本發(fā)明涉及飼料生產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種富集有類胡蘿卜素和益生菌動(dòng)物飼料的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
粗糙脈孢菌(Neurospora crassa)屬于真菌門，真子囊菌亞綱，鹿角菌目，糞殼菌科，是屬于脈孢菌屬的一種常見真菌，它是被美國(guó)食品及藥物管理局FDA組織認(rèn)為是少數(shù)可食用的安全菌類。粗糙脈孢菌是以豆渣為原料固態(tài)發(fā)酵時(shí)的優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)菌，發(fā)酵過程中可產(chǎn)生大量分生孢子，分生孢子中富含類胡蘿卜素，而且以β-胡蘿卜素為主。粗糙脈孢菌有很強(qiáng)的纖維分解能力，能將粗纖維降解為低聚糖或者單糖。因此粗糙脈孢菌具有很好的應(yīng)用前景。
但是，粗糙脈孢菌在固態(tài)發(fā)酵過程中不會(huì)產(chǎn)生酸，容易感染雜菌，如一些腐敗菌、酵母和霉菌等，導(dǎo)致發(fā)酵失敗。過去人們了解粗糙脈孢菌主要是紅色面包霉以及豆制品的腐敗菌，是微生物領(lǐng)域研究比較多的一種模式生物，但是對(duì)其應(yīng)用的研究則較少。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：提出一種富集有類胡蘿卜素和益生菌動(dòng)物飼料的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題提出的技術(shù)方案是：一種富集有類胡蘿卜素和益生菌動(dòng)物飼料的生產(chǎn)方法，包括以下特征步驟：
i、準(zhǔn)備含水量40％-70％的豆渣作為固態(tài)培養(yǎng)基，經(jīng)100℃蒸料滅菌20-50min，冷卻至20℃-40℃，待接種；
ii、將粗糙脈孢菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中并活化、富集培養(yǎng)24h-48h，收集粗糙脈孢菌的菌絲體、分生孢子；
iii、將益生菌菌種分別接種于種子培養(yǎng)基：蛋白胨10g/L,酵母浸出液5g/L，NaCl 10g/L，pH 7.2-7.5，富集培養(yǎng)10h-40h，得到益生菌培養(yǎng)菌液；
iv、將所述粗糙脈孢菌的菌絲體、分生孢子以2％-15％的重量比添加到所述固態(tài)培養(yǎng)基中，并將所述益生菌培養(yǎng)菌液按照菌總體積(mL)/培養(yǎng)基重量(g)1％-10％的比例添加到所述固態(tài)培養(yǎng)基中，混合均勻，于20℃-40℃條件下培養(yǎng)1d-4d。
進(jìn)一步的，所述益生菌包括植物乳桿菌、雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、枯草芽孢桿菌、屎腸球菌菌液中的一種或者任意幾種。
進(jìn)一步的，還包括步驟v、將可直接投喂的動(dòng)物飼料進(jìn)行烘干、裝袋和倉(cāng)儲(chǔ)。
本發(fā)明的有益效果是：
通過本發(fā)明中方法產(chǎn)生的飼料，不僅富含類胡蘿卜素還含有豐富的益生菌，攝食后利于飼養(yǎng)動(dòng)物的健康。本發(fā)明所述的技術(shù)可使粗糙脈孢菌發(fā)酵類胡蘿卜素產(chǎn)量從710mg/Kg(類胡蘿卜素干重/發(fā)酵底物總干重)提高到1150mg/Kg?？梢燥@著降低雜菌感染的風(fēng)險(xiǎn)；發(fā)酵飼料中益生菌的數(shù)量占濕重達(dá)到105-108cfu/g。植物乳桿菌被動(dòng)物攝入后會(huì)產(chǎn)生一定的保健作用，如增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)、在腸道內(nèi)抑制致病菌、降低動(dòng)物血清膽固醇含量、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收等。雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌、枯草芽孢桿菌和屎腸球菌，代謝都會(huì)產(chǎn)生乳酸或乙酸。研究表明這些益生菌都有抗癌、調(diào)節(jié)血壓、改善腸道、延緩衰老等功能，在畜牧生產(chǎn)中有廣泛的應(yīng)用前景。
