專利名稱：：HPPAR－α受體的噁唑/噻唑衍生物活化劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及某種新化合物。具體來說，本發(fā)明涉及活化α亞型人過氧化物酶體增殖物活化受體(“hPPARα”)的化合物。本發(fā)明還涉及制備所述化合物的方法以及預(yù)防或治療PPARα介導(dǎo)性疾病或病癥的方法。幾種相互獨立的危險因素與心血管疾病有關(guān)。這樣的危險因素包括高血壓、纖維蛋白原水平升高、高甘油三酯、高LDL膽固醇、總膽固醇升高和低HDL膽固醇。HMGCoA還原酶抑制劑(“他汀類藥物”)可用于治療以高LDL-c水平為特征的病癥。已經(jīng)證實降低LDL-c在部分患者、尤其是HDL-c水平正常患者不足以降低心血管疾病風(fēng)險。這種人群用低LDL-c獨立危險因素鑒定。低HDL-c水平相關(guān)心血管疾病的高風(fēng)險仍然沒有藥物療法來成功解決(即目前市場上沒有藥物用于提高HDL-c至40％以上)。(Bisgaier，C.L.；Pape，M.E.Curr.Pharm.Des.1998，4，53-70)。X綜合征(包括代謝綜合征)不精確地定義為多種異常，包括高胰島素血癥、肥胖、高甘油三酯、尿酸、纖維蛋白原、低密度LDL-c顆粒、纖溶酶原激活劑抑制劑1(PAI-1)、HDL-c水平降低。NIDDM稱為胰島素抵抗，胰島素抵抗再引起異常葡萄糖產(chǎn)生和葡萄糖在骨骼肌攝取降低。這些因素最終導(dǎo)致葡萄糖耐量降低(IGT)和高胰島素血癥。過氧化物酶體增殖物活化受體(PPAR)為孤兒受體，屬于類固醇/類維生素A受體超家族的配體活化轉(zhuǎn)錄因子。參見例如Willson，T.M.和Wahli，W.，Cuur.Opin.Chem.Biol.，(1997)，Vol.1，pp235-241。已經(jīng)分離出3種哺乳動物過氧化物酶體增殖物活化受體，稱為PPAR-α、PPAR-γ、PPAR-δ(也稱為NUC1或PPAR-β)。這些PPAR通過結(jié)合稱為PPAR效應(yīng)元件(PPRE)的DNA序列元件調(diào)節(jié)目標(biāo)基因的表達(dá)。迄今，已經(jīng)在編碼調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的蛋白的許多基因的增強(qiáng)子中鑒定了PPRE，提示PPAR在脂肪形成的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)和脂質(zhì)動態(tài)平衡中起關(guān)鍵作用(H.Keller和W.Wahli，TrendsEndocrin.Met291-296，4(1993))。某些激活或作用于一種或多種PPAR的化合物在動物模型中參與調(diào)節(jié)甘油三酯和膽固醇水平。參見例如美國專利號5,847,008(Doebber等)和5,859,051(Adams等)、PCT公布號WO97/28149(Leibowitz等)和WO99/04815(Shimokawa等)。貝特類為一類藥物，它們可以降低血清甘油三酯20-50％、降低LDL-c10-15％、使LDL顆粒大小由致動脈粥樣化的低密度轉(zhuǎn)化為正常密度的LDL-c以及升高HDL-c10-15％。實驗證據(jù)表明，貝特類對血清脂質(zhì)的作用通過激活PPARα而介導(dǎo)。參見例如B.Staels等，Curr.Pharm.Des.，1-14，3(1)，(1997)。激活PPARα導(dǎo)致增加脂肪酸代謝而降低肝臟脂肪酸從頭合成減少的酶發(fā)生轉(zhuǎn)錄，使得降低甘油三酯合成和VLDL-c產(chǎn)生/分泌。此外，PPARα活化降低產(chǎn)生apoC-III。apoC-III為LPL作用抑制劑，apoC-III降低增加VLDL-c清除。參見例如J.Auwerx等，Atherosclerosis，(Shannon，Irel.)，S29-S37，124(Suppl)，(1996)。PPARα配體可以用于治療異常脂血癥和心血管疾病，參見Fruchart，J.C.，Duriez，P.和Staels，B.，Curr.Opin.Lipidol.(1999)，Vol10，pp245-257。本發(fā)明的第一方面提供式(I)化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和可水解酯其中X1為O或S；R1和R2獨立為H或C1-3烷基，或者連接到同一碳原子的R1和R2可以與它們所連接的碳原子一起構(gòu)成3-5元環(huán)烷基環(huán)；R3和R4獨立為H、鹵素、-CH3和-OCH3；R5為H或C1-6烷基；X2為NH、NCH3或O；Y和Z其中之一為N，另一個則為O或S；R6為苯基或吡啶基(其中N在2位或3位)，并且任選被一個或多個鹵素、CF3、C1-6直鏈或支鏈烷基(任選被鹵素取代)取代，條件是R6為吡啶基時，則其N不被取代。另一方面，本發(fā)明公開了一種預(yù)防或治療人PPARα、γ或δ(“hPPAR”)介導(dǎo)性疾病或病癥的方法，包括給予治療有效量的本發(fā)明化合物。hPPAR介導(dǎo)性疾病或病癥包括異常脂血癥(包括相關(guān)糖尿病性異常脂血癥和混合型異常脂血癥)、X綜合征(見本申請定義，包括代謝綜合征)、心力衰竭、高膽固醇血癥、心血管疾病(包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯)、II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素抵抗、高脂質(zhì)血癥、炎癥、上皮高增殖性疾病(包括濕疹和銀屑病)、腸道上皮以及腸道相關(guān)性疾病、以及調(diào)節(jié)肥胖、貪食癥和神經(jīng)性厭食癥等病癥患者的食欲和食物攝取。具體來說，本發(fā)明化合物可用于治療或預(yù)防心血管疾病和病癥，包括動脈粥樣硬化、動脈硬化、高甘油三酯血癥和混合型異常脂血癥。