專利名稱：吲哚生物堿衍生物、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物堿衍生物，尤其涉及一種吲哚生物堿衍生物、其制備方法及其用途。
背景技術(shù)：
我國(guó)西北地區(qū)的駱駝蓬含有多種吲哚生物堿，具有中樞神經(jīng)興奮和胺氧化酶抑制活性。從駱駝蓬的種子中主要分離到β-咔啉和去氫-β-咔啉(林啟壽，中草藥成分化學(xué)，科學(xué)出版社，1977，767)。二十世紀(jì)八十年代發(fā)現(xiàn)駱駝蓬生物堿具有抗腫瘤作用，駱駝蓬堿和下式的去氫駱駝蓬堿是抗腫瘤活性成分。
去氫駱駝蓬堿但去氫駱駝蓬堿的溶解度較低、生物利用度不高，導(dǎo)致去氫駱駝蓬堿的抗腫瘤活性不夠高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一類抗腫瘤活性高的吲哚生物堿衍生物。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的一種吲哚生物堿衍生物，具有下述通式I的結(jié)構(gòu)，
通式I其中R選自氨基酸芐酯基、肼基、2-氨基乙氨或1-甲基-四氫咔啉-3-甲酰氨基乙氨基。
上述通式化合物中，所述的氨基酸芐酯基是甘氨酸芐酯基、L-丙氨酸芐酯基、L-纈氨酸芐酯基、L-蘇氨酸芐酯基、L-苯丙氨酸芐酯基、L-酪氨酸芐酯基、L-亮氨酸芐酯基、L-異亮氨酸芐酯基、L-脯氨酸芐酯基、L-谷氨酸芐酯基或L-絲氨酸芐酯基。
本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問(wèn)題是提供上述通式I化合物的制備方法。
本發(fā)明通式I化合物的一種制備方法，包括以下步驟1)在酸催化下L-色氨酸與乙醛反應(yīng)生成1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸，2)1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸與SOCl2、甲醇反應(yīng)生成1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯，3)將1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯氧化生成1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯，4)將1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯皂化生成1-甲基-β-咔啉-3-羧酸，5)在堿和DCC(二環(huán)己基碳化二亞胺)存在下將1-甲基-β-咔啉-3-羧酸與水合肼、乙二胺、L-氨基酸芐酯或甘氨酸芐酯基反應(yīng)即得本發(fā)明化合物。
上述制備方法中，其中步驟1)中催化L-色氨酸與乙醛反應(yīng)所用的酸為無(wú)機(jī)酸，優(yōu)選為98％硫酸；步驟3)中將1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯氧化所用的氧化劑為KMnO4；步驟4)中將1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯皂化所用的堿為強(qiáng)無(wú)機(jī)堿，優(yōu)先為NaOH；步驟5)中所述的堿為有機(jī)堿，優(yōu)先為N-甲基嗎啉。步驟4)中所述的L-氨基酸芐酯為L(zhǎng)-丙氨酸芐酯基、L-纈氨酸芐酯基、L-蘇氨酸芐酯基、L-苯丙氨酸芐酯基、L-酪氨酸芐酯基、L-亮氨酸芐酯基、L-異亮氨酸芐酯基、L-脯氨酸芐酯基、L-谷氨酸芐酯基或L-絲氨酸芐酯基。
本發(fā)明通式I化合物的另一種制備方法，包括以下步驟
1)在酸催化下L-色氨酸與乙醛反應(yīng)生成1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸，2)1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸與SOCl2、甲醇反應(yīng)生成1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯，3)將1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯氧化生成1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯，4)將肼或乙二胺在甲醇和氯仿存在下與1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯反應(yīng)即得。
去氫駱駝蓬堿的藥效團(tuán)是β-咔啉，β-咔啉與DNA雙鏈的作用方式是嵌插，β-咔啉的1位及9位引入了不同的基團(tuán)，其抗癌活性會(huì)發(fā)生顯著變化，其中β-咔啉的1位用甲基取代，其抗癌活性會(huì)變好，β-咔啉的3-位引入柔性側(cè)鏈連接可以降低毒性增強(qiáng)活性。本發(fā)明將芳構(gòu)化的吲哚生物堿的側(cè)鏈連上氨基酸芐酯，可以增強(qiáng)吲哚生物堿的抗腫瘤活性。


圖1本發(fā)明化合物的合成路線圖具體實(shí)施方式
