本發(fā)明涉及吉林人參低聚肽的一種新用途，具體來(lái)說(shuō)是吉林人參低聚肽在抗氧化功能的食品或保健食品中的用途。

背景技術(shù)：

氧化應(yīng)激(Oxidative Stress)是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species，RNS)產(chǎn)生過(guò)多，氧化程度超出氧化物的清除，氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，從而導(dǎo)致機(jī)體組織細(xì)胞及蛋白和核酸等生物大分子損傷。研究證實(shí)，氧化應(yīng)激可導(dǎo)致胰島β細(xì)胞功能損傷及外周胰島素抵抗，從而導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生；并能引起內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，導(dǎo)致心血管疾?。淮送?，還可引發(fā)自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)疾病及癌癥等一系列疾病，給人體健康造成極大損害。因此控制氧化應(yīng)激對(duì)于維持機(jī)體健康具有極其重要的作用。尋找安全有效的抗氧化物質(zhì)顯得尤為迫切。

目前臨床應(yīng)用的抗氧化藥物主要有單胺氧化酶抑制劑、多巴胺受體激動(dòng)劑、維生素等。這些藥物均有不同程度的副作用，不宜長(zhǎng)期服用。近年來(lái)的大量研究已經(jīng)證實(shí)天然食物成分在抗氧化方面是安全有效的。

生物活性肽是指對(duì)生物機(jī)體的生命活動(dòng)有益或具有生理作用的肽類化合物。肽在分子結(jié)構(gòu)上處于氨基酸和蛋白質(zhì)的中間位置，但它具有氨基酸和蛋白質(zhì)所不能替代的功能。低聚肽，又稱為活性小分子肽，一般由10個(gè)或10個(gè)以下氨基酸組成。研究發(fā)現(xiàn)低聚肽比單個(gè)氨基酸的吸收更有效，且能直接參與蛋白質(zhì)的合成，因此提高了機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用率。在氨基酸運(yùn)輸系統(tǒng)出現(xiàn)障礙的情況下，攝入低聚肽卻能獲得良好的吸收效果。另外，生物活性肽類具有廣泛的生物活性，如免疫調(diào)節(jié)、降膽固醇、降血壓、抗血栓、抗癌、抗病毒、抗氧化和清除自由基作用、促進(jìn)生長(zhǎng)等。目前生物活性肽以其高效、安全的特點(diǎn)異軍突起，逐漸顯示出其在臨床營(yíng)養(yǎng)中的重要作用和廣泛的應(yīng)用前景。

人參為名貴中藥材，有關(guān)人參的藥用已經(jīng)有四千多年的歷史。目前世界上的人參主要有四種：即我國(guó)的“吉林人參”、朝鮮的“高麗參”、日本的“東洋參”和加拿大、美國(guó)的“西洋參”。我國(guó)的人參為五加科植物人參的干燥根及根莖，主要產(chǎn)于吉林省。2012年9月4日，中國(guó)衛(wèi)生部批準(zhǔn)人參成為新資源食品，人參的應(yīng)用將由單一的中藥材拓展到食品、飲料及保健產(chǎn)品等領(lǐng)域，范圍大幅擴(kuò)大，這為我國(guó)的人參產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了新的契機(jī)。人參具有大補(bǔ)元?dú)?、生津止渴、安神等功效。研究發(fā)現(xiàn)，人參可通過(guò)提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶活性，降低丙二醛(MDA)等脂質(zhì)氧化產(chǎn)物的含量來(lái)發(fā)揮抗氧化作用。對(duì)人參提取物人參皂甙的研究也發(fā)現(xiàn)，人參皂苷Re、Rg1等具有抗氧化功能。人參低聚肽雖然作為一類重要的化合物存在于人參組織中，但其功能研究較少報(bào)道，有關(guān)其抗氧化功能的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。人參低聚肽在人體胃腸道極易消化吸收，因而可避免活性物質(zhì)的浪費(fèi)，大大提高其生物活性，可作為一種新型的具有抗氧化功能作用的食品或保健品的配方材料。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種低粘度、易吸收且吸收快的吉林人參低聚肽在制備抗氧化功能食品或保健食品中的用途，為通過(guò)飲食來(lái)提高抗氧化功能提供一種新途徑。

其中所述的食品為粉劑、片劑、液體飲料、奶粉及奶制品、糖果或烘焙制品。

其中所述的保健食品為粉劑、片劑、膠囊或口服液。

本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了現(xiàn)有物質(zhì)-吉林人參低聚肽具有抗氧化的功能，發(fā)現(xiàn)了其在制備抗氧化功 能的食品或保健食品中的用途。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)灌胃吉林人參低聚肽水溶液能夠有效的提高氧化模型大鼠的抗氧化功能。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，這些實(shí)例應(yīng)被理解為僅是舉例說(shuō)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1、對(duì)氧化模型大鼠抗氧化功能影響的實(shí)驗(yàn)研究

