本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，及其包含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的螺旋藻保健食品。
背景技術(shù)：
：激酶食品因其具有特殊的功能受到人們的廣泛關(guān)注和開發(fā)利用，目前較常見的有納豆激酶食品，螺旋藻激酶食品。其中納豆(富含納豆激酶)具有一定的歷史，它是以大豆為原料添加枯草芽孢桿菌發(fā)酵制成，已被國家食藥局列入普通食品。而富含螺旋藻激酶食品正在進一步開發(fā)中，它是以螺旋藻為底物添加枯草芽孢桿菌發(fā)酵而成的。螺旋藻具有極高的營養(yǎng)價值，其獨特的醫(yī)療保健功能和特有的生物活性成分受到生物學(xué)，醫(yī)學(xué)，營養(yǎng)學(xué)的廣泛關(guān)注，其蛋白質(zhì)含量可達(dá)60-70％，而且還含有β-胡蘿卜素，維生素e等多種維生素、礦物質(zhì)和多種微量元素；其中螺旋藻具有增強機體非特異性免疫力，抗輻射，改善造血功能，延緩細(xì)胞衰老，促進人體外周血中nk細(xì)胞的活性和顯著提高超氧化物歧化酶(sod)的活力?？莶菅挎邨U菌以具有豐富營養(yǎng)的螺旋藻作為底物進行發(fā)酵，可使其發(fā)酵產(chǎn)物富含螺旋藻激酶，螺旋藻激酶是一種具有生物活性的絲氨酸蛋白酶，可提高血管內(nèi)皮細(xì)胞纖溶活性，具有較強的溶解血栓和抑制血栓形成的特性，且成本低廉,溶栓效果好,作用迅速,持續(xù)時間長,而且安全性好,無任何毒副作用，成為新一代理想的預(yù)防和治療栓塞的生化藥物。中國專利cn102727538b公開了一種含螺旋藻活性肽、蛋白酶及激酶的螺旋藻及制備方法和應(yīng)用，該方法采用單一菌種枯草芽孢桿菌進行發(fā)酵，發(fā)酵方式為間隔攪拌發(fā)酵，其步驟包括：將螺旋藻和水進行1：1.3混合，然后添加枯草芽孢桿菌進行發(fā)酵18-24h，其間每4h攪拌一次，發(fā)酵完成后置于3℃冰箱后熟70-100h。該方法采用的間隔攪拌發(fā)酵，會造成發(fā)酵漿中的通氣不足，因枯草芽孢桿菌發(fā)酵過程中產(chǎn)生的氨不能及時排出，會造成螺旋藻漿的ph升高，從而抑制自身菌體的生長和螺旋藻激酶的產(chǎn)生，致使發(fā)酵成品螺旋藻激酶含量及活性較低。而且發(fā)酵成品中含有大量的氨和螺旋藻固有的藻腥味將造成成品口感比較差。所以，改進螺旋藻激酶食品的發(fā)酵方法，尋找一種螺旋藻激酶活性含量高，且口感較好的螺旋藻激酶食品具有重大的現(xiàn)實意義。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了克服螺旋藻發(fā)酵成品中螺旋藻激酶活性、產(chǎn)品低口感差的缺點，本發(fā)明提供了一種螺旋藻激酶活性高，且口感較好的螺旋藻保健食品。本發(fā)明的第一目的在于，提供一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，所述方法包括以下步驟：1)將破壁螺旋藻加入水中配成螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)，對其進行滅菌處理；2)向滅菌后的螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)中接種枯草芽孢桿菌，進行深層液體通氣發(fā)酵；3)向步驟2)通氣發(fā)酵后的發(fā)酵液中接種酵母菌，進行低溫靜置發(fā)酵；4)將步驟3)靜置發(fā)酵后的發(fā)酵液進行低溫真空濃縮，烘干，粉碎，即得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物。在步驟1)中將破壁螺旋藻配制成發(fā)酵基質(zhì)并滅菌，再經(jīng)過步驟2)的深層液體通氣發(fā)酵，可促進枯草芽孢桿菌菌體繁殖及螺旋藻激酶的產(chǎn)生；步驟3)采用酵母菌低溫靜置發(fā)酵，可進一步促進枯草芽孢桿菌的裂解，釋放胞內(nèi)的螺旋藻激酶。本發(fā)明所述破壁螺旋藻不限于制備方法，為市售機械破壁的螺旋藻粉末。由于破壁后螺旋藻其胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)溶解在發(fā)酵液中，因此采用破壁螺旋藻進行發(fā)酵可更直接的被菌種利用。