以下將結(jié)合實(shí)施例具體說(shuō)明本發(fā)明，本發(fā)明的實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，并非限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)。
本發(fā)明化合物的中間體制備一、1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的制備攪拌下將2.0g L-色氨酸與0.2ml98％硫酸及20ml水混合，然后往溶液中加2ml40％乙醛，室溫反應(yīng)6h后，有無(wú)色固體析出，用NaHCO3中和反應(yīng)溶液至pH6-7，靜置1h，抽濾，干燥得2.2g(95％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體，mp286-288℃。
二、1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯的制備冰鹽浴下往10ml甲醇中緩慢滴加1mlSOCl2，反應(yīng)15min后除去冰浴，往溶液中加2g1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸，室溫反應(yīng)過(guò)夜。有淡黃色固體析出，用10％碳酸鈉中和反應(yīng)混合物至pH7，靜置15min后抽濾，得2g(94％)標(biāo)題化合物，為淺黃綠色固體，mp.255-257℃。
三、1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯(1)的制備以下A、B、C三種制備方法都可以制備1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯(1)(A)5g(20mmol)1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯溶于50ml DMF。冰鹽浴和攪拌下分次往內(nèi)加入4.5g(28mmol)KMnO4，反應(yīng)大量放熱。反應(yīng)1h后撤去冰浴，室溫反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)混合物抽濾，濾液室溫下吹干，得到的淺黃色固體用甲醇浸泡，濾出黑色殘?jiān)?，濾液減壓濃縮至干，得到的黃色固體與濾出的黑色殘?jiān)喜⒉⒂眉状贾亟Y(jié)晶，得淺3.2g(65％)標(biāo)題化合物，為黃色固體，mp.243-244℃。FAB-MSm/e 241[M+H]+。
(B)將2.5g(10mmol)1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯，0.7g(20mmol)硫粉及20ml無(wú)水二甲苯混合并回流4天。反應(yīng)中有大量硫化氫氣體放出，瓶壁有紅色晶體析出。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液置于冰箱中過(guò)夜，次日過(guò)濾。濾渣先用7ml冷二甲苯洗，然后用石油醚洗，得1.6g(67％)標(biāo)題化合物，為咖啡色固體，mp 242℃。
(C)冷水浴和中快速攪拌下往0.5g(2.1mmol)1-甲基-1，2，3，4-四氫β-咔啉-3-羧酸甲酯和10ml冰醋酸中加入2.25g(5.1mmol)，四醋酸鉛。反應(yīng)混合物攪拌15min，加0.5g(5.1mmol)草酸，再攪拌1h，收集類白色的沉淀。收集的沉淀用少量甲醇洗，然后混懸于75ml水和氯仿(1∶2v/v)混合溶液中。懸浮液用碳酸氫鈉中和，過(guò)濾。濾渣用少量氯仿洗，合并濾液，分出氯仿層。水層用氯仿提取(3×10ml)，合并的氯仿層用無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至干，得0.25g(50％)標(biāo)題化合物，為黃色固體，mp 242℃。
四、1-甲基-β-咔啉-3-羧酸(2)的制備5g1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯溶于120ml 2N NaOH，加熱至60℃反應(yīng)4h，固體逐漸溶解，溶液變?yōu)槌吻澹K止反應(yīng)，放冷至室溫，用濃鹽酸中和至中性，有大量黃色固體析出，冰箱中靜置過(guò)夜，抽濾得3.86g(82％)標(biāo)題化合物，為黃色固體，mp 292℃。FAB-MS(m/e)241[M+H]+。
實(shí)施例1.1-甲基-β-咔啉-3-甲酰肼(3)的制備2.5ml(50.0mmol)N2H4.H2O與2.0mlCH3OH的混合溶液加熱至80℃，往溶液中加入溶于10ml氯仿和2ml甲醇混合溶液的480mg(2mmol)β-咔啉-3-羧酸甲酯，2.5h內(nèi)加完，混合物室溫?cái)嚢柚帘訖z測(cè)無(wú)原料點(diǎn)，有大量白色固體析出，減壓濃縮除去溶劑，殘?jiān)弥鶎游龇蛛x(CHCl3/MeOH，3∶1，v/v)，得180mg(38％)標(biāo)題化合物，為得黃色固體，mp.294-295℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)241[M+H]+，1H-NMR(DMSO-d6)11.90(s，1H)，8.63(s，1H)，8.34(d，J＝7.8Hz，1H)，7.63(d，J＝8.1，1H，H-5)，7.56(t，J＝7.5Hz，1H)，7.26(t，J＝7.5Hz，1H)，4.60(m，1H)，2.80(s，3H).