另一方面，本發(fā)明提供包含本發(fā)明化合物以及優(yōu)選包含藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體的藥用組合物。另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明化合物在治療、尤其在人類醫(yī)學(xué)中的用途。另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明化合物在制備用于治療hPPAR介導(dǎo)性疾病或病癥的藥物中的用途。另一方面，本發(fā)明提供一種治療患有hPPAR介導(dǎo)性疾病或病癥的患者的方法，該方法包括給予治療有效量的本發(fā)明化合物。本文使用的“本發(fā)明化合物”是指式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或可水解酯。雖然可水解酯包括在本發(fā)明范圍內(nèi)，但是優(yōu)選酸，因為實驗數(shù)據(jù)顯示雖然酯為有用的化合物，但實際上可能是其水解得到的酸為活性化合物。容易水解的酯能夠在測試條件或體內(nèi)產(chǎn)生羧酸。通常，在結(jié)合及瞬時轉(zhuǎn)染分析中活性物質(zhì)都為羧酸，而酯通常結(jié)合差，但是在瞬時轉(zhuǎn)染分析中有活性，推測可能是由于水解的原因。優(yōu)選的可水解酯為C1-6烷基酯，其中烷基可以為直鏈或支鏈。更優(yōu)選甲基酯或乙基酯。X1優(yōu)選O。R1和R2優(yōu)選甲基。優(yōu)選R3和R4之一為H，更優(yōu)選R3和R4都為H。R5優(yōu)選H。X2優(yōu)選NH。Z優(yōu)選N。Y優(yōu)選S。優(yōu)選R6為任選取代的苯基。優(yōu)選R6為單或雙取代的。R6為吡啶基時，優(yōu)選其N在2位。R6優(yōu)選在對位單取代，更優(yōu)選為苯基。優(yōu)選的取代基為F、CF3、乙基或甲基。雖然每個變量的優(yōu)選基團(tuán)已經(jīng)全部單獨各自列出，但是優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括式(I)中幾個或全部變量選自各變量的優(yōu)選、更優(yōu)選或最優(yōu)選的基團(tuán)的化合物。因此，本發(fā)明包括優(yōu)選、更優(yōu)選以及最優(yōu)選基團(tuán)的所有組合。優(yōu)選式(I)化合物為hPPAR激動劑。式(I)的hPPAR激動劑可以為僅一種類型的激動劑(“選擇性激動劑”)、兩種PPAR亞型的激動劑(“雙重激動劑”)或所有三種亞型的激動劑(“全(pan)激動劑”)。本文使用的“激動劑”、“活化化合物”或“活化劑”等是指這樣的化合物在下述結(jié)合分析中對有關(guān)的PPAR(例如hPPARα)的pKi至少為6.0，優(yōu)選至少7.0，并且在下述轉(zhuǎn)染分析中，濃度為10-5M或10-5M以下時，相對于指定的適當(dāng)陽性對照實現(xiàn)至少50％活化相關(guān)PPAR。更優(yōu)選，在相關(guān)轉(zhuǎn)染分析中，濃度為10-6M或10-6M以下時，本發(fā)明化合物實現(xiàn)50％活化至少一種人PPAR。更優(yōu)選，在相關(guān)轉(zhuǎn)染分析中，濃度為10-7M或10-7M以下時，本發(fā)明化合物實現(xiàn)50％活化至少一種人PPAR。優(yōu)選本發(fā)明化合物為hPPARα激動劑。最優(yōu)選式(I)化合物為選擇性hPPARα激動劑。本文使用的“選擇性hPPARα激動劑”是一種hPPARα激動劑，其對PPARα的EC50比對PPARγ和PPARδ的EC50低至少10倍。這樣的化合物可以稱為“10倍選擇性”。EC50在以下介紹的轉(zhuǎn)染分析中定義，是某種化合物達(dá)到其最大活性50％的濃度。最優(yōu)選的化合物為100-倍以上的選擇性hPPARα激動劑。本發(fā)明優(yōu)選的化合物包括2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯。2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-氟苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯。本發(fā)明的更優(yōu)選化合物包括2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-4-[4-氟苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物是2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可理解式(I)化合物存在立構(gòu)中心。因此，本發(fā)明包括式(I)的所有可能立體異構(gòu)體和幾何異構(gòu)體，并且不僅包括外消旋化合物，而且本發(fā)明同樣包括這些異構(gòu)體的每一種外消旋、富集或純凈形式。當(dāng)需要式(I)化合物為單一的對映異構(gòu)體時，可以通過以下方法獲得拆分最終產(chǎn)物；使用旋光性催化劑或旋光性配體的催化體系或純凈的異構(gòu)初始原料或任何適當(dāng)?shù)闹虚g體進(jìn)行立體專一合成。拆分最終產(chǎn)物、中間體或初始原料可以通過本領(lǐng)域已知的任何合適方法完成。參見例如，StereochemistryofCarbonCompounds，E.L.Eliel(McgrawHill，1962)和TablesofResolvingAgents，S.H.Wilen。另外，在式(I)化合物可能有互變異構(gòu)體時，本發(fā)明包括化合物的所有互變異構(gòu)體形式。具體地講，在許多本發(fā)明優(yōu)選化合物中，R1和R5連接的碳原子為手性的。在這些手性化合物中，部分化合物對不同的PPAR受體的活性在S和R異構(gòu)體之間有差別。優(yōu)選哪一種異構(gòu)體取決于所需的化合物的具體用途。