在步驟1)中，所述破壁螺旋藻與所述水的添加質(zhì)量比為1:2～4，本發(fā)明不限于使用水的種類，采用滅菌水效果較優(yōu)。當(dāng)破壁螺旋藻和無菌水的比例為1:3時，配制成的發(fā)酵基質(zhì)濃度適中，適宜菌體的生長的同時又有利于后續(xù)發(fā)酵液的低溫真空濃縮；所述滅菌處理具體為濕熱滅菌；所述濕熱滅菌的溫度為105℃～115℃，滅菌時間為10～20min；優(yōu)選為滅菌溫度為110℃，滅菌時間為15min。所述滅菌溫度和時間的設(shè)定即能殺滅掉破壁螺旋藻中常見的微生物又能盡量減少螺旋藻營養(yǎng)物質(zhì)的損失。本發(fā)明進一步提出地，步驟2)中所述深層液體通氣發(fā)酵在ph值為7.5～8.5、培養(yǎng)溫度為35℃～39℃的條件下，以110～150r/min的轉(zhuǎn)速，每升螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)每分鐘通入0.8～1.6l無菌空氣的通氣量，發(fā)酵20～28小時；優(yōu)選地，所述通氣量為每升螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)每分鐘通入1.1～1.3l的無菌空氣；步驟2)中所述枯草芽孢桿菌的接種量為1％～5％，優(yōu)選為2.5％～3.5％；本發(fā)明采用枯草芽孢桿菌菌種不限于種類，本發(fā)明優(yōu)先使用來源于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為:cicc10456的枯草芽孢桿菌。在步驟2)中，由于采用深層液體通氣發(fā)酵，向發(fā)酵罐中勻速通入無菌空氣，相對合適的通氣量不僅可給予枯草芽孢桿菌充足的氧氣供應(yīng)，而且還可以將此階段產(chǎn)生的氨氣帶出發(fā)酵基質(zhì)，防止發(fā)酵液ph升高，使發(fā)酵液的ph維持在相對穩(wěn)定的水平，從而促進菌體繁殖和螺旋藻激酶的產(chǎn)生。本發(fā)明進一步提出的，步驟3)中所述低溫靜置發(fā)酵在ph值為5.5～6.5、培養(yǎng)溫度為8℃～16℃的條件下，培養(yǎng)時間為20～28小時；優(yōu)選地，所述培養(yǎng)溫度為10℃～14℃；進一步優(yōu)選地，所述發(fā)酵液中添加了濃度為15％～30％的葡萄糖或蔗糖溶液，所述葡萄糖或蔗糖溶液占所述發(fā)酵液的質(zhì)量百分比的5％～10％。在步驟3)酵母菌靜置發(fā)酵前，向發(fā)酵液中補充營養(yǎng)成分可加速酵母菌靜置發(fā)酵。所述營養(yǎng)成分不限于葡萄糖或蔗糖。步驟3)中所述酵母菌按的接種量為0.1％～0.5％，優(yōu)選為0.15％～0.25％；本發(fā)明采用酵母菌菌種不限于種類；本發(fā)明優(yōu)先使用的菌種酵母菌(釀酒酵母)來源于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為:cicc10005。步驟3)酵母菌靜置發(fā)酵過程中，由于發(fā)酵溫度較低，枯草芽孢桿菌的生長受到抑制。新添加的酵母菌可在低溫和無氧環(huán)境中進行緩慢發(fā)酵，其發(fā)酵產(chǎn)生的酸性物質(zhì)，可加速枯草芽孢桿菌菌體的裂解，從而釋放出更多的螺旋藻激酶，其發(fā)酵產(chǎn)生的酸性物質(zhì)還可以中和枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的氨類物質(zhì)，改善發(fā)酵基質(zhì)的口感，去除螺旋藻發(fā)酵產(chǎn)物的藻腥味。另外酵母菌還可利用枯草芽孢桿菌所不能利用的營養(yǎng)物質(zhì)，從而產(chǎn)生各種激素和生物活性成分，改善螺旋藻發(fā)酵液的特性。本發(fā)明進一步提出地，步驟4)中所述低溫真空濃縮的溫度為45℃～60℃，優(yōu)選為50℃～55℃。干燥過程中，選擇合適的溫度即能保持干燥產(chǎn)物中有較高的螺旋藻激酶活力又能縮短干燥時間，提高干燥效率，從而降低生產(chǎn)成本。