實(shí)施例2.3-乙氨基-1-甲基-β-咔啉-3-甲酰胺(4)的制備12ml(180mmol)1，2-乙二胺加熱至85-90℃，往溶液中加入溶于30ml氯仿和10ml甲醇混合溶液的1g(4.2mmol)β-咔啉-3-羧酸甲酯，2.5h內(nèi)加完，混合物回流至薄層檢測(cè)無(wú)原料點(diǎn)，減壓濃縮除去溶劑，殘?jiān)弥鶎游龇蛛x(CHCl3/MeOH，3∶1，v/v)，得797mg(71％)標(biāo)題化合物，為黃色固體，mp 172-173℃。
柱層析分離時(shí)得到20mg(1.78％)1，2-乙二胺與兩分子1-甲基-β-咔啉-3-羧酸反應(yīng)的產(chǎn)物，即N，N’-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)乙二胺(5)。
N，N’-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)乙二胺(5)Mp 210-211℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)477[M+H]+，1H-NMR(DMSO-d6)11.92(s，2H)，8.66(s，2H)，8.34(d，J＝7.8Hz，2H)，7.63(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(t，J＝7.5Hz，1H)，7.27(t，J＝7.5Hz，1H)，3.24-3.42(m，4H)，2.80(s，6H).
實(shí)施例3.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)甘氨酸芐酯(6a)的制備將0.403g(2mmol)甘氨酸芐酯鹽酸鹽溶于5ml無(wú)水THF中，往內(nèi)加0.3ml(2.7mmol)N-甲基嗎啉，振搖，有無(wú)色固體析出，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，殘留物用4mlDMF溶解。冰鹽浴下往溶液中加0.2ml N-甲基嗎啉，0.454g(2.2mmol)DCC。然后分次加0.452g(2mmol)1-甲基-β-咔啉-3-羧酸，反應(yīng)1小時(shí)，除去冰浴，室溫反應(yīng)過(guò)夜。TLC檢測(cè)原料消失，終止反應(yīng)，加入40ml乙酸乙酯，過(guò)濾，濾液依次分別用20ml飽和食鹽水洗、飽和碳酸鈉(20ml×3)洗、20ml飽和食鹽水洗、20ml飽和NaHSO4洗、20ml飽和食鹽水洗、飽和碳酸鈉(20ml×3)洗和20ml飽和食鹽水洗后，無(wú)水硫酸鎂干燥過(guò)夜。過(guò)濾除去硫酸鎂，濾液減壓濃縮至干，得到的固體用硅膠柱層析分離(氯仿-甲醇-ACOH，60∶1∶0.1)分離，得到280mg(37.0％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)374[M+H]+，IR(KBr)3341，3028，3009，1751，1690，1601，1582，1501，1460，762，701cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ＝8.70(s，1H)，8.33(s，1H)，8.00(d，J＝7.2Hz，1H)，7.58(t，J＝7.5Hz，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)，7.41(t，J＝7.2Hz，1H)，7.34(t，J＝7.8Hz，1H)，7.32(t，J＝7.6Hz，2H)，7.27(d，J＝7.5Hz，2H)，5.28(s，2H)，4.39(d，J＝5.4Hz，1H)，2.82(s，3H)。
實(shí)施例4.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-丙氨酸芐酯(6b)的制備用實(shí)施例3的操作，得到154mg(19.9％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp.158-160℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)388[M+H]+，IR(KBr)3343，3032，3008，1754，1690，1605，1582，1505，1464，762，701cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ＝8.70(s，1H)，8.43(s，1H)，8.04(s，1H)，7.59(t，J＝7.5Hz，1H)，7.56(d，J＝8.4Hz，1H)，7.41(t，J＝7.2Hz，1H)，7.32(t，J＝7.8Hz，1H)，7.30(t，J＝7.6Hz，2H)，7.27(d，J＝7.5Hz，2H)，5.29(s，2H)，4.91(m，1H)，2.85(s，3H)，1.66(d，J＝6.6Hz，3H)。[α]D＝+2(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1)。