換句話說，甚至使用同一種化合物，也可以在某些用途中優(yōu)選S異構(gòu)體，而在某些用途中優(yōu)選R異構(gòu)體。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員能夠理解的是本發(fā)明化合物也可使用其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的形式。式(I)化合物的生理上可接受的鹽包括用藥學(xué)上可接受的無機(jī)酸或有機(jī)酸或堿生成的常規(guī)鹽以及季銨酸加成鹽。合適的酸鹽的具體實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、高氯酸鹽、富馬酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乙醇酸鹽、甲酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、撲酸鹽(palmoic)、丙二酸鹽、羥基馬來酸鹽、苯乙酸鹽、谷氨酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、富馬酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、苯磺酸鹽、羥基萘甲酸鹽、氫碘酸鹽、蘋果酸鹽、steroic、丹寧酸鹽等。其它酸例如草酸，雖然本身不是藥學(xué)上可接受的，但是可以用于制備用于獲取本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的中間體。合適的堿鹽的具體實例包括鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋁鹽、鈣鹽、鋅鹽、N，N′-二芐基乙二胺鹽、氯代普魯卡因鹽、膽堿鹽、二乙醇胺鹽、乙二胺鹽、N-甲基葡糖胺鹽和普魯卡因鹽。在下文中提及本發(fā)明化合物時，包括式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑化物。本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物適合以藥用組合物的形式給藥。按照常規(guī)方法與一種或多種生理學(xué)上可接受的載體或賦型劑混合可以方便地制備這樣的組合物。雖然可以治療性給予本發(fā)明化合物的未加工化學(xué)品，但是優(yōu)選本發(fā)明活性成分以藥用制劑給予。載體必須為“可接受的”是指載體與制劑的其它成分相容并且不對其接受者產(chǎn)生有害作用。因此，本發(fā)明還提供藥用制劑，該制劑包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，并任選包含其它治療性和/或預(yù)防性成分。所述制劑包括適合口服、胃腸外(包括皮下(例如通過注射或貯庫型片劑(depottablet)、真皮內(nèi)、鞘內(nèi)、肌內(nèi)(例如通過貯庫)和靜脈內(nèi))、直腸和局部(包括皮膚、含服和舌下)給藥的制劑，但是最合適的途徑可以根據(jù)例如患者的身體狀況和疾病選擇。所述制劑可以為單位劑型，并可以通過藥學(xué)領(lǐng)域的任何眾所周知的方法制備。所有方法包括使化合物(“活性成分”)與由一種或多種輔助成分構(gòu)成的載體結(jié)合的步驟。一般來講，制劑可以如下制備使活性成分與液體載體或微細(xì)固體載體或以上兩種載體均勻并緊密地結(jié)合，如果需要，再將產(chǎn)品成型為所需的制劑。適合口服的制劑可以為分散單元例如膠囊劑、扁囊劑或片劑(例如特別用于兒科給藥的可咀嚼片劑)，每一單元包含預(yù)先確定數(shù)量的活性成分；散劑或顆粒劑；在水性液體或非水性液體中的溶液劑或混懸劑；或水包油的液體乳劑或油包水的液體乳劑?；钚猿煞忠部梢灾瞥纱笸杷?、干藥糖劑或糊劑。片劑可以通過任選與一種或多種輔助成分壓制或模塑制備。壓制片劑可以如下制備在合適的機(jī)器上將自由流動形式(例如粉末或顆粒)的活性成分壓制，活性成分任選與其它常規(guī)賦形劑混合，例如粘合劑(例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、西黃蓍膠、淀粉粘漿或聚乙烯吡咯烷酮)、充填劑(例如乳糖、糖、微晶纖維素、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨糖醇)、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅)、崩解劑(例如馬鈴薯淀粉或淀粉乙醇酸鈉)或潤濕劑(例如十二烷基硫酸鈉)。模塑片劑可以如下制備在合適的機(jī)器上模塑用惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀化合物。片劑可以任選包衣或或刻痕，并可以配制為提供緩釋或控釋活性成分的制劑。片劑可以按照本領(lǐng)域眾所周知的方法包衣?；蛘?，本發(fā)明化合物可以摻混到口服液體制劑中，例如水性或油性混懸劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或酏劑。此外，包含上述化合物的制劑可以為干燥產(chǎn)品，在臨用前用水或其它合適的溶媒還原。這樣的液體制劑可以包含常規(guī)添加劑例如懸浮劑，例如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/糖的糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化可食用脂肪；乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性溶媒(可包括可食用油)，例如杏仁油、分餾的椰子油、油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸。這樣的制劑還可以配制為栓劑，例如包含常規(guī)栓劑的基底例如椰子油或其它甘油酯。