本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，公開了一種含氮的天然產(chǎn)物醫(yī)藥用途，本發(fā)明公開了含氮的天然產(chǎn)物預(yù)防或治療高脂血癥、高血糖、非酒精性脂肪肝、2型糖尿病的用途。

背景技術(shù)：

糖尿病是一種由于胰島素分泌缺陷及（或）其生物學(xué)作用障礙引起的以高血糖為特征的代謝疾病，是在遺傳基礎(chǔ)上，有環(huán)境因素參與的遺傳易感性疾病，是一種慢性全身性代謝疾病，嚴重危害人類健康，積極開展糖尿病的防治工作已成為主要的社會公共衛(wèi)生問題。

西醫(yī)目前常采用飲食、運動療法磺酰脲類、雙胍類、噻唑烷二酮類、α-葡萄糖苷酶抑制劑、瑞格列奈、胰島素等來治療ii型糖尿病，僅噻唑烷二酮類可改善胰島素抵抗。病人在用西藥治療的同時，又不斷地出現(xiàn)動脈硬化、冠心病和高血壓等并發(fā)癥，ii型糖尿病的復(fù)雜機制及其導(dǎo)致的全身病變是西藥治療的薄弱環(huán)節(jié)。不論是磺脈類的促泌劑還是噻唑烷二酮類的增敏劑在實驗和臨床研究中都不具備明顯的減肥功效，而肥胖是2型糖尿病乃至代謝綜合征的重要病理基礎(chǔ)。

ii型糖尿病不僅是糖代謝紊亂疾病，還是脂肪代謝紊亂疾病。肥胖引起的ii型糖尿病患者通常都有高糖和高脂飲食，并常伴有高脂血癥。有研究表明提示血糖“正?！钡姆逝只颊呒河笑录毎置诠δ艿漠惓?。但是，大部分的肥胖者并不發(fā)展為糖尿病，說明機體的自身狀況起重要作用。在同樣的毒性作用下,易感人群很容易發(fā)展成ii型糖尿病，而不敏感人群可能終身不發(fā)病，或者延遲發(fā)病?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)并不能夠改變機體的易感性，但可以通過改變生活方式，減肥等手段來盡可能地減少早期的誘因，盡量的延長代償期，從而延遲2型糖尿病的發(fā)生，甚至避免發(fā)病。

現(xiàn)代ii型糖尿病的治療觀點已從已往的單純控制血糖轉(zhuǎn)為降糖、降脂、降壓、改善胰島素抵抗等多環(huán)節(jié)治療。但是，對于ii型糖尿病患者，藥量需逐漸增加，投藥種類也常由單一用藥逐漸變?yōu)槁?lián)合用藥，這不可避免地要考慮藥物代謝對肝腎的副作用。故從傳統(tǒng)中藥中尋找低毒、療效肯定的天然藥物來治療是目前研糖尿病究熱點之一。

含氮的天然產(chǎn)物

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明公開了含氮的天然產(chǎn)物用于制備治療或預(yù)防ii型糖尿病的組合物。

結(jié)構(gòu)式一的含氮的天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式如下：

結(jié)構(gòu)一：

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式如下：

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用于制備治療或預(yù)防高脂血癥的組合物。

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用于制備治療或預(yù)防非酒精性脂肪肝的組合物。

本發(fā)明公開了的結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物組合物,為：市售或按已知方法制備的結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的化合物、天然產(chǎn)物、水合物或無水物；

組合物制成：藥物、保健品、或功能性食品,賦形劑或載體為制藥或食品領(lǐng)域中常用的賦形劑或載體，如稀釋劑，崩解劑，潤滑劑等。

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用于制備治療或預(yù)防高脂血癥、高血糖、非酒精性脂肪肝、2型糖尿病中任意一種或多種的組合物。

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用于制備的組合物,為：

用于制備治療或預(yù)防ii型糖尿病的組合物；或；

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用于制備的組合物，用于制備防治高脂血癥、防治高血糖、或、非酒精性脂肪肝、2型糖尿病的組合物，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用量范圍是15mg/kg-30mg/kg。

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物用于制備的組合物，組合物制成：藥物、保健品、或功能性食品,賦形劑或載體為制藥或食品領(lǐng)域中常用的賦形劑或載體，如稀釋劑，崩解劑，潤滑劑等。

本發(fā)明公開了用于防治高脂血癥的結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物,結(jié)構(gòu)式一的含氮的天然產(chǎn)物的用量范圍是5mg/kg-100mg/kg;

