
實施例三 進、出風(fēng)溫度對噴霧干燥粉的影響噴霧干燥條件對成分的保留及顆粒成型極為重要。為利于有效成分的保留和顆粒成型，對進風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度進行比較如表4。
表4 進、出風(fēng)溫度對噴霧干燥粉的影響進風(fēng)溫度(℃) 出風(fēng)溫度(℃) 黃芩苷保留率(％) 含水量(％) 對制粒的影響190 90 90.5 3.6 稍差180 80 95.6 4.5 非常好170 70 98.2 6.1 較好制粒試驗結(jié)果表明，本制劑半成品細粉粒的含水量在4.0～6.0％時，可以直接干式制得粒度、硬度適宜的顆粒；含水量高于8.0％時，顆粒流動性較差，制粒后水分難以控制在5％以內(nèi)；含水量小于4.0％時，顆粒的細粉稍多，產(chǎn)率會下降。因此應(yīng)控制噴霧干燥的進風(fēng)溫度為170-180℃，出風(fēng)溫度70-80℃。
實施例四 三白草肝炎糖漿、三白草肝炎顆粒的含量及穩(wěn)定性研究對三白草肝炎糖漿、三白草肝炎顆粒進行了穩(wěn)定性對比試驗，以黃芩苷和槲皮素的含量為指標(biāo)，實驗結(jié)果如表5。
表5 三白草肝炎糖漿、三白草肝炎顆粒的含量及穩(wěn)定性對比試驗品種檢驗項目 0個月3個月6個月12個月黃芩苷(mg/支) 25.6 22.7 20.9 15.3三白草肝炎糖漿槲皮素(mg/支) 14.1 12.9 11.3 8.1黃芩苷(mg/袋) 42.3 42.1 42.2 42.1三白草肝炎顆粒槲皮素(mg/袋) 21.8 21.7 21.5 21.6從上可知，三白草肝炎顆粒的含量比三白草肝炎口服液的含量顯著提高(黃芩苷的含量提高了65.2％，槲皮素的含量提高了54.6％)；同時三白草肝炎顆粒的穩(wěn)定性也大大得到了提高。
實施例五 三白草肝炎顆粒劑按下列方法質(zhì)量控制(一)三白草鑒別 取本品4g，加醋酸乙酯20ml，振搖，分取醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取三白草對照藥材1g，加甲醇10ml，超聲提取，濾過，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解濾液作為對照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以5∶1∶4的二氯甲烷∶乙酸乙酯∶丙酮為展開劑，展開，取出，在365nm下觀察，在供試品色譜中，與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
實施例六 三白草肝炎顆粒劑按下列方法質(zhì)量控制(二)黃芩苷的含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000版一部附錄61頁)測定。系統(tǒng)適用性試驗Waters510泵，紫外486檢測器，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇∶0.1％三氟乙酸水溶液(43∶57)為流動相，流速為1ml/min；檢測波長為280nm。理論塔板數(shù)按黃芩苷計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液制備精密稱取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并配制成每1ml中含黃芩苷0.25mg，即得。
供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物粉末0.5g，精密稱定，置25ml量瓶中，加50％甲醇適量，超聲提取30min，放冷，定容，高速離心(10000rpm)10分鐘，取上清液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定。
本品每袋含黃芩苷不得少于40mg。
實施例七 三白草肝炎顆粒劑按下列方法質(zhì)量控制(三)槲皮素的含量測定
照高效液相色譜法(中國藥典2000版一部附錄61頁)測定。系統(tǒng)適用性試驗Waters510泵，紫外486檢測器，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇∶0.1％三氟乙酸水溶液(53∶47)為流動相，流速為1ml/min；檢測波長為360nm。理論塔板數(shù)按槲皮素計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液制備精密稱取槲皮素對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀配制成每1ml中含槲皮素0.07mg。
供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物粉末1.0g，精密稱定，各加60％甲醇40ml，超聲40min(超聲功率為250w，頻率為50KHz)，放冷，定容，過濾，精密移取30ml，加入25％鹽酸7.5ml水浴回流水解40分鐘，快速冷卻，定容至50ml，取樣高速離心(10000rpm)10分鐘，取上清液過膜，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定，計算，即得。
本品每袋含槲皮素不得少于19mg/袋。


圖1 槲皮素標(biāo)品HPLC2 缺三白草、地耳草陰性樣品HPLC3 三白草肝炎顆粒樣品HPLC圖(6號峰為槲皮素峰)
權(quán)利要求