胃腸外給藥制劑包括水性和非水性無菌注射溶液，所述溶液中可以包含抗氧劑、緩沖劑、制菌劑以及使制劑與預(yù)期接受者的血液等滲的溶質(zhì)；水性和非水性無菌懸浮液，所述懸浮液可以包括懸浮劑和增稠劑。制劑可以置于單位劑量容器或多劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以在冷凍干燥條件下貯存，只需要在臨用前加入無菌液體載體，例如注射用水。臨時注射溶液和懸浮液可以用無菌粉末、顆粒和前述類型的片劑制備。直腸給藥制劑可以為含有常用載體(例如椰子油、固體脂肪或聚乙二醇)的栓劑。在口腔局部給藥(例如含服或舌下)的制劑包括錠劑，其中包含活性成分和調(diào)味基例如蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠；軟錠劑，其中包括活性成分和基底例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠。本發(fā)明化合物還可以配制為貯庫制劑。這樣的長效制劑可以通過埋入法(例如皮下或肌內(nèi))或肌內(nèi)注射給藥。由此舉例來講，化合物可以與適當(dāng)?shù)木酆喜牧匣蚴杷牧?例如為在可接受的油中的乳劑)或離子交換樹脂配制，或配制為低溶解性衍生物，例如低溶解性鹽。除了以上特別提到的成分外，制劑還可以包括本領(lǐng)域中配制所考慮類型的其它常規(guī)試劑，例如適合口服的制劑中可包含調(diào)味劑。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員能夠理解本文提到治療時包括預(yù)防以及治療確定的疾病或病癥。此外，應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明化合物在治療中的用量將根據(jù)所治療疾病的性質(zhì)、患者的年齡和身體狀況變化，并且最終由主治醫(yī)師或獸醫(yī)決定。然而一般來講，用于成人治療的劑量通常為0.02-5000mg/天，優(yōu)選1-1500mg/天。所需劑量可以方便地以單劑量或以合適間隔(例如每天2、3、4或更多次)的分劑量給藥。本發(fā)明制劑可以含有0.1-99％的活性成分，片劑和膠囊劑適合含有30-95％，液體制劑適宜含有3-50％。本發(fā)明使用的式(I)化合物可以與其它治療藥物聯(lián)合使用，例如他汀和/或其它降脂藥例如MTP抑制劑和LDLR上調(diào)劑。本發(fā)明化合物還可與抗糖尿病藥聯(lián)合應(yīng)用，例如甲福明、磺酰脲類和/或PPARγ激動劑(例如噻唑烷二酮如吡格列酮和羅西格列酮)?；衔镞€可以與抗高血壓藥聯(lián)合應(yīng)用，例如鈣通道拮抗劑和ACE抑制劑。由此，本發(fā)明另一方面提供包含式(I)化合物和進(jìn)一步的治療藥物的組合在治療hPPARα介導(dǎo)性疾病中的用途。當(dāng)式(I)化合物與其它治療藥物聯(lián)合應(yīng)用時，所述化合物可以通過任何常規(guī)途徑序貫或同時給藥。以上提到的組合在使用中可以藥用制劑形式出現(xiàn)，因此，包含以上定義的組合并最好包含藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥用制劑構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。這樣的組合中各獨立組分可以單獨或混合的藥用制劑形式序貫或同時給藥。當(dāng)混合在同一制劑時，應(yīng)當(dāng)理解的是兩種化合物必須穩(wěn)定、相互兼容并與制劑中其它組分相容，并且可以配制用于給藥。當(dāng)單獨配制時，它們可以以本領(lǐng)域所述各化合物已知的方式方便地提供為任何合適的制劑。當(dāng)式(I)化合物與第二種對相同hPPAR介導(dǎo)性疾病有活性的治療藥物聯(lián)合應(yīng)用時，每種化合物的劑量可能與單獨使用各化合物時的劑量不同。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員很容易確定合適的劑量。本發(fā)明化合物可以方便地通過常規(guī)步驟制備其中采用肽偶合反應(yīng)使如(A)的部分與酸(B)偶合，或者用酯(C)?；?A)。式(C)中R優(yōu)選C1-6烷基。注意此合成優(yōu)選在A部分的酸基團(tuán)被R保護(hù)下完成。因此雖然R可以為H，但是優(yōu)選R為C1-6烷基，它可以通過水解脫去得到式(I)酸，或者如果容易水解，可以直接給予得到的酯?；衔?A)、(B)和(C)可以按照例如以下的實施例演示合成。此類型的中間體可以由市售獲得，或者其制備對于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員是顯而易見的，例如通過下述類似方法。當(dāng)X1為O，X2為NH(R1、R2為甲基，R3、R4、R5為H)時，(A)的優(yōu)選合成法為注意在此合成中可以使用羧酸B(方法A)或酯C(方法B)。例如，當(dāng)X1為O，X2為NH，Y為S，Z為N，R1＝R2＝甲基，R3＝R4＝R5＝H，R6為4-Et-苯基時當(dāng)X1和X2為0時，式(1)化合物可以采用DIC/DMAP/NEt3使式(B)化合物與式(A)化合物反應(yīng)。本發(fā)明進(jìn)一步通過以下中間體和實施例進(jìn)行說明，但不應(yīng)解釋為對本發(fā)明的限制。中間體1在35min內(nèi)，向冷卻至15℃的212.8g(1.79mol)對羥基苯甲腈的1.7LDMF(8vol.)溶液中分批加入121g(3.04mol.，1.7eq.)分散于石蠟中的NaH(60％)。在返至室溫后，將混合物攪拌30min，在1小時內(nèi)緩慢加入393mL(2.68mol.，1.5eq.)溴代異丁酸乙酯。在加料期間，通過冷卻使惰性溫度保持在25℃以下，因為發(fā)生了輕微的放熱反應(yīng)。將混合物在室溫下攪拌過夜，在80℃加熱2h。在冷卻至20℃以下后，加入600ml1N氫氧化鈉溶液破壞過量的氫化鈉。