實(shí)施例5.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-纈氨酸芐酯(6c)的制備用實(shí)施例3的操作，得到183mg.(22％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp162-164℃.FAB-MS m/e 416[M+H]+，IR(KBr)3338，3025，3009，1751，1690，1602，1581，1504，1460，761，698cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ＝8.68(s，1H)，8.38(s，1H)，8.04(s，1H)，7.57(t，J＝7.5Hz，1H)，7.56(d，J＝7.2Hz，1H)，7.49(t，J＝7.5Hz，1H)，7.31(t，J＝7.8Hz，1H)，7.29(t，J＝7.6Hz，2H)，7.26(d，J＝7.5Hz，2H)，5.29(s，2H)；4.91(t，J＝7.2Hz，1H)，2.85(s，3H)，1.95-2.22(m，1H)，1.66(d，J＝6.6Hz，3H)。[α]D＝5.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1)。
實(shí)施例6.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-苯丙氨酸芐酯(6d)的制備用實(shí)施例3的操作，得到490mg.(53％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp138-140℃，IR(cm-1)33261626，F(xiàn)AB-MS(m/e)464[M+H]+，IR(KBr)3342，3032，3011，1748，1690，1601，1581，1502，1465，761，702cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ＝8.70(s，1H)，8.24(s，1H)，7.96(d，J＝7.2Hz，1H)，7.57(t，J＝7.5Hz，1H)，7.46(d，J＝8.1Hz，1H)，7.36(t，J＝9.9Hz，1H)，7.30(t，J＝7.8Hz，1H)，7.28(t，J＝7.6Hz，2H)，7.26(d，J＝7.5Hz，2H)，5.26(s，2H)，5.14(dd，J＝4.8Hz，J＝3.5Hz，1H)，3.36(m，2H)，2.72(s，3H)。[α]D＝3.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1)。
實(shí)施例7.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-蘇氨酸芐酯(6e)的制備用實(shí)施例3的操作，得到126mg.(15％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp178-179℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)418[M+H]+IR(KBr)3339，3028，3009，1754，1690，1603，1581，1502，1465，761，702cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ＝8.79(s，1H)，8.22(s，1H)，8.13(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55(t，J＝7.5Hz，1H)，7.55(d，J＝7.2Hz，1H)，7.35(t，J＝7.8Hz，1H)，7.33(t，J＝7.8Hz，1H)，7.30(t，J＝7.6Hz，2H)7.27(d，J＝7.5Hz，2H)，5.29(s，2H)，4.02(t，J＝7.2Hz，1H)，2.85(s，3H)，2.08(m，3H)，1.66(d，J＝6.6Hz，3H)。
實(shí)施例8.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-酪氨酸芐酯(6f)的制備用實(shí)施例3的操作，得到197mg(20％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp 136-137℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)480[M+H]+。IR(KBr)3342，3031，3012，1754，1693，1605，1582，1501，1460，762，701cm-1.1H-NMR(DMSO-d6)δ＝8.76(s，1H)，8.65(m，1H)；8.34(d，J＝7.8，1H，H-8)，7.67(d，J＝7.8Hz，1H)，7.60(t，J＝7.5Hz，1H)，7.34(t，J＝7.5Hz，1H)，7.32(t，J＝7.8Hz，1H)，7.30(t，J＝7.6Hz，2H)，7.27(d，J＝7.5Hz，2H)，6.99(d，J＝6.9Hz，2H)，6.61(d，J＝6.8Hz，2H)，5.26(s，2H)，4.51(m，1H)，3.14(m，2H)，2.82(s，3H).[α]D＝-25.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1).
