其中加入30份蜂蜜和 3份麥芽提取物,均勻混合,加入混合物料2.5倍的去離子水,用乳酸調節(jié)pH值為5.5,升溫至 58°C,保溫35min,然后降溫至33°C于電場強度23kV/cm,脈沖時間250ys,脈沖頻率250Hz進 行高壓脈沖電場殺菌7min,調整pH值為6.3,加入益生菌粉劑質量的43 %恒溫發(fā)酵0.7h,接 著以0.85°C/min的速率升溫至42°C,加入益生菌粉劑質量的53%恒溫發(fā)酵2.5h,最后以 0.65°C/min的速率升溫至52°C,繼續(xù)發(fā)酵0.6h,發(fā)酵液依次經(jīng)40目、80目雙聯(lián)過濾器過濾, 濾液經(jīng)循環(huán)超濾濃縮至固形物含量為80 %得蜂蜜益生菌發(fā)酵濃縮液;
[0147] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中,置于裝有53°C水的預溶裝置中,預溶35min,過 105目篩,轉入調配罐,保溫53°C,邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物,充分溶 解12min;接著加入蛹蟲草充分溶解4.5min得初混料;然后過膠體磨研磨4.5min,調整物料 細度,過170目篩,入滅菌罐81°C滅菌29min,轉入貯罐降溫至49°C,最后灌裝、封口、包裝即 得蛹蟲草蜂蜜產(chǎn)品。
[0148] 經(jīng)上述方法制備的蜂蜜產(chǎn)品結晶出現(xiàn)時間為36個月。
[0149] 實施例六:
[0150] -種殼寡糖蜂蜜產(chǎn)品,主要由以下重量份數(shù)的原料制備:
[0151 ]蜂蜜150份,麥芽提取物10份,生姜提取物6份,益生菌粉劑6份,韭花3份,殼寡糖 0 · 4份;
[0152] 其中蜂蜜含有95%的洋槐蜂蜜;
[0153] 上述益生菌粉劑益生菌活菌含量為:7.5 X 1012cfu/g;
[0154] 益生菌粉劑為干酪乳桿菌粉劑;
[0155] 殼寡糖蜂蜜產(chǎn)品的制備方法,包括如下步驟:
[0156] 1)按照配方,首先取韭花,清洗、瀝干,破碎至粒徑0.45mm,向其中加入40份蜂蜜和 4份麥芽提取物,均勻混合,加入混合物料3.5倍的去離子水,用乳酸調節(jié)pH值為6.5,升溫至 63°C,保溫45min,然后降溫至34°C于電場強度28kV/cm,脈沖時間350ys,脈沖頻率350Hz進 行高壓脈沖電場殺菌9min,調整pH值為6.8,加入益生菌粉劑質量的48 %恒溫發(fā)酵0.9h,接 著以0.95°C/min的速率升溫至44°C,加入益生菌粉劑質量的58%恒溫發(fā)酵3.5h,最后以 0.75°C/min的速率升溫至54°C,繼續(xù)發(fā)酵0.9h,發(fā)酵液依次經(jīng)40目、80目雙聯(lián)過濾器過濾, 濾液經(jīng)循環(huán)超濾濃縮至固形物含量為85 %得蜂蜜益生菌發(fā)酵濃縮液;
[0157] 2)將剩余蜂蜜放入不銹鋼容器中,置于裝有58°C水的預溶裝置中,預溶45min,過 115目篩,轉入調配罐,保溫58°C,邊攪拌邊依次加入剩余麥芽提取物、生姜提取物,充分溶 解Hmin;接著加入殼寡糖充分溶解5.5min得初混料;然后過膠體磨研磨5.5min,調整物料 細度,過190目篩,入滅菌罐82°C滅菌31min,轉入貯罐降溫至51°C,最后灌裝、封口、包裝即 得殼寡糖蜂蜜產(chǎn)品。
[0158] 經(jīng)上述方法制備的蜂蜜產(chǎn)品結晶出現(xiàn)時間為38個月。
[0159] 實驗例七食用雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品后總膽固醇的變化
[0160] 選總膽固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名,男女各半,隨機分成三組;第一組 每天晚餐飲用150毫升礦泉水;第二組每天晚餐沖飲普通市售雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品150g,第 三組每天晚餐沖飲本發(fā)明實施例2的雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品150g,期間每天食用同樣的食物, 食物包括肉、蛋、蔬菜和水果。分別在實驗開始的前一天和第20、40、60天采集試驗者的血 液,測定血液中的總膽固醇含量,結果如表1:
[0161]表1:血液中總膽固醇含量檢測結果