水溶液用1L乙醚萃取3次。合并的有機(jī)層用200ml1N氫氧化鈉溶液(消除痕量對羥基苯甲腈)和500ml鹽水洗滌兩次。用硫酸鎂干燥后，過濾并濃縮至干，傾析油狀殘余物，除去33.5g石蠟油(上層)。估計189.9g油狀殘余物與14.9g殘余石蠟油混合。粗制中間體1直接使用無需再提純。估計產(chǎn)率約為42％(約175g)。中間體2在1L氫化器中，59.3g中間體1(0.254mol(最多)、43.6ml(0.762mol.，3eq.)冰醋酸和6g(10％w/w)Pd/C10％在250ml乙醇中的混合物在室溫、2bar下氫化。在8h吸收8.7L氫(理論體積11.4L)后反應(yīng)停止。過濾出催化劑后，將溶液蒸發(fā)至干獲得中間體2的醋酸鹽(油狀殘余物)。將殘余物傾入300ml水(pH＝5)中，水層用200ml環(huán)己烷萃取兩次。在此操作期間，出現(xiàn)樹膠狀固體，將其留在水層中(可能是部分醋酸鹽)。加入400ml乙酸乙酯后，兩相混合物冷卻至15℃，用500ml1NNaOH溶液處理(至pH＝12)。在傾析后，水層用400ml乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機(jī)層用200ml鹽水洗滌。有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)獲得35.5g粗制中間體2(黃色油狀物，58.9％收率)，將其直接用于下一步無需再提純(LC-MS純度＝約90％)。中間體3在10-12℃，向200g(1.23mol，Avocado)4-乙基苯基丙酮的800ml乙酸溶液中滴加61.8ml(1eq.)溴的600ml乙酸溶液2h。在加入最后階段，將混合物攪拌5min，然后用水(2L)處理。冷卻后，加入100gNa2SO3，將所得混合物在室溫下攪拌1h。傾析兩相混合物，水層用1LCH2Cl2萃取兩次。全部有機(jī)層用1L水洗滌，用硫酸鈉干燥。在過濾并濃縮至干后，獲得288g褐色油狀物(97％收率)。中間體4288g(1.19mol)中間體3的2.9L乙醇溶液中加入158.8g(1eq.，Acros)硫代草氨酸乙酯。將溶液在室溫下攪拌1h，然后回流1h。在蒸發(fā)乙醇后，黑色殘余物用1L水稀釋，用3×500mlCH2Cl2萃取。有機(jī)層用500ml水洗滌兩次。用硫酸鈉干燥后，減壓蒸發(fā)得到32.6g粗制油狀物。用色譜法提純(98∶2石油醚/乙酸乙酯)得到30.9g灰色油狀中間體4(60.6％收率)。中間體50.6g中間體4(22mmol)的10ml乙醇溶液中加入6.5ml(13eq.)NaOH1N。將混合物在回流下攪拌30min，然后減壓濃縮。殘余物用水稀釋，用乙醚萃取。水層用HCl1N酸化，用CH2Cl2萃取。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真空蒸發(fā)獲得0.4g黃色固體中間體5(73.6％收率)。MSm/z248(M+1)中間體6在10℃，向10g(65.8mmol，Aldrich)4-氟苯基丙酮的100ml苯溶液中滴加10.5g(1eq.)溴。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h。在反應(yīng)末期，將氮通入反應(yīng)混合物中。真空濃縮混合物，蒸餾所得油狀物獲得9g油狀物(收率＝59％)。Eb＝130-135℃，20mmHg。中間體71g(4.33mmol)中間體6的30ml乙醇溶液中加入0.54g(1eq.，Acros)硫代草氨酸乙酯。將溶液在回流下攪拌過夜。真空濃縮溶液，油狀殘余物用水稀釋，用CH2Cl2萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。所得粗制油狀物用色譜法處理(99∶1二氯甲烷/甲醇)獲得0.26g褐色固體中間體7(收率＝22.6％)。m.p69-70℃。中間體81.5中間體7(5.66mmol)的50ml乙醇溶液中加入20mlNaOH1N。將混合物在回流下攪拌30min，然后減壓濃縮。殘余物用水稀釋，用乙醚萃取。水層用HCl1N酸化，用CH2Cl2萃取。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干獲得乳白色固體中間體7(0.81g，60％收率)。m.p140℃。實施例12-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯方法A250mg中間體2(1mmol)的10ml二氯甲烷溶液中加入174mgHOBT(1.3eq.)、284mgEDC(1.3eq.)、260mg中間體5(1eq.)和130mg三乙胺(1.3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2天。將混合物用稀NaOH處理，用CH2Cl2萃取。有機(jī)層用稀HCl、水洗滌，用硫酸鈉干燥。真空蒸發(fā)后，所得粗制油狀物用色譜法提純(99∶1二氯甲烷/甲醇)獲得100mg油狀實施例1(21.5％收率)。方法B26.93g(97.9mmol)中間體4和46.5g(2eq.)中間體2的300ml乙醇溶液中加入85.3ml(5eq.)二異丙基乙胺。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌2天。為了完全反應(yīng)，加入23.5g(1eq.)中間體2的50mol乙醇。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌7h，再加入1當(dāng)量中間體2(23.5g)。將混合物保持回流24h。真空濃縮反應(yīng)物，殘余物用水稀釋，用NaOH1N堿化。水層用乙酸乙酯(3×300ml)萃取，有機(jī)層用HCl1N、NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌。整個有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)至干。