作為優(yōu)選方案，本發(fā)明提供一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：1)將破壁螺旋藻加入水中配成螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)，進行滅菌處理；2)向滅菌后的螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)中按2.5％～3.5％的接種量接種枯草芽孢桿菌，在ph值為7.5～8.5、培養(yǎng)溫度為35℃～39℃的條件下，以110～150r/min的轉(zhuǎn)速，每升螺旋藻發(fā)酵基質(zhì)每分鐘通入1.1～1.3l的無菌空氣的通氣量，進行深層液體通氣發(fā)酵20～28小時；3)在步驟2)通氣發(fā)酵后的發(fā)酵液添加占所述發(fā)酵液的質(zhì)量百分比為5％～10％、濃度為15％～30％的葡萄糖溶液，再按0.15％～0.25％的接種量接種酵母菌，在ph值為5.5～6.5、溫度為10℃～14℃的條件下，進行低溫靜置發(fā)酵20～28小時；4)將步驟3)靜置發(fā)酵后的發(fā)酵液在50℃～55℃的溫度下，進行低溫真空濃縮，烘干，粉碎，即得。本發(fā)明的第二目的在于，提供一種上述制備方法所制得的富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物。上述制備方法制備的富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物，可進一步制作成保健食品。添加合適份額的螺旋藻，不僅可以調(diào)整單位成品螺旋藻片中含有的螺旋藻激酶活力，而且還將螺旋藻具有的抗氧化提升免疫力的功能引入其中。本發(fā)明的第三目的在于，提供一種包括上述發(fā)酵產(chǎn)物的保健食品，所述保健食品中的活性成分，包括上述所制得的富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物和螺旋藻。其中，所述富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物與所述螺旋藻的質(zhì)量比為：2～8:0.5～7，優(yōu)選為5.5～6.5:0.5～3.5；所述保健食品可以進一步制備成螺旋藻片、螺旋藻膠囊或螺旋藻糖果。本發(fā)明進一步提出的，所述保健食品具體為一種螺旋藻片，按重量份計，所述螺旋藻片包括以下組分：優(yōu)選地，按重量份計，所述螺旋藻片包括以下組分：所述螺旋藻片的制備方法，包括以下步驟：1)將富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物、螺旋藻、羧甲基淀粉鈉、二氧化硅、硬脂酸鎂分別過20～40目篩，混合；2)將過篩后的粉末按照等量遞增法進行混合，制得混合粉，將混合粉進行壓片，即得螺旋藻片。本發(fā)明進一步提出的，根據(jù)保健效果，將所述富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物和螺旋藻按合適份額混合，還可以制成螺旋藻膠囊，按重量份計，所述螺旋藻膠囊包括以下組分：優(yōu)選地，按重量份計，所述螺旋藻片包括以下組分：所述螺旋藻膠囊的制備方法，包括以下步驟：1)將富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物、螺旋藻粉、淀粉、微粉硅膠、硬脂酸鎂，充分混合后，制得混合粉；2)用體積百分比為70％～90％的酒精與所述混合粉混和，充分?jǐn)嚢瑁频密洸?，過15～20目篩，制粒，置于50℃～55℃的條件下干燥，填充膠囊，即得。本發(fā)明進一步提出的，所述保健食品具體為一種螺旋藻糖果，按重量份計，所述螺旋藻糖果包括以下組分：優(yōu)選地，按重量份計，所述螺旋藻糖果包括以下組分：所述螺旋藻糖果的制備方法，包括以下步驟：1)將富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物、螺旋藻、山楂粉、微晶纖維素、硬脂酸鎂和甜味劑，分別過70～90目篩，充分混合后，制得混合粉；2)用體積百分比為5％～10％的pvp乙醇與所述混合粉混合，充分?jǐn)嚢瑁频密洸?，過15～20目篩，置于55℃～65℃的條件下干燥，使其含水量小于4％；3)在步驟2)制得的顆粒中加入體積百分比為1％的聚乙二醇6000，進行壓片，即得。本發(fā)明的第四目的在于，上述制得的螺旋藻片、螺旋藻膠囊或螺旋藻糖果在高粘血癥上的保健應(yīng)用。較傳統(tǒng)的螺旋藻片，本發(fā)明制得保健食品可大幅的提高了其溶栓防栓，調(diào)節(jié)血脂，改變血液流變的特性。