另外，值得一提的是：本發(fā)明將粗糙脈孢菌和植物乳桿菌等動(dòng)物益生菌進(jìn)行混合發(fā)酵，巧妙地搭配使這兩類菌不同生物特性得到互相促進(jìn)。因?yàn)橹参锶闂U菌在發(fā)酵培養(yǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生酸性物質(zhì)以及乳酸桿菌素，能抑制很多腐敗菌的生長(zhǎng)，減少培養(yǎng)基的腐敗，從而提高了粗糙脈孢菌發(fā)酵成功率。粗糙脈孢菌則有很強(qiáng)的纖維分解能力，能將粗纖維降解為低聚糖或者單糖。這些低聚糖、單糖為益生菌生長(zhǎng)提供了碳源補(bǔ)充，益生菌在發(fā)酵時(shí)可充分利用培養(yǎng)基中的低聚糖而無需另外人工添加。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例一
以含水量60％的豆渣作為固態(tài)培養(yǎng)基，經(jīng)100℃蒸料滅菌50min，冷卻至20℃，待接種。將粗糙脈孢菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中活化、富集培養(yǎng)48h；植物乳桿菌、雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌分別接種于種子培養(yǎng)基(蛋白胨10g/L,酵母浸出液5g/L，NaCl 10g/L，pH 7.2-7.5)，活化、富集培養(yǎng)40h，得到培養(yǎng)菌液。將粗糙脈孢菌的菌絲體或者孢子按照5％的重量比添加到培養(yǎng)基中；同時(shí)，植物乳桿菌、雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌菌液體積比1:1:1，按照菌液總體積(mL)/培養(yǎng)基重量(g)2％添加到培養(yǎng)基中。混合均勻，于25℃條件下培養(yǎng)4天。
實(shí)施例二
以含水量50％的豆渣作為固態(tài)培養(yǎng)基，經(jīng)100℃蒸料滅菌30min，冷卻至30℃，待接種。將粗糙脈孢菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中活化、富集培養(yǎng)24h；植物乳桿菌、雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、枯草芽孢桿菌、屎腸球菌分別接種于種子培養(yǎng)基(蛋白胨10g/L,酵母浸出液5g/L，NaCl 10g/L，pH 7.2-7.5)，活化、富集培養(yǎng)24h，得到培養(yǎng)菌液。將粗糙脈孢菌的菌絲體或者孢子按照10％的重量比添加到培養(yǎng)基中；同時(shí)，植物乳桿菌、雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、枯草芽孢桿菌、屎腸球菌菌液體積比2:2:1:1，按照菌液總體積(mL)/培養(yǎng)基重量(g)10％添加到培養(yǎng)基中?；旌暇鶆?，于室溫條件下培養(yǎng)3天。
實(shí)施例三
以含水量70％的豆渣作為固態(tài)培養(yǎng)基，經(jīng)100℃蒸料滅菌40min，冷卻至35℃，待接種。將粗糙脈孢菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中活化、富集培養(yǎng)48h；植物乳桿菌、雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌分別接種于種子培養(yǎng)基(蛋白胨10g/L,酵母浸出液5g/L，NaCl 10g/L，pH 7.2-7.5)，活化、富集培養(yǎng)30h，得到培養(yǎng)菌液。將粗糙脈孢菌的菌絲體或者孢子按照5％的重量比添加到培養(yǎng)基中；同時(shí)，植物乳桿菌、雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、枯草芽孢桿菌、屎腸球菌菌液體積比1:2:2:1，按照菌液總體積(mL)/培養(yǎng)基重量(g)8％添加到培養(yǎng)基中?；旌暇鶆?，于室溫條件下培養(yǎng)2天。
本發(fā)明的不局限于上述實(shí)施例，本發(fā)明的上述各個(gè)實(shí)施例的技術(shù)方案彼此可以交叉組合形成新的技術(shù)方案，另外凡采用等同替換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明要求的保護(hù)范圍內(nèi)。