所得粗制油狀物用色譜法處理(80∶20石油醚/乙酸乙酯)獲得無色油狀實施例1(40.9g，收率＝89.6％)。1HNMR(CDCl3)δ7.57(m，1H)，7.29(d，2H)，7.15-7.21(m，4H)，6.75(d，2H)，4.50(d，2H)，4.16(q，2H)，2.62(q，2H)，2.40(s，3H)，1.52(s，6H)，1.20(s，3H)，1.10(s，3H)。實施例22-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸100mg(0.21mmol.)實施例1的5ml乙醇溶液中加入0.63ml(3eq.)NaOH(1N)。將溶液在回流下攪拌30min。減壓除去溶劑后，殘余物用水稀釋，用HCl1N酸化至PH＝1。水層用CH2Cl2萃取，用硫酸鈉干燥。在過濾并濃縮至干后，將油狀殘余物與CH2Cl2和戊烷的混合物合并。過濾固體，真空烘箱中干燥獲得白色固體實施例2(50mg，收率＝53.2％)，mp＝159-162℃。MSm/z467(M+1)。1HNMR(CDCl3)δ7.57(m，1H)，7.18(d，2H)，7.10(d，2H)，6.74(d，2H)，4.41(d，2H)，2.52(q，2H)，2.30(s，3H)，1.43(s，6H)，1.10(s，3H)。實施例32-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-氟苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯320mg中間體2(1.35mmol)的30ml二甲基甲酰胺溶液中加入240mgHOBT(1.3eq.)、340mgEDC(1.3eq.)、320mg中間體7(1eq.)和0.25ml三乙胺(1.3eq.)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。減壓蒸發(fā)混合物，用水稀釋，用CH2Cl2萃取。有機(jī)層用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)。所得粗制油狀物用色譜法提純(99∶1二氯甲烷/甲醇)獲得330mg白色固體實施例1(收率＝53.5％)。m.p97℃。MSm/z457(M+1)。實施例42-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-氟苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸310mg(0.68mmol.)實施例3的25ml四氫呋喃溶液中加入2ml(5eq.)LiOH1N。將溶液在50℃攪拌30min。為了完全反應(yīng)，加入2mlNaOH1N，將溶液在50℃攪拌1h。減壓除去溶劑后，殘余物用水稀釋，水層用乙醚萃取。水層用5.4mlHClN處理，用乙醚萃取。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真空蒸發(fā)得到固體，將其用二異丙基醚重結(jié)晶獲得230mg白色固體實施例4(72％收率)，mp＝122℃。MSm/z429(M+1)。結(jié)合測定使用閃爍近似測定(SPA)檢測化合物結(jié)合hPPARγ、hPPARα或PPARδ的能力。PPAR配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(LBD)在大腸桿菌表達(dá)polyHis標(biāo)記的融合蛋白，對其進(jìn)行純化。然后用生物素標(biāo)記LBD，將其固定在鏈霉抗生物素蛋白修飾的閃爍近似珠上。之后將珠與恒定量合適放射性配體(PPARγ為3H-BRL49653，hPPARα為放射性標(biāo)記的2-(4-(2-(2，3-二氚-1-庚基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸(參見WO00/08002)，PPARδ為標(biāo)記GW2433(關(guān)于該配體的結(jié)構(gòu)和合成參見Brown，P.J等，Chem.Biol.1997，4，909-918)和不同濃度的受試化合物溫育，平衡后用閃爍計數(shù)儀檢測結(jié)合在珠子上放射性。每個數(shù)據(jù)減去非特異性結(jié)合量，非特異性結(jié)合量為含有50μM相應(yīng)未標(biāo)記配體的對照孔的測定值。對于每種所測試的化合物，對配體濃度與結(jié)合的放射性配體CPM作圖，假定為單純竟?fàn)幮越Y(jié)合的前提下，根據(jù)非線性最小二乘方擬合數(shù)據(jù)估算表觀K1值。另見有關(guān)該測定細(xì)節(jié)的報道(參見Blanchard，S.G.等，DevelopmentofaScintillationProximityAssayforPeroxisomeProliferator-ActivatedReceptorgammaLigandBindingDomain.Anal.Biochem.1998，257，112-119)。轉(zhuǎn)染測定制備以下配體用于下述轉(zhuǎn)染測定。(i)2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫基]苯氧基}乙酸該化合物用作下述轉(zhuǎn)染測定中的PPARδ對照，根據(jù)WO200100603-A1報道的方法制備。(ii)2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑5-基-羰基)氨基]甲基}-苯氧基]丙酸該化合物用作下述轉(zhuǎn)染測定中的PPARα對照，根據(jù)WO200140207-A1報道的方法制備(如下所述重新制備)。中間體(a)按照Stout，D.M.J.Med.Chem.1983，26(6)，808-13的相同步驟制備。向4-甲氧基芐基胺(25g，0.18mol；Aldrich)加入46％HBr的H2O(106ml，0.9mol；Aldrich)溶液。