本發(fā)明公開了用于防治高血糖的結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物,一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物的用量范圍是5mg/kg-100mg/kg;

本發(fā)明公開了用于防治2型糖尿病的結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物,結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物的用量范圍是5mg/kg-100mg/kg;

本發(fā)明公開了用于防治非酒精性脂肪肝的結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物,結(jié)構(gòu)式一、或、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物的用量范圍是5mg/kg-100mg/kg。

為了便于理解，下面通過附圖和具體實施例對本發(fā)明的用途進行詳細的描述。需要特別指出的是，具體實施例和附圖僅是為了說明，顯然本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)本文說明，對本發(fā)明進行各種修正或改變，這些修正和改變也將納入本發(fā)明范圍之內(nèi)。

附圖說明

圖1.結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對高脂誘導(dǎo)的小鼠模型體重變化曲線

圖2.結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對高脂誘導(dǎo)的小鼠模型進食量變化曲線

本發(fā)明的數(shù)據(jù)記載于如下表格中:

表1.結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對高脂誘導(dǎo)的小鼠模型進食量的影響

表2.血漿中甘油三酯含量

表3.血漿中總膽固醇含量

表4.血漿中高密度脂蛋白含量

表5.血漿中低密度脂蛋白含量

表6.禁食血糖水平

表7.口服糖耐量線下面積值

表8.胰島素耐受線下面值

表9.血清中alt含量

表10血清中ast含量

表11.肝臟重量

表12.肝臟中總膽固醇含量

表13.肝臟中甘油三酯含量。

具體實施方式

實施例1

為了研究結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對高脂誘導(dǎo)的小鼠模型的影響，使用c57bl小鼠，spf級，雄性，體重(20±2)g，隨機分成兩組，第一組12只，為正常組，給與正常飼料，其余小鼠(40只)分為4組，給與高脂飼料(飼料熱量19.4%蛋白質(zhì)，20.6%碳水化合物，60%脂肪)自由攝食、飲水。分別給予基質(zhì)、洛伐他汀組(30mg/kg)，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物低濃度組(15mg/kg)、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物高濃度組(30mg/kg)。連續(xù)喂養(yǎng)6周。

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物的配置方法:用生理鹽水溶液溶解。

觀察指標(biāo)：

a動物的一般情況

實驗動物，光照12h黑夜12h，自由飲食飲水，實驗期間動物狀態(tài)正常。

b每周觀測進食量、體重

表1.高脂誘導(dǎo)的小鼠模型進食量原始數(shù)據(jù)

如圖1.所示模型組相比正常組體重顯著升高，提示造模很成功，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物治療6周后體重顯著降低。如圖2.和表1.所示空白組和給藥組進食量較高，提示該組模型體質(zhì)吃多但是體重增加不明顯，模型組進食量相對較高，同樣提示造模成功給藥有效。

實施例2

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對于高脂血動物模型的作用

實驗動物及方法：

c57bl小鼠，spf級，雄性，體重(20±2)g，隨機分成兩組，第一組12只，為正常組，給與正常飼料，其余小鼠(40只)分為4組，給與高脂飼料(飼料熱量19.4%蛋白質(zhì)，20.6%碳水化合物，60%脂肪)自由攝食、飲水。分別給予基質(zhì)、洛伐他汀組(30mg/kg)，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物低濃度藥物(15mg/kg)、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物高濃度組(30mg/kg)。連續(xù)喂養(yǎng)6周。采血、處死、取肝臟組織。

觀察指標(biāo)：

a動物的一般情況

實驗動物在spf動物房中飼養(yǎng)，12h光照12h黑夜，自由飲食飲水，實驗期間動物狀態(tài)正常。

b血脂相關(guān)指標(biāo)：tc、tg、hdl、ldl

3、實驗結(jié)果：

結(jié)果表明：結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物可明顯降低血清中的總膽固醇(tc)和甘油三酯(tg)，升高高密度脂蛋白(hdl-c)，降低低密度脂蛋白(ldl-c)給藥結(jié)束后測定小鼠、血脂水平。使用t檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果顯示，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對高脂改善作用效果明顯，具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。