一、材料和方法

1樣品：吉林人參低聚肽，由吉林肽谷生物工程有限責(zé)任公司提供，淡黃色固體粉末，主要成分為分子量小于1000的小分子低聚肽，含量為97.4％。

2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康SPF級(jí)成年雄性SD大鼠90只，適應(yīng)期結(jié)束時(shí)，體重200±20g，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，每籠3只，自由飲食、飲水。動(dòng)物飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室符合國(guó)標(biāo)SPF級(jí)，溫度范圍為22±2℃，相對(duì)濕度為50％～60％，晝：夜明暗交替時(shí)間為12h：12h。

3劑量分組及受試樣品給予時(shí)間：實(shí)驗(yàn)設(shè)6個(gè)劑量組(0.0625g/kg BW、0.125g/kg BW、0.25g/kg BW、0.50g/kg BW、1.00g/kg BW、2.00g/kg BW)、1個(gè)空白對(duì)照組、1個(gè)乳清蛋白組(0.25g/kg BW)和1個(gè)模型對(duì)照組。受試樣品給予時(shí)間為45天。

二、實(shí)驗(yàn)方法

1動(dòng)物造模、分組及給受試物

1.1適應(yīng)期：于屏障系統(tǒng)下大鼠喂飼基礎(chǔ)飼料觀察5-7天。

1.2造模期

按體重隨機(jī)分成2組，10只大鼠作為空白對(duì)照組，其余80只作為模型組?？瞻讓?duì)照組每日腹腔注射滅菌生理鹽水，注射量為0.2mL/100g，每日1次。模型組用D-半乳糖125mg/kg BW腹腔注射造模，注射量為0.2mL/100g(將D-半乳糖31.25g溶于500ml生理鹽水中配成D-半乳糖-氯化鈉注射液，使用前配制常規(guī)滅菌后使用)，每日1次，連續(xù)造模6周，取血測(cè)MDA，按MDA水平分組，隨機(jī)分為1個(gè)模型對(duì)照組、1個(gè)乳清蛋白組和6個(gè)受試樣品劑量組。

1.3受試樣品給予

分組后，6個(gè)劑量組每天灌胃給予不同濃度人參肽，空白對(duì)照組、模型對(duì)照組給予同體積蒸餾水，乳清蛋白組給予同體積乳清蛋白水溶液。在給受試樣品的同時(shí)，模型對(duì)照組、乳清蛋白組和各劑量組繼續(xù)給予相同劑量D-半乳糖腹腔注射，空白對(duì)照組繼續(xù)給予相同劑量生理鹽水腹腔注射。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每周各鼠稱重記錄1次，按體質(zhì)量調(diào)整腹腔注射量和灌胃量。每日觀察大鼠的皮毛色澤、飲食、飲水、大小便、精神活動(dòng)情況等。

2氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè)

末次給灌胃及腹腔注射完畢后，大鼠禁食不禁水12h后采血，斷頭處死大鼠。

2.1血清氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè)

血液3000r/min離心10min，取血清按照試劑盒說(shuō)明書檢測(cè)8-表氫氧-異前列腺素(8-Isoprostane)、丙二醛(MDA)、蛋白質(zhì)羰基、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、還原性谷胱甘肽(GSH)水平。

2.2肝臟氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè)

在冰浴剝離肝臟，除去脂肪組織，用預(yù)冷的生理鹽水漂洗組織至無(wú)血色，稱取相同部位組織適量，用眼科小剪刀剪碎組織塊，加入相應(yīng)倍數(shù)的預(yù)冷生理鹽水，用勻漿機(jī)制成測(cè)試所需百分含量(10％)的組織勻漿(勻漿時(shí)間10s/次，間隔30s，在冰浴中進(jìn)行)，3000r/min低溫離心10min，取上清，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行丙二醛(MDA)、蛋白質(zhì)羰基、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、還原性谷胱甘肽(GSH)含量的測(cè)定。

三、統(tǒng)計(jì)方法

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，p＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、吉林人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠脂質(zhì)氧化產(chǎn)物的影響