將反應(yīng)物回流過夜，然后將反應(yīng)物冷卻至0℃，用氫氧化鉀緩慢中和至pH7。攪拌反應(yīng)物～30min，然后濾出固體并干燥。將固體重新溶于熱MeOH，過濾，將溶液冷卻得到19g(85％)中間體1。1HNMR(DMSO-d6)δ8.0(bs，1H)，7.2(d，2H)，6.75(d，2H)，3.85(s，2H)，3.50(bs，2H)。中間體(b)將2-氯乙酰乙酸乙酯(35.3g，29.7mL，0.21mol)和4-(三氟甲基)硫代苯甲酰胺(44g，0.21mol)的EtOH(300mL)溶液回流過夜。冷卻至室溫后，真空除去溶劑。最終產(chǎn)物(中間體(b))用最少量MeOH重結(jié)晶得到40g(59％)白色固體終產(chǎn)物；1HNMR(CDCl3)δ8.10(d，2H)，7.70(d，2H)，4.40(q，2H)，2.80(s，3H)，1.4(t，3H)。中間體(c)中間體(b)(1.84g，5.8mmol)的THF溶液中加入1NLiOH(6mL，6mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌。在～3h后，將反應(yīng)物用1NHCl中和，用3×100mLEtOAc萃取，用硫酸鈉干燥，過濾，真空除去溶劑后得到1.5g(89％)白色固體中間體(b)。1HNMR(DMSO-d6)δ13.55(bs，1H)，8.25(d，2H)，7.95(d，2H)，2.75(s，3H)。中間體(d)中間體(c)(1g，7mmol)的CH2Cl2/DMF(1∶1)溶液中加入HOBT(565mg，4.2mmol；Aldrich)、EDC(800mg，4.2mmol；Aldrich)和中間體1(860mg，7mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌18h。真空除去溶劑，用H2O處理，用3×100mlCH2Cl2萃取。合并有機(jī)相，用1NHCl洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)獲得混合物(N-取代的和N，O-取代的)。將混合物溶于甲醇，用1NNaOH處理。將反應(yīng)物在50℃攪拌18h。真空除去溶劑，溶于CH2Cl2，用H2O洗滌，用硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，殘余物用色譜法處理(CH2Cl2/MeOH99/1)得到610mg(47％)白色固體中間體6。1HNMR(DMSO-d6)9.30(s，1H)，8.80(t，1H)，8.20(d，2H)，6.70(d，2H)，4.35(d，2H)，2.6(s，3H)。中間體(e)2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯中間體(d)(710mg，1.81mmol)的DMF(50mL)溶液中加入K2CO3(275mg，1.99mmol)，然后加入2-溴-2-甲基丙酸乙酯(280μL，1.91mmol；Aldrich)，將反應(yīng)物加熱至80℃。在18h后，將反應(yīng)物冷卻至室溫，真空除去溶劑。殘余物用水(200mL)處理，用3×50mLCH2Cl2萃取，用硫酸鈉干燥，過濾，真空除去溶劑。殘余物用色譜法處理(CH2Cl2/MeOH99/1)。得到680mg(77％)澄清油狀實施例1。1HNMR(CDCl3)δ7.95(d，2H)，7.60(d，2H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.05(t，1H)，4.45(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H)。2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸中間體(e)(680mg，1.39mmol)的MeOH溶液中加入1NNaOH(1.6mL，1.6mmol)，將反應(yīng)物在60℃攪拌。在18h后，將反應(yīng)物冷卻至室溫，蒸發(fā)溶劑。殘余物用1NHCl處理，用3×20mLTHF萃取，真空除去溶劑。從最小量的二氯甲烷和戊烷中沉淀出500mg(75％)白色固體標(biāo)題化合物。mp在60-70℃改變形態(tài)；LC/MS(m/z)477.22(100％，AP-)，479.12(100％，AP+)；C23H21F3N2O4S計算值C5.71(57.73)，H4.56(4.42)，N5.77(5.85)，S6.15(6.70)。(iii)5-{4-[2-(甲基-吡啶-2-基-氨基)-乙氧基]-芐基}-噻唑烷-2，4-二酮此化合物在下述轉(zhuǎn)染測定中用作PPARγ對照，根據(jù)J.Med.Chem.1994，37(23)，3977中介紹的方法制備。用瞬時轉(zhuǎn)染測定法篩選化合物的功能潛能，確定在CV-1細(xì)胞中激活PPAR亞型的能力。應(yīng)用以前建立的嵌合受體系統(tǒng)比較多種受體亞型對相同靶基因的相對轉(zhuǎn)錄活性，防止內(nèi)源性受體激活以免對結(jié)果的解釋復(fù)雜化。參見例如Lehmann，J.M.；Moore，L.B.；Smith-Oliver，T.A.；Wilkison，W.O.；Willson，T.M.；Kliewer，S.A.，Anantidiabeticthiazolidinedioneisahighaffinityligandforperoxisomeproliferator-activatedreceptorgamma(PPARgamma)，J.Biol.Chem.，1995，270，12953-6。分別使小鼠和人PPARα、PPARγ和PPARδ的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域與酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域融合。