本發(fā)明至少具有以下有益效果：1)在深層液體通氣發(fā)酵過程中，給予充足的通氣量，帶走發(fā)酵液中的氨，能夠維持ph相對穩(wěn)定，從而促進菌體的生長和螺旋藻激酶的產(chǎn)生。2)在靜置密封發(fā)酵過程中，酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的酸性物質(zhì)，可加速枯草芽孢桿菌菌體的溶解促進螺旋藻激酶的釋放，同時也可中和發(fā)酵液中的氨，去除發(fā)酵液中的藻腥味和特殊的臭味，提升產(chǎn)品的口感，更易被人接受。3)本發(fā)明配比制成的螺旋藻片中不僅有螺旋藻原有的提升免疫力的功能，而且較強的螺旋藻激酶的活性使其具有調(diào)節(jié)血脂，溶栓防栓，改變血液流變的特性。具體實施方式以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例1本實施例是一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：1)種子液的制備:取一環(huán)活化過的菌種，接入裝量為50ml種子培養(yǎng)基的250ml三角瓶中，進行培養(yǎng)。酵母菌的培養(yǎng)溫度為28℃，搖床轉(zhuǎn)速為120rpm，培養(yǎng)時間為12h；枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)溫度為37℃，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下培養(yǎng)18h。2)菌種擴培：分別取10ml種子液，接入盛有500ml發(fā)酵培養(yǎng)基的2.5l三角瓶中(接種量為2％,v/v)。酵母菌的培養(yǎng)溫度為28℃，搖床轉(zhuǎn)速為120rpm，培養(yǎng)時間為12h；枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)溫度為37℃，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下培養(yǎng)12h。3)發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌：取5kg破壁螺旋藻干粉加入到15l無菌水中，攪拌均勻，裝入到50l的發(fā)酵罐中，再將發(fā)酵罐內(nèi)的ph調(diào)至7.5-8.0，然后進行濕熱滅菌，滅菌溫度是110℃，滅菌時間為15min。4)深層液體通氣發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的液體冷卻至37℃，在無菌條件下，按3％的比例將枯草芽孢桿菌菌種接種到發(fā)酵罐中進行一次發(fā)酵，發(fā)酵條件為：培養(yǎng)溫度37℃，通氣量為每l液體1.2l/min，培養(yǎng)時間為24h，轉(zhuǎn)速為130r/min。5)酵母菌進行靜置發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵液溫度降至為12℃，添加濃度為21％的葡萄糖溶液1l，ph調(diào)整到6，接入酵母菌進行二次發(fā)酵，接種量為0.2％，接入菌種后，攪拌均勻，靜置發(fā)酵，在12℃條件下保溫發(fā)酵24h。6)將發(fā)酵產(chǎn)物進行52℃低溫真空濃縮，再將濃縮產(chǎn)物在50-55℃條件下烘至含水量7％以下，烘干后粉碎，即得。實施例2本實施例是一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：步驟1)～3)與實施例1相同；4)深層液體通氣發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的液體冷卻至37℃，在無菌條件下，按3％的比例將枯草芽孢桿菌菌種接種到發(fā)酵罐中進行一次發(fā)酵，發(fā)酵條件為：培養(yǎng)溫度37℃，通氣量為每l液體1.6l/min，培養(yǎng)時間為24h，轉(zhuǎn)速為130r/min。5)酵母菌進行靜置發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵液溫度降至為10℃，添加濃度為21％的葡萄糖溶液1l，ph調(diào)整到6，接入酵母菌進行二次發(fā)酵，接種量為0.2％，接入菌種后，攪拌均勻，靜置發(fā)酵，在12℃條件下保溫發(fā)酵24h。