[0163]由上表可知沖飲本發(fā)明實施例2的雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品后,成年人血液中的總膽 固醇的含量發(fā)生明顯變化。與普通市售雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品相比,本發(fā)明雨生紅球藻蜂蜜 產(chǎn)品對成年人血液中的總膽固醇的含量明顯的降低,而礦泉水組成年人血液中的總膽固醇 的含量明顯的增加,市售雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品雖然有所降低,但與本發(fā)明產(chǎn)品相比,效果不 顯著,由此可知,本發(fā)明采用具有降低膽固醇特性的特定菌株制備的雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品 具有很好的降低膽固醇的保健效果。
[0164] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6所制備的蜂蜜產(chǎn)品同樣具有上述技術效果,各實 施例之間差異性不顯著。
[0165] 實施例八本發(fā)明雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品的感官品評試驗
[0166] 邀請24名人員對本發(fā)明實施例2制備的雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品與市售兩種同類相同 生產(chǎn)日期的雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品進行品評,感官打分,其中專業(yè)和非專業(yè)人員各12名,專業(yè) 人員青年、中年、老年各4名,男女各半,非專業(yè)人員少年、青年、中年、老年各3名,男女各半; 打分包括外觀(20分)、質地(25分)、風味(30分)、口感(25分)四個方面,打分人員獨立進行, 互不影響,以保證品評結果準確。對品評結果進行了統(tǒng)計,均分值取近似值,保留整數(shù),具體 見表2:
[0167] 表2:感官品評統(tǒng)計結果
[0169] 注:同一行內(nèi)標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),標不同大寫字母表示差異 極顯著(P<〇.01),標有相同字母表示差異不顯著(P>〇.05)。
[0170] 以上結果表明,本發(fā)明制備的雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品從外觀、質地、風味和口感任何 一方面都要明顯優(yōu)于市售雨生紅球藻蜂蜜產(chǎn)品,特別是外觀、風味和口感極好,同時也適合 不同年齡段、不同消費層次的消費者食用。
[0171] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6制備的蜂蜜產(chǎn)品同樣具有上述實驗效果,各實施 例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0172]實施例九本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對機體免疫力的影響
[0173] 1實驗目的
[0174]通過運動耐力測試(小鼠游泳試驗),驗證本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品的提高免疫力、抗疲勞 作用。
[0175] 2實驗材料與試劑
[0176] 2.1供試藥物:
[0177] 市售蜂蜜產(chǎn)品(Gl);市售蜂蜜產(chǎn)品(G2);本發(fā)明實施例2-6制備的蜂蜜產(chǎn)品(G3- G7)。
[0178] 2.2 試劑:
[0179] 肝/肌糖原測試盒,購自南京建成生物制品研究所;濃硫酸(AR),南京化學試劑有 限公司;生理鹽水,山東長富潔晶藥業(yè)有限公司。
[0180] 3.實驗動物
[0181] ICR小鼠,清潔級,體重18_22g,由寧夏醫(yī)科大學比較醫(yī)學中心提供,實驗期間小 鼠自由飲食。
[0182] 4.主要儀器
[0183] 錯制游泳箱(50cm X 50cm X 40cm),鉛絲,低溫高速離心機:5804R型,Eppendrof公 司;水浴鍋:DK-S26型,上海精宏實驗設備有限公司;電子稱:BS224S型,Sartorius公司;秒 表,溫度計
[0184] 5.實驗分組
[0185] 5.1劑量分組及受試樣品給予時間隨機將小鼠分為8組,每組10只,第1組至第7組 分別給Gl~G7的藥物,第8組為空白對照組,給予等體積的雙蒸水,每組每日均灌胃1次,灌 胃體積為0.2ml/10g,連續(xù)給予受試樣品30天。
[0186] 5.2樣品配制第1組至第7組:稱取2.25g藥物樣品,用蒸餾水配至150ml;空白對照 組:雙蒸水150ml。
[0187] 6.實驗方法
[0188] 6.1負重游泳實驗末次給藥30min后,置小鼠于游泳箱中,水深不少于30cm,水溫25 ± TC,鼠尾根部負荷5%體重的鉛皮,記錄小鼠游泳開始至死亡的時間,作為小鼠游泳時 間。