實(shí)施例9.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-亮氨酸芐酯(6g)的制備用實(shí)施例3的操作，得到256mg.(30％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp 183-185℃.，F(xiàn)AB-MS(m/e)430[M+H]+。IR(KBr)3338，3027，3012，1749，1689，1601，1582，1502，1461，762，701cm-1.1H-NMR(DMSO-d6)δ＝8.67(s，1H)，8.57(d，J＝8.7Hz，1H)，8.34(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55(t，J＝7.5Hz，1H)，7.35(t，J＝7.8Hz，1H)，7.33(t，J＝7.6Hz，2H)，7.31(t，J＝7.5Hz，1H)，7.26(d，J＝7.5Hz，2H)，5.26(s，2H)，4.60(d，J＝5.1Hz，1H)，2.84(s，3H)，1.79-1.99(m，2H)，1.15-1.20(m，1H)，0.96(d，J＝6.0Hz，6H).[α]D＝4.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1).
實(shí)施例10.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-異亮氨酸芐酯(6h)的制備用實(shí)施例3的操作，得到346mg(40％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp.182-183℃，F(xiàn)AB-MS(m/e)430[M+H]+。IR(KBr)3341，3032，3011，1751，1690，1602，1581，1502，1461，1380，1371，761，701cm-1.1H-NMR(DMSO-d6)δ＝8.72(s，1H)，8.55(d，J＝8.7Hz，1H)，8.34(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝8.1Hz，1H)，7.58(t，J＝7.5Hz，1H)，7.34(t，J＝7.8Hz，1H)，7.32(t，J＝7.5Hz，1H)，7.31(t，J＝7.6Hz，2H)，7.26(d，J＝7.5Hz，2H)，5.26(s，2H)，4.51(d，J＝5.1Hz，1H)，2.85(s，3H)，2.03(m，1H)，1.21-1.31(m，2H)，0.97(d，J＝6.9Hz，3H)，0.68-0.95(m，3H).[α]D＝3.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1)，實(shí)施例11.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-脯氨酸芐酯(6i)的制備用實(shí)施例3的操作，得到134mg.(16％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp 190-191℃，IR(KBr)3342，3031，3012，1754，1690，1601，1582，1505，1460，761，702cm-1.FAB-MS(m/e)414[M+H]+。1H-NMR(DMSO-d6)δ＝8.55(s，1H)，8.45(s，1H)，8.32(d，J＝7.2Hz，1H)，7.65(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(t，J＝7.5Hz，1H)，7.35(t，J＝7.8Hz，1H)，7.30(d，J＝7.5Hz，2H)，7.27(t，J＝7.5Hz，1H)，7.25(d，J＝7.5Hz，2H)，，5.28(s，2H)，4.47-4.50(m，1H)，3.71(t，J＝6.6Hz，2H)，2.81(s，3H)，2.20-2.27(m，2H)，2.02-2.07(m，2H).[α]D＝2.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1).