步驟6)與實施例1相同；實施例3本實施例是一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：步驟1)～3)與實施例1相同；4)深層液體通氣發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的液體冷卻至37℃，在無菌條件下，按3％的比例將枯草芽孢桿菌菌種接種到發(fā)酵罐中進行一次發(fā)酵，發(fā)酵條件為：培養(yǎng)溫度37℃，通氣量為每l液體0.8l/min，培養(yǎng)時間為24h，轉(zhuǎn)速為130r/min。5)酵母菌進行靜置發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵液溫度降至為16℃，添加濃度為21％的葡萄糖溶液1l，ph調(diào)整到6，接入酵母菌進行二次發(fā)酵，接種量為0.2％，接入菌種后，攪拌均勻，靜置發(fā)酵，在12℃條件下保溫發(fā)酵24h。(6)將發(fā)酵產(chǎn)物進行55℃低溫真空濃縮，再將濃縮產(chǎn)物在50-55℃條件下烘至含水量7％以下，烘干后粉碎，即得。實施例4本實施例是一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：步驟1)、2)與實施例1相同；3)發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌：取5kg破壁螺旋藻干粉加入到15l無菌水中，攪拌均勻，裝入到50l的發(fā)酵罐中，再將發(fā)酵罐內(nèi)的ph調(diào)至7.5-8.0，然后進行濕熱滅菌，滅菌溫度是115℃，滅菌時間為20min。4)深層液體通氣發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的液體冷卻至37℃，在無菌條件下，按3％的比例將枯草芽孢桿菌菌種接種到發(fā)酵罐中進行一次發(fā)酵，發(fā)酵條件為：培養(yǎng)溫度37℃，通氣量為每l液體1.0l/min，培養(yǎng)時間為24h，轉(zhuǎn)速為130r/min。5)酵母菌進行靜置發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵液溫度降至為10℃，添加濃度為21％的葡萄糖溶液1l，ph調(diào)整到6，接入酵母菌進行二次發(fā)酵，接種量為0.2％，接入菌種后，攪拌均勻，靜置發(fā)酵，在12℃條件下保溫發(fā)酵24h。6)將發(fā)酵產(chǎn)物進行52℃低溫真空濃縮，再將濃縮產(chǎn)物在50-55℃條件下烘至含水量7％以下，烘干后粉碎，即得。實施例5本實施例是采用實施例1所制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，制備一種螺旋藻片的方法，包括以下步驟：1)螺旋藻片的配方：富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物60份，螺旋藻粉30份，羧甲基淀粉鈉7份，二氧化硅2份，硬脂酸鎂1份。2)將烘干粉碎后的螺旋藻發(fā)酵產(chǎn)物，羧甲基淀粉鈉、螺旋藻粉、二氧化硅、硬脂酸鎂、過30目不銹鋼篩。3)混合：將過篩的各物料，按照等量遞增法進行混合，得混合粉。將混合粉進行壓片，即得螺旋藻片，每片凈重500g。實施例6本實施例是采用實施例2所制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，按照實施例5相同的方式制備一種螺旋藻片。實施例7本實施例是采用實施例3所制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，按照實施例5相同的方式制備一種螺旋藻片。實施例8本實施例是采用實施例4所制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，按照實施例5相同的方式制備一種螺旋藻片。實施例9本實施例是采用實施例1所制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，制備一種螺旋藻膠囊的方法，包括以下步驟：1)螺旋藻膠囊劑配方：富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物60份，螺旋藻粉30份，淀粉7份，微粉硅膠2份，硬脂酸鎂1份。