如表1所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血清8-表氫氧異前列腺素、丙二醛水平和肝臟丙二醛水平均有所增高，其中血清丙二醛水平增高最為顯著(p＜0.05)。與模型對(duì)照組相比，吉林人參低聚肽C、D劑量組大鼠血清8-表氫氧異前列腺素水平顯著降低(p＜0.05)；吉林人參低聚肽A、B、D、F劑量組大鼠血清丙二醛水平顯著降低(p＜0.05)；吉林人參低聚肽A、B、D、F劑量組大鼠肝臟丙二醛水平顯著降低(p＜0.05)。與乳清蛋白組相比，吉林人參低聚肽各劑量組大鼠血清8-表氫氧異前列腺素水平均無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，吉林人參低聚肽A、B、D、F劑量組大鼠血清丙二醛水平顯著降低(p＜0.05)；吉林人參低聚肽F劑量組大鼠肝臟丙二醛水平顯著降低(p＜0.05)。

表1 人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠脂質(zhì)氧化產(chǎn)物的影響(n＝10)

注：a：與空白對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

b：與模型對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

c：與乳清蛋白組比較差異有顯著性(p＜0.05)。

2、吉林人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物的影響

如表2所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血清蛋白質(zhì)羰基水平顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。與模型對(duì)照組相比，乳清蛋白組、吉林人參低聚肽A、B、C、D和E劑量組大鼠血清蛋白質(zhì)羰基水平顯著降低(p＜0.05)；吉林人參低聚肽F劑量組大鼠肝臟蛋白質(zhì)羰基水平顯著增高(p＜0.05)。與乳清蛋白組相比，吉林人參低聚肽F劑量組大鼠血清和肝臟蛋白質(zhì)羰基水平均顯著增高(p＜0.05)。

表2 人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物的影響(n＝10)

注：a：與空白對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

b：與模型對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

c：與乳清蛋白組比較差異有顯著性(p＜0.05)。

3、吉林人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠抗氧化酶活力的影響

如表3所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血清和肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)水平均無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。與模型對(duì)照組相比，吉林人參低聚肽C、E劑量組大鼠血清SOD水平顯著增高(p＜0.05)；吉林人參低聚肽B、C、D、F劑量組大鼠肝臟SOD水平顯著增高(p＜0.05)；吉林人參低聚肽B、D、F劑量組大鼠肝臟GSH-Px水平顯著增高(p＜0.05)；與乳清蛋白組相比，吉林人參低聚肽E劑量組大鼠血清SOD水平顯著增高(p＜0.05)；人參低聚肽A、B、C、F劑量組大鼠血清GSH-Px水平顯著增高(p＜0.05)；吉林人參低聚肽B、C、D、F劑量組大鼠肝臟SOD水平顯著增高(p＜0.05)。

表3 人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠抗氧化酶活力的影響(n＝10)

注：a：與空白對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

b：與模型對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

c：與乳清蛋白組比較差異有顯著性(p＜0.05)。

4、吉林人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠抗氧化物質(zhì)GSH的影響

如表4所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血清和肝臟還原性谷胱甘肽(GSH)水平均無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。與模型對(duì)照組相比，吉林人參低聚肽B和C劑量組大鼠血清GSH水平顯著增高(p＜0.05)；吉林人參低聚肽各劑量組 大鼠肝臟GSH水平均無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。與乳清蛋白組相比，吉林人參低聚肽B和C齊量組大鼠血清GSH水平顯著增高(p＜0.05)；吉林人參低聚肽C劑量組大鼠肝臟GSH水平顯著增高(p＜0.05)；其他各組均無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。

表4 人參低聚肽對(duì)氧化模型大鼠抗氧化物質(zhì)GSH的影響(n＝10)

注：a：與空白對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

b：與模型對(duì)照組比較差異有顯著性(p＜0.05)；

c：與乳清蛋白組比較差異有顯著性(p＜0.05)。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本研究通過(guò)建立D-半乳糖氧化大鼠模型，設(shè)立空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和乳清蛋白組作為對(duì)照組，探討吉林人參低聚肽對(duì)大鼠抗氧化作用的影響。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血清8-表氫氧異前列腺素水平、血清和肝臟丙二醛(MDA)水平、血清蛋白質(zhì)羰基水平均增高，肝臟超氧化物歧化酶(SOD)水平降低，其中血清丙二醛(MDA)和蛋白質(zhì)羰基水平增高最為顯著，表明本實(shí)驗(yàn)氧化模型建立成功。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，吉林人參低聚肽可以顯著降低大鼠脂質(zhì)氧化產(chǎn)物和蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物水平，提高大鼠抗氧化酶活力，從而發(fā)揮抗氧化功能，具備了作為一種新型抗氧化功能制劑的潛力，其適宜濃度范圍為每天0.0625～1g/kgbw。