表2.血清中甘油三酯含量單位：mm

與高脂組比較，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表3.血清中總膽固醇含量，單位：mm

*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表4.血清中高密度脂蛋白含量單位：mm

與高脂組比較，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表5.血清中低密度脂蛋白單位：mm

與高脂組比較，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

造模后小鼠的血液中總膽固醇（tc）、甘油三酯（tg）,高密度脂蛋白（hdl-c）、低密度脂蛋白（ldl-c）均顯著升高，且具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，表明造模成功，給藥tc,tg,ldl-c均顯著性濃度依賴性的降低，具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，說明治療效果顯著。

hdl-c主要作用為將膽固醇從血液運輸至肝臟中代謝，因此被稱為"好"膽固醇，抗動脈粥樣硬化的膽固醇，由于tc的升高造模組hdl-c顯著升高，洛伐他汀組和給藥組均能顯著性的升高這一“好膽固醇”的含量，說明治療效果顯著?？傊Y(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物能夠有效的改善高脂血癥，降低tg,tc,ldl-c，升高“好膽固醇”hdl-c的含量。

實施例3

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對于高血糖動物模型的作用

為了研究結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對糖尿病的影響，本實驗采用經(jīng)典高脂誘導(dǎo)小鼠糖尿病模型，使用c57bl小鼠，spf級，雄性，體重(20±2)g，隨機分成兩組，第一組12只，為正常組，給與正常飼料，其余小鼠(40只)分為4組，給與高脂飼料(飼料熱量19.4%蛋白質(zhì)，20.6%碳水化合物，60%脂肪)自由攝食、飲水。分別給予基質(zhì)、洛伐他汀組(30mg/kg)，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物低濃度藥物(15mg/kg)、結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物高濃度組(30mg/kg)。連續(xù)喂養(yǎng)6周。給藥結(jié)束后禁食過夜測定、空腹血糖、葡萄糖耐量和胰島素耐量。糖耐量實驗方法：小鼠禁食過夜，小鼠口服血糖2g/kg后分別在0，15，30，60，90，120min時，尾尖采血測定相應(yīng)血糖，使用graphpadprism軟件計算相應(yīng)線下面積(auc)。

胰島素耐受實驗方法：小鼠禁食過夜，小鼠腹腔注射胰島素0.75iu/kg后分別在0，30，60，90，120，150min時，尾尖采血測定相應(yīng)血糖，使用graphpadprism軟件計算相應(yīng)線下面積(auc)。

所示，模型組相比正常對照組血糖約升高1倍，說明造模良好，給藥后血糖有所降低，且高濃度相比低濃度具有更好的降血糖作用，且具有統(tǒng)計學(xué)差異。由于ii型糖尿病主要特征為胰島素抵抗，即機體對胰島素不敏感，常用糖耐量和胰島素耐量實驗評估。糖耐量試驗是一種口服葡萄糖負荷試驗，用于了解機體對進食葡萄糖后的血糖調(diào)節(jié)能力。通過糖耐量試驗，可以早期發(fā)現(xiàn)糖代謝異常，是目前公認的診斷糖尿病的金標(biāo)準，在血糖增高但尚未達到糖尿病診斷標(biāo)準時，為明確是否患糖尿病，可以采用ogtt進行鑒別診斷。正常情況下，機體有一套維持血糖的機制，口服葡萄糖，血糖短暫升高后迅速恢復(fù)正常，即糖耐量正常，相應(yīng)的口服糖耐量曲線線下面積較小，糖尿病患者糖的利用障礙，口服葡萄糖后血糖迅速升高，血糖下降速度較慢，即糖耐量減退相應(yīng)的線下面積較大，該實驗中糖耐量減退，模擬禁食后機體血糖狀態(tài)，所示，模型組在各個時間點的血糖均高于正常組，說明造模很成功，模型組呈現(xiàn)結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物治療組和正常組的糖耐量曲線均在模型組曲線下，為了更好的定量這一現(xiàn)象使用graphpadprism軟件計算相應(yīng)線下面積(auc)，，相應(yīng)的線下面積也均低于模型組，且具有統(tǒng)計意義。說明了結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物整體降糖效果明顯。

胰島素耐量試驗是反映機體對胰島素敏感性的實驗，主要模擬的是機體分泌胰島素后糖水平的變化，高脂造模后，注射相同量的胰島素后各個點的血糖值均高于正常組，其相應(yīng)的線下面積也高于正常組，結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物治療后各個時間點的血糖數(shù)值低于模型組，相應(yīng)線下面積低于高脂誘導(dǎo)的模型組，說明降糖效果明顯。結(jié)果表明結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物能夠有效的增加胰島素敏感性改善糖尿病。

以上數(shù)據(jù)表明結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物能夠顯著降低血液中葡萄糖含量(表6)顯著提高糖耐受(表7)顯著增加胰島素敏感性(表8)。