實(shí)施例12.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-谷氨酸芐酯(6j)的制備用實(shí)施例3的操作，得到90mg(8％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp 211-213℃.，F(xiàn)AB-MS(m/e)536[M+H]+。IR(KBr)3340，3029，3008，1752，1692，1603，1584，1502，1461，762，701cm-1.1H-NMR(DMSO-d6)δ＝8.75(s，1H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)，7.60(d，J＝7.8Hz，1H)，7.53(t，J＝7.5Hz，1H)，7.35(t，J＝7.2Hz，1H)，7.33(t，J＝7.8Hz，1H)，7.31(t，J＝7.8Hz，1H)，7.29(t，J＝7.6Hz，2H)，7.28(t，J＝7.6Hz，2H)，7.26(d，J＝7.5Hz，2H)，7.23(d，J＝7.5Hz，2H)，5.28(s，2H)，5.25(s，2H)，3.16-3.40(m，1H)，2.79(s，3H)，1.90(m，2H)，0.85-1.23(m，2H)。[α]D＝3.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1).
實(shí)施例13.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-天冬氨酸芐酯(6k)的制備用實(shí)施例3的操作，得到100mg.(10％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp.202-204℃..FAB-MS(m/e)522[M+H]+。IR(KBr)3342，3027，3009，1754，1690，1601，1582，1501，1463，760，704cm-1.1H-NMR(DMSO-d6)δ＝8.70(s，1H)，8.35(d，J＝7.8Hz，1H)，7.62(d，J＝7.8Hz，1H)，7.58(t，J＝7.5Hz，1H)，7.35(t，J＝7.2Hz，1H)，7.33(t，J＝7.8Hz，1H)，7.32(t，J＝7.8Hz，1H)，7.30(t，J＝7.6Hz，2H)，7.28(t，J＝7.6Hz，2H)，7.26(d，J＝7.5Hz，2H)，7.24(d，J＝7.5Hz，2H)，5.28(s，2H)，5.25(s，2H)，3.20-3.31(m，1H)，2.81(s，3H)，1.85(m，2H)。[α]D＝4.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1)。
實(shí)施例14.N-(1-甲基-β-咔啉-3-甲酰)-L-絲氨酸芐酯(6l)的制備用實(shí)施例3的操作，得到86mg.(12％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp158-160℃.，F(xiàn)AB-MS(m/e)403[M+H]+。IR(KBr)3342，3027，3011，1754，1691，1602，1581，1503，1462，764，703cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ＝8.64(s，1H)，8.44(d，J＝8.1Hz，1H)，8.32(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55(t，J＝7.5Hz，1H)，7.31(t，J＝7.5Hz，1H)，7.25-7.29(m，5H)，5.27(s，2H)，4.72(m，1H)，3.12(m，2H)，2.83(s，3H).[α]D＝4.0(C＝0.5，EtOH/DMSO，4∶1)[試驗(yàn)例]本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性試驗(yàn)一、試驗(yàn)材料1、供試樣品本發(fā)明實(shí)施例所制備的樣品1、2、3、4、5、6a、6b、6c、6d、6e、6f、6g、6h、6i、6j、6k、6l；將供試樣品用含10％胎牛血清的RPMI-1640配制成所需濃度的被測(cè)溶液。
2、試劑四噻唑藍(lán)(MTT)溶于PBS中使?jié)舛葹?mg/mL，過(guò)濾除菌，4℃避光保存。SRB用1％醋酸配成0.4％溶液，4℃避光保存。每升PBS溶液中含8.2gNaCl，0.20g KCl，1.56g Na2HPO4·H2O和0.2g KH2PO4，pH7.4。RPMI-1640培養(yǎng)基按常規(guī)配制。