用相應(yīng)PPAR嵌合體和含5拷貝GAL4DNA結(jié)合位點的報道構(gòu)建物的表達(dá)載體瞬時轉(zhuǎn)染CV-1細(xì)胞，其中GAL4DNA結(jié)合位點驅(qū)動表達(dá)分泌型胎盤堿性磷酸酶(SPAP)和β-半乳糖苷酶。16小時后，培養(yǎng)基更換為加有10％去脂胎牛血清和適當(dāng)濃度受試化合物的DME培養(yǎng)基。24小時后，制備細(xì)胞提取物，分析堿性磷酸酶和β-半乳糖苷酶活性。使用β-半乳糖苷酶活性作為內(nèi)標(biāo)校正堿性磷酸酶活性的轉(zhuǎn)染效率(參見例如Kliewer，S.A.等，Cell83，813-819(1995))。羅格列酮(BRL49653)用作hPPARγ測定的陽性對照。hPPARα測定的陽性對照為2-(2-甲基-3-[3-{3-(4-環(huán)己基氨基)-[6-(4-氟苯基哌嗪-1-基)][1，3，5]三嗪-2-基氨基}丙基]苯硫基)-2-甲基丙酸。PPARδ測定的陽性對照為2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-{三氟甲基}苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫基]苯氧基}乙酸。下表報告了最優(yōu)選化合物在3個hPPAR亞型測定中的活性，用納摩爾表示。權(quán)利要求1.一種式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和可水解酯其中X1為O或S；R1和R2獨立為H或C1-3烷基，或者連接到同一碳原子的R1和R2可以與它們所連接的碳原子一起構(gòu)成3-5元環(huán)烷基環(huán)；R3和R4獨立為H、鹵素、-CH3和-OCH3；R5為H或C1-6烷基；X2為NH、NCH3或O；Y和Z其中之一為N，另一個則為O或S；R6為苯基或吡啶基(其中N在2位或3位)，并且任選被一個或多個鹵素、CF3、C1-6直鏈或支鏈烷基(任選被鹵素取代)取代，條件是R6為吡啶基時，則其N不被取代。2.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物為選擇性hPPARα激動劑。3.權(quán)利要求1-2的化合物，其中X1為O。4.權(quán)利要求1-3的化合物，其中R1和R2為甲基。5.權(quán)利要求4的化合物，其中R3和R4之一為H。6.權(quán)利要求1-5任一項的化合物，其中R3和R4都為H。7.權(quán)利要求1-6任一項的化合物，其中X2為NH。8.權(quán)利要求1-7的化合物，其中Z為N。9.權(quán)利要求1-8任一項的化合物，其中Y為S。10.權(quán)利要求1-9任一項的化合物，其中R5為H。11.權(quán)利要求1-10的化合物，其中R6為苯基。12.權(quán)利要求11的化合物，其中R6為單取代的基團(tuán)。13.權(quán)利要求12的化合物，其中R6在對位被單取代。14.權(quán)利要求13的化合物，其中所述取代基為F、CF3、甲基或乙基。15.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物為選自以下的化合物2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯，2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-氟苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯，2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-氟苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸，2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。16.2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-5-[4-乙基苯基]噻唑-2-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。17.用于治療的權(quán)利要求1-16任一項的化合物。18.一種藥用組合物，該組合物包含權(quán)利要求1-16任一項的化合物。19.權(quán)利要求18的藥用組合物，該組合物還包含藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。20.權(quán)利要求1-16任一項的化合物在制備用于治療hPPARα疾病或病癥的藥物中的用途。21.權(quán)利要求20的用途，其中所述hPPARα介導(dǎo)性疾病或病癥為異常脂血癥、X綜合癥、心力衰竭、高膽固醇血癥、心血管疾病、II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素抵抗、高脂質(zhì)血癥、肥胖、貪食性厭食癥和神經(jīng)性厭食癥。22.一種治療患者h(yuǎn)PPARα介導(dǎo)性疾病或病癥的方法，該方法包括給予治療有效量的權(quán)利要求1-16任一項的化合物。23.權(quán)利要求22的方法，其中所述hPPARα介導(dǎo)性疾病或病癥為異常脂血癥、X綜合癥、心力衰竭、高膽固醇血癥、心血管疾病、II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素抵抗、高脂質(zhì)血癥、肥胖、貪食性厭食癥和神經(jīng)性厭食癥。全文摘要本發(fā)明提供式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和可水解酯，其中X文檔編號A61P3/06GK1633421SQ02814942公開日2005年6月29日申請日期2002年5月29日優(yōu)先權(quán)日2001年5月31日發(fā)明者F·J·格利伯特申請人:葛蘭素集團(tuán)有限公司