2)混合：按配方比例稱取各原料，置入混合機中進行混合30min，混勻，出料，制得總混合粉。3)用體積濃度80％食用酒精與混合粉混合攪拌30min，制軟材，軟材過18目篩制粒，置于52℃條件下干燥。4)填充膠囊，控制每粒膠囊內(nèi)容物重量500mg。實施例10本實施例是采用實施例1所制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，制備一種螺旋藻糖果的方法，包括以下步驟：1)螺旋藻壓片糖果原料配方：富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物30份，螺旋藻20份，山楂粉30份，微晶纖維素9.3份，硬脂酸鎂0.6份，甜味劑0.1份。2)制粒：山楂粉與各輔料分別粉碎過80目篩，按比例混合均勻，加入適量5％的pvp乙醇溶液制軟材，過18目篩造粒，將顆粒在60℃條件干燥，至含水量在4％以下。3)壓片：顆粒中加入1％的聚乙二醇6000，進行壓片，每片1000mg，得到螺旋藻壓片糖果。本實施例中從物料粉碎、混合到壓片是十分潔凈區(qū)內(nèi)進行操作。對比例1本實施例是一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：步驟1)～4)與實施例1相同；5)發(fā)酵液的后熟:將經(jīng)過枯草芽孢桿菌發(fā)酵后的螺旋藻漿置于4℃冰箱中后熟48h。6)將發(fā)酵產(chǎn)物進行52℃低溫真空濃縮，再將濃縮產(chǎn)物在50-55℃條件下烘至含水量7％以下，烘干后粉碎，即得。按實施例5相同的制備方法制得螺旋藻片。對比例2將實施例1制得富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物為原料，制備一種螺旋藻片：配方如下(單位g)：富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物30份，螺旋藻粉60份,羥甲淀粉鈉7份，二氧化硅2份，硬脂酸鎂1份。按照實施例5相同的制備方法制得螺旋藻片。對比例3本實施例是一種富含螺旋藻激酶發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：步驟1)～3)與實施例1相同；4)深層液體通氣發(fā)酵：將發(fā)酵罐內(nèi)的液體冷卻至37℃，在無菌條件下，按3％的比例將枯草芽孢桿菌菌種接種到發(fā)酵罐中進行一次發(fā)酵，發(fā)酵條件為：培養(yǎng)溫度37℃，通氣量為每l液體0.4l/min，培養(yǎng)時間為24h，轉(zhuǎn)速為20r/min。步驟5)～6)與實施例1相同；按實施例5相同的制備方法制得螺旋藻片。實驗例1螺旋藻片溶栓活性的測定材料：實施例5～實施例8、對比例1～對比例3制得的螺旋藻片。方法：采用瓊脂糖-纖維蛋白平板法測螺旋藻激酶溶栓活性的大小。在纖維蛋白平板上，分別加入含2000，4000，6000，8000，10000u/1ml的蚓激酶標(biāo)準(zhǔn)溶液10ul，37℃恒溫培養(yǎng)18h，以蚓激酶標(biāo)準(zhǔn)品的單位數(shù)為橫坐標(biāo)，蚓激酶標(biāo)準(zhǔn)品溶圈兩垂直直徑的乘積為縱坐標(biāo)，得二次回歸方程。工作液是由0.01mol/lna2hpo4和0.9％nacl溶液組成，取1粒樣品螺旋藻片，將樣品粉碎，加入工作液并定容到10ml，混勻。精密吸取0.5ml上清液，加入0.5ml工作液，混勻，即為樣品溶液。取10ul按照上述方法測定樣品溶液的溶圈兩垂直直徑的乘積，并計算出樣品效價單位數(shù)。結(jié)果：螺旋藻激酶酶活測定結(jié)果如表1所示表1實驗組螺旋藻激酶測定結(jié)果實驗組螺旋藻激酶活性(萬u/粒)實施例52.98實施例62.69實施例72.43實施例82.47對比例12.22對比例21.84對比例31.12由表1可知，實施例5～8與對比例1相比，螺旋藻激酶活性高，說明缺少酵母菌靜置發(fā)酵將嚴(yán)重影響發(fā)酵液中螺旋藻激酶的含量；實施例5～8與對比例2相比，說明富含螺旋藻激酶的發(fā)酵產(chǎn)物添加量的多少將直接影響螺旋藻片的螺旋藻激酶的含量；實施例5～8與對比例3相比，說明在深層液體發(fā)酵過程中，缺少氧不利于螺旋藻激酶的產(chǎn)生。