表6.禁食血糖水平單位：mm

*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表7.口服糖耐量線下面積值

與高脂組，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表8.胰島素耐受線下面值

與高脂組，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

實施例4

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物對高脂血癥和非酒精性脂肪肝的治療作用

實驗動物及方法：

c57bl小鼠，spf級，雄性，體重(20±2)g，隨機分成兩組，第一組12只，為正常組，給與正常飼料，其余小鼠(40只)分為4組，給與高脂飼料(飼料熱量19.4%蛋白質(zhì)，20.6%碳水化合物，60%脂肪)自由攝食、飲水。分為高脂組，高脂+洛伐他汀組（30mg/kg）、高脂+結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物低濃度組(15mg/kg)、高脂+結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物高濃度組(30mg/kg)。給藥7周

觀察指標(biāo)：

a動物的一般情況

實驗動物，12h光照12h黑夜，自由飲食飲水，實驗期間動物狀態(tài)正常。

b肝功能相關(guān)指標(biāo)：血清alt、ast

c血脂相關(guān)指標(biāo)：tc、tg、hdl、ldl

d病理學(xué)檢查：he染色

e肝臟脂類蓄積相關(guān)指標(biāo)：肝臟重量、肝臟中tg、肝臟中tc

給藥結(jié)束后測定小鼠、血脂水平。使用t檢驗進行統(tǒng)計分析。

2.結(jié)果分析

造模后小鼠的血液中tc，tg，hdl-c，ldl-c均顯著升高，且具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，表明造模成功，給藥tc，tg，ldl-c均顯著性濃度依賴性的降低，具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，說明治療效果顯著。

hdl-c主要作用為將膽固醇從血液運輸至肝臟中代謝，因此被稱為"好"膽固醇，抗動脈粥樣硬化的膽固醇，由于tc的升高造模組hdl-c顯著升高，洛伐他汀組和給藥組均能顯著性的升高這一“好膽固醇”的含量，說明治療效果顯著。

丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶又稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶，簡稱gpt、alt,丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝細胞漿內(nèi)，其細胞內(nèi)濃度高于血清中1000-3000倍。肝細胞會使血液中的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高。1%的肝細胞損傷可以使血液中的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶濃度升高一倍。因此，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶是反映肝細胞受損程度最靈敏的指標(biāo)，臨床上是最為常用的肝功能檢查指標(biāo)。小鼠造模后ast，alt約升高1.5倍，給藥ast，alt基本恢復(fù)正常，如病理結(jié)果顯示，造模后小鼠肝臟中脂肪蓄積顯著，肝細胞脂肪變性明顯，纖維化增加，說明非酒精性脂肪肝造模成立，給予洛伐他汀和迷迭香石油醚部位，病理損傷顯著逆轉(zhuǎn)。此外高脂造模后肝臟重量顯著增加，給藥后一定程度逆轉(zhuǎn)）結(jié)合血液中alt,ast,tc，tg，ldl指標(biāo)說明肝臟向硬化趨勢發(fā)展，高劑量組肝臟重量逐漸恢復(fù)，且具有統(tǒng)計學(xué)差異。

數(shù)據(jù)顯示肝臟中甘油三酯和膽固醇含量的結(jié)果顯示，造模后肝臟中甘油三酯和膽固醇升高，說明肝臟中甘油三酯膽固醇蓄積顯著，給予洛伐他汀和結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物基本恢復(fù)正常。綜上所述，數(shù)據(jù)顯示非酒精性脂肪肝造模成立，給藥后治療效果顯著，具有統(tǒng)計學(xué)差異。

表9.血清中alt含量單位：iu/l

與高脂組，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表10.血清中ast含量單位：iu/l

與高脂組，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表11.肝臟重量單位：g

表12.肝臟中總膽固醇含量單位：mg膽固醇/g新鮮肝臟組織

與高脂組，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

表13.肝臟中甘油三酯含量，單位：mg膽固醇/g新鮮肝臟組織

與高脂組，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001

實施例5

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物的制劑

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物片劑

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物10mg，淀粉88g，硬脂酸鎂2g

制備工藝：取結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物過100目篩，加淀粉、硬脂酸鎂混合均勻，制成顆粒，干燥，壓片，即得。

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物膠囊

結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物10mg，淀粉88g，硬脂酸鎂2g

制備工藝：取結(jié)構(gòu)式二的含氮的天然產(chǎn)物過100目篩，加淀粉、硬脂酸鎂混合均勻，制成顆粒，干燥，裝膠囊，即得。