[0189] 6.2小鼠血清尿素測定末次給藥3〇11^11后,在溫度為30°(:的水中不負重游泳9〇1^11, 休息60min后摘眼球采血0.5mL (不加抗凝劑),置4°C冰箱3h,血凝固后2000r/min離心 15min,取血清送寧夏醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科檢測。
[0190] 6.3肝糖原的測定末次給藥3〇11^11后,在溫度為25±1°(:的水中不負重游泳9〇1^11, 頸椎脫臼處死小鼠,用生理鹽水洗凈,并用濾紙吸干水分后,準確稱取肝臟l〇〇mg,肝糖原檢 測試劑盒檢測小鼠肝糖原含量。
[0191] 6.4血乳酸的測定末次給藥30min后采血,然后不負重在溫度為30 °C的水中游泳 IOmin后停止。乳酸儀測定方法:分別在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20yL加 入40yL破膜液中,立即充分振蕩破碎細胞用乳酸儀測定。(血乳酸曲線下面積= 5X(游泳前 血乳酸值+3 X游泳后Omin的血乳酸值+2 X游泳后20min的血乳酸值)
[0192] 7.觀察指標負重游泳時間,血乳酸、尿素、肝糖原值
[0193] 8.統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)用〕表示,采用t檢驗進行組間比較
[0194] 9.實驗結果
[0195] 9.1本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠體重的影響
[0196] 各組小鼠在給予Gl~G9藥物后,前、中,后期體重分別見下表所示,各組小鼠的初 始體重和增重體重與對照組比較均無統(tǒng)計學差異(P>〇.05),表明Gl~G9藥物均無明顯的 毒性。實驗結果詳見表3。
[0197] 表3負重游泳實驗小鼠的初始體重、中期體重和結束體重± .V >
[0199] 9.2本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠負重游泳時間的影響
[0200] 經(jīng)口給予小鼠 Gl~G7藥物后,Gl~G2藥物與空白對照組比較,可以明顯延長小鼠 負重游泳時間,具有顯著性差異(P<〇.05),本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品G3~G7藥物與空白對照組比 較,可以顯著延長小鼠負重游泳時間,具有極顯著性差異(P<〇.01),且明顯優(yōu)于Gl~G2藥 物。結果詳見表4。
[0201 ] 表4蜂蜜產(chǎn)品對小鼠負重游泳時間的影響以士友)
[0203] "*"p〈0.05vs 空白對照;
[0204] "**"?〈〇.〇1¥8空白對照;
[0205] 9.3本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠運動前后血乳酸的影響
[0206] 經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明的蜂蜜產(chǎn)品后,本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品G3~G7藥物對小鼠運動后血 乳酸曲線下面積與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P<〇.05),G1~G2藥物組小鼠血乳酸曲線下 面積與對照組比較雖有所降低,但并無統(tǒng)計學差異(P>〇.05)。結果見表5。
[0207] 表5本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠運動前后血乳酸水平的影響(S±.v}
[0210] "*"p〈〇.〇5vs 空白對照;
[0211] 9.4本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠肝糖原的影響
[0212] 經(jīng)口給予小鼠 Gl~G7藥物后,Gl~G2藥物與空白對照組比較,小鼠肝糖原含量均 有明顯的升高,具有顯著性差異(P<〇.05),本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品G3~G7藥物與與空白對照組比 較,小鼠肝糖原含量均有明顯的升高,具有極顯著性差異(P<〇.01),且明顯優(yōu)于Gl~G2藥 物。結果詳見表6。
[0213]表6本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠肝糖原含量的影響(Λ :! S )
[0215] "*"p〈〇.〇5vs 空白對照;
[0216] "林" ρ〈〇· 〇1 vs 空白對照;
[0217] 9.5本發(fā)明蜂蜜產(chǎn)品對小鼠血清尿素的影響
[0218] 經(jīng)口給予小鼠 Gl~G7藥物后