1.一種治療肝炎的顆粒劑，由三白草450重量份、地耳草300重量份、黃芩150重量份、茯苓150重量份為原料藥制成，其特征是含包合劑β-環(huán)糊精50-80重量份，含成型劑低聚乳糖45-75重量份，含矯味劑甜菊糖苷0.05重量份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療肝炎的顆粒劑，其特征是含包合劑β-環(huán)糊精56重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療肝炎的顆粒劑的制備方法，按具體步驟如下a.稱取三白草、地耳草、黃芩、茯苓，備用。b.加水煎煮2次，合并煎液，進行過濾，濾液靜置12小時，取上清液濃縮至適量，放冷至室溫后，加入適量的乙醇使含醇量達70％，攪勻，靜置，濾過，取上清液回收乙醇至50℃測定相對密度為1.07，得清膏，充分攪拌，再加成型劑低聚乳糖45-75重量份，加入包合劑β-環(huán)糊精56-80重量份，充分攪拌，濾過，進行噴霧干燥，干燥進風(fēng)溫度170-180℃，出風(fēng)溫度70-90℃，得噴干粉；噴干粉加入矯味劑甜菊糖苷0.05重量份，物料在20-60℃溫度下干式制粒，整粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療肝炎的顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征是三白草鑒別 取本品4g，加醋酸乙酯20ml，振搖，分取醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取三白草對照藥材1g，加甲醇10ml，超聲提取，濾過，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解濾液作為對照溶液；吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為5∶1∶4的二氯甲烷∶乙酸乙酯∶丙酮為展開劑，展開，取出，在365nm下觀察，在供試品色譜中，與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種治療肝炎的顆粒劑的質(zhì)量控制方法，黃芩苷的含量測定方法是對照品溶液制備精密稱取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀配制成每1ml中含黃芩苷0.25mg，即得；供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物粉末0.5g，精密稱定，置25ml量瓶中，加50％甲醇適量，超聲提取30min，放冷，定容，10000rpm高速離心10分鐘，取上清液，即得；色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為43∶57的甲醇-0.1％三氟乙酸水為流動相；檢測波長為280nm分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的種治療肝炎的顆粒劑的的黃芩苷含量測定方法，其特征是體積比為43∶57的甲醇-0.1％乙酸水為流動相。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的種治療肝炎的顆粒劑的的黃芩苷含量測定方法，其特征是體積比為43∶57的甲醇-0.1％磷酸水為流動相。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療肝炎的顆粒劑的質(zhì)量控制方法，槲皮素的含量測定方法是對照品溶液制備精密稱取槲皮素對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀配制成每1ml中含槲皮素0.07mg；供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物粉末1.0g，精密稱定，各加60％甲醇40ml，超聲40min，放冷，定容，過濾，精密移取30ml，加入25％鹽酸7.5ml水浴回流水解40分鐘，快速冷卻，定容至50ml，10000rpm離心10分鐘，取上清液過膜，即得；色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為53∶47的甲醇-0.1％三氟乙酸水為流動相；檢測波長為360nm分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的種治療肝炎的顆粒劑的的槲皮素含量測定方法，其特征是體積比為53∶47的甲醇-0.1％乙酸水為流動相。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的種治療肝炎的顆粒劑的的槲皮素含量測定方法，其特征是體積比為53∶47的甲醇-0.1％磷酸水為流動相。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療肝炎的顆粒劑的制備方法和質(zhì)量控制方法。由三白草等4味中藥為原料藥制成，藥劑還含包合劑β－環(huán)糊精50－80重量份，含矯味劑甜菊糖苷0.05重量份，含成型劑低聚乳糖45－75重量份。制備工藝中采用β－環(huán)糊精包合，噴霧干燥及干式制粒的方法，使有效成分盡可能保留完全，便于連續(xù)性GMP條件下大型生產(chǎn)。該種治療肝炎的顆粒劑的質(zhì)量控制方法有三白草的薄層鑒別、黃芩苷的高效液相法含量測定和槲皮素的高效液相法含量測定。
文檔編號A61K9/16GK1616031SQ20041007809
公開日2005年5月18日 申請日期2004年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月23日
發(fā)明者濮桂寶 申請人:內(nèi)蒙古伊泰醫(yī)藥科技開發(fā)有限責(zé)任公司