3、細(xì)胞株系HL-60、Bel-7402、Kb、Hela(來(lái)自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系)二、試驗(yàn)方法及結(jié)果將生長(zhǎng)狀態(tài)良好、濃度為1×104個(gè)/mL、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HL-60、Bel-7402、Kb及Hela細(xì)胞接種于96孔板，37℃5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。棄舊液、換新培養(yǎng)液、加入滅菌處理的本發(fā)明的化合物溶液、再培養(yǎng)48小時(shí)。棄去培養(yǎng)液、每孔加20ml含四噻唑藍(lán)的RPMI-1640(含10％小牛血清)培養(yǎng)液(5mg/ml)、再培養(yǎng)4個(gè)小時(shí)、2500rpm離心20min、吸出上清液、室溫晾干。殘留物中加入二甲基亞砜使其溶解，將紫色溶液用酶標(biāo)儀于570nm測(cè)定吸收值(A)按細(xì)胞抑制率＝(1-治療組A/對(duì)照組A)*100％計(jì)算化合物的抗癌活性結(jié)果見(jiàn)表1-3。
表1本發(fā)明的化合物對(duì)Hela腫瘤細(xì)胞的抑制作用(抑制率％)

表2本發(fā)明的化合物對(duì)HepG2腫瘤細(xì)胞的抑制作用(抑制率％)

表3本發(fā)明的化合物對(duì)MCF-7腫瘤細(xì)胞的抑制作用(抑制率％)

試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明化合物具有較高的抗腫瘤活性。
權(quán)利要求
1.一種吲哚生物堿衍生物，具有下述通式I的結(jié)構(gòu) 通式I其中R選自氨基酸芐酯基、肼基、2-氨基乙氨或1-甲基-四氫咔啉-3-甲酰氨基乙氨基。
2.按照權(quán)利要求1的吲哚生物堿衍生物，其特征是所述的氨基酸芐酯基為甘氨酸芐酯基、L-丙氨酸芐酯基、L-纈氨酸芐酯基、L-蘇氨酸芐酯基、L-苯丙氨酸芐酯基、L-酪氨酸芐酯基、L-亮氨酸芐酯基、L-異亮氨酸芐酯基、L-脯氨酸芐酯基、L-谷氨酸芐酯基或L-絲氨酸芐酯基。
3.通式I化合物的制備方法，通式I化合物的結(jié)構(gòu)如下式， 通式I其中R選自氨基酸芐酯基、肼基、2-氨基乙氨或1-甲基-四氫咔啉-3-甲酰氨基乙氨基。主要包括以下步驟1)在酸催化下L-色氨酸與乙醛反應(yīng)生成1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸，2)1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸與SOCl2、甲醇反應(yīng)生成1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯，3)將1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯氧化生成1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯，4)將1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯皂化生成1-甲基-β-咔啉-3-羧酸，5)在堿和DCC存在下將1-甲基-β-咔啉-3-羧酸與L-氨基酸芐酯或甘氨酸芐酯基反應(yīng)即得本發(fā)明化合物。
4.按照權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征是其中步驟1)中催化L-色氨酸與乙醛反應(yīng)所用的酸為無(wú)機(jī)酸。
5.按照權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征是步驟3)中將1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯氧化所用的氧化劑為KMnO4。
6.按照權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征是步驟4)中將1-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯皂化所用的堿為強(qiáng)無(wú)機(jī)堿。
7.按照權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征是步驟5)中所述的堿為N-甲基嗎啉。
8.通式I化合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。 通式I其中R選自氨基酸芐酯基、肼基、2-氨基乙氨或1-甲基-四氫咔啉-3-甲酰氨基乙氨基。
9.一種具有抗腫瘤活性的藥物組合物，含有權(quán)利要求1所述結(jié)構(gòu)的通式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一類新的吲哚生物堿衍生物、其制備方法及用途。本發(fā)明化合物的制備方法為將L－色氨酸與乙醛反應(yīng)生成1－甲基－1，2，3，4－四氫－β－咔啉－3－羧酸后再與SOCl
文檔編號(hào)A61K31/437GK1743327SQ20041007420
公開(kāi)日2006年3月8日 申請(qǐng)日期2004年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月3日
發(fā)明者彭師奇, 趙明, 王超, 王煒 申請(qǐng)人:首都醫(yī)科大學(xué)