實施例5中，推算經(jīng)二次發(fā)酵的螺旋藻基質(zhì)干粉其激酶酶活可達(dá)9.93萬u/g。實驗例2螺旋藻片口感的評價以12人的感官評價評定螺旋藻片的口感，即采用實施例5～6和對比例1～2制備的螺旋藻片樣品放置于鼻孔下方嗅其味道，然后將螺旋藻片樣品置于口中，品其味道。12人中若有≥8人選擇有，則判定有此氣味，若≥8人選擇無，則判定無此氣味，其它情況則判定為無效。其口感評價結(jié)果如表2所示。表212人對實驗組螺旋藻片口感評價結(jié)果實驗組有無藻腥味有無特殊臭味有無醇香味實施例5無無有實施例6無無有對比例1有有無對比例2有無有從結(jié)果可以看出，實施例5～6與對比例相比，說明酵母菌靜置發(fā)酵可除去發(fā)除去發(fā)酵液中的藻腥味和特殊臭味，提升螺旋藻片成品的口感。實施例5～6與對比例2相比，說明螺旋藻片中螺旋藻的添加比例也會影響成品螺旋藻片的藻腥味。實驗例3螺旋藻片對大鼠血液流變化的影響材料：實施例5、實施例6的螺旋藻片實驗對象：選取雄性wistar大鼠50只，年齡為16周左右，購自北大醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。方法：將大鼠飼養(yǎng)1周后，隨機分為5組，每組10只。分別為空白組，模型組，對照組(山楂降脂片)，實施例1，實施例2?？瞻捉M飼喂基礎(chǔ)飼料，其余組飼喂高脂飼料(基礎(chǔ)飼料78.8％，豬油10％，蛋黃粉10％，膽固醇1％，膽鹽0.2％)。各組給藥量如下：空白組：灌胃等體積的水；對照組：灌胃2g/kg山楂降脂片；模型組：灌胃等體積的水；實施例5組：灌胃2g/kg實施例5制備的螺旋藻片；實施例6組：灌胃2g/kg實施例6制備的螺旋藻片；連續(xù)灌胃15d，禁食12h，斷頭取血，測定大鼠全血黏度，分離血清檢測血清中的tc(總膽固醇)，tg(甘油三脂)，hdl(高密度脂蛋白膽固醇),ldl(低密度脂蛋白膽固醇)的含量。結(jié)果：全血黏度的結(jié)果如表3所示，大鼠血清的tc，tg，hdl,ldl的含量如表4所示。表3不同處理方法對大鼠血液流變化的影響(mpa·s)組120(/s)70(/s)30(/s)空白組4.57±0.025.87±0.048.44±0.05模型組4.74±0.15*6.03±0.12*8.64±0.15*對照組4.60±0.06△△5.91±0.05△8.49±0.10△實施例5組4.59±0.09△△5.89±0.06△8.50±0.13△實施例6組4.62±0.11△5.92±0.128.54±0.18注：*表示與空白組相比p<0.05；△表示與模型組相比p<0.05；△△表示與模型組相比p<0.01。與空白組相比，模型組大鼠全血黏度在切變率為120/s時顯著升高(p<0.05)，模型成立。與模型組相比對照組、實施例5組、實施例6組血液黏度均顯著降低(p<0.05，p<0.01)。說明螺旋藻激酶片可有效的抑制大鼠全血粘度上升。表4各組大鼠血清中tc，tg，hdl，ldl的含量(mmol/l)組別tc(mmol/l)tg(mmol/l)hdl(mmol/l)ldl(mmol/l)空白組1.58±0.220.74±0.141.30±0.180.29±0.08模型組1.95±0.20**0.92±0.12*0.86±0.11**0.38±0.10對照組1.64±0.25△0.80±0.171.00±0.13△0.32±0.05實施例5組1.66±0.22△0.79±0.170.96±0.12△0.33±0.07實施例6組1.68±0.20△0.82±0.190.94±0.10△0.35±0.08注：*表示與空白組相比p<0.05；**表示與空白組相比p<0.01；△表示與模型組相比p<0.05。與空白組相比，模型組血清中tc，tg，ldl含量均升高，hdl含量降低，其中tc，tg和hdl差異性顯著，說明高脂大鼠模型成立。實施例5～6組與模型組相比tc，hdl含量差異性顯著，說明螺旋藻片具有明顯降低大鼠血清中總膽固醇含量和提升血清中高密度脂蛋白膽固醇的含量。實驗例4螺旋藻片對高粘血癥病人的影響受測人臨床診斷為高粘血癥，血液血脂含量超出正常水平，癥狀表現(xiàn)為易疲勞，頭昏，失眠，心悶。讓受試者每日早晚各服一次，每次三片，測試期間保持日常飲食和生活習(xí)慣，服用三個月后，血液中血脂含量降低至正常水平，其失眠、頭昏癥狀消失，高粘